Luận án tiến sĩ dược học đánh giá độc tính của 3 monocloro propan 1,2 diol (3 mcpd) trên gan, máu và thần kinh của chuột nhắt

LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả Ngô Kiến Đức i MỤC LỤC Trang phụ bìa Lời cam đoan Mục lục Danh mục chữ viết tắt Danh mục bảng Danh mục hình Danh mục biểu đồ Danh mục sơ đồ Trang MỞ ĐẦU Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đại cương 3-Monocloropropan-1,2-diol (3-MCPD) 1.2 Các nghiên cứu đánh giá độc tính 3-MCPD giới 1.3 Xét nghiệm huyết học 19 1.4 Thử nghiệm vi nhân (micronucleus) 24 1.5 Giải phẫu mô học – Dị sản tế bào gan 28 1.6 Gen tiền ung thư c-fos (proto-oncogen) 31 1.7 Phương pháp hóa mơ miễn dịch 31 1.8 Thối hóa tế bào thần kinh 35 1.9 Phương pháp nhuộm màu cresyl violet 36 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 Đối tượng nghiên cứu 38 2.2 Thuốc thử – Trang thiết bị – Nơi thực 38 2.3 Phương pháp nghiên cứu .40 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 54 3.1 Đánh giá độc tính 3-MCPD huyết học .54 3.2 Đánh giá độc tính 3-MCPD nhiễm sắc thể 78 3.3 Đánh giá độc tính mạn tính 3-MCPD gan 89 3.4 Đánh giá độc tính 3-MCPD não chuột nhắt .94 ii Trang Chương 4: BÀN LUẬN 106 KẾT LUẬN 123 KIẾN NGHỊ .125 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CỦA TÁC GIẢ TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC iii DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Từ nguyên Nghĩa tiếng Việt 1,3-DCP 1,3-Dicloropropan-2-ol 2,3-DCP 2,3-Dicloropropan-1-ol 2-MCPD 2-Monocloropropan-1,3-diol 3-MCPD 3-Monocloropropan-1,2-diol ALT Alanin aminotransferase AST Aspartat aminotransferase EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid Hb Hemoglobin HCT Hematocrit Thể tích khối hồng cầu LD50 Lethal Dose 50% Liều gây chết 50% LYM Lymphocytes Bạch cầu lympho MCV Mean Corpuscular Volume Thể tích trung bình hồng cầu MCH Mean Corpuscular Hemoglobin Huyết sắc tố trung bình hồng cầu MCHC Mean Corpuscular Hemoglobin Nồng độ huyết sắc tố trung Concentration bình hồng cầu MN Micronucleus Vi nhân MPV Mean Platete Volume Thể tích trung bình tiểu cầu NEU Neutrophils Bạch cầu trung tính MONO Monocytes Bạch cầu đơn nhân PLT Platelets Tiểu cầu RBC Red blood cells Hồng cầu WBC White blood cells Bạch cầu M Mean Giá trị trung bình SD Standard deviation Độ lệch chuẩn TDI Tolerable daily intake Mức thu nạp cho phép hàng ngày PMTDI Provisional maximum tolerable Định mức tạm thời cho phép thể daily intake thu nạp ngày iv DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Khảo sát hàm lượng 3-MCPD số thực phẩm nước Anh Bảng 1.2 Nồng độ tối đa 3-MCPD nước tương cho phép số quốc gia Bảng 1.3 Mức tiêu thụ 3-MCPD ngày người dân số quốc gia Bảng 1.4 Một số kết tổn thương bệnh học, tăng sản ung thư sau năm nghiên cứu độc tính 3-MCPD chuột cống 14 Bảng 1.5 Kết thử nghiệm in vitro khả gây đột biến gen 3-MCPD 17 Bảng 1.6 Kết thử nghiệm in vivo khả gây đột biến gen 3-MCPD 19 Bảng 1.7 Cơng thức bạch cầu bình thường 20 Bảng 1.8 Sự thay đổi số lượng loại bạch cầu ý nghĩa lâm sàng .20 Bảng 1.9 Các dạng bất thường kích thước hồng cầu 23 Bảng 1.10 Các dạng bất thường hình thái hồng cầu .23 Bảng 3.1 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lô thử nghiệm độc tính mạn tháng 55 Bảng 3.2 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn tháng 57 Bảng 3.3 Tác động 3-MCPD số tiểu cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn tháng 59 Bảng 3.4 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lô thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 60 Bảng 3.5 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 62 Bảng 3.6 Tác động 3-MCPD số tiểu cầu lô thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 