Luận án tiến sĩ dược học đánh giá độc tính của 3 monocloro propan 1,2 diol (3 mcpd) trên gan, máu và thần kinh của chuột nhắt

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH D ượ c họ c NGÔ KIẾN ĐỨC sĩ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CỦA 3-MONOCLORO tiế n PROPAN-1,2-DIOL (3-MCPD) TRÊN GAN, MÁU Lu ận án VÀ THẦN KINH CỦA CHUỘT NHẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC TP Hồ Chí Minh, Năm 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH c họ c NGƠ KIẾN ĐỨC ượ ĐÁNH GIÁ ĐỘC TÍNH CỦA 3-MONOCLORO sĩ D PROPAN-1,2-DIOL (3-MCPD) TRÊN GAN, MÁU án tiế n VÀ THẦN KINH CỦA CHUỘT NHẮT Kiểm nghiệm thuốc Độc chất Mã số: 62720410 Lu ận Chuyên ngành: Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Trần Mạnh Hùng GS.TS Nguyễn Văn Thanh TP Hồ Chí Minh, Năm 2016 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa công bố cơng trình khác Tác giả Lu ận án tiế n sĩ D ượ c họ c Ngô Kiến Đức i MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Danh mục biểu đồ họ c Danh mục sơ đồ Trang ượ c MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU D 1.1 Đại cương 3-Monocloropropan-1,2-diol (3-MCPD) sĩ 1.2 Các nghiên cứu đánh giá độc tính 3-MCPD giới n 1.3 Xét nghiệm huyết học 19 tiế 1.4 Thử nghiệm vi nhân (micronucleus) 24 án 1.5 Giải phẫu mô học – Dị sản tế bào gan 28 1.6 Gen tiền ung thư c-fos (proto-oncogen) 31 Lu ận 1.7 Phương pháp hóa mơ miễn dịch 31 1.8 Thối hóa tế bào thần kinh 35 1.9 Phương pháp nhuộm màu cresyl violet 36 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 Đối tượng nghiên cứu 38 2.2 Thuốc thử – Trang thiết bị – Nơi thực 38 2.3 Phương pháp nghiên cứu .40 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 54 3.1 Đánh giá độc tính 3-MCPD huyết học .54 3.2 Đánh giá độc tính 3-MCPD nhiễm sắc thể 78 3.3 Đánh giá độc tính mạn tính 3-MCPD gan 89 3.4 Đánh giá độc tính 3-MCPD não chuột nhắt .94 ii Trang Chương 4: BÀN LUẬN 106 KẾT LUẬN 123 KIẾN NGHỊ .125 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ TÀI LIỆU THAM KHẢO Lu ận án tiế n sĩ D ượ c họ c PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ nguyên Nghĩa tiếng Việt 1,3-DCP 1,3-Dicloropropan-2-ol 2,3-DCP 2,3-Dicloropropan-1-ol 2-MCPD 2-Monocloropropan-1,3-diol 3-MCPD 3-Monocloropropan-1,2-diol ALT Alanin aminotransferase AST Aspartat aminotransferase EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid Hb Hemoglobin HCT Hematocrit LD50 Lethal Dose 50% LYM Lymphocytes MCV Mean Corpuscular Volume MCH Mean Corpuscular Hemoglobin họ c Từ viết tắt c Thể tích khối hồng cầu ượ Liều gây chết 50% MPV Huyết sắc tố trung bình hồng cầu Nồng độ huyết sắc tố trung Concentration bình hồng cầu Micronucleus Vi nhân án MN Thể tích trung bình hồng cầu Mean Corpuscular Hemoglobin Lu ận MCHC tiế n sĩ D Bạch cầu lympho Mean Platete Volume Thể tích trung bình tiểu cầu Neutrophils Bạch cầu trung tính Monocytes Bạch cầu đơn nhân PLT Platelets Tiểu cầu RBC Red blood cells Hồng cầu WBC White blood cells Bạch cầu M Mean Giá trị trung bình SD Standard deviation Độ lệch chuẩn TDI Tolerable daily intake Mức thu nạp cho phép hàng ngày PMTDI Provisional maximum tolerable Định mức tạm thời cho phép thể daily intake thu nạp ngày NEU MONO iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Khảo sát hàm lượng 3-MCPD số thực phẩm nước Anh Bảng 1.2 Nồng độ tối đa 3-MCPD nước tương cho phép số quốc gia Bảng 1.3 Mức tiêu thụ 3-MCPD ngày người dân số quốc gia Bảng 1.4 Một số kết tổn thương bệnh học, tăng sản ung thư sau năm nghiên cứu độc tính 3-MCPD chuột cống 14 Bảng 1.5 Kết thử nghiệm in vitro khả gây đột biến gen 3-MCPD 17 Bảng 1.6 Kết thử nghiệm in vivo khả gây đột biến gen 3-MCPD 19 họ c Bảng 1.7 Cơng thức bạch cầu bình thường 20 Bảng 1.8 Sự thay đổi số lượng loại bạch cầu ý nghĩa lâm sàng .20 c Bảng 1.9 Các dạng bất thường kích thước hồng cầu 23 ượ Bảng 1.10 Các dạng bất thường hình thái hồng cầu .23 D Bảng 3.1 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lơ thử nghiệm độc tính sĩ mạn tháng 55 n Bảng 3.2 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lô thử nghiệm độc tính tiế mạn tháng 57 án Bảng 3.3 Tác động 3-MCPD số tiểu cầu lô