Nguyễn thùy linh xây dựng phương pháp định lượng methanol, rượu bậc cao, furfural trong rượu trắng bằng gc fid khóa luận tốt nghiệp dược sĩ

BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THÙY LINH XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METHANOL, RƯỢU BẬC CAO, FURFURAL TRONG RƯỢU TRẮNG BẰNG GC-FID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2023 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN THÙY LINH Mã sinh viên: 1801402 XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METHANOL, RƯỢU BẬC CAO, FURFURAL TRONG RƯỢU TRẮNG BẰNG GC-FID KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS Nguyễn Lâm Hồng Ths Phạm Thị Thanh Nga Nơi thực hiện: Viện dinh dưỡng Quốc gia HÀ NỘI - 2023 LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực đề tài với nhiều nỗ lực cố gắng, thời điểm hồn thành khóa luận lúc tơi xin phép bày tỏ lòng biết ơn chân thành dành cho người dạy dỗ, hướng dẫn giúp đỡ suốt thời gian qua Đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới ThS Phạm Thị Thanh Nga, Th.S Lê Hùng Dũng TS Nguyễn Lâm Hồng dành nhiều thời gian tâm huyết để hướng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành đề tài tốt nghiệp Tôi xin trân trọng cảm ơn thầy cô công tác Khoa Hóa Phân tích Kiểm nghiệm thuốc, Trường Đại học Dược Hà Nội dạy giúp đỡ thời gian học tập trường Tơi xin chân thành cảm ơn tồn thể cán khoa Hóa thực phẩm – Viện dinh dưỡng Quốc gia giúp đỡ, tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực tập nghiên cứu khoa Cuối cùng, xin dành lời cảm ơn chân thành cho gia đình, bạn bè đặc biệt thành viên tổ 12 lớp M1K73 Sự cổ vũ, động viên tất người nguồn động lực to lớn cho tơi q trình thực khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 31 tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thùy Linh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ CÁI VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ .1 TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan rượu trắng 1.1.1 Phân loại rượu trắng 1.1.2 Các tạp chất có rượu trắng 1.1.3 Các phương pháp định lượng tạp chất methanol, rượu bậc cao (propanol, alcol amylic, alcohol isobutyl) furfural sắc ký khí (GC) 1.2 Tổng quan phương pháp sắc ký khí (GC – Gas Chromatography) .9 1.2.1 Khái niệm quy trình hoạt động hệ thống sắc ký khí 1.2.2 Cấu tạo hệ thống sắc ký khí ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 13 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị 13 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 13 2.1.2 Hóa chất 13 2.1.3 Thiết bị 13 2.1.4 Dụng cụ 13 2.2 Nội dung nghiên cứu 14 2.2.1 Xây dựng phương pháp phân tích 14 2.2.2 Thẩm định phương pháp phân tích 14 2.2.3 Ứng dụng phân tích mẫu thực tế 14 2.3 Phương pháp nghiên cứu 14 2.3.1 Chuẩn bị dung dịch chuẩn 14 2.3.2 Lựa chọn phương pháp phân tích Methanol, rượu bậc cao( Propanol, Alcohol isobutyl, Alcol amylic) Furfural 15 2.3.3 Thẩm định phương pháp 17 2.3.4 Áp dụng phương pháp xây dựng để kiểm tra mẫu rượu trắng lưu hành thị trường 21 2.4 Xử lý kết 21 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 3.1 Khảo sát điều kiện phân tích đồng thời Methanol, rượu bậc cao ( Propanol, Alcohol isobutyl, Alcol amylic) Furfural 22 3.1.1 Khảo sát chương trình nhiệt độ 22 3.1.2 Khảo sát chế độ chia dòng 23 3.1.3 Khảo sát chuẩn nội 24 3.2 Thẩm định phương pháp định lượng đồng thời MeOH, rượu bậc cao, furfural rượu trắng 25 3.2.1 Độ ổn định hệ thống 25 3.2.2 Tính đặc hiệu 27 3.2.3 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 29 3.2.4 Khoảng tuyến tính 29 3.2.5 Độ xác phương pháp (độ độ chụm) 31 3.2.6 Độ không đảm bảo đo phương pháp 33 3.3 ỨNG DỤNG PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH MỘT SỐ MẪU THỰC TẾ TRÊN THỊ TRƯỜNG .33 3.4 BÀN LUẬN .36 KẾT LUẬN VÀ DỀ XUẤT 38 4.1 KẾT LUẬN .38 4.2 ĐỀ XUẤT 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU VÀ CHỮ CÁI VIẾT TẮT STT Chữ viết tắt Nội dung đầy đủ Nghĩa tiếng Việt a.a Alcol amylic Acol amylic a.iso Alcohol isobutyl Isobutanol a.pro Propanol Propanol ACN Acetonitril Acetonitril AOAC Association of Official Analytical Chemists Hiệp hội nhà hố phân tích thức CV Coefficient of Variation Hệ số biến thiên ĐTH Độ thu hồi Độ thu hồi ECD Electron Capture Detector) Đầu dò cộng kết điện tử EtOH Ethanol Ethanol 10 FID Flame Ioniation Detector Đầu dị ion hóa lửa 11 fur Furfural Furfural 12 GC Gas Chromatography Sắc ký khí 13 GLC Gas liquid chromatography Sắc ký khí phân bố 14 GSC Gas solid chromatography Sắc ký khí hấp phụ HALICO Hanoi Liquor And Beverage Joint Stock Company Công ty cổ phần rượu nước giải khát Hà Nội 16 HL Hàm lượng Hàm lượng 17 IS Internal standard Chất chuẩn nội 18 LOD Limit of detection Giới hạn phát hiên 19 LOQ Limit of quantification Giới hạn định lượng 15 20 NDP Nitrogen-phosphorus Đầu dò nito phospho Detector 21 Me, MeOH Methanol Methanol 22 RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối 23 SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn Thermal Conductivity Đầu dò dẫn nhiệt 23 TCD Detector 24 TCVN Tiêu chuẩn Việt Nam Tiêu chuẩn Việt Nam 25 TLTK Tài liệu tham khảo Tài liệu tham khảo DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Tiêu chuẩn giới hạn hàm lượng tạp chất rượu trắng quy định TCVN 7043:2013 [2] .3 Bảng 1.2: Một số phương pháp định lượng methanol, rượu bậc cao, furfural sắc ký khí (GC) Bảng 2.1: Một số chương trình nhiệt độ 16 Bảng 2.2: Cách pha dung dịch đường chuẩn 18 Bảng 2.3: Cách pha mẫu placebo nạp chuẩn 19 Bảng 3.1: Tỉ số S/N chất mức nồng độ khác 24 Bảng 3.2: Kết độ phù hợp hệ thống diện tích pic 26 Bảng 3.3: Kết độ phù hợp hệ thống thời gian lưu tR 26 Bảng 3.4: Giá trị S/N pic nạp chuẩn kết LOQ, LOD 29 Bảng3.5: Phương trình hồi quy Methanol, Rượu bậc cao Furfural 30 Bảng 3.6 Hàm lượng tạp chất Methanol, rