1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus

101 7 0

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Tiêu đề Nghiên Cứu Nuôi Cấy Callus Cà Gai Leo (Solanum Hainanense Hance) Và Ảnh Hưởng Của Chất Kích Ứng Đến Sự Tích Lũy Hợp Chất Thứ Cấp Trong Callus
Tác giả Đoàn Ngọc Hân
Người hướng dẫn PGS. TS. Nguyễn Thị Lý Anh
Trường học Học viện Nông nghiệp Việt Nam
Chuyên ngành Công nghệ sinh học
Thể loại luận văn thạc sĩ
Năm xuất bản 2018
Thành phố Hà Nội
Định dạng
Số trang 101
Dung lượng 503,6 KB

Nội dung

HỌC VIỆN NƠNG NGHIỆP VIỆT NAM ĐỒN NGỌC HÂN NGHIÊN CỨU NUÔI CẤY CALLUS CÀ GAI LEO (SOLANUM HAINANENSE HANCE) VÀ ẢNH HƯỞNG CỦA CHẤT KÍCH ỨNG ĐẾN SỰ TÍCH LŨY HỢP CHẤT THỨ CẤP TRONG CALLUS Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 60 42 02 01 Người hướng dẫn khoa học: PGS TS Nguyễn Thị Lý Anh NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực chưa công bố công trình nghiên cứu khác, thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 01 tháng 10 năm 2017 Tác giả luận văn Đoàn Ngọc Hân ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, cố gắng nỗ lực thân, nhận nhiều quan tâm giúp đỡ nhiệt tình thầy cơ, cán kĩ thuật, bạn bè người thân Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy, cô, cán nhân viên Phịng Cơng nghệ Sinh học Thực vật – Viện Sinh học Nông Nghiệp – Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành luận văn Tơi xin cảm ơn ThS Nguyễn Thị Thanh Phương - cán Viện Sinh học Nông nghiệp, người sát cánh bên tơi, nhiệt tình giúp đỡ, bảo tơi suốt thời gian thực tập Viện Đặc biệt, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS TS Nguyễn Thị Lý Anh – Viện trưởng Viện Sinh học Nơng nghiệp tận tình hướng dẫn giúp đỡ, động viên tơi suốt q trình thực luận văn Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến gia đình, người thân, bạn bè, người ln bên cạnh động viên giúp đỡ tơi q trình học tập thực đề tài Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 01 tháng 10 năm 2017 Tác giả luận văn Đoàn Ngọc Hân iii MỤC LỤC Lời cam đoan .ii Lời cảm ơn iii Mục lục iv Danh mục chữ viết tắt .vii Danh mục bảng .viii Danh mục hình x Trích yếu luận văn xii Phần Mở đầu 1.1 Tính cấp thiết đề tài .1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu .2 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Sản xuất hợp chất thứ cấp từ nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.1.1 Vai trò hợp chất thứ cấp thực vật 2.1.2 Tầm quan trọng nuôi cấy tế bào thực vật sản xuất hợp chất thứ cấp .3 2.1.3 Phương pháp nuôi cấy mô tế bào để sản xuất hợp chất thứ cấp .4 2.1.4 Các nghiên cứu sản xuất hợp chất thứ cấp nuôi cấy mô tế bào thực vật .6 2.2 Ứng dụng chất kích ứng để cải thiện tích lũy hợp chất thứ cấp ni cấy tế bào thực vật 2.2.1 Giới thiệu chất kích ứng 2.2.2 Cơ chế tác động 2.2.3 Một số nghiên cứu ứng dụng chất kích ứng ni cấy tế bào thực vật 10 2.3 Cây cà gai leo 11 2.3.1 Giới thiệu chung cà gai leo 11 2.3.2 Một số nghiên cứu khác cà gai leo 13 2.4 Đánh giá tích lũy hợp chất thứ cấp qua thử nghiệm hoạt tính sinh học chiết xuất dược liệu 14 iv 2.4.1 Xác định hoạt tính chống oxy hóa in vitro thơng qua q trình peroxy hóa lipit tế bào gan chuột 2.4.2 14 Đánh giá tác dụng bảo vệ gan chiết xuất dược liệu chuột bị nhiễm độc CCl4 in vivo .15 2.4.3 Một số nghiên cứu tác dụng bảo vệ gan chiết xuất dược liệu 15 Phần Đối tượng, nội dung phương pháp nghiên cứu .17 3.1 Đối tượng, địa điểm thời gian nghiên cứu 17 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu .17 3.1.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 17 3.2 Nội dung nghiên cứu 17 3.2.1 Xác định mơi trường thích hợp cảm ứng tạo callus cà gai leo 17 3.2.2 Nhân sinh khối callus 18 3.2.3 Đánh giá tích lũy hoạt chất thứ cấp thơng qua thử nghiệm hoạt tính sinh học dịch chiết callus, dịch chiết cà gai leo tự nhiên 20 3.3 Phương pháp nghiên cứu 22 3.3.1 Phương pháp nuôi cấy in vitro 22 3.3.2 Nuôi cấy in vitro 22 3.3.3 Nuôi cấy callus, nhân sinh khối callus 23 3.3.4 Đánh giá hoạt tính sinh học dịch chiết callus 23 3.3.5 Xử lý số liệu .24 Phần Kết thảo luận 25 4.1 Kết 25 4.1.1 Xác định môi trường thích hợp cảm ứng tạo callus cà gai leo 25 4.1.2 Nhân sinh khối callus 33 4.1.3 Đánh giá tích lũy hợp chất thứ cấp qua thử nghiệm hoạt tính sinh học dịch chiết callus, dịch chiết cà gai leo tự nhiên .45 4.2 Thảo luận 49 4.2.1 Cảm ứng tạo callus .49 4.2.2 Nhân sinh khối callus 50 4.2.3 Đánh giá tích lũy hợp chất thứ cấp qua thử nghiệm hoạt tính sinh học dịch chiết callus 52 v Phần Kết luận đề nghị 54 5.1 Kết luận .54 5.2 Đề nghị 54 Tài liệu tham khảo 55 Phụ lục 59 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt αNAANAA αNAA- naphtyl axetic acid BA Benzyl adenine CT Công thức DAM Dialdehyt malonyl ĐC Đối chứng HCTC Hợp chất thứ cấp HTCO Hoạt tính chống oxy hóa LED Light emitting diode LSD5% Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa 5% MS Murashige and Skoog NADCC Sodium dichloroisocyanurate POL Q trình peroxyd hóa lipit TB Trung bình TN Thí nghiệm YE Yeast extract 2,4-D 2,4-Dichlorophenoxyscetic acid vii DANH MỤC BẢNG Bảng 4.1 Ảnh hưởng tổ hợp BA αNAA-NAA đến khả tạo callus từ đoạn thân cà gai leo 25 Bảng 4.2 Ảnh hưởng tổ hợp BA αNAA-NAA đến khả tạo callus từ mảnh cà gai leo 26 Bảng 4.3 Ảnh hưởng tổ hợp BA 2,4-D đến khả tạo callus từ đoạn thân cà gai leo 28 Bảng 4.4 Ảnh hưởng tổ hợp BA 2,4-D đến khả tạo callus từ mảnh cà gai leo 29 Bảng 4.5 Ảnh hưởng tổ hợp BA 2,4-D đến khả tạo callus từ đoạn thân cà gai leo 30 Bảng 4.6 Ảnh hưởng tổ hợp BA 2,4-D đến khả tạo callus từ mảnh cà gai leo 31 Bảng 4.7 Ảnh hưởng môi trường đến nhân sinh khối callus từ đoạn thân cà gai leo 33 Bảng 4.8 Ảnh hưởng môi trường đến nhân sinh khối callus từ mảnh cà gai leo 34 Bảng 4.9 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng đến nhân sinh khối callus từ đoạn thân cà gai leo 35 Bảng 4.10 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng đến nhân sinh khối callus từ mảnh cà gai leo 36 Bảng 4.11 Ảnh hưởng chiếu sáng đèn LED đến khả nhân sinh khối callus từ đoạn thân .37 Bảng 4.12 Ảnh hưởng chiếu sáng đèn LED đến khả nhân sinh khối callus từ mảnh 38 Bảng 4.13 Ảnh hưởng acid salisylic đến khả nhân sinh khối .40 Bảng 4.14 Ảnh hưởng acid salisylic đến khả nhân sinh khối callus môi trường A2 41 Bảng 4.15 Ảnh hưởng chất chiết nấm men đến khả nhân sinh khối callus môi trường A1 42 Bảng 4.16 Ảnh hưởng chất chiết nấm men đến khả nhân sinh khối callus môi trường A2 43 viii Bảng 4.17 Tổng hợp kết yếu tố ảnh hưởng đến nhân sinh khối callus .45 Bảng 4.18 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết cà gai leo 46 Bảng 4.19 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết callus nhân sinh khối mơi trường A2 46 Bảng 4.20 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết callus nhân sinh khối môi trường A2 + g/l nấm men 47 Bảng 4.21 Hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết callus nhân sinh khối mơi trường A2 + 100µM acid salisylic 48 Bảng 4.22 So sánh hoạt tính chống oxy hóa dịch chiết callus, dịch chiết cà gai leo tự nhiên .49 ix

Ngày đăng: 23/11/2023, 08:49

Nguồn tham khảo

Tài liệu tham khảo Loại Chi tiết
1. Bùi Văn Lệ, Nguyễn Ngọc Hồng (2006). Ảnh hưởng của chất điều hòa tăng trưởng thực vật và đường saccharose lên dịch nuôi cấy huyền phù tế bào dừa cạn (Catharanthus roseus).Tạp chí Phát triển Khoa học và Công nghệ.(9). tr. 59-66 Khác
2. Đào Thị Kim Nhung, Đổ Thị Gấm, Đào Thị Hoa, Trần Nam Thái (2006). Khảo sát một số đặc điểm hoá học và tác dụng chống oxy hoá - antioxydant của các hợp chất Flavonoid chiết xuất từ lá cây vải và cây nhãn họ bồ hòn Sapindaceae. Tuyển tập các báo cáo của Hội nghị hoá sinh y dược. tr. 205-214 Khác
3. Đỗ Trung Đàm (2006). Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý của thuốc từ thảo dược. Nhà xuất bản KH & KT, Hà nội. tr. 171-184 Khác
4. Lê Thị Hà Thanh, Đoàn Hữu Nhật Bình, Nguyễn Hoàng Lộc (2009). Sản xuất glycoalkaloid từ tế bào cây cà gai leo (Solanum hainanense Hance). Hội nghị Công nghệ sinh học toàn quốc, Nxb. Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội. tr. 697-700 Khác
5. Lê Thị Thủy Tiên, Bùi Trang Việt, Nguyễn Đức Lượng, (2010). Khảo sát vài yếu tố ảnh hưởng đến sự sinh tổng hợp taxol của các hệ thống tế bào Taxus wallichiana Zucc. in vitro. Tạp chí phát triển KH&CN. 13 (T3-2010). tr. 67-75 Khác
6. Nguyễn Bích Thu, Nguyễn Minh Khai, Phạm Kim Mãn, Đoàn Thị Nhu (2000). Nghiên cứu tác dụng của cà gai leo (Solanum hainanense Hance) trên collagenase. Tạp chí Dược liệu. 05 (05). tr. 149-152 Khác
7. Nguyễn Hữu Thuần Anh (2016). Nghiên cứu ảnh hưởng của một số elicitor đến khả năng tích lũy solasodine trên tế bào in vitro của cây cà gai leo.Luận văn Thạc sỹ. Đại học Huế. tr. 41-66 Khác
8. Nguyễn Ngọc Hồng, Võ Văn Giàu, Huỳnh Ngọc Thụy, Trần Hùng, Hồ Huỳnh Thùy Dương (2010). Nghiên cứu và thử nghiệm hoạt tính bảo vệ tế bào gan ex vivo của cao chiết cây râu mèo. Tạp chí phát triển KH&CN. 13 (T3-2010). tr. 58-65 Khác
9. Nguyễn Quang Thạch, Nguyễn Thị Lý Anh, Phạm Kim Ngọc, Trần Văn Minh, NguyễnThị Phương Thảo (2009). Cơ sở công nghệ sinh học Công nghệ sinh học tế bào. Tập 3, Nhà xuất bản Giáo dục, Hà Nội Khác
10. Nguyễn Quang Trường (1995). Các phương pháp xác định và một số xu hướng nghiên cứu thuốc gắn với quá trình peroxy hóa. Tạp chí dược học. 03. tr. 23 -26 Khác
11. Nguyễn Thị Minh Khai, Phạm Kim Mãn, Nguyễn Bích Thu, Vũ Kim Thu, Phạm Thanh Trúc, Lã Kim Oanh, Nguyễn Văn Mùi, Trịnh Thị Xuân Hòa, Nguyễn Anh Tuấn, Mão NĐ (2001). Nghiên cứu điều chế thuốc Haina điều trị viêm gan B mạn hoạt động từ cà gai leo. Tạp chí Dược liệu. 6 (02). tr. 68-71 Khác
12. Phạm Kim Mãn, Nguyễn Bích Thu, Trần Văn Hanh (1999). Tác dụng chống ung thư của cà gai leo. Thông báo Tạp chí Dược liệu. 03 (04). tr. 126 Khác
13. Phạm Thị Tố Liên, Võ Thị Bạch Mai (2007). Bước đầu nghiên cứu sự tạo dịch treo tế bào cây Đinh lăng (Polyscias fruticosa Harms). Tạp chí phát triển KH &CN. 10 (07). tr. 11-16 Khác
14. Phí Thị Cấm Miện, Trần Văn Thái, Đồng Huy Giới, Bùi Thị Thu Hương, Đỗ Thị Thảo (2017). Đánh giá tác dụng bảo vệ gan của dịch chiết chùm ngây (Moringa oleifera) trên chuột gây tổn thương gan bằng CCl4. Tạp chí khoa học Nông nghiệp Việt Nam 2017. 15 (02). tr. 225-233 Khác
15. Phùng Thị Thu Hà, Phạm Thị Huyền Trang, Nguyễn Hữu Cường (2017). Đặc điểm thực vật học và một số biện pháp kỹ thuật trồng cà gai leo tại Gia Lâm, Hà Nội. Tạp chí khoa học Nông nghiệp Việt Nam 2017. 15 (02). tr. 146-154 Khác
16. Trần Vũ Ngọc Thi (2014). Ảnh hưởng của dịch chiết nấm men lên khả năng tích lũy curcumin của tế bào nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe). Tạp chí Khoa học và Công nghệ, Trường Đại Học Khoa học Huế. 01 (01). tr. 48-58 Khác
17. Viện Dược liệu (1993). Tài nguyên cây thuốc Việt Nam. Nhà xuất bản Khoa học và Kỹ thuật, Hà Nội Khác
18. Võ Châu Tuấn (2014). Nghiên cứu nuôi cấy tế bào cây nghệ đen (Curcuma zedoaria Roscoe) và khảo sát khả năng tích lũy một số hợp chất có hoạt tính sinh học của chúng. Luận văn Thạc sỹ. Đại học Huế. tr. 80-82 Khác
19. Vũ Văn Hợp, Vũ Xuân Phương (2003). Các loài chứa alkaloid trong họ Cà (Solanaceae Juss.) ở Việt Nam. Tạp chí Sinh học. 24 (04). tr. 27-31 Khác

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Bảng 4.1. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.1. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 41)
Hình 4.1. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình 4.1. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 42)
Hình 4.2. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình 4.2. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và αNAA-NAA đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo (Trang 43)
Bảng 4.3. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.3. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 44)
Bảng 4.4. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.4. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo (Trang 45)
Bảng 4.5. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.5. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 46)
Hình 4.5. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình 4.5. Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 47)
Hình 4.6 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình 4.6 Ảnh hưởng của tổ hợp BA và 2,4-D đến khả năng tạo callus từ mảnh lá cà gai leo (Trang 48)
Hình 4.7. Ảnh hưởng của môi trường A 1  (MS + 0,5 mg/l BA + 1,5 mg/l 2,4-D) và A 2  (MS + 0,1 mg/l BA + 1 mg/l - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình 4.7. Ảnh hưởng của môi trường A 1 (MS + 0,5 mg/l BA + 1,5 mg/l 2,4-D) và A 2 (MS + 0,1 mg/l BA + 1 mg/l (Trang 49)
Bảng 4.7. Ảnh hưởng của môi trường đến nhân sinh khối callus từ đoạn thân cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.7. Ảnh hưởng của môi trường đến nhân sinh khối callus từ đoạn thân cà gai leo (Trang 49)
Hình thái callus - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình th ái callus (Trang 50)
Bảng 4.8. Ảnh hưởng của môi trường đến nhân sinh khối callus từ mảnh lá cà gai leo - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.8. Ảnh hưởng của môi trường đến nhân sinh khối callus từ mảnh lá cà gai leo (Trang 50)
Hình thái - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Hình th ái (Trang 51)
Bảng 4.11. Ảnh hưởng của chiếu sáng đèn LED đến khả năng nhân sinh khối callus từ đoạn thân - (Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu nuôi cấy callus cà gai leo (solanum hainanense hance) và ảnh hưởng của chất kích ứng đến sự tích lũy hợp chất thứ cấp trong callus
Bảng 4.11. Ảnh hưởng của chiếu sáng đèn LED đến khả năng nhân sinh khối callus từ đoạn thân (Trang 54)

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w