thử nghiệm độc tính mạn tháng 59 Lu ận Bảng 3.4 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 60 Bảng 3.5 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 62 Bảng 3.6 Tác động 3-MCPD số tiểu cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 64 Bảng 3.7 Tổng kết thay đổi hình thái hồng cầu phương pháp phết máu ngoại vi 71 Bảng 3.8 Kết xét nghiệm bất thường hồng cầu máy huyết đồ ADVIA 2120i .72 Bảng 3.9 Kết lympho bất thường sau phơi nhiễm 3-MCPD mạn tính 12 tháng .73 v Trang Bảng 3.10 Tác động 3-MCPD lên thời gian chảy máu sau phơi nhiễm tháng, tháng 12 tháng 75 Bảng 3.11 Tác động 3-MCPD lên thời gian đông máu sau phơi nhiễm tháng, tháng 12 tháng 76 Bảng 3.12 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 24 78 Bảng 3.13 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 48 79 c Bảng 3.14 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lô thí nghiệm sau họ phơi nhiễm 3-MCPD 72 80 c Bảng 3.15 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau ượ phơi nhiễm 3-MCPD tuần .81 D Bảng 3.16 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau sĩ phơi nhiễm 3-MCPD tháng 84 n Bảng 3.17 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau tiế phơi nhiễm 3-MCPD tháng 85 án Bảng 3.18 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 12 tháng .87 Lu ận Bảng 3.19 Hoạt tính AST ALT huyết tương sau phơi nhiễm 3-MCPD thời gian tháng lô thử nghiệm 90 Bảng 3.20 Tỷ số khối lượng gan/thể trọng chuột lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 90 Bảng 3.21 Kết vi phẫu gan lơ chuột thí nghiệm sau 12 tháng phơi nhiễm 3MCPD 93 Bảng 3.22 Tổng kết biểu c-fos lô thử nghiệm sau gây phơi nhiễm 3MCPD 99 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Cơng thức hóa học dẫn xuất cloropropanol .4 Hình 1.2 Cơ chế tạo thành vi nhân biểu vi nhân hồng cầu .25 Hình 1.3 Vi thể dị sản gan với nhân đa hình, nhân đơi màng nhân bất thường 29 Hình 1.4 Dẫn truyền biểu c-fos .32 Hình 1.5 Phương pháp hóa mô miễn dịch trực tiếp .34 Hình 1.6 Phương pháp hóa mơ miễn dịch gián tiếp 34 Hình 1.7 Phương pháp nhuộm cresyl violet quan sát thân tế bào thần kinh thể Nissl 36 họ c Hình 2.1 Máy xét nghiệm huyết học ADVIA 2120i 39 Hình 2.2 Máy xét nghiệm huyết học EXCELL 2280 39 c Hình 2.3 Máy xét nghiệm sinh hóa Tecno 168 39 ượ Hình 2.4 Lấy máu từ tim chuột 43 D Hình 2.5 Mẫu mơ não nhuộm hóa mơ miễn dịch .52 sĩ Hình 3.1 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 24 67 n Hình 3.2 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 48 67 tiế Hình 3.3 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 72 68 án Hình 3.4 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tuần 69 Hình 3.5 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 69 Lu ận Hình 3.6 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 70 Hình 3.7 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 12 tháng 71 Hình 3.8 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 24 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 79 Hình 3.9 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 48 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 80 Hình 3.10 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 72 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 81 Hình 3.11 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tuần phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 82 Hình 3.12 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 84 vii Trang Hình 3.13 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 85 Hình 3.14 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 12 tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 88 Hình 3.15 Hình ảnh đại thể gan lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng .91 Hình 3.16 Hình ảnh sinh thiết gan lơ thí nghiệm (x 400) 92 Hình 3.17 Mơ gan bình thường trường hợp viêm, nghịch sản 94 c Hình 3.18 Sự biểu c-fos độ pha loãng 1/100 (kháng thể sơ cấp kháng c-fos) họ 1/20 (kháng thể thứ cấp-cơ chất tạo màu) 95 c Hình 3.19 Sự biểu c-fos lơ thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 10 ượ mg/kg 24 96 D Hình 3.20 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 