Nghiên cứu sinh khả dụng và tính an toàn của một số chủng vi khuẩn bacillus sinh chất chống oxi hóa để ứng dụng làm thực phẩm chức năng

ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM TRUNG TÂM KHOA HOC SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CƠNG NGHỆ DƯỢC SÀI GỊN BÁO CÁO NGHIỆM THU NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG VÀ TÍNH AN TỒN CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SINH CHẤT CHỐNG OXI HÓA ĐỂ ỨNG DỤNG LÀM THỰC PHẨM CHỨC NĂNG PGS.TS TRẦN CÁT ĐÔNG THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/ 2016 ỦY BAN NHÂN DÂN TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ BÁO CÁO NGHIỆM THU (Đã chỉnh sửa theo góp ý Hội đồng nghiệm thu) NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG VÀ TÍNH AN TỒN CỦA MỘT SỐ CHỦNG VI KHUẨN BACILLUS SINH CHẤT CHỐNG OXI HÓA ĐỂ ỨNG DỤNG LÀM THỰC PHẨM CHỨC NĂNG CHỦ NHIỆM ĐỀ TÀI (Ký tên) PGS.TS TRẦN CÁT ĐÔNG CƠ QUAN QUẢN LÝ CƠ QUAN CHỦ TRÌ (Ký tên/đóng dấu xác nhận) (Ký tên/đóng dấu xác nhận) GS.TS LÊ QUAN NGHIỆM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THÁNG 12/ 2016 TÓM TẮT NỘI DUNG NGHIÊN CỨU Các chất chống oxi hóa chứng minh có vai trị việc ngăn ngừa làm giảm nguy mắc bệnh ung thư, tim mạch, tiểu đường Nguồn cung cấp chất chống oxi hóa chủ yếu từ thực vật, dù phong phú chủng loại hàm lượng sử dụng nhiều quỹ đất phụ thuộc thời tiết Trong đó, vi khuẩn có nhiều thuận lợi sản xuất lên men qui mơ lớn mà không sử dụng nhiều quỹ đất; thuận lợi sử dụng dùng cách tự nhiên dạng sinh khối probiotic Với xu hướng này, Phịng thí nghiệm Vi sinh Cơng nghệ Dược phân lập sàng lọc chủng vi khuẩn B subtilis BT2.4, B subtilis GL2.1, B subtilis GL4.5, B licheniformis DQ11, B pumilus DQ40, B amyloliquefaciens HR04, B subtillis KP3 có hoạt tính chống oxi hóa, đồng thời có đặc điểm có lợi probiotic chứng minh in vitro Mục tiêu nghiên cứu nhằm tìm chủng vi khuẩn an tồn có khả chống oxi hóa hiệu in vivo Trong nghiên cứu, độc tính cấp bán cấp đường miệng chủng Bacillus thử nghiệm mô hình chuột Ngoại trừ chủng B subtilis GL2.1, chủng BT2.4, DQ11, DQ40, GL4.5, HR04, KP3 an toàn để sử dụng probiotic Trong đó, bốn chủng BT2.4, DQ40, GL4.5 KP3 có khả cải thiện số thực bào in vivo Đối với thử nghiệm khả cung cấp chất chống oxi hóa, bào tử chủng Bacillus có khả bảo vệ gan gây cảm ứng stress oxi hóa với carbon tetrachlorid chuột nhắt trắng, chủng KP3 GL4.5 chủng có khả cung cấp chất chống oxi hóa tốt Bên cạnh đó, kết xác định lượng chất chống oxi hóa HPLC cho thấy chất chống oxi hóa chủng vi khuẩn hấp thu vào máu tích lũy gan chuột sau 60 ngày thử nghiệm Tóm lại, nghiên cứu cho thấy chủng vi khuẩn BT2.4, DQ40, GL4.5 KP3 sử dụng nguồn cung cấp tiềm chất chống oxi hóa tự nhiên i SUMMARY OF RESEARCH CONTENT Antioxidant compounds have been proven to play part in preventing progression of carcinogenesis, cardiovascular diseases and diabetes At present, the source of antioxidant compounds mainly come from plants; Although these source are diversed in type and contains, they heavily require agricultural resource for cultivation and are influenced by weather and climate Meanwhile, bacterial production is far more superior in compare such as they can be mass produced by fermentation processes which require minimal land resources and they can be used directly as probiotic which does not need extraction Follows this growing trend, Laboratory of Pharmaceutical Biotechnology has isolated and identified strains of Bacilus species: B subtilis BT2.4, B subtilis GL2.1, B subtilis GL4.5, B licheniformis DQ11, B pumilus DQ40, B amyloliquefaciens HR04, B subtillis KP3 that have been proven to have protective antioxdidant activities and characterized in vitro The scope of this research was to identify safe-to-consume bacteria that exhibit antioxidant activities effectively in vivo In this study, acute and sub-acute oral doses of Bacillus strains were determined on mouse model With an exception of B subtilis GL2.1, other strains BT2.4, DQ11, DQ40, GL4.5, HR04 and KP3 are safe to used as probiotic Among those, BT2.4, DQ40, GL4.5 and KP3 are able to improve macrophage count in vivo These strains were further subjected to antioxidant producing capacity tests in which, spores of these bacteria reveal hepatoprotective effect under CCl4-induced oxidative stress on mouse model Accordingly, KP3 and GL4.5 performed antioxidant activity most efficiently Besides, antioxidant quantification by HPLC also shows that antioxidant compounds generated by bacteria were absorbed and stored in mouse liver during 60 days trial In conclusion, our research shows that strains of bacteria BT2.4, DQ40, GL4.5 and KP3 can be used as alternative and potential source for natural antioxidant compounds ii MỤC LỤC DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC HÌNH ix DANH MỤC HÌNH ix DANH MỤC BẢNG x CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan probiotic .2 1.1.1 Khái niệm probiotic 1.1.2 Tác dụng probiotic 1.1.3 Một số VSV thường sử dụng làm probiotic 1.1.4 Những yêu cầu probiotic .5 1.2 Tổng quan gốc tự 1.2.1 Khái niệm gốc tự 1.2.2 Gốc tự trình oxi hóa khử sinh lý bình thường 1.2.3 Khả gây hại gốc tự 1.3 Chất chống oxi hóa .9 1.3.1 Khái niệm chất chống oxi hóa 1.3.2 Phân loại chất chống oxi hóa .9 1.3.3 Vai trị chất chống oxi hố sức khoẻ 12 1.3.4 Chất chống oxi hoá từ vi sinh vật 14 1.3.5 Thực phẩm chức chứa chất chống oxi hóa Việt Nam 20 1.4 Thử nghiệm tính an tồn chuột .21 1.4.1 Thử nghiệm độc tính 21 1.4.2 Thử nghiệm khả chống oxi hóa .23 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 25 2.1 Nội dung 1: Sản xuất bào tử bào tử vi khuẩn thử nghiệm .25 2.1.1 Mô tả nội dung 25 2.1.2 Các tiêu theo dõi 29 2.1.3 Sản phẩm nội dung cần đạt 29 2.2 Nội dung 2: Làm bào tử vi khuẩn .29 iii 2.2.1 Mô tả nội dung 29 2.2.2 Làm bào tử vi khuẩn 29 2.2.3 Các tiêu theo dõi 30 2.2.4 Sản phẩm nội dung cần đạt 30 2.3 Nội dung 3: Xác định độc tính cấp chủng mơ hình chuột 30 2.3.1 Mô tả nội dung 30 2.3.2 Nghiên cứu độc tính cấp chủng Bacillus 30 2.4 Nội dung 4: Xác định độc tính bán cấp chủng mơ hình chuột .31 2.4.1 Mô tả nội dung 31 2.4.2 Phương pháp tiến hành 32 2.4.3 Các tiêu theo dõi 33 2.4.4 Sản phẩm nội dung cần đạt 33 2.5 Nội dung 5: Xác định số thực bào đại thực bào in vivo .34 2.5.1 Mô tả nội dung 34 2.5.2 Các tiêu theo dõi 35 2.5.3 Sản phẩm nội dung cần đạt 35 2.6 Nội dung 6: Chuẩn bị dịch chiết nội bào ngoại bào vi khuẩn .35 2.6.1 Mô tả nội dung 35 2.6.2 Thu nhận phân đoạn chất chống oxi hóa .35 2.6.3 Các tiêu theo dõi 36 2.6.4 Sản phẩm nội dung cần đạt 36 2.7 Nội dung 7: Đánh giá khả gây độc tế bào HepG2 MCF-7 36 2.7.1 Mô tả nội dung 36 2.7.2 Phương pháp MTT 37 2.7.3 Các tiêu theo dõi 37 2.7.4 Sản phẩm nội dung cần đạt 37 2.8 Nội dung 8: Khảo sát khả chống oxi hóa mơ hình tế bào 38 2.8.1 Mô tả nội dung 38 2.8.2 Chuẩn bị tế bào stress tế bào với hydrogen peroxid .38 2.8.3 Xác định dấu chống oxi hóa 38 2.8.4 Các tiêu theo dõi 44 iv 2.8.5 Sản phẩm nội dung cần đạt 44 2.9 Nội dung 9: Thử nghiệm khả chống oxi hóa mơ hình chuột gây độc gan với CCl4 44 2.9.1 Mô tả nội dung 44 2.9.2 Thử nghiệm tác dụng chống oxi hóa mơ hình chuột gây độc gan CCl4 .45 2.9.3 Các dấu xác định hoạt tính chống oxi hóa 46 2.9.4 Sản phẩm nội dung cần đạt 47 2.10 Nội dung 10: Đánh giá số miễn dịch gan huyết chuột 47 2.10.1 Phương pháp thực 47 2.10.2 Các tiêu theo dõi: .48 2.10.3 Sản phẩm nội dung cần đạt: 48 2.11 Nội dung 11: Đánh giá khả hấp thu tích lũy chất chống oxi hóa huyết chuột .48 2.11.1 Mô tả nội dung 48 2.11.2 Thử nghiệm đánh giá khả hấp thu tích lũy chất COXH huyết chuột 49 2.11.3 Phương pháp chiết chất chống oxi hóa từ máu chuột .49 2.11.4 Phương pháp chiết chất chống oxi hóa từ gan chuột .50 2.11.5 Các tiêu theo dõi 50 2.11.6 Sản phẩm nội dung cần đạt 50 2.12 Xử lý số liệu .50 CHƯƠNG KẾT QUẢ 52 3.1 Nội dung 1: Nuôi cấy thu nhận bào tử chủng vi khuẩn .52 3.1.1 Khảo sát đường cong tăng trưởng chủng vi khuẩn 52 3.1.2 Kích thích tạo bào tử 53 3.1.3 Thu nhận bào tử nồi lên men 56 3.2 Nội dung 2: Làm bào tử vi khuẩn .56 3.3 Nội dung 3: Độc tính cấp chủng vi khuẩn mơ hình chuột .58 3.3.1 Tỉ lệ tử vong 58 v 3.3.2 Quan sát đại thể nội tạng chuột 58 3.3.3 Trọng lượng chuột thử nghiệm độc tính cấp 58 3.4 Nội dung 4: Độc tính bán cấp chủng vi khuẩn mơ hình chuột .59 3.4.1 Trọng lượng chuột thử nghiệm độc tính bán cấp .59 3.4.2 Quan sát đại thể giải phẫu vi thể nội tạng chuột 61 3.4.3 Thơng số huyết học thử nghiệm độc tính bán cấp 65 3.5 Nội dung 5: Xác định số thực bào in vivo .69 3.6 Nội dung 6: Thu nhận phân đoạn cao chiết chủng vi khuẩn thử nghiệm .70 3.7 Nội dung 7: Thử nghiệm độc tính chất thử mơ hình tế bào 71 3.8 Nội dung 8: Khảo sát khả hạn chế stress oxi hóa mơ hình tế bào 73 3.8.1 Khảo sát nồng độ hydrogen peroxid gây stress oxi hóa 73 3.8.2 Khả hạn chế stress oxi hóa cảm ứng hydrogen peroxid .73 3.9 Nội dung 9: Thử nghiệm khả cung cấp chất chống oxi hóa mơ hình chuột gây độc gan CCl4 77 3.9.1 Quan sát đại thể, vi thể nội tạng chuột 77 3.9.2 Enzym gan 80 3.9.3 Các dấu chống oxi hóa 80 3.10 Nội dung 10: Định lượng kháng thể mẫu huyết chuột 85 3.11 Nội dung 11: Đánh giá hàm lượng chất COXH máu chuột cho uống bào tử vi khuẩn 88 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 91 4.1 Kết luận 91 4.2 Đề nghị .93 TÀI LIỆU THAM KHẢO 94 PHỤ LỤC 99 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ALT (SGOT) AST (SGPT) BHA BHT BUN CAT CCP CFU DPPH DSM DTNB ĐTBC ĐTC EDTA EPS GSH Hb HP HDL-C HT IQ KL LD50 LDL-C LMW MCH MCHC MCV MDA MeIQ MPV PBS PLT Alanin Transaminase Aspartat Transaminase Butyl hydroxianisol Butyl hydroxitoluen Blood Urea Nitrogen (Nitơ urê máu) Catalase Polysaccharid nang thô Colony Forming Unit (Đơn vị tạo khuẩn lạc) 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl Difco Sporulation Medium 5,5'-Dithiobis-(2-Nitrobenzoic Acid) Độc tính bán cấp Độc tính cấp Ethylen Diamin Tetraacetic Acid Exopolysaccharide Glutathion Hemoglobin Hydrogen peroxid High Density Lipoprotein Cholesterol (Cholesterol Lipoprotein tỉ trọng cao) Huyết 2-Amino-3methylimidazo[4,5-f]quynolin Khối lượng Lethal dose 50% (Liều gây chết 50% động vật thử nghiệm) Low Density Lipoprotein Cholesterol (Cholesterol Lipoprotein tỉ trọng thấp) Low molecular weight (Trọng lượng phân tử thấp) Mean Corpuscular Hemoglobin (Lượng hemoglobin trung bình hồng cầu) Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (Nồng độ hemoglobin trung bình hồng cầu) Mean Corpuscular Volume (Thể tích trung bình hồng cầu) Malonyl dialdehyd 2-Amino-3,4-dimethylimidazo[4,5-f] quynolin Mean Platelet Volume (Thể tích trung bình tiểu cầu) Phosphat Buffer Salin Platelet (Tiểu cầu) vii RBC SD SDS SOD TBA TCA TPTZ TSA TSB WBC Red Blood Cell (Tế bào hồng cầu) Standard Deviation (Độ lệch chuẩn) Sodium dodecyl sulfat Superoxid dimustase Thiobarbituric acid Tricloroacetic acid 2,4,6-Tripyridyl-s-triazine Tryptic Soy Agar Tryptic Soy Broth White Blood Cell (Tế bào bạch cầu) viii Phụ lục Xử lý thống kê Anova số thực bào Chỉ số thực bào Multiple Comparisons Dependent Variable:K LSD Mean Difference (I) Strain PBS (J) Strain (I-J) 95% Confidence Interval Std Error Sig Lower Bound Upper Bound * 00294 005 -.0148 -.0029 * 00294 000 -.0218 -.0099 * 00294 000 -.0190 -.0070 * -.01200 00294 000 -.0180 -.0060 DQ11 00417 00294 165 -.0018 0101 HR04 00333 00294 264 -.0026 0093 GL4.5 DQ40 BT2.4 KP3 -.00883 -.01583 -.01300 * The mean difference is significant at the 0.05 level Thời gian bán thải carbon t1/2 Multiple Comparisons Dependent Variable:T LSD Mean Difference (I-J) 95% Confidence Interval (I) Strain5 (J) Strain5 Std Error Sig PBS GL4.5 9.95000 4.30564 043 -.7909 16.6909 DQ40 * 11.53333 4.30564 011 2.7924 20.2742 BT2.4 9.85000* 4.30564 028 1.1091 18.5909 KP3 * 9.68333 4.30564 031 9424 18.4242 DQ11 -8.50000 4.30564 056 -17.2409 2409 HR04 -7.23333 4.30564 102 -15.9742 1.5076 Lower Bound Upper Bound * The mean difference is significant at the 0.05 level Phụ lục 5: Xử lý thống kê so sánh Anova trọng lượng tương đối quan chuột thử nghiệm CCl4 Gan Multiple Comparisons Dependent Variable:trong luong Gan, LSD Mean Difference (I) Lo 12 PBS-Oil (J) Lo 12 PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-Oil DQ40-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval Std Error Sig Lower Bound Upper Bound -1.10000 * 34052 002 -1.7756 -.4244 -.40556 34052 236 -1.0811 2700 16111 34052 637 -.5145 8367 -.08722 33190 793 -.7457 5713 19878 33190 551 -.4597 8573 103 PBS-CCl4 KP3-Oil -.36778 34052 283 -1.0434 3078 KP3-CCl4 -.19000 34052 578 -.8656 4856 GL4.5-Oil -.52333 34052 127 -1.1989 1522 GL4.5-CCl4 -.21622 33190 516 -.8747 4423 VitE-Oil -.44322 33190 185 -1.1017 2153 VitE-CCl4 -.56000 34052 103 -1.2356 1156 * 34052 002 4244 1.7756 * 34052 044 0189 1.3700 BT2.4-CCl4 * 1.26111 34052 000 5855 1.9367 DQ40-Oil 1.01278* 33190 003 3543 1.6713 * 33190 000 6403 1.9573 * 34052 034 0566 1.4078 KP3-CCl4 * 91000 34052 009 2344 1.5856 GL4.5-Oil 57667 34052 093 -.0989 1.2522 GL4.5-CCl4 * 88378 33190 009 2253 1.5423 VitE-Oil 65678 33190 051 -.0017 1.3153 VitE-CCl4 54000 34052 116 -.1356 1.2156 PBS-Oil BT2.4-Oil DQ40-CCl4 KP3-Oil 1.10000 69444 1.29878 73222 * The mean difference is significant at the 0,05 level Thận Multiple Comparisons Dependent Variable:trong luong Than , LSD Mean Difference (I) Lo 12 (J) Lo 12 PBS-Oil PBS-CCl4 -.17011 09463 075 -.3579 0176 BT2.4-Oil 00933 09463 922 -.1784 1971 BT2.4-CCl4 -.04267 09463 653 -.2304 1451 DQ40-Oil -.03313 09223 720 -.2161 1499 02387 09223 796 -.1591 2069 KP3-Oil -.05911 09463 534 -.2469 1286 KP3-CCl4 -.15578 09463 103 -.3435 0320 GL4.5-Oil 01089 09463 909 -.1769 1986 GL4.5-CCl4 -.01213 09223 896 -.1951 1709 VitE-Oil -.02193 09223 813 -.2049 1611 VitE-CCl4 -.06889 09463 468 -.2566 1189 PBS-Oil 17011 09463 075 -.0176 3579 BT2.4-Oil 17944 09463 061 -.0083 3672 BT2.4-CCl4 12744 09463 181 -.0603 3152 DQ40-Oil 13698 09223 141 -.0460 3200 DQ40-CCl4 * 19398 09223 038 0110 3770 KP3-Oil 11100 09463 244 -.0767 2987 DQ40-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval Std Error Sig Lower Bound Upper Bound 104 KP3-CCl4 01433 09463 880 -.1734 2021 GL4.5-Oil 18100 09463 059 -.0067 3687 GL4.5-CCl4 15798 09223 090 -.0250 3410 VitE-Oil 14818 09223 111 -.0348 3312 VitE-CCl4 10122 09463 287 -.0865 2890 * The mean difference is significant at the 0,05 level Lách Multiple Comparisons Dependent Variable:trong luong Lach LSD Mean Difference (I) Lo 12 PBS-Oil (J) Lo 12 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound * -.59444 06149 000 -.7164 -.4724 08333 06149 178 -.0387 2053 * -.52556 06149 000 -.6476 -.4036 07278 05994 228 -.0461 1917 * -.56422 05994 000 -.6831 -.4453 04333 06149 483 -.0787 1653 KP3-CCl4 * -.57556 06149 000 -.6976 -.4536 GL4.5-Oil 01667 06149 787 -.1053 1387 GL4.5-CCl4 * -.48022 05994 000 -.5991 -.3613 VitE-Oil -.02122 05994 724 -.1401 0977 * -.57000 06149 000 -.6920 -.4480 59444* 06149 000 4724 7164 BT2.4-Oil * 67778 06149 000 5558 7998 BT2.4-CCl4 06889 06149 265 -.0531 1909 DQ40-Oil * 66722 05994 000 5483 7861 DQ40-CCl4 03022 05994 615 -.0887 1491 KP3-Oil * 63778 06149 000 5158 7598 KP3-CCl4 01889 06149 759 -.1031 1409 GL4.5-Oil * 61111 06149 000 4891 7331 GL4.5-CCl4 11422 05994 060 -.0047 2331 VitE-Oil * 57322 05994 000 4543 6921 VitE-CCl4 02444 06149 692 -.0976 1464 PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-Oil DQ40-CCl4 KP3-Oil VitE-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval PBS-Oil * The mean difference is significant at the 0,05 level 105 Phụ lục 6: Xử lý thống kê so sánh Anova enzym gan thử nghiệm CCl4 AST Multiple Comparisons Dependent Variable:AST Serum, LSD Mean (I) Strain12 (J) Strain12 PBS-Oil PBS-CCl4 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound 12.50274 000 -315.0092 -264.9908 -2.83333 12.50274 821 -27.8425 22.1759 -103.66667* 12.50274 000 -128.6759 -78.6575 22.83333 12.50274 073 -2.1759 47.8425 -96.00000* 12.50274 000 -121.0092 -70.9908 KP3-Oil 25.00000 12.50274 050 -.0092 50.0092 KP3-CCl4 11.50000 12.50274 361 -13.5092 36.5092 GL4.5-Oil 9.66667 12.50274 442 -15.3425 34.6759 -88.00000* 12.50274 000 -113.0092 -62.9908 10.83333 12.50274 390 -14.1759 35.8425 -80.66667* 12.50274 000 -105.6759 -55.6575 * 12.50274 000 264.9908 315.0092 * 12.50274 000 262.1575 312.1759 * 12.50274 000 161.3241 211.3425 * 12.50274 000 287.8241 337.8425 * 12.50274 000 168.9908 219.0092 * 12.50274 000 289.9908 340.0092 * 12.50274 000 276.4908 326.5092 * 12.50274 000 274.6575 324.6759 * 12.50274 000 176.9908 227.0092 * 12.50274 000 275.8241 325.8425 * 12.50274 000 184.3241 234.3425 * 12.50274 000 55.6575 105.6759 * -209.33333 12.50274 000 -234.3425 -184.3241 BT2.4-Oil 77.83333* 12.50274 000 52.8241 102.8425 BT2.4-CCl4 -23.00000 12.50274 071 -48.0092 2.0092 103.50000* 12.50274 000 78.4908 128.5092 -15.33333 12.50274 225 -40.3425 9.6759 105.66667* 12.50274 000 80.6575 130.6759 KP3-CCl4 * 92.16667 12.50274 000 67.1575 117.1759 GL4.5-Oil 90.33333* 12.50274 000 65.3241 115.3425 -7.33333 12.50274 560 -32.3425 17.6759 91.50000* 12.50274 000 66.4908 116.5092 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil KP3-CCl4 GL4.5-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Difference (I-J) -290.00000* BT2.4-Oil PBS-CCl4 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil 290.00000 287.16667 186.33333 312.83333 194.00000 315.00000 301.50000 299.66667 202.00000 300.83333 209.33333 80.66667 106 ALT Multiple Comparisons Dependent Variable:ALT Serum LSD Mean (I) Strain12 (J) Strain12 PBS-Oil PBS-CCl4 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound 8.72969 000 -220.9620 -186.0380 7.33333 8.72969 404 -10.1286 24.7953 -76.00000* 8.72969 000 -93.4620 -58.5380 6.16667 8.72969 483 -11.2953 23.6286 -90.66667* 8.72969 000 -108.1286 -73.2047 5.60000 8.72969 542 -12.8620 23.3620 KP3-CCl4 -79.66667* 8.72969 000 -99.1386 -61.2047 GL4.5-Oil 6.66667 8.72969 448 -10.7953 24.1286 -46.66667* 8.72969 000 -64.1286 -29.2047 1.00000 8.72969 909 -16.4620 18.4620 -74.16667* 8.72969 000 -91.6286 -56.7047 * 8.72969 000 186.0380 220.9620 * 8.72969 000 193.3714 228.2953 * 8.72969 000 110.0380 144.9620 * 8.72969 000 192.2047 227.1286 * 8.72969 000 95.3714 130.2953 * 8.72969 000 185.5380 241.4620 * 8.72969 000 103.3714 153.2953 * 8.72969 000 192.7047 227.6286 * 8.72969 000 139.3714 174.2953 * 8.72969 000 187.0380 221.9620 * 8.72969 000 111.8714 146.7953 * 8.72969 000 56.7047 91.6286 * -129.33333 8.72969 000 -146.7953 -111.8714 81.50000* 8.72969 000 64.0380 98.9620 -1.83333 8.72969 834 -19.2953 15.6286 DQ40-OIl 80.33333* 8.72969 000 62.8714 97.7953 DQ40-CCl4 -16.50000 8.72969 064 -33.9620 9620 KP3-Oil 77.66667 * 8.72969 000 62.2047 97.1286 KP3-CCl4 -4.70000 8.72969 612 -23.9620 15.9620 GL4.5-Oil 80.83333* 8.72969 000 63.3714 98.2953 GL4.5-CCl4 * 27.50000 8.72969 003 10.0380 44.9620 VitE-Oil 75.16667* 8.72969 000 57.7047 92.6286 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil KP3-CCl4 GL4.5-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Difference (I-J) -203.50000* BT2.4-Oil PBS-CCl4 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 203.50000 210.83333 127.50000 209.66667 112.83333 212.00000 129.83333 210.16667 156.83333 204.50000 129.33333 74.16667 * The mean difference is significant at the 0,05 level 107 Phụ lục 7: Xử lý thống kê Anova dấu COXH gan chuột - thử nghiệm CCl4 MDA Multiple Comparisons Dependent Variable:MDA Gan, LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound -1.25167 08499 000 -1.4217 -1.0817 56667* 08499 000 3967 7367 BT2.4-CCl4 * 22500 08499 010 0550 3950 DQ40-OIl 89833* 08499 000 7283 1.0683 DQ40-CCl4 11000 08499 201 -.0600 2800 KP3-Oil 87500* 08499 000 7050 1.0450 KP3-CCl4 * 34667 08499 000 1767 5167 GL4.5-Oil 38333* 08499 000 2133 5533 GL4.5-CCl4 08833 08499 303 -.0817 2583 VitE-Oil 95500* 08499 000 7850 1.1250 * 08499 000 6567 9967 PBS-Oil * 1.25167 08499 000 1.0817 1.4217 BT2.4-Oil 1.81833* 08499 000 1.6483 1.9883 * 08499 000 1.3067 1.6467 * 08499 000 1.9800 2.3200 DQ40-CCl4 * 1.36167 08499 000 1.1917 1.5317 KP3-Oil 2.12667* 08499 000 1.9567 2.2967 * 08499 000 1.4283 1.7683 * 08499 000 1.4650 1.8050 GL4.5-CCl4 * 1.34000 08499 000 1.1700 1.5100 VitE-Oil 2.20667* 08499 000 2.0367 2.3767 * 08499 000 1.9083 2.2483 * -.82667 08499 000 -.9967 -.6567 -2.07833* 08499 000 -2.2483 -1.9083 BT2.4-Oil * -.26000 08499 003 -.4300 -.0900 BT2.4-CCl4 -.60167* 08499 000 -.7717 -.4317 07167 08499 402 -.0983 2417 -.71667* 08499 000 -.8867 -.5467 04833 08499 572 -.1217 2183 KP3-CCl4 -.48000* 08499 000 -.6500 -.3100 GL4.5-Oil * -.44333 08499 000 -.6133 -.2733 GL4.5-CCl4 -.73833* 08499 000 -.9083 -.5683 12833 08499 136 -.0417 2983 PBS-CCl4 VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * BT2.4-Oil PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil VitE-Oil 82667 1.47667 2.15000 1.59833 1.63500 2.07833 * The mean difference is significant at the 0,05 level 108 SOD Multiple Comparisons Dependent Variable:SOD Gan LSD Mean (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound 81.97500 23.40493 001 35.1582 128.7918 -182.32500* 23.40493 000 -229.1418 -135.5082 * 23.40493 009 -110.2668 -16.6332 -216.56500* 23.40493 000 -263.3818 -169.7482 DQ40-CCl4 * -121.85000 23.40493 000 -168.6668 -75.0332 KP3-Oil -150.81000* 23.40493 000 -197.6268 -103.9932 KP3-CCl4 -29.83000 23.40493 207 -76.6468 16.9868 GL4.5-Oil -245.21000* 23.40493 000 -292.0268 -198.3932 -46.24833 23.40493 053 -93.0652 5685 -204.24333* 23.40493 000 -251.0602 -157.4265 * 23.40493 000 -153.3735 -59.7398 * 23.40493 001 -128.7918 -35.1582 -264.30000* 23.40493 000 -311.1168 -217.4832 * 23.40493 000 -192.2418 -98.6082 * 23.40493 000 -345.3568 -251.7232 DQ40-CCl4 * -203.82500 23.40493 000 -250.6418 -157.0082 KP3-Oil -232.78500* 23.40493 000 -279.6018 -185.9682 * 23.40493 000 -158.6218 -64.9882 * 23.40493 000 -374.0018 -280.3682 GL4.5-CCl4 * -128.22333 23.40493 000 -175.0402 -81.4065 VitE-Oil -286.21833* 23.40493 000 -333.0352 -239.4015 * 23.40493 000 -235.3485 -141.7148 PBS-Oil * 106.55667 23.40493 000 59.7398 153.3735 PBS-CCl4 188.53167* 23.40493 000 141.7148 235.3485 * 23.40493 002 -122.5852 -28.9515 43.10667 23.40493 070 -3.7102 89.9235 * -110.00833 23.40493 000 -156.8252 -63.1915 DQ40-CCl4 -15.29333 23.40493 516 -62.1102 31.5235 KP3-Oil -44.25333 23.40493 063 -91.0702 2.5635 KP3-CCl4 76.72667* 23.40493 002 29.9098 123.5435 GL4.5-Oil * -138.65333 23.40493 000 -185.4702 -91.8365 60.30833* 23.40493 012 13.4915 107.1252 * 23.40493 000 -144.5035 -50.8698 PBS-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Difference (I-J) * BT2.4-Oil PBS-CCl4 95% Confidence Interval BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl GL4.5-CCl4 VitE-Oil -63.45000 -106.55667 -81.97500 -145.42500 -298.54000 -111.80500 -327.18500 -188.53167 -75.76833 -97.68667 * The mean difference is significant at the 0,05 level 109 CAT Multiple Comparisons Dependent Variable:CAT Gan LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 10.36000 3.12539 002 4.1083 16.6117 BT2.4-Oil -30.78333* 3.12539 000 -37.0351 -24.5316 -.66833 3.12539 831 -6.9201 5.5834 -21.51667* 3.12539 000 -27.7684 -15.2649 4.14167 3.12539 190 -2.1101 10.3934 -20.11500* 3.12539 000 -26.3667 -13.8633 KP3-CCl4 -5.21000 3.12539 101 -11.4617 1.0417 GL4.5-Oil -23.70667* 3.12539 000 -29.9584 -17.4549 * 8.60667 3.12539 008 2.3549 14.8584 -28.67500* 3.12539 000 -34.9267 -22.4233 -15.44667 * 3.12539 000 -21.6984 -9.1949 PBS-Oil -10.36000 * 3.12539 002 -16.6117 -4.1083 BT2.4-Oil -41.14333* 3.12539 000 -47.3951 -34.8916 -11.02833 * 3.12539 001 -17.2801 -4.7766 -31.87667 * 3.12539 000 -38.1284 -25.6249 -6.21833 3.12539 051 -12.4701 0334 -30.47500* 3.12539 000 -36.7267 -24.2233 -15.57000 * 3.12539 000 -21.8217 -9.3183 -34.06667 * 3.12539 000 -40.3184 -27.8149 -1.75333 3.12539 577 -8.0051 4.4984 -39.03500* 3.12539 000 -45.2867 -32.7833 * 3.12539 000 -32.0584 -19.5549 PBS-Oil * 15.44667 3.12539 000 9.1949 21.6984 PBS-CCl4 25.80667* 3.12539 000 19.5549 32.0584 * 3.12539 000 -21.5884 -9.0849 14.77833* 3.12539 000 8.5266 21.0301 -6.07000 3.12539 057 -12.3217 1817 19.58833* 3.12539 000 13.3366 25.8401 -4.66833 3.12539 141 -10.9201 1.5834 KP3-CCl4 10.23667* 3.12539 002 3.9849 16.4884 GL4.5-Oil -8.26000 * 3.12539 010 -14.5117 -2.0083 GL4.5-CCl4 24.05333* 3.12539 000 17.8016 30.3051 * 3.12539 000 -19.4801 -6.9766 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil KP3-CCl4 GL4.5-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * BT2.4-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil VitE-Oil -25.80667 -15.33667 -13.22833 * The mean difference is significant at the 0,05 level 110 GSH-Px Multiple Comparisons Dependent Variable:GSH-Px Gan LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound 57.39167 14.83821 000 27.7108 87.0725 -172.38167* 14.83821 000 -202.0625 -142.7008 * 14.83821 000 -97.0342 -37.6725 -171.51500* 14.83821 000 -201.1958 -141.8342 * 14.83821 000 -91.6475 -32.2858 -192.46833* 14.83821 000 -222.1492 -162.7875 KP3-CCl4 -78.80667 * 14.83821 000 -108.4875 -49.1258 GL4.5-Oil -162.50667* 14.83821 000 -192.1875 -132.8258 * 14.83821 001 -81.2025 -21.8408 -219.47667* 14.83821 000 -249.1575 -189.7958 -78.07667 * 14.83821 000 -107.7575 -48.3958 -57.39167 * 14.83821 000 -87.0725 -27.7108 -229.77333* 14.83821 000 -259.4542 -200.0925 * 14.83821 000 -154.4258 -95.0642 * 14.83821 000 -258.5875 -199.2258 DQ40-CCl4 * -119.35833 14.83821 000 -149.0392 -89.6775 KP3-Oil -249.86000* 14.83821 000 -279.5408 -220.1792 * 14.83821 000 -165.8792 -106.5175 * 14.83821 000 -249.5792 -190.2175 GL4.5-CCl4 * -108.91333 14.83821 000 -138.5942 -79.2325 VitE-Oil -276.86833* 14.83821 000 -306.5492 -247.1875 * 14.83821 000 -165.1492 -105.7875 * 78.07667 14.83821 000 48.3958 107.7575 135.46833* 14.83821 000 105.7875 165.1492 * 14.83821 000 -123.9858 -64.6242 10.72333 14.83821 473 -18.9575 40.4042 * 14.83821 000 -123.1192 -63.7575 16.11000 14.83821 282 -13.5708 45.7908 * -114.39167 14.83821 000 -144.0725 -84.7108 KP3-CCl4 -.73000 14.83821 961 -30.4108 28.9508 GL4.5-Oil * 14.83821 000 -114.1108 -54.7492 26.55500 14.83821 079 -3.1258 56.2358 * 14.83821 000 -171.0808 -111.7192 PBS-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * BT2.4-Oil PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil -67.35333 -61.96667 -51.52167 -124.74500 -228.90667 -136.19833 -219.89833 -135.46833 -94.30500 -93.43833 -84.43000 -141.40000 * The mean difference is significant at the 0,05 level 111 FRAP Multiple Comparisons Dependent Variable:FRAP Gan, LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 53833 06697 000 4044 6723 BT2.4-Oil -.83500* 06697 000 -.9690 -.7010 BT2.4-CCl4 * -.26500 06697 000 -.3990 -.1310 DQ40-OIl -.88167* 06697 000 -1.0156 -.7477 DQ40-CCl4 * -.32000 06697 000 -.4540 -.1860 KP3-Oil -.99000* 06697 000 -1.1240 -.8560 KP3-CCl4 * -.40500 06697 000 -.5390 -.2710 GL4.5-Oil -2.44000* 06697 000 -2.5740 -2.3060 GL4.5-CCl4 -1.55333 * 06697 000 -1.6873 -1.4194 VitE-Oil -1.12667* 06697 000 -1.2606 -.9927 * 06697 000 -.5356 -.2677 * -.53833 06697 000 -.6723 -.4044 -1.37333* 06697 000 -1.5073 -1.2394 * 06697 000 -.9373 -.6694 * 06697 000 -1.5540 -1.2860 * -.85833 06697 000 -.9923 -.7244 -1.52833* 06697 000 -1.6623 -1.3944 * 06697 000 -1.0773 -.8094 * 06697 000 -3.1123 -2.8444 GL4.5-CCl4 -2.09167 * 06697 000 -2.2256 -1.9577 VitE-Oil -1.66500* 06697 000 -1.7990 -1.5310 * 06697 000 -1.0740 -.8060 PBS-Oil * 40167 06697 000 2677 5356 PBS-CCl4 94000* 06697 000 8060 1.0740 * -.43333 06697 000 -.5673 -.2994 13667* 06697 046 0027 2706 * -.48000 06697 000 -.6140 -.3460 08167 06697 227 -.0523 2156 KP3-Oil * -.58833 06697 000 -.7223 -.4544 KP3-CCl4 -.00333 06697 960 -.1373 1306 GL4.5-Oil -2.03833 * 06697 000 -2.1723 -1.9044 GL4.5-CCl4 -1.15167* 06697 000 -1.2856 -1.0177 * 06697 000 -.8590 -.5910 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * VitE-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 VitE-Oil -.40167 -.80333 -1.42000 -.94333 -2.97833 -.94000 -.72500 * The mean difference is significant at the 0,05 level 112 Phụ lục 8: Xử lý thống kê Anova dấu COXH - huyết chuột - CCl4 MDA Multiple Comparisons Dependent Variable:MDA Serum, LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound 80876 000 -15.2144 -11.9789 7.77333* 80876 000 6.1556 9.3911 -.04333 80876 957 -1.6611 1.5744 7.62833* 80876 000 6.0106 9.2461 DQ40-CCl4 * 3.80500 80876 000 2.1872 5.4228 KP3-Oil 8.29000* 80876 000 6.6722 9.9078 KP3-CCl4 -.86167 80876 291 -2.4794 7561 GL4.5-Oil 8.59500* 80876 000 6.9772 10.2128 -.35500 80876 662 -1.9728 1.2628 10.93833* 80876 000 9.3206 12.5561 * 80876 000 1.6506 4.8861 PBS-Oil * 13.59667 80876 000 11.9789 15.2144 BT2.4-Oil 21.37000* 80876 000 19.7522 22.9878 * 80876 000 11.9356 15.1711 * 80876 000 19.6072 22.8428 DQ40-CCl4 * 17.40167 80876 000 15.7839 19.0194 KP3-Oil 21.88667* 80876 000 20.2689 23.5044 * 80876 000 11.1172 14.3528 * 80876 000 20.5739 23.8094 GL4.5-CCl4 * 13.24167 80876 000 11.6239 14.8594 VitE-Oil 24.53500* 80876 000 22.9172 26.1528 * 80876 000 15.2472 18.4828 -3.26833 * 80876 000 -4.8861 -1.6506 -16.86500* 80876 000 -18.4828 -15.2472 * 4.50500 80876 000 2.8872 6.1228 -3.31167* 80876 000 -4.9294 -1.6939 * 4.36000 80876 000 2.7422 5.9778 53667 80876 510 -1.0811 2.1544 * 5.02167 80876 000 3.4039 6.6394 KP3-CCl4 -4.13000* 80876 000 -5.7478 -2.5122 GL4.5-Oil * 5.32667 80876 000 3.7089 6.9444 -3.62333* 80876 000 -5.2411 -2.0056 * 80876 000 6.0522 9.2878 PBS-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * BT2.4-Oil PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil -13.59667 3.26833 13.55333 21.22500 12.73500 22.19167 16.86500 7.67000 * The mean difference is significant at the 0,05 level 113 SOD Multiple Comparisons Dependent Variable:SOD Serum LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 88.18333 23.92868 000 40.3189 136.0478 BT2.4-Oil -92.39167* 23.92868 000 -140.2561 -44.5272 BT2.4-CCl4 -51.67500 * 23.92868 035 -99.5395 -3.8105 DQ40-OIl -38.96833 23.92868 109 -86.8328 8.8961 35.08833 23.92868 148 -12.7761 82.9528 -72.56000* 23.92868 004 -120.4245 -24.6955 KP3-CCl4 * 81.75500 23.92868 001 33.8905 129.6195 GL4.5-Oil -64.94167* 23.92868 009 -112.8061 -17.0772 2.29500 23.92868 924 -45.5695 50.1595 VitE-Oil -90.42000* 23.92868 000 -138.2845 -42.5555 VitE-CCl4 -47.14167 23.92868 053 -95.0061 7228 * 23.92868 000 -136.0478 -40.3189 -180.57500* 23.92868 000 -228.4395 -132.7105 * 23.92868 000 -187.7228 -91.9939 * 23.92868 000 -175.0161 -79.2872 * 23.92868 030 -100.9595 -5.2305 -160.74333* 23.92868 000 -208.6078 -112.8789 KP3-CCl4 -6.42833 23.92868 789 -54.2928 41.4361 GL4.5-Oil * 23.92868 000 -200.9895 -105.2605 * 23.92868 001 -133.7528 -38.0239 -178.60333* 23.92868 000 -226.4678 -130.7389 * -135.32500 23.92868 000 -183.1895 -87.4605 47.14167 23.92868 053 -.7228 95.0061 PBS-CCl4 135.32500* 23.92868 000 87.4605 183.1895 BT2.4-Oil -45.25000 23.92868 063 -93.1145 2.6145 -4.53333 23.92868 850 -52.3978 43.3311 8.17333 23.92868 734 -39.6911 56.0378 DQ40-CCl4 82.23000* 23.92868 001 34.3655 130.0945 KP3-Oil -25.41833 23.92868 292 -73.2828 22.4461 KP3-CCl4 128.89667* 23.92868 000 81.0322 176.7611 GL4.5-Oil -17.80000 23.92868 460 -65.6645 30.0645 GL4.5-CCl4 49.43667* 23.92868 043 1.5722 97.3011 VitE-Oil -43.27833 23.92868 076 -91.1428 4.5861 KP3-Oil GL4.5-CCl4 PBS-Oil BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * DQ40-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval PBS-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl -88.18333 -139.85833 -127.15167 -53.09500 -153.12500 -85.88833 * The mean difference is significant at the 0,05 level 114 CAT Multiple Comparisons Dependent Variable:CAT Serum LSD Mean (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 4.10167 1.04901 000 2.0033 6.2000 BT2.4-Oil -2.31333* 1.04901 031 -4.4117 -.2150 72167 1.04901 494 -1.3767 2.8200 DQ40-OIl -2.49833* 1.04901 020 -4.5967 -.4000 DQ40-CCl4 -1.56333 1.04901 141 -3.6617 5350 KP3-Oil -1.42333 1.04901 180 -3.5217 6750 KP3-CCl4 -2.37667 * 1.04901 027 -4.4750 -.2783 GL4.5-Oil -3.59333* 1.04901 001 -5.6917 -1.4950 GL4.5-CCl4 -2.45167 * 1.04901 023 -4.5500 -.3533 VitE-Oil -3.33833* 1.04901 002 -5.4367 -1.2400 * 1.04901 003 -5.3650 -1.1683 PBS-Oil -4.10167 * 1.04901 000 -6.2000 -2.0033 BT2.4-Oil -6.41500* 1.04901 000 -8.5133 -4.3167 * 1.04901 002 -5.4783 -1.2817 * 1.04901 000 -8.6983 -4.5017 DQ40-CCl4 -5.66500 * 1.04901 000 -7.7633 -3.5667 KP3-Oil -5.52500* 1.04901 000 -7.6233 -3.4267 * 1.04901 000 -8.5767 -4.3800 * 1.04901 000 -9.7933 -5.5967 GL4.5-CCl4 -6.55333 * 1.04901 000 -8.6517 -4.4550 VitE-Oil -7.44000* 1.04901 000 -9.5383 -5.3417 * 1.04901 000 -9.4667 -5.2700 PBS-Oil * 3.26667 1.04901 003 1.1683 5.3650 PBS-CCl4 7.36833* 1.04901 000 5.2700 9.4667 95333 1.04901 367 -1.1450 3.0517 3.98833* 1.04901 000 1.8900 6.0867 76833 1.04901 467 -1.3300 2.8667 DQ40-CCl4 1.70333 1.04901 110 -.3950 3.8017 KP3-Oil 1.84333 1.04901 084 -.2550 3.9417 KP3-CCl4 89000 1.04901 400 -1.2083 2.9883 GL4.5-Oil -.32667 1.04901 757 -2.4250 1.7717 81500 1.04901 440 -1.2833 2.9133 -.07167 1.04901 946 -2.1700 2.0267 VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Difference (I-J) * BT2.4-CCl4 PBS-CCl4 95% Confidence Interval BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl GL4.5-CCl4 VitE-Oil -3.26667 -3.38000 -6.60000 -6.47833 -7.69500 -7.36833 * The mean difference is significant at the 0,05 level 115 GSH-Px Multiple Comparisons Dependent Variable:GSH-Px Serum LSD Mean Difference (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 107.33333 24.97719 000 57.3715 157.2951 BT2.4-Oil -145.69833* 24.97719 000 -195.6601 -95.7365 -46.13833 24.97719 070 -96.1001 3.8235 -102.96000* 24.97719 000 -152.9218 -52.9982 13.59833 24.97719 588 -36.3635 63.5601 -139.87333* 24.97719 000 -189.8351 -89.9115 KP3-CCl4 -51.07167 * 24.97719 045 -101.0335 -1.1099 GL4.5-Oil -61.68000* 24.97719 016 -111.6418 -11.7182 25.78500 24.97719 306 -24.1768 75.7468 -229.72000* 24.97719 000 -279.6818 -179.7582 * 24.97719 000 -178.1768 -78.2532 PBS-Oil * -107.33333 24.97719 000 -157.2951 -57.3715 BT2.4-Oil -253.03167* 24.97719 000 -302.9935 -203.0699 * 24.97719 000 -203.4335 -103.5099 * 24.97719 000 -260.2551 -160.3315 * 24.97719 000 -143.6968 -43.7732 -247.20667* 24.97719 000 -297.1685 -197.2449 * 24.97719 000 -208.3668 -108.4432 * 24.97719 000 -218.9751 -119.0515 * 24.97719 002 -131.5101 -31.5865 -337.05333* 24.97719 000 -387.0151 -287.0915 * 24.97719 000 -285.5101 -185.5865 PBS-Oil * 128.21500 24.97719 000 78.2532 178.1768 PBS-CCl4 235.54833* 24.97719 000 185.5865 285.5101 BT2.4-Oil -17.48333 24.97719 487 -67.4451 32.4785 BT2.4-CCl4 82.07667* 24.97719 002 32.1149 132.0385 DQ40-OIl 25.25500 24.97719 316 -24.7068 75.2168 141.81333* 24.97719 000 91.8515 191.7751 KP3-Oil -11.65833 24.97719 642 -61.6201 38.3035 KP3-CCl4 77.14333* 24.97719 003 27.1815 127.1051 GL4.5-Oil * 66.53500 24.97719 010 16.5732 116.4968 154.00000* 24.97719 000 104.0382 203.9618 * 24.97719 000 -151.4668 -51.5432 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil KP3-CCl4 GL4.5-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Std Error * BT2.4-CCl4 PBS-CCl4 (I-J) 95% Confidence Interval DQ40-CCl4 GL4.5-CCl4 VitE-Oil -128.21500 -153.47167 -210.29333 -93.73500 -158.40500 -169.01333 -81.54833 -235.54833 -101.50500 * The mean difference is significant at the 0,05 level 116 FRAP Multiple Comparisons Dependent Variable:FRAP Serum Mean (I) Strain12 PBS-Oil (J) Strain12 Std Error Sig Lower Bound Upper Bound PBS-CCl4 5.51500 46513 000 4.5846 6.4454 BT2.4-Oil -2.45000* 46513 000 -3.3804 -1.5196 * 1.96167 46513 000 1.0313 2.8921 -.73667 46513 119 -1.6671 1937 * 3.83500 46513 000 2.9046 4.7654 -.57167 46513 224 -1.5021 3587 KP3-CCl4 * 1.75167 46513 000 8213 2.6821 GL4.5-Oil -2.49000* 46513 000 -3.4204 -1.5596 * 1.88833 46513 000 9579 2.8187 -1.94833* 46513 000 -2.8787 -1.0179 * 46513 003 4863 2.3471 PBS-Oil -5.51500 * 46513 000 -6.4454 -4.5846 BT2.4-Oil -7.96500* 46513 000 -8.8954 -7.0346 * 46513 000 -4.4837 -2.6229 * 46513 000 -7.1821 -5.3213 DQ40-CCl4 -1.68000 * 46513 001 -2.6104 -.7496 KP3-Oil -6.08667* 46513 000 -7.0171 -5.1563 * 46513 000 -4.6937 -2.8329 * 46513 000 -8.9354 -7.0746 GL4.5-CCl4 -3.62667 * 46513 000 -4.5571 -2.6963 VitE-Oil -7.46333* 46513 000 -8.3937 -6.5329 * 46513 000 -5.0287 -3.1679 -1.41667 * 46513 003 -2.3471 -.4863 4.09833* 46513 000 3.1679 5.0287 -3.86667 * 46513 000 -4.7971 -2.9363 54500 46513 246 -.3854 1.4754 -2.15333 * 46513 000 -3.0837 -1.2229 2.41833* 46513 000 1.4879 3.3487 -1.98833 * 46513 000 -2.9187 -1.0579 KP3-CCl4 33500 46513 474 -.5954 1.2654 GL4.5-Oil -3.90667 * 46513 000 -4.8371 -2.9763 47167 46513 315 -.4587 1.4021 * 46513 000 -4.2954 -2.4346 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil VitE-CCl4 BT2.4-CCl4 DQ40-OIl KP3-CCl4 GL4.5-Oil VitE-CCl4 VitE-CCl4 Difference (I-J) * BT2.4-CCl4 PBS-CCl4 95% Confidence Interval PBS-Oil PBS-CCl4 BT2.4-Oil BT2.4-CCl4 DQ40-OIl DQ40-CCl4 KP3-Oil GL4.5-CCl4 VitE-Oil 1.41667 -3.55333 -6.25167 -3.76333 -8.00500 -4.09833 -3.36500 * The mean difference is significant at the 0,05 level 117