Nghiên cứu thành phần hoá học của lá cây bàn tay ma heliciopsis lobata (merr ) sleum họ proteaceae ở cao bằng

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƯƠNG LAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY BÀN TAY MA HELICIOPSIS LOTABA (MERR.) SLEUM HỌ PROTEACEAE Ở CAO BẰNG LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC THÁI NGUYÊN - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên Tai ngay!!! Ban co the xoa dong chu nay!!! http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM NGUYỄN THỊ PHƢƠNG LAN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA LÁ CÂY BÀN TAY MA HELICIOPSIS LOTABA (MERR.) SLEUM HỌ PROTEACEAE Ở CAO BẰNG Chuyên ngành : Hóa học Hữu Mã số : 60 44 27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: PGS.TS PHẠM VĂN THỈNH Thái Nguyên - 2010 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1: Các hệ dung môi triển khai SKLM 27 Bảng 2.2: 30 Khối lượng cặn chiết thu từ Bàn tay ma Bảng 2.3: Phát nhóm chất Bàn tay ma Bảng 2.4: Kết thử hoạt tính sinh học dịch chiết từ Bàn tay ma Bảng 3.1 Số liệu phổ C-NMR (CDCl3, 125Mhz) số Các số liệu phổ 1H-NMR 13C-NMR HL-3: 3-Axetyl-6-oxo-spirostan Bàn tay ma Bảng 3.3 Số liệu phổ 13C-NMR (CDCl3, 125Mhz) 1H-NMR HL-4 Bàn tay ma phổ Taraxerol Bảng 3.4 Số liệu phổ 13C-NMR (CDCl3, 125Mhz) 1H-NMR chất HL-5 Bàn tay ma Bảng 3.5 Số liệu phổ 13C-NMR (CDCl3, 125Mhz) 1H-NMR chất EL-2 Bàn tay ma SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1: 34 13 sterol Bàn tay ma Bảng 3.2 33 47 51 59 67 75 Trang Sơ đồ ngâm chiết mẫu Bàn tay ma 29 Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Ảnh 1.1: Ảnh Bàn tay ma Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum 22 Ảnh 1.2: Ảnh Bàn tay ma ……… 22 Hình 2.1 Đường kính vùng ức chế xung quanh giếng thạch 35 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 3.1: Phổ 1H- NMR chất HL- 53 Hình 3.2: Phổ 13 H- NMR chất HL- 54 Hình 3.3: Phổ DEPT chất HL- 55 Hình 3.4: Phổ HSQC chất HL- 56 Hình 3.5: Phổ HMBC chất HL- 57 Hình 3.6: Phổ 1H- NMR chất HL- 61 Hình 3.7: Phổ 13 H- NMR chất HL- 62 Hình 3.8: Phổ DEPT chất HL- 63 Hình 3.9: Phổ HSQC chất HL- 64 Hình 3.10 Phổ HMBC chất HL- 65 Hình 3.11 Phổ 1H- NMR chất HL- 69 Hình 3.12 Phổ 13 H- NMR chất HL- 70 Hình 3.13 Phổ DEPT chất HL- 71 Hình 3.14 Phổ HSQC chất HL- 72 Hình 3.15 Phổ HMBC chất HL- 73 Hình 3.16 Phổ 1H- NMR chất EL-2 77 Hình 3.17 Phổ 13 H- NMR chất EL-2 78 Hình 3.18 Phổ DEPT chất EL-2 79 Hình 3.19 Phổ HSQC chất EL-2 80 Hình 3.20 Phổ HMBC chất EL-2 81 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT CC : Column Chromatography (Sắc ký cột) TLC : Thin-layer Chromatography (Sắc ký lớp mỏng) SKLM : Sắc ký lớp mỏng HPLC : High Performance Liquid Chromatography (Sắc ký lỏng hiệu cao) MS : Mass Spectrometry (Phổ khối lượng) LC-MS : Liqud chromatography –Mass Spectroscopy EI-MS : Electron Impact Mass Spectrometry (Phổ khối va chạm electron) (Bắn phá chùm nguyên tử tốc độ cao) FT-IR : Fourier Transform Infrared Spectroscopy (Phổ hồng ngoại biến đổi Fourie) NMR : Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) H-NMR : Proton Magnetic Resonance Spectrometry (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR : 13 