Nghiên quá quá trình trích ly thu dịch chiết từ rau đắng biển có khả năng kháng enzyme α amylase với sự hỗ trợ của enzyme cellulase

TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CƠNG NGHỆ THỰC PHẨM ó Kh KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP a lu ận Đề tài: NGHIÊN CỨU Q TRÌNH TRÍCH LY THU DỊCH CHIẾT TỪ RAU ĐẮNG BIỂN CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE p iệ gh tn tố ĐẶNG MINH CHÂU MSSV: 2005150404 TP HỒ CHÍ MINH, 06/2019 IT U SVTH: H GVHD: Th.S TRẦN CHÍ HẢI LỚP: 06DHTP4 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM ó Kh a KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ận lu p iệ gh tn tố Đề tài: NGHIÊN CỨU QUÁ TRÌNH TRÍCH LY THU DỊCH CHIẾT TỪ RAU ĐẮNG BIỂN CÓ KHẢ NĂNG KHÁNG ENZYME α-AMYLASE VỚI SỰ HỖ TRỢ CỦA ENZYME CELLULASE H IT U GVHD: Th.S TRẦN CHÍ HẢI SVTH: ĐẶNG MINH CHÂU MSSV: 2005150404 TP HỒ CHÍ MINH, 06/2019 LỚP: 06DHTP4 Mẫu BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CƠNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc KHOA CÔNG NGHỆ THỰC PHẨM PHIẾU GIAO NHIỆM VỤ  Khóa luận tốt nghiệp  Đồ án tốt nghiệp (Phiếu phải đóng vào trang báo cáo) ó Kh Họ tên sinh viên giao đề tài (Số lượng sinh viên: 1) (1) Đặng Minh Châu MSSV: 2005150404 Lớp: 06DHTP4 a Tên đề tài : Nghiên quá trình trích ly thu dịch chiết từ rau đắng biển có khả lu kháng enzyme α-amylase với hỗ trợ enzyme cellulase ận Mục tiêu đề tài: Thu nhận dịch chiết đinh lăng có hàm lượng saponin triterpenoide khả tố kháng enzyme α-amylase cao với hỗ trợ enzyme cellulase tn Nội dung nghiên cứu chính: - Nghiên cứu ảnh hưởng thơng số cơng nghệ đến q trình trích ly gh enzyme cellulase (ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu:dung môi, tỉ lệ enzyme: iệ chất, thời gian xử lí enzyme) tối ưu hóa/xây đựng động học cho trình H amylase p - Hàm mục tiêu: hàm lượng saponin triterpenoide khả ức chế enzyme α- Trưởng khoa Ngày nộp báo cáo: 11/6/2019 IT U Ngày giao đề tài: 09/12/2018 TP.Hồ Chí Minh, ngày 18 tháng 01 năm 2019 Trưởng môn Giảng viên hướng dẫn Phan Thị Hồng Liên Trần Chí Hải BẢN NHẬN XÉT CỦA GVHD Khóa luận tốt nghiệp Đồ án tốt nghiệp Những thông tin chung: Họ tên sinh viên giao đề tài: (Số lượng sinh viên: 1) ĐẶNG MINH CHÂU MSSV: 2005150404 Lớp: 06DHTP4 Tên đề tài: “Nghiên cứu q trình trích ly thu dịch chiết từ rau đắng biển có khả kháng enzyme α-amylase với hỗ trợ enzyme cellulase” ó Kh Nhiệm vụ: Khảo sát ảnh hưởng số thông số cơng nghệ q trình trích ly saponine triterpenoid từ rau đắng biển tối ưu hóa q trình trích ly Nhận xét giảng viên hướng dẫn: a - Về tinh thần, thái độ làm việc sinh viên: lu ận - Về nội dung kết nghiên cứu: gh tn tố - Ý kiến khác: Ý kiến giảng viên hướng dẫn việc SV bảo vệ trước Hội đồng: Không đồng ý p iệ Đồng ý TP Hồ Chí Minh, ngày … tháng … năm 2019 H GVHD IT U (Ký ghi rõ họ tên) LỜI CAM ĐOAN Chúng cam đoan báo cáo khóa luận tốt nghiệp thực hướng dẫn thầy TRẦN CHÍ HẢI Các số liệu kết phân tích báo cáo trung thực, khơng