Xây dựng quy trình nhân giống cây thủy sinh tiêu thảo lá nhăn cryptocoryne wendtii trong điều kiện in vitro

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG CÂY THỦY SINH TIÊU THẢO LÁ NHĂN (CRYPTOCORYNE WENDTII) TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT Giảng viên hướng dẫn : TS ĐỖ ĐĂNG GIÁP Sinh viên thực MSSV: 1611100162 : TRƯƠNG PHƯỚC THUẬN Lớp: 16DSHA2 TP Hồ Chí Minh, 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN GIỐNG CÂY THỦY SINH TIÊU THẢO LÁ NHĂN (CRYPTOCORYNE WENDTII) TRONG ĐIỀU KIỆN IN VITRO Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC THỰC VẬT Giảng viên hướng dẫn : TS ĐỖ ĐĂNG GIÁP Sinh viên thực MSSV: 1611100162 : TRƯƠNG PHƯỚC THUẬN Lớp: 16DSHA2 Nhận xét GVHD: TP Hồ Chí Minh, 2020 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng thực hướng dẫn TS ĐỖ ĐĂNG GIÁP Toàn đề tài thực phịng Cơng nghệ tế bào thực vật Viện sinh học Nhiệt Đới Thành Phố Hồ Chí Minh Tất nội dung, quy trình, số liệu đồ án chưa cơng bố tạp chí, hội thảo hay diễn đàn khoa học Những phần sử dụng tài liệu tham khảo đồ án nêu rõ phần tài liệu tham khảo Ngoài ra, đồ án sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giả khác, quan tổ chức khác có trích dẫn thích nguồn gốc Các số liệu, kết trình bày đồ hoàn toàn trung thực, sai tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm chịu kỷ luật môn nhà trường đề TP Hồ Chí Minh, ngày tháng Sinh viên Trương Phước Thuận năm 2020 LỜI CẢM ƠN Trong thời gian thực đề tài Viện Sinh Học Nhiệt Đới TP Hồ Chí Minh, tơi hướng dẫn giúp đỡ tận tình q Thầy Cơ, anh chị, bạn, tơi hồn thành tốt đồ án Tôi xin chân thành gửi lời cám ơn sâu sắc đến: TS Đỗ Đăng Giáp, thầy giảng dạy, giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi sở vật chất, trang thiết bị, hóa chất cho tơi suốt thời gian thực để hoàn thành tốt đề tài Ths Nguyễn Thị Dược, tận tình hướng dẫn truyền đạt kinh nghiệm quý báu suốt thời gian qua Anh Đinh Bá Duy giúp đỡ tơi lúc khó khăn, thử thách Các anh chị cán Phịng Thí nghiệm Cơng nghệ tế bào thực vật Phịng Thí nghiệm điểm công nghệ tế bào thực vật, Viện Sinh Học Nhiệt Đới giúp tạo điều kiện để hồn thành đề tài Q Thầy, Cơ khoa Viện Khoa học Ứng dụng, Trường Đại học Cơng nghệ TPHCM tận tình giảng dạy truyền đạt kiến thức quý báu kinh nghiệm suốt bốn năm học giảng đường Đại học Các bạn lớp 16DSHA2 đồng hành, giúp đỡ năm tháng học lớp học phịng thí nghiệm Cuối cùng, tơi xin cám ơn Bố Mẹ nuôi nấng, dạy dỗ, chăm sóc, ln động viên chỗ dựa vật chất lẫn tinh thần suốt thời gian vừa qua Tạo điều kiện cho học tập, vững bước đường chọn để trở thành người có ích cho xã hội MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT i DANH MỤC BẢNG ii DANH MỤC HÌNH iii DANH MỤC BIỂU ĐỒ iv LỜI MỞ ĐẦU ❖ Tính cấp thiết đề tài ➢ Đặt vấn đề ➢ Ý nghĩa đề tài ➢ Lý chọn đề tài ❖ Tình hình nghiên cứu ❖ Mục đích nghiên cứu ❖ Nhiệm vụ nghiên cứu ❖ Phương pháp nghiên cứu CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Phân loại khoa học 1.2 Nguồn gốc, phân bố 1.3 Đặc điểm hình thái 1.4 Điều kiện phát triển 10 1.5 Vai trò thực vật thủy sinh 10 1.6 Lịch sử phát sinh ngành thủy sinh kiểng 11 1.7 Tổng quan chất điều hòa sinh trưởng thực vật 13 1.8 Tổng quan chất dinh dưỡng 16 1.9 Vai trò ánh sáng phát triển thực vật 18 CHƯƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 19 2.1 Vật liệu 19 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 19 2.1.2 Nguồn mẫu cấy 19 2.1.3 Thiết bị dụng cụ 19 2.1.4 Môi trường nuôi cấy 19 2.1.5 Điều kiện nuôi cấy 20 2.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 20 2.2.1 Địa điểm 20 2.2.2 Thời gian nghiên cứu 20 2.3 Bố trí thí nghiệm 20 2.3.1 Thí nghiệm 1: Khảo sát điều kiện khử trùng thủy sinh Cryptocoryne wendtii tạo nguồn mẫu in vitro 20 2.3.2 Thí nghiệm 2: Khảo sát ảnh hưởng cytokinin lên phát sinh chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 22 2.3.3 Thí nghiệm 3: Khảo sát ảnh hưởng mơi trường khống lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 23 2.3.4 Thí nghiệm 4: Khảo sát ảnh hưởng auxin lên hình thành rễ từ chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 23 2.3.5 Thí nghiệm 5: Khảo sát ảnh hưởng cường độ ánh sáng lên tăng trưởng chồi thủy sinh Cryptocoryne wendtii in vitro 24 2.4 Các tiêu theo dõi 26 CHƯƠNG KẾT QUẢ & THẢO LUẬN 27 3.1 Kết khảo sát điều kiện khử trùng thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii tạo nguồn mẫu in vitro 27 3.2 Ảnh hưởng cytokinin lên phát sinh chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 28 3.3 Ảnh hưởng mơi trường khống lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 33 3.4 Ảnh hưởng auxin lên hình thành rễ từ chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 36 3.5 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 42 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 4.1 Kết luận 45 4.2 Đề nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ½ MS Mơi trường giảm cịn nửa khống đa lượng B5 Mơi trường Gamborg B5 BA 6-Benzylamino CĐHSTTV Chất điều hòa sinh trưởng thực vật IBA 4-Indol-3-Ylbutyric Acid KIN 6-Furfuryl amino purine (KINETIN) MS Môi trường Murashige Skoog (1962) MS ½ Mơi trường giảm cịn nửa khoáng đa vi lượng NAA α-Naphtaleneacetic Acid i DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Khảo sát điều kiện khử trùng mẫu tạo nguồn mẫu in vitro 21 Bảng 2.2 Khảo sát ảnh hưởng cytokinin lên nhân nhanh chồi mẫu cấy 22 Bảng 2.3 Khảo sát ảnh hưởng mơi trường khống lên tăng chồi mẫu cấy 23 Bảng 2.4 Khảo sát ảnh hưởng auxin lên hình thành rễ mẫu cấy 24 Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng cường độ sáng lên tăng chồi mẫu cấy 25 Bảng 3.1 Ảnh hưởng loại thời gian khử trùng đến hiệu khử trùng sau tuần theo dõi 27 Bảng 3.2 Ảnh hưởng BA kinetin lên phát sinh chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 29 Bảng 3.3 Ảnh hưởng môi trường khoáng lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 34 Bảng 3.4 Ảnh hưởng auxin lên hình thành rễ từ chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 37 Bảng 3.5 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 42 ii DANH MỤC HÌNH Hình 3.1 Hình thái chồi tiêu thảo nhăn môi trường bố sung BA KIN 32 Hình 3.2 Hình thái mẫu tiêu thảo nhăn in vitro mơi trường khống 35 Hình 3.3 Hình thái tiêu thảo nhăn môi trường bổ sung IBA NAA 40 Hình 3.4 Hình thái tiêu thảo nhăn in vitro khảo sát ảnh hưởng cường độ ánh sáng lên chồi 43 iii DANH MỤC BIỂU ĐỒ Biểu đồ 3.1 Ảnh hưởng BA Kinetin lên phát sinh chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 30 Biểu đồ 3.2 Ảnh hưởng BA Kinetin lên số thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 30 Biểu đồ 3.3 Ảnh hưởng BA Kinetin lên chiều cao thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 31 Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng mơi trường khống lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 34 Biểu đồ 3.5 Ảnh hưởng auxin lên hình thành rễ thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 38 Biểu đồ 3.6 Ảnh hưởng auxin lên hình thành chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 38 Biểu đồ 3.7 Ảnh hưởng auxin lên hình thành thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 39 Biểu đồ 3.8 Ảnh hưởng auxin lên hình thành chiều cao thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 40 Biểu đồ 3.9 Ảnh hưởng cường độ ánh sáng lên tăng trưởng chồi thủy sinh tiêu thảo nhăn Cryptocoryne wendtii in vitro 43 iv Contrast Sig Difference +/- Limits - ,5 * -2,53026 ,494653 0-1 * -2,56103 ,494653 - 1,5 * -2,51487 ,494653 0-2 * -2,39879 ,518183 ,5 - -,0307692 ,512014 ,5 - 1,5 ,0153846 ,512014 ,5 - ,131469 ,534781 - 1,5 ,0461538 ,512014 1-2 ,162238 ,534781 1,5 - ,116084 ,534781 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for chieu cao by BA Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 295,223 73,8059 5,96 Within groups 3965,87 320 12,3933 Total (Corr.) 4261,09 P-Value , 324 Multiple Range Tests for chieu cao by BA Method: 99,0 percent LSD BA Count Mean Homogeneou s Groups ,5 65 11,5231 X 65 11,7538 X 1,5 65 11,7538 X 55 12,4364 XX 75 14,0 X Contrast Sig Difference +/- Limits - ,5 * 2,47692 1,54592 0-1 * 2,24615 1,54592 - 1,5 * 2,24615 1,54592 0-2 1,56364 1,61946 ,5 - -,230769 1,60018 ,5 - 1,5 -,230769 1,60018 ,5 - -,913287 1,67133 - 1,5 ,0 1,60018 1-2 -,682517 1,67133 1,5 - -,682517 1,67133 * denotes a statistically significant difference Summary Statistics So choi So la Chieu cao Count 229 229 229 Average 1,11354 5,18341 15,6769 Standard deviation ,454259 1,75006 5,48206 Coeff of variation 40,7942% 33,7627% 34,9691% Minimum ,0 ,0 ,0 Maximum 3,0 9,0 33,0 Range 3,0 9,0 33,0 Stnd skewness 6,31043 -6,12815 -3,58469 Stnd kurtosis 10,3712 5,61981 5,32528 ANOVA Table for So choi by Kin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2,2698 ,567451 Within groups 44,7782 224 ,199903 Total (Corr.) 47,048 228 2,84 , 252 Multiple Range Tests for So choi by Kin Method: 99,0 percent LSD Kin Count Mean Homogeneous Groups 0,5 30 ,933333 X 75 1,06667 XX 40 1,1 XX 49 1,20408 X 1,5 35 1,25714 X Contrast Sig Difference +/- Limits - 0,5 ,133333 ,250926 0-1 -,0333333 ,227421 - 1,5 -,190476 ,237779 0-2 -,137415 ,213365 0,5 - -,166667 ,280544 0,5 - 1,5 * -,32381 ,289004 0,5 - * -,270748 ,269275 - 1,5 -,157143 ,268849 1-2 -,104082 ,247519 1,5 - ,0530612 ,257069 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for So la by Kin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 58,2271 14,5568 5,09 Within groups 640,07 224 2,85745 Total (Corr.) 698,297 P-Value , 228 Multiple Range Tests for So la by Kin Method: 99,0 percent LSD Kin Count Mean Homogeneous Groups 75 4,54667 X 0,5 30 5,1 XX 40 5,325 XX 49 5,55102 X 1,5 35 5,94286 X Contrast Sig Difference +/- Limits - 0,5 -,553333 ,948693 0-1 -,778333 ,859826 - 1,5 * -1,39619 ,898988 0-2 * -1,00435 ,806686 0,5 - -,225 1,06067 0,5 - 1,5 -,842857 1,09266 0,5 - -,45102 1,01807 - 1,5 -,617857 1,01646 1-2 -,22602 ,935813 1,5 - ,391837 ,971918 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Chieu cao by Kin Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 752,61 188,153 6,91 Within groups 6099,48 224 27,2298 Total (Corr.) 6852,09 P-Value 228 Multiple Range Tests for Chieu cao by Kin Method: 99,0 percent LSD Kin Count Mean Homogeneous Groups 75 14,0 X 0,5 30 14,2 X 49 15,3469 XX 1,5 35 17,8 XX 40 18,475 X Contrast Sig - 0,5 Difference +/- Limits -,2 2,92859 0-1 * -4,475 2,65426 - 1,5 * -3,8 2,77515 -1,34694 2,49022 0-2 0,5 - * -4,275 3,27426 0,5 - 1,5 * -3,6 3,373 0,5 - -1,14694 3,14275 - 1,5 ,675 3,13777 3,12806 2,88883 2,45306 3,00028 1-2 1,5 - * * denotes a statistically significant difference , XỬ LÝ SỐ LIỆU SỐ CHỒI, LÁ, CHIỀU CAO Ở THÍ NGHIỆM Summary Statistics So choi So la Chieu cao Count 552 552 552 Average 1.19928 5.67029 13.558 Standard deviation 0.549013 1.0811 4.53263 Coeff of variation 45.7787% 19.066% 33.4315% Minimum 0.0 2.0 1.0 Maximum 5.0 10.0 30.0 Range 5.0 8.0 29.0 Stnd skewness 29.1758 0.176678 5.01968 Stnd kurtosis 49.3872 2.96619 0.930542 ANOVA Table for so choi by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 17,2521 5,75068 21,08 Within groups 150,341 551 ,272851 Total (Corr.) 167,593 554 P-Value , Multiple Range Tests for so choi by NT Method: 95,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups 1/2 MS 135 1,02222 X B5 150 1,13333 X MS 135 1,14074 X MS1/2 135 1,4963 X Contrast Difference +/- Limits 1/2 MS - B5 -,111111 ,121724 1/2 MS - MS -,118519 ,124886 -,474074 ,124886 1/2 MS - MS1/2 Sig * 10 B5 - MS -,00740741 ,121724 B5 - MS1/2 * -,362963 ,121724 MS - MS1/2 * -,355556 ,124886 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for So la by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 25.4497 8.48322 7.54 0.0001 Within groups 619.101 550 1.12564 Total (Corr.) 644.551 553 Multiple Range Tests for So la by NT Method: 99.0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups MS 1/2 135 5.35556 X 1/2MS 135 5.6 XX B5 149 5.77181 XX MS 135 5.94074 X Contrast Sig Difference +/- Limits -0.171812 0.325856 -0.340741 0.333791 1/2MS - MS 1/2 0.244444 0.333791 B5 - MS -0.168929 0.325856 1/2MS - B5 1/2MS - MS * B5 - MS 1/2 * 0.416257 0.325856 MS - MS 1/2 * 0.585185 0.333791 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Chieu cao by NT 11 Source Sum of Squares Df Mean Square FRatio P-Value Between groups 6456.48 2152.16 242.49 0.0000 Within groups 4863.67 548 8.8753 Total (Corr.) 11320.1 551 Multiple Range Tests for Chieu cao by NT Method: 99.0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups MS 1/2 135 9.34074 X 1/2MS 133 11.0075 X B5 149 15.8054 X MS 135 17.8074 X Contrast Sig Difference +/- Limits 1/2MS - B5 * -4.79785 0.918608 1/2MS - MS * -6.79989 0.940804 1/2MS - MS 1/2 * 1.66678 0.940804 B5 - MS * -2.00204 0.915005 B5 - MS 1/2 * 6.46463 0.915005 MS - MS 1/2 * 8.46667 0.937287 * denotes a statistically significant difference 12 XỬ LÝ SỐ LIỆU Ở THÍ NGHIỆM Summary Statistics so choi so la so re chieu cao Count 584 584 584 584 Average 1,70205 4,76199 4,24144 15,6781 Standard deviation 1,00099 ,962341 2,62752 4,78804 Coeff of variation 58,8108% 20,2088% 61,9488% 30,5397% Minimum 1,0 2,0 ,0 1,0 Maximum 6,0 8,0 12,0 35,0 Range 5,0 6,0 12,0 34,0 Stnd skewness 16,1105 3,13227 2,07945 4,25308 Stnd kurtosis 12,0178 1,43294 -2,43498 ,231783 ANOVA Table for so choi by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 140,866 17,6082 23,56 Within groups 482,059 645 ,747379 Total (Corr.) 622,925 P-Value , 653 Multiple Range Tests for so choi by NT Method: 