Nghiên cứu thành phần hóa học của nấm cổ linh chi (ganoderma australe (fr ) pat ) ở nghệ an luận văn thạc sỹ hóa học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH HỒ THI HẢI YÊN NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NẤM CỔ LINH CHI (GANODERMA AUSTRALE (Fr.) Pat.) Ở NGHỆ AN LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Vinh - 2012 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA NẤM CỔ LINH CHI (GANODERMA AUSTRALE (Fr.) Pat.) Ở NGHỆ AN Chuyên ngành : HOÁ HỮU CƠ Mã số: 60.44.27 LUẬN VĂN THẠC SĨ HOÁ HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS TRẦN ĐÌNH THẮNG Học viên cao học: Vinh - 2012 HỒ THỊ HẢI YÊN LỜI CẢM ƠN Luận văn thực phịng thí nghiệm chun đề Hố hữu - khoa Hố, Trung tâm Kiểm định An tồn Thực phẩm Môi trường, Trường Đại học Vinh, Viện Hố học-Viện Khoa học Cơng nghệ Việt Nam Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành sâu sắc đến TS Trần Đình Thắng - Khoa Hố, Trường Đại học Vinh giao đề tài, tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện suốt trình thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn PGS TS Hoàng Văn Lựu, TS Lê Đức Giang Khoa Hoá - Trường Đại học Vinh tạo điều kiện thuận lợi, động viên tơi q trình làm luận văn ThS Đỗ Ngọc Đài giúp thu mẫu thực vật TS Ngô Anh ( khoa Sinh, Trường Đại học khoa học Huế) giúp định danh mẫu thực vật Nhân dịp này, xin gửi lời cảm ơn đến thầy cơ, cán bộ mơn hố Hữu cơ, khoa Hoá, khoa Đào tạo Sau đại học-Trường Đại học Vinh, bạn đồng nghiệp, học viên cao học, sinh viên, gia đình người thân động viên giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Vinh, ngày 10 tháng 10 năm 2012 Tác giả Hồ Thị Hải Yên MỤC LỤC Nội dung Trang MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Đối tượng nghiên cứu Nhiệm vụ nghiên cứu CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Chi Ganoderma (Linh chi) 1.1.1 Đặc điểm hình thái phân loại nấm Linh chi 1.1.2 Thành phần hóa học: 10 1.1.2.1 Lanostanoit tritecpenoit 11 1.1.2.2 Các sterol 22 1.1.2.2.1 Nguồn gốc phát sinh ergosterol 24 1.1.2.3 Polysaccarit kháng u 25 1.1.3 Tác dụng dược lý 26 1.1.3.1 Kháng khuẩn chất chuyển hóa 27 1.1.3.2 Chất chuyển hóa có đặc tính chống oxy hóa 29 1.2 Đối tượng nghiên cứu 29 1.2.1 Phân loại 29 1.2.2 Đặc điểm hình thái 30 1.2.2.1 Đặc điểm bên 30 1.2.2.2 Đặc điểm bên 32 1.2.2.3 Phân bố 33 1.2.3 Thành phần hóa học 33 1.2.4 Hoạt tính sinh học 35 Chƣơng PHƢƠNG PHÁP VÀ THỰC NGHIỆM 36 2.1 Phương pháp nghiên cứu 36 2.1.1 Phương pháp lấy mẫu 36 2.1.2 Phương pháp phân tích, phân tách hỗn hợp phân lập hợp chất 36 2.1.3 Phương pháp khảo sát cấu trúc hợp chất 36 2.2 Hoá chất, dụng cụ thiết bị 37 2.2.1 Hoá chất 37 2.2.2 Dụng cụ thiết bị 37 2.3 Nghiên cứu hợp chất 37 2.3.1 Thu mẫu 37 2.3.2 Phân lập hợp chất 37 2.3.3 Một số kiện phổ hồng ngoại, phổ khối lượng phổ cộng hưởng từ hạt nhân chất phân lập Chƣơng Kết qua thảo luận 39 40 3.1 Phân lập hợp chất 40 3.2 Xác định cấu trúc hợp chất 83 40 3.3 Xác định cấu trúc hợp chất 84 54 KẾT LUẬN 63 DANH MỤC CƠNG TRÌNH 64 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH SÁCH BẢNG Trang Bảng 3.1 Số liệu phổ NMR hợp chất 83 41 Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất 84 55 DANH SÁCH HÌNH Trang Hình 1.1 Hình 1.2 Chu trình phát triển nhóm Nấm họ Linh chi Ganoderma lucidum (W.Curt.: Fr.) Karst - Linh chi đỏ Hình 1.3 Ganoderma sinesis – Huyền chi Hình 1.4 Ganoderma tropicum Hình 1.5 Ganoderma tsugae 10 Hình 1.6 Ganoderma appalanatum 10 Hình 1.7 Các kiểu cấu trúc lanostanoit 12 Hình 1.8 Ergosterol chuyển đổi vitamin D2 23 Hình 1.9 Sinh tổng hợp ergosterol 24 Hình 1.10 Hiển thị định hướng vị trí -glucan liên kết khác Hình 1.11 kiểu cấu trúc glucan phân lập từ G.lucidum 25 25 Hình 1.12.1 Ganoderma australe non 30 Hình 1.12.2 Ganoderma australe lâu năm 30 Hình 1.12.3 Bề mặt G.australe 31 Hình 1.12.4 Lớp chân lơng phía G.australe 31 Hình 1.12.5 Lát cắt ngang G.australe G.applanatum 32 Hình 3.1 Phổ EI-MS hợp chất 83 43 Hình 3.2 Phổ 1H-NMR hợp chất 83 43 Hình 3.3 Phổ 1H-NMR hợp chất 83 (phổ dãn) 44 Hình 3.4 Phổ 1H-NMR hợp chất 83 (phổ dãn) 44 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.5 Phổ 13C-NMR hợp chất 83 45 Hình 3.6 Phổ 13C-NMR hợp chất 83 (phổ dãn) 45 Hình 3.7 Phổ DEPT hợp chất 83 46 Hình 3.8 Phổ DEPT hợp chất 83 (phổ dãn) 46 Hình 3.9 Phổ HSQC hợp chất 83 47 Hình 3.10 Phổ HSQC hợp chất 83 (phổ dãn) 48 Hình 3.11 Phổ HSQC hợp chất 83 (phổ dãn) 49 Hình 3.12 Phổ HMBC hợp chất 83 50 Hình 3.13 Phổ HMBC hợp chất 83 (phổ dãn) 51 Hình 3.14 Phổ HMBC hợp chất 83 (phổ dãn) 52 Hình 3.15 Phổ COSY hợp chất 83 53 Hình 3.16 Phổ khối lượng hợp chất 84 57 Hình 3.17 Phổ 1H-NMR hợp chất 84 57 Hình 3.18 Phổ 1H-NMR hợp chất 84 58 Hình 3.19 Phổ 13C-NMR hợp chất 84 58 13 Hình 3.20 Phổ C-NMR hợp chất 84 59 Hình 3.21 Phổ 13C-NMR hợp chất 84 59 Hình 3.22 Phổ DEPT hợp chất 84 60 Hình 3.23 Phổ DEPT hợp chất 84 60 Hình 3.24 Phổ HMBC hợp chất 84 61 Hình 3.25 Phổ HSQC hợp chất 84 62 DANH SÁCH SƠ ĐỒ Trang Sơ đồ 2.1 Phân lập hợp chất nấm cổ linh chi Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn 38 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an danh môc kí hiệu, chữ viết tắt CC: Column Chromatography (S¾c kÝ cét) FC: Flash Chromatography (S¾c ký cét nhanh) TLC: Thin Layer Chromatography (S¾c kÝ líp máng) IR: Infrared Spectroscopy (Phỉ hång ngo¹i) MS: Mass Spectroscopy (Phỉ khèi l-ợng) EI-MS: Electron Impact-Mass Spectroscopy (Phổ khối va chạm electron) ESI-MS: Electron Spray Impact-Mass Spectroscopy (Phỉ khèi l-ỵng phun mï electron) H-NMR: Proton Magnetic Resonance Spectroscopy (Phæ céng h-ëng từ hạt nhân proton) 13 C-NMR: Carbon Magnetic Resonance Spectroscopy (Phổ cộng h-ởng từ hạt nhân cacbon-13) DEPT: Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer HSQC: Heteronuclear Single Quantum Correlation HMBC: Heteronuclear Multiple Bond Correlation COSY: Correlation Spectroscopy s: singlet br s: singlet tï t: triplet d: dublet dd: dublet cña duplet dt: dublet cña triplet m: multiplet TMS: Tetramethylsilan DMSO: DiMethylSulfoxide §.n.c.: §iĨm nãng ch¶y Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Hiện nấm cơng nhận giới riêng biệt, khác biệt hẳn với thực vật hay động vật, chúng tách xuất xấp xỉ tỷ năm trước [5], tạo thành giới riêng biệt hành tinh Và giới nấm ngày có ý nghĩa to lớn kinh tế quốc dân, khoa học vịng tuần hồn vật chất Nấm phân bố toàn giới phát triển nhiều dạng môi trường sống khác nhau, kể sa mạc Đa phần nấm sống cạn, số lồi lại tìm thấy mơi trường nước Dựa theo theo tỉ lệ số loài nấm với số lồi thực vật mơi trường, người ta ước tính giới Nấm có khoảng 1,5 triệu lồi [9] Tuy nhiên có khoảng 70.000 lồi nấm nhà phân loại học phát miêu tả Nấm sử dụng dân gian từ hàng ngàn năm có ý nghĩa quan trọng đời sống người Chúng nguồn thực phẩm giàu chất dinh dưỡng (Termitomyces albuminosus, Macrocybe gegantea), nguồn thức ăn quý nhân dân ưa chuộng, chứa nhiều protein, chất khoáng vitamin (A, B, C, D, E ) [17] Nhiều loài nấm ứng dụng công nghiệp dược phẩm, nguồn nguyên liệu để điều chế hoạt chất điều trị bệnh như: Laricifomes officinalis nguyên liệu để chiết aragicin dùng chữa bệnh lao [7,13], dùng làm thuốc nhuận tràng hay chất thay cho quinine [13] Những loại nấm nấm múa, nấm hương , nấm linh chi tập trung nghiên cứu khả chống ung thư, chống virus tăng cường hệ miễn dịch chúng Từ 2000 năm trước, Linh chi sử dụng dân gian loại thuốc quý vua chúa sử dụng Hiện nhà khoa học phát thêm nhiều lồi linh chi có đặc tính q, tốt cho phòng chữa bệnh Các chế phẩm từ nấm linh chi (Ganoderma) dùng để hỗ trợ điều trị nhiều bệnh bệnh gan, tiết niệu, tim mạch, ung thư, AIDS [1, 2, 4, 10] Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 54 3.3 Xác định cấu trúc hợp chất 84 Hợp chất 84 thu dạng thể hình kim khơng màu Trên phổ 13C-NMR xuất tín hiệu 28 nguyên tử carbon, có cacbon methyl, methylen, 11 methyl cacbon không nối với nguyên tử xác định phổ DEPT 90 DEPT 135 Hai nối đôi xác định 135,2 (C-6), 130,1 (C-7), 135,6 (C-22) 131,5 (C-23), hai cacbon bậc ba nối với nguyên tử oxi 81,4 (C-5) 78,4 (C-8) với hai tín hiệu carbon nối đôi C-6/C-7 đặc trưng cho tạo thành liên kết peroxit C-6/C-7 Ngoài phổ 13C-NMR cịn xuất tín hiệu cacbon oxymethyl  64,6 (C-3), sáu nhóm methyl  12,5 (C-18), 17,9 (C-19), 20,2 (C-21), 19,4 (C-26), 19,7 (C-27) 17,2 (C-28) Trên phổ 1H-NMR, có mặt hai nhóm methyl bậc bốn nhận biết hai singlet  0,87 (s, H-18) 0,95 (s, H-19), ba nhóm methyl bậc ba 0,87 d (J=6,5 Hz, H-26), 0,89 d (J=6,5 Hz, H-27) 0,96 d (J=7,0 Hz, H-28) Bốn proton hai nối đôi xác định  6,23 (J=8,5 Hz, H-6), 6,44 d (J=8,5 Hz, H-7), 5,28 (m, H-22) 5,18 (m, H-23) proton oxymethyl  3,58 (m, H-3) Những dấu hiệu điển hình cho hợp chất sterol mà cấu trúc hố học esgosterol peroxit Các liệu phổ 62 kiểm tra so sánh với liệu phổ tương ứng esgosterol peroxit cho kết phù hợp Ngoài phổ HSQC HMBC thực để xác định xác giá trị độ dịch chuyển hoá học cacbon proton Trên phổ HMBC, tương tác H-6 với C-5/C-10/C-8, tương tác H-7 với C-5, C-9, tương tác H-19 với C-1/C-5/C-9/C-10, tương tác H-18 với C-12/C-13/C-15/C-17, tương tác H-21 với C-17/C-20/C-22 tương tác H-28 với C-23/C-24/C-25 chứng tỏ có mặt nối đơi C-6/C-7, C22/C-23 có mặt liên kết peroxit C-5/C-7 Sự trùng khớp Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 55 giá trị độ dịch chuyển hoá học 62 với esgosterol peroxit cho thấy nhóm hydroxy gắn vào C-3 với cấu hình  Cơng thức phân tử dự kiến C28H44O3 với khối lượng phân tử 428 đvc khẳng định kết thu phổ khối lượng EI-MS với xuất pic ion m/z 428 [M]+ Bảng 3.2 Số liệu phổ NMR hợp chất 84 C DEPT C H CH2 29,9 1,59 m; 1,85 m CH2 34,5 1,72 m; 1,86 m CH 64,6 3,58 m CH2 38,7 1,98m C 81,4 - CH 135,2 6,23 d (J = 8,5 Hz) 4,5,7,8,10 CH 130,1 6,44 d (J = 8,5 Hz) 5,6,8,9 C 78,4 - CH 50,9 1,52 m 10 C 36,9 - 11 CH2 21,7 1,37 m; 1,49m 12 CH2 36,5 1,94 m; 1,99 m 13 C 44,0 - 14 CH 51,2 1,53 m 15 CH2 22,8 1,56 m; 1,26 m 16 CH2 28,2 1,43 m; 1,78 m 17 CH2 55,4 1,28 m 18 CH3 12,5 0,87 s 12,13,14,17 19 CH3 17,9 0,95 s 1,5,9,10 20 CH 40,1 1,98 m 21 CH3 20,2 1,05 d (J=6,5 Hz) Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn HMBC (H-C) 17, 20, 22 C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 56 22 CH 135,6 5,28 m 23 CH 131,5 5,18 m 24 CH 42,0 1,87 m 25 CH 32,4 1,52 m 26 CH3 19,4 0,87 d (J=6,5 Hz) 24, 25 27 CH3 19,7 0,89 d (J=6,5 Hz) 24, 25 28 CH3 17,2 0,96 d (J= 7,0 Hz) 23, 24, 25 Từ liệu trên, hợp chất 84 xác định 5α, 8-epidioxyergosta-6,22dien-3-ol) Hợp chất phân lập từ Ajuga remot, từ bọt biển Axinella cannabina Typha latifolia số loài khác Hợp chất egrosterol peroxit biết đến với hoạt tính kháng khuẩn ức chế phát triển tế bào ung thư cao HO O O (84) (5α, 8-epidioxyergosta-6,22-dien-3-ol Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 57 Hình 3.16: Phổ khối lượng hợp chất 84 Hình 3.17: Phổ 1H-NMR hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 Hình 3.18: Phổ 1H-NMR hợp chất 84 Hình 3.19: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 Hình 3.20: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 Hình 3.21: Phổ 13C-NMR hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 Hình 3.22: Phổ DEPT hợp chất 84 Hình 3.23: Phổ DEPT hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 Hình 3.24: Phổ HMBC hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 Hình 3.25: Phổ HSQC hợp chất 84 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 63 KẾT LUẬN Nghiên cứu thành phần hoá học dịch chiết nấm Cổ Linh chi (Ganoderma australe Pat.) thuộc họ Ganodermaceae Việt Nam thu số kết sau: - Nấm Cổ Linh chi chiết với dung môi metanol ngày, cất thu hồi dung môi thu cao metanol thô (154g) - Bằng phương pháp phân bố cao metanol nước chiết với dung môi chọn lọc chưng cất chân không thu 42 g cao etyl axetat 67g cao butanol - Phân lập hợp chất từ cao etyl axetat phương pháp sắc ký thu hợp chất 83 (358 mg), hợp chất 84 (332 mg) - Sử dụng phương pháp phổ đại: phổ hồng ngoại IR, phổ khối lượng (EI-MS), phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT, HMBC HSQC để xác định cấu trúc hợp chất tách Các kết phổ xác định: hợp chất 83 ergosta-4,22-dien-3-on; hợp chất 84 5α, 8epidioxyergosta-6,22-dien-3-ol Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 64 DANH MỤC CÔNG TRÌNH Nguyễn Huy Hùng, Hồ Thị Hải Yên, Trần Đình Thắng Các hợp chất steroit tritecpenoit từ thể Linh chi đỏ ( Ganoderma lucidum L) Việt Nam, tạp chí hố học Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt Ngô Anh (1999), “Nghiên cứu họ nấm Linh Chi (Ganodermataceae Donk) Thừa Thiên Huế”, Báo cáo khoa học – Proceedings Hội nghị cơng nghệ sinh học tồn quốc, Hà Nội, tr 1043 – 1049 Ngô Anh (2003), Nghiên cứu thành phần loài nấm Thừa Thiên Huế, Luận án Tiến sĩ khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học quốc gia Hà Nội Nguyễn Thị Chính, Kiều Thu Vân, Dương Đình Bi, Nguyễn Thị Đức Hiền (1999), “Nghiên cứu số hoạt chất sinh học tác dụng chữa bệnh nấm Linh chi (Ganoderma lucidum)”, Proceedings - Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, Hà Nội, tr 956 – 963 Trịnh Tam Kiệt, Ngô Anh, U Grafe, H Dorflt (2000), “Những dẫn liệu bổ sung thành phần loài hoá hợp chất tự nhiên khu hệ nấm Việt Nam”, Báo cáo khoa học - Hội nghị Sinh học Quốc gia: Những vấn đề nghiên cứu sinh học, Hà Nội, tr 247 – 250 Trinh Tam Kiet (1998), “Preliminary checklist of macrofungi of Vietnam”, Feddes Repertorium 109 (3 - 4), pp 257 – 277 Trịnh Tam Kiệt (1996), Danh lục nấm Việt Nam, Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Đàm Nhận (1996), Nghiên cứu thành phần loài số đặc điểm sinh học nấm Linh chi (Ganodermataceae Donk) Việt Nam, Luận án PTS Khoa học Sinh học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQG Hà Nội, Hà Nội Trần Văn Sung (2002), Phổ cộng hưởng từ hạt nhân hoá hữu cơ, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội 10 Đào Hữu Vinh, Nguyễn Xuân Dũng, Trần Thị Mỹ Linh, Phạm Hùng Việt (1985), Các phương pháp sắc ký, Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 66 Tiếng Anh 11 Abdul K D (1999) Spectroscopy and chemical studies on the chemical constituents of Savia triloba and related plant species University of Karachi, Pakistan 12 Ahammadsahib K I., Hollingworth R M., McGovren J P., Hui Y H., McLaughlin J L (1993), Mode of action of bullatacin a potent antitumor and pesticidal Annonaceous acetogenin, Life Sci., 53, 11131120 13 Alexandra L (2000)., Triterpenes and Sterols from Ganoderma australe (Fr.) Pat (Aphyllophoromycetideae), Vol 2, 4, 128 14 Amolak C J., (1984), The isolation of lanosta-7,9(11),24-trien-3,21diol from the fungus G.australe Phytochemistry, Vol.23, No.3, 686-687 15 Anna L P., Attilio V., Siro P., Francesco D S., Luca R (2007), Flavonol glycosides from whole cottonseed by-product, Food chemistry, 100, 344–349 16 Artur S J, (2006), Derivatization Does Not Influence Antimicrobial and Antifungal Activities of Applanoxidic Acids and Sterols from Ganoderma spp, Z Naturforsch 61c, 31-34 17 Buckingham J (2005), Dictionary of Natural Products Vol 3, Chapman & HallInc, London, 53660 18 Chaichantipyuth C, Tiyaworanan S, Mekaroonreung S, Ngamrojnavanich N, Roengsumran S, Puthong S, Petsom A and Ishikawa T (2001) Oxidized heptenes from flower of Melodorum fruticosum, Phytochemistry, 58(8), 1311-1315 19 Charoenpanich J., Chulalaksananukul W and Yongvanich T (2005), Synthesis of amyl acetate by immobilized lipases from mucor miehei and Aspergillus niger in n-hexane, Journal of Scientific Research of Chulalongkorn University, 30(2), 153-159 20 Chulalaksananukul W., Buaboocha T., Wongkasemsombat A and Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 67 Yongvanich T (1998), Synthesis of amyl acetate by lipases from various microorganisms, Thai J Agri Sci., 31(4), 594-600 21 De Smet AGM Peter (1997), The role of plant derived drugs and herbal medicines in healthcare, Drugs, 54(6), 801-840 22 Dictionary of Natural product on CD-Rom (2005), Chapman and HallCRC 23 George I., Ndukwe C and Yimin Z., Pharmacological activity of 2,3,8tri-O-methyl ellagic acid isolated from the stem bark of Irvingia gabonensis, African Journal of Biotechnology, (16), pp 1910-1912 24 George I., Ndukwe C., Amupitan J O and Yimin Z (2008), Isolation and characterization of 2, 3, 8-tri-me ether ellagic acid from the stem bark of Irvingia gabonensis (Baill), Journal of Medicinal Plants Research, 2(9), 234-236 25 Gerald D C (2006), Annonaceae, [Online], Botany department, University of Hawaii Available from: www.botany.hawaii.edu/faculty/carr/annon.htm.[Accessed 2006 April 27] 26 Jung J H., Chang C J., McLaughlin J L., Pummangura S., Chaichantipyuth C and Patarapanich C (1991), Additional bioactive heptenes from Melodorum fruticosum, J Nat Prod., 54(2), 500-505 27 Jung J H., Pummangura S., Chaichantipyuth C., Patarapanich C and McLaughlin J L (1990), Bioactive constituents of Melodorum fruticosum, Phytochemistry, 29(5), 1667-1670 28 Jung J H., Pummangura S., Chaichantipyuth C., Patarapanich C., Fanwick P E., Chang C J and McLaughlin J L (1990), New bioactive heptenes from Melodorum fruticosum (Annonaceae), Tetrahedron, 46(15), pp 5043-5054 29 Kim D S., Baek N I., Oh S R., Jung K Y., Lee I S., Kim J H., Lee H K., (1997) Anticomplementary activity of ergosterol peroxide from Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn