Nghiên cứu thực trạng, một số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươn strongyloides spp và kết quả điều trị bằng ivermectin tại huyện đức hoà, tỉnh long an (2017 – 2018)

BỘ GIÁODỤCVÀ ĐÀO TẠO BỘYTẾ VIỆN SỐTRÉT– KÝSINH TRÙNG– CÔNTRÙNGTRUNGƯƠNG LÊĐỨCVINH NGHIÊNCỨUTHỰCTRẠNG,MỘTSỐYẾUTỐLIÊNQUAN ĐẾN NHIỄM GIUN LƯƠNStrongyloidesspp KẾT QUẢ ĐIỀUTRỊ BẰNG IVERMECTIN TẠI HUYỆN ĐỨC HOÀ, TỈNH LONGAN(2017–2018) Chuyênngành: Ký Sinh TrùngYHọc Mã số: 62.72.01.16 Cánbộhướngdẫnkhoahọc PGS TS TRẦN THỊ HỒNGPGS.TS VŨVĂNDU HàNội,2019 LỜICAMĐOAN Tôixincamđoan Kết luận án cơng trình nghiên cứu riêng tơi, tất kếtquả số liệu luận án thân thực suốt thời giannghiêncứu.Cácsốliệutrìnhbàytrongluậnánlàtrungthựcvàchưatừngđượcai cơngbố bất kỳcơng trìnhnghiên cứunàokhác Tác giảluậnán Lê ĐứcVinh LỜICẢM ƠN Lời tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tri ân tới PGS.TS Trần Thị Hồng, PGS.TS Vũ Văn Du người Thầy hướng dẫnkhoa học, tận tình giúp đỡ, động viên truyền đạt kiến thức nhưnhững kinh nghiệm quý báu nghiên cứu khoa học để tơi hồnthànhluận án TơixinchânthànhcảmơnđếnLãnhđạoViệnSốtrét–KST– CTTrungương,PGS.TSCaoBáLợi,phịngkhoahọcđàotạo,cácthầycơgiáovàcáckhoa, phịngliênquancủaViệnđãtạomọi điềukiệntốt nhấtvàgiúpđỡtơitrongqtrình họctậpvà nghiên cứu Tơixin chânthànhcảmơn Ban giámđốc,các Anh chịemđồng nghiệptại TrungtâmytếhuyệnĐứcHịa,tỉnhLongAnvàBộmơnKýsinhyhọcTrường đại học y khoa Phạm Ngọc Thạch tạo điều kiện, giúp đỡ cho tơitrong q trình thu thập liệu, mẫu phân, máu, xét nghiệm điều trị chongườidântạihuyệnĐứcHịa Tơi xin chân thành cảm ơn Quý Thầy Cô GS, PGS, TS hộiđồng khoa học chấm luận án đóng góp nhiều ý kiến q báu để tơi cóthêmkiếnthứcvà hồn thiệnluậnánđạt chất lượngtốt Xin bày tỏ lòng cảm ơn sâu sắc tới người thân gia đình,anh chị em, đồng nghiệp, người ủng hộ động viên tơi trongsuốt q trìnhhọc tập giúp tơi vượt qua khó khăn để hồn thànhluận ántốtnghiệp Hànộitháng,….năm… Tácgiảluận án Lê Đức Vinh DANHMỤCCHỮVIẾTTẮT Chữ viếttắt TêntiếngAnhđầyđủ AIDS Acquiredimmuno deficiencysyndrome ALB albendazol Nghĩa/TêntiếngViệt Hội chứng suy giảm miễn dịchmắcphải Thuốcalbendazol AT ATGL BCAT Bp BYT CDC cox1 CS CT CT–scan DNA Basepair Centers for Disease ControlandPrevention Cytochrome c oxydasesubunit1 ComputedTomographyscan Deoxyribonucleicacid Ấutrùng ấutrùnggiunlươn Bạch cầuáitoan Cặpbasecủachuỗi ADN Bộ Ytế Trung tâm kiểm sốt phịngngừabệnhtật Mộtgenthuộc hệ gentythể Cộngsự Cơn trùng Chụp cắtlớpđiệntốn Axítdeoxyribonucleic ĐơnvịcấutạonênADN dNTP Deoxynucleoside triphosphates ĐHYK EDTA ELISA Đạihọc ykhoa Ethylenediamintetraacetic acid Mộtloạichấtchốngđôngmáu Enzyme linkedimmunosorben tassay Phảnứng miễndịchgắnmen Genbank Ngânhànggen GPIA Gelatin particle indirectagglutination HIV Human ImmunodeficiencyVirus HTLV– HVS ITS genIVM Chữ viếttắt KAP KHV KST KTC 95% Ngưngkết hạt gelatin gián tiếp InternalTranscribedSpacer ivermectin Virus gây suy giảm miễn dịch ởngười Virus hướng ung thư tế bào lymphoTtíp1 Hợpvệsinh Đoạn giao Thuốcivermectin TêntiếngAnhđầyđủ Nghĩa/TêntiếngViệt HumanT-celllymphotropic virustype1 Knowledge, Attitude andPractice Kiếnthức–tháiđộ–hànhvi Kínhhiểnvi Kýsinhtrùng Khoảngtincậy95% LAMP LoopMediatedIsothermalA mplification Kỹ thuật khuếch đại đẳngnhiệtADN LĐTBXH Lao động thươngbinh vàxãhội LIPA Phảnứng ngưngkếtmiễndịch LIPS Multiplex PCR NCBI Luciferaseimmunoprecipit ationassay Luciferase immunoprecipitation system MultiplexPolymeraseC hainReaction Hệthống ngưngkết miễn dịch National Center forBiotechnologyInformatio n Trung tâm tin -sinh học Quốcgia nested – PCR Nested Polymerase ChainReaction NTU Novatechunit NovatechPCR Phảnứngchuỗipolymerase Realtime Realtime Polymerase PCR (RTChainReaction PCR) RFLP RNA SHPT TBZ THPT Tp.HCM WHO Restrictionfragmentlengthpo lymorphism Ribonucleicacid thiabendazol WorldHealthorganization Phản ứng chuỗi polymerase đamồi Phản ứng chuỗi polymeraselồng Đơnvị tínhcủa PolymeraseChainReaction Phản ứng chuỗi polymerasethờigian thực Kỹ thuật xác định đa hình độdàiđoạngiớihạn Axítribonucleic Sinh họcphântử Thuốcthiabendazol Trung họcphổ thơng ThànhphốHồChí Minh Tổ chức YtếThếgiới (TCYTTG) MỤCLỤC Danh mục bảngDanhmục hình ĐẶT VẤNĐỀ Chương1 TỔNG QUAN 1.1 Lịch sửpháthiện giunlươn 1.2 Tác nhângâybệnh 1.2.1 Hình tháihọc 1.2.2 Khả sốngsót củaấutrùnggiun lươnngồi môi trường 1.3 Chukỳphát triển sinhhọccủagiunlươn 1.3.1 Chutrình sinhhọc 1.3.2 Chu trình tự nhiễm(mạn tính) 1.4 Đặcđiểmdịch tễhọc 10 1.4.1 Tình hìnhnhiễmgiun lươntrênthếgiới 11 1.4.2 Tình hìnhnhiễmgiun lươntạiViệtNam 13 1.4.3 Các yếu tốliênquanđến nhiễmgiunlươn 15 1.5 Bệnh họcgiunlươn 16 1.5.1 Bệnhgiun lươn mạn tính,khơngbiếnchứng .17 1.5.2 Bệnhnặng,cóbiếnchứng 19 1.5.3 Bệnh đa cơquanởcơđịasuygiảmmiễn dịch 19 1.5.4 Hộichứng tăngnhiễm(hyperinfection syndrom) .20 1.5.5 Bệnhgiun lươn lantỏa 21 1.5.6 Biến chứngvà tửvongdobệnhnhiễmgiun lươnS.stercoralis 22 1.6 Chẩn đoánbệnh nhiễmgiun lươn .23 1.6.1 Địnhnghĩaca bệnhnhiễmgiun lươnS stercoralis 23 1.6.2 Chẩnđoánlâmsàng 24 1.6.3 Xétnghiệmchẩn đốntrựctiếptìmKST 24 1.6.4.Phươngpháp chẩnđoán miễn dịchhọc 27 1.6.5 Chẩnđoánsinhhọc phân tử 28 1.7 Điều trịvà dựphòng 30 1.7.1 Các thuốc điều trịgiun lươn 30 1.7.2 Điềutrị cabệnh 32 1.7.3 Phòngbệnhvàgiáodụcsứckhỏe .33 Chương2 ĐỐITƯỢNG VÀPHƯƠNGPHÁPNGHIÊNCỨU 34 2.1 Mục tiêu 1: Xác định tình trạng số yếu tố liên quan đến nhiễm giunlươnStrongyloidessppởngườidânhuyệnĐứcHoà,tỉnhLongAnnăm2017-2018 2.1.1 Đốitượngnghiêncứu 34 2.1.2 Địađiểmvàthờigian nghiêncứu .34 2.1.3 Thiếtkếnghiêncứu 36 2.1.4 Nộidungnghiêncứu .38 2.1.5 Cáckỹthuật sửdụngtrongnghiêncứu 38 2.1.6 Các chỉsốđánhgiá 41 2.1.7 Xửlýsốliệu 43 2.2 Mụctiêu2:XácđịnhlồigiunlươngâybệnhởngườibằnghìnhtháihọcvàSHPT 2.2.1 Đốitượngnghiêncứu 43 2.2.2 Địađiểmvàthờigian nghiêncứu .44 2.2.3 Thiếtkếnghiêncứu 44 2.2.4 Nộidungnghiêncứu .45 2.2.5 Cáckỹthuật sửdụngtrongnghiêncứu 45 2.2.6 Các chỉsốđánhgiá 51 2.2.7 Xửlýsốliệu 52 2.3 Mụctiêu3:Mô tảcác triệuchứnglâmsàng,cậnlâmsàngvàđánhgiákếtquảđiềutrị cabệnhdoStrongyloidesspp Ivermectinliều duynhất 2.3.1 Đốitượngnghiêncứu 52 2.3.2 Địađiểmvàthờigian nghiêncứu .53 2.3.3 Thiếtkếnghiêncứu 53 2.3.4 Nộidungnghiêncứu .54 2.3.5 Cáckỹthuật sửdụngtrongnghiêncứu 54 2.3.6 Các chỉsốđánhgiá 56 2.3.7 Xửlýsốliệu 60 2.4 Sai số biện pháp hạn chếsaisố .60 2.5 Đạođứctrong nghiêncứu 60 Chương3KẾTQUẢNGHIÊNCỨU 63 3.1 Xácđ ị n h t ỉ l ệ n h i ễ m v m ộ t s ố y ế u t ố l i ê n q u a n đ ế n n h i ễ m g i u n l n StrongyloidessppởngườidânhuyệnĐứcHoà,tỉnhLongAn 3.1.1 Đặcđiểmđốitượngnghiêncứu 63 3.1.2 Thựctrạng nhiễmgiunlươn củatồnhuyện ĐứcHịa .67 3.1.3 Một số yếu tốliên quanđếnnhiễmgiunlươn 74 3.2 Xácđịnh loàigiun lươnStrongyloidesgâybệnh 78 3.2.1 KhảosátgiunlươnStrongyloidesgâybệnhbằnghìnhtháihọc .78 3.2.2 KếtquảrealtimePCRđịnhlồiStrongyloidesspp .83 3.2.3 KếtquảPCR lồngvàgiải trìnhtự gen .86 3.2.4 Câyphân hệcácloàigiun lươn đượcxác địnhtrongnghiên cứu9 3.3 Mô tả triệu chứng lâm sàng, cận lâm sàng đánh giá kết điều trịcabệnhdoStrongyloidessppvới Ivermectinliều duynhất 3.3.1 Các triệuchứnglâmsàng 92 3.3.2 Cáckếtquả cậnlâmsàng 93 3.3.3 Hiệuquảđiều trịcủa ivermectinliềuduynhất 94 Chương4BÀNLUẬN .97 4.1 Xác định tỉ lệ nhiễm số yếu tố liên quan đến nhiễm giun lươnStrongyloidessppởngườidânhuyệnĐứcHoà,tỉnhLongAnnăm2017-20184.1.1 Đặcđiểmmẫunghiên cứu 97 4.1.2 Thựctrạng nhiễmgiunlươn củatồnhuyện ĐứcHịa .99 4.1.3 Một số yếu tốliên quanđếnnhiễmgiunlươn 103 4.2 Xácđịnh loàigiun lươnStrongyloidesgâybệnh 109 4.2.1 KhảosátgiunlươnStrongyloidesgâybệnhbằnghìnhtháihọc 109 4.2.2 KếtquảrealtimePCRđịnhlồiStrongyloidesspp 114 4.2.3 KếtquảPCR lồngvàgiải trìnhtự gen .116 4.3 Môtảcáctriệuchứnglâmsàng,cậnlâmsàngvàđánhgiákếtquảđiềutrịcabệnhd oStrongyloidessppvới Ivermectinliều duynhất 4.3.1 Các triệuchứnglâmsàng 119 4.3.2 Cáckếtquả cậnlâmsàng 124 4.3.3 Hiệuquảđiều trịcủa ivermectinliềuduynhất 128 4.3.4 Tácdụngkhông mongmuốncủa thuốcivermectin 131 KẾTLUẬN 133 KIẾNNGHỊ 135 NHỮNG ĐÓNGGÓPMỚICỦALUẬNÁN 136 TÀILIỆUTHAMKHẢO