nghiên cứu ảnh hưởng của vi khuẩn sinh iaa đến sự nảy mầm và sinh trưởng phát triển của đậu cô-ve tại buôn ma thuột

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY NGUYÊN  LÊ THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA VI KHUẨN SINH IAA ĐẾN SỰ NẢY MẦM VÀ SINH TRƯỞNG PHÁT TRIỂN CỦA ĐẬU CÔVE TẠI BUÔN MA THUỘT LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC BUÔN MA THUỘT, NĂM 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY NGUYÊN  LÊ THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA VI KHUẨN SINH IAA ĐẾN SỰ NẢY MẦM VÀ SINH TRƯỞNG PHÁT TRIỂN CỦA ĐẬU CÔVE TẠI BUÔN MA THUỘT CHUYÊN NGÀNH SINH HỌC THỰC NGHIỆM Mã số: 60.42.30 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Người HDKH: TS. Võ Thị Phương Khanh BUÔN MA THUỘT, NĂM 2011 i i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam ñoan ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa ñược ai công bố trong bất kỳ một công trình nào khác. Người cam ñoan Lê Thị Hường ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn tốt nghiệp, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc ñến: TS. Võ Thị Phương Khanh, người ñã dạy dỗ, gần gũi, tận tình hướng dẫn, tạo mọi ñiều kiện thuận lợi, giúp ñỡ tôi trong suốt thời gian học tập tại trường cũng như thời gian thực hiện ñề tài. Ban giám hiệu cùng toàn thể quý thầy cô trường THPT Tôn Đức Thắng ñã tạo ñiều kiện thuận lợi cho tôi trong học tập và hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Quý thầy cô trong trường, các thầy cô trong khoa Khoa học tự nhiên và công nghệ, ñặc biệt là các thầy cô trong bộ môn Sinh ñã nhiệt tình truyền ñạt cho tôi những kiến thức quý báu suốt ba năm học tập và rèn luyện dưới mái trường Đại học Tây Nguyên. Các thầy cô giáo, cán bộ, nhân viên quản lý phòng thí nghiệm ñã tạo ñiều kiện tốt nhất cho tôi thực hiện ñề tài. Cuối cùng, cho phép tôi gửi lời cảm ơn sâu sắc ñến gia ñình, bạn bè, các bạn học viên lớp Sinh học thực nghiệm K03,… ñã ñộng viên, giúp ñỡ tôi trong suốt thời gian học tập và thực hiện ñề tài. Xin chân thành cảm ơn! BMT, ngày 06 /10 / 2011 Học viên Lê Thị Hường iii MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU 1 CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1 Vi khuẩn sinh IAA 3 1.1.1. Đại cương về vi khuẩn sinh IAA 3 1.1.2. Một số yếu tố ảnh hưởng ñến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn 7 1.1.2.1. Ảnh hưởng của nhiệt ñộ 7 1.1.2.2. Ảnh hưởng của pH môi trường nuôi cấy 7 1.1.2.3. Nước và ñộ ẩm môi trường 8 1.2. Auxin – chất kích thích sinh trưởng thực vật 8 1.2.1. Nguồn gốc 8 1.2.2. Cấu trúc hoá học và sự sinh tổng hợp 9 1.2.3. Tính chất sinh lý của auxin 10 1.2.3.1. Hoạt ñộng trong sự kéo dài tế bào 10 1.2.3.2. Hoạt ñộng trong sự phân chia tế bào 11 1.2.3.3. Hoạt ñộng trong sự phát sinh hình thái (rễ, chồi, quả) 11 1.3 Tổng quan tài liệu về cây ñậu Côve 13 1.3.1. Phân loại 13 1.3.2. Nguồn gốc và phân bố 13 1.3.3. Một số ñặc ñiểm sinh vật học của ñậu Côve 13 1.3.4.Yêu cầu sinh thái của cây ñậu Côve 14 1.4. Tình hình nghiên cứu 15 1.4.1. Nghiên cứu trong nước 15 1.4.2. Nghiên cứu trên thế giới 16 1.5. Điều kiện tự nhiên của Buôn Ma Thuột 18 CHƯƠNG II NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 iv 2.1 Nội dung 19 2.2 Vật liệu và ñịa ñiểm nghiên cứu 19 2.2.1 Vật liệu nghiên cứu 19 2.2.2 Địa ñiểm nghiên cứu 19 2.3 Phương pháp nghiên cứu 19 2.3.1. Phương pháp tuyển chọn chủng vi khuẩn sinh IAA ảnh hưởng ñến sinh trưởng của cây mầm ñậu Côve 19 2.3.1.1. Tạo dung dịch thí nghiệm 19 2.3.1.2. Xác ñịnh nồng ñộ vi khuẩn trong dung dịch 20 2.3.1.3. Xác ñịnh phương trình tương quan giữa chỉ số OD 530nm và nồng ñộ IAA (mg/l) 20 2.3.1.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn sinh IAA lên sự sinh trưởng cây mầm ñậu Côve 21 3.3.2. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của chủng vi khuẩn sinh IAA ñược tuyển chọn lên sự nảy mầm của hạt và sinh trưởng, phát triển của ñậu Côve 21 3.3.2.1. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian ngâm hạt và nồng ñộ vi khuẩn sinh IAA ñược tuyển chọn ñến sự nảy mầm và sinh trưởng cây mầm ñậu Côve 21 3.3.2.2. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của nồng ñộ và số lần tưới của vi khuẩn sinh IAA ñược chọn ñến sinh trưởng phát triển cây ñậu Côve ……… 22 3.3.2.3. Phương pháp ñánh giá vi sinh vật ñất sau nuôi trồng ñậu Côve 24 3.3.3. Phương pháp nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học của chủng vi khuẩn ñược tuyển chọn ñể ñịnh danh và nhân nuôi sinh khối 25 3.3.3.1. Mô tả hình thái, màu sắc và ñặc ñiểm khuẩn lạc 25 3.3.3.2. Phương pháp nhuộm Gram 25 3.3.3.3. Phương pháp xác ñịnh hoạt tính catalaza 26 3.3.3.4. Phương pháp xác ñịnh khả năng cố ñịnh nitơ phân tử 26 3.3.3.5. Phương pháp xác ñịnh ñường cong sinh trưởng 26 3.3.3.6. Phương pháp xác ñịnh nhiệt ñộ thích hợp của chủng vi khuẩn sinh IAA 27 v 3.3.3.7. Phương pháp xác ñịnh pH thích hợp của chủng vi khuẩn sinh IAA 27 CHƯƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 3.1. Nghiên cứu tuyển chọn các chủng vi khuẩn sinh IAA ảnh hưởng ñến sự sinh trưởng cây mầm ñậu Côve 28 3.1.1. Ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn ñến tỷ lệ nảy mầm của hạt 28 3.1.2. Ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn ñến sinh trưởng của cây mầm 30 3.