chép từ đề tài nghiên cứu khoa học TP.HCM, tháng 06 năm 2019 SINH VIÊN THỰC HIỆN (Kí ghi rõ họ tên) ó Kh a lu ĐẶNG MINH CHÂU ận p iệ gh tn tố H IT U i TĨM TẮT KHĨA LUẬN Mục đích nghiên cứu tìm thơng số cơng nghệ phù hợp nhằm trích ly hàm lượng saponin triterpenoide với khả kháng enzyme α-amylase cao từ rau đắng biển hỗ trợ enzyme cellullase ó Kh Với đề tài này, chúng tiến hành khảo sát sự ảnh hưởng của các thông số công nghệ (tỷ lệ nguyên liệu dung môi, nồng độ enzyme thời gian trích ly) đến q trình trích ly saponin triterpenoide thơng qua đánh giá khả ức chế enzyme α-amylase (ngồi cịn xác định khả chống oxi hóa hàm lượng polyphenol) từ rau đắng, tối ưu hóa điều kiện trích ly có hỗ trợ enzyme Đồng thời tiến hành xây dựng động học nhằm phản ánh cụ thể tớc đợ trích ly saponin triterpenoide a ận lu Ngun liệu rau đắng tươi xử lý, phơi khô điều kiện tự nhiên sau tiến hành xay mịn thành bột khơ (kích thước ≤0.03mm) bảo quản kín nhiệt độ phịng (túi hút chân khơng) để sử dụng cho suốt trình nghiên cứu Kết nghiên cứu cho thấy phương pháp trích ly kỹ thuật enzyme cho hiệu đáng kể khai thác chất hòa tan, đặc biệt thành phần mang hoạt tính sinh học cao nguyên liệu thực vật Khi tiến hành khảo sát ảnh hưởng đơn yếu tố, điều kiện thích hợp để trích ly dịch từ rau đáng biển có kết hợp xử lý enzyme cellulase chứa hoạt tính sinh học có khả kháng enzyme α - amylase đạt hiệu cao là: tỷ lệ nguyên liệu: dung môi 1:30 với nồng độ enzyme cellulase sử dụng 2% thời gian trích ly 40 phút Với điều kiện hàm lượng triterpensaponin đạt 0.941 ± 0.03 mg/gCK tương ứng khả kháng enzyme α-amylase đạt 13.717 ± 0.42 mgAcarbose/gCK hàm lượng TPC 0.32 mgGAE/gCK tương ứng khả kháng oxi hóa gốc DPPH 5.4 ± 0.06 mgTrolox/gCK (so với mẫu đối chứng khơng xử lý enzyme thì: hàm lượng triterpensaponin cao gấp 2.73 lần; khả kháng enzyme αamylase cao gấp 1.96 lần; hàm lượng TPC cao gấp lần khả kháng oxi hóa gốc DPPH cao gấp 1.9 lần) Sau đó, chúng tơi tiến hành thử nghiệm mơ hình bề mặt đáp ứng với hỗ trợ phần mềm Modde 5.0 sử dụng để tối ưu hóa q trình trích ly saponin triterpenoide có khả kháng enzyme α – amylase cao Kết thu hàm lượng saponin triterpenoide đạt cực đại 0.955 mg/gCK khả ức chế enzyme amylase 13.862 mgAcarbose/gCK điều kiện tỉ lệ nguyên liệu: dung môi 1:32.30 (w/w), nồng độ enzyme 2.26% (v/w) thời gian trích ly 48.38 phút Ngồi ra, động học q trình trích ly tn theo mơ hình bậc hai với khả trích Ce 0.107 ± 0.002 mg/gCK, vận tốc trích ly ban đầu v 1.343 ± 0.868 p iệ gh tn tố H IT U ii (mg.g-1.phút-1), số tốc độ trích ly k 118.36 ± 2.013 (g.mg-1.phút-1) R2 = 0.962 Đây nghiên cứu tiền đề cho nghiên cứu sâu hợp chất có hoạt tính sinh học nghiên cứu dược liệu có nguồn gốc thiên nhiên giàu hàm lượng saponin triterpenoide, khả ức chế enzyme amylase, mở đầu cho hướng phát triển sản phẩm thực phẩm chức từ rau đắng biển việc điều trị bệnh tiểu đường ó Kh a ận lu p iệ gh tn tố H IT U iii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành khóa luận này, trước hết chúng em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy, cô giáo khoa Công nghệ thực phẩm trường Đại học Công nghiệp thực phẩm Tp Hồ Chí Minh truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu cho chúng em suốt trình học tập rèn luyện trường ó Kh Trong trình thực đề tài chúng em gặp khơng khó khăn Nhưng với động viên giúp đỡ quý thầy cô, người thân bạn bè, chúng em hoàn thành tốt đề tài nghiên cứu có kinh nghiệm, kiến thức hữu ích cho thân a Cảm ơn thầy Trung tâm thí nghiệm thực hành tạo điều kiện thuận lợi để chúng em hồn thành thí nghiệm lu ận Đặc biệt chúng em xin gởi lời cảm ơn sâu sắc đến thầy TRẦN CHÍ HẢI, người trực tiếp hướng dẫn tận tình giúp đỡ chúng em suốt thời gian thực đề tài Khơng lịng nhiệt huyết, kiến thức – kinh nghiệm quý báu mà thầy truyền đạt lại cho chúng em, tất điều tình cảm mà thầy trị dành cho qua buổi họp mặt, ảnh kỷ yếu nhóm, chuyến dã ngoại để chúng em bớt phần áp lực suốt thời gian thực khóa luận, chúng em tiếp thêm sức mạnh tinh thần vượt qua khó khăn cách tốt Với “gia đình chúng ta” thầy khơng người Thầy mà người “anh” – người “baba” – người bạn thân thiếu xuân chúng em Một lần chúng em xin cảm ơn thầy TRẦN CHÍ HẢI p iệ gh tn tố H Dù cố gắng khơng thể tránh khỏi sai sót Rất mong thơng cảm đóng góp ý kiến q thầy bạn để khóa luận hồn thiện IT U Cuối cùng, xin kính chúc q thầy bạn sức khỏe, thành công công việc sống Chúng em xin chân thành cảm ơn! TP Hồ Chí Minh, tháng 06, năm 2019 SVTH ĐẶNG MINH CHÂU iv MỤC LỤC ó Kh LỜI CAM ĐOAN i TÓM TẮT KHÓA LUẬN ii LỜI CẢM ƠN iv MỤC LỤC v DANH MỤC HÌNH ẢNH vii DANH MỤC BẢNG BIỂU .ix DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT xi MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Mục tiêu đề tài Nội dung nghiên cứu Bố cục luận văn gồm có phần .3 CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan rau đắng biển 1.1.1 Tên gọi phân loại 1.1.2 Nguồn gốc, đặc điểm hình thái phân bố 1.1.3 Thành phần hóa học 1.2 Hợp chất saponin triterpenoide 1.2.1 Khái niệm Saponin 1.2.2 Nguồn gốc 1.2.3 Cấu trúc hóa học saponin 1.2.4 Phân loại saponin .10 1.2.5 Saponin triterpenoide .11 1.2.6 Tính chất hóa lý triterpensaponin 15 1.2.7 Các hợp chất saponin triterpenoide có rau đắng biển .17 1.2.8 Phương pháp định tính saponin 19 1.2.9 Phương pháp định lượng saponin 20 1.3 Tổng quan enzyme cellulase 21 1.3.1 Giới thiệu chung 21 1.3.2 Phân loại chế hoạt động 22 1.3.3 Cấu trúc tính chất cellulase 24 1.3.4 Cơ chất enzyme cellulase 26 1.3.5 Ứng dụng cellulase công nghiệp thực phẩm 27 1.4 Tình hình nghiên cứu nước giới 28 1.4.1 Tình hình nghiên cứu nước .28 1.4.2 Tình hình nghiên cứu giới 29 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1 Thời gian địa điểm làm đề tài .35 2.2 Vật liệu nghiên cứu 35 2.2.1 Nguyên liệu .35 2.2.2 Hóa chất 36 a ận lu p iệ gh tn tố H IT U v ó Kh 2.2.3 Thiết bị 37 2.3 Quy trình thu nhận dịch chiết từ rau đắng biển .38 2.3.1 Sơ đồ quy trình 38 2.3.2 Thuyết minh quy trình .39 2.4 Phương pháp nghiên cứu 40 2.4.1 Sơ đồ nghiên cứu thực nghiệm 40 2.4.2 Phương pháp bố trí thí nghiệm 42 2.5 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 47 2.5.1 Phương pháp phân tích 47 2.5.2 Phương pháp xử lý số liệu .47 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 48 3.1 Kết thí nghiệm 1: Ảnh hưởng thơng số cơng nghệ q trình trích ly dịch chiết rau đắng biển với hỗ trợ enzyme cellulase .48 3.1.1 Kết thí nghiệm 1.1: Khảo sát ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu: dung môi đến hàm lượng hợp chất có dịch chiết rau đắng biển 48 3.1.2 Kết thí nghiệm 1.2: Khảo sát ảnh hưởng nồng độ enzyme đến hàm lượng hợp chất có dịch chiết rau đắng biển 52 3.1.3 Kết thí nghiệm 1.3: Khảo sát ảnh hưởng thời gian trích ly đến hàm lượng hợp chất có dịch chiết rau đắng biển 55 3.2 Kết thí nghiệm 2: Tối ưu hóa q trình trích ly dịch chiết rau đắng biển với hỗ trợ kỹ thuật enzyme .57 3.3 Kết thí nghiệm 3: Xác định thơng số động học q trình trích ly saponin triterpenoide 65 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 70 4.1 Kết luận 70 4.2 Kiến nghị 71 TÀI LIỆU THAM KHẢO .72 PHỤ LỤC 75 a ận lu p iệ gh tn tố H IT U vi 3.3.Khả kháng oxi hóa (DPPH) THOI GIAN Count 20 40 60 80 100 3 3 3 18 Total Coeff of Average Standard deviation variation Minimum Maximum Range 3.1792 0.042048 1.32% 3.1397 3.2234 0.0837 4.41647 0.053454 1.21% 4.368 4.4738 0.1058 5.41843 0.058075 1.07% 5.3806 5.4853 0.1047 5.3682 0.081004 1.51% 5.3014 5.4583 0.1569 5.1999 0.079264 1.52% 5.1215 5.28 0.1585 5.06293 0.075311 1.49% 4.9978 5.1454 0.1476 4.77419 0.810461 16.98% 3.1397 5.4853 2.3456 ó Kh ANOVA Table for HAM LUONG TROLOX by THOI GIAN Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 11.1134 2.22267 502.98 Within groups 0.053028 12 0.004419     Total (Corr.) 11.1664 17       a ận lu Multiple Range Tests for HAM LUONG TROLOX by THOI GIAN tố Method: 95.0 percent LSD p iệ 3 3 3 Mean 3.1792 4.41647 5.06293 5.1999 5.3682 5.41843 gh 20 100 80 60 40 Count tn THOI GIAN Homogeneous Groups X X X X X X H 3.4.Khả ức chế enzyme amylase IT U Summary Statistics for Ham luong Acarbose thoi gian Standard Coeff of trích ly Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 6.09013 0.087326 1.43% 5.9923 6.1602 0.1679 20 7.8722 0.301686 3.83% 7.5489 8.1462 0.5973 40 13.717 0.423528 3.09% 13.2334 14.0217 0.7883 60 13.3064 0.332113 2.50% 12.9613 13.6238 0.6625 80 10.4695 0.295101 2.82% 10.1305 10.6689 0.5384 100 8.7313 0.108517 1.24% 8.6376 8.8502 0.2126 Total 18 10.0311 2.87111 28.62% 5.9923 14.0217 8.0294 ANOVA Table for Ham luong Acarbose by thoi gian trích ly Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between 139.162 27.8323 342.78 118 groups Within groups Total (Corr.) 0.974353 12 140.136 0.081196         17   Multiple Range Tests for HAM LUONG ACARBOSE by THOI GIAN Method: 95.0 percent LSD Level Homogeneous Mean Groups 6.09013 X 7.8722 X 8.7313 X 10.4695 X 13.3064 X 13.717 X Count ó Kh 20 100 80 60 40 3 3 3 a lu 4.Thí nghiệm kiểm chứng ận Summary Statistics for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE THI Standard Coeff of NGHIEM Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 0.95467 0.41329 0.68398 Total 0.001601 0.17% 0.95304 0.95624 0.0032 0.0017 0.41% 0.41159 0.41499 0.0034 0.41159 0.95624 0.54465 tn tố 0.29653 43.35% p iệ gh ANOVA Table for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THI NGHIEM Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.439638 0.439638 161255.3 Within groups 1.09E-05 2.73E-06     Total (Corr.) 0.439649       H IT U Multiple Range Tests for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THI NGHIEM Method: 95.0 percent LSD THI NGHIEM Count Mean 3 Homogeneous Groups 0.41329 X 0.95467 X Summary Statistics for UC CHE ENZYME THI Standard NGHIEM Count Average deviation Coeff of variation Minimum Maximum Range 119 14.1676 0.1211 0.85% 14.0765 14.3167 0.2402 7.33527 0.132315 1.80% 7.2102 7.4738 0.2636 10.7614 3.75491 34.89% 7.2102 14.3167 7.1065 Total ANOVA Table for UC CHE ENZYME by THI NGHIEM Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 70.4324 70.4324 4378.43 Within groups 0.064345 0.016086     Total (Corr.) 70.4967       ó Kh Multiple Range Tests for UC CHE ENZYME by THI NGHIEM a 3 Homogeneous Groups ận lu Method: 95.0 percent LSD THI NGHIEM Count Mean 7.33527 X 14.1876 X tn tố 5.Xây dựng động học 5.1 Mẫu thử (mẫu có enzyme) p iệ gh Summary Statistics for nghich dao TG thoi gian Standard Coeff of trích ly Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 0.311533 0.007614 2.44% 0.3042 0.3194 0.0152 10 0.3771 0.014603 3.87% 0.3613 0.3901 0.0288 20 0.429133 0.014797 3.45% 0.4167 0.4455 0.0288 30 0.7609 0.008345 1.10% 0.7531 0.7697 0.0166 40 0.9227 0.01511 1.64% 0.9108 0.9397 0.0289 50 0.9557 0.009527 1.00% 0.9447 0.9613 0.0166 60 0.982633 0.012298 1.25% 0.9747 0.9968 0.0221 70 0.999567 0.011262 1.13% 0.9866 1.0069 0.0203 80 0.975267 0.010797 1.11% 0.9628 0.9815 0.0187 90 0.970233 0.009266 0.96% 0.9613 0.9798 0.0185 100 0.959533 0.003202 0.33% 0.9564 0.9628 0.0064 110 0.939067 0.007614 0.81% 0.9312 0.9464 0.0152 120 0.9351 0.013788 1.47% 0.9193 0.9447 0.0254 Total 39 0.809113 0.250011 30.90% 0.3042 1.0069 0.7027 H IT U ANOVA Table for nghich dao TG by thoi gian trích ly Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2.37197 12 0.197664 1588.42 120 Within groups Total (Corr.) 0.003235 26 2.3752 0.000124         38   Multiple Range Tests for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THOI GIAN Method: 95.0 percent LSD Level Count 3 3 3 3 3 3 ó Kh a lu ận tn tố 10 20 30 40 120 110 50 100 90 80 60 70 Homogeneous Mean Groups 0.311533 X 0.3771 X 0.429133 X 0.7609 X 0.9227 X 0.9351 X 0.939067 XX 0.9557 XX 0.959533 XX 0.970233 XXX 0.975267 XX 0.982633 XX 0.999567 X 5.2 Mẫu đối chứng (mẫu khơng có enzyme) p iệ gh Summary Statistics for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE THOI Standard Coeff of GIAN Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 0.307567 0.011102 3.61% 0.2957 0.3177 0.022 10 0.323367 0.003539 1.09% 0.3194 0.3262 0.0068 20 0.3613 0.006129 1.70% 0.3545 0.3664 0.0119 30 0.411233 0.017851 4.34% 0.3918 0.4269 0.0351 40 0.452667 0.019253 4.25% 0.4336 0.4721 0.0385 50 0.487367 0.00942 1.93% 0.4772 0.4958 0.0186 60 0.500367 0.009626 1.92% 0.4925 0.5111 0.0186 70 0.5535 0.012929 2.34% 0.5394 0.5648 0.0254 80 0.604367 0.006813 1.13% 0.5965 0.6083 0.0118 90 0.602233 0.007921 1.32% 0.5933 0.6084 0.0151 100 0.594433 0.010061 1.69% 0.5835 0.6033 0.0198 110 0.580467 0.011124 1.92% 0.5682 0.5899 0.0217 120 0.577133 0.011751 2.04% 0.5648 0.5882 0.0234 Total 39 0.488923 0.106186 21.72% 0.2957 0.6084 0.3127 H IT U ANOVA Table for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THOI GIAN Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 0.425102 12 0.035425 273.57 121 Within groups Total (Corr.) 0.003367 26 0.428469 38   0.000129         Multiple Range Tests for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THOI GIAN ó Kh Method: 95.0 percent LSD THOI GIAN Count Mean 0.307567 10 0.323367 20 0.3613 30 0.411233 40 0.452667 50 0.487367 60 0.500367 70 0.5535 120 0.577133 110 0.580467 100 0.594433 90 0.602233 80 0.604367 a ận lu Homogeneous Groups X X X X X X X X X X XX X X tn tố 5.3 Giá trị nghịch đảo tốc độ trích ly saponin triterpenoide Mẫu có enzyme p iệ gh Summary Statistics for nghich dao TG thoi gian Standard Coeff of trích ly Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 0 % 0 10 26.545 1.03963 3.92% 25.6345 27.6778 2.0433 20 46.6421 1.58859 3.41% 44.8934 47.9962 3.1028 30 39.4301 0.431621 1.09% 38.9762 39.8353 0.8591 40 43.3587 0.704869 1.63% 42.5668 43.9174 1.3506 50 52.3212 0.524608 1.00% 52.0129 52.9269 0.914 60 61.0667 0.758917 1.24% 60.1926 61.5574 1.3648 70 70.0363 0.794074 1.13% 69.5203 70.9507 1.4304 80 82.0356 0.914003 1.11% 81.5079 83.091 1.5831 90 92.7668 0.885131 0.95% 91.8555 93.6232 1.7677 100 104.218 0.347752 0.33% 103.864 104.559 0.6951 110 117.143 0.950624 0.81% 116.23 118.127 1.8972 120 128.347 1.90767 1.49% 127.025 130.534 3.5096 Total 39 66.4547 36.2841 54.60% 130.534 130.534 H IT U ANOVA Table for nghich dao TG by thoi gian trích ly Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 50004.2 12 4167.01 4494.79 122 Within groups Total (Corr.) 24.104 26 50028.3 0.927076         38   Multiple Range Tests for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THOI GIAN Method: 95.0 percent LSD Level Mean 3 3 3 3 3 3 26.545 39.4301 43.3587 46.6421 52.3212 61.0667 70.0363 82.0356 92.7668 104.218 117.143 128.347 ó Kh a ận lu Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X tn Mẫu khơng có enzyme tố 10 30 40 20 50 60 70 80 90 100 110 120 Count p iệ gh Summary Statistics for nghich dao TG thoi gian Standard Coeff of trích ly Count Average deviation variation Minimum Maximum Range 0 % 0 10 30.9271 0.340091 1.10% 30.656 31.3087 0.6527 20 55.3664 0.945512 1.71% 54.5852 56.4175 1.8323 30 73.0443 3.21501 4.40% 70.2741 76.5697 6.2956 40 88.4719 3.76167 4.25% 84.7278 92.2509 7.5231 50 102.618 1.9941 1.94% 100.847 104.778 3.9308 60 119.941 2.28959 1.91% 117.394 121.827 4.4335 70 126.514 2.97738 2.35% 123.938 129.774 5.8361 80 132.381 1.50203 1.13% 131.514 134.116 2.6016 90 149.461 1.97786 1.32% 147.929 151.694 3.7649 100 168.26 2.86231 1.70% 165.755 171.38 5.6246 110 189.549 3.65795 1.93% 186.472 193.594 7.1215 120 207.982 4.24949 2.04% 204.012 212.465 8.4524 Total 39 111.117 59.6151 53.65% 212.465 212.465 H IT U ANOVA Table for nghich dao TG by thoi gian trích ly Sum of Source Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 134872 12 11239.3 1634.73 123 Within groups Total (Corr.) 178.758 26 135050 38   6.87532         Multiple Range Tests for HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE by THOI GIAN Method: 95.0 percent LSD Level Count Mean 3 3 3 3 3 3 ó Kh a 30.9271 55.3664 73.0443 88.4719 102.618 119.941 126.514 132.381 149.461 168.26 189.549 207.982 lu ận 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 Homogeneous Groups X X X X X X X X X X X X X tố 10 11 12 13 14 20 20 20 20 60 60 60 60 40 40 40 40 20 60 124 UC CHE ENZYME AMYLASE 3.4081 7.9853 5.3096 9.1431 8.4977 9.4654 11.155 10.8619 12.8637 13.2849 10.2178 12.6341 7.8757 13.3021 IT U 1 3 1 3 2 2 HAM LUONG SAPONIN TRITERPENOIDE 0.1252 0.4761 0.3177 0.5223 0.5093 0.5801 0.7294 0.6656 0.8253 0.8158 0.6131 0.8175 0.4183 0.9293 H thoi gian trích ly p nong enzyme iệ STT ty le nguyen lieu : dung moi 20 40 20 40 20 40 20 40 20 40 30 30 30 30 gh Mơ hình thí nghiệm tối ưu hóa tn II- TỐI ƯU HÓA CÁC YẾU TỐ ẢNH HƯỞNG ĐẾN Q TRÌNH TRÍCH LY SAPONIN TRITERPENOIDE VÀ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ ENZYME AMYLASE 15 16 17 30 30 30 2 40 40 40 0.9548 0.9548 0.9564 13.7199 13.7199 13.7198 ó Kh a ận lu p iệ gh tn tố H IT U 125 PHỤ LỤC C: HÌNH ẢNH Một số thiết bị sử dụng nghiên cứu ó Kh a lu Máy xay mẫu Máy đo pH ận p iệ gh tn tố Cân sấy ẩm hồng ngoại Bể ổn nhiệt Máy ly tâm H Tủ sấy IT U 126 Tủ lạnh ó Kh Máy đo quang a Một số hình ảnh thực thí nghiệm q trình trích ly ận lu p iệ gh tn tố H IT U Vỏ đ xanh Phơi rau đắng Bột rau đắng bao gói bảo quản 127 Cân định lượng Bất hoạt enzyme trước Điều chỉnh pH mẫu đem ly tâm ó Kh a ận lu tố Tiến hành cân định lượng nguyên liệu, dung môi p iệ gh tn H IT U Đo pH dịch ban đầu 128 Ngâm mẫu Bấtbể hoạt ổnenzyme nhiệt (100oC) ó Kh a ận lu p iệ gh tn tố Ly tâm mẫu H IT U Dịch Đo sau thể tích lọc chiết đựng chai tối màu 129 Dãy chuẩn Trolox Dãy chuẩn acid gallic ó Kh Cân định lượng a ận lu Mẫu sau ủ 70oC 15 phút (test hàm lượng saponin triterpenoide) p iệ gh tn tố Pha loãng mẫu H IT U Test khả kháng DPPH Test hàm lượng polyphenol Test khả kháng enzyme α-amylase 130 Tối ưu hóa điều kiện trích ly kỹ thuật enzyme theo phương pháp bề mặt RSM óa Kh ận lu p iệ gh tn tố IT U H 131 óa Kh ận lu p iệ gh tn tố IT U H 132