50 sĩ mg/kg 24 97 n Hình 3.21 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 tiế mg/kg 24 98 án Hình 3.22 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 mg/kg 48 99 Lu ận Hình 3.23 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 mg/kg 72 100 Hình 3.24 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau 24 phơi nhiễm 3-MCPD .101 Hình 3.25 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau 48 72 phơi nhiễm 3-MCPD .101 Hình 3.26 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã với độ phóng đại cao (x 1000) sau 72 phơi nhiễm 3-MCPD 103 Hình 3.27 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau tuần phơi nhiễm 3-MCPD .104 Hình 3.28 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã với độ phóng đại cao (x 1000) sau tuần phơi nhiễm 3-MCPD .105 PL-11 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian chảy máu (giây) sau tháng Chứng 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD mg/kg 10 mg/kg 40 mg/kg 219 109 100 111 207 66 125 75 194 211 59 100 179 185 92 121 133 148 162 140 204 190 150 75 10 149 11 113 140 88 c 50 72 119 107 Chết 176 133 Chết 88 81 Chết 148 192 118 Chết Chết 143 113 Chết tiế n sĩ D ượ 135 án 12 c họ STT Chết 145 126 Chết 14 Chết Chết 128 Chết 15 Chết Chết 174 Chết 16 Chết Chết Chết Chết 17 Chết Chết Chết Chết 18 Chết Chết Chết Chết 19 Chết Chết Chết Chết 20 Chết Chết Chết Chết 21 Chết Chết Chết Chết 22 Chết Chết Chết Chết 23 Chết Chết Chết Chết 24 Chết Chết Chết Chết 25 Chết Chết Chết Chết Lu ận 13 PL-12 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian đông máu (phút) sau tháng STT Chứng 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD mg/kg 10 mg/kg 40 mg/kg 11,53 7,81 6,51 5,1 10,89 8,18 7,8 3,83 11,43 8,23 7,33 3,43 11,33 9,17 6,68 4,92 12,30 7,99 6,95 3,31 12,45 8,17 8,01 3,86 12,45 8,57 10,14 10,50 10 11,11 11 họ c 4,61 7,63 8,33 Chết 7,48 7,88 Chết 8,09 7,56 Chết 12,48 8,08 7,77 Chết 11,56 8,68 7,77 Chết tiế n sĩ D ượ 7,41 án 12 c 11,97 9,13 7,15 Chết 14 Chết Chết 8,44 Chết 15 Chết Chết 7,37 Chết 16 Chết Chết 9,23 Chết 17 Chết Chết 9,33 Chết 18 Chết Chết 10,04 Chết 19 Chết Chết Chết Chết 20 Chết Chết Chết Chết 21 Chết Chết Chết Chết 22 Chết Chết Chết Chết 23 Chết Chết Chết Chết 24 Chết Chết Chết Chết 25 Chết Chết Chết Chết Lu ận 13 PL-13 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian chảy máu (giây) sau 12 tháng CHỨNG 3-MCPD MG/KG 3-MCPD 10 MG/KG 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 219 207 194 179 133 162 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 155 175 160 150 145 195 190 197 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 75 78 135 145 90 145 135 105 150 170 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết họ c ượ D sĩ n tiế án Lu ận c STT PL-14 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian đông máu (phút) sau 12 tháng CHỨNG 3-MCPD MG/KG 3-MCPD 10 MG/KG 11.53 10.58 11.82 10 11 12 13 11.95 11.77 13.25 13.42 11.9 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 9.97 9.08 12.25 10.85 9.5 Chết Chết Chết Chết Chết Chết 10.37 11.75 8.67 9.58 9.5 8.42 7.95 7.71 Chết Chết Chết Chết họ c ượ D sĩ n tiế án Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 20 21 22 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 23 24 25 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Lu ận 14 15 16 17 18 19 c STT PL-15 PHỤ LỤC 4: NỘI KIỂM ENZYM 33,6 sĩ 37,5 -1SD 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 -2SD 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 -3SD 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 41,4 45,3 29,7 25,8 21,9 họ c 3SD 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 c 2SD 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 D 1SD 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 n M 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 tiế 30,1 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - AST Xi (U/L) Lu ận 27 Giá trị đo 34,1 35,6 37 32,4 30,1 29,9 35,4 30,1 36,2 36 36,7 35,2 32,1 31,4 30,6 31,5 33,6 34,5 35,2 án Ngày 10 11 12 13 16 17 18 19 20 23 24 25 26 Máy : Tecno 168 Huyết kiểm tra: Humatrol - N Hạn sử dụng: 12/2012 Người thực hiện: ThS Nguyễn Thị Xuân ượ Thời gian: Tháng 12/2010 Test: AST Số lô: 0002 Mean: 33,6 ± 3,9 Ngày PL-16 PHỤ LỤC 4: NỘI KIỂM ENZYM Máy : Tecno 168 Huyết kiểm tra: Humatrol - N Hạn sử dụng: 12/2012 Người thực hiện: ThS Nguyễn Thị Xuân 1SD 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 2SD 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 19 20 23 24 25 26 30 34,2 35,6 33,2 29,8 30,1 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 27 33,4 -1SD 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 -2SD 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 -3SD 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 38,8 42,45 27,85 24,2 20,55 D sĩ n tiế 31,5 3SD 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 35,15 c M 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 họ Giá trị đo 33,1 31 29,6 29 35 34,2 32,1 30,6 34,6 33,5 35 30,4 29,9 ượ Ngày 10 11 12 13 16 17 18 c Thời gian: Tháng 12/2010 Test: ALT Số lô: 0002 Mean: 31,5 ± 3,65 Xi (U/L) Lu ận án BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - ALT Ngày PL-17 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ án ượ c họ c Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo 3SD -1SD -2SD -3SD 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 sĩ BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – WBC Xi (109/L) Lu ận 2SD 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 D 1SD 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 n M 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 tiế Thời gian: Tháng 2/2010 Test: WBC (109/L) Số lô: U054 Mean: 3,35 ± 0,14 Ngày Giá trị đo 3,4 3,4 3,3 3,3 3,5 3,4 12 3,3 13 3,4 18 3,3 19 3,5 20 3,3 21 3,4 22 3,4 23 3,6 25 3,5 26 3,3 27 3,3 28 3,5 Ngày PL-18 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: RBC (109/L) Số lô: U054 Mean: 4,38 ± 0,08 M-SD M-2SD M-3SD 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 D ượ c họ c 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - RBC sĩ 4,32 4,44 4,35 4,37 4,45 4,38 4,45 4,46 4,49 4,48 4,39 4,3 4,25 4,38 4,28 4,29 4,3 4,51 M+SD M+2SD M+3SD n 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 M tiế Value Xi (1012/L) Lu ận án Date Ngày PL-19 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: Hb (g/dL) Số lô: U054 Mean: 12,6 ± 0,2 M-2SD M-3SD 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – Hb 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 D ượ c họ c M-SD sĩ 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 M+SD M+2SD M+3SD n 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 M tiế Value Xi (g/dL) Lu ận án Date Ngày PL-20 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: MCV (fL) Số lô: U054 Mean: 94 ± M-2SD M-3SD 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – MCV 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 D ượ c họ c M-SD sĩ 93,60 93,9 93,7 93,6 93,9 93,9 94,1 94,2 93,5 93 93,5 93,3 93,5 93,5 93,6 93,6 91,6 92,1 M+SD M+2SD M+3SD n 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 M tiế Value Xi (fL) Lu ận án Date Ngày PL-21 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: PLT (109/ L) Số lô: U054 Mean: 230 ± M-SD M-2SD M-3SD 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 D ượ c họ c 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – PLT sĩ 239 235 225 236 235 229 239 240 238 232 230 227 236 222 223 227 229 239 M+SD M+2SD M+3SD n 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 M tiế Value Xi (109/L) Lu ận án Date Ngày PL-22 PHỤ LỤC 6: SO SÁNH THỐNG KÊ CÔNG THỨC MÁU GIỮA LÔ CHỨNG VÀ CÁC LÔ PHƠI NHIỄM 3-MCPD sĩ D ượ c họ c BẠCH CẦU TRUNG TÍNH Ở CÁC LƠ SAU THÁNG PHƠI NHIỄM 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD STT Lô chứng mg/kg 10 mg/kg 20 mg/kg 3.86 10.09 4.18 1.52 8.23 3.86 3.17 4.7 12.7 4.99 2.38 3.11 5.15 4.88 2.09 3.01 3.78 4.5 3.88 2.95 3.22 3.83 2.49 1.35 7.58 6.58 3.25 3.98 4.39 6.19 3.04 3.31 11.5 6.1 2.71 8.52 10 8.53 2.7 5.18 5.2 11 4.83 2.2 5.24 4.87 12 3.73 6.5 3.57 13 5.2 0.7 1.95 14 9.33 3.44 15 4.78 F-Test Two-Sample for Variances n F-Test Two-Sample for Variances tiế án Lu ận Mean Variance Observations df F P(F