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của chủng vi khuẩn sinh IAA ñược tuyển chọn (chủng T5) lên sinh trưởng, phát triển của ñậu Côve 34 3.2.1. Ảnh hưởng của thời gian ngâm hạt và nồng ñộ vi khuẩn T5 ñến sự nảy mầm 34 3.2.2. Ảnh hưởng của thời gian ngâm hạt và nồng ñộ vi khuẩn T5 ñến sự sinh trưởng cây mầm ñậu Côve 36 3.2.3. Nghiên cứu ảnh hưởng của nồng ñộ và số lần tưới vi khuẩn T5 ñến sinh trưởng phát triển cây ñậu Côve 42 3.2.3.1. Ảnh hưởng ñến số lượng lá và diện tích lá 42 3.2.3.2. Ảnh hưởng ñến khả năng ra hoa và ñậu quả 43 3.2.3.3. Ảnh hưởng ñến chiều dài, ñường kính quả, năng suất, 47 3.2.3.4. Ảnh hưởng ñến số lượng nốt sần rễ ñậu Côve 51 3.2.4. Đánh giá lượng vi sinh vật ñất sau nuôi trồng ñậu Côve 53 3.3. Nghiên cứu một số ñặc ñiểm sinh học của chủng vi khuẩn T5 ñể ñịnh danh và nhân nuôi sinh khối 55 3.3.1. Định danh vi khuẩn chủng T5 55 3.3.2. Xác ñịnh vi khuẩn Gram 55 3.3.3. Hoạt tính catalaza của vi khuẩn chủng T5 56 3.3.4. Nghiên cứu khả năng cố ñịnh nitơ phân tử của vi khuẩn chủng T5 57 3.3.5. Xác ñịnh ñường cong sinh trưởng của vi khuẩn chủng T5 57 3.3.6. Ảnh hưởng của nhiệt ñộ ñến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn chủng T5 59 3.3.7. Ảnh hưởng của pH ñến sinh trưởng, phát triển của vi khuẩn T5 61 vi KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 64 Kết luận 64 Kiến nghị 64 Tài liệu tham khảo Phụ lục [...]... n và ánh giá ch ng vi khu n sinh IAA phân l p trong hư ng n s n y m m và sinh trư ng phát tri n c a cây 2 Xác tuy n ch n nh m t s t nh u Côve c i m sinh h c c a ch ng vi khu n sinh IAA ư c nh danh và nhân nuôi sinh kh i Ý nghĩa khoa h c - Xác nh các ch ng vi khu n có kh năng sinh IAA ư c phân l p t i Buôn Ma Thu t, góp ph n ánh giá s - a d ng c a vi sinh v t t Tây Nguyên ánh giá vai trò c a m t s vi. .. CHƯƠNG II N I DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 N i dung 1 Nghiên c u tuy n ch n ch ng vi khu n sinh IAA nh hư ng trư ng cây m m n sinh u Côve 2 Nghiên c u nh hư ng c a ch ng vi khu n sinh IAA ư c tuy n ch n lên s n y m m c a h t và sinh trư ng, phát tri n c a cây 3 Nghiên c u m t s ch n u Côve c i m sinh h c c a ch ng vi khu n ư c tuy n nh danh và nhân nuôi sinh kh i 2.2 V t li u và a i m nghiên c u 2.2.1... c y Vi sinh v t s ng và phát tri n trong môi trư ng l ng ch u nh hư ng tr c ti p và gián ti p c a các ion H+ và OH- pH ư c o b ng n ng các ion H+ và OH- trong dung d ch [17] M i vi sinh v t u có m t ph m vi pH sinh trư ng nh t ưa acid (acidophile) có pH cho sinh trư ng t t t 0 - 5,5 ; trung tính: pH = 5,5 - 8,0 ; nh Vi sinh v t i v i vi sinh v t ưa i v i vi sinh v t ưa ki m: pH = 8,5 - 11,5 Vi sinh. .. i s sinh trư ng, phát tri n iv is n ym m u Côve Ý nghĩa th c ti n K t qu tài góp ph n vào vi c s d ng các vi khu n có kh năng sinh IAA và giúp s phát tri n n n nông nghi p theo hư ng b n v ng, có th gi m s d ng ch t kích thích sinh trư ng nhân t o cho cây tr ng, t cho ngư i s d ng ó m b o an toàn 3 CHƯƠNG I T NG QUAN TÀI LI U 1.1 Vi khu n sinh IAA 1.1.1 i cương v vi khu n sinh IAA Vi sinh v t là sinh. .. [38] Năm 2000, Maria Guineth Torres - Rubio (Colombia) cùng c ng s ã phân l p ư c m t s ch ng Azotobacter và Pseudomonas có kh năng sinh IAA t vùng r cây lúa Lư ng IAA do vi khu n Azotobacter và Pseudomonas sinh ra bi n ng: 3,5 - 32,2 mg/l sau 3 ngày nuôi c y [54] Năm 2001, Vivek Kumar và c ng s ( n ), nghiên c u nh hư ng c a vi khu n sinh IAA Azotobacter chroococcum lên sinh trư ng và phát tri n cây... Ph m Vi t Cư ng và c ng s (Vi n Công ngh Sinh h c) ã nghiên c u v kh năng t o IAA c a m t s ch ng vi khu n chi Bacillus K t qu cho th y kh năng t ng h p IAA c a các ch ng nghiên c u thay i tùy theo ch ng gi ng, môi trư ng nuôi c y và m t s nhân t khác [4] Vũ Thúy Nga và c ng s t i Vi n KHKT Nông nghi p Vi t Nam (2003), nghiên c u nh hư ng c a m t vi khu n và môi trư ng nuôi c y n kh năng t ng h p IAA. .. [28], [40], [61] A C B D Hình 1.1 Các nhóm vi khu n có kh năng sinh IAA A: Vi khu n Rhizobium sp B: Vi khu n Bradyrhizobium C: Vi khu n Azotobacter sp D: Vi khu n Azospirillum dài r 7 1.1.2 M t s y u t 1.1.2.1 nh hư ng n sinh trư ng, phát tri n c a vi khu n nh hư ng c a nhi t Nhi t nh hư ng sâu s c n s sinh trư ng c a vi sinh v t M i loài vi sinh v t có kh năng phát tri n trong m t gi i h n nhi t v t... m 19,0 cm, và 17 r con [53] Năm 2011, B.S Saharan và V Nehra ( n các vi khu n vùng r ), nghiên c u nh hư ng c a n s sinh trư ng, phát tri n c a cây K t qu nghiên c u 18 cho th y vi khu n Azospirillum có kh năng c nh m, thúc y cây sinh trư ng, tăng năng su t thu ho ch [59] 1.5 i u ki n t nhiên c a Buôn Ma Thu t Mang nét c trưng c a khí h u Tây Nguyên, Thành ph Buôn Ma Thu t có hai mùa mưa và khô rõ r... s sinh trư ng c a vi khu n T5 60 n sinh trư ng c a các ch ng vi khu n T5 61 B ng 3.17 Kh năng sinh IAA c a ch ng vi khu n ư c tuy n ch n trên các môi trư ng nuôi c y 63 x DANH M C HÌNH Trang Hình 1.1 Các nhóm vi khu n có kh năng sinh IAA 6 Hình 1.2 Công th c hóa h c c a IAA 9 Hình 1.3 Ho t Hình 3.1 h t ng c a IAA trong s kéo dài t bào 10 nh hư ng c a các ch ng vi khu n sinh. .. IAA ( > 10ppm) [5] Năm 2003, Ph m Văn To n (Vi n KHKT Nông nghi p Vi t Nam), nghiên c u hi u qu s d ng phân bón ch a h n h p vi sinh v t có kh năng sinh ch t kích thích sinh trư ng i v i cà chua, khoai tây, u ph ng [22] Năm 2008, Nguy n Kim Anh và Ph m Th Ng c Anh (Trư ng ph m i h c Sư à N ng), ã phân l p và tuy n ch n ư c 08 ch ng vi khu n thu c chi Azotobacter có kh năng c nh m và sinh t ng h p IAA . DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY NGUYÊN  LÊ THỊ HƯỜNG NGHIÊN CỨU ẢNH HƯỞNG CỦA VI KHUẨN SINH IAA ĐẾN SỰ NẢY MẦM VÀ SINH TRƯỞNG PHÁT TRIỂN CỦA ĐẬU CÔVE TẠI BUÔN MA THUỘT. OD 530nm và nồng ñộ IAA (mg/l) 20 2.3.1.4. Nghiên cứu ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn sinh IAA lên sự sinh trưởng cây mầm ñậu Côve 21 3.3.2. Phương pháp nghiên cứu ảnh hưởng của chủng vi khuẩn sinh. 3.1.2. Ảnh hưởng của các chủng vi khuẩn ñến sinh trưởng của cây mầm 30 3.2. Nghiên cứu ảnh hưởng của chủng vi khuẩn sinh IAA ñược tuyển chọn (chủng T5) lên sinh trưởng, phát triển của ñậu