Xây dựng quy trình nhân thân rễ in vitro lan một lá nervilia fordii bằng hệ thống ngập chìm tạm thời

BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN THÂN RỄ IN VITRO LAN MỘT LÁ (Nervilia fordii) BẰNG HỆ THỐNG NGẬP CHÌM TẠM THỜI THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2019 BAN QUẢN LÝ KHU NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO TP.HCM TRUNG TÂM ƯƠM TẠO DOANH NGHIỆP NÔNG NGHIỆP CÔNG NGHỆ CAO BÁO CÁO NGHIỆM THU NHIỆM VỤ KHOA HỌC CÔNG NGHỆ CẤP CƠ SỞ XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN THÂN RỄ IN VITRO LAN MỘT LÁ (Nervilia fordii) BẰNG HỆ THỐNG NGẬP CHÌM TẠM THỜI CHỦ NHIỆM CƠ QUAN CHỦ TRÌ Nguyễn Văn Tồn THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/2019 MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG iv DANH MỤC HÌNH v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vi THÔNG TIN CHUNG vii TÓM TẮT KẾT QUẢ ix PHẦN MỞ ĐẦU Chương I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Lan .3 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Đặc điểm sinh học 1.1.3 Thành phần hóa học 1.1.4 Hoạt tính chất chứa Lan 1.1.5 Công dụng sử dụng y học cổ truyển 1.2 Hiện trạng cơng trình nghiên cứu liên quan .6 1.2.1 Tình hình nghiên cứu nhân giống in vitro Lan 1.2.2 Những nghiên cứu hệ thống ngập chìm tạm thời Chương II NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Nội dung nghiên cứu 12 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 12 2.3 Vật liệu nghiên cứu .12 2.4 Phương pháp nghiên cứu 13 i 2.4.1 Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng chế độ ni cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích) đến khả nhân nhanh sinh khối Lan hệ thống nuôi cấy ngập chìm tạm thời 13 2.4.2 Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả tích lũy dược chất sinh khối Lan 16 2.5 Phương pháp tiến hành .18 2.5.1 Khảo sát ảnh hưởng chế độ nuôi cấy 19 2.5.2 Khảo sát ảnh hưởng thành phần mơi trường đến khả tích lũy dược chất sinh khối Lan 19 2.5.3 Chỉ tiêu theo dõi 19 2.6 Phương pháp phân tích số liệu 20 Chương III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 21 3.1 Ảnh hưởng chế độ nuôi cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích) đến khả nhân nhanh sinh khối Lan hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời21 3.1.1 Ảnh hưởng thời gian ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan 21 3.1.2 Ảnh hưởng số lần ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan 22 3.1.3 Ảnh hưởng thể tích môi trường nuôi cấy đến khả nhân thân rễ Lan 23 3.2 Ảnh hưởng thành phần mơi trường đến khả tích lũy dược chất sinh khối Lan .25 3.2.1 Ảnh hưởng nước dừa tươi lên khả nhân thân rễ Lan 25 3.2.2 Ảnh hưởng nồng độ đường lên khả nhân thân rễ Lan 27 Chương IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 29 ii 4.1 Kết luận 29 4.2 Đề nghị 29 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 PHỤ LỤC XỬ LÝ SỐ LIỆU THỐNG KÊ 33 iii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thí nghiệm ảnh hưởng thời gian ngập chìm đến khả nhân thân rễ 13 Bảng 2.2 Thí nghiệm ảnh hưởng số lần ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan Một 14 Bảng 2.3 Thí nghiệm ảnh hưởng thể tích mơi trường ni cấy đến khả nhân sinh khối thân rễ 15 Bảng 2.4 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ nước dừa tươi đến khả nhân thân rễ 16 Bảng 2.5 Thí nghiệm ảnh hưởng nồng độ đường đến khả nhân thân rễ 17 Bảng 3.1 Ảnh hưởng thời gian ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 21 Bảng 3.2 Ảnh hưởng số lần ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 22 Bảng 3.3 Ảnh hưởng thể tích mơi trường ni cấy đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 23 Bảng 3.4 Ảnh hưởng nước dừa tươi đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 25 iv DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây Lan N fordii Hình 1.2 Thân rễ Lan N fordii Hình 2.1 Cụm thân rễ Lan 12 Hình 2.2 Hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời Platima 19 Hình 3.1 Ảnh hưởng thời gian ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan 22 Hình 3.2 Ảnh hưởng số lần ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 23 Hình 3.3 Ảnh hưởng thể tích mơi trường ni cấy đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 24 Hình 3.4 Ảnh hưởng nước dừa tươi đến khả nhân thân rễ Lan sau 10 tuần nuôi cấy 26 Hình 3.5 Ảnh hưởng nước dừa tươi đến khả nhân thân rễ Lan sau 12 tuần nuôi cấy 26 Hình 3.6 Ảnh hưởng nồng độ đường đến thân rễ Lan sau tuần nuôi cấy 28 v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BAP N – – Benzyladenine HSN Hệ số nhân IAA Indol acetic acid IBA – Indolebutyric acid MS Murashige and Skoog NAA α – Naphthaleneacetic acid TDZ Thidiazuron vi THÔNG TIN CHUNG Tên đề tài: Xây dựng quy trình nhân thân rễ in vitro Lan (Nervilia fordii) hệ thống ngập chìm tạm thời  Chủ nhiệm: Họ tên: Nguyễn Văn Tồn Năm sinh: 02/03/1983 Giới tính: Nam Học vị: Cử nhân; Chuyên ngành: Sinh học; Năm đạt học vị: 2006 Chức vụ: Trưởng phịng Hỗ trợ Cơng nghệ Tế bào Thực vật Tên quan công tác: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp NNCNC Địa quan: Ấp 1, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TP.HCM Điện thoại quan: 028 62646103 ; Fax: 028 62646104 Địa nhà riêng: 120 đường 489, ấp 2, xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TP.HCM Điện thoại nhà riêng: ĐTDĐ: 0792 816 981 E-mail: nguyenvantoan0203@yahoo.com.vn Cơ quan chủ trì: Trung tâm Ươm tạo Doanh nghiệp NN CNC  Thời gian thực hiện: 12 tháng (từ tháng 01 đến tháng 12 năm 2019)  Kinh phí duyệt: 280.533.233 đồng Nội dung: Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng chế độ nuôi cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích) đến khả nhân nhanh sinh khối thân rễ Lan hệ thống ni cấy ngập chìm tạm thời Thời gian thực hiện: 02/2019 đến 09/2019 Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả tích lũy dược chất sinh khối Lan Thời gian thực hiện: 08/2019 đến 12/2019 Sản phẩm nhiệm vụ: Báo cáo trình bày khoa học, số liệu phân tích phần mềm xử lý thống kê hội đồng thơng qua vii Quy trình nhân sinh khối Lan (Quy trình nhân sinh khối Lan lá, sinh khối thu có hàm lượng dược tính tương đương gần với sinh khối thu hái tự nhiên) 02 – 03 kg thân rễ tươi Lan Bảng tiến độ thực nhiệm vụ STT Nội dung Kết Người Thời gian thực thực Nội dung 1: Khảo sát ảnh hưởng chế độ nuôi cấy (Thời gian ngập chìm, số lần ngập chìm thể tích) đến khả nhân nhanh sinh khối Lan hệ thống ni cấy Hồn thành 100% Nguyễn Văn Tồn 02/2019 đến 09/2019 ngập chìm tạm thời Nội dung 2: Khảo sát ảnh hưởng thành phần môi trường đến khả tích lũy dược chất sinh khối Lan Hoàn thành 100% Hoàn Viết báo cáo thành 100% viii Nguyễn Văn Toàn Nguyễn Văn Toàn 08/2019 đến 12/2019 12/2019 15 Om Prakash, Amit Kumar, Pawan Kumar, Ajeet, 2013 Anticancer Potential of Plants and Natural Products: A Review American Journal of Pharmacological Sciences, (6), pp 104-115 16 Overbeek van J, Conklin M, Blakeslee A F, 1941 Factors in coconut milk essential forgrowth and development of very young Datura embryos, Science, 94, pp 350-351 17 Pan Xue-feng , Fu Shi-qin , Dai Wei-duan,2001 In vitro Culture of Nervilia fordii Leaves and Plant Regeneration Natural sciece journal of Hainan University, vol 19 (4) 18 Sondahl M P., Nakamicra F., Medincefilho M P., Carvollho A., Fazuou L C., and Caslo W M.,1989 Coffee Handbook of Plant Cell Culture Volumen III chapter 21 19 Teisson, C and Alvard, D, 1995 A new concept of plant in vitro cultivation liquid medium: temporary immersion, in Current Issues in Plant Molecular and [11] Cellular Biology (Terzi, M., Cella, R., and Falavigna, A., eds.) Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, The Netherlands, pp 105–110 20 Teruyuki N, 1999 Effect of Sugar Concentration on Bulbil Formation In vitro and on Growth after Acclimatization in Narcissus tazetta L var chinensis Roem, J Shita, Vol.11 (1):16-21 21 Yong J W H., Ge L., Ng Y F., Tan S N, 2009 The chemical composition abd biology properties of coconut (Cocos mucifera L.) water, Molecules 14, pp 5144-5164 22 Zhen HS , Qiu Q , Mo HH , Yuan YF , Zhou YY , Huang MQ, 2010 Studies on the chemical constituents of the petroleum ether portion of Nervilia fordii Journal of Chinese Medicinal Materials vol 33(5):717-719 23 Zhang L, Zhu CC, Zhao ZX, Lin CZ, 2011.Simultaneous determination of seven flavonoids in Nervilia fordii with HPLC PublMed, 46(10):1237-40 24 Zhaoyu Huang, Sue-zhen Su, Fu Yang, and Qiuyan Qin, 2012 Research on the Rhizome Proliferation of the Nervilis Fordii Schlecht in Different Condition Springer, CCIS 267, pp 568–573, 2012 32 PHỤ LỤC II XỬ LÝ SỐ LIỆU THỐNG KÊ Ảnh hưởng thời gian ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan ‘Trong luong tuoi’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 123 Number of Observations Read 12 Number of Observations Used 12 ‘Trong luong tuoi’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 74.27500000 14.85500000 5.06 0.0367 Error 17.62166667 2.93694444 Corrected Total 11 91.89666667 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.808245 5.659059 1.713752 30.28333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 36.22333333 12.07444444 4.11 0.0665 T 38.05166667 19.02583333 6.48 0.0317 ‘Trong luong tuoi’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 2.936944 Critical Value of t 2.44691 Least Significant Difference 2.9652 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 32.125 A A 30.850 B 27.875 ‘Trong luong kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 123 Number of Observations Read 12 Number of Observations Used 12 ‘Trong luong kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.88966667 0.17793333 1.44 0.3333 Error 0.74380000 0.12396667 Corrected Total 11 1.63346667 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.544649 7.760963 0.352089 4.536667 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 0.46440000 0.15480000 1.25 0.3723 T 0.42526667 0.21263333 1.72 0.2575 ‘Trong luong kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.123967 Critical Value of t 2.44691 Least Significant Difference 0.6092 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 4.7100 A A 4.6250 A A 4.2750 33 ‘ti le tuoi/kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 10 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 123 Number of Observations Read 12 Number of Observations Used 12 ‘ti le tuoi/kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 11 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 0.48301667 0.09660333 0.48 0.7804 Error 1.20495000 0.20082500 Corrected Total 11 1.68796667 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.286153 6.710282 0.448135 6.678333 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 0.28350000 0.09450000 0.47 0.7138 T 0.19951667 0.09975833 0.50 0.6315 ‘ti le tuoi/kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 12 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.200825 Critical Value of t 3.70743 Least Significant Difference 1.1748 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.8425 A A 6.6650 A A 6.5275 ‘ti le tuoi/kho’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 13 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.200825 Critical Value of t 2.44691 Least Significant Difference 0.7754 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.8425 A A 6.6650 A A 6.5275 ‘he so nhan’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 14 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 123 Number of Observations Read 12 Number of Observations Used 12 ‘he so nhan’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 15 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 2.97100000 0.59420000 5.06 0.0367 Error 0.70486667 0.11747778 Corrected Total 11 3.67586667 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.808245 5.659059 0.342750 6.056667 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 1.44893333 0.48297778 4.11 0.0665 T 1.52206667 0.76103333 6.48 0.0317 ‘he so nhan’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 16 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 34 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.117478 Critical Value of t 3.70743 Least Significant Difference 0.8985 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.4250 A A 6.1700 A A 5.5750 ‘he so nhan’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 17 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.117478 Critical Value of t 2.44691 Least Significant Difference 0.593 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.4250 A A 6.1700 B 5.5750 Ảnh hưởng số lần ngập chìm đến khả nhân thân rễ Lan ‘trong luong tuoi 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 18 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 1234 Number of Observations Read 16 Number of Observations Used 16 ‘trong luong tuoi 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 19 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 1129.910000 188.318333 28.34 F K 5.002500 1.667500 0.25 0.8587 T 1124.907500 374.969167 56.43 F Model 27.95625000 4.65937500 141.55 F K 0.58875000 0.19625000 5.96 0.0160 T 27.36750000 9.12250000 277.14 F Model 0.46518750 0.07753125 0.54 0.7635 Error 1.28155625 0.14239514 Corrected Total 15 1.74674375 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.266317 5.522405 0.377353 6.833125 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 0.23511875 0.07837292 0.55 0.6604 T 0.23006875 0.07668958 0.54 0.6676 ‘ti le tuoi kho 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 28 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate 36 Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.142395 Critical Value of t 3.24984 Least Significant Difference 0.8671 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 7.0325 A A 6.8150 A A 6.7650 A A 6.7200 4 ‘ti le tuoi kho 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 29 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.142395 Critical Value of t 2.26216 Least Significant Difference 0.6036 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 7.0325 A A 6.8150 A A 6.7650 A A 6.7200 4 ‘he so nhan 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 30 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 1234 Number of Observations Read 16 Number of Observations Used 16 ‘he so nhan 1’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 31 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 45.19640000 7.53273333 28.34 F K 0.20010000 0.06670000 0.25 0.8587 T 44.99630000 14.99876667 56.43 F Model 6160.328750 1026.721458 203.55 F K 203.806875 67.935625 13.47 0.0011 T 5956.521875 1985.507292 393.64 F Model 111.0134375 18.5022396 439.48 F K 3.2479687 1.0826562 25.72 F K 0.14595000 0.04865000 1.03 0.4245 T 0.47895000 0.15965000 3.38 0.0679 ‘ti le tuoi/kho 2’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 44 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.047233 Critical Value of t 3.24984 Least Significant Difference 0.4994 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 7.0925 A A 7.0250 4 A A 7.0125 A A 6.6500 ‘ti le tuoi/kho 2’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 45 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 39 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.047233 Critical Value of t 2.26216 Least Significant Difference 0.3476 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 7.0925 A A 7.0250 4 A A 7.0125 B 6.6500 ‘he so nhan 2’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 46 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 1234 Number of Observations Read 16 Number of Observations Used 16 ‘he so nhan 2’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 47 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 246.4131500 41.0688583 203.55 F K 8.1522750 2.7174250 13.47 0.0011 T 238.2608750 79.4202917 393.64 F Model 502.1750000 83.6958333 73.40 F K 8.1125000 2.7041667 2.37 0.1382 T 494.0625000 164.6875000 144.43 F Model 11.05000000 1.84166667 72.86 F K 0.22250000 0.07416667 2.93 0.0918 T 10.82750000 3.60916667 142.78 F Model 1.84470000 0.30745000 1.96 0.1753 Error 1.41327500 0.15703056 Corrected Total 15 3.25797500 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.566211 6.689526 0.396271 5.923750 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 0.92567500 0.30855833 1.96 0.1899 T 0.91902500 0.30634167 1.95 0.1920 ‘ti le tuoi kho 3’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 60 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.157031 Critical Value of t 3.24984 Least Significant Difference 0.9106 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.1825 4 A A 6.1050 A A 5.8325 A A 5.5750 ‘ti le tuoi kho 3’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 61 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom Error Mean Square 0.157031 Critical Value of t 2.26216 Least Significant Difference 0.6339 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 6.1825 4 A A 6.1050 A A 5.8325 A A 5.5750 42 ‘he so nhan 3’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 62 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 1234 Number of Observations Read 16 Number of Observations Used 16 ‘he so nhan 3’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 63 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 20.08700000 3.34783333 73.40 F K 0.32450000 0.10816667 2.37 0.1382 T 19.76250000 6.58750000 144.43 F Model 673.5050000 96.2150000 120.56 F K 2.0580000 0.6860000 0.86 0.4884 T 671.4470000 167.8617500 210.33 F Model 21.34800000 3.04971429 55.12 F K 0.23600000 0.07866667 1.42 0.2848 T 21.11200000 5.27800000 95.39 F Model 1.69127000 0.24161000 1.68 0.2057 Error 12 1.72861000 0.14405083 Corrected Total 19 3.41988000 R-Square Coeff Var Root MSE Y Mean 0.494541 6.573264 0.379540 5.774000 Source DF Anova SS Mean Square F Value Pr > F K 0.24944000 0.08314667 0.58 0.6410 T 1.44183000 0.36045750 2.50 0.0980 ‘ti le tuoi/kho 4’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 76 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.01 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.144051 Critical Value of t 3.05454 Least Significant Difference 0.8198 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 5.9900 A A 5.9475 A A 5.8475 A A 5.8350 A A 5.2500 4 ‘ti le tuoi/kho 4’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 77 The ANOVA Procedure t Tests (LSD) for Y NOTE: This test controls the Type I comparisonwise error rate, not the experimentwise error rate Alpha 0.05 Error Degrees of Freedom 12 Error Mean Square 0.144051 Critical Value of t 2.17881 Least Significant Difference 0.5847 Means with the same letter are not significantly different t Grouping Mean N T A 5.9900 A A 5.9475 A A 5.8475 A A 5.8350 B 5.2500 4 ‘he so nhan 4’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 78 The ANOVA Procedure Class Level Information Class Levels Values K 1234 T 12345 Number of Observations Read 20 45 Number of Observations Used 20 ‘he so nhan 4’ 13:45 Thursday, November 24, 2019 79 The ANOVA Procedure Dependent Variable: Y Sum of Source DF Squares Mean Square F Value Pr > F Model 26.94020000 3.84860000 120.56 F K 0.08232000 0.02744000 0.86 0.4884 T 26.85788000 6.71447000 210.33