99,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups IBA2 65 1,29231 X IBA1 75 1,29333 X IBA1,5 70 1,34286 XX IBA0,5 75 1,37333 XX NAA2 70 1,44286 XX DC 75 1,69333 XX 13 NAA1 75 1,82667 X NAA1,5 74 1,94595 X NAA0,5 75 2,8 X ANOVA Table for so la by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 69,3454 8,66818 10,57 Within groups 529,586 646 ,819792 Total (Corr.) 598,931 P-Value , 654 Multiple Range Tests for so la by NT Method: 99,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NAA2 70 4,14286 X NAA1,5 75 4,2 XX NAA1 75 4,54667 XX IBA2 65 4,67692 XX NAA0,5 75 4,73333 XX IBA1 75 4,85333 XXX IBA0,5 75 4,94667 XX IBA1,5 70 4,98571 XX DC 75 5,14667 X ANOVA Table for so re by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 1813,95 226,743 58,94 Within groups 2216,02 576 3,84727 Total (Corr.) 4029,97 584 14 P-Value , Multiple Range Tests for so re by NT Method: 99,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NAA2 ,0 XXX NAA1,5 75 ,746667 X NAA1 74 2,95946 X DC 75 2,96 X IBA1,5 70 4,95714 XX IBA2 65 5,15385 XX IBA1 75 5,44 XXX IBA0,5 75 5,85333 XX NAA0,5 75 6,04 X ANOVA Table for chieu cao by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 5406,91 675,863 47,57 Within groups 9178,2 646 14,2077 Total (Corr.) 14585,1 P-Value , 654 Multiple Range Tests for chieu cao by NT Method: 99,0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups NAA0,5 75 11,0267 X DC 75 11,5467 X NAA1 75 13,56 X NAA1,5 75 16,52 X 15 NAA2 70 16,6571 X IBA0,5 75 17,4933 XX IBA2 65 18,0769 XX IBA1,5 70 18,8143 X IBA1 75 18,8267 X 16 XỬ LÝ SỐ LIỆU Ở THÍ NGHIỆM Summary Statistics So choi So la Chieu cao Count 225 225 225 Average 1.20889 4.64889 15.1778 Standard deviation 0.428776 1.00726 4.49746 Coeff of variation 35.4686% 21.6666% 29.6319% Minimum 1.0 0.0 0.0 Maximum 3.0 7.0 27.0 Range 2.0 7.0 27.0 Stnd skewness 10.8967 -1.56221 -0.519015 Stnd kurtosis 6.37873 3.487 1.02656 ANOVA Table for So choi by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 3.26222 1.63111 0.0001 Within groups 37.92 222 0.170811 Total (Corr.) 41.1822 9.55 224 Multiple Range Tests for So choi by NT Method: 99.0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups L3 75 1.05333 X L2 75 1.22667 XX L1 75 1.34667 X Difference +/- Limits 0.12 0.175351 0.293333 0.175351 0.173333 0.175351 Contrast Sig L1 - L2 L1 - L3 L2 - L3 * 17 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for So la by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 2.51556 1.25778 1.24 0.2907 Within groups 224.747 222 1.01237 Total (Corr.) 227.262 224 Multiple Range Tests for So la by NT Method: 99.0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups L3 75 4.50667 X L1 75 4.68 X L2 75 4.76 X Contrast Sig Difference +/- Limits L1 - L2 -0.08 0.426895 L1 - L3 0.173333 0.426895 L2 - L3 0.253333 0.426895 * denotes a statistically significant difference ANOVA Table for Chieu cao by NT Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio P-Value Between groups 194.996 97.4978 0.0076 Within groups 4335.89 222 19.5311 Total (Corr.) 4530.89 224 18 4.99 Multiple Range Tests for Chieu cao by NT Method: 99.0 percent LSD NT Count Mean Homogeneous Groups L2 75 14.0267 X L1 75 15.2 XX L3 75 16.3067 X Contrast Difference +/- Limits L1 - L2 1.17333 1.87505 L1 - L3 -1.10667 1.87505 -2.28 1.87505 L2 - L3 Sig * * denotes a statistically significant difference 19