Bài giảng Các phương pháp phân tích dịch ối

Trang 3 Dịch ối là dịch trong suốt nằm trong túi ói, có màu vàng nhạt bao quanh phôi thai trong suốt quá trình mang thai.. Phân tích dịch ối thường được biết đến là phân tích tế bào ối

TS Vũ Thị Thơm

Khoa Y Dược Đại học Quốc gia Hà Nội

Các phương pháp phân tích dịch ối

Phần I Dịch ối

 Dịch ối là dịch trong suốt nằm

trong túi ói, có màu vàng nhạt bao

quanh phôi thai trong suốt quá

trình mang thai

 Phân tích dịch ối thường được biết

đến là phân tích tế bào ối

Dịch ối

 Xét nghiệm dịch ối thường chỉ tiến hành với một vài xét nghiệm đặc biệt Do dịch ối là sản phẩm của trao đổi chất của bào thai, nên các thành phần có trong dịch ối có thẻ cung cáp thông tin về quá trình trao đổi chất diễn ra trong suốt quá trình phôi phát triển

 Khi điều kiện không thuận lợi cho sự phát triển của phôi, nguy hiểm có thể xảy ra, có thể gây sảy thai, thai lưu hoặc sinh non

Nguồn gốc và sản phẩm tạo ra

 Nước ối được tạo ra trong tử cung của người mẹ trong suốt 1/3 thời gian đầu thai kỳ và ở thời điểm đầu của giai đoạn thứ 2 của thai kỳ, dến khi thận của em bé hoàn thiện để đảm nhiệm chức năng của mình

 Em bé nuốt dịch để “thở” và sau đó bài tiết ra dưới dạng nước tiểu, duy trì tuần hoàn liên tục

 Tuy nhiên, phần lớn nước tiểu tạo ra trong dịch ối được trao đổi qua nhau thai và lọc bằng thận của mẹ

 Cho phép phổi phát triển một cách phù hợp

 Trao đổi nước và các chất, cho phép diễn ra sự trao đổi dịch giữa bào thai và cơ thể mẹ

 Giúp cho sự phát triển đồng dều các cơ quan và cơ thể của đứa trẻ

 Hỗ trợ sự phát triển của xương và cơ

Thể tích ối

 Lượng nước ối tăng dần trong quá trình mang thai, đạt cực đại ở giai đoạn thứ 3 của thai kỳ (khoảng gần 1L)

và sau đó giảm dần đến trước khi sinh

 Thể tích nước ối tỷ lệ thuận với sự phát triển của phôi

Từ tuần 10 -20 tăng từ 25 ml lên gần 400 ml Từ tuần thứ 8, khi thận của thai nhi bắt đầu hoạt động, thì nước tiểu của thai nhi bắt đầu xuất hiện trong dịch ối

 Sau đó, mối quan hệ tỷ lệ thuận này dừng lại khi thai nhi ở tuần 28 và lượng nước ối khoảng 800 ml Sau đó lượng nước ối giảm dần, chỉ còn khoảng 400 ml ở tuần thai thứ 42

 Đa ối: Thừa ra nước ối (800-1500 ml) Hiện tượng này

xuất hiện ở phụ nữ mang đa thai, dị tật bẩm sinh hoặc tiểu đường thai kỳ

 Thiểu ối: Lượng nước ối ít bất thường (<250 ml) Hiện

tượng này hay xảy ra ở cuối thai kỳ, màng ối bị vỡ, tử cung giảm hoạt động, hoặc có bất thường ở thai nhi

 Lượng nước ối bất thường giúp bác sỹ đánh giá tình trạng thai phụ Việc phân tích dịch ối thông qua chọc

ối, có thể cung cấp thông tin về giới tính, tình trạng sức khỏe và sự phát triển của bào thai

Thành phần các chất trong dịch ối

 Nước và các chất hòa tan

 Thành phần nước ối tương tự như thành phần huyết tương của mẹ và chứa một lượng nhỏ tế bào phôi thai được thải ra từ da, hệ thống tiêu hóa và hệ thống tiết niệu

 Dịch ối cũng chứa các chất sinh hóa tạo ra từ thai nhi như bilirubin, lipid, enzym, chất điện giải, các hợp chất chứa ni-tơ, protein Những chất này có thể dùng làm xét nghiệm đánh giá tình trạng sức khỏe và sự phát triển của thai nhi

 Một phần dịch ối được tạo ra từ bộ máy hô hấp của thai nhi, nước tiểu, màng ối và dây rốn Do đó, thành phần hóa học của dịch ối bắt đầu thay đổi khi nước tiểu của thai nhi được hình thành

 Nồng độ của creatinin, ure, axit uric tăng, ngược lại nồng độ của glucose, protein lại giảm khi thận của thai nhi bắt đầu hoạt động VD: Creatinin đánh giá tuổi thai, 1.5-2 mg/dl tương đương thai 36 tuần

 Nồng độ của các chất điện giải, enzym, hormone và sản phẩm chuyển hóa cũng thay đổi nhưng không có nhiều ý nghĩa lâm sàng

Xét nghiệm sàng lọc

 Chọc ối được chỉ định khi sàng lọc trước sinh bằng máu mẹ cho giá trị bất thường: protein huyết thanh

phôi alpha [AFP], hormon sinh dục nhau thai [hCG],

và estriol không liên hợp [UE3]

 Thăm khám thai nhi có thể thực hiện bằng siêu âm, qua đó đánh giá về tuổi thai, kích thước và tình trạng phát triển của thai nhi

Phần II

Các phương pháp lấy mẫu

Chỉ định các xét nghiệm xâm lấn

 Mẹ trên 35 tuổi ở thời điểm mang thai

 Tiền sử gia đình có người bị bất thường nhiễm sắc thể,

VD như trisomy 21 (Hội chứng Down)

 Cha mẹ có tổ hợp nhiễm sắc thể bất thường

 Cha mẹ bị bất thường chuyển hóa

 Phụ nữ từ 3 lần sảy thai trở lên

 Đánh giá sự hoàn thiện của phổi

 Tế bào biểu mô thai trong dịch ối có thể cung cấp vật liệu di truyền cho quá trình phân tích, sàng lọc chẩn đoán trước sinh Các tế bào này được phân lập, nuôi

cấy và làm nhiễm sắc thể đồ (karyotyping), nhuộm

FISH và xét nghiệm ADN

1 Chọc ối

Thu mẫu

 Dịch ối được thu nhận bằng phương pháp chọc kim qua túi ối gọi là chọc ối Quá trình thường được tiến hành dưới sự hướng dẫn của siêu âm (Tuần thai 16)

 Tối đa 30 mL nước ối được thu thập vào xy-lanh 2-3

ml đầu có thể bị nhiễm với máu mẹ, dịch và tế bào của các mô của người mẹ

 Dịch phân tích bilirubin

để sàng lọc bệnh tan máu

ở trẻ sơ sinh (HDN) phải

được bảo quản tránh

sáng

2 Chọc nhau (CVS)

Chọc nhau thai (Chorionic villus sampling) là phương pháp thu mẫu ở giai đoạn đầu của thai kỳ (từ tuần 9-11)

Sản phẩm của phương pháp này là 10-25 mg mẫu mô dùng

để phân tích tế bào học và phân tích ADN

3 Lấy máu thai nhi (FBS)

Phần III

Các phương pháp phân tích

Lấy mẫu xâm lấn

XN sinh hóa thường quy cho dịch ối

Xét nghiệm Giá trị bình

thường Ý nghĩa

Bilirubin 0.026 mg/dl Tan máu sơ sinh

L/S 2.0 Sự hoàn thiện của

AFP 4 mg/dl Dị tật ống thần

kinh

Các phương pháp phân tích khác

NST đồ Siêu âm có bất thường

Cha mẹ muốn kiểm tra bất thường NST Miễn dịch Nhóm máu Rh

Kháng nguyên tiểu cầu Tác nhân lây

nhiễm Toxoplasmosis Cytomegalovirus

Di truyền Rối loạn Hemoglobin

Hội chứng chuyển hóa và thiếu hụt enzyme

Tình trạng phát

triển thai Chậm phát triển thai

1 Nuôi cấy tế bào và phân tích NST đồ

Đây là phương pháp phổ biến nhất để chẩn đoán các bất thường về

số lượng nhiễm sắc thể ví dụ hội chứng Down, hội chứng 3 NST số

18, 3 NST số 13

2 Phân tích tế bào học sử dụng FISH (fluorescent insitu

hibrylization)

FISH sử dụng lai đầu dò ADN có gắn huỳnh quang với một trình

tự đặc hiệu trên NST hoặc trên 1 đoạn NST ở giai đoạn gian kì

(trong phân chia tế bào) giúp phát hiện sự có mặt hoặc vắng mặt của một đoạn gen nào đó trên nhiễm sắc thể, với ưu điểm nhanh, đặc hiệu và chính xác cho chẩn đoán những mất đoạn gen nhỏ

(microdeletion), hoặc để khẳng định nguồn gốc của các loại chuyển đoạn đặc biệt, hoặc rối loạn số lượng nhiễm sắc thể

FISH

3 Các kỹ thuật phân tích ADN

Gồm PCR

3 Các kỹ thuật phân tích ADN

Gồm Southern Blotting

4 Kỹ thuật microarray

Phần III

Các phương pháp phân tích

Lấy mẫu không xâm lấn

1 Kỹ thuật tiền làm tổ

2 Chẩn đoán trước sinh không xâm lấn NIBT

2 Chẩn đoán trước sinh không xâm lấn NIBT