C-Nuclear Magnetic resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân cacbon-13) DEPT : Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC : Heteronuclear Single - Quantum Coherence HMBC : Heteronuclear multiple - Bond Correlation Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỞ ĐẦU Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới gió mùa nên thừa hưởng nguồn thiên nhiên vơ phong phú đa dạng sinh học với nhiều lồi dược liệu q Ngay từ xa xưa, cha ơng ta biết khai thác nguồn tài nguyên quý báu để làm thực phẩm, thuốc chữa bệnh, vật liệu xây dựng nhiên liệu phục vụ đời sống Nền y dược học cổ truyền Việt Nam có lịch sử phát triển từ lâu đời Từ nhiều kỷ nay, chế phẩm y học cổ truyền coi kho tàng dược liệu quí báu Tiếp thu truyền thống quý báu hệ cha ông, ngày nay, Đảng Nhà nước ta xây dựng chiến lược phát triển lâu dài với nhiều sách ưu đãi tạo điều kiện cho ngành Y dược học cổ truyền tiếp tục kế thừa, bảo tồn đồng thời phát huy hết khả tiềm ẩn nhằm xây dựng Y dược học Việt Nam ngày khoa học đại góp phần đắc lực cơng tác chăm sóc sức khoẻ nhân dân Những hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học phân lập từ cỏ từ lâu ứng dụng nhiều ngành công nghiệp, nông nghiệp, chúng sử dụng để sản xuất thuốc chữa bệnh, thuốc bảo vệ thực vật, làm nguyên liệu cho ngành công nghiệp thực phẩm mỹ phẩm… Chế phẩm thảo dược hỗn hợp nhiều hợp chất khác hầu hết trường hợp chưa xác định rõ hoạt chất chất Vì vậy, thuốc sử dụng thảo dược thân thảo dược đối tượng cho nhà khoa học nghiên cứu cách đầy đủ cấu trúc chất có hoạt tính sinh học cao có cỏ Từ định hướng cho việc nghiên cứu, chiết xuất để tìm loại thuốc đường tổng hợp, bán tổng hợp để tạo chất có hoạt tính cao góp phần việc phòng bệnh, chữa bệnh, giảm tỉ lệ tử vong, nâng cao tuổi thọ Vì việc nghiên Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn cứu thành phần hóa học từ cỏ thiên nhiên có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Cây Bàn tay ma có tên khoa học Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum thuộc họ Proteaceae, thuốc dân gian Việt Nam Nghiên cứu sơ tác dụng dược học cho biết, Bàn tay ma có tác dụng kháng sinh mạnh Theo kinh nghiệm dân gian, có tác dụng tiêu độc, hay nhân dân sử dụng để chữa bệnh thấp khớp, nấu nước tắm cho phụ nữ sau sinh đẻ cho khoẻ người đỡ đau nhức, dùng để chữa lao hạch, chữa bệnh lý gan, thận, đặc biệt trường hợp viêm gan cấp mãn tính [1, 2] Cây Bàn tay ma dùng dân gian từ lâu, nghiên cứu thành phần hóa học Bàn tay ma chưa thấy có tài liệu cơng bố Để góp phần làm rõ thành phần hóa học Bàn tay ma, tạo thuận lợi cho việc dùng, sử dụng thuốc làm dược liệu nguyên liệu cho mục đích khác, tơi mạnh dạn chọn đề tài: “Nghiên cứu thành phần hoá học Bàn tay ma - Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum họ Proteaceae Cao Bằng” Đối tượng nghiên cứu Bàn tay ma, mọc hoang, thu hái quanh năm huyện Hịa An tỉnh Cao Bằng Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn CHƢƠNG I: TỔNG QUAN 1.1- HỌ PROTEACEAE VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CHÚNG 1.1.1- Giới thiệu họ Proteaceae Proteaceae họ tương đối lớn, với khoảng 80 chi 1.600 loài Các chi biết đến nhiều bao gồm Protea, Banksia, Embothrium, Grevillea (trải bàn / ngân hoa), Hakea, Dryandra Macadamia [24] Họ tất nhà phân loại học công nhận Được thiết lập vững phân loại học Linnaeus cổ điển, hệ thống phân loại dựa miêu tả theo nhánh hệ thống APG hệ thống APG II công nhận Trong hệ thống đặt Proteales, vị trí lại khơng cố định Proteaceae nói chung thân gỗ hay bụi, ngoại trừ số loài thuộc chi Stirlingia thân thảo Lá chúng thường xanh với dao động mạnh kích thước, hình dáng mép Proteaceae họ chủ yếu Nam bán cầu, với trung tâm đa dạng Australia Nam Phi Nó có miền trung châu Phi, Nam Trung Mỹ, Ấn Độ, miền Đông Đông nam châu Á, đảo châu Đại Dương Chỉ có loài New Zealand, chứng phấn hoa hóa thạch cho thấy trước có nhiều loài Họ Proteaceae chia thành phân họ, bao gồm: Bellendenoideae, Persoonioideae, Symphionematoideae, Proteoideae Grevilleoideae Có nhiều lồi thuộc họ Proteaceae sử dụng y học dân gian nhiều dân tộc, nước Châu Phi, Châu Mỹ La tinh, Châu Á Đông Nam Á Tại Chile New Zealand, hai lồi chi Macadamia trồng quy mơ thương mại để lấy hạt ăn Gevuina avellana (phỉ Chile) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn trồng để lấy hạt, hạt ăn sử dụng cơng nghiệp dược phẩm để dưỡng da tính chất giữ ẩm nó, thành phần kem chống nắng Ở Chile có lồi Lomatia ferruginea, Lomatia hirsuta có giá trị chúng tạo cảnh quan đẹp kỳ lạ kiểu nhiệt đới khu vực có khí hậu ơn đới Chúng du nhập vào Tây Âu miền tây Hoa Kỳ Embothrium coccineum (cây lửa Chile hay Notro) có giá trị cảnh quan có hoa màu đỏ thẫm, phát triển tốt Quốc đảo Anh thấy quần đảo Faroe vĩ độ 62° vĩ bắc Nhiều loài Proteaceae trồng vườn ươm, thực vật hàng rào tán hoa bật chúng Một vài loài có tầm quan trọng ngành trồng hoa, đặc biệt vài loài chi Banksia Protea Các loài khác, nhỏ trồng vài nơi giới Telopea speciosissima (waratah), từ dãy núi New South Wales, Australia Một vài lồi khí hậu ơn đới trồng quy mơ địa phương Australia vẻ đẹp chúng: Persoonia pinifolia (geebung thơng) hoa vàng chói lọi giống nho Adenanthos sericeus (cây bụi quăn) trồng mầu lịe loẹt hoa nhỏ màu đỏ hay da cam chúng Hicksbeachia pinnatifolia trồng ăn [6-7], [10], [12-14], [17- 23] 1.1.2 Những nghiên cứu hóa học thực vật họ Proteaceae Cho đến có nhiều lồi thực vật họ Proteaceae nghiên cứu thành phần hoá học, phân lập nhận dạng số chất, thuộc nhóm chất khác phổ biến ancaloit, glucosit, axit hữu cơ, flavonoit, phenol steroit [9], [11], [16] 1.1.2.1- Các hợp chất ancaloit đƣợc phân lập từ họ Proteaceae Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Trong số chất phân lập từ lồi thuộc họ Proteaceae kiểu cấu trúc hợp chất ancaloit tìm thấy nhiều Chủ yếu cấu trúc ancaloit khung tropan [9], [4] Mười bốn ancaloit biết đến họ Proteaceae phân lập từ búp non hoa loài Bellendena montanat Tasmania tác giả IRC Bick, Gillard JW H Leow [25] Trong đó, phổ biến cấu trúc bellendine (1) dẫn xuất bao gồm: 2,3dihydrobellendine (2); 5,11-dihydroisobellendine(3); isobellendine (5); 2,3epidihydrobellendine (4); α -acetoxy-6 β- hydroxytropane (6); β -acetoxy3 α -isobutoxytropane (7); 3α-acetoxy-6β-isobutoxytropane (8); darlingine (9); 2,3-Dihydrodarlingine (10) [9] O CH N O O CH N O H3C H 3C Dạng (+) Bellendinne (2,3-Dihydrobellendine) O O CH CH3 N O N H3C O H 3C ( 5,11-Dihydroisobellendine) (2,3-Epidihydrobellendine) Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn vòng furan tham gia vào liên kết este với gốc axetat (Xem hình 3.16; 3.17; 3.18; 3.19; 3.20: phổ 1H - NMR; 13 C-NMR; DEPT ; HSQC; HMBC chất EL- 2) Từ kiện phổ cộng hưởng từ hạt nhân, DEPT, HSQC, HMBC so sánh với kết tính tốn phần mềm ACD/NMR mạnh dạn đề nghị xây dựng công thức cấu tạo chất EL-2 este đặt tên cho Heliciopsis II Cơng thức hợp chất sau: CH3 17 O 12 O 11 13 CH3 16 18 14 15 10 NH2 O 1' C O 2' CH3 Bảng 3.5 Số liệu phổ chất EL-2 số liệu phổ phần mềm ACD EL- Bàn tay ma Heliciopsis lobata (Merr.) Sleum PHỔ CỦA CHẤT EL.2 Vị trí C δC/H ppm 220,7 1,35/35,3 1,53; 2,18/23,95 1,92; 2,40/25,2 (HSQC) Tương tác C  H ( H C) (HMBC) 1,92; 1,82; 1,25 3,65; 3,90 1,60 1,15; 2,25; 1,60 DEPT Phần mềm ACD chất EL-2 C CH2 CH2 CH2 215,4 39,1 22,9 27,7 75 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn PHỔ CỦA CHẤT EL.2 DEPT Phần mềm ACD chất EL-2 CH CH2 42,6 26,4 1,70; 1,15; 1,10; CH2 35,8 1,25; C 38,6 CH 46,1 C 60,4 3,65; 3,90; 1,39 CH2 13,4 0,72; 1,72/38,6 1.10 CH2 37,2 77,9 1,53; 2,18 ;1,92 C 78,4 CH 60,4 CH 72,0 Tương tác C  H ( H C) (HMBC) 1,10;1,70;1,92;2,40 1.10; 0,72 Vị trí C δC/H ppm 1,15/52,6 1,30/18,3 1,39;1,60;1,70;1,82/ 27,5 36,2 2,30/39,1 10 58,6 1,92; 2,40; 1,70; 1,30; 1.1 1,15;1.70; 1,92;2,40 11 1,50;1,70/17,3 12 13 (HSQC) 14 1,25/46,5 15 3,85/70,6 3,65; 3,90; 0,85;1,10; 1,35;1,70 1,70;1,25;1,39;1,70 16 3,65;3,90/72,4 17,2; 35,3; 46,5 CH2 72,3 17 1,10/18,0 58,6;52,6;38,6; 39,1 CH3 22,2 18 0,85/17,2 35,3;46,5; 72,4 CH3 16,8 1' 171,1 3,65;3,90;2,07 C 170,3 2' 2,07/20,8 77,9; 171,7 CH3 22,2 76 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Hình 3.16 77 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Hình 3.17 78 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Ngun http://www.lrc-tnu.edu.vn Hình 3.18 79 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Hình 3.19 80 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Ngun http://www.lrc-tnu.edu.vn 81 Hình 3.20 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn KẾT LUẬN 1- Lần đầu tiên, Bàn tay ma rừng núi phía bắc Việt Nam sàng lọc hóa thực vật cho biết Bàn tay ma có lớp chất sau : Steroit, glycosit, triterpen, lipit, este 2- Các dịch chiết : n–hexan, EtOAc, BuOH MeOH Bàn tay ma có tác dụng kháng vi sinh vật thử gồm : + Vi khuẩn Gr (-) Escherichia coli + Vi khuẩn: Salmonella spp + Vi khuẩn : Streptococcus pyogenes + Vi khuẩn: Shigella spp + Vi khuẩn Gr (+) Staphylococcus auresu 3- Đo phân tích phổ IR, MS, NMR, HSQC, HMBC chất nói nhận dạng chất gồm : -sitosterol, Stigmast-5,22-dien-24R-3β-ol, β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit, 3-Axetyl- 6- oxo - spirostan, Taraxerol 4- Từ Bàn tay ma, lần Việt Nam phân lập hợp chất : 3-Axetyl-6-oxo- spirostan; Taraxerol ; Heliciopsis I, Heliciopsis II Cấu trúc Heliciopsis I, Heliciopsis II khẳng định số vật lý số liệu phổ đại : IR, NMR, HSQC, HMBC Tuy nhiên, để khẳng định cấu trúc xác nó, cần phải tiếp tục nghiên cứu KIẾN NGHỊ Cây Bàn tay ma thuốc quý có nhiều tác dụng y học Vì vậy, tơi đề nghị cấp có thẩm quyền tiếp tục cho nghiên cứu cách sâu rộng Bàn tay ma nhằm phục vụ tốt cơng tác chăm sóc sức khoẻ cho nhân dân 82 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN VĂN Phạm Văn Thỉnh, Nguyễn Thị Phương Lan (2010), CÁC STEROIT PHÂN LẬP TỪ LÁ CÂY BÀN TAY MA - HELICIOPSIS LOTABA ( MERR.) SLEUM, Tạp chí Khoa học Công nghệ Đại học Thái Nguyên, Tập 70- Số năm 2010 83 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn TÀI LIỆU THAM KHẢO A TIẾNG VIỆT 1- Võ Văn Chi (1999),"Từ điển thuốc Việt Nam", Nhà xuất Y học – TPHCM, 1999, T.70 - Nông Phúc Chinh (2009), “Cây Bàn tay ma –cây thuốc chữa bệnh gan, thận độc đáo đồng bào dân tộc Bắc Kạn”, Tạp chí Dược liệu Cuộc sống (8), năm 2009, T 142 3- Nguyễn Văn Đàn, Nguyễn Viết Tựu (1985), “Phương pháp nghiên cứu hóa học thuốc’’, Nhà xuất Y học, Thành phố Hồ Chí Minh 4- Phạm Hữu Điển, Nguyễn Quyết Tiến (2008), “Giáo trình Hố Dược”, Nhà xuất Đại học Sư phạm Hà Nội - 2008 5- Nguyễn Hữu Đĩnh -Trần Thị Đà (1999), “Ứng dụng số phương pháp phổ nghiên cứu cấu trúc phân tử ”, Nhà xuất Giáo dục - 1999 , T 65 B TIẾNG ANH 6- A.M Fuss, S.J Pattison, D Aspinall, M Sedgley, “Shoot growth in relation to cut flower production of Banksia coccinea and Banksia menziesii (Proteaceae)”, Scientia Horticulturae, Volume 49, Issues 3-4, March 1992, Pages 323-334 7- A J Gordon, “The impact of the Hakea seed-moth, Carposina autologa (Carposinidae) on the canopy-stored seeds of the weed Hakea sericea (Proteaceae)”, Agriculture, Ecosystems & Environment, Volume 45, Issues 12, May 1993, Pages 105-113 - Bao Kun ZHU, Hong Bin ZHANG (2005), Chemical letters Vol 16, (2), pp 143-146 - 2005 - Chapman & Hall/CRC, DNP on CD – ROM, 1982-2006, Version 15:1 84 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 10- D.M.W Anderson, G Leon De Pinto, “Gum exudates from the genus Grevillea(Proteaceae)”, Carbohydrate Polymers, Volume 2, Issue 1, 1982, Pages 19-24 11- Dan Li, Ming-Sheng Liu, Zhan-Lin Li, Kang Sheng-Li, Hui-Ming Hua (2008), “Research on the chemical composition of Heliciopsis lobata’’, China journal of Chinese materia medica in 2008; 33 (4): 409-11 12- G Beaton, Gretna Weste, “A new species of Banksiamyces on Banksia saxicola(Proteaceae)”, Transactions of the British Mycological Society, Volume 83, Issue 3, 1984, Pages 533-535 13- H.-J Hawkins, J McKenzie, J Rohwer, M.D Cramer “Timing of organic acid storage and exudation events in cluster roots of Proteaceae and Fabaceae using 31 P- and 13 C-NMR spectrometry”, South African Journal of Botany, Volume 75, Issue 2, April 2009, Page 404 14- K Coetzer, E.T.F Witkowski, B Erasmus, “Conservation biology and population dynamics of Leucospermum gerrardii Stapf (Proteaceae) in the Dr Hamilton Protea Reserve, Mpumalanga”, South African Journal of Botany, Volume 74, Issue 2, April 2008, Pages 363-364 15 - L.Jorhn Good and Toshihino Akihisa,“Analys of sterol”, Blackie Academic & profrssional: London Weinheim – New Yord – Tokyo – Melbourne –Madras - 1997 16 - Li D , MS Liu , Li ZL , Kang SL , Hua HM, “A new phenolic glucoside from the leaves of Heliciopsis lobata”, J Asian Nat Prod Res 2006 Jun; 8(4): 373-7 17- M.J Priest, “Species of Periconiella and Stenella on proteaceae in