Nghiên cứu sàng lọc thảo dược có tác dụng bảo vệ gan trên mô hình tế bào hepg2 bị gây độc bởi ethanol hoặc tert butyl hydroperoxide

SỞ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH Độc lập – Tự – Hạnh phúc TRUNG TÂM CÔNG NGHỆ SINH HỌC BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC THẢO DƯỢC CÓ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN TRÊN MƠ HÌNH TẾ BÀO HEPG2 BỊ GÂY ĐỘC BỞI ETHANOL HOẶC TERT-BUTYL HYDROPEROXIDE MSNV: TP01/18-19 Cơ quan chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Công nghệ Sinh học TPHCM Chủ nhiệm nhiệm vụ: ThS Lê Thị Huyền Thành phố Hồ Chí Minh - 2020 SỞ NƠNG NGHIỆP VÀ PTNT CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CÔNG NGHỆ SINH HỌC Độc lập – Tự – Hạnh phúc BÁO CÁO TỔNG HỢP KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU SÀNG LỌC THẢO DƯỢC CÓ TÁC DỤNG BẢO VỆ GAN TRÊN MƠ HÌNH TẾ BÀO HEPG2 BỊ GÂY ĐỘC BỞI ETHANOL HOẶC TERT-BUTYL HYDROPEROXIDE MSNV: TP01/18-19 (Đã chỉnh sửa theo Kết luận Hội đồng nghiệm thu ngày 30/6/2020) Chủ nhiệm nhiệm vụ Lê Thị Huyền Cơ quan chủ trì nhiệm vụ PGS.TS Dương Hoa Xơ CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc SỞ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRUNG TÂM CƠNG NGHỆ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2020 BÁO CÁO THỐNG KÊ KẾT QUẢ THỰC HIỆN NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KH&CN I THÔNG TIN CHUNG Tên nhiệm vụ: Nghiên cứu sàng lọc thảo dược có tác dụng bảo vệ gan mơ hình tế bào HepG2 bị gây độc ethanol tert-butyl hydroperoxide (TP01/18-19) Chủ nhiệm nhiệm vụ: Họ tên: ThS Lê Thị Huyền Ngày, tháng, năm sinh: 06/02/1990 Nam/ Nữ: Nữ Học hàm, học vị: Thạc sĩ Chức danh khoa học: Nghiên cứu viên Chức vụ: nhân viên Điện thoại: 02837153792 Nhà riêng: Mobile: Fax: 02838916997 E-mail: lehuyen6290@gmail.com Tên tổ chức công tác: Trung tâm Cơng nghệ Sinh học Thành phố Hồ Chí Minh Địa tổ chức: 2374 quốc lộ 1, khu phố 2, phường Trung Mỹ Tây, Quận 12, TP HCM Địa nhà riêng: Tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Tên tổ chức chủ trì nhiệm vụ: Trung tâm Công nghệ Sinh học TPHCM Điện thoại: 02837153792 Fax: 028 38916997 E-mail: ttcnsh.snn@tphcm.gov.vn Website: hcmbiotech.com.vn Địa chỉ: 2374, Quốc lộ 1, Khu phố 2, Trung Mỹ Tây, Quận 12, TP.HCM Họ tên thủ trưởng tổ chức: PGS.TS Dương Hoa Xô Số tài khoản: 3713.0.1007645 Kho bạc: Tại kho bạc Nhà nước TP HCM Tên quan chủ quản đề tài: Sở Nông nghiệp Phát triển Nông thôn II TÌNH HÌNH THỰC HIỆN Thời gian thực nhiệm vụ: - Theo Hợp đồng ký kết: 24 tháng (từ tháng 01/2018 đến tháng 12/2019) - Thực tế thực hiện: từ tháng 01 năm 2018 đến tháng 06 năm 2020 - Được gia hạn (nếu có): 06 tháng (từ tháng 01/2020 đến tháng 06/2020) Kinh phí sử dụng kinh phí: a) Tổng số kinh phí thực hiện: 550.000.000 đồng, đó: + Kính phí hỗ trợ từ ngân sách khoa học: 550.000.000 đồng + Kinh phí từ nguồn khác: đồng b) Tình hình cấp sử dụng kinh phí từ nguồn ngân sách khoa học: Theo kế hoạch Thực tế đạt Số Thời gian Kinh phí Thời gian Kinh phí (Số đề nghị (Tháng,năm) (đồng) (Tháng,năm) (đồng) toán) 01/201812/2019 250.000.000 01/201812/2019 249.912.810 249.912.810 TT Ghi 264.232.620 01/201912/2019 300.000.000 01/201906/2020 c) Kết sử dụng kinh phí theo khoản chi: Đối với đề tài: Đơn vị tính: đồng (Giảm 264.232.620 50.000.000 đồng so với đề cương chi tiết) Số Nội dung TT khoản chi Thực tế đạt Theo kế hoạch Nguồn khác Tổng NSKH Nguồn khác Trả công lao động (khoa 185.487.400 185.487.400 học, phổ thông) 185.487.400 185.487.400 Nguyên, vật liệu, 307.767.700 307.767.700 lượng 304.560.320 304.560.320 Thiết bị, máy móc 0 0 0 Xây dựng, sửa chữa nhỏ 0 0 0 Chi khác 56.744.900 56.744.900 24.097.710 24.097.710 Tổng cộng 550.000.000 550.000.000 514.145.430 514.145.430 Tổng NSKH - Lý thay đổi (nếu có): Các văn hành q trình thực đề tài/dự án: (Liệt kê định, văn quan quản lý từ công đoạn xét duyệt, phê duyệt kinh phí, hợp đồng, điều chỉnh (thời gian, nội dung, kinh phí thực có); văn tổ chức chủ trì nhiệm vụ (đơn, kiến nghị điều chỉnh có) Số TT Số, thời gian ban hành văn Tên văn Văn số 12/QĐ- Quyết định việc phê duyệt đề tài CNSH ngày nghiên cứu khoa học cấp sở năm 2018 tháng năm 2018 Văn số Hợp đồng giao việc thực đề tài cấp 47/HĐGV-CNSH sở năm 2018 ngày 28 tháng năm 2018 Văn số 349/QĐ-SNN ngày 28 tháng 10 năm 2019 Quyết định việc giao tiếp tục thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở chuyển tiếp từ năm 2016, 2017, 2018 sang năm 2019, 2020, 2021 Đơn vị: Trung tâm Công nghệ Sinh học Ghi Văn số 21/2019/HĐ-SNN ngày tháng 12 năm 2019 Hợp đồng thực nhiệm vụ khoa học công nghệ cấp sở: “Nghiên cứu sàng lọc thảo dược có tác dụng bảo vệ gan mơ hình tế bào HepG2 bị gây độc ethanol tert-butyl hydroperoxide” (Nhiệm vụ chuyển tiếp năm 2018) Tổ chức phối hợp thực nhiệm vụ: Số TT Tên tổ chức đăng ký theo Thuyết minh Tên tổ chức tham gia thực Phòng Thực nghiệm trồng – TT CNSH TP.HCM Phòng CNSH Y Dược - TT CNSH TP.HCM Nội dung tham gia chủ yếu Khảo nồng độ độc chiết dòng tế HepG2 sát gây cao lên bào Sản phẩm chủ yếu đạt Ghi chú* Đánh giá tác động gây độc cao chiết lên tế bào HepG2 - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân tham gia thực nhiệm vụ: (Người tham gia thực đề tài thuộc tổ chức chủ trì quan phối hợp, khơng q 10 người kể chủ nhiệm) Số TT Tên cá nhân đăng ký theo Thuyết minh Bùi Thị Kim Lý, Lê Thị Huyền, Dương Thị Phụng Tên cá nhân Nội dung tham gia Sản phẩm chủ tham gia yếu đạt thực Bùi Thị - Xây dựng đề Kim Lý, cương Lê Thị Huyền, Dương Thị Phụng Ghi chú* - Báo cáo đề Bùi Thị cương Kim Lý, Dương Thị Phụng Các, Các, Ngô Thị Phương Dung Các, Ngô Thị Phương Dung Bùi Thị Lê Thị Kim Lý, Huyền Lê Thị Huyền, Dương Thị Phụng Các, Ngô Thị Phương Dung Ngô Thị Phương Dung chuyển công tác - Chủ nhiệm đề tài -Đã thu thập định tính thảo - Thu thập dược dược theo liệu giám định Dược điển Việt tên phân loại Nam - Xử lý mẫu, tách - Đã xử lý, tách chiết thảo dược thu chiết 10 loại cao khô thảo dược - Đánh giá tác động thu cao khô bảo vệ tế bào gan - Đã khảo sát HepG2 bị gây độc nồng độ gây ethanol tđộc cao BHP cao chiết chiết thảo dược dựa khảo sát lên dòng tế bào tác động ức chế HepG2 tăng sinh tế bào - Đã khảo sát - Phân tích kết xác định IC50 thực nghiệm, báo ethanol, tcáo tiến độ tổng BHP gây độc kết kết lên dòng tế bào nghiên cứu HepG2 - Đã đánh giá tác động bảo vệ tế bào gan HepG2 bị gây độc ethanol t-BHP cao chiết - Báo cáo tiến độ nghiệm thu hoàn chỉnh - Lý thay đổi ( có): Tình hình hợp tác quốc tế: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm, tên tổ chức hợp tác, số đoàn, số lượng người tham gia ) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tình hình tổ chức hội thảo, hội nghị: Số TT Theo kế hoạch Thực tế đạt (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) (Nội dung, thời gian, kinh phí, địa điểm ) Ghi chú* - Lý thay đổi (nếu có): Tóm tắt nội dung, cơng việc chủ yếu: (Nêu mục 15 thuyết minh, không bao gồm: Hội thảo khoa học, điều tra khảo sát nước nước ngoài) Số TT Thời gian Các nội dung, công việc chủ yếu (Các mốc đánh giá chủ yếu) (Bắt đầu, kết thúc - tháng … năm) Người, quan thực Theo kế hoạch Thực tế đạt Xây dựng đề cương 01/2018 – 03/2018 01/2018 – 02/2018 B T K Lý L T Huyền D T P Các N T P Dung Nội dung 1: Thu thập dược liệu giám định tên phân loại 04/2018 – 12/2018 03/2018 – 04/2018 L T Huyền Nội dung 2: Xử lý mẫu tạo dịch chiết thô 03/2018 – 12/2018 03/2018 – 02/2019 L T Huyền Nội dung 3: Đánh giá tác động bảo vệ tế bào gan HepG2 bị gây độc ethanol tBHP cao chiết dựa khảo sát tác động ức chế tăng sinh tế bào Thí nghiệm 1: Khảo sát nồng 06/2018độ gây độc ethanol t- 09/2018 BHP lên dòng tế bào HepG2 03/201905/2019 L T Huyền Thí nghiệm 2: Khảo sát nồng 09/2018độ gây độc cao chiết lên 12/2018 dòng tế bào HepG2 06/201908/2019 L T Huyền Thí nghiệm 3: Khảo sát hoạt 01/2019tính bảo vệ tế bào gan HepG2 05/2019 khỏi độc tố gây ethanol 09/201902/2020 L T Huyền Thí nghiệm 4: Khảo sát hoạt 06/2019tính bảo vệ tế bào gan HepG2 11/2019 khỏi độc tố gây t-BHP 03/202005/2020 L T Huyền Tổng hợp số liệu nghiên 11/2019cứu, viết báo cáo nghiệm thu 12/2019 06/2020 L T Huyền - Lý thay đổi (nếu có): Cá nhân đăng ký tham gia theo thuyết minh nghỉ việc nên thay đổi cá nhân thực đề tài III SẢN PHẨM KH&CN CỦA NHIỆM VỤ Sản phẩm KH&CN tạo ra: a) Sản phẩm Dạng I: Tên sản phẩm tiêu chất lượng TT chủ yếu Đơn Số vị đo Thực tế Số lượng Theo kế hoạch đạt 3-5 3-5 Mẫu cao chiết thảo Mẫu dược có hoạt tính bảo vệ gan - Lý thay đổi (nếu có): b) Sản phẩm Dạng II: Yêu cầu khoa học cần đạt Số Tên sản phẩm Ghi Theo kế hoạch TT Quy trình đánh giá dược liệu có tác dụng bảo vệ tế bào gan 01 quy trình Thực tế đạt 01 quy trình Đã hồn thành - Lý thay đổi (nếu có): c) Sản phẩm Dạng III: Yêu cầu khoa học cần đạt Số Số lượng, nơi công bố Tên sản phẩm TT Theo Thực tế kế hoạch đạt (Tạp chí, nhà xuất bản) Hình 4.8 Hoạt tính bảo vệ tế bào gan HepG2 bị gây độc ethanol cao chiết thảo dược (Cỏ xước, Ngũ gia bì gai, Xuyên tâm liên, Cúc tần) Khi tế bào tiền xử lý với cao chiết trước bị gây độc ethanol có tỉ lệ sống sót cao so với tế bào khơng tiền xử lý với cao chiết (Hình 8) Tuy nhiên, tăng nồng độ cao chiết từ 3,125 - 100µg/mL khả tồn tế bào tiền xử lý với loại cao chiết Cỏ xước, Ngũ gia bì gai, Xuyên tâm liên, Cúc tần lại giảm dần từ 88,48% - 60,12% Ở nồng độ 3,125µg/mL, cao chiết Ngũ gia bì gai, Cỏ xước, Xuyên tâm liên, Cúc tần cho tỉ lệ tế bào sống 88,48%, 82,91%, 82,30%, 80,61% tương đương so với chất đối chứng Silymarin 28 nồng độ 12,5µg/mL cho tỉ lệ tế bào sống đạt 84,24%, kết có ý nghĩa thống kê (P-value