64 Bảng 3.7 Tổng kết thay đổi hình thái hồng cầu phương pháp phết máu ngoại vi 71 Bảng 3.8 Kết xét nghiệm bất thường hồng cầu máy huyết đồ ADVIA 2120i .72 Bảng 3.9 Kết lympho bất thường sau phơi nhiễm 3-MCPD mạn tính 12 tháng .73 v Trang Bảng 3.10 Tác động 3-MCPD lên thời gian chảy máu sau phơi nhiễm tháng, tháng 12 tháng 75 Bảng 3.11 Tác động 3-MCPD lên thời gian đông máu sau phơi nhiễm tháng, tháng 12 tháng 76 Bảng 3.12 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 24 78 Bảng 3.13 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 48 79 Bảng 3.14 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 72 80 Bảng 3.15 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tuần .81 Bảng 3.16 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lô thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 84 Bảng 3.17 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 85 Bảng 3.18 Số lượng vi nhân quan sát thị trường lơ thí nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD 12 tháng .87 Bảng 3.19 Hoạt tính AST ALT huyết tương sau phơi nhiễm 3-MCPD thời gian tháng lô thử nghiệm 90 Bảng 3.20 Tỷ số khối lượng gan/thể trọng chuột lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 90 Bảng 3.21 Kết vi phẫu gan lô chuột thí nghiệm sau 12 tháng phơi nhiễm 3MCPD 93 Bảng 3.22 Tổng kết biểu c-fos lô thử nghiệm sau gây phơi nhiễm 3MCPD 99 vi DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Cơng thức hóa học dẫn xuất cloropropanol .4 Hình 1.2 Cơ chế tạo thành vi nhân biểu vi nhân hồng cầu .25 Hình 1.3 Vi thể dị sản gan với nhân đa hình, nhân đơi màng nhân bất thường 29 Hình 1.4 Dẫn truyền biểu c-fos .32 Hình 1.5 Phương pháp hóa mơ miễn dịch trực tiếp .34 Hình 1.6 Phương pháp hóa mô miễn dịch gián tiếp 34 Hình 1.7 Phương pháp nhuộm cresyl violet quan sát thân tế bào thần kinh thể Nissl 36 Hình 2.1 Máy xét nghiệm huyết học ADVIA 2120i 39 Hình 2.2 Máy xét nghiệm huyết học EXCELL 2280 39 Hình 2.3 Máy xét nghiệm sinh hóa Tecno 168 39 Hình 2.4 Lấy máu từ tim chuột 43 Hình 2.5 Mẫu mơ não nhuộm hóa mô miễn dịch .52 Hình 3.1 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 24 67 Hình 3.2 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 48 67 Hình 3.3 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 72 68 Hình 3.4 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tuần 69 Hình 3.5 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 69 Hình 3.6 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 70 Hình 3.7 Hình thái hồng cầu sau phơi nhiễm 3-MCPD 12 tháng 71 Hình 3.8 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 24 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 79 Hình 3.9 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 48 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 80 Hình 3.10 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau 72 phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 81 Hình 3.11 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tuần phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 82 Hình 3.12 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 84 vii Trang Hình 3.13 Vi nhân tế bào hồng cầu lơ thí nghiệm sau tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 85 Hình 3.14 Vi nhân tế bào hồng cầu lô thí nghiệm sau 12 tháng phơi nhiễm 3MCPD (x 1000) 88 Hình 3.15 Hình ảnh đại thể gan lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng .91 Hình 3.16 Hình ảnh sinh thiết gan lơ thí nghiệm (x 400) 92 Hình 3.17 Mơ gan bình thường trường hợp viêm, nghịch sản 94 Hình 3.18 Sự biểu c-fos độ pha loãng 1/100 (kháng thể sơ cấp kháng c-fos) 1/20 (kháng thể thứ cấp-cơ chất tạo màu) 95 Hình 3.19 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 10 mg/kg 24 96 Hình 3.20 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 50 mg/kg 24 97 Hình 3.21 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 mg/kg 24 98 Hình 3.22 Sự biểu c-fos lơ thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 mg/kg 48 99 Hình 3.23 Sự biểu c-fos lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD liều 100 mg/kg 72 100 Hình 3.24 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau 24 phơi nhiễm 3-MCPD .101 Hình 3.25 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau 48 72 phơi nhiễm 3-MCPD .101 Hình 3.26 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã với độ phóng đại cao (x 1000) sau 72 phơi nhiễm 3-MCPD 103 Hình 3.27 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã lô thử nghiệm sau tuần phơi nhiễm 3-MCPD .104 Hình 3.28 Sự bắt màu cresyl violet vùng hồi hải mã với độ phóng đại cao (x 1000) sau tuần phơi nhiễm 3-MCPD .105 viii DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ Trang Biểu đồ 3.1 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn tháng 55 Biểu đồ 3.2 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lô thử nghiệm độc tính mạn tháng 58 Biểu đồ 3.3 Tác động 3-MCPD số tiểu cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn tháng 59 Biểu đồ 3.4 Tác động 3-MCPD số bạch cầu lô thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 61 Biểu đồ 3.5 Tác động 3-MCPD số hồng cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng 63 Biểu đồ 3.6 Tác động 3-MCPD tiểu cầu lơ thử nghiệm độc tính mạn 12 tháng .64 Biểu đồ 3.7 Thời gian chảy máu lô thử nghiệm sau 3, 12 tháng phơi nhiễm 3-MCPD 75 Biểu đồ 3.8 Thời gian đông máu lô thử nghiệm sau 3, 12 tháng phơi nhiễm 3-MCPD 76 Biểu đồ 3.9 Tỉ lệ % hồng cầu có vi nhân lơ thử nghiệm sau phơi nhiễm 3MCPD 24, 48, 72 tuần 83 Biểu đồ 3.10 Tỉ lệ % hồng cầu có vi nhân lơ thử nghiệm sau phơi nhiễm 3MCPD tháng tháng 86 Biểu đồ 3.11 Tỉ lệ % hồng cầu có vi nhân lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3MCPD 12 tháng 87 Biểu đồ 3.12 Hoạt tính AST ALT huyết tương sau phơi nhiễm 3-MCPD thời gian tháng lô thử nghiệm .90 Biểu đồ 3.13 Tỷ số khối lượng gan/thể trọng chuột lô thử nghiệm sau phơi nhiễm 3-MCPD tháng 91 ix DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 1.1 Sự hình thành độc tố 3-MCPD Sơ đồ 2.1 Thiết kế quy trình đánh giá độc tính 3-MCPD huyết học 42 Sơ đồ 2.2 Thiết kế quy trình đánh giá độc tính 3-MCPD nhiễm sắc thể .46 Sơ đồ 2.3 Thiết kế quy trình đánh giá độc tính 3-MCPD gan .48 Sơ đồ 2.4 Thiết kế quy trình đánh giá độc tính 3-MCPD não chuột 50 Sơ đồ 2.5 Quy trình nhuộm cresyl violet .53 Sơ đồ 3.1 Tổng kết độc tính 3-MCPD cơng thức máu 65 PL-11 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian chảy máu (giây) sau tháng STT Chứng 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD mg/kg 10 mg/kg 40 mg/kg 219 109 100 111 207 66 125 75 194 211 59 100 179 185 92 121 133 148 50 113 162 140 140 88 204 190 135 72 150 119 107 Chết 75 176 133 Chết 10 149 88 81 Chết 11 148 192 118 Chết 12 Chết 143 113 Chết 13 Chết 145 126 Chết 14 Chết Chết 128 Chết 15 Chết Chết 174 Chết 16 Chết Chết Chết Chết 17 Chết Chết Chết Chết 18 Chết Chết Chết Chết 19 Chết Chết Chết Chết 20 Chết Chết Chết Chết 21 Chết Chết Chết Chết 22 Chết Chết Chết Chết 23 Chết Chết Chết Chết 24 Chết Chết Chết Chết 25 Chết Chết Chết Chết PL-12 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian đông máu (phút) sau tháng STT Chứng 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD mg/kg 10 mg/kg 40 mg/kg 11,53 7,81 6,51 5,1 10,89 8,18 7,8 3,83 11,43 8,23 7,33 3,43 11,33 9,17 6,68 4,92 12,30 7,99 6,95 3,31 12,45 8,17 8,01 3,86 12,45 8,57 7,41 4,61 10,14 7,63 8,33 Chết 10,50 7,48 7,88 Chết 10 11,11 8,09 7,56 Chết 11 12,48 8,08 7,77 Chết 12 11,56 8,68 7,77 Chết 13 11,97 9,13 7,15 Chết 14 Chết Chết 8,44 Chết 15 Chết Chết 7,37 Chết 16 Chết Chết 9,23 Chết 17 Chết Chết 9,33 Chết 18 Chết Chết 10,04 Chết 19 Chết Chết Chết Chết 20 Chết Chết Chết Chết 21 Chết Chết Chết Chết 22 Chết Chết Chết Chết 23 Chết Chết Chết Chết 24 Chết Chết Chết Chết 25 Chết Chết Chết Chết PL-13 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian chảy máu (giây) sau 12 tháng STT CHỨNG 3-MCPD MG/KG 3-MCPD 10 MG/KG 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 219 207 194 179 133 162 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 155 175 160 150 145 195 190 197 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 75 78 135 145 90 145 135 105 150 170 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết PL-14 PHỤ LỤC 3: THỜI GIAN CHẢY MÁU VÀ THỜI GIAN ĐÔNG MÁU Ở CÁC LÔ SAU KHI PHƠI NHIỄM 3-MCPD TRONG THÁNG, THÁNG VÀ 12 THÁNG Thời gian đông máu (phút) sau 12 tháng STT CHỨNG 3-MCPD MG/KG 3-MCPD 10 MG/KG 11.53 10.58 11.82 10 11 12 13 11.95 11.77 13.25 13.42 11.9 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 9.97 9.08 12.25 10.85 9.5 Chết Chết Chết Chết Chết Chết 10.37 11.75 8.67 9.58 9.5 8.42 7.95 7.71 Chết Chết Chết Chết 14 15 16 17 18 19 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 20 21 22 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết 23 24 25 Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết Chết PL-15 PHỤ LỤC 4: NỘI KIỂM ENZYM Thời gian: Tháng 12/2010 Test: AST Số lô: 0002 Mean: 33,6 ± 3,9 Máy : Tecno 168 Huyết kiểm tra: Humatrol - N Hạn sử dụng: 12/2012 Người thực hiện: ThS Nguyễn Thị Xuân Ngày 10 11 12 13 16 17 18 19 20 23 24 25 26 Giá trị đo 34,1 35,6 37 32,4 30,1 29,9 35,4 30,1 36,2 36 36,7 35,2 32,1 31,4 30,6 31,5 33,6 34,5 35,2 M 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 33,6 1SD 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 37,5 2SD 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 41,4 3SD 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 45,3 -1SD 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 29,7 -2SD 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 25,8 -3SD 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 21,9 27 30,1 33,6 37,5 41,4 45,3 29,7 25,8 21,9 Xi (U/L) BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - AST Ngày PL-16 PHỤ LỤC 4: NỘI KIỂM ENZYM Máy : Tecno 168 Huyết kiểm tra: Humatrol - N Hạn sử dụng: 12/2012 Người thực hiện: ThS Nguyễn Thị Xuân Thời gian: Tháng 12/2010 Test: ALT Số lô: 0002 Mean: 31,5 ± 3,65 Ngày 10 11 12 13 16 17 18 Giá trị đo 33,1 31 29,6 29 35 34,2 32,1 30,6 34,6 33,5 35 30,4 29,9 M 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 1SD 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 2SD 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 3SD 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 -1SD 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 -2SD 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 -3SD 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 19 20 23 24 25 26 30 34,2 35,6 33,2 29,8 30,1 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 31,5 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 35,15 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 38,8 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 42,45 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 27,85 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 24,2 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 20,55 27 33,4 31,5 35,15 38,8 42,45 27,85 24,2 20,55 Xi (U/L) BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - ALT Ngày PL-17 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Thời gian: Tháng 2/2010 Test: WBC (109/L) Số lô: U054 Mean: 3,35 ± 0,14 Ngày Giá trị đo 3,4 3,4 3,3 3,3 3,5 3,4 12 3,3 13 3,4 18 3,3 19 3,5 20 3,3 21 3,4 22 3,4 23 3,6 25 3,5 26 3,3 27 3,3 28 3,5 M 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 3,35 1SD 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 3,49 2SD 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 3,63 Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo 3SD -1SD -2SD -3SD 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 3,77 3,21 3,07 2,93 Xi (109/L) BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – WBC Ngày PL-18 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: RBC (109/L) Số lô: U054 Mean: 4,38 ± 0,08 Value 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 4,32 4,44 4,35 4,37 4,45 4,38 4,45 4,46 4,49 4,48 4,39 4,3 4,25 4,38 4,28 4,29 4,3 4,51 M M+SD M+2SD M+3SD M-SD 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 4,38 4,46 4,54 4,62 4,30 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra - RBC Xi (1012/L) Date Ngày M-2SD M-3SD 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,22 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 4,14 PL-19 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: Hb (g/dL) Số lô: U054 Mean: 12,6 ± 0,2 Value 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 12,70 M M+SD M+2SD M+3SD M-SD M-2SD M-3SD 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 12,60 12,80 13,00 13,20 12,40 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – Hb 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,20 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 12,00 Xi (g/dL) Date Ngày PL-20 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 Người thực hiện: ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: MCV (fL) Số lô: U054 Mean: 94 ± Value 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 93,60 93,9 93,7 93,6 93,9 93,9 94,1 94,2 93,5 93 93,5 93,3 93,5 93,5 93,6 93,6 91,6 92,1 M M+SD M+2SD M+3SD M-SD M-2SD M-3SD 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 94,00 96,00 98,00 100 92,00 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – MCV 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 90,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 88,00 Xi (fL) Date Ngày PL-21 PHỤ LỤC 5: NỘI KIỂM HUYẾT ĐỒ Máy : ADVIA 2120 Huyết kiểm tra: R&D Systems Hạn sử dụng: 2/2012 ThS Lại Thị Thảo Thời gian: Tháng 2/2010 Test: PLT (109/ L) Số lô: U054 Mean: 230 ± Value 12 13 18 19 20 21 22 23 25 26 27 28 239 235 225 236 235 229 239 240 238 232 230 227 236 222 223 227 229 239 M M+SD M+2SD M+3SD M-SD 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 230 235 240 245 225 BIỂU ĐỒ LEVEY – JENNINGS Mẫu kiểm tra – PLT Xi (109/L) Date Ngày M-2SD M-3SD 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 220 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 215 PL-22 PHỤ LỤC 6: SO SÁNH THỐNG KÊ CÔNG THỨC MÁU GIỮA LÔ CHỨNG VÀ CÁC LÔ PHƠI NHIỄM 3-MCPD BẠCH CẦU TRUNG TÍNH Ở CÁC LƠ SAU THÁNG PHƠI NHIỄM 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD 3-MCPD STT Lô chứng mg/kg 10 mg/kg 20 mg/kg 3.86 10.09 4.18 1.52 8.23 3.86 3.17 4.7 12.7 4.99 2.38 3.11 5.15 4.88 2.09 3.01 3.78 4.5 3.88 2.95 3.22 3.83 2.49 1.35 7.58 6.58 3.25 3.98 4.39 6.19 3.04 3.31 11.5 6.1 2.71 8.52 10 8.53 2.7 5.18 5.2 11 4.83 2.2 5.24 4.87 12 3.73 6.5 3.57 13 5.2 0.7 1.95 14 9.33 3.44 15 4.78 F-Test Two-Sample for Variances Mean Variance Observations df F P(F