eastern Australia”, Mycological Research, Volume 95, Issue 8, August 1991, Pages 924-927 18- S Erazo, R García, N Backhouse, I Lemus I, C Delporte, C Andrade, “ Phytochemical and biological study of Radal Lomatia hirsuta Proteaceae)” , 85 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Journal of Ethnopharmacology, Volume 57, Issue 2, July 1997, Pages 81-83 19- Stephen Blackmore, Susan H Barnes, “ Garside's rule and the microspore tetrads of Grevillea rosmarinifolia A Cunningham and Dryandra polycephala Bentham (Proteaceae)”, Review of Palaeobotany and Palynology, Volume 85, Issues 1-2, March 1995, Pages 111-121 20- Santi Krisantini, Margaret Johnston, Richard R Williams, Christine Beveridge, “Adventitious root formation in Grevillea (Proteaceae), an Australian native species”, Scientia Horticulturae, Volume 107, Issue 2, 10 January 2006, Pages 171-175 21- R L Kluge, S Neser, “Biological control of Hakea sericea (Proteaceae) in South Africa”, Agriculture, Ecosystems & Environment, Volume 37, Issues 1-3, October 1991, Pages 91-113 22- Tony D Auld, Andrew J Denham, “ The impact of seed predation by mammals on post-fire seed accumulation in the endangered shrub Grevillea caleyi (Proteaceae)” , Biological Conservation, Volume 97, Issue 3, February 2001,Pages377-385 23- Wendy K Swenson, John E Dunn, Eric E Conn, “Cyanogenesis in the proteaceae”, Phytochemistry, Volume 28, Issue 3, 1989, Pages 821-823 C- CÁC TRANG WEB 24 - http://vi.wikipedia.org/wiki/H%E1%BB%8D_Qu%E1%BA%AFn_hoa 25- http://www.en.wikipedia.org/wiki/ancaloit 26 - http://en.wikipedia.org/wiki/Knightia_(plant) 27- http://en.wikipedia.org/wiki/Myricitrin 28 - http://en.wikipedia.org/wiki/Macadamia 29 - http://en.wikipedia.org/wiki/Grevillea 30 - http://www.drugfuture.com/chemdata/Taraxerol.html 31 - http://zipcodezoo.com/Plants/K/Knightia_strobilina/ 86 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn PHỤ LỤC Thử hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định 89 Phổ chất………… 2.1 Hợp chất HL-1: -sitosterol 2.1.1 Phổ 1H-NMR 90 2.1.2 Phổ 13C-NMR 91 2.1.3 Phổ DEPT 92 2.2 Hợp chất HL-2: Stigmast-5,22-dien-24R-3 β –ol 2.2.1 Phổ 1H-NMR 93 2.2.2 Phổ 13C-NMR 94 2.2.3 Phổ DEPT 95 2.3 Hợp chất EL-1: β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit 2.3.1 Phổ 1H-NMR 96 2.3.2 Phổ 13C-NMR 97 2.3.3 Phổ DEPT 98 2.4 Hợp chất HL-3 : 3- Axetyl- - oxo – spirostan 2.4.1 Phổ FT-IR 99 2.4.2 Phổ EI-MS 100 2.4.3 Phổ 1H-NMR 101 2.4.4 Phổ 13C-NMR 106 2.4.5 Phổ DEPT 107 2.4.6.Phổ HSQC 109 87 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.4.7 Phổ HMBC 2.5 Hợp chất HL-4: 111 Taraxerol 2.5.1 Phổ EI-MS 112 2.5.2 Phổ 1H-NMR 114 2.5.3 Phổ 13C-NMR 117 2.5.4 Phổ DEPT 118 2.5.5 Phổ HSQC 120 2.5.6 Phổ HMBC 121 2.6 Hợp chất HL-5: Heliciopsis I 2.6.1 Phổ FT-IR 123 2.6.2 Phổ EI-MS 124 2.6.3 Phổ 1H-NMR 126 2.6.4 Phổ 13C-NMR 130 2.6.5 Phổ DEPT 132 2.6.6 Phổ HSQC 134 2.6.7 Phổ HMBC 136 2.7 Hợp chất EL-2 : Heliciopsis II 2.7.1 Phổ FT-IR 139 2.7.2 Phổ 1H-NMR 140 2.7.3 Phổ 13C-NMR 143 2.7.4 Phổ DEPT 144 2.7.5 Phổ HSQC 146 2.7.6 Phổ HMBC 147 88 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 89 Số hóa Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn