Báo cáo nghiên cứu khoa học " NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA POLYPHENOL CÂY CHÈ DÂY (AMPELOPSIS CANTONIENSIS) TRÊN MỘT SỐ CHỈ SỐ LIPID MÁU VÀ MÔ BỆNH HỌC CỦA XƠ VỮA ĐỘNG MẠCH Ở THỎ UỐNG CHOLESTEROL " potx

NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA POLYPHENOL CÂY CHÈ DÂY AMPELOPSIS CANTONIENSIS TRÊN MỘT SỐ CHỈ SỐ LIPID MÁU VÀ MÔ BỆNH HỌC CỦA XƠ VỮA ĐỘNG MẠCH Ở THỎ UỐNG CHOLESTEROL Nguyễn Thị Băng Sương

NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG CỦA POLYPHENOL CÂY CHÈ DÂY

(AMPELOPSIS CANTONIENSIS) TRÊN MỘT SỐ CHỈ SỐ LIPID MÁU VÀ

MÔ BỆNH HỌC CỦA XƠ VỮA ĐỘNG MẠCH Ở THỎ UỐNG

CHOLESTEROL

Nguyễn Thị Băng Sương

Trường Đại học Y khoa, Đại học Huế

I ĐẶT VẤN ĐỀ

Rối loạn lipid máu là một bệnh lý phổ biến trên thế giới, tỷ lệ mắc bệnh cao trong cộng đồng, hậu quả thường dẫn đến xơ vữa động mạch Tai biến của xơ vữa động mạch rất phức tạp, trong đó, tai biến về tim mạch là phổ biến và có tỷ

lệ tử vong cao Hiện nay, xơ vữa động mạch và nhiều tai biến khác của nó là những bệnh lý phổ biến không chỉ ở các nước có nền kinh tế phát triển mà ở cả những nước đang phát triển, trong đó có Việt Nam [3]

Điều trị có hiệu quả hội chứng tăng lipid máu sẽ hạn chế được sự phát triển của xơ vữa động mạch và ngăn ngừa các tai biến phức tạp của nó [9]

Hiện nay có khá nhiều thuốc điều trị hội chứng tăng lipid máu Các thuốc này tuy có hiệu lực tốt nhưng cũng gây nhiều tác dụng phụ như rối loạn tiêu hóa, đau cơ và đặc biệt, chúng đều gây độc cho tế bào gan [7] Ở Việt Nam cũng như các nước trên thế giới, các công trình nghiên cứu về tác dụng hạ lipid máu và khả năng chống oxy hóa của cây chè xanh, cây ngưu tất, rau diếp cá, cây mắc rạc

đã được công bố khá nhiều [1], [2], [4], [5], [6], [8] Trong khi đó cây chè dây cũng có tác dụng hạ lipid máu tốt thì vẫn chưa được nghiên cứu, bởi vậy chúng

tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu tác dụng của polyphenol cây chè dây (Ampelopsis cantoniensis Planch) trên một số chỉ số lipid máu và mô bệnh học của xơ vữa động mạch ở thỏ uống cholesterol” với mục tiêu:

1 Khảo sát tác dụng của polyphenol cây chè dây đến một số chỉ số lipid

và hàm lượng malonyl dialdehyd trong huyết tương ở thỏ uống cholesterol

2 Bước đầu khảo sát tác dụng của polyphenol chè dây đến mô bệnh học mảng xơ vữa động mạch ở thỏ uống cholesterol

II CHẤT LIỆU, ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

1 Chất liệu nghiên cứu:

Hoạt chất polyphenol cây chè dây được chiết xuất theo qui trình chuẩn

Thỏ thực nghiệm là thỏ đực, chủng Orytolagus cuniculus, 12 tuần tuổi, khỏe mạnh, có trọng lượng 1,8 - 2 kg/ con

Cholesterol tinh khiết, acid thiobarbituric, muối Mohr, KCl, acid ascorbic, các kit định lượng: cholesterol, triglycerid, LDL - C, HDL – C

2 Phương pháp nghiên cứu:

2.2 Mô hình thực nghiệm:

Cho thỏ uống 0,5 gam cholesterol/kg thân trọng trong một ngày

* Chia nhóm thỏ:

30 con thỏ đực được chia làm 5 nhóm ( I, II, III, IV, V), mỗi nhóm 6 con:

+ Nhóm I: Nhóm chứng, dinh dưỡng bình thường, không cho thỏ uống cholesterol và dung dịch polyphenol

+ Nhóm II: Nhóm thỏ uống cholesterol đơn thuần

+ Nhóm III, IV, V: uống cholesterol hàng ngày, sau 2 giờ được uống thêm dung dịch polyphenol lần lượt theo liều lượng: 50mg/kg/ngày, 100mg/kg/ngày, 150mg/kg/ngày

