Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 - 2021)

Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).Nghiên cứu đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng và kiểu gen của Chlamydia trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương (2020 2021).

Đặcđiểm sinhhọccủaChlamydiatrachomatis

Cấu trúc kháng nguyêncủaChlamydia

Chlamydia có nhiều loại kháng nguyên, bao gồm kháng nguyên giống, kháng nguyên loài và kháng nguyên của từng tuýp Kháng nguyên giống (genus) là lipopolysaccharide (LPS) gắn liền với thân, ổn định với nhiệt và là kháng nguyên chung của nhiều loại Chlamydia Kháng nguyên loài là các protein của màng ngoài, không chịu được nhiệt Các kháng nguyên riêng của từng tuýp cũng là protein, cho phép phân loại thành nhiều tuýp huyết thanh khác nhau.

C trachomatis có khả năng mã hóa một loại kháng nguyên đặc biệt gọi là protein chủ yếu của màng ngoài (MOMP), được mã hóa bởi gen OmpA, chiếm tới 50% cấu trúc màng và đóng vai trò quan trọng trong phân loại huyết thanh học MOMP là một protein xuyên màng chứa các quyết định kháng nguyên đặc hiệu cho từng loài và từng tuýp Các hội chứng do nhiễm Chlamydia liên quan chặt chẽ đến các tuýp huyết thanh khác nhau Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng kháng thể đặc hiệu tuýp có khả năng bảo vệ ở động vật thí nghiệm.

Chlamydia thuộc họ Chlamydiaceae, với một chi duy nhất là Chlamydia, bao gồm 12 loài, trong đó chỉ một số loài gây bệnh ở người Các loài Chlamydia khác nhau gây ra nhiều bệnh lý đa dạng, từ nhiễm trùng lâu dài đến các trường hợp nhiễm mà không có triệu chứng lâm sàng Dựa vào đặc điểm kháng nguyên, hạt vùi trong bào tương, tình trạng nhạy cảm với sulfonamid và bệnh lý gây ra, Chlamydia được phân chia thành ba loại.

- Chlamydia trachomatisgây bệnh mắt hột, bệnh viêm tiết niệu sinh dục, bệnh viêm hạch bạch huyết hoa liễu (bệnh hộtxoài).

-Chlamydia pneumoniaegây bệnh viêm đường hô hấp trên vàdưới.

- Chlamydia psittacigây bệnh sốt vẹt (Psittacosis hay Ornithose – psittacose).

Nhiễmtrùng sinhdụctiếtniệudoC.trachomatis

Các loại nhiễm trùng sinh dục tiết niệu doC.trachomatis

1.2.1.1 Nhiễm trùng C trachomatis đường sinh dục ở namgiới

Viêm niệu đạo do C trachomatis chiếm khoảng 50% các trường hợp viêm niệu đạo không do lậu Ở nam giới, khoảng 50% trường hợp này không có triệu chứng lâm sàng Nếu có, triệu chứng lâm sàng tương tự như bệnh lậu nhưng xuất hiện chậm hơn và nhẹ hơn, với thời gian ủ bệnh từ 7-21 ngày Trong giai đoạn toàn phát, thường gặp các triệu chứng như cảm giác nóng rát dọc niệu đạo, tăng tiết dịch niệu đạo màu trắng đục hoặc trắng trong, số lượng ít hơn, đái khó, đau buốt, đái rắt, và có thể xuất hiện các dấu hiệu viêm mào tinh hoàn và viêm tuyến tiền liệt.

Viêm mào tinh hoàn do C trachomatis thường biểu hiện bằng sốt, sưng tấy và đau ở một bên tinh hoàn, cùng với triệu chứng tiểu ra máu hoặc xuất tinh có máu Tình trạng này có thể xảy ra một cách độc lập hoặc đi kèm với viêm niệu đạo.

Viêm tuyến tiền liệt doC trachomatiscơ chế chưa rõ ràng, biểu hiện lâm sàng đa dạng tùy từng đối tượng [35].

Viêm trực tràng do C trachomatis có thể biểu hiện từ không triệu chứng đến các triệu chứng như đau hậu môn, đi ngoài ra máu, dịch nhầy và tiêu chảy Tình trạng này thường gặp ở nam giới có quan hệ tình dục đồng giới.

Hội chứng Reiter là một tình trạng y tế đặc trưng bởi các triệu chứng như viêm niệu đạo, viêm kết mạc mắt, viêm khớp và các tổn thương đặc trưng trên da và niêm mạc, thường liên quan đến nhiễm trùng do C trachomatis.

Nhiễm C trachomatis ở nữ giới thường biểu hiện một cách kín đáo, với khoảng 70% trường hợp không có triệu chứng Tuy nhiên, một số phụ nữ có thể gặp phải triệu chứng như đái buốt, đái rắt, và tiết dịch âm đạo, hoặc tiến triển thành viêm phần phụ (23%) Nhiễm C trachomatis có thể dẫn đến những hậu quả nghiêm trọng như viêm tiểu khung chậu (PID), chửa ngoài tử cung và vô sinh Đặc biệt, ở phụ nữ mang thai, nhiễm trùng này có thể gây ra các kết cục bất lợi như sảy thai, sinh non, thai lưu và sinh nhẹ cân Các tình trạng viêm phần phụ cũng thường gặp ở phụ nữ bị nhiễm C trachomatis.

Viêm cổ tử cung thường không có triệu chứng rõ ràng, với khoảng 1/3 bệnh nhân có dấu hiệu tại chỗ Các biểu hiện lâm sàng phổ biến bao gồm cổ tử cung tiết dịch nhày mủ và viêm lộ tuyến phì đại, kèm theo tình trạng cổ tử cung phù nề, sung huyết và dễ chảy máu.

Viêm niệu đạo là tình trạng thường gặp với các triệu chứng lâm sàng như tăng tiết dịch niệu đạo, miệng niệu đạo đỏ hoặc phù nề, và rối loạn tiểu tiện như đái khó, đái rắt hoặc đái ra mủ Tình trạng này thường xảy ra ở phụ nữ trẻ trong độ tuổi hoạt động tình dục mạnh mẽ, đặc biệt là những người có bạn tình có triệu chứng viêm niệu đạo hoặc bạn tình mới Tuy nhiên, cũng có những trường hợp viêm niệu đạo do C trachomatis mà không có biểu hiện lâm sàng rõ ràng.

Viêm tuyến Bartholin có thể do C trachomatis gây ra, tương tự như viêm do lậu cầu Tình trạng này thường đi kèm với sự xuất hiện của mủ và có thể xảy ra độc lập hoặc kết hợp với nhiễm khuẩn lậu cầu.

Viêm vòi tử cung là một biến chứng nghiêm trọng của viêm cổ tử cung do C trachomatis, thường không có triệu chứng rõ ràng, dẫn đến nhiều phụ nữ không đi khám và không được điều trị kịp thời Hậu quả của tình trạng này có thể là sẹo vòi tử cung, gây ra thai ngoài tử cung và vô sinh do yếu tố vòi tử cung (tubal factor infertility - TFI).

Viêm nội mạc tử cung thường xảy ra ở những bệnh nhân mắc viêm cổ tử cung và viêm vòi trứng, cũng như ở những phụ nữ mang thai bị nhiễm C trachomatis mà không được điều trị.

Nhiễm C trachomatis thường không có triệu chứng rõ ràng, dẫn đến việc bệnh nhân phát hiện và điều trị muộn Điều này có thể gây ra các tình trạng viêm như viêm vùng chậu, viêm vòi trứng và viêm nội mạc tử cung, từ đó làm tăng nguy cơ vô sinh ở nữ giới Nghiên cứu của Bernice M Hoenderboom và cộng sự trên 13,498 phụ nữ đã chỉ ra mối liên hệ này.

Giai đoạn 2015 - 2016, Hà Lan ghi nhận tỷ lệ phụ nữ có di chứng sau nhiễm Chlamydia cao, với tỷ lệ viêm vùng chậu (PID) từ 3,0% - 30,0%, thai ngoài tử cung từ 0,2% - 2,7%, và viêm tiểu khung (TFI) từ 0,1% - 6,0% Người nhiễm C trachomatis có nguy cơ vô sinh cao gấp 1,84 lần so với người không nhiễm, trong khi tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở bệnh nhân vô sinh cao gấp 2,72 lần so với người không vô sinh Các nghiên cứu cũng chỉ ra rằng, tỷ lệ vô sinh do C trachomatis ở các nước có thu nhập thấp cao hơn so với các nước có thu nhập cao Tại Việt Nam, do điều kiện kinh tế và cơ sở vật chất y tế còn hạn chế, nhiều trường hợp nhiễm C trachomatis vẫn bị bỏ sót.

Viêm tiểu khung, do C trachomatis gây ra, là nguyên nhân phổ biến nhất ở phụ nữ dưới 25 tuổi có tiền sử quan hệ tình dục không an toàn Bệnh thường gặp ở những người sống trong khu vực có tỷ lệ mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục cao Triệu chứng của viêm tiểu khung bao gồm đau bụng dưới, đau vùng chậu, sốt, đau thắt lưng, buồn nôn và ớn lạnh Nếu không được điều trị, nhiễm C trachomatis có thể dẫn đến viêm vòi trứng, tắc vòi trứng, gây ra vô sinh hoặc chửa ngoài tử cung.

Hình 1.3.Viêm tiểu khung doC trachomatisở bệnh nhân vô sinh [42]

Viêm quanh gan, hay còn gọi là hội chứng Fitz – Hugh – Cutis, có thể xảy ra đồng thời với viêm viêm gan virus (VTC) Triệu chứng của bệnh bao gồm đau ở vùng hạ sườn phải, sốt, buồn nôn và nôn Tình trạng này thường gặp ở phụ nữ trong độ tuổi sinh sản.

1.2.1.3 Bệnh lympho hạt (bệnh hột xoài, lymphogranuloma venereum – LGV) do C.trachomatis

Bệnh lympho hạt thường do các kiểu gen L1, 2, 3 gây ra, với khả năng xâm nhập sâu vào tổ chức dưới niêm mạc và hạch lân cận Hạch tổn thương thường là hạch bẹn hoặc hạch đùi một bên, đặc trưng bởi tình trạng viêm mềm, có thể kèm theo mủ và vết loét hoặc sẩn ở bộ phận sinh dục Bệnh thường gặp ở vùng khí hậu nhiệt đới, đặc biệt ở những người du lịch đến khu vực có dịch bệnh lưu hành Tại vùng hậu môn trực tràng, bệnh có thể biểu hiện qua viêm hậu môn trực tràng, tiết dịch, đau, táo bón hoặc mót rặn.

Tình hình nhiễmC trachomatisđường sinh dục – tiết niệu và cácyếu tốliênquan

1.2.2.1 Tình hình nhiễm C trachomatis đường sinhdục

C trachomatislà tác nhân gây bệnh lây truyền qua đường tình dục

STDs phổ biến nhất trên toàn thế giới, trong đó tình hình nhiễm C trachomatis đang gia tăng Theo ước tính của Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), mỗi ngày có khoảng 1 triệu người mới nhiễm C trachomatis, với 9,8% phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ bị ảnh hưởng Đến năm 2020, WHO ghi nhận 129 triệu ca mắc C trachomatis trên toàn cầu, cho thấy xu hướng tăng lên Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở đường sinh dục tiết niệu có sự dao động lớn, thường dưới 5% ở phụ nữ trong cộng đồng nhưng thường trên 10% ở các quần thể có nguy cơ cao.

C trachomatiscó thể lây truyền qua đường tình dục hoặc lây từ mẹ sang con trong quá trình chuyển dạ Từ đó, tác nhân gây bệnh xâm nhập vào vùng niệu đạo, âm đạo, hậu môn và hầu họng Trong đường sinhdục,các tác nhân này có khả năng lan tràn ngược dòng, gây ra viêm nhiễm ở cổ tử cung, tử cung và VTC, cũng như tiền liệt tuyến ở nam giới, có thể dẫn đến vô sinh ở cả hai giới Tuy nhiên, một tỷ lệ lớn người nhiễmC trachomatiskhông triệu chứng hoặc biểu hiện lâm sàng không rõrệt.Bệnh có thể gặp ở nhiều đối tượng, ở cả nam và nữ giới, nhưng thường gặp ở phụ nữ trẻ dưới 25 tuổi [44]. Dựa trên các bằng chứng thuyết phục về tỷ lệ nhiễm và hậu quả củaC.trachomatisgây ra, các chiến lược sàng lọcC trachomatisở phụ nữ đã được đưa ra ở nhiều quốc gia CDC Hoa Kỳ cũng như nhiều quốc gia khác khuyến nghị tầm soátChlamydiahàng năm cho tất cả phụ nữ hoạt động tình dục dưới 25 tuổi[44].

Phụ nữ có nguy cơ nhiễm C trachomatis cao hơn nam giới, với nhiều nghiên cứu chỉ ra tỷ lệ nhiễm ở nữ giới vượt trội Tại Hoa Kỳ, năm 2019 ghi nhận 1.808.703 ca nhiễm C trachomatis mới, tương đương khoảng 552,8 ca trên 100.000 người Tần suất nhiễm C trachomatis ở các châu lục trong giai đoạn 2012-2016 đã được WHO thống kê Các nghiên cứu về nhiễm C trachomatis đường sinh dục tiết niệu cũng được tóm tắt trong các bảng số liệu.

Bảng 1.1 Tần suất nhiễm C trachomatis trong các năm 2012 và 2016 ở các châu lục khác nhau

Khu vực địa lý Tỷ lệ nhiễm (khoảng dao động)

Phía Đông Địa Trung Hải 3,5 (2,4–5,0) 3,8 (2,6–5,4) Khu vực Tây Thái Bình Dương 6,2 (5,1–7,5) 4,3 (3,0–5,9)

Phía Đông Địa Trung Hải 2,7 (1,6–4,3) 3,0 (1,7–4,8) Khu vực Tây Thái Bình Dương 5,2 (3,4–7,2) 3,4 (2,0–5,3)

Các yếu tố nguy cơ làm tăng nhiễm C trachomatis bao gồm tuổi trẻ, điều kiện kinh tế xã hội thấp kém, nhiều bạn tình, chưa kết hôn, tiền sử nạo hút thai và mắc các bệnh lây truyền qua đường tình dục Sử dụng bao cao su khi quan hệ tình dục có thể giúp phòng ngừa sự lây truyền của bệnh và giảm tỷ lệ mắc bệnh Nếu không được điều trị hoặc điều trị không đầy đủ, 20-40% nhiễm C trachomatis có thể dẫn đến viêm vùng chậu, vô sinh, chửa ngoài tử cung và đau vùng chậu mạn tính Nhiễm C trachomatis cũng làm tăng nguy cơ ung thư cổ tử cung và tăng nguy cơ nhiễm HIV gấp 2-3 lần so với người không nhiễm.

Bảng 1.2 Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở đường sinh dục tiết niệu phụ nữ trong một số nghiên cứu

Nơi khảo sát Đối tượng

Số người tham gia nghiên cứu

Hoa Kỳ Phụ nữ tuổi từ

Châu Phi Phụ nữ độ tuổi sinh đẻ 17.119 2018 7,8 [3]

Nhiều nơi Phụ nữ trong cộng đồng - 2019 3,8 [47]

Kông Phụ nữ trong cộng đồng 535 2017 1,7 [48]

Bệnh nhân đi khám phụ khoa 338 2020 24,3 [49]

Tanzania Phụ nữ mang thai 439 2020 4,6 [50]

Phụ nữ mang thai, viêm phụ khoa, vô sinh

Séc Phụ nữ chửa ngoài tử cung 128 2022 12,5 [51]

Liên Bang Đức Phụ nữ trong cộng đồng 336 2022 2,8 [52]

Phụ nữ chuẩn bị mang thai 439.372 2022 0,2 [53]

Các nghiên cứu tại Việt Nam cho thấy, tỷ lệ nhiễmC trachomatisrất khác nhau Cụ thể:

Nghiên cứu của Nguyễn Duy Ánh (2022) tại Bệnh viện Phụ sản Hà Nội cho thấy trong số hơn 3000 phụ nữ độ tuổi sinh đẻ có triệu chứng viêm đường tiết niệu sinh dục, tỷ lệ nhiễm C trachomatis đạt 9,62%.

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Phạm Mỹ Hoài và CS

(2022) trên 150 đối tượng phụ nữ mắc bệnh phụ khoa đến khám tại Bệnh việnTrường đại học Y Dược Thái Nguyên là 3,3% [55].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Nguyen và CS (2019) thực hiện trên 800 thai phụ tại Bệnh viện Hà Đông, Hà Nội từ tháng 6/2016 đến tháng 7/2017 là 6,0% [56].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Nguyễn Thị Nhu và

CS (2013) trên 215 phụ nữ có biểu hiện nhiễm trùng sinh dục tại Bệnh viện đa khoa Thủ Đức - Tp Hồ Chí Minh tỷ lệ nhiễmC trachomatislà 8,38% [57].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Phạm Văn Đức và CS

(2009) tại Bệnh viện Từ Dũ - Tp Hồ Chí Minh trên phụ nữ hút thai 3 tháng đầu là 9,1% [58].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Lê Thị Phương năm

2001 trên 126 phụ nữ tuổi sinh đẻ có hội chứng tiết dịch âm đạo đến khám tại Viện Da liễu (nay là Bệnh viện Da liễu Trung ương) là 5,55% [59].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Trần Đình Vinh và CS

(2020) trên 600 đối tượng phụ nữ ≥ 18 tuổi đã có quan hệ tình dục đến khám tại Bệnh viện Phụ sản - Nhi Đà Nẵng là 15,6%[60].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Lê Hồng Cẩm và CS

(2001) trên 415 phụ nữ tuổi sinh đẻ tại huyện Hóc Môn Tp Hồ Chí Minh là 18,07% [61].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Hồ Thị Mỹ Châu và

CS (2018) trên đối tượng phụ nữ có hội chứng tiết dịch âm đạo đến khám tại Bệnh viện Da liễu Tp Hồ Chí Minh năm 2016-2017 là 26% [62].

Tỷ lệ nhiễmC trachomatistrong nghiên cứu của Nguyễn Duy Ánh

(2021) trên 1176 phụ nữ có gia đình tuổi từ 18 đến 49 trong cộng đồng tại 2 quận Cầu Giấy và huyện Đông Anh, Hà Nội là 22,11% [63].

1.2.2.2 Các yếu liên quan đến nhiễm C trachomatis sinhdục

- Tuổi:NhiễmC trachomatisthường xảy ra ở phụ nữ dưới 25 tuổi Ở

Theo thống kê, 75% các trường hợp nhiễm C trachomatis ở Mỹ xảy ra ở những người dưới 25 tuổi Tỷ lệ nhiễm ở tuổi vị thành niên là từ 5-10%, trong khi khoảng 50% phụ nữ ở độ tuổi 30 có kháng thể C trachomatis trong huyết thanh, cho thấy tình trạng phơi nhiễm trước đó Tại Vương Quốc Anh, 87,9% phụ nữ nhiễm C trachomatis cũng nằm trong độ tuổi dưới 25 Nghiên cứu tại Mỹ cho thấy có 563 trường hợp nhiễm C trachomatis trên 100.000 dân ở nhóm tuổi này.

Tại Việt Nam, nghiên cứu của Phạm Văn Đức và CS thấy rằng tỷ lệ nhiễmC trachomatisở nhóm 18-25 tuổi lớn hơn 2-3 lần ở nhóm tuổi lớn hơn

[65] Theo Trần Hậu Khang và CS tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ dưới

25 tuổi là 28,3%, trên 25 tuổi là 5% và sự khác biệt có ý nghĩa thống kê [66].

Nhiều nghiên cứu đã chỉ ra rằng việc bắt đầu quan hệ tình dục ở độ tuổi sớm làm tăng nguy cơ mắc các bệnh viêm nhiễm và bệnh lây truyền qua đường tình dục.

Nghiên cứu của Nguyễn Công Trúc (2007) chỉ ra rằng tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở nhóm tuổi có quan hệ tình dục trước 25 tuổi cao hơn so với nhóm có quan hệ tình dục sau 25 tuổi.

Nghiên cứu cho thấy rằng quan hệ tình dục sớm làm tăng nguy cơ nhiễm C trachomatis, và có mối liên hệ rõ ràng giữa độ tuổi quan hệ tình dục và tình trạng nhiễm loại vi khuẩn này.

Việc có nhiều bạn tình hoặc bạn tình mới làm tăng nguy cơ mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục, đặc biệt là nhiễm C trachomatis Theo nghiên cứu của Trần Thị Lợi và cộng sự (2001), phụ nữ có từ hai bạn tình trở lên có tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao gấp ba lần so với những người chỉ có một bạn tình Nghiên cứu của Thái Ngọc Huỳnh Vân (2005) cũng chỉ ra mối liên hệ giữa số lượng bạn tình và tình trạng nhiễm C trachomatis.

Nghiên cứu của Theo Levidioton (2005) với 16.843 phụ nữ và 1.035 nam cho thấy rằng những người trẻ tuổi, có bạn tình mới và nhiều bạn tình trong vòng một năm là những yếu tố nguy cơ làm tăng khả năng nhiễm C trachomatis.

- Tiền sử đặt dụng cụ tử cung và uống thuốc tránhthai

Nghiên cứu của Nguyễn Thị Ngọc Khanh (2000) trên 602 phụ nữ cho thấy việc đặt dụng cụ tử cung chỉ liên quan đến nhiễm Bacterial vaginosis, không phát hiện mối liên hệ với nấm hay C trachomatis.

Mối liên quan giữa tiền sử sản khoa và nhiễm C trachomatis ở đường sinh dục tiết niệu vẫn chưa được thống nhất Một số nghiên cứu chỉ ra rằng tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao hơn và có xu hướng tăng theo số lần sinh và nạo hút thai, trong khi một số khác không tìm thấy mối liên hệ này Thái Ngọc Huỳnh Vân (2005) cũng đã chỉ ra rằng có sự liên quan giữa tiền sử nạo buồng tử cung và tình trạng nhiễm C trachomatis.

Nguyễn Công Trúc (2007) cũng chỉ ra rằng, có mối liên quan có ý nghĩa thống kê giữa nhiễmC trachomatisvới tiền sử có can thiệp vào buồng tử cung[45].

- Tiền sử viêm nhiễm đường sinhdục

Nghiên cứu cho thấy rằng phụ nữ có tiền sử viêm nhiễm đường sinh dục có nguy cơ nhiễm C trachomatis cao hơn so với những người không có tiền sử này Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê, và bất kỳ ai có hoạt động tình dục đều có khả năng bị nhiễm Chlamydia.

ChẩnđoánxácđịnhvàchẩnđoánphânbiệtnhiễmC.trachomatis đường sinh dục –tiếtniệu

Chẩn đoán bệnh do nhiễmC trachomatisdựa vào các yếu tố dịch tễ, lâm sàng và cận lâm sàng [2], [39].

- Về dịch tễ: bệnh nhân có tiền sử phơi nhiễm vớiC trachomatisnhư có quan hệ tình dục hoặc bạn tình có dấu hiệu, triệu chứngbệnh.

- Về lâm sàng: có biểu hiện một số triệu chứng như viêm cổ tử cung, viêm niêm mạc tử cung, viêm tiểu khung, viêm niệu đạo, viêm trựctràng…

Bằng chứng nhiễm C trachomatis có thể được xác định qua xét nghiệm dịch cổ tử cung, cho thấy sự thâm nhiễm của hơn 20 bạch cầu đa nhân trong một vi trường độ phóng đại 1000X, trong khi không phát hiện song cầu Gram âm Đồng thời, nuôi cấy cũng giúp loại trừ sự hiện diện của lậu cầu khuẩn.

+ Làm các xét nghiệm PCR, LCR hoặc ELISA cho kết quả dương tính vớiChlamydia[39], [73].

Phương pháp sinh học phân tử hiện nay được Bộ Y tế công nhận là tiêu chuẩn vàng trong chẩn đoán nhiễm C trachomatis, với độ nhạy cao (> 90%) và độ đặc hiệu đạt 98-99%, cùng với hiệu suất cao Quyết định này được ghi nhận tại Quyết định số 5169/QĐ-BYT ngày 9 tháng 11 năm 2021.

Cần phân biệt chẩn đoán giữa nhiễm trùng đường tiết niệu – sinh dục do các tác nhân lây truyền qua đường tình dục và các nguyên nhân không lây truyền qua đường tình dục.

Viêm đường sinh dục – tiết niệu có thể do nhiều nguyên nhân khác nhau, bao gồm các tác nhân gây bệnh lây truyền qua đường tình dục (STDs) như N.gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium, cũng như các tác nhân không lây truyền qua đường tình dục.

- Viêm cổ tử cung do các tác nhân khác:N gonorrhoeae,

Herpes simplex, Trichomonas vaginalis, trực khuẩn lao, Mycoplasma, Ureaplasma, Cytomegalovirus và liên cầu khuẩn tan huyết beta nhóm B (Group B Streptococcus, GBS) có thể gây bệnh độc lập hoặc phối hợp với nhau Trong thực tế lâm sàng, thường gặp đồng nhiễm C trachomatis và N gonorrhoeae, vì vậy cần xét nghiệm lậu cho tất cả bệnh nhân nhiễm C trachomatis và ngược lại.

Cáckỹthuậtpháthiện nhiễmC.trachomatis

Các kỹ thuật chẩn đoán vi sinhvật học

- Bệnh phẩm: lấy, bảo quản và vận chuyển mẫu bệnh phẩm đúng cách ảnh hưởng rất lớn tới độ chính xác của kết quả xét nghiệmC trachomatis[74].

Độ nhạy và độ đặc hiệu của kỹ thuật xét nghiệm chẩn đoán C trachomatis phụ thuộc vào chất lượng mẫu bệnh phẩm Do đó, bác sĩ lâm sàng cần được đào tạo để thực hiện việc lấy, bảo quản và vận chuyển mẫu bệnh phẩm đúng cách Vì C trachomatis là vi khuẩn ký sinh nội bào, việc lấy mẫu cần bao gồm cả tế bào nhiễm từ cơ thể người bệnh; nếu chỉ lấy dịch tiết mà không có tế bào, kết quả xét nghiệm sẽ không chính xác.

Bệnh phẩm cần được thu thập từ các vùng nghi ngờ nhiễm, bao gồm dịch kết mạc, dịch từ các nang trong đau mắt hột, đờm, dịch tiết, và mủ niệu đạo (đối với nam giới), âm đạo và cổ tử cung (đối với nữ giới) Để lấy bệnh phẩm cổ tử cung, sử dụng tăm bông vô trùng có cán nhựa dài, đưa sâu vào cổ tử cung khoảng 1-2cm để lấy dịch, mủ và tế bào niêm mạc từ nhiều vị trí khác nhau Sau khi thu thập, bệnh phẩm cần được bảo quản trong môi trường vận chuyển hoặc ở nhiệt độ lạnh trước khi chuyển đến phòng xét nghiệm Đối với bệnh phẩm kết mạc mắt, nên lấy ở kết mạc bờ mi trên trong giai đoạn sớm của bệnh.

Quan sát trực tiếp bằng nhuộm Giemsa hoặc nhuộm Gimenez cho thấy thể sơ cấp có màu tím đỏ hoặc đỏ, trong khi thể tạo lưới có màu lơ nhạt Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang trực tiếp sử dụng kháng thể đa clon hoặc đơn clon để phát hiện thể sơ cấp trong bệnh phẩm, với các vật thể hình tròn hoặc hình bầu dục có nhân dày đặc gắn liền với màng bọc đặc trưng của vách tế bào.

Nuôi cấy phân lập vi khuẩn C trachomatis thường sử dụng các dòng tế bào như McCoy, Hela hoặc tế bào thận khỉ Buffalo Green Bệnh phẩm cần được thu thập vô trùng và bảo quản trong môi trường thích hợp Sau khi cấy vào tế bào đã xử lý với chất chống chuyển hóa, bệnh phẩm được ủ trong 48-72 giờ, sau đó ly tâm để phân tích Phương pháp này có độ đặc hiệu cao (98-99%) nhưng độ nhạy chỉ đạt 60-70%, thời gian cho kết quả lâu (3-7 ngày) và kỹ thuật phức tạp, dễ bị nhiễm chéo Chi phí đào tạo và xây dựng phòng xét nghiệm cũng khá tốn kém, dẫn đến việc kỹ thuật này ít được áp dụng trong chẩn đoán nhiễm C trachomatis, chủ yếu được sử dụng cho nghiên cứu về độc lực và tình trạng nhạy cảm với kháng sinh.

Chẩn đoán miễndịch học

Các xét nghiệm chẩn đoán miễn dịch họcC trachomatisbao gồm nhóm các xét nghiệm phát hiện kháng nguyên và nhóm các xét nghiệm phát hiện kháng thể củaC trachomatis[73].

Currently, antigen tests for detecting C trachomatis are conducted in various healthcare settings, including direct immunofluorescence assays (DFAs), enzyme immunoassays (EIAs), and immune chromatographic rapid diagnosis tests (RDTs).

Xét nghiệm miễn dịch huỳnh quang trực tiếp DFA sử dụng kháng thể Mabs kết hợp với phân tử huỳnh quang để phát hiện trực tiếp C trachomatis trong mẫu bệnh phẩm Tuy nhiên, phương pháp này có thể dẫn đến kết quả dương tính giả với các loại Chlamydia khác và các vi khuẩn không thuộc họ Chlamydia.

Phương pháp miễn dịch enzyme EIA là kỹ thuật hiệu quả để phát hiện kháng nguyên LPS đặc hiệu có trong bệnh phẩm Phương pháp này có thể áp dụng cho nhiều loại bệnh phẩm như dịch sinh dục, dịch tiết niệu, dịch kết mạc và nước tiểu Thời gian cho kết quả nhanh chóng, chỉ từ 3 đến 5 giờ.

Xét nghiệm nhanh kháng nguyên RDTs dựa trên phương pháp miễn dịch thẩm thấu, nhằm phát hiện kháng nguyên LPS trong dịch niệu đạo, cổ tử cung và nước tiểu nam Tuy nhiên, kỹ thuật này có độ nhạy và độ đặc hiệu thấp, vì vậy không phù hợp cho việc chẩn đoán.

Xét nghiệm kháng thể IgA và IgM của C trachomatis bằng phương pháp ELISA cho thấy cơ thể đang nhiễm mầm bệnh Tại Việt Nam, phương pháp này được ưa chuộng nhờ độ nhạy cao, nhưng tính ứng dụng còn hạn chế do yêu cầu về con người và thiết bị IgA xuất hiện khi có sự kích thích của kháng nguyên và có thời gian tồn tại ngắn, do đó, phát hiện kháng thể IgA là chỉ số quan trọng trong việc xác định tình trạng nhiễm trùng C trachomatis cấp tính Ngoài ra, phát hiện IgA còn giúp theo dõi tiến triển bệnh và điều trị Trong khi đó, kháng thể IgG cho biết đáp ứng miễn dịch với Chlamydia ở mọi giai đoạn nhiễm trùng, nhưng không phân biệt giữa nhiễm hiện tại và quá khứ, do đó không phù hợp để chẩn đoán nhiễm Chlamydia cấp tính Để có kết quả đáng tin cậy, cần thực hiện xét nghiệm đồng thời cả hai loại kháng thể IgG và IgA hoặc IgM.

Chẩn đoán bằng sinh họcphântử

Xét nghiệm khuếch đại acid nucleic (NAATs) sử dụng phản ứng chuỗi polymerase (PCR) hoặc phản ứng chuỗi ligase (LCR) kết hợp với đầu dò huỳnh quang để phát hiện sản phẩm khuếch đại trong thời gian thực Phương pháp này giúp rút ngắn thời gian thử nghiệm so với nuôi cấy và được CDC Hoa Kỳ khuyến cáo cho chẩn đoán nhiễm C trachomatis do độ nhạy và độ đặc hiệu cao Bệnh phẩm có thể bao gồm nước tiểu đầu bãi, dịch phết âm đạo hoặc dịch phết cổ tử cung, với yêu cầu không làm sạch niệu đạo trước khi thu thập.

Công nghệ khuếch đại gen phổ biến nhất hiện nay là realtime PCR, được ứng dụng trong chẩn đoán chi, loài hoặc dưới loài của Chlamydia Các gen đích chẩn đoán C trachomatis bao gồm gen OmpA, plasmid endogeneous, gen phospholipase, và gen 16S và 23S của rARN vi khuẩn Xét nghiệm PCR chẩn đoán C trachomatis do Roche Diagnostics phát triển là xét nghiệm PCR đầu tiên được US-FDA chấp thuận tại Hoa Kỳ, với độ nhạy và độ đặc hiệu tương ứng là 90% và 99% đến 100% Amplicor PCR cho phép sử dụng nhiều loại mẫu bệnh phẩm như dịch cổ tử cung, dịch niệu đạo nam giới và nước tiểu, và mẫu bệnh phẩm được bảo quản ở nhiệt độ -20°C đến -80°C trước khi tách chiết ADN và thực hiện phản ứng PCR Hiện nay, nhiều hệ thống xét nghiệm mới đã được phát triển, cho phép chẩn đoán C trachomatis nhanh chóng, tự động hóa và có độ chính xác cao, như hệ thống realtime PCR m20.

Abbott (Abbott Molecular Inc Des Plaines, IL, USA), APTIMA của Gen-Probe (Hologic/Gen-Probe, San Diego, CA, USA), BD ProbeTec ET và Qx (Becton Dickinson, Sparks, Maryland), và Xpert CT/NG Assay (Cepheid, Sunnyvale, CA, USA) là những công nghệ xét nghiệm tiên tiến Tuy nhiên, ở các nước đang và kém phát triển, việc thực hiện xét nghiệm này còn hạn chế do chi phí cao và khó khăn trong việc bảo trì máy móc, dẫn đến việc chưa phổ biến rộng rãi Phương pháp này mang lại nhiều ưu điểm đáng kể.

Độ nhạy và độ đặc hiệu của phương pháp NAATs vượt trội hơn hẳn so với các phương pháp nuôi cấy và phát hiện kháng nguyên, với độ nhạy cao hơn từ 20-30%, cho phép phát hiện vi khuẩn ngay cả khi số lượng trong bệnh phẩm rất nhỏ Đặc biệt, độ đặc hiệu của NAATs gần đạt 100%, cao hơn nhiều so với các phương pháp khác hiện có.

Phương pháp thu thập bệnh phẩm đường tiết niệu – sinh dục như âm hộ, âm đạo, cổ tử cung, niệu đạo và nước tiểu có thể áp dụng cho nhiều loại bệnh phẩm khác nhau Kỹ thuật này không xâm lấn và không yêu cầu cao về khả năng sống sót của mầm bệnh, giúp thuận tiện trong bảo quản và vận chuyển Nhờ vào các cặp mồi đặc hiệu, phương pháp này có thể phát hiện tác nhân gây bệnh ở nồng độ rất nhỏ, ngay cả trong những mẫu bệnh phẩm loãng như nước tiểu đầu Việc lấy mẫu có thể do nhân viên y tế hoặc tự bệnh nhân thực hiện, cho phép áp dụng ở nhiều tuyến từ cơ sở đến trung ương và cho nhiều đối tượng sàng lọc cộng đồng Điều này đóng vai trò quan trọng trong việc phát hiện các trường hợp nhiễm bệnh, đặc biệt là đối với những người nhiễm C trachomatis mà không có triệu chứng.

Một số xét nghiệm chẩn đoán như xét nghiệm kép Chlamydia–Lậu cầu (C trachomatis/N.gonorrhoeae:CT/NG) cho phép xác định đồng thời nhiều loại mầm bệnh, có thể thực hiện tại phòng xét nghiệm hoặc điểm khám bệnh Dựa trên nguyên lý NAATs, các xét nghiệm này cho kết quả nhanh trong vòng vài giờ và đã được FDA chấp thuận cho mẫu bệnh phẩm ở cổ tử cung, âm đạo và nước tiểu Các xét nghiệm như Abbot Realtime CT/NG, Roche Cobas Amplicor CT/NG, Aptima Combo 2 và Probetec ET CT/GC đều đạt độ nhạy > 90% và độ đặc hiệu > 95%.

Chẩn đoán nhiễm Chlamydia thường sử dụng xét nghiệm khuếch đại gen (PCR, LCR) hoặc xét nghiệm phát hiện kháng nguyên (DFA, EIA) Trong trường hợp nguồn lực hạn chế, có thể áp dụng xét nghiệm tại điểm (POC) như xét nghiệm kép Chlamydia – Lậu.

Các kiểu gen củaC.trachomatis

Phân tích huyết thanh học và sinh học phân tử đã xác định 19 kiểu huyết của C trachomatis, bao gồm A, B/Ba, C, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J, K, L1, L2, L2a và L3 Những kiểu gen này liên quan đến các thay đổi trên genompAc của C trachomatis, đặc biệt là ở vùng mã hóa cho protein chính ở màng ngoài tế bào Các nghiên cứu toàn cầu cho thấy các kiểu gen A-C là nguyên nhân gây bệnh đau mắt hột, D-K gây nhiễm khuẩn sinh dục, và L1-L3 gây bệnh hột xoài Tần suất của các kiểu gen C trachomatis ở đường sinh dục thay đổi theo đối tượng nghiên cứu và khu vực địa lý khác nhau Ở các quốc gia phát triển, các kiểu gen D, E, F là nguyên nhân phổ biến nhất gây nhiễm khuẩn cổ tử cung, âm đạo và niệu đạo Thống kê từ một số nghiên cứu quốc gia cho thấy các kiểu gen E, D và F chiếm ưu thế với tần suất tương ứng là 26–46%, 9–20%, và 14–24% Một nghiên cứu trên người có giao hợp với người khác giới tại 16 quốc gia chỉ ra rằng các kiểu gen chiếm ưu thế là E (45%), F (16%), D (13%), G (10%) và K (5,8%) Ở bệnh nhân vô sinh, tỷ lệ nhiễm C trachomatis cao hơn so với bệnh nhân không vô sinh, với nhiều nghiên cứu hỗ trợ cho nhận định này.

110 phụ nữ vô sinh, bao gồm cả vô sinh 1 và vô sinh 2 cho thấy, tỷ lệ nhiễm

Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở nhóm phụ nữ vô sinh là 28,1%, trong khi nhóm đối chứng (phụ nữ khỏe mạnh mang thai) chỉ có 3,3%, cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,01) Nghiên cứu năm 2009 của tác giả này cũng chỉ ra rằng 55% phụ nữ vô sinh có kháng thể IgG kháng C trachomatis, cao hơn đáng kể so với tỷ lệ 5,5% ở nhóm chứng Một nghiên cứu khác tại Jordan của Al Ramahi và cộng sự cũng đã xác nhận những phát hiện này.

Một nghiên cứu năm 2008 đã chỉ ra rằng trong số 152 bệnh nhân vô sinh và 146 bệnh nhân đối chứng không vô sinh, tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở nhóm phụ nữ vô sinh là 3,9%, trong khi ở nhóm chứng chỉ là 0,7%.

Nghiên cứu về kiểu gen của C trachomatis ở bệnh nhân vô sinh cho thấy, ba kiểu gen D, E, F là phổ biến nhất, tuy nhiên tỷ lệ giữa các kiểu gen này khác nhau ở từng quốc gia Tại Mexico, kiểu gen F chiếm tỷ lệ cao nhất (54,2%), tiếp theo là E, G, K và các kiểu gen LGV, trong khi ở Ấn Độ, kiểu gen E lại chiếm ưu thế Tại Việt Nam, mặc dù có một số nghiên cứu về nhiễm C trachomatis ở nhiều đối tượng khác nhau, nhưng dữ liệu về kiểu gen gây bệnh vẫn còn hạn chế Một nghiên cứu hiếm hoi tại Bệnh viện Da liễu Trung ương cho thấy ba kiểu gen phổ biến nhất là D (29,4%), F (27,1%) và E (23,5%), trong khi các kiểu gen G, H, J, K có tỷ lệ thấp hơn và không phát hiện kiểu gen I.

Theo y văn, các kiểu gen khác nhau gây ra các bệnh cảnh lâm sàng khác nhau [20], [79], [39] trongđó:

Các kiểu gen củaChlamydia trachomatislà A, B, Ba và C gây bệnh mắt hột (trachoma) và có thể dẫn tới mù lòa [20],[39].

Kiểu gen D, E, F, G, H, I, J và K củaChlamydia trachomatisgây bệnh viêm đường sinh dục [20], [39].

Các kiểu gen L1, L2 và L3 củaC trachomatisgây bệnh lympho hạt, một bệnh viêm hạch bạch huyết ở bẹn - bệnh hột xoài (Lymphogranulomatose venerienne - LGV) với bệnh cảnh loét sinh dục [20], [39].

Hình 1.4.Các kiểu gen củaC trachomatisvà bệnh gây ra [87]

Tùy từng thể bệnh, chẩn đoán vi sinh vật, phòng bệnh và điều trị sẽ khácnhau.

Việc xác định các kiểu gen của C trachomatis là mục tiêu quan trọng trong nghiên cứu dịch tễ học và lâm sàng, giúp hiểu rõ hơn về tác nhân gây bệnh này Sự phân bố gen theo thời gian và địa lý có ý nghĩa quan trọng đối với dịch tễ học và phát triển vắc xin Các kiểu gen cung cấp thông tin cần thiết để giải thích con đường lây truyền, mối liên quan với mô bị xâm nhập và khả năng gây bệnh Tại Việt Nam, dữ liệu về tỷ lệ nhiễm và kiểu gen của C trachomatis còn hạn chế, nhiều vấn đề vẫn chưa được làm sáng tỏ.

Vôsinhvàmối liên quan vớinhiễmC.trachomatis

Một số vấn đề chung vềvô sinh

Theo Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), vô sinh được định nghĩa là tình trạng một cặp vợ chồng có quan hệ tình dục bình thường, không sử dụng biện pháp tránh thai nào trong vòng 12 tháng nhưng không thể mang thai.

Vô sinh có thể được phân loại thành nhiều loại khác nhau dựa trên các tiêu chí như tình trạng mang thai, nguyên nhân gây vô sinh, và tiên lượng dự phòng cũng như điều trị.

- Phân loại theo giới tính hay nguyên nhân vôsinh

Theo phân loại, vô sinh được chia thành hai loại chính: vô sinh nam và vô sinh nữ, hoặc chưa rõ nguyên nhân Vô sinh nam, do nguyên nhân hoàn toàn từ chồng, chiếm khoảng 35% - 40% tổng số trường hợp Tương tự, vô sinh nữ cũng chiếm khoảng 35% - 40%, nguyên nhân hoàn toàn từ vợ Trường hợp cả hai vợ chồng đều gặp vấn đề về sinh sản chiếm khoảng 15% - 20%.

Khoảng 20% trường hợp vô sinh không xác định được nguyên nhân, tức là không tìm thấy nguyên nhân ở cả vợ và chồng Một khảo sát trên 7273 cặp vợ chồng bị vô sinh cho thấy, nguyên nhân vô sinh do nữ giới chiếm 41%, do nam giới chiếm 24%, do cả hai giới chiếm 24% và không rõ nguyên nhân chiếm 11% Tại Anh, tỷ lệ vô sinh không rõ nguyên nhân dao động từ 10% đến 20%, trong khi phần còn lại chủ yếu liên quan đến nguyên nhân suy phong noãn.

(27%), tổn thương VTC (14%), lạc nội mạc tử cung (5%), số lượng hoặc chất lượng tinh trùng thấp (19%) và nguyên nhân khác (5%).

- Theo tình trạng đã từng mang thai hay chưa

Theo cách phân loại này, vô sinh được chia làm 2 nhóm: vô sinh nguyên phát (vô sinh I) và vô sinh thứ phát (vô sinh II)[89].

Vô sinh nguyên phát (vô sinh I) là tình trạng khi cặp vợ chồng chưa từng có thai Tỷ lệ mắc vô sinh I ước tính dao động từ 0,6% đến 3,5%.

Vô sinh thứ phát (vô sinh II) là tình trạng mà cặp vợ chồng đã từng thụ thai nhưng hiện tại không thể mang thai trở lại trong hơn 12 tháng, mặc dù có quan hệ tình dục bình thường và không sử dụng biện pháp tránh thai Tình trạng này có thể xảy ra sau những lần mang thai thành công hoặc không thành công, như sẩy thai hay thai ngoài tử cung Tỷ lệ mắc vô sinh thứ phát dao động từ 8,7% đến 32,6%, với mức trung bình khoảng 18,4%.

Vô sinh có thể được phân loại theo tiên lượng điều trị dự phòng thành hai nhóm chính: vô sinh không thể dự phòng trước, thường do nguyên nhân bẩm sinh, và vô sinh có thể dự phòng được, thường là do các yếu tố mắc phải Việc phân loại này giúp nâng cao hiệu quả trong điều trị và dự phòng vô sinh.

Các nguyên nhân vô sinh không thể dự phòng bao gồm dị dạng hay khiếm huyết bẩm sinh của đường sinh dục, bất thường về gen hoặc hormone, và các vấn đề liên quan đến miễn dịch Nhóm nguyên nhân này chỉ chiếm khoảng 5% tổng số nguyên nhân gây vô sinh.

Các bệnh lây truyền qua đường tình dục (STDs) như Chlamydia, lậu và giang mai có thể gây ra viêm nhiễm và tắc nghẽn vòi trứng, cản trở khả năng thụ thai Ngoài ra, nạo phá thai không an toàn hoặc các thủ thuật không vô khuẩn tại buồng tử cung cũng có thể dẫn đến viêm nhiễm vùng sinh dục và vùng chậu, gây ra vô sinh thứ phát, đặc biệt là do tắc vòi trứng.

Tình hình mắcvôsinh

Ở các nước phát triển, khoảng 80-90% các cặp vợ chồng cố gắng thụ thai thành công sau một năm, và con số này tăng lên 95% sau hai năm Tỷ lệ thụ thai thành công giảm dần theo tuổi, cho thấy tỷ lệ mắc vô sinh cũng tăng theo độ tuổi của các cặp vợ chồng Do đó, việc đưa ra con số chính thức về tỷ lệ mắc vô sinh trên toàn cầu gặp nhiều khó khăn Những lý do dẫn đến việc xác định tỷ lệ mắc vô sinh không chính xác bao gồm thiếu biện pháp đo lường hoàn hảo và ảnh hưởng của thành kiến văn hóa.

Trên toàn thế giới, khoảng 48,5 đến 72,4 triệu cặp vợ chồng gặp vấn đề về sinh sản, trong đó có khoảng 10 triệu cặp ở khu vực cận Sahara châu Phi và 14 triệu cặp ở Nam Á Tỷ lệ vô sinh ở độ tuổi sinh đẻ (15-49) chiếm khoảng 10-15% Tại Nhật Bản, có khoảng 2.400.000 người gặp vấn đề về sinh sản, trong khi con số này ở Mỹ là khoảng 6.100.000 Tỷ lệ vô sinh dao động từ 3,5 đến 16,7% ở các nước phát triển và từ 6,9 đến 9,3% ở các nước có thu nhập thấp, với tần suất trung bình khoảng 9% Thống kê cho thấy tỷ lệ vô sinh nguyên phát ước tính khoảng 2% và vô sinh thứ phát khoảng 10% sau 5 năm không có con.

Tỷ lệ vô sinh giữa các quốc gia thu nhập thấp và phát triển khác nhau do điều kiện chăm sóc sức khỏe, dịch vụ khám chữa và yếu tố văn hóa - xã hội, cùng với sự khác biệt về địa lý và chủng tộc Gần đây, tỷ lệ vô sinh đã gia tăng, với nghiên cứu tại Pháp cho thấy 24% phụ nữ trong độ tuổi sinh đẻ mắc vô sinh Tại Australia và Iran, tỷ lệ này lần lượt là 17% và 17,3% Nguyên nhân gia tăng vô sinh có thể do các cặp vợ chồng chậm sinh con, thay đổi chất lượng tinh trùng do thói quen sinh hoạt, và sự chủ động trong việc khám chữa Khoảng 15% phụ nữ trên thế giới bị vô sinh nguyên phát hoặc thứ phát, trong đó nữ giới chiếm 37-41% nguyên nhân Mặc dù vô sinh phổ biến ở cả nam và nữ, nhưng ít người có ý thức ngăn ngừa Vô sinh gây ra gánh nặng tâm lý và ảnh hưởng đến đời sống hôn nhân, với tỷ lệ rối loạn tâm lý cao hơn ở những người vô sinh Trầm cảm là tác động tâm lý phổ biến nhất liên quan đến vô sinh, và tỷ lệ tái hôn ở phụ nữ vô sinh cao gấp 3,5 lần so với phụ nữ không bị vô sinh Vô sinh có thể dẫn đến nhiều hậu quả, ảnh hưởng đến đời sống xã hội, đau khổ cá nhân, rối loạn tâm lý và chức năng tình dục của các cặp vợ chồng.

Tại Việt Nam, tỷ lệ vô sinh ở các cặp vợ chồng trẻ hiện đang ở mức khoảng 7,7%, trong đó vô sinh nguyên phát chiếm 3,9% và vô sinh thứ phát là 3,8% Hiện có ít nhất 1 triệu cặp vợ chồng vô sinh đang cần điều trị, với 50% trong số đó gặp vấn đề về vô sinh, hiếm muộn ở độ tuổi dưới 30.

Liên quan giữa nhiễmC trachomatisvàvôsinh

Nhiễm C trachomatis có thể không biểu hiện triệu chứng ở cả nam và nữ, nhưng lại ảnh hưởng nghiêm trọng đến khả năng sinh sản của cả hai giới Nghiên cứu gần đây cho thấy, nhiễm khuẩn này có thể cản trở quá trình vận chuyển tinh trùng ở nam giới và gây ra những thay đổi trong sinh tinh, làm giảm chất lượng và số lượng tinh trùng Đối với nữ giới, nhiễm khuẩn vùng khung chậu do C trachomatis là một trong những nguyên nhân chính gây vô sinh, đặc biệt là vô sinh do viêm vùng chậu.

Vi khuẩn có khả năng di chuyển ngược dòng ảnh hưởng đến tử cung và buồng trứng, dẫn đến các biến chứng nghiêm trọng như dính tắc và ứ nước, cản trở quá trình thụ tinh Nghiên cứu cho thấy nguyên nhân chính gây nhiễm khuẩn vùng khung chậu và vô sinh là các tác nhân lây truyền qua đường tình dục, phổ biến nhất là C trachomatis và lậu cầu khuẩn Thêm vào đó, một số biến thể di truyền của gen C trachomatis cũng được phát hiện có liên quan đến khả năng gây bệnh ở đường sinh dục và ảnh hưởng đến tình trạng vô sinh.

Nhiễm C trachomatis nếu không được điều trị có thể dẫn đến viêm vùng chậu và viêm tắc vòi trứng, gây ra vô sinh ở nữ giới, với tỷ lệ khoảng 10-15% Đáng chú ý, nhiễm trùng này có thể không có triệu chứng nhưng vẫn có khả năng gây tắc vòi trứng vĩnh viễn Khoảng 15% trường hợp viêm nhiễm vùng khung chậu có thể dẫn đến vô sinh do tắc vòi trứng, và số lần viêm nhiễm tỉ lệ thuận với nguy cơ vô sinh Nhiều phân tích cho thấy mối liên quan quan trọng giữa nhiễm C trachomatis và vô sinh nữ, với tổn thương vòi trứng là bằng chứng rõ ràng nhất Tuy nhiên, một số nghiên cứu vẫn chưa đạt được sự đồng thuận về vấn đề này.

Tỷ lệ nhiễm Chlamydia trachomatis ở bệnh nhân vô sinh có tắc vòi trứng (VTC) cao gấp bốn lần so với những bệnh nhân không bị tắc Nguy cơ tắc buồng trứng, chửa ngoài tử cung và vô sinh tăng lên khi có tái nhiễm Chlamydia trachomatis Nghiên cứu của van Dooremalen và cộng sự (2020) cho thấy tỷ lệ có kháng thể kháng Chlamydia trachomatis ở nhóm có tắc VTC cao hơn nhiều so với nhóm không bị tắc VTC.

Theo nghiên cứu, tỷ lệ phụ nữ mắc tắc VTC có tiền sử nhiễm trùng C trachomatis là 41,9%, so với 9,6% Rawre và CS (2016) cũng xác nhận điều này khi phát hiện 56 trong số 75 phụ nữ bị tắc VTC đã từng nhiễm trùng Tuy nhiên, cơ chế và bằng chứng về mối liên quan giữa nhiễm trùng và tắc VTC vẫn chưa được làm rõ.

Các phân tích cho thấy viêm vòi trứng (VTC) thường ảnh hưởng đến cả hai bên hoặc chỉ một bên, trong khi bên còn lại có thể bị hỏng hoặc bị sẹo Viêm VTC thường đi kèm với viêm cổ tử cung, viêm niêm mạc tử cung, và viêm nhiễm buồng trứng cũng như vùng lân cận Nghiên cứu của Navarro và cộng sự đã chỉ ra mối liên hệ này.

Một nghiên cứu năm 2002 trên 162 phụ nữ vô sinh cho thấy 62,3% bệnh nhân có kháng thể IgG kháng C trachomatis Trong số 29 phụ nữ bị tắc vòi trứng một hoặc hai bên, tất cả đều có sự hiện diện của kháng thể IgG này Kết quả cũng chỉ ra rằng những phụ nữ có tiền sử nhiễm C trachomatis có nguy cơ tắc vòi trứng cao gấp 4 lần so với những người không có bằng chứng nhiễm bệnh.

1.6 Một số thông tin về Bệnh viện Phụ sản Trungương

Bệnh viện Phụ sản Trung ương, ban đầu mang tên Bệnh viện “C”, được thành lập theo Nghị định số 615-ZYO/NĐ/3A ngày 19/7/1955 của Bộ trưởng Bộ Y tế Năm 1966, bệnh viện được đổi tên thành Viện Bảo vệ Bà mẹ và Trẻ sơ sinh theo Quyết định số 88/CP ngày 08/11/1966 của Thủ tướng chính phủ Đến năm 2003, Bộ trưởng Bộ Y tế đã ký Quyết định số 2212/QĐ-BYT ngày 18/06/2003, chính thức đổi tên thành Bệnh viện Phụ sản Trung ương, tên gọi này được duy trì cho đến nay.

1516 viên chức, người lao động (VCNLĐ), trong đó viên chức là 1102 người, hợp đồng 68 là 198 người, số lượng hợp đồng lao động là 216 người [111].

Bệnh viện Phụ sản Trung ương, tọa lạc tại 43 Tràng Thi, Hoàn Kiếm, Hà Nội, là cơ sở y tế hàng đầu trong lĩnh vực sản phụ khoa với quy mô hơn 1.350 giường bệnh nội trú và 39 khoa, phòng, trung tâm Bệnh viện có 8 phòng chức năng, 14 khoa lâm sàng, 9 khoa cận lâm sàng và 7 trung tâm, cùng với cơ sở 2 tại xã Ngọc Mỹ, huyện Quốc Oai, Hà Nội Đây cũng là nơi đào tạo đại học, sau đại học và nghiên cứu khoa học, đồng thời thực hiện chuyển giao công nghệ trong chuyên ngành phụ sản và sơ sinh Mỗi ngày, Bệnh viện tiếp nhận hàng nghìn lượt khám ngoại trú các bệnh lý sản phụ khoa, sơ sinh và hiếm muộn, với khoảng 300.000 lượt khám ngoại trú, 200.000 lượt điều trị ngoại trú và 70.000 lượt điều trị nội trú mỗi năm, cùng với 20.000 ca phẫu thuật sản khoa và phụ khoa.

Bệnh viện Phụ sản Trung ương đã bắt đầu điều trị vô sinh và hỗ trợ sinh sản từ năm 2000, liên tục tổ chức khám và điều trị cho hàng trăm, thậm chí hàng ngàn bệnh nhân mỗi ngày Năm 2022, số lượng ca làm thụ tinh nhân tạo tăng 116% so với 2021, với tỷ lệ có thai đạt 51% trong ống nghiệm Bệnh viện đã triển khai nhiều kỹ thuật chuyên môn cao, bao gồm lấy tinh trùng từ mào tinh, hủy thai tại vết mổ dưới siêu âm và thực hiện kỹ thuật mang thai hộ, trở thành một trong những cơ sở được Bộ Y tế cho phép.

Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Đốitượng, thời gian, địa điểmvàphươngphápnghiêncứu mụctiêu1:Môtảmộtsốđặcđiểmlâmsàng, cận lâm sàngvàmộtsốyếutốliênquan tới tìnhtrạng nhiễmC.trachomatisởphụnữ vôsinh đến khám, điều trịtạiBệnhviệnPhụ sản Trungương(2020-2021)

Đối tượngnghiên cứu

- Phụ nữ vô sinh có độ tuổi 19-52 đến khám và điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương trong thời gian từ2020-2021.

-Phụ nữ vô sinh đã được xét nghiệm và bị nhiễmC.trachomatis.

+ Là phụ nữ đến khám và điều trị vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương trong thời gian nghiên cứu.

Người tham gia nghiên cứu tự nguyện đồng ý cung cấp mẫu bệnh phẩm và thông tin cần thiết vào bộ câu hỏi hoặc bệnh án nghiên cứu đã được thiết kế sẵn.

Không lựa chọn vào nghiên cứu các đối tượng sau:

- Phụ nữ bất thường về tâm thần kinh hoặc mắc các bệnh lý nội ngoại khoa cấp tính hoặc nhiễmHIV/AIDS.

- Phụ nữ đang hành kinh, rong kinh, ronghuyết.

- Phụ nữ có sử dụng thuốc đặt âm đạo hoặc thụt rửa âm đạo trong vòng

1 tuần trước thời điểm đi khám và điều trị vôsinh.

Địa điểmnghiêncứu

- Địa điểm khám bệnh, thu thập thông tin đối tượng và lấy mẫu bệnh phẩm: phòng khám bệnh chuyênkhoa.

- Địa điểm xét nghiệm phát hiện nhiễmC trachomatis: khoa visinh.

Thiết kế và cỡ mẫunghiêncứu

2.1.4.1 Thiết kế nghiên cứu:nghiên cứu mô tả cắt ngang có phântích.

2.1.4.2 Cỡ mẫu và phương pháp chọnmẫu

Trong một nghiên cứu về phụ nữ vô sinh từ 19 đến 52 tuổi, đã xác định được sự nhiễm C trachomatis và các đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng liên quan Số lượng phụ nữ vô sinh này được tính toán dựa trên tỷ lệ gặp triệu chứng trong nhóm phụ nữ bị nhiễm C trachomatis Cụ thể, số phụ nữ sinh nhiễm C trachomatis được tính theo công thức: n=𝑍²(1−𝛼/2)p(1−p).

+ n: Số phụ nữ bị vô sinh.

1,96 nếu mức ý nghĩa thống kê là 5%.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi ghi nhận tỷ lệ xuất hiện triệu chứng dịch tiết âm đạo bất thường ở phụ nữ nhiễm C trachomatis là 88,5% (p = 0,885) Tỷ lệ này cho thấy triệu chứng cơ năng này thường gặp trong nhóm đối tượng nghiên cứu.

Bệnh viện phụ sản - nhi Đà Nẵng năm 2018 - 2019 trong nghiên cứu của Trần Đình Vinh và CS (2020) [60].

+ d: mức sai số tuyệt đối chấp nhận Lấy d = 0,06.

Thay vào công thức trên, tính toán được số phụ nữ vô sinh nhiễmC.trachomatistối thiểu cần để mô tả đặc điểm lâm sàng, cận lâm sàng là

Trong nghiên cứu, 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis đã được mô tả với các đặc điểm lâm sàng và cận lâm sàng Để xác định nhóm đối tượng này, tổng số 761 bệnh nhân nữ đến khám và điều trị vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương trong khoảng thời gian từ tháng 1 năm 2020 đã được khảo sát.

Vào tháng 12 năm 2021, đã tiến hành khám và thu thập thông tin, lấy mẫu dịch phết cổ tử cung để xét nghiệm phát hiện nhiễm C trachomatis Kỹ thuật xét nghiệm được sử dụng là realtime PCR với bộ sinh phẩm cobas® CT/NG, áp dụng cho hệ thống Cobas® 4800 của hãng Roche.

- Phương pháp chọn mẫu nghiên cứu

Trong nghiên cứu từ tháng 1/2020 đến tháng 12/2021, phương pháp chọn mẫu thuận tiện được áp dụng cho những phụ nữ vô sinh đến khám và điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương Những phụ nữ đáp ứng đủ tiêu chuẩn lựa chọn sẽ được khám lâm sàng, lấy dịch phết cổ tử cung để xét nghiệm C trachomatis và phỏng vấn thu thập thông tin Quá trình lấy mẫu diễn ra từ tháng 1/2020 và sẽ dừng lại khi đủ số lượng mẫu cần thiết đã được tính toán trước.

Nội dungnghiêncứu

- Mô tả đặc điểm lâm sàng nhiễm C trachomatis đường sinh dục

+ Xác định tỷ lệ nhiễmC trachomatisở mẫu dịch phết cổ tử cung phụ nữ bị vô sinh.

+ Xác định tần suất xuất hiện một số triệu chứng lâm sàng toàn thân ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis;

+ Xác định tần suất xuất hiện một số triệu chứng lâm sàng cơ quan sinh dục ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis;

+ So sánh sự khác nhau về tần suất xuất hiện triệu chứng lâm sàng ở phụ nữ vô sinh nhiễm và không nhiễmC trachomatis;

- Mô tả đặc điểm cận lâm sàng nhiễm C trachomatis đường sinh dục

+ Đặc điểm nhiễm một số tác nhân lây truyền qua đường tình dục ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatisđường sinhdục.

+ Đặc điểm đồng nhiễm một số nhóm vi sinh vật đường sinh dục ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatisđường sinhdục.

+ Đặc điểm hình ảnh siêu âm phần phụ tử cung của bệnh nhân vô sinh nhiễmC trachomatisđường sinh dục.

+ Đặc điểm tế bào học dịch phết cổ tử cung bệnh nhân vô sinh nhiễm

- Phân tích một số yếu tố liên quan với nhiễm C trachomatis đường sinh dục ở phụ nữ vô sinh.

+ Liên quan giữa một số đặc điểm nhân khẩu học với tình trạng nhiễm

C trachomatisở phụ nữ vô sinh.

+ Liên quan giữa một số yếu tố tiền sử với tình trạng nhiễmC.trachomatisở phụ nữ vô sinh.

+ Liên quan giữa kiểu vô sinh và thời gian mắc vô sinh với tình trạng nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh.

+ Liên quan giữa một số đặc điểm lâm sàng với tình trạng nhiễmC.trachomatisở phụ nữ vô sinh.

Các biến số trongnghiêncứu

Bảng 2.1 Các biến số trong nghiên cứu mục tiêu 1

TT Biến số Định nghĩa, cách xác định Phân loại

Thời gian nghiên cứu được tính từ khi đối tượng được sinh ra cho đến thời điểm tiến hành nghiên cứu, được xác định bằng hiệu số giữa năm nghiên cứu và năm sinh của đối tượng.

Xem giấy tờ tùy thân

2 Nhóm tuổi Được phân loại thành 2 nhóm: ≤ 25, > 25 Theo khuyến cáo của US-CDC, phụ nữ ≤ 25 là đối tượng cần được sàng lọc nhiễmC trachomatis.

3 Nghề Nghề nghiệp là lĩnh vựcl a o Định Hỏi bệnh Phiếu

Công cụ thu thập nghiệp động đóng vai trò quan trọng trong việc tạo ra thu nhập chính cho các nhóm đối tượng khác nhau, bao gồm công nhân, nông dân, công chức/viên chức, những người kinh doanh/buôn bán, người thất nghiệp và các nghề khác Việc nghiên cứu và phân tích các nhóm này giúp hiểu rõ hơn về sự đa dạng trong nguồn thu nhập và các yếu tố ảnh hưởng đến sự phát triển kinh tế.

Cộng đồng này có mối liên hệ chặt chẽ và bền vững, sở hữu ngôn ngữ riêng cùng những đặc trưng văn hóa độc đáo Cộng đồng được chia thành hai nhóm chính: Dân tộc Kinh và các dân tộc thiểu số khác.

Là bậc học cao nhất của một người trong hệ thống giáo dục quốc dân Được chia thành các nhóm: mù chữ, tiểu học,T H C S ,

Tình trạng hôn nhân của một cá nhân được xem xét từ góc độ pháp lý, bao gồm hai nhóm chính: những người đã kết hôn và hiện đang sống với chồng, cùng với những người đã ly hôn hoặc ly thân.

Là tuổi bệnh nhân bắt đầu có quan hệ tình dục lầnđầu tiên với người khác giới Định lượng

Phiếu hỏi/ BA nghiên cứu

8 Tuổi kết Là tuổi bệnh nhân đăng ký Định Hỏi bệnh Phiếu

Công cụ thu thập hôn kết hôn lần đầu tiên tại cơ quan có thẩm quyền lượng nhân hỏi/BA nghiên cứu 9

Tuổi có thai lần đầu

Là tuổi lần đầu tiên bệnh nhân có giao hợp và được xác định có mang thai Định lượng

Phiếu hỏi/ BA nghiên cứu 10

Là số lần đối tượng mang thai, bao gồm cả những lần mang thai chuyển dạ sinh con và bị sảy thai Định lượng

Là số lần mang thai có chuyển dạ sinh con Định lượng

Số con chuyển dạ sinh ra hiện đang còn sống Định lượng

Là tình trạng đối tượng có QHTD trước thời điểm kết hôn lần đầu Định tính

Phiếu hỏi/ BA nghiên cứu

Số người đối tượng thực hiện hành vi QHTD Được phân loại thành: QHTD với 1 người và QHTD với nhiều hơn 1 người

Trongquá khứcó hay không có sử dụngbiệnpháp đìnhchỉ có thaibằngcáchloại bỏphôi thaihoặc thai nhi ra khỏi tửcung trướclúc đếngiaiđoạn sinh nở của thai phụ. Đượcphânloại thành: chưatừng và đãtừng.

Trong quá khứ có hay không tình trạng mang thai và mất thai trước tuần thứ 20 của thai kỳ Đượcphân loại thành có và không có.

Tiền sử viêm âm đạo, sinhdục

Trong quá khứ có bị viêm âm đạo, sinh dục với các biểu hiệu ngứa, tăng tiết khí hư hay không Được phân loại thành có và không

18 Loại vô sinh Được phân loại thành:nguyên phát và thứphát

Phiếu hỏi/BA nghiên cứu

Thời gian bị vô sinh

Thời gian từ khi muốn có con nhưng không thể có con đến thời điểm khám bệnh. Được chiathành:

Tăng tiết dịch âm đạo

Tình trạng dịch âm đạo tiết ra quá mức bình thường. Được phân loại thành có và không có.

21 Đau bụng dưới ngoàikỳ kinh

Tình trạng đau bụng dưới ngoài chu kỳ kinh nguyệt. Được phân loại thành có và không có.

Là tình trạng âm đạo tiết ra dịch có mùi khó chịu, gây nên tình trạng ngứa và đau. Được phân loại thành: có viêm và không viêm

Là tình trạng viêm, sưng và loét ở cổ tử cung do các vi sinh vật gây ra Được phân loại có viêm và không viêm

Là cảm giác không thoải mái ở đường sinh dục làm cho bệnh nhân muốn dùng tay để gãi Được phânloại thành có và không có.

Ra máu bất thường ngoàikỳ kinh

Là tình trạng ra máu ở đường sinh dục ngoài chu kỳ kinh nguyệt Được phân loại thành có và khôngcó.

Là cảm giác nóng, rát tại âm đạo làm cho bệnh nhân cảm thấy không thoải mái Được phân loại thành cóvà không có.

Đái rắt và đái buốt là hai triệu chứng thường gặp liên quan đến tình trạng tiểu tiện Đái rắt biểu hiện bằng việc đi tiểu nhiều lần trong ngày, trong khi đái buốt gây cảm giác đau đớn, nóng rát và khó chịu khi đi tiểu Các triệu chứng này có thể được phân loại thành hai nhóm: có và không có.

Là tình trạng giảm hứng thú và khó đạt được khoái cảm khi QHTD Được phân loại thành có và không có.

Tình trạng đau bụng dưới ngoài chu kỳ kinh nguyệt. Được phân loại thành có và không có.

Là tình trạng nhiệt độ cơ thể tăng cao hơn giới hạn bình thường Sốt được xác định khi nhiệt độ cơ thể đo ở da 37,2 o C hoặc đo ởhậumôn

> 37,5 o C [112] Đượcp h â n loại thành có và không có.

Là sự xuất hiện sưng, nóng, đỏ hay đau tại một hay nhiều khớp trên cơ thể Được phân loại thành cóvà không có viêm khớp.

Là cảm giác khó chịu ở trên, trong, sau hoặc xung quanh ổ mắt.Đượcphân loại thànhcóvàkhôngcó đau mắt.

Là tình trạng viêm nhiễm niêm mạc họng và hầu gây ra cảm giác đau, rát ở họng.Được phânloạithànhcóv à không có viêm họng.

Là tình trạng vòi trứng bị chít hẹp, tắc nghẽn lưu thông Được phân loại thành tắc 1 bên, tắc cả 2bên và không tắc.

Nhiễm 1 tác nhân vi sinh vật

Một vi sinh vật nào đó, được phát hiện ở người bằng 1 kỹ thuật xét nghiệm nào đó. Được phân loại thành: có nhiễm, không nhiễm.

Phiếu xét nghiệm/BA nghiên cứu

Kết quả siêu âm bất thường

Siêu âm thấy hình ảnh bất thường so với giải phẫu, sinh lý bình thường Được phân loại thành: cóvà không có bất thường.

Xét nghiệm siêu âm phân phụ

Phiếu xét nghiệm/BA nghiên cứu

Các kỹ thuật sử dụng trongnghiêncứu

2.1.7.1 Kỹ thuật điều tra thông tin của đối tượng nghiêncứu

- Thiết kế phiếu điều tra thu thập thông tin của đối tượng nghiêncứu.

- Phỏng vấn thử đối tượng nghiêncứu.

- Chỉnh sửa, hoàn thiện phiếu điềutra.

Để thu thập thông tin hiệu quả, cần xác định đối tượng là những phụ nữ vô sinh đến khám tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương, đảm bảo đáp ứng đầy đủ các tiêu chuẩn nghiên cứu Việc thu thập thông tin sẽ không được tiến hành đối với những đối tượng không đủ tiêu chuẩn nghiên cứu.

Mục đích của nghiên cứu này là để hiểu rõ hơn về [chủ đề nghiên cứu], nhằm mang lại lợi ích cho cộng đồng và phát triển kiến thức trong lĩnh vực này Người tham gia sẽ được hưởng quyền lợi như [liệt kê quyền lợi], và sự tham gia của họ là hoàn toàn tự nguyện Để tham gia, đối tượng nghiên cứu cần xác nhận đồng ý bằng cách điền vào phiếu điều tra và trả lời các câu hỏi một cách trung thực.

- Tiến hành phỏng vấn đối tượng nghiên cứu để thu thập thông tin, ghi chép các thông tin thu thập được vào phiếu điềutra.

- Rà soát, kiểm tra các thông tin thu thậpđược.

Sau khi hoàn tất phỏng vấn và thu thập thông tin từ bộ câu hỏi thiết kế sẵn, bệnh nhân sẽ được hướng dẫn cụ thể về các bước tiếp theo trong lộ trình điều trị vô sinh tại Bệnh viện.

2.1.7.2 Kỹ thuật khám phụ khoa và thu thập mẫu dịch phết cổ tửcung

Những đối tượng được chọn phải đáp ứng đầy đủ các tiêu chuẩn lựa chọn Việc lấy mẫu nên thực hiện ngoài kỳ kinh, ưu tiên lấy mẫu ở nửa chu kỳ sau của kinh nguyệt để đảm bảo mẫu không bị lẫn nhiều máu.

Hướng dẫn bệnh nhân nằm tư thế sản khoa là rất quan trọng Sử dụng mỏ vịt không bôi chất làm trơn, có thể thay thế bằng nước muối sinh lý hoặc nước ấm để tăng cường độ trơn Mục tiêu là bộc lộ cổ tử cung một cách rõ ràng nhất để thuận lợi cho quá trình thăm khám.

+ Tăm bông vô trùng loại dài 15 - 20cm

+ Bút viết kính (loại dành cho phòng xét nghiệm).

* Tiến hành khám phụ khoa, lấymẫu

Phụ nữ vô sinh khi đến khám và điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương sẽ được đảm bảo đầy đủ các tiêu chuẩn lựa chọn Quy trình khám lâm sàng và lấy bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung sẽ được thực hiện bởi bác sĩ chuyên khoa phụ sản hoặc nữ hộ sinh/kỹ thuật viên đã được đào tạo bài bản theo quy trình chuẩn của bệnh viện.

- Trước khi lấy mẫu, tiến hành in phiếu chỉ định, dán mã số, viết tên bệnh nhân, tuổi và ngày giờ lấy mẫu lên ống môi trường Cobas® PCRMedia.

Sử dụng mỏ vịt không bôi trơn, có thể dùng nước muối sinh lý hoặc nước ấm để làm trơn, nhằm bộc lộ âm đạo và cổ tử cung của bệnh nhân.

- Khám và ghi chép thông tin lâm sàng lên bệnh án/phiếu thu thập thông tin nghiêncứu.

- Dùng tăm bông lấy dịch phết cổ tử cung bằng cách quay 2-3 vòng quanh cổ tử cung rồi rút quera.

Sau khi lấy mẫu, que tăm bông vô trùng được đưa vào ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media Người thực hiện sẽ xoay và xục que tăm bông, đồng thời tì vào thành ống từ 2-3 vòng trước khi rút ra và đậy nắp kín Ống môi trường bảo quản cùng với phiếu chỉ định xét nghiệm cần được vận chuyển tới phòng xét nghiệm vi sinh trong vòng 2 giờ để phát hiện nhiễm C.trachomatis.

* Tiếp nhận, kiểm tra và xử lý mẫu bệnhphẩm

Khi mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung được chuyển đến phòng xét nghiệm, các thông tin trên ống chứa và trong phiếu xét nghiệm sẽ được kiểm tra kỹ lưỡng.

Các mẫu bệnh phẩm không đạt yêu cầu sẽ bị yêu cầu thu hồi hoặc loại bỏ khỏi nghiên cứu trong các trường hợp như: mẫu bệnh phẩm bị lẫn máu, thiếu thông tin hoặc thông tin không nhất quán; mẫu vận chuyển đến phòng xét nghiệm sau 48 giờ; và mẫu bảo quản không đúng quy cách.

- Với các mẫu đủ tiêu chuẩn xét nghiệm, thông tin bệnh nhân được vào sổ tiếp nhận mẫu và được đưa tới khu vực xétnghiệm.

2.1.7.3 Xác định nhiễm C trachomatis trong dịch phết cổ tửc u n g

* Nguyên vật liệu, trang thiết bị sửdụng

- Dụng cụ, phụ tùng, vật tư tiêu hao

+ Máng nhựa hình chữ V loại 50ml và 200ml;

+ Đĩa Deepwell và AD plate 0,3ml;

+ Ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media (Roch);

+ Hộp lưu mẫu 100 vị trí;

+ Đầu tớp cú lọc cỏc loại 10 àl, 200 àl, 1000 àl;

Một số hóa chất cơ bản cần thiết bao gồm cồn 70 độ, dung dịch NaCl 0,9% và cồn đốt Để phát hiện C trachomatis, bộ sinh phẩm xét nghiệm cobas® CT/NG cho hệ thống Cobas® 4800 của Roche được sử dụng, bao gồm các thành phần chính như dung dịch đệm WB, sinh phẩm tách chiết DNA (MGP và EB), chứng âm, chứng dương và sinh phẩm chạy realtime PCR để phát hiện CT/NG.

+ Hệ thống Cobas® 4800 (Roche, Đức);

+ Máy ly tâm lạnh (Eppendorf, Đức);

+ Máy spin down D1008 (Trung Quốc);

Hình 2.1.Hệ thống xét nghiệm Cobas® 4800

- Xác định nhiễm C trachomatis ở mẫu dịch phết cổ tử cung bằng hệ thống Cobas®4800

Mẫu dịch phết cổ tử cung được kiểm tra nhiễm C trachomatis bằng bộ sinh phẩm Cobas 4800® CT/NG Test trên hệ thống Cobas® 4800 Phương pháp này dựa trên nguyên lý realtime PCR theo hướng dẫn của nhà sản xuất Chi tiết các bước thực hiện được trình bày trong Phụ lục 3.

- Bảo quản mẫu dịch phết cổ tử cung sau xétnghiệm

Kết quả xét nghiệm của các bệnh nhân được ghi chép lại vào sổ và ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media Những mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung có kết quả xét nghiệm dương tính với C.trachomatis được bảo quản ở -20°C cho tới khi thực hiện tách chiết DNA và các phân tích tiếp theo.

Kỹ thuật xét nghiệm trực tiếp và nhuộm soi được sử dụng để chẩn đoán nhiễm nấm Candida và trùng roi âm đạo, theo quy trình kỹ thuật hướng dẫn của Bộ Y tế tại Quyết định số 6769/QĐ-BYT ngày 08 tháng 11 năm 2018.

Kỹ thuật nhuộm Gram được thực hiện bằng bộ sinh phẩm nhuộm Gram của hãng Merk (Đức), tuân theo hướng dẫn của nhà sản xuất và tham khảo từ hướng dẫn của Bộ Y tế.

Các chỉ sốnghiên cứu

- Tỷ lệ nhiễmC trachomatislà số phụ nữ vô sinh được xác địnhnhiễm

C trachomatisqua xét nghiệm sàng lọc bằng realtime PCR chia cho tổng số phụ nữ vô sinh được sàng lọc Cụ thể:

Tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh

Tổng số phụ nữ vô sinh ược xét nghiệm được xét nghiệm

Tỷ lệ nhiễm theo 1 đặc điểm của đối tượng

Số trường hợp(+)với 𝐶 𝑡𝑟𝑎𝑐ℎ𝑜𝑚𝑎𝑡𝑖𝑠 của 1 ặc iểm được xét nghiệm được xét nghiệm

Tổng số phụ nữ vô sinh của ặc iểm ó được xét nghiệm được xét nghiệm được xét nghiệm

- Tỷ lệ dương tính với 1 tác nhân gây bệnh (lậu, giang mai, HBV, nấm

Candida…) ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis

Tỷ lệ dương tính với 1 mầm bệnh

Số trường hợp nhiễm mầm bệnh được xét nghiệm ó

= Tổng số phụ nữ ược xét nghiệm dương tính được xét nghiệm với 𝐶 𝑡𝑟𝑎𝑐ℎ𝑜𝑚𝑎𝑡𝑖𝑠

- Tỷ lệ xuất hiện một triệu chứng lâm sàng:

Tỷ lệ xuất hiện một triệu chứng lâm sàng

Số trường hợp có triệu chứng lâm

= sàng Tổng số phụ nữ ược xét nghiệm dương tính được xét nghiệm với 𝐶 𝑡𝑟𝑎𝑐ℎ𝑜𝑚𝑎𝑡𝑖𝑠

Đốitượng,thời gian, địađiểmvàphươngphápnghiên cứumụctiêu2:XácđịnhkiểugencủaC.trachomatisphânlậpđượctừđốitượngnghiên cứu

Đối tượngnghiên cứu

+ Phụ nữ vô sinh là đối tượng của mục tiêu 1 được xác định nhiễmC.trachomatis.

+ Vi khuẩnC trachomatis: là các chủng vi khuẩnC trachomatisphân lập được từ phụ nữ vô sinh đến khám tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương trong thời gian từ 1/2020-12/2021.

- Tiêu chuẩn lựa chọn đối tượng nghiêncứu

+ Phụ nữ vô sinh được lựa chọn trong mục tiêu 1.

+ Được xác định nhiễmC trachomatisbằng xét nghiệm realtime PCR.

- Tiêu chuẩn lựa chọn mẫu để xác định kiểugen

+ Mẫu bệnh phẩm dương tính vớiC trachomatisbằng xét nghiệm realtime PCR.

+ Kết quả khuếch đại genompA cho 1 band sản phẩm duy nhất rõ nét, có kích thước khoảng 1100bp.

+ Trình tự thu được có chất lượng tốt: các pick của các nucleotide cao,nhọn, không chồng chéo lên nhau

Địa điểmnghiêncứu

- Địa điểm xác định nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh: Bệnh viện Phụ sản Trungương.

- Địa điểm phân tích kiểu gen củaC trachomatis: Học viện Quâny.

- Địa điểm giải trình tự gen: Apical Scientific, Kembangan 43.300, Selangor,Malaysia.

Thiết kế và cỡ mẫunghiêncứu

2.2.4.1 Thiết kế nghiên cứu:nghiên cứu mô tả cắt ngang có phân tích các kết quả thu được từ phòng thínghiệm.

2.2.4.2 Cỡ mẫu và phương pháp chọnmẫu

- Gồm toàn bộ 119 mẫu dịch phết cổ tử cung của phụ nữ vô sinhn h i ễ m

C trachomatisđường sinh dục được xác định ở mục tiêu 1 Tuy nhiên, trong số 119 mẫu dịch phết cổ tử cung nhiễmC trachomatis, chỉ có 90 mẫu cho kết quả PCR vòng 2 tốt với 1 band rõ nét Trong 90 mẫu này,chỉ có 81 mẫu cho các trình tự tốt đủ điều kiện để phân tích kiểu gen.

+ Phương pháp chọn mẫu, bảo quản và chuyển mẫu nghiên cứu

Sau khi thực hiện xét nghiệm sàng lọc để xác định tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh, toàn bộ bệnh nhân có kết quả dương tính đã được phân tích kiểu gen Các mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung được lưu trữ trong ống môi trường Cobas® PCR Media (Roch) và bảo quản ở nhiệt độ -20°C tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương Sau đó, các mẫu này được chuyển đến Học viện Quân y để tiến hành phân tích xác định kiểu gen.

Nghiên cứu này áp dụng kỹ thuật giải trình tự genompA để xác định kiểu gen của C trachomatis, sử dụng phương pháp PCR bán lồng nhằm tăng độ nhạy của phản ứng khuếch đại Những mẫu có kết quả PCR vòng 2 rõ nét sẽ được giải trình tự bằng 5 mồi, và trình tự thu được sẽ được so sánh với ngân hàng gen để xác định các kiểu gen của C trachomatis.

+ Thời gian xác định kiểu gen: Từ tháng 1/2020 đến hết tháng 12/2022.

Nội dungnghiêncứu

- Xác định tần suất các kiểu gen củaC trachomatisphân lập từ đối tượng nghiêncứu.

- Xác định tỷ lệ tương đồng nucleotide của các kiểu genC.t r a c h o m a t i s phân lập từ đối tượng nghiên cứu với dữ liệu trên ngân hàng gen.

- Xây dựng cả phả hệ và phân tính đặc điểm đa hình gen ompA các kiểu gen củaC.trachomatis

- Phân tích mối liên quan giữa kiểu gen và một số đặc điểm của đối tượng nghiên cứu.

Các biến số trongnghiêncứu

Bảng 2.2 Các biến số trong nghiên cứu mục tiêu 2

TT Biến số Định nghĩa, cách xác định

1 Kiểu genC.trach omatis Được phân loại thành: A, B/Ba, C, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J, K, L1, L2, L2a, và L3. Định danh Xét nghiệm

Máy PCR, phần mền tin sinh học…

Số nucleotide khác nhau giữa trình tự trong nghiên cứu này và trình tự tương ứng trên ngân hàng gen đã được xác định thông qua phần mềm tin sinh học định lượng.

Thay đổi nucleotide tại một vịtrítrên chuỗi nucleotide Được phân loại thành có và không có thayđổi giữa 2 chuỗi nucleotide được so sánh

Loại thay đổi axít amin Được phân loại thành đồng nghĩa và sai nghĩa Định danh

So sánh, đối chiếu với trình tự tham chiếu

Các kỹ thuật sử dụng trongnghiêncứu

2.2.7.1 Kỹ thuật tách chiết và kiểm tra nồng độADN

- Tách chiết ADN tổng số mẫu dịch phết cổ tửcung

ADN tổng số mẫu dịch phết cổ tử cung được tách chiết từ dịch bảo quản Cobas® PCR Media bằng bộ sinh phẩm QiAamp® DNA mini kit của QIAGEN (Mã số 51304, Đức) Quy trình tách chiết ADN này được thực hiện theo các bước cụ thể để đảm bảo độ chính xác và hiệu quả cao trong việc phân tích mẫu.

Lấy 500 μl môi trường Cobas® PCR Media cho vào ống Eppendorf, sau đó ly tâm ở tốc độ 10.000 vòng/phút trong 10 phút Sau khi ly tâm, hút bỏ dịch nổi và giữ lại cặn.

+Thêm 180 μl môi trường Cobas® PCR Media cho vào ống eppendorf,l dung dịch đệm ATL, 20 μl môi trường Cobas® PCR Media cho vào ống eppendorf,l proteinase K rồi ủ ở nhiệt độ

Để tiến hành quy trình, đầu tiên, máy lắc rung cần được điều chỉnh ở nhiệt độ 56°C trong 10-20 phút Tiếp theo, thêm 200 μl môi trường Cobas® PCR Media vào ống Eppendorf, sau đó bổ sung đệm AL vào mẫu Vortex hỗn hợp trong 15 giây và ủ ở 70°C trong 10 phút Cuối cùng, tiến hành ly tâm với tốc độ 8000 vòng/phút trong 15 giây.

Tiếp tục thêm 200 μl môi trường Cobas® PCR Media vào ống Eppendorf, sau đó thêm ethanol (96-100%) và vortex trong 15 giây Chuyển toàn bộ dung dịch vào cột lọc QIAamp Mini (loại 2 ml) và ly tâm ở 8000 vòng/phút trong 1 phút, rồi loại bỏ phần dung dịch sau ly tâm Tiếp theo, thêm 500 μl môi trường Cobas® PCR Media vào ống Eppendorf, thêm đệm AW1 vào cột lọc và ly tâm 8000 vòng/phút trong 1 phút, sau đó loại bỏ phần dung dịch sau ly tâm.

+ Lặp lại tương tự bước trên với 500 μl môi trường Cobas® PCR Media cho vào ống eppendorf,l đệm AW2.

+ Cuối cùng đặt cột lọc trong một ống ly tâm sạch loại 1,5 ml và thêm

Để thu ADN, cho 100 μl môi trường Cobas® PCR Media vào ống Eppendorf, sau đó thêm đệm AE hoặc nước khử ion vào cột lọc Ủ hỗn hợp ở nhiệt độ phòng trong 1 – 2 phút, rồi ly tâm với tốc độ 8000 vòng/phút trong 1 phút.

ADN thu được được bảo quản ở -20 o C cho tới khi thực hiện các phản ứng PCR nhân genompA củaC trachomatis.

- Kiểm tra nồng độ ADN sau khi táchchiết

Dung dịch ADN thu được được kiểm ra nồng độ trên máy NanoDrop

ADN được thu nhận theo hướng dẫn của Thermofisher (Mỹ) vào năm 2000 Sau khi thu thập, nồng độ ADN được kiểm tra và bảo quản ở nhiệt độ -20°C cho đến khi được sử dụng làm cơ chất cho phản ứng PCR.

2.2.7.2 Khuếch đại gen om pA của Chlamydia trachomatis bằng phản ứng semi-nestedPCR

Nghiên cứu này áp dụng kỹ thuật PCR bán lồng (semi-nested PCR) nhằm nâng cao độ nhạy của phản ứng khuếch đại genompA, dựa trên phương pháp đã được Beni và cộng sự mô tả trong năm 2010.

- Dụng cụ, vật tư tiêuhao

+ Đĩa Deepwell và AD plate 0,3ml;

+ Ống môi trường bảo quản Cobas® PCR Media (Roch);

+ Tube chạy PCR và realtime PCR;

+ Đầu tớp cú lọc cỏc loại 10 àl, 200 àl, 1000 àl;

+ Một số hóa chất cơ bản: NaCl 0,9%, cồn tuyệt đối.

+ Sinh phẩm phát hiệnC trachomatis: sử dụng bộ sinh phẩm xét nghiệm cobas® CT/NG cho hệ thống Cobas® 4800 của hãng Roche.

+ Bộ sinh phẩm tách chiết ADN vi khuẩn (Qiagen, Đức);

+ Hóa chất điện di: gel agarose, dung dịch TBE 10X (Serva, Đức); + Hóa chất tinh sạch sản phẩm PCR: Thermofisher (Mỹ).

+ Hóa chất, sinh phẩm chạy PCR: Master Mix 2X (Promega, Mỹ), nước khử ion (Corning, Mỹ),mồi…;

+ Hóa chất giải trình tự

+ Máy ly tâm lạnh (Eppendorf, Đức);

+ Bộ điện di (EPS 301, Trung Quốc);

+ Máy soi và chụp gel (UVP, Canada);

+ Tủ an toàn sinh học (Nuaire, Hàn Quốc);

+ Buồng mix PCR (Biosan, Latvia);

+ Máy spin down D1008 (Trung Quốc);

+ Tủ lạnh -20 o C (Electrolax, Trung Quốc);

+ Tủ mát 2 - 10 o C (Sanaky, Việt Nam)

- Thực hiện phản ứng PCR vòng1

Phản ứng PCR vòng 1 sử dụng hai mồi CT1 (5’- GCC GCT TTG AGT TCT GCT TCC TC-3’) và CT5 (5’-ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT-3’) Thành phần của phản ứng PCR vòng 1 được xác định rõ ràng.

Bảng 2.3 Thành phần phản ứng PCR1

TT Thành phần Nồng độ ban đầu

Hỗn dịch PCR được đưa vào máy luân nhiệt Thermo Mastercycler gradient cycler (Thermo Scientific, USA) theo chu trình nhiệt như sau. + 1 chu kỳ: 94 °C trong 5 min;

+ 10 chu kỳ, mồi chu kỳ gồm các bước:

+ 20 chu kỳ tiếp theo, mỗi chu kỳ gồm các bước:

+ Cuối cùng: một chu kỳ 72 °C trong 10 phút.

- Thực hiện phản ứng PCR vòng2

Thành phần của phản ứng PCR vũng 2 gồm 2 àl dung dịch sản phẩm củaphảnứngPCRvòng1đượcsửdụnglàmkhuânchophảnứngPCRvòng

2 Phản ứng PCR vòng 2 sử dụng 2 mồi, gồm PCTM3 (forward: 5’- TCC TTG CAA GCT CTG CCT GTG GGG AAT CCT-3’) và mồi CT5 (mồi ngược: 5’-ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT-3’) cùng với các sinh phẩm khác như đã sử dụng trong phản ứng PCR vòng 1 Chu trình nhiệt của phản ứng PCR vòng 2 tương tự vòng1.

Các phản ứng PCR khuếch đại gen ompA được thực hiện với mẫu chứng dương là DNA của vi khuẩn C trachomatis, được cung cấp bởi các đồng nghiệp tại Viện Truyền nhiễm Quốc gia Nhật Bản (NIID).

- Kiểm tra sản phẩm PCR vòng2

Sau khi kết thúc phản ứng PCR vòng 2, sản phẩm PCR vòng 2 được điện di trên gel agarose 1,2 % Các bước tiến hành nhưsau:

Chuẩn bị gel agarose 1,2% trong dung dịch đệm TAE 1.0X, tính toán lượng gel cần thiết cho số giếng điện di Đun sôi gen và dung dịch đệm trong lò vi sóng, sau đó pha Redsafe 20.000X (Intron, Hàn Quốc) vào và trộn đều Khi gel nguội xuống khoảng 65 – 70 độ C, tiến hành đổ vào khay chứa đã chuẩn bị sẵn với miếng lược nhựa.

+ Để bản gel đông lại, tháo lược và đặt miếng gel vào bể điện di đã có TBE 1,0X hoặc TAE 1,0X.

+ Trộn 6 – 10 àl sản phẩm PCR hoặc cắt giới hạn với 1 àl loading dye và dùng pipete trộn đều sản phẩm PCR và loading dye.

+ Đưa sản phẩm PCR hoặc cắt giới hạn đã trộn loading dye vào bản gel mỗi giếng 6 – 10 àl Sử dụng cỏc đầu cụn khỏc nhau cho mỗi giếng.

Điện di được thực hiện trong 90 phút với điện áp 100 volt, thời gian và điện thế có thể điều chỉnh theo nhu cầu Sau khi hoàn tất quá trình điện di, cần lấy bản gel ra và ngâm trong dung dịch ethium bromide từ 10 đến 15 phút để xử lý mẫu.

+ Chụp ảnh kết quả trên thiết bị có ánh sáng UV.

+ Phân tích kết quả bằng cách so sánh sản phẩm PCR so với thang DNA chuẩn100bp.

Kết quả PCR vòng 2 được đánh giá dựa vào so sánh với thang ADN chuẩn 100bp.

+ Mẫu được xác định có kết quả tốt khi chỉ xuất hiện band khoảng

1100 bp như lý thuyết, không có band phụ đikèm.

+ Mẫu được xác định có kết quả chưa tốt khi không xuất hiện band như lý thuyết hoặc có nhiều band phụ kèm theo.

2.2.7.3 Kỹ thuật giải trình tựgen

GenompA được giải trình tự bằng 5 mồi như trong bảng dưới đây:

Bảng 2.4 Thông tin các mồi sử dụng trong nghiên cứu

Tên mồi Trình tự mồi (5’-3’) Mục đích Nguồn tham khảo

CT1 GCC GCT TTG AGT TCT GCT TCC TC PCR [24]

PCTM3 TCCTTGCAAGCTCTGCCTGTGGGGAATCCT PCR và giải trình tự đã được thực hiện, cùng với CT5 ATT TAC GTG AGC AGC TCT CTC AT PCR và giải trình tự Bên cạnh đó, CT3 ACT TTG TTT TCG ACC GTG TTT TG cũng đã được giải trình tự CT4 GAT TGA GCG TAT TGG AAA GAA GC và CT789 TGC CTC TAT TGA TTA CCA TG-3 là những đoạn quan trọng trong nghiên cứu này, được thiết kế và giải trình tự để phục vụ cho các mục tiêu nghiên cứu.

Sản phẩm PCR vòng 2 đã được gửi đến Apical Scientific Sdn Bhd tại Kembangan, Selangor, Malaysia để tiến hành tinh sạch và giải trình tự Quá trình này sử dụng 5 mồi PCTM5, CT5, CT3, CT4 và CT789 như được nêu trong Bảng 2.4.

Khi có kết quả, các trình tự thu được sẽ được ghép nối và chỉnh sửa bằng các công cụ tin sinh học như BioEdit và Mega 7.07 Trình tự cuối cùng được so sánh với ngân hàng gen để xác định kiểu gen của C trachomatis Một số trình tự đại diện đã được đăng ký mã số trên ngân hàng gen.

Các chỉ sốnghiên cứu

+ Tỷ lệ các kiểu gen củaC trachomatis

Tỷ lệ một kiểu genC. trachomatis

Số trường hợp của kiểu gen ó được xét nghiệm

= Tổng số mẫu ược xác ịnh kiểu gen được xét nghiệm được xét nghiệm

+ Tỷ lệ tương đồng nucleodite

Tỷ lệ tương đồng nucleodite

Tổng số nucleotide giống nhau

= Tổng số nucleotide so sánh với trình tự tham chiếu

Nhậpsốliệu,phântíchvàxửlýsốliệuthốngkê

- Các kết quả nghiên cứu được mã hóa, phân tích,xửlý bằng phần mềm IBM SPSS20.0.

- Các triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng và đặc điểm của đối tượng được tính toàn thành các tỷ lệ phần trăm và/hoặc giá trị trungbình.

Đối tượng nghiên cứu được phân chia thành các nhóm dựa trên độ tuổi, nghề nghiệp, tình trạng vô sinh (nguyên phát và thứ phát), tăng tiết dịch âm đạo, đau bụng dưới và các tiền sử bệnh lý Mục tiêu là mô tả tỷ lệ nhiễm và các yếu tố liên quan đến tình trạng này.

Các yếu tố liên quan được xác định dựa trên các giá trị như phân tích giá trị p, tỷ suất chênh OR và khoảng tin cậy 95% (CI) Nếu giá trị p nhỏ hơn 0,05, phép so sánh sẽ được coi là có ý nghĩa thống kê.

- Số liệu kết quả nghiên cứu được thể hiện dưới dạng bảng, biểu đồ hoặc hình ảnh minhhọa.

- Kích thước sản phẩm PCR khuếch đại gen ompA được xác định trên gel agarose bằng thang ADN100bp.

It seems that this video doesn't have a transcript, please try another video.

- Các trình tự tham chiếu được sử dụng trong nghiên cứugồm:

Bảng 2.5 Danh sách trình tự tham chiếu lấy từ ngân hàng gen

TT Kiểu gen Mã số trên ngân hàng gen Ký hiệu chủng Vật chủ/Quốc gia

1 B/Ba DQ064280 B/Tunis-864 Người/Mỹ

7 I/Ia DQ116397 CS-190/96 Người/Bồ Đào Nha

2.4 Sai số và loại trừ saisố

Bộ phiếu điều tra và bệnh án nghiên cứu được xây dựng và thực hiện trên một nhóm nhỏ, sau đó tiến hành chỉnh sửa những điểm không phù hợp nhằm tạo ra bộ công cụ chính thức.

- Sai số lựa chọn: Đối tượng tham gia nghiên cứu được lựa chọn bám sát các tiêu chuẩn lựa chọn đềra.

Để giảm thiểu sai số nhớ lại và sai số thu thập thông tin, bác sĩ và hộ lý cần được đào tạo bài bản về kỹ năng khai thác và ghi chép thông tin Việc thiết kế câu hỏi thu thập thông tin cũng phải ngắn gọn, dễ hiểu và rõ ràng, nhằm đảm bảo tính chính xác và cụ thể trong quá trình phỏng vấn và lập hồ sơ bệnh án nghiên cứu.

Để giảm thiểu sai sót trong việc xét nghiệm phát hiện nhiễm C trachomatis từ mẫu bệnh phẩm dịch phết cổ tử cung, cán bộ y tế cần được đào tạo bài bản về quy trình kỹ thuật lấy mẫu và các yêu cầu đối với mẫu Sau khi lấy mẫu, cần chuyển ngay đến khoa vi sinh để tiến hành xét nghiệm trên hệ thống tự động Cobas®4800.

- Sai số trong quá trình thực hiện kỹ thuật PCR: master mix của phản ứng PCR được chuẩn bị ở một khu vực riêng Mẫu DNA phân tích được tra ở

Khu vực riêng biệt được thiết lập cho việc chuẩn bị master mix nhằm đảm bảo độ chính xác trong phản ứng PCR Quy trình này được kiểm soát bằng chứng âm và chứng dương, trong đó DNA của C trachomatis được cung cấp bởi Viện các bệnh truyền nhiễm Quốc gia Nhật Bản.

Để hạn chế sai số do ghi chép và nhập liệu, trình tự mẫu giải trình tự được đánh số trùng với mã số của bệnh nhân nghiên cứu Yêu cầu hãng cung cấp kết quả giải trình tự của các mồi bằng mã số tương ứng Các trình tự thu được sẽ được ghép nối và so sánh với ngân hàng gen Kiểu gen thu được sẽ được nhập liệu theo mã số bệnh nhân trên phần mềm IBM SPSS cùng với các thông tin khác của bệnh nhân.

Đạo đứctrongnghiêncứu

Đề cương nghiên cứu đã được Hội đồng Đạo đức trong nghiên cứu y sinh học tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương phê duyệt theo Quyết định số 221/QĐ-PTSW ngày 05/03/2020 Đồng thời, Viện Sốt rét – Ký sinh trùng – Côn trùng Trung ương cũng đã thông qua theo Quyết định số 182/QĐ-VSR ngày 24/02/2020.

- Quá trình khám lâm sàng cho bệnh nhân được thực hiện trong 1 phòng kín với tối thiểu 2 nhân viên ytế.

- Tất cả những người tham gia được thông báo lợi ích, mục đích của nghiên cứu và các quy trình được sử dụng trong việc thu thập dữliệu.

Thông tin về tình trạng bệnh và dữ liệu cá nhân của đối tượng nghiên cứu sẽ được bảo mật tuyệt đối, chỉ được sử dụng cho mục đích nghiên cứu và không được áp dụng cho bất kỳ mục đích nào khác.

- Phụ nữ vô sinh tự nguyện và đồng ý tham gia vào nghiên cứu mới thu thập thông tin và lấy mẫu bệnh phẩm xác định nhiễmC.trachomatis.

Hình 2.2 Sơ đồ thiết kết nghiên cứu

Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU

Trong giai đoạn 2020-2021, nghiên cứu tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương đã chỉ ra những đặc điểm lâm sàng và cận lâm sàng liên quan đến tình trạng nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh Các yếu tố này bao gồm triệu chứng lâm sàng, kết quả xét nghiệm và các yếu tố nguy cơ khác ảnh hưởng đến sức khỏe sinh sản Nghiên cứu nhằm cung cấp cái nhìn sâu sắc hơn về mối liên hệ giữa nhiễm trùng và vô sinh, từ đó hỗ trợ trong việc chẩn đoán và điều trị hiệu quả cho bệnh nhân.

Bảng 3.1 Phân bố tuổi của của 761 phụ nữ vô sinh được sàng lọc nhiễm

Nhóm tuổi Số lượng Tỷ lệ %

> 25 540 70,96 Đa phần (70,96%) phụ nữ đến khám và điều trị vô sinh tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương có tuổi đời trên 25.

Hình 3.1.Tuổi trung bình của đối tượng nghiên cứu (n = 761)

Tuổi trung bình của phụ nữ vô sinh là 29,29 ± 5,95, nhỏ nhất là 19 tuổi và lớn nhất 52 tuổi.

Bảng 3.2 Đặc điểm nhân khẩu học của đối tượng nghiên cứu (n = 761) Đặc điểm nhân khẩu học Số lượng Tỷ lệ %

Công chức, viên chức 214 28,12 Kinh doanh, buôn bán 218 28,65

Có 46 (6,04%) nữ bệnh nhân đến Bệnh viện Phụ sản Trung ương điều trị vô sinh là người dân tộc thiểu số Số còn lại (93,96%) là người dân tộc Kinh (93,96%).

Các đối tượng là công chức, viên chức và hành nghề kinh doanh buôn bán chiếm tỷ lệ cao nhất (28,12% và 28,65%).

Hầu hết phụ nữ vô sinh đến Bệnh viện phụ sản Trung ương điều trị có trình độ học vấn từ THPT trở lên (89,62%).

Bảng 3.3 Đặc điểm tiền sử sản phụ khoa của đối tượng nghiên cứu (n = 761)

Tiền sử Số lượng Tỷ lệ %

Viêm âm đạo, cổ tử cung Đã mắc 283 37,19

Mổ lấy thai Đã từng 62 8,15

Phẫu thuật ở âm đạo, vùng bụng, chậu Đã từng 127 16,69

Nạo hút thai Đã từng 181 23,78

Chửa ngoài tử cung Đã từng 27 3,55

Số người QHTD Chỉ với 1 người 562 73,85

Bạn đời/bạn tình đã từng mắc STDs

-Có đến 62,81% phụ nữ vô sinh chưa từng bị viêm âm đạo, cổ tử cung

Số còn lại đã bị viêm âm đạo, cổ tử cung.

- Có 62 phụ nữ (8,15%) đã từng mổ đẻ và 27,33% phụ nữ vô sinh đã từng sảy thai Đây là những bệnh nhân thuộc nhóm vô sinh thứphát.

- 16,69% phụ nữ vô sinh có tiền sử phẫu thuật ở vùng âm đạo hoặc vùng bụng,chậu.

- 23,78% phụ nữ vô sinh trong nghiên cứu này đã từng nạo hútthai.

- 3,55% phụ nữ vô sinh có tiền sử chửa ngoài tửcung.

- 26,15% phụ nữ vô sinh QHTD với nhiều hơn 1người.

- 12 phụ nữ (1,58%) có thông tin có chồng/bạn tình đã từng mắc bệnh lây truyền qua đường tínhdục.

Theo hình 3.2, tuổi bắt đầu có kinh nguyệt trung bình của phụ nữ vô sinh là 14,31 ± 1,54, với độ tuổi sớm nhất là 10 và muộn nhất là 21 Tuổi quan hệ tình dục lần đầu trung bình là 21,74 ± 3,64, dao động từ 15 đến 37 tuổi Đối với tuổi kết hôn lần đầu, trung bình là 23,73 ± 4,06, với độ tuổi thấp nhất là 16 và cao nhất là 44.

Bảng3.4.Mộtsốđặcđiểmvềquanhệtìnhdụcvàtuổikếthôncủađốitượng nghiêncứu(nv1) Đặc điểm Số lượng Tỷ lệ %

Tuổi QHTD lần đầu Trước 18 tuổi 154 20,24

Thời điểm QHTD lần đầu

Số người QHTD Nhiều hơn 1 người 199 26,15

Tuổi kết hôn Trước 22 tuổi 233 30,62

Trong nghiên cứu này,có20,24%phụnữ vôsinhQHTDlần đầutrước18tuổi,58,21% QHTD trước hôn nhân, 26,15% QHTD với nhiều hơn

1 người và 30,62% kết hôn ở độ tuổi trước22.

Bảng 3.5 Loại vô sinh, thời gian vô sinh của đối tượng nghiên cứu (n = 761) Đặc điểm Số lượng Tỷ lệ %

Loại vô sinh Vô sinh nguyên phát 382 50,20

Trong một nghiên cứu với 761 nữ bệnh nhân vô sinh, 50,2% mắc vô sinh nguyên phát và 49,8% mắc vô sinh thứ phát Đáng chú ý, 62,81% trong số họ đã trải qua thời gian vô sinh dưới 2 năm.

C trachomatis đường sinh dục phụ nữ vô sinh đến khám, điều trị tại Bệnh viện Phụ sản Trungương

3.1.2.1 Tỷ lệ nhiễm C trachomatis đường sinh dục phụ nữ vôsinh

Hình 3.3.Tỷ lệ nhiễmC trachomatisở đối tượng nghiên cứu

Trong số 761 bệnh nhân được xét nghiệm, có 119 bệnh nhân dương tính vớiC trachomatis Tỷ lệ nhiễmC trachomatislà15,6%.

Bảng3.6.Phânbốtỷlệnhiễm C.trachomatistheo tuổivàdântộccủađốitượng nghiêncứu (n v1) Đặc điểm Số nhiễm Tổng số Tỷ lệ nhiễm % p Độ tuổi ≤ 25 tuổi 35 221 15,84

Tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh dưới 25 tuổi cao hơn so với phụ nữ trên 25 tuổi (15,84% so với 15,56%) nhưng khác biệt không có ý nghĩa thống kê.

Tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh người Kinh thấp hơn nhiều so với phụ nữ các dân tộc khác (34,78% so với 14,01%), sự khác biệtcóý nghĩa thống kê (p 0,05).

Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh có bạn đời hoặc bạn tình từng mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục cao hơn đáng kể so với những phụ nữ có bạn đời hoặc bạn tình chưa từng hoặc không rõ mắc bệnh này, với tỷ lệ lần lượt là 50% so với 15,09%.

Bảng3.9.Phânbốtỷlệnhiễmtheoloạivôsinhvàthờigianpháthiệnvô sinh của đốitượng nghiêncứu (n v1) Đặc điểm Số nhiễm

Bảng trên cho thấy, không có sự khác biệt về tỷ lệ nhiễmC.trachomatisgiữa các loại vô sinh và các thời điểm phát hiện vôsinh.

3.1.2.2 Đặc điểm lâm sàng nhiễm C trachomatis sinh dục phụ nữ vô sinhBảng3.10.Một số triệu chứng lâm sàng ở cơ quan sinh dục phụ nữvô sinh nhiễm C trachomatis (n = 119)

Triệu chứng cơ năng Số có triệu chứng Tỷ lệ %

Tăng tiết dịch âm đạo 80 67,22

Nóng rát âm đạo 18 15,13 Đái dắt, đái buốt, đái khó 18 15,13

Ra máu bất thường ở đường sinh dục dưới 7,5% trong số phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis Trong số này, 67,22% có tiết dịch âm đạo, và tỷ lệ gặp phải ngứa sinh dục, nóng rát âm đạo, đái khó và giảm khoái cảm khi quan hệ tình dục dao động từ 15,13% đến 21,01%.

Hình3.4.Thayđổi mùi khíhưởphụnữvôsinhnhiễmC.trachomatis(n)Trongs ố 8 1 p h ụ n ữ v ô s i n h c ó t h ô n g t i n vềmùik h í h ư , 3 3 n g ư ờ i (40,74%) xuất hiện mùi khó chịu, còn lại (59,26%) khí hư không mùi hoặc mùi không thay đổi.

Bảng 3.11 Đặc điểm màu sắc khí hư ở phụ nữ vô sinh nhiễm C.trachomatis (n = 81)

Màu sắc khí hư Số lượng Tỷ lệ %

Khí hư của phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis chủ yếu có màu trắng đục (76,54%), tiếp theo là màu vàng xanh (18,52%) và một tỷ lệ nhỏ không màu (4,94%) Đáng chú ý, không có trường hợp nào ghi nhận khí hư màu nâu hoặc màu bất thường khác ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis.

Hình 3.5.Tính chất khí hư ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis(n = 81)

Khí hư ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatisđa phần có tính chất là nhầy (41,98%) và đặc (40,74%).

9) Ở những phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis,75,63% có triệu chứng viêm âm đạo và 80,67% viêm cổ tử cung.

Bảng 3.12 Sự xuất hiện một số triệu chứng toàn thân ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis (n = 119)

Triệu chứng cơ năng Số có triệu chứng Tỷ lệ % Đau bụng dưới ngoài kỳ kinh 48 40,34

Viêm họng là triệu chứng phổ biến ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis, với tỷ lệ 31,93% Ngoài ra, đau vùng bụng dưới ngoài kỳ kinh cũng xuất hiện với tỷ lệ 40,34% Các triệu chứng khác như sốt, viêm khớp và đau mắt có tần suất từ 5,88% đến 7,56%.

Bảng3.13.Sự khác biệt về tần suất xuất hiện một số triệu chứng giữa phụ nữ vô sinh nhiễm và không nhiễm C trachomatis Triệu chứng lâm sàng

Nhiễm CT (n = 119) Không nhiễm CT

Tăng tiết dịch âm đạo 80 67,22 338 52,65 0,003

Ra máu bất thường ở đường sinh dục dưới 7 5,88 2 0,31 < 0,001

Nóng rát âm đạo 18 15,13 13 2,02 < 0,001 Đái dắt, đái buốt, đái khó 18 15,13 13 2,02 < 0,001

Viêm cổ tử cung 96 80,67 104 16,20 < 0,001 Đau bụng dưới ngoài kỳ kinh 48 40,34 64 9,97 < 0,001

Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ triệu chứng lâm sàng viêm họng ở phụ nữ vô sinh nhiễm vi khuẩn C trachomatis cao hơn so với phụ nữ vô sinh không nhiễm, với mức độ ý nghĩa thống kê rất cao (p < 0,001).

C trachomatis,sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0,05.

3.1.3 Đặc điểm cận lâm sàng của phụ nữ vô sinh nhiễm C.trachomatis

Bảng3.14.Tỷ lệnhiễmmộtsốbệnhlâytruyềnquađườngtình dục ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis (n = 119)

Căn nguyên vi sinh vật Số dương tính Tỷ lệ %

Trung roi âm đạo 0 0 Ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis, có 5 người đồng nhiễm vi rút viêm gan B Không bệnh nhân nào nhiễm lậu, giang mai, trùng roi.

Bảng3.15.Tỷ lệnhiễm1 số nhóm vikhuẩngâybệnhở âm đạo phụ nữ vô sinhnhiễm C trachomatis (n = 105)

Tác nhân Số dương tính Tỷ lệ %

Nấm menCandida 9 8,57 Đồng nhiễm trực khuẩn gram (+) và cầu khuẩn gram (+) 13 12,38 Đồngn h i ễ m t r ự c k h u ẩ n g r a m ( + ) v à t r ự c k h u ẩ n gram (-)

46 43,81 Đồng nhiễm trực khuẩn gram (+) và nấmCandida 7 6,67 Đồng nhiễm cầu khuẩn gram (+) và trực khuẩn gram (-) 17 16,19 Đồng nhiễm cầu khuẩn gram (+) và nấmCandida 2 1,90 Đồng nhiễm nấmCandidavà trực khuẩn gram (-) 3 2,86

Nhiễm ít nhất 1 loại vi sinh vật 105 100

100% phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis có đồng nhiễm với ít nhất một trong các tác nhân vi khuẩn gram dương, vi khuẩn gram âm hoặc nấm Candida Trong đó, tỷ lệ đồng nhiễm cao nhất là với vi khuẩn gram dương, chiếm 75,24%, tiếp theo là vi khuẩn gram âm.

(65,71%), cầu khuẩn gram (+) (22,86%) và nấmCandida(8,57%).

Bảng 3.16 Kết quả một số xét nghiệm khác về dịch âm đạo

Số dương tính/Có bất thường

Xét nghiệm tế bào cổ tử cung 31 2 6,45

Theo bảng thống kê, có 17 trong số 105 phụ nữ vô sinh (16,19%) dương tính với C trachomatis qua xét nghiệm tế bào clue và test sniff Trong số 31 bệnh nhân được làm xét nghiệm phiến đồ tế bào cổ tử cung, có 2 bệnh nhân (6,45%) có kết quả bất thường Đáng chú ý, 4 trong 5 bệnh nhân được chỉ định xét nghiệm HPV cho kết quả dương tính.

Hình 3.7.Tần suất tắc VTC ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatis(n = 33)

Trongsố33phụnữvô sinhnhiễmC.trachomatisđược chụptửcung vòi trứng,9phụnữpháthiện tắc1bên(27,27%),6 tắccả2bên(18,18%)và 18(54,55%) khôngtắc bênnào.

Hình 3.8.Kết quả siêu âm tử cung, phần phụ (n = 119)

Trong số 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis, có 45 người được phát hiện có hình ảnh buồng trứng đa nang, khối bất thường ở tử cung và hình ảnh ứ dịch vòi trứng trên siêu âm, chiếm tỷ lệ 37,82%.

3.1.4 Một số yếu tố liên quan đến nhiễm C trachomatis đường sinh dục phụ nữ vôsinh

* Liên quan giữa một số đặc điểm nhân khẩu học với tình trạng nhiễm C.trachomatis ở phụ nữ vôsinh

Bảng3.17.Liên quan giữa tuổi với tình trạng nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh (n = 761) Nhóm tuổi Dương tính Âm tính p OR (95% CI)

Tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh tuổi ≤ 25 tương đương (OR

= 1,02; 95%CI: 0,66-1,57) với ở phụ nữ vô sinh > 25 tuổi, sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p = 0,9227).

Bảng 3.18 Liên quan giữa nghề nghiệp và trình độ học vấn với tình trạng nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh

C trachomatis p OR (95% CI) Dương tính Âm tính

* Các tham số ở mỗi hàng được tính toán dựa trên so sánh giữa nhómthuộc hàng đó với các nhóm của các hàng còn lại.

Không có mối liên quan giữa nghề nghiệp và trình độ học vấn với tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh.

* Liên quan giữa một số yếu tố tiền sử với tình trạng nhiễm C.trachomatis ở phụ nữ vôsinh

Bảng 3.19 Liên quan giữa tiền sử viêm âm đạo với tình trạng nhiễm C.trachomatis ở phụ nữ vô sinh (n = 761) Yếu tố tiền sử

Tình trạng nhiễm C.tracho matis p OR (95% CI)

Tiền sử viêm âm đạo, cổ tử cung

Tiền sử nạo hút thai

Tiền sử chửa ngoài tử cung

Tiền sửphẫuthuậ t vùng bụngdưới, khungchậu

Kết quả phân tích đơn biến cho thấy:

Đặcđiểmlâmsàng,cận lâmsàngvàmộtsốyếutốliênquantớitìnhtrạngnhiễmC.trachomatisởphụnữvôsinhđ ếnkhám,điềutrịtạiBệnh việnPhụsảnTrungương(2020-2021)

KiểugencủaC.trachomatisphânlậpđượcởđốitượngnghiêncứu

Kết quả xác định các kiểu gen và phân tích đa hìnhgenompA

Chínmươi trongsố119mẫu có kếtquảPCR2chấtlượngtốtđượcgửi giảitrìnhtự(Hình3.9).Trongđó,81mẫuthuđượctrìnhtựtốt,rõràng,đủđiềukiệnđểphân tíchkiểugen.Khôngcómẫunàonhiễmphốihợp2kiểugen.

Hình 3.9 trình bày sản phẩm vòng 2 phản ứng PCR lồng khuếch đại gen ompA của Chlamydia trachomatis từ mẫu dịch phết cổ tử cung Các giếng 1-5 chứa sản phẩm khếch đại gen ompA từ các mẫu dịch phết cổ tử cung nhiễm CT, với mã số trên genbank lần lượt là MZ407931, MZ407932, MZ407933, MZ407934 và MZ407935 Giếng 6 là chứng âm, giếng 7 chứa DNA chuẩn từ 100 – 1000 bp, và giếng 8 là chứng dương.

Hình 3.10.Sản phẩm vòng 2 phản ứng PCR lồng khuếch đại genompA của

C trachomatistừ mẫu dịch phết cổ tử cung

Trong Hình 3.10, từ giếng 1 đến đến giếng 3 là các mẫu lâm sàng, giếng 4 là thang DNA chuẩn loại 100 – 1500 bp, giếng 5 là chứng dương và giếng 6 là chứngâm.

Các phân tích cho thấy có 9 kiểu gen khác nhau được xác định, bao gồm B/Ba, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J và K Tỷ lệ của các kiểu gen này được minh họa trong Hình 3.11.

Hình 3.11.Tần suất các kiểu gen củaC trachomatis(n = 81)

Theo phân tích gen trong Hình 3.11, có 9 kiểu gen khác nhau của C trachomatis được xác định ở nữ bệnh nhân vô sinh Kiểu gen E chiếm tỷ lệ cao nhất với 25,93% (n = 21), tiếp theo là kiểu gen D/Da với 22,23% (n = 18), và các kiểu gen F (13,58%; n = 11), G/Ga (12,35%; n = 10), J (12,35%; n = 10), H (6,17%; n = 5), K (3,70%; n = 3).

= 2; 2,47%) và thấp nhất là I/Ia (n = 1; 1,23%).

Đã có 22/81 trình tự gen được đăng ký và cấp mã số trong ngân hàng gen, với mã số từ MZ407931 đến MZ407947 và từ OP899639 đến OP899643 (Bảng 3.37) Kết quả so sánh cho thấy tỷ lệ tương đồng của các trình tự nucleotide của gen này dao động từ 99,10 đến 100% Các kiểu gen E, F và G/Ga không có sự sai khác, trong khi các kiểu gen D

H, I/Ia, J và K có từ 1 đến 10 nucleotide saikhác.

Bảng 3.31 Tỷ lệ tương đồng nucleotide gen omp A ở 9 kiểu gen của 22 chủng C trachomatis phân lập ở đối tượng nghiên cứu

Ký hiệu mẫu Chiều dài

Tỷ lệ tương đồng nucleotide (%)

B-1537 1113 OP899639 B/Ba DQ064280 99,10 B-485955 1113 OP899640 B/Ba DQ064280 99,10 Ia-485377 1122 OP899641 I/Ia DQ116397 99,64 G-417806 1116 OP899642 G/Ga CP001888 100

Kết quả phân tích các kiểu gen được thể hiện trong Hình 3.11 dưới đây.

Cây phát sinh loài cho thấy mối quan hệ giữa các chủng C trachomatis được phân lập tại Việt Nam và trên thế giới Phân tích này dựa trên trình tự genompA, được xây dựng bằng phần mềm MEGA7.0.9, sử dụng phương pháp kết nối liền kề NJ với hệ số tin cậy bootstrap là 1.000 lần lặp lại.

Kết quả so sánh cho thấy 81 trình tự gen ompA của các mẫu CT có tỷ lệ tương đồng nucleotide cao, dao động từ 99,10% đến 100% so với các kiểu gen tương ứng trên ngân hàng gen Trong số này, 22 trình tự thuộc 9 kiểu gen của gen ompA đã được đăng ký và cấp mã số trên ngân hàng gen, với mã số từ MZ407931 đến MZ407947 và từ OP899639 đến OP899643 Phân tích quan hệ phát sinh loài cho thấy các kiểu gen của các chủng CT trong nghiên cứu có mối quan hệ gần gũi với các kiểu gen tương ứng trên ngân hàng gen và quan hệ xa với loài Chlamydiacaviae.

Các trình tự genompA của các kiểu gen E, F và G/Ga thu được tương đồng 100% so với các trình tự tham chiếu Các kiểu gen B/Ba, D/Da, H, I/Ia,

J và K có từ 1 đến 10 nucleotide khác biệt so với các trình tự tham chiếu, với 19 vị trí thay đổi được phát hiện Trong số đó, có 7 thay đổi nucleotide dẫn đến sự thay thế axit amin.

Hình 3.13.Minh họa các vị trí nucleotide có sai khác tren genompA của kiểu gen B/Ba so với trình tự tham chiếu trên ngân hàng gen.

Theo Hình 3.13, hai trình tự gen B/Ba trong nghiên cứu là OP899639 và OP899640 có 10 vị trí khác biệt nucleotide so với trình tự tham chiếu DQ064280 tại các vị trí 75, 100, 130, 132 và 141.

Bảng 3.32 Thay đổi nucleotide ở 22 trình tự gen omp A của 9 kiểu gen của

Ký hiệu mẫu/Mã số trên ngân hàng gen Kiểu gen Trình tự tham chiếu Vị trí thay đổi nucleotide Thay đổi axít amin

M →V; Đồng nghĩa Đồng nghĩa Đồng nghĩa Đồng nghĩa Đồng nghĩa Đồng nghĩa

1098: A →T G → S; Đồng nghĩa D-Hanoi.A2/MZ407932 D/Da X62919 1098: A → T Đồng nghĩa D-Hanoi.A6/MZ407935 D/Da X62919 1098: A → T Đồng nghĩa D-Hanoi.A8/MZ407937 D/Da X62919 922: A →G;

1098: A →T T → A; Đồng nghĩa D-Hanoi.A12/MZ407938 D/Da X62919 940: G →A;

1098: A →T G → S; Đồng nghĩa D-Hanoi.A14/MZ407940 D/Da X62919 940: G →A;

1098: A →T G → S; Đồng nghĩa D-Hanoi.T4/MZ407945 D/Da X62919 431: A →G;

Dưới đây là các mã số liên quan đến các sản phẩm tại Hà Nội: E-Hanoi.A5/MZ407934, E-Hanoi.A7/MZ407936, E-Hanoi.A13/MZ407939, E-Hanoi.A17/MZ407942, E-Hanoi.A19/MZ407943, và F-Hanoi.A3/MZ407933 Tất cả các sản phẩm này đều có mã E X52557 hoặc F X52080 và hiện tại không có thay đổi nào.

Ký hiệu mẫu/Mã số trên ngân hàng gen

Vị trí thay đổi nucleotide

G-417806/OP899642 G/Ga CP001888 Không thay đổi Không G-803679/OP899643 G/Ga CP001888 Không thay đổi Không H-Hanoi.T7/MZ407947 H X16007 1110: A → T Đồng nghĩa Ia-485377/OP899641 I/Ia DQ116397

I → V ĐồngnghĩaĐ ồngnghĩa Đồngnghĩa J-Hanoi.A15/MZ407941 J JN795432 315: C →T;

1110: A →T Đồng nghĩa Đồng nghĩa J-Hanoi.T5/MZ407946 J JN795432 315: C →T;

1110: A →T Đồng nghĩa Đồng nghĩa K-Hanoi.T3/MZ407944 K JN795430 1110: A → T Đồng nghĩa

3.3.2 Mối liên quan giữa các kiểu gen và một số đặc điểm của đối tượng nghiên cứu

Bảng 3.33 Phân bố các kiểu gen của C trachomatis theo nhóm tuổi (n = 81)

Tổng số 25 (100) 56 (100) Ở nhóm tuổi ≤ 25, các kiểu gen E (28%), D/Da (20%), F (20%) và J (20%) chiếm ưu thế Ở nhóm tuổi > 25, các kiểu gen E (25%), D (23,21%), G/

Ga (16,08%) chiếm ưu thế Tỷ lệ các kiểu gen giữa 2 nhóm tuổi khác nhau không có ý nghĩa thống kê.

Nghiên cứu cho thấy, ở phụ nữ vô sinh có tiền sử viêm âm đạo, các kiểu gen D/D a, E và G/Ga chiếm ưu thế, trong khi ở phụ nữ vô sinh chưa từng bị viêm âm đạo, các kiểu gen E, F và J lại nổi bật hơn Tuy nhiên, sự khác biệt về kiểu gen giữa hai nhóm này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).

Trong nghiên cứu về các kiểu gen của C trachomatis theo tiền sử sảy thai, ở phụ nữ vô sinh có tiền sử sảy thai, kiểu gen chiếm ưu thế là D/Da (23,08%), E (23,08%) và H (15,38%) Ngược lại, ở phụ nữ không có tiền sử sảy thai, các kiểu gen chủ yếu là E (27,27%), D/Da (21,82%) và F (16,36%) Đặc biệt, tỷ lệ kiểu gen H ở nhóm phụ nữ có tiền sử sảy thai cao hơn và có ý nghĩa thống kê so với nhóm không có tiền sử sảy thai (p = 0,0186) Tuy nhiên, sự khác biệt về các kiểu gen khác giữa hai nhóm không có ý nghĩa thống kê.

Bảng 3.34 Phân bố các kiểu gen C trachomatis theo tuổi bắt đầu quan hệ tình dục (n = 81)

Kiểu gen Tuổi bắt đầu QHTD [n (%)]

Trong một nghiên cứu về phụ nữ vô sinh, tổng số 29 phụ nữ dưới 18 tuổi cho thấy các kiểu gen E (31,03%), D/Da (24,14%), F (13,79%) và J (13,79%) chiếm ưu thế Tuy nhiên, sự khác biệt về kiểu gen giữa nhóm phụ nữ vô sinh dưới 18 tuổi và nhóm sau 18 tuổi không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05).

Trong nghiên cứu về phân bố kiểu gen của C trachomatis theo thời điểm quan hệ tình dục, cả nhóm đối tượng trước và sau kết hôn đều cho thấy kiểu gen ưu thế là E và D/Da Sự khác biệt giữa hai nhóm này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).

Bảng 3.35 Phân bố các kiểu gen C trachomatis theo loại vô sinh (n = 81)

Kiểu gen Loại vô sinh [n (%)]

Vô sinh nguyên phát Vô sinh thứ phát p

Tổng số 37 (100) 44 (100) Ở phụ nữ vô sinh nguyên phát, 3 kiểu gen chiếm ưu thế là E (27,03%),

F (24,32%) và D/Da (18,92%) Ở phụ nữ vô sinh thứ phát, các kiểu gen chiếm ưu thế là D/Da (25,0%), E (25,0%), G (13,64%) và J (13,64%) Tỷ lệ kiểu gen

F ở nhóm vô sinh nguyên phát cao hơn có ý nghĩa sovớiở nhóm vô sinh thứ phát (p = 0,0101) Các kiểu gen khác không có sự khác biệt giữa 2nhóm.

Bảng 3.36 Phân bố các kiểu gen C trachomatis theo sự xuất hiện triệu chứng viêm âm đạo, cổ tử cung (n = 81)

Kiểu gen Viêm âm đạo, cổ tử cung [n (%)]

Tổng số 58 (100) 23 (100) Ở nhóm phụ nữ vô sinh có viêm âm đạo, cổ tử cung, các kiểu gen của

C trachomatischiếm ưu thế là E (25,86%), D/Da (18,97%), F (13,79%) và G/

Trong nhóm phụ nữ vô sinh không có viêm âm đạo và cổ tử cung, bốn kiểu gen chiếm ưu thế bao gồm D/Da (30,43%), E (26,09%), F (13,04%) và J (13,04%) Sự khác biệt giữa các nhóm này không đạt ý nghĩa thống kê (p > 0,05).

Hình 3.17.Phân bố kiểu genC trachomatistheo triệu chứng đau bụng dưới

Các kiểu gen D/Da (26,47%), E (23,53%) và J (17,65%) chiếm ưu thế ở phụ nữ vô sinh có triệu chứng đau bụng dưới do nhiễm C trachomatis Ngược lại, ở phụ nữ không có triệu chứng đau bụng dưới, các kiểu gen E (27,66%), D (19,15%) và G/Ga (14,89%) lại chiếm ưu thế Tuy nhiên, sự khác biệt giữa hai nhóm này không có ý nghĩa thống kê.

Đặcđiểmlâmsàng,cận lâmsàngvàmộtsốyếutốliênquantớitìnhtrạngnhiễmC.trachomatisởphụnữvôsinh 97 1 Tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữvô sinh

Đặc điểm lâm sàng nhiễmC.trachomatis

Theo y văn,C trachomatislà vi khuẩn có kích thước nhỏ, ký sinh nội bào bắt buộc, thời gian ủ bệnh từ 3 đến 30 ngày (trung bình 10 đến 21 ngày)

Nhiễm C trachomatis thường diễn biến âm thầm, với khoảng 70% trường hợp không có triệu chứng rõ ràng, dẫn đến việc nhiều người không được phát hiện và điều trị, làm tăng nguy cơ lây nhiễm Đối với những người có triệu chứng, viêm cổ tử cung là phổ biến, gây ra tăng tiết dịch âm đạo, đau bụng dưới, chảy máu và khó tiểu Một số phụ nữ có thể gặp chảy máu sau giao hợp hoặc ra máu giữa kỳ kinh Khi khám lâm sàng, có thể thấy chảy mủ từ ống cổ tử cung và cổ tử cung dễ bị tổn thương C trachomatis có thể lây lan lên phía trên đường sinh dục, gây viêm tiểu khung với triệu chứng như đau bụng, sốt, đau thắt lưng và buồn nôn Ngoài ra, vi khuẩn này còn có thể gây viêm vòi tử cung, tắc vòi trứng dẫn đến vô sinh và chửa ngoài tử cung.

Theo CDC Hoa Kỳ, tăng tiết dịch âm đạo được coi là một triệu chứng quan trọng trong tiêu chuẩn lâm sàng chẩn đoán viêm sinh dục nữ, tuy nhiên, không có triệu chứng lâm sàng nào được xác định là đặc hiệu cho bệnh này.

Trong nghiên cứu này, trong số 761 phụ nữ vô sinh được sàng lọc, có

Trong một nghiên cứu về 119 đối tượng nhiễm C trachomatis, kết quả cho thấy 54,93% trường hợp có triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo Đặc biệt, tỷ lệ này ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis lên tới 67,22%, cao hơn đáng kể so với 52,65% ở phụ nữ vô sinh không nhiễm Sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê với p < 0,05.

Tỷ lệ xuất hiện triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo ở phụ nữ nhiễm C trachomatis thường dao động từ 30-60% Trong nghiên cứu này, tỷ lệ này ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis khá cao, mặc dù vẫn thấp hơn so với nghiên cứu của Trần Đình Vinh và cộng sự (2020).

Nghiên cứu tại Bệnh viện Phụ sản - Nhi Đà Nẵng cho thấy 67,22% phụ nữ đến khám có triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo, thấp hơn so với 88,5% ở các nghiên cứu khác Sự khác biệt này có thể do đặc điểm đối tượng và nhiều yếu tố chưa được phân tích Tương tự, nghiên cứu của Rawre và cộng sự (2016) tại Ấn Độ chỉ ra rằng 65,3% phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis có triệu chứng này, trong khi tỷ lệ ở phụ nữ vô sinh không nhiễm chỉ là 11,4%, cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê.

Nghiên cứu của Nguyễn Hải Đăng và cộng sự (2020) tại Huế cho thấy tỷ lệ phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis có triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo là 32,26%, cao hơn đáng kể so với 16,86% ở nhóm không nhiễm, với sự khác biệt có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Ngoài ra, nhiều nghiên cứu khác cũng xác nhận rằng tăng tiết dịch âm đạo là triệu chứng phổ biến nhất ở phụ nữ nhiễm C trachomatis sinh dục.

Nghiên cứu của Afrasiabi và CS (2015) cho thấy 66,6% phụ nữ trẻ tuổi nhiễm C trachomatis gặp triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo Tương tự, nghiên cứu của Harahap và CS (2014) tại Medan, Indonesia cũng ghi nhận tỷ lệ này là 60,7%.

Khí hư bình thường có màu giống lòng trắng trứng hoặc hơi ngả vàng, không mùi hoặc có mùi tanh nhẹ Tình trạng tăng tiết khí hư và sự thay đổi về màu sắc, mùi, tính chất thường là dấu hiệu cảnh báo viêm nhiễm đường sinh dục Nghiên cứu cho thấy 40,74% phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis có sự thay đổi mùi khí hư, tuy nhiên, đây không phải là triệu chứng đặc hiệu cho bất kỳ vi sinh vật nào Tất cả phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis trong nghiên cứu đều đồng nhiễm với ít nhất một vi sinh vật gây viêm âm đạo khác, do đó, sự thay đổi mùi khí hư chỉ gợi ý về tình trạng viêm âm đạo mà không phải là dấu hiệu đặc hiệu cho nhiễm C trachomatis.

Viêm âm đạo thường biểu hiện bằng triệu chứng tăng tiết dịch, thay đổi mùi và tính chất khí hư, cùng với cảm giác kích thích, ngứa và nóng rát Nghiên cứu cho thấy 95,06% phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis có sự thay đổi màu sắc khí hư, chủ yếu là màu trắng đục (76,54%) Hơn 80% trường hợp ghi nhận sự thay đổi về tính chất khí hư, bao gồm đặc, nhầy và có bọt Những biến đổi này liên quan chặt chẽ đến tần suất viêm âm đạo và viêm cổ tử cung ở phụ nữ nhiễm C trachomatis.

Thay đổi màu sắc và tính chất khí hư do nhiều nguyên nhân gây ra

Khí hư màu trắng đục thường liên quan đến viêm âm đạo do nấm Candida, cũng như các tình trạng như viêm âm đạo do trùng roi, viêm lộ tuyến cổ tử cung, u xơ cổ tử cung và polip cổ tử cung Trong trường hợp viêm âm đạo do nấm, dịch tiết âm đạo thường nhiều, đặc như bột và có màu trắng đục Nghiên cứu cho thấy trong số 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis, có 9 bệnh nhân (8,57%) nhiễm nấm Candida, và 80,67% phụ nữ có viêm cổ tử cung Thông tin này giải thích lý do tỷ lệ khí hư màu trắng đục cao ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis Màu vàng xanh của khí hư chủ yếu do vi khuẩn gây ra, đặc biệt là ở những người nhiễm trùng roi âm đạo kèm theo các nguyên nhân vi sinh vật khác.

Trong nghiên cứu này, tỷ lệ phụ nữ vô sinh có đồng nhiễm với các nhóm vi khuẩn gram dương và gram âm, bao gồm cả trực khuẩn và cầu khuẩn, là khá cao Dữ liệu cho thấy có 18,52% phụ nữ xuất hiện khí hư màu vàng xanh.

Trong một nghiên cứu về 119 nữ bệnh nhân vô sinh nhiễm C trachomatis, tỷ lệ ngứa sinh dục chỉ gặp ở 21,01% bệnh nhân, thấp hơn nhiều so với 66,1% trong nghiên cứu của Trần Đình Vinh và CS (2020) Sự khác biệt này có thể do đối tượng nghiên cứu của hai nghiên cứu là khác nhau; nghiên cứu hiện tại tập trung vào phụ nữ vô sinh, bao gồm cả bệnh nhân có và không có triệu chứng lâm sàng, trong khi nghiên cứu của Trần Đình Vinh chủ yếu khảo sát bệnh nhân đến khám phụ khoa, phần lớn đều có triệu chứng rõ rệt.

Ngứa là triệu chứng phổ biến trong viêm sinh dục ở nữ giới, nhưng không phải là dấu hiệu đặc trưng cho nguyên nhân vi sinh vật gây bệnh.

Trong nghiên cứu này, ngoài việc sàng lọc C trachomatis, các tác nhân gây viêm sinh dục khác cũng được xem xét Kết quả cho thấy 100% phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis đồng nhiễm với ít nhất một loại vi sinh vật khác, nhưng tỷ lệ xuất hiện triệu chứng ngứa chỉ là 21,01%, cao hơn so với 10,28% ở phụ nữ vô sinh không nhiễm C trachomatis (p < 0,05) Điều này củng cố luận điểm rằng ngứa không phải là triệu chứng đặc hiệu của căn nguyên gây viêm sinh dục Nghiên cứu của Herrmann và CS (1996) tại Nicaragua cũng cho thấy 63% phụ nữ nhiễm C trachomatis có tăng tiết dịch âm đạo, 55% đau bụng, và 38% có triệu chứng ngứa âm hộ, nhưng không có triệu chứng nào trong số này có giá trị dự đoán nhiễm Chlamydia.

Chảy máu bất thường ở đường sinh dục thường xuất phát từ cổ tử cung do viêm nội mạc cổ tử cung, với khoảng 30% phụ nữ nhiễm C trachomatis gặp phải tình trạng này Khám lâm sàng cho thấy 20% phụ nữ nhiễm C trachomatis có cổ tử cung phì đại, dễ chảy máu khi chạm vào Nghiên cứu của Trần Đình Vinh và cộng sự tại Bệnh viện Phụ Sản – Nhi Đà Nẵng năm 2020 chỉ ra rằng tỷ lệ phụ nữ có triệu chứng ra máu bất thường là 41,7% Trong nghiên cứu của chúng tôi, có 9 bệnh nhân vô sinh gặp tình trạng ra máu bất thường, trong đó 7 bệnh nhân có nhiễm C trachomatis.

Đặc điểm cận lâm sàng nhiễmC.trachomatis

Nghiên cứu này phân tích kết quả xét nghiệm của 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis và ghi nhận có 5 bệnh nhân nhiễm vi rút viêm gan B, không có trường hợp nào nhiễm lậu, giang mai hay trùng roi âm đạo Mặc dù đồng nhiễm lậu cầu khuẩn và C trachomatis rất phổ biến, với tỷ lệ khoảng 10-40% ở những người nhiễm lậu cầu khuẩn, nghiên cứu này không phát hiện trường hợp nào đồng nhiễm Nguyên nhân có thể là do nghiên cứu tập trung vào tác nhân C trachomatis, trong khi tỷ lệ đồng nhiễm thường được thống kê trên đối tượng nhiễm lậu cầu khuẩn.

C trachomatischo thấy, nhiễm trực khuẩn gram (+) gặp ở 75,24%, trực khuẩn gram (-) ở 65,71%, cầu khuẩn gram (+) ở 22,86% và nấmCandida8,57% Tỷ lệ đồng nhiễmC trachomatisvới ít nhất một trong các tác nhân trên là 100%. Phân tích trước đó đã chỉ ra rằng, mặc dù tỷ lệ nhiễm các tác nhân nhiễm trực khuẩn gram (+), trực khuẩn gram (-), cầu khuẩn gram (+) và nấmCandidaở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatiskhá cao nhưng tình trạng này không liên quan với tình trạng tăng tiết dịch âm đạo, ngứa sinh dục hay thay đổi mùi khí hư Điều này cho thấy, các biểu hiện này không đặchiệu cho tác nhân gây nhiễm khuẩn sinh dục nào Nhiều nghiên cứu cũng có chung nhận định này [135].

Theo nghiên cứu của chúng tôi, hiện tại có rất ít tài liệu trong và ngoài nước phân tích tình trạng đồng nhiễm vi sinh vật ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis Do đó, chúng tôi chưa thể đưa ra những đánh giá và so sánh kết quả của nghiên cứu này với các nghiên cứu trước đó Tuy nhiên, trong nhóm đối tượng có hội chứng tiết dịch âm đạo, nghiên cứu đã chỉ ra một số thông tin quan trọng.

Nghiên cứu của Hồ Thị Mỹ Châu và CS (2018) tại Bệnh viện Da liễu Tp Hồ Chí Minh trong giai đoạn 2016-2017 cho thấy, trong số 100 bệnh nhân được xét nghiệm, 78% xác định được nguyên nhân gây bệnh Kết quả cho thấy 10% bệnh nhân đồng nhiễm lậu cầu khuẩn và C trachomatis, 2% đồng nhiễm lậu cầu khuẩn và U urealyticum, 5% đồng nhiễm C trachomatis và U urealyticum, và 3% đồng nhiễm cả ba tác nhân lậu, C trachomatis và U urealyticum.

Y Dược Thái Nguyên được công bố năm 2022 cho thấy, 62,2% nhiễm trực khuẩn gram (-), 29,3% nhiễm cầu khuẩn gram (-), 23,3% nhiễm nấmCandida,16% nhiễmGardnerella vaginalis,8% nhiễm trùng roi và 3,3% nhiễmC trachomatis[55].

Trong nghiên cứu trên 31 bệnh nhân thực hiện xét nghiệm PAP smear, có 2 trường hợp xuất hiện tế bào cổ tử cung bất thường, cụ thể là loạn sản mức độ thấp và tổn thương biểu mô vảy không điển hình Một trong hai bệnh nhân này đồng nhiễm vi rút HPV và C trachomatis với kiểu gen B/Ba và D/Da Nhiều tài liệu cho thấy nhiễm C trachomatis có thể làm tăng nguy cơ ung thư cổ tử cung và nhiễm HIV Tuy nhiên, do số lượng bệnh nhân còn hạn chế và thiếu thông tin giải phẫu bệnh, nghiên cứu chưa thể cung cấp bằng chứng rõ ràng về mối liên quan giữa nhiễm C trachomatis và các bất thường tế bào cổ tử cung.

Trong nghiên cứu này, 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis đã được siêu âm để khảo sát bất thường ở phần phụ tử cung Kết quả cho thấy 37,82% có hình ảnh bất thường, chủ yếu ở tử cung, vòi trứng và buồng trứng Siêu âm cung cấp thông tin gián tiếp về các bất thường này và là chỉ dẫn quan trọng giúp xác định nguyên nhân gây vô sinh Ngoài ra, siêu âm cũng hỗ trợ trong các can thiệp điều trị vô sinh như theo dõi trứng, thu thập trứng và chuyển phôi.

Trong nghiên cứu về vô sinh, 31 bệnh nhân nhiễm C trachomatis đã được thực hiện chụp VTC cùng với siêu âm phần phụ tử cung Kết quả cho thấy có 15 bệnh nhân bị tắc, chiếm tỷ lệ 45,45%, trong đó 9 bệnh nhân tắc một bên (27,27%) và 6 bệnh nhân tắc cả hai bên (18,18%) Mặc dù số lượng bệnh nhân được chụp VTC không nhiều, nhưng tỷ lệ tắc khá cao, điều này phù hợp với các phát hiện từ siêu âm.

Nghiên cứu của Hô Vân Phúc và CS (2021) trên 122 trường hợp phụ nữ hiếm muộn nhiễm C trachomatis tại Bệnh viện Phụ sản Mê Kông cho thấy tỷ lệ tắc VTC cao hơn đáng kể so với nghiên cứu của chúng tôi, với 77,9% so với 45,45% Điều này chỉ ra rằng tắc nghẽn VTC ở phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis là một vấn đề nghiêm trọng cần được chú ý.

C trachomatischủ yếu xuất hiện ở đoạn xa và quá 1 nữa tắc nghẽn VTC là do ứ dịch [140] Nghiên cứu của chúng tôi chưa có điều kiện để phân tích các đặc điểm này.C trachomatisđã được xác định có thể gây ra viêm vòi trứng, tắc VTC dẫn đến vô sinh, chửa ngoài tử cung [1], [2], [17] Tắc VTC xảy ra ở khoảng 10-15% phụ nữ nhiễmC trachomatis[18] Từ kết quả nghiên cứu của chúng tôi và của Hô Vân Phúc và CS (2021) có thể thấy, tắc VTC ở phụ nữ vô sinh nhiễmC trachomatisgặp nhiều hơn ở phụ nữ nhiễmC.trachomatisnóichung.

4.2.4 Một số yếu tố liên quan nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vôsinh Ở nghiên cứu này, tuổi của phụ nữ vô sinh đến khám và điều trị tạiBệnh viện Phụ sản Trung ương dao động từ 19 đến 52 tuổi Kết quả phân tích cho thấy, tỷ lệ nhiễmC trachomatissinh dục phụ nữ vô sinh dưới 25 tuổi cao gấp 1,07 lần (95%CI: 0,66 – 1,57) nhóm trên 25 tuổi (15,84% so với 15,56%) nhưng sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê (p = 0,9227) Ở nghiên cứu này, tỷ lệ nhiễmC trachomatissinh dục cao hơn ở nhóm ≤ 25 tuổi so với nhóm trên 25 tuổi Hầu hết các nghiên cứu đã công bố trước đều đồng thuận khi cho rằng, tỷ lệ nhiễmC trachomatisthường cao hơn ở nhóm phụ nữ trẻ tuổi [84], [121] Ví dụ: nghiên cứu của Rawre và CS (2016) trên phụ nữ vô sinh ở Ấn Độ cho thấy, tỷ lệ nhiễmC trachomatisở phụ nữ vô sinh dưới 30 tuổi cao hơn nhóm trên 30 tuổi nhưng sự khác biết không có ý nghĩa thống kê (OR = 1,25; 95%CI: 0,73–2,15) [32] Một nghiên cứu khác của Li và CS

Nghiên cứu thực hiện tại Quảng Đông, Trung Quốc vào năm 2021 cho thấy tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ vô sinh dưới 25 tuổi cao hơn, tuy nhiên sự khác biệt này không đạt ý nghĩa thống kê.

Phụ nữ trẻ tuổi có nguy cơ nhiễm Chlamydia sinh dục cao hơn so với phụ nữ lớn tuổi do nhiều lý do, bao gồm sự phát triển thể chất, đặc điểm biểu mô cổ tử cung, và sự thay đổi trong hệ vi khuẩn âm đạo Phụ nữ lớn tuổi có thể đã phát triển miễn dịch sau những lần nhiễm trước đó Hành vi tình dục cũng là yếu tố quan trọng, khi phụ nữ trẻ tuổi có hoạt động tình dục mạnh mẽ và thường sử dụng bao cao su không đúng cách hoặc thiếu kiến thức về tình dục an toàn Các nghiên cứu khuyến cáo rằng phụ nữ trẻ tuổi cần được ưu tiên trong các chương trình giáo dục sức khỏe và sàng lọc phát hiện nhiễm Chlamydia Cơ quan Y tế Dự phòng Hoa Kỳ khuyến nghị sàng lọc hàng năm cho tất cả phụ nữ dưới 25 tuổi và những phụ nữ lớn tuổi có yếu tố nguy cơ Tuy nhiên, tại Việt Nam, việc sàng lọc nhiễm Chlamydia chưa được thực hiện một cách thường quy, chủ yếu chỉ phát hiện khi phụ nữ đến khám tại bệnh viện lớn Bộ Y tế đã ban hành hướng dẫn sàng lọc và xử trí nhiễm Chlamydia trachomatis cho phụ nữ mang thai vào năm 2019 và hướng dẫn chẩn đoán và điều trị bệnh vào năm 2021.

[2] Theo các hướng dẫn này, chỉ những phụ nữ mang thai 3 tháng đầu có tuổi

Phụ nữ dưới 25 tuổi hoặc từ 25 tuổi trở lên với nguy cơ cao được khuyến cáo sàng lọc nhiễm C trachomatis, trong khi các nhóm đối tượng khác không được khuyến cáo sàng lọc thường quy So với các quy định tại một số quốc gia tiên tiến, phạm vi sàng lọc tại Việt Nam vẫn còn hạn chế, chủ yếu tập trung vào phụ nữ mang thai.

Nghiên cứu cho thấy tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ dân tộc thiểu số cao hơn đáng kể so với phụ nữ dân tộc Kinh, với tỷ lệ lần lượt là 34,78% và 14,01%, và sự khác biệt này có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Hành vi tình dục có thể khác nhau giữa các chủng tộc, và theo một số tài liệu, yếu tố chủng tộc cùng tình trạng kinh tế xã hội thường không ảnh hưởng đến nhiễm Chlamydia sinh dục Một số nghiên cứu đa biến chỉ ra rằng nguy cơ nhiễm Chlamydia ở người không phải da trắng cao hơn so với người da trắng.

Các yếu tố như tình trạng việc làm, mức thu nhập và trình độ học vấn của cha mẹ thường không liên quan đến nhiễm Chlamydia ở cả nam và nữ Tại Việt Nam, rất ít nghiên cứu tập trung vào nhiễm C trachomatis ở các nhóm đối tượng này, đặc biệt là phụ nữ người dân tộc thiểu số Kích thước mẫu của nhóm nghiên cứu vẫn chưa đủ để đưa ra kết luận rõ ràng Kết quả này đặt ra câu hỏi về tỷ lệ nhiễm C trachomatis ở phụ nữ dân tộc thiểu số so với phụ nữ người Kinh, tương tự như sự khác biệt giữa người da màu và người da trắng Cần thiết phải thực hiện thêm các nghiên cứu để làm sáng tỏ vấn đề này.

Các kiểu gen và đa hình gen ompA củaC.trachomatis

Hiện nay, các kỹ thuật PCR-RFLP và giải trình tự gen dựa vào gen ompA – gen mã hóa cho khoảng 60% protein màng ngoài tế bào – được xác định là có độ nhạy và độ đặc hiệu cao hơn các phương pháp khác trong việc xác định kiểu gen của C trachomatis Những kỹ thuật này đã chứng minh là công cụ hữu hiệu trong phân tích đặc điểm dịch tễ học phân tử, giúp xác định các nhóm nguy cơ cao và con đường lây nhiễm Dựa trên tính đa hình của gen này, 19 kiểu gen khác nhau của C trachomatis, bao gồm A, B/Ba, C, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J, K, L1, L2, L2a và L3, đã được xác định, tất cả đều có bằng chứng gây bệnh rõ ràng.

Trong nghiên cứu này, chúng tôi áp dụng kỹ thuật PCR bán lồng theo Beni và CS (2010) để khuếch đại một phần genompA dài khoảng 1100-1200bp của C trachomatis Các mồi sử dụng trong kỹ thuật này đã được nhiều nghiên cứu khác tham khảo để phân tích kiểu gen của C trachomatis Sản phẩm PCR vòng 2 sẽ được cắt giới hạn hoặc giải trình tự để xác định kiểu gen Chúng tôi lựa chọn giải trình tự sản phẩm PCR vòng 2 bằng 5 mồi khác nhau nhằm đảm bảo thu được chiều dài toàn bộ đoạn genompA Trình tự thu được sẽ được ghép nối và so sánh với trình tự tham khảo trên ngân hàng gen để xác định kiểu gen của C trachomatis, đồng thời phát hiện các thay đổi di truyền trên đoạn genompA.

Việc xác định kiểu gen của C trachomatis ngày càng quan trọng do sự khác biệt về độc lực và mối liên hệ với các biểu hiện lâm sàng ở đường sinh dục và nhiễm trùng xâm lấn Đây là nghiên cứu đầu tiên về phân bố kiểu gen của C trachomatis ở phụ nữ vô sinh tại Việt Nam Trước đây, chỉ có một nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011) xác định kiểu gen của C trachomatis ở đối tượng khám phụ khoa tại Bệnh viện Da liễu Trung ương trong khoảng thời gian từ tháng 1 đến tháng 8 năm 2010.

Nghiên cứu xác định 9 kiểu gen khác nhau của C trachomatis, bao gồm E, D/Da, F, G/Ga, J, H, K, B/Ba và I/Ia Kiểu gen E chiếm tỷ lệ cao nhất với 25,93%, tiếp theo là D/Da (22,22%) và F (13,58%) Các kiểu gen còn lại như G/Ga, J, H, K, B/Ba và I/Ia có tỷ lệ thấp hơn, dao động từ 1,23% đến 12,35% Nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011) trên đối tượng đi khám bệnh LTQĐTD cho thấy ba kiểu gen D/Da.

E, F cũng chiếm ưu thế với trên 80% tổng số các trường hợp được xác định

Trong nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011), kiểu gen D chiếm tỷ lệ cao nhất với 29,5%, tiếp theo là kiểu gen E (27,1%) và kiểu gen F (23,5%) Ngược lại, nghiên cứu của chúng tôi cho thấy kiểu gen E có tỷ lệ cao nhất (25,93%), kế đến là D/Da (22,22%) và F (13,58%) Sự khác biệt này giữa hai nghiên cứu cho thấy sự biến đổi trong tỷ lệ phân bố các kiểu gen.

(2011) còn cho thấy, có sự khác nhau về phân bố các kiểu gen giữa nhómtuổi

Trong nghiên cứu của chúng tôi, không có sự khác biệt về phân bố kiểu gen giữa nhóm tuổi ≤ 25 và nhóm tuổi > 25 Điều này có thể liên quan đến nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011), nơi họ khảo sát cả nam và nữ nhiễm C trachomatis tại Bệnh viện Da liễu Trung ương, trong khi đối tượng của chúng tôi chỉ tập trung vào nữ giới bị vô sinh.

Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy ba kiểu gen E, D và F của C trachomatis chiếm ưu thế ở phụ nữ vô sinh tại Ấn Độ (47,8% E, 32,2% D, và 20% F) và phụ nữ có triệu chứng tại Argentina (46,9% E, 21,0% D, và 16,1% F) Tại một số quốc gia khác, ba kiểu gen này cũng được báo cáo là phổ biến nhất ở đường tiết niệu sinh dục Tuy nhiên, có sự khác biệt trong phân bố kiểu gen ở một số nơi so với nghiên cứu của chúng tôi; chẳng hạn, kiểu gen D, F và K chiếm ưu thế ở bệnh nhân mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục tại Thái Lan, trong khi kiểu gen F lại phổ biến ở Mexico và Brazil Tại Quảng Tây và Quảng Châu, Trung Quốc, kiểu gen D và J cũng là phổ biến nhất với tỷ lệ lần lượt là 29,69% và 28,6% Sự thay đổi trong phân bố các kiểu gen của C trachomatis giữa các nghiên cứu có thể do yếu tố địa lý, đặc điểm quần thể nghiên cứu và thời gian nghiên cứu Do đó, cần có thêm các nghiên cứu khác để làm rõ tần suất và phân bố các kiểu gen này.

C trachomatisở các đối tượng và khu vực địa lý khác nhau.

Trong nghiên cứu này, tỷ lệ các kiểu gen G/Ga và J khá cao, đạt 12,35% Dữ liệu cho thấy tỷ lệ kiểu gen G ở Châu Âu nhỉnh hơn so với Mỹ, trong khi kiểu gen J lại phổ biến hơn ở Mỹ Tại một số khu vực, các kiểu gen này trở thành những kiểu gen chiếm ưu thế, như ở Quảng Châu (Trung Quốc) với tỷ lệ kiểu gen J lên tới 28,6%, và ở Thâm Quyến (Trung Quốc) với tỷ lệ 22,55%, đứng thứ hai sau kiểu gen E.

Trong một nghiên cứu tại Belém, Pará, miền bắc Brazil, kiểu gen J chiếm 25% trong số phụ nữ, chỉ sau kiểu gen F với 37,5% Nghiên cứu gần đây trên sinh viên nữ ở bốn thành phố lớn thuộc khu vực Amazon cho thấy kiểu gen J là kiểu gen chiếm ưu thế nhất với tỷ lệ 27,2%.

Kiểu gen G thường đồng nhiễm với các vi khuẩn khác và có liên quan đến viêm cổ tử cung hóa mủ cùng loạn sản cổ tử cung Trong nghiên cứu, tỷ lệ kiểu gen G/Ga đạt 12,35%, tuy nhiên, tỷ lệ này khá thấp ở Thái Lan (2,3%), Ấn Độ (1,6%), cũng như tại Hồ Nam và Quảng Châu (Trung Quốc).

Ở phụ nữ vô sinh tại Mexico, kiểu gen G chiếm ưu thế với tỷ lệ 8,7% Tỷ lệ kiểu gen G/Ga tương tự như kết quả nghiên cứu của chúng tôi tại Quảng Đông, Trung Quốc.

Tỷ lệ kiểu gen G/Ga được ghi nhận trong một nghiên cứu ở 6 thành phố của Trung Quốc, với mức 12,4% Tại Phần Lan, kiểu gen này chiếm 13%, đứng thứ 3 sau kiểu gen E (40%) và F (28%) Ở Nhật Bản, tỷ lệ kiểu gen G cao hơn, đạt khoảng 18% Tại Córdoba, Argentina, kiểu gen G đứng thứ 2 với 25% Đặc biệt, ở nam giới quan hệ tình dục đồng giới, kiểu gen G/Ga chiếm ưu thế hơn Những phân tích này cho thấy sự phân bố kiểu gen G có sự khác biệt rõ rệt giữa các khu vực địa lý Do đó, cần tiến hành thêm nghiên cứu về kiểu gen này ở các đối tượng và vùng địa lý khác nhau tại Việt Nam.

Nghiên cứu này phát hiện 19 thay đổi nucleotide (đột biến điểm) ở các kiểu gen B/Ba, D/Da, H, I/Ia, J và K, trong đó 7 thay đổi dẫn đến thay thế axít amin (đột biến sai nghĩa) Kiểu gen B có số đột biến điểm cao nhất với 10 vị trí, bao gồm 3 đột biến sai nghĩa Những thay đổi này có sự khác biệt rõ rệt so với nghiên cứu của Jurstrand và cộng sự.

Năm 2001, một nghiên cứu đã được thực hiện trên bệnh nhân mắc bệnh lây truyền qua đường tình dục tại Thụy Điển Trong nghiên cứu này, 9 kiểu gen B/Ba, D, E, F, G, H, I/Ia, J và K đã được xác định Đặc biệt, kiểu gen B/Ba và I/Ia không phát hiện đột biến trên gen ompA.

D, E, F, G, H, J và K cótừ1 đến 4 điểm đột biến với tổng 15 vị trí đột biến khác nhau, trong đó 8 đột biến sai nghĩa tại các vị trí 331, 440, 487, 700, 997,

Nghiên cứu của Yang và cộng sự (2010) tại Quảng Châu, Trung Quốc cho thấy những kết quả tương đồng với nghiên cứu của Jurstrand và cộng sự (2001) về bệnh lây truyền qua đường tình dục.

6 trong số 9 kiểu gen được xác định có các đột biến trên genompA gồm D, E,

F, G, H và K với tổng 16 vị trí đột biến khác nhau Ở mỗi kiểu gen này đều có những đột biến sai nghĩa Các kiểu gen B, I và J không ghi nhận đốt biến

Mối liên quan giữa kiểu gen của C trachomatis với một số đặcđiểm của đối tượngnghiên cứu

Kết quả phân tích trong nghiên cứu này cho thấy không có sự khác biệt về phân bố các kiểu gen giữa các nhóm tuổi ≤ 25 và > 25, tiền sử viêm âm đạo và không viêm âm đạo, tuổi bắt đầu quan hệ tình dục trước và sau 18 tuổi, quan hệ tình dục trước và sau hôn nhân, có và không có viêm âm đạo/cổ tử cung, có và không có đau bụng dưới, cũng như có và không có tắc vòi trứng (p > 0,05) Tuy nhiên, kết quả cho thấy kiểu gen F có xu hướng cao hơn ở bệnh nhân vô sinh có tuổi ≤ 25 so với bệnh nhân vô sinh tuổi > 25, điều này phù hợp với nghiên cứu của Gaovà.

CS(2007) nghiêncứutrênđốitượngphụnữcónguy cơcaotạiTrungQuốc[149]vànghiêncứuc ủ a Liuv à C S (2022)trênp h ụ n ữ đ ộ t u ổ i s i n h đ ẻ tạiThâm

Nghiên cứu của Quyến (Trung Quốc) khác với nghiên cứu của Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011) về khám bệnh hoa liễu tại Bệnh viện Da liễu Trung ương năm 2010 Phạm Đăng Bảng và cộng sự (2011) đã chỉ ra rằng không có sự khác biệt trong phân bố các kiểu gen giữa hai nhóm có viêm và không viêm sinh dục Kết quả này phù hợp với những phát hiện trong nghiên cứu của chúng tôi.

Kết quả phân tích từ nhiều nghiên cứu cho thấy mối liên hệ giữa các kiểu gen của C trachomatis và các đặc điểm lâm sàng có sự khác biệt rõ rệt Trong nghiên cứu của chúng tôi, không phát hiện mối liên quan nào giữa các kiểu gen D/Da và E với nhóm tuổi, tiền sử viêm âm đạo, cũng như thời điểm quan hệ tình dục Ngược lại, một số nghiên cứu khác đã chỉ ra rằng các kiểu gen này có liên quan đến một số đặc điểm lâm sàng nhất định Chẳng hạn, nghiên cứu của Casillas-Vega và cộng sự (2017) đã ghi nhận sự liên quan này.

Nghiên cứu cho thấy kiểu gen D thường gặp hơn ở phụ nữ từng nhiễm trùng sinh dục trong thai kỳ trước và có liên quan đến việc tăng số lượng bạch cầu trong nước tiểu Kiểu gen E có tỷ lệ nhiễm cao hơn ở những phụ nữ đã từng mang thai ngoài tử cung Đặc biệt, kiểu gen F của C trachomatis có tỷ lệ nhiễm cao hơn ở nhóm vô sinh nguyên phát so với nhóm vô sinh thứ phát (24,32% so với 4,55%, p = 0,0101) Phát hiện này là mới mẻ, vì chưa có nghiên cứu nào phân tích mối liên hệ giữa kiểu gen F và loại vô sinh Thêm vào đó, kiểu gen F cũng được xác định có tỷ lệ cao ở bệnh nhân chưa kết hôn.

[149], phụ nữ đang mang thai [155] hay bệnh nhân có tăng tiết dịch âm đạo hoặc ngứa sinh dục[23].

Nghiên cứu của Gao và cộng sự (2007) tại Trung Quốc cho thấy, ở phụ nữ khám bệnh lây truyền qua đường tình dục, kiểu gen G/Ga có liên quan đến triệu chứng đau bụng dưới, trong khi không thấy mối liên hệ với triệu chứng tăng tiết dịch âm đạo bất thường.

Nghiên cứu đã chỉ ra mối liên quan giữa kiểu gen và các triệu chứng lâm sàng ở phụ nữ Cụ thể, 54,5% phụ nữ có đau bụng dưới nhiễm kiểu gen G, trong khi tỷ lệ này ở những bệnh nhân không có đau bụng dưới chỉ chiếm 5,2% Tuy nhiên, một số nghiên cứu khác lại cho thấy kết quả không nhất quán về mối liên quan giữa kiểu gen G và triệu chứng đau bụng dưới Đối với kiểu gen H, nghiên cứu của chúng tôi thấy rằng tỷ lệ kiểu gen H ở phụ nữ có tiền sử sảy thai cao hơn có ý nghĩa thống kê so với phụ nữ không có tiền sử sảy thai, đạt 15,38% so với 1,82% Điều này cho thấy vai trò của kiểu gen H trong việc tăng nguy cơ sảy thai ở phụ nữ.

Nghiên cứu năm 2022 tại Thâm Quyến, Trung Quốc, cho thấy không có mối liên hệ giữa các kiểu gen và biểu hiện lâm sàng ở đường sinh dục ở phụ nữ độ tuổi sinh đẻ Tuy nhiên, kiểu gen H có liên quan đến sự xuất hiện bất thường tế bào học ở cổ tử cung (p = 0,006; aOR = 8,16, 95%CI: 1,86-36,6) Do hạn chế về phạm vi nghiên cứu, chúng tôi chưa thể thực hiện xét nghiệm tế bào học cổ tử cung cho toàn bộ 119 phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis, do đó chưa đánh giá được mối quan hệ giữa kiểu gen H và bất thường tế bào cổ tử cung như trong nghiên cứu của Liu và cộng sự.

Nghiên cứu cho thấy kiểu gen D/Da của C trachomatis chiếm ưu thế ở bệnh nhân không có tắc vòi trứng (VTC), trong khi kiểu gen J lại phổ biến ở bệnh nhân có tắc VTC Tuy nhiên, số lượng bệnh nhân nhiễm C trachomatis được chụp vòi trứng là khá hạn chế, chỉ 24 trường hợp Do đó, tần suất các kiểu gen trong từng nhóm có thể không phản ánh đúng phân bố thực sự, dẫn đến nhận định về sự khác biệt giữa hai nhóm có thể không chính xác và chưa xác định được kiểu gen nào liên quan đến tắc VTC.

Hạn chế của đề tài

- Số lượng bệnh nhân được chụp tử cung – vòi tử cung ít nên việc phân tích ảnh hưởng củaC trachomatisđến vô sinh chưa được làmrõ.

Các xét nghiệm về thay đổi trong nước tiểu, dịch tiết âm đạo và niệu đạo, cũng như tế bào học cổ tử cung chưa được thực hiện đầy đủ Điều này dẫn đến việc phân tích mối liên quan giữa các kiểu gen và các yếu tố này chưa được hoàn thiện Hơn nữa, cỡ mẫu xác định kiểu gen nói chung và từng kiểu gen riêng lẻ còn nhỏ, gây khó khăn trong việc đánh giá chính xác các mối liên hệ.

Nghiên cứu này chỉ xác định các kiểu gen của C.trachomatis bằng chỉ thị gen ompA do giới hạn về thời gian và kinh phí, mà chưa tiến hành giải trình tự nhiều gen đích khác nhau để xác định các biến thể dưới tuýp.

Việc xác định các kiểu gen của C trachomatis đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu dịch tễ học và lâm sàng về tác nhân gây bệnh này Sự phân bố thời gian và địa lý của các kiểu gen C trachomatis trên toàn cầu có ý nghĩa quan trọng đối với dịch tễ học và phát triển vắc-xin.

Các kiểu gen của C trachomatis cung cấp thông tin quan trọng về con đường lây truyền, mối liên quan với các mô bị xâm nhập và khả năng gây bệnh Tại Việt Nam, dữ liệu về tỷ lệ nhiễm và kiểu gen của C trachomatis ở các khu vực và đối tượng khác nhau còn hạn chế, dẫn đến nhiều vấn đề chưa được làm sáng tỏ.

Nghiên cứu này đã cung cấp dữ liệu cơ bản về kiểu gen của C trachomatis ở phụ nữ vô sinh, tạo nền tảng cho các nghiên cứu tiếp theo trong việc đánh giá và phân tích.

1 Đặcđiểmlâm sàng,cậnlâmsàngvà một sốyếutố liên quan tớitình trạng nhiễm Chlamydiatrachomatis ở phụ nữ vô sinh đếnkhám,điều trị tạiBệnhviện Phụsản Trungương(2020-2021)

Trong giai đoạn 2020 - 2022, tại Bệnh viện Phụ sản Trung ương, chúng tôi đã nghiên cứu trên tổng số 761 phụ nữ đến khám, điều trị vô sinh thì có

119 trường hợp bị nhiễmC trachomatischiếm tỷ lệ 15,6%.

Triệu chứng gặpp phổ biến nhất liên quan đến tình trạng sức khỏe sinh sản là tăng tiết dịch âm đạo, chiếm 67,22%, trong đó dịch trắng đục chiếm tỷ lệ cao nhất với 76,54% Các triệu chứng khác bao gồm đau bụng ngoài kỳ kinh (40,34%), ngứa sinh dục (21,01%), giảm khoái cảm tình dục (16,81%), nóng rát âm đạo (15,13%), đái buốt và đái khó (15,13%), và ra máu bất thường ngoài kỳ kinh với tỷ lệ thấp nhất là 5,88%.

- Tỷ lệ viêm âm đạo, viêm cổ tử cung ở phụ nữ vô sinh nhiễmC.trachomatislầnlượt là 75,63%và80,67%.

1.2 Đặc điểm cận lâm sàng của phụ nữ vô sinh nhiễm C trachomatis

- 100%phụ nữ vô sinh nhiễmC.trachomatisđồngnhiễmvớiítnhất1 visinhvậtthuộcmộttrong các nhómtrựckhuẩn gram (+), trựckhuẩngram (-),cầukhuẩn gram (+)vànấmCandida

- Tỷ lệnhiễmvi rútviêm ganBlà 4,20% Khôngcótrường hợp nào nhiễm lậu, giangmai vàtrùngroi âmđạo.

- Hìnhảnhbấtthườngởphần phụ trên siêuâmchiếm 37,82%,chủ yếu làcác hìnhảnhbuồng chứng đanang, khốibất thườngở tử cung và ứdịchở vòi tửcung.

Một sốyếutốliênquanđếnnhiễmC.trachomatissinh dục phụnữvôsinhgồm:tiềnsử chửangoàitửcung(OR=4 , 6 4 ; 95%CI:3,05-7,07),

129 quan hệ tình dục trước 18 tuổi (OR = 2,97; 95%CI: 1,95 - 4,54), quan hệ tình dục với nhiều người (OR = 1,93; 95%CI: 1,28 - 2,91).

2.2 Kiểu gen của Chlamydia trachomatis phân lập được ở phụ nữ vôsinh

Phân tích kiểu gen bằng giải trình tự của 81 mẫu dịch phết cổ tử cung nhiễmC trachomatis,kết quả cho thấy:

- Có 9 kiểu gen khác nhau đã được xác định, bao gồm: B/Ba, D/Da, E, F, G/Ga, H, I/Ia, J, và K Trong đó, kiểu gen E là kiểu gen chiếm tỷ lệ cao nhất với 25,93%,t i ế p t h e o l ầ n l ư ợ t l à D / D a ( 2 2 , 2 3 % ) , F ( 1 3 , 5 8 % ) , G / G a ( 1 2 ,

Phụ nữ có kiểu gen H có tiền sử sảy thai cao hơn so với những người không có tiền sử này, cho thấy sự khác biệt có ý nghĩa thống kê Ngoài ra, tỷ lệ kiểu gen F ở nhóm vô sinh nguyên phát cũng cao hơn một cách có ý nghĩa so với nhóm vô sinh thứ phát.

Tiêu đề	Nghiên Cứu Đặc Điểm Lâm Sàng, Cận Lâm Sàng Và Kiểu Gen Của Chlamydia trachomatis Ở Phụ Nữ Vô Sinh Tại Bệnh Viện Phụ Sản Trung Ương (2020 - 2021)
Tác giả	Nguyễn Hòa
Người hướng dẫn	PGS.TS. Vũ Văn Du, PGS.TS. Đỗ Ngọc Ánh
Trường học	Viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Côn trùng Trung ương
Chuyên ngành	Bệnh truyền nhiễm và các bệnh nhiệt đới
Thể loại	luận án tiến sĩ y học
Năm xuất bản	2023
Thành phố	Hà Nội

Định dạng
Số trang	190
Dung lượng	1,54 MB