Phụlục1:Kỹthuật cấyphân sinh họcphântửrealtime PCR .i Phụ lục2: Bảng câuhỏi phỏngvấn xiii Phụlục3: Mộtsố kếtquảxét nghiệmvềSHPT xix Phụ lục4: Danhsáchbệnhnhânnhiễmgiun xxi Phụlục5:Mộtsố hìnhảnh khithựchiện nghiêncứu xxiii Phụ lục6:Bảng camkếtđồng thuậnthamgia nghiên cứu xxv Bảngsố DANHMỤCCÁCBẢNG TênBảng Trang Bảng 2.1Cácbiếnsốsửdụng trongnghiêncứucho mụctiêu 41 Bảng2.2CôngthứcphảnứngrealtimePCR .48 Bảng2.3 Côngthứcphản ứngPCRlồng2bước 50 Bảng 2.4 Cácbiếnsốđánh giáhìnhthái vàSHPT 51 Bảng 2.5Cácbiếnsốvềlâmsàng,cậnlâmsàng vàđiềutrị 56 Bảng 2.6Địnhnghĩacácchỉ số,biếnsốvà phươngphápthuthập 57 Bảng 3.1Phânbốgiớitính vàđộtuổitạiđiểmnghiên cứu 64 Bảng 3.2 Phânbốtrìnhđộ họcvấn vàtình trạngkinh tế .65 Bảng 3.3Phânbốnghềnghiệpvàtìnhtrạngsửdụnghốxí .66 Bảng 3.4Tỷlệ nhiễmgiunlươnở từngxã/thịtrấn(n =1.190) 67 Bảng 3.5Phânbốgiớitínhởbệnhnhânnhiễmgiunlươn 68 Bảng3.6Phânbốnhómtuổiởbệnhnhânnhiễmgiunlươn .69 Bảng 3.7Phânbốtrìnhđộhọcvấnởbệnhnhânnhiễmgiun lươn 70 Bảng 3.8Phânbốtìnhtrạngkinhtếởbệnh nhânnhiễmgiunlươn 71 Bảng3.9Phânbốnghềnghiệpởbệnhnhânnhiễmgiunlươn 72 Bảng 3.10Phânbố tình trạngsử dụng hố xí bệnh nhânnhiễmgiunlươn 73Bảng 3.11Liênquangiữanhiễmgiunlươn vớigiới tính 74 Bảng3.12liênquangiữanhiễmgiunlươnvớinhómtuổi 74 Bảng 3.13Liênquangiữanhiễmgiunlươnvớitrình độhọc vấn 75 Bảng 3.14Liênquangiữanhiễmgiunlươn vớitình trạngkinhtế 75 Bảng3.15Liênquangiữanhiễmgiunlươnvớinghềnông 76 Bảng 3.16Liênquangiữanhiễmgiun lươnvới tìnhtrạng sửdụng hốxí .76 Bảng 3.17Liênquangiữanhiễmgiunlươn vớithóiquen TXĐtrựctiếp 77 Bảng 3.18 Phântíchđabiến xácđịnh cácyếutố liênquan 78 Bảng 3.19 Kết quảxétnghiệmphânlần chẩnđoán giunlươn(n =79) .78 Bảng3.20 Chỉsố hình thểấu trùnggiun lươngiaiđoạn 1(n =79) .80 Bảng3.21 Chỉsố hình thểấu trùnggiun lươngiaiđoạn 2(n =79) .81 Bảng 3.22 Chỉ số hình thể giunlươnđựcsống tựdo(n =5) 82 Bảng 3.23 Chỉ số hìnhthể giunlươncáisống tựdo (n=3) 83 Bảng3.24 Thànhphầnloài giun lươnđượcxác định bằngrealtimePCR 84 Bảng 3.25 Chu kỳngưỡngkhixácđịnhbằng RT–PCR .84 Bảng 3.26 Kết quảsosánhtrìnhtự của14mẫu nghiêncứu vớiNCBI 87 Bảng 3.27Hệsốtương đồngvềtrìnhtựgen của10 mẫuATS stercoralis 90 Bảng 3.28 Hệsốtương đồngvềtrìnhtựgen của4 mẫuATS ratti .91 Bảng 3.29 Triệu chứnglâmsàng ởbệnh nhân nhiễmgiunlươn (n=79) 92 Bảng 3.30 Các triệu chứnglâmsàng nhiễmgiunlươn(n =79) 92 Bảng 3.31 Tỷlệbệnhnhâncótăng bạch cầu áitoan 93 Bảng 3.32 Kết quảELISA ởbệnh nhân nhiễmgiunlươn (n=79) .94 Bảng 3.33Mứcđộthayđổitriệuchứnglâmsàng sauđiềutrị6tuần 95 Bảng 3.34 Tỷlệsạchấu trùngsau điều trị (n=79) .95 Bảng 3.35 Hiệuquả điềutrị củaivermectin(n =57) 96 Bảng3.36 Tỷlệcác tác dụngkhông mongmuốn uốngthuốc(n = 79) 96