 Nhóm III: 50 mg polyphenol/ kg thân trọng/ ngày

 Nhóm IV: 100 mg polyphenol/ kg thân trọng/ ngày

 Nhóm V: 150 mg polyphenol/ kg thân trọng/ ngày

* Lấy mẫu máu: Các nhóm thỏ được lấy máu tĩnh mạch vào các thời điểm

ngày 0, ngày 10, ngày 20, ngày 30 để định lượng cholesterol toàn phần, triglycerid, HDL - C, LDL - C và MDA trong huyết tương

* Lấy mẫu động mạch chủ xác định tổn thương giải phẫu bệnh

Đánh giá mức độ tổn thương xơ vữa động mạch theo bảng phân độ của WHO như sau:

- Độ 0: Các tổn thương xơ mỡ ở giai đoạn đầu, giai đoạn này có sự lắng đọng các hạt mỡ ở lớp áo trong nhưng chưa nổi rõ lên mặt động mạch

- Độ I: Những tổn thương xơ mỡ bắt đầu hình thành những chấm hoặc những vạch mảnh màu vàng đục, nổi rõ trên mặt động mạch, có thể kết hợp thành những mảng nhỏ

- Độ II: Tổn thương hình thành những mảng lớn nổi cao trên mặt động mạch, bao gồm chủ yếu những mô xơ do phản ứng quá sản ở vùng tổn thương,

có màu trắng đục hay màu trắng vàng

- Độ III: Gồm những tổn thương phức tạp: loét, chảy máu, hoại tử hoặc huyết khối có thể kèm theo calci hóa ở vùng trung tâm hoại tử

- Độ IV: Thành động mạch calci hóa, đôi khi còn gọi là “xương hóa” làm vách động mạch rất cứng

III KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN

1 Triglycerid huyết tương:

Biểu đồ 3.1: Nồng độ triglycerid huyết tương giữa các nhóm thỏ

theo thời gian thực nghiệm

Nồng độ triglycerid huyết tương của nhóm I và II hầu như không thay đổi trong quá trình thực nghiệm Với nhóm IV và V (nhóm thỏ uống polyphenol chè dây liều 100mg/kg/ngày và 150 mg/kg/ngày), vào ngày thứ 20 nồng độ triglycerid giảm 2,5 lần so với ngày 0 và thấp hơn có ý nghĩa so với các nhóm I,

II, III Điều này chứng tỏ polyphenol chè dây với liều 100mg/kg/ngày có tác dụng giảm nồng độ triglycerid huyết tương từ ngày thứ 20 Nhóm thỏ uống polyphenol chè dây liều thấp 50 mg/kg/ngày đến ngày thứ 30 mới có sự thay đổi nồng độ triglycerid, nhưng sự giảm này chưa có ý nghĩa thống kê, như vậy với liều 50mg/kg/ngày, polyphenol chè dây có thể gây hạ triglycerid huyết tương nhưng phải được uống với thời gian kéo dài (trên 30 ngày)

0

0 4

0 8

1 2

1 6 2

2 4

2 8

N h ãm I N h ãm II N h ã m III N h ãm IV N h ã m V

N h ãm th á ng hiªn cøu

N g µ y 0

N g µ y 1 0

N g µ y 2 0

N g µ y 3 0

2 Cholesterol toàn phần huyết tương:

Biểu đồ 3.2: Nồng độ cholesterol toàn phần huyết tương của các

nhóm thỏ theo thời gian thực nghiệm

Đến ngày thứ 20, sự giảm cholesterol huyết tương xảy ra mạnh ở nhóm IV

và V, n ồn g độ c hole ster ol h uyết tươn g của ch ún g thấp hơn rõ r ệt s o với nhó m uốn g chol ester ol đơn thuần (p < 0,01 ÷ p < 0,001) và nhóm uống polyphenol chè dây liều thấp (p < 0,05) Điều này chứng tỏ với liều polyphenol chè dây 100mg/kg/ngày tác dụng hạ cholesterol toàn phần đã xảy ra vào ngày thứ 20 và với liều 150mg/kg/ngày tác dụng hạ cholesterol huyết tương

0 3 6 9

1 2

1 5

1 8

2 1

T h ê i g i a n th ù c n g h i Öm (n g µ y )

N h ã m I I I

N h ã m I V

N h ã m V

có ưu việt hơn, nồng độ cholesterol toàn phần của nhóm V chỉ còn gấp 2 lần so với nồng độ cholesterol của chính nhóm đó ở ngày 0

3 HDL - Cholesterol huyết tương:

Biểu đồ 3.3: Nồng độ HDL-C huyết tương giữa các nhóm thỏ

theo thời gian thực nghiệm

HDL có tác dụng vận chuyển ngược cholesterol từ tế bào ngoại biên về gan để thoái hoá chúng, do vậy HDL-C còn được gọi là yếu tố bảo vệ chống xơ vữa động mạch Nồng độ HDL-C máu tỷ lệ nghịch với khả năng bị bệnh tim mạch Với nhóm uống polyphenol chè dây liều 100mg/kg/ngày và nhóm uống polyphenol chè dây liều cao 150mg/kg/ngày, ngay từ ngày thứ 10, nồng độ HDL

- C huyết tương của hai nhóm tăng cao gần gấp hai lần so với ngày 0 (p < 0,05)

và tăng cao hơn so với nhóm chứng (p < 0,05) Như vậy polyphenol chè dây có

tác dụng tăng HDL - C từ ngày thứ 10 với liều 100 mg/kg/ngày

0 0.3 0.6 0.9 1.2 1.5 1.8

Thêi gian thùc nghiÖm (ngµy)

Nhãm I Nhãm II Nhãm III Nhãm IV Nhãm V

4 LDL - Cholesterol huyết tương:

Biểu đồ 3.4: Nồng độ LDL-C huyết tương giữa các nhóm thỏ

theo thời gian thực nghiệm

Vào ngày thứ 20, nồng độ LDL - C huyết tương của hai nhóm uống polyphenol chè dây liều 100mg/kg/ngày và liều 150mg/kg/ngày giảm rõ rệt, bằng 1/3 nồng độ LDL - C huyết tương của nhóm uống cholesterol đơn thuần Với nhóm thỏ uống polyphenol chè dây liều thấp 50mg/kg/ngày ta thấy: ở ngày thứ

20, nồng độ LDL-C huyết tương của nhóm này thấp hơn mức LDL-C huyết tương của nhóm thỏ uống cholesterol đơn thuần và thấp hơn mức LDL-C huyết tương của chính nhóm đó ở ngày thứ 10 có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) Điều này có thể nói rằng, liều 50mg/kg/ngày polyphenol chè dây đã có tác dụng hạ LDL-C từ ngày thứ 20

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18

Thêi gian thùc nghiÖm (ngµy)

Nhãm II Nhãm III Nhãm IV Nhãm V

5 Hà m l ượ ng Malonyl dialdehyd huyết tương:

Biểu đồ 3.5: Hàm lượng MDA huyết tương giữa các nhóm thỏ theo thời gian

thực nghiệm

Sự thay đổi MDA huyết tương của các nhóm thỏ trong quá trình thực nghiệm không có ý nghĩa thống kê Từ đó ta có thể nói rằng trong quá trình thực nghiệm 30 ngày, polyphenol chè dây chưa có tác dụng trên quá trình peroxy hóa lipid huyết tương

6 Kết quả về giải phẫu bệnh động mạch chủ của các nhóm thỏ thực nghiệm:

Bảng 3.1: Các mức độ tổn thương xơ mỡ đại thể của các nhóm nghiên cứu

0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 4

Nhãm I Nhãm II Nhãm III Nhãm IV Nhãm V

Nhãm thá nghiªn cøu

Ngµy 10 Ngµy 20 Ngµy 30

nghiên cứu lượng

thỏ

có xơ

0

GĐ

I

III

GĐ IV Tỷ lệ

Nhóm

chứng

(nhóm I)

Kết quả cho thấy nhóm II (uống cholesterol đơn thuần) có tổn thương rõ nhất ở động mạch chủ: hạt mỡ, chấm mỡ bám trên thành động mạch, mảng mỡ rộng trên thành mạch, tổn thương chủ yếu ở giai đoạn I; ngoài ra nhóm này có tỷ

lệ tổn thương là cao nhất, chiếm 4/6 Nhóm uống cholesterol bổ sung polyphenol chè dây liều 50mg/kg/ngày có tổn thương chiếm 2/6, mức độ tổn thương vừa ở giai đoạn I, vừa ở giai đoạn II Đối với nhóm IV và V, tỷ lệ tổn thương động

mạch chủ là 2/6, nhưng mức độ tổn thương nhẹ, chỉ ở giai đoạn 0 Như vậy, ta có thể nói polyphenol chè dây có vai trò ngăn cản sự lắng đọng lipid trên thành động mạch, từ đó hạn chế sự xuất hiện bệnh xơ vữa động mạch ở thỏ thực nghiệm Liều polyphenol chè dây càng cao thì càng hạn chế được sự tạo thành mảng vữa

IV KẾT LUẬN

1 Polyphenol chè dây có tác dụng làm giảm các chỉ số triglycerid, cholesterol toàn phần và LDL - C và làm tăng HDL - C huyết tương; tuy nhiên không có tác dụng làm giảm hàm lượng MDA huyết tương ở thỏ uống cholesterol thực nghiệm trong thời gian 30 ngày

2 Nghiên cứu về tổn thương mô bệnh học cho thấy polyphenol chè dây có tác dụng làm giảm mức độ xơ vữa động mạch ở thỏ uống cholesterol thực nghiệm

3 Mức tiêu thụ polyphenol chè dây có ảnh hưởng đến mức độ giảm của các chỉ số triglycerid, cholesterol toàn phần, LDL - C huyết tương và mức độ tăng HDL - C huyết tương ở thỏ uống cholesterol thực nghiệm Tác dụng này của polyphenol chè dây bắt đầu với liều 100mg/kg/ngày, và tác dụng rất rõ ở liều 150mg/kg/ngày

TÀI LIỆU THAM KHẢO

1 Nguyễn Thanh Dương, Lê Thị Hà, Phan Văn Chi, Nguyễn Bích Nhi,

Đoàn Hùng Tiến và cộng sự Tác dụng chống phóng xạ, giảm cholesterol của chế phẩm từ chè xanh, phylamin và ngưu tất, Hóa sinh Y học, Hội Y Dược học Việt Nam (1997) 13 -17

2 Trần Thị Hương Tác dụng của dịch chiết chè xanh Việt Nam trên một số chỉ số lipid và hàm lượng malonyl dialdehyd trong huyết tương thỏ thực nghiệm, Luận văn thạc sỹ Y học, Trường Đại học Y

Hà Nội (2002)

3 Phạm Khuê Vữa xơ động mạch, Bệnh học tuổi già, Nhà xuất bản Y

học Hà Nội, (2000) 178 - 200

4 Nguyễn Liêm, Triệu Duy Điệt, Đỗ Văn Bình Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa của một số cây thuốc Việt Nam, Công trình nghiên cứu Y học quân sự, Học viện quân y (1998) 30 - 33

5 Đoàn thị Nhu và cộng sự Nghiên cứu dược lý cây ngưu tất về tác dụng hạ cholesterol máu và hạ huyết áp, Tạp chí dược học, (1)

(1998) 11 - 13

6 Chu D.C and Juneja L R General chemical composition of grean tea and its infusion, Chemistry and applications of green tea, CRC

Press, Boca Raton - New York (1997) 13 - 20

7 Demacker PN, Hectors MP, Stalenhoef AF Chylomycron processing

in familial dysbetalipoproteinemia studied with vitamin A and E as markers: a new physiological concept, Atherosclerosis; 149 (1)

(2000) 169 - 80

8 Kim M, Masuda M Cancer chemoprevention by green tea polyphenols, Chemistry and applications of green tea, CRC Press,

Boca Raton - New York, (1995) 61 - 71

9 William J Marshall Lipid, lipoprotein and cardiovascular disease,

Clinical Chemistry, Mosby (2000) 231 - 51

TÓM TẮT

Nghiên cứu về tác dụng chống rối loạn lipid máu của polyphenol cây chè dây được thực hiện trên 30 con thỏ đực chủng orytolagus curiculus Kết quả thực nghiệm cho thấy với liều 100mg/kg/ngày, polyphenol cây chè dây có tác dụng hạ triglycerid, cholesterol toàn phần, LDL - C huyết tương, làm tăng HDL - C huyết tương và ngăn cản sự phát triển của mảng xơ vữa động mạch ở thỏ uống cholesterol thực nghiệm

A STUDY OF THE EFFECTS OF THE POLYPHENOL EXTRACTED

FROM AMPELOPSIS CANTONIENCES PLANT ON SOME BLOOD

LIPID INDICES AND ON ARYERIAL ATHEROSCLEROTIC

HISTOPATHOLOGY

IN RABBITS FED WITH HIGH CHOLESTEROL REGIME

Nguyen Thi Bang Suong

College of Medicine, Hue University

SUMMARY

The study of the effects on blood lipid disorders of the polyphenol extracted from the Ampelosis Cantoniensis plant was carried out on 30 male rabbits of the species Orytolagus Curicus The experimental results showed that when administered at the daily dose of 100 milligram/kg, the extracted polyphenol significantly lowered the serum triglyceride, whole cholesterol, LDL-C; and conversely increased HDL-C and prevented the formation and development of arterial atherosclerotic plaque in the rabbits fed with high cholesterol regime