Bài 3 đánh giá khả năng kháng khuẩn

Bài 3: Đánh giá khả kháng khuẩn cao chiết ĐTHT I.Tổng quan Cordyceps spp Cordyceps spp gọi winter worm summer grass hay Trung Quốc 'Dong Chong Xia Cao' Đông trùng hạ thảo có nghĩa 'Sâu vào mùa đơng cỏ vào mùa hè' Đây mợt loại đơng dược quý có chất dạng ký sinh của loài nấm Cordyceps sinensic (tḥc nhóm Ascomycetes) thể sâu Hepialus fabricius lần ghi nhận Ben-Cao-Bei-Yao Wang Ang vào năm 1694 (Yue ctv, 2013) Tên gọi Đông Trùng Hạ Thảo (ĐTHT) xuất phát từ việc quan sát thực tế vào mùa hè nấm lây nhiễm vào vật chủ, sinh trưởng phát triển vật chủ giết chết vật chủ vào mùa thu Khi mùa đơng đến, nấm giết chết hồn tồn vật chủ, hình thành stroma - cấu trúc bào tử, phát triển lên mặt đất vào mùa hè sau kế tiếp (Đặng ctv, 2016) Chi nấm Cordyceps với 750 loài chọn lọc định danh theo loại ký chủ hình dạng thể Đây xem một loại “thần dược” từ năm 620 sau CN, vào thời nhà Đường Trung Quốc Tuy nhiên, mợt vài lồi chọn lọc có khả sử dụng làm dược liệu bao gồm Cordyceps sinensis, C militaris, C ophioglossoides, C sobolifera, C liangshanensis, C cicadicola (Li ctv, 2022) Trong đó, lồi đã sử dụng rộng rãi y học cổ truyền châu Á Cordyceps sinensis Cordyceps militaris (Holliday Cleaver, 2008) Năm 1994, Trung Quốc đã thức xếp loại đông trùng hạ thảo một dược phẩm Trong năm gần đây, đông trùng hạ thảo chứng minh có tác dụng điều trị các bệnh về tim mạch, hô hấp, gan, thận, ức chế hình thành khối u,… (Li ctv, 2006) II.Tác dụng nấm ĐTHT Theo các ghi chép về đông dược cổ, ĐTHT một vị thuốc hết sức quý giá Các hợp chất dược liệu của loại nấm C militaris ứng dụng điều trị bệnh nâng cao sức khỏe người, lồi nấm có giá trị kinh tế cao Các hợp chất chống ung thư: Hợp chất cordycepin (3′deoxyadenosine) từ nấm cho thấy có hoạt tính kháng vi sinh vật, kháng ung thư, ngừa di căn, điều hòa miễn dịch (Hồng ctv, 2021) Hoạt tı ́nh kháng oxy hóa: Các nghiên cứu cho thấy hợp chất CM-hsCPS2 chứa dịch chiết nấm C militaris có tı ́nh kháng DPPH, hoạt tı ́nh khử tạo phức nồng độ (8 mg/ml) 89%, 1,188 85% (Ahn ctv, 2020) Kháng khuẩn kháng nấm: Cordycepin ngăn biểu của gen T2D chịu trách nhiệm điều hòa bệnh tiểu đường thông qua việc ức chế các đáp ứng phản ứng viêm phụ tḥc NF-κB, hyB, hy vọng ứng dụng mợt chất điều hịa miễn dịch điều trị các bệnh về miễn dịch (Shi ctv, 2009) Tı ́nh kháng viêm: Dịch chiết từ thể nấm C militaris thử nghiệm về tác dụng kiểm soát lipopolysaccharide (LPS) Các đại thực bào xử lý với nồng độ khác của CMWE làm giảm đáng kể LPS, TNF-α IL-6 mức độ giảm theo nồng độ của dịch chiết Những kết cho thấy C militaris có tác dụng ức chế mạnh đến việc sản xuất các chất trung gian gây viêm của tế bào (Zhou ctv, 2008) Mặt khác các nghiên cứu cổ truyền các thực nghiệm đại đều xác định ĐTHT khơng có tác dụng phụ thể người đợng vật III Thí nghiệm đánh giá khả kháng khuẩn cao chiết ĐTHT Mục tiêu: Đánh giá khả kháng khuẩn của cao chiết ĐTHT Phương pháp: Đối tượng nghiên cứu: Cao chiết Cordyceps millitaris Vật liệu: Chủng vi khuẩn E.coli Chủng vi khuẩn Samonela Kháng sinh Cephalexin 500mg Thí nghiệm tiến hành theo phương pháp khuếch tán kháng sinh thạch (Kirby Bauer) Phương pháp khoanh giấy kháng sinh khuếch tán thạch hay phương pháp Kirby - Bauer một phương pháp đơn giản, phổ biến nhất vì dễ thực hàng ngày phòng xét nghiệm với nhiều quy mô khác Các bước tiến hành của kỹ thuật khuếch tán kháng sinh thạch:  Lựa chọn dòng vi khuẩn gây bệnh cách phân lập định danh  Mợt lượng vi khuẩn thích hợp lấy trải đĩa thạch, đặt các đĩa kháng sinh vào đĩa thạch (đĩa kháng sinh mảnh giấy trịn có tẩm kháng sinh với hàm lượng nhất định)   Các đĩa thạch ủ ấm nhiệt độ 35 - 37 ̊C Sau 24 - 48 tiến hành đọc kết quả: kháng sinh từ khoanh giấy khuếch tán môi trường thạch ức chế phát triển của vi khuẩn, vì thế tạo vòng trịn khơng có vi khuẩn hay cịn gọi vùng ức chế xuất bề mặt đĩa thạch Dựa vào đường kính của vùng ức chế xác định độ nhạy của kháng sinh đợ kháng kháng thuốc của vi khuẩn Đường kính vùng ức chế tỷ lệ thuận với mức độ nhạy cảm Ghi nhận số liệu viết báo cáo Yêu cầu: - Lập bảng số liệu thô - Lập bảng số liệu sau tính tốn - Chụp hình ảnh đĩa thí nghiệm lần quan sát, trình bày số liệu hình ảnh theo quy chuẩn - Nhận xét kết quả, thảo luận đưa kết luận cụ thể - Dựa vào kết thí nghiệm, đưa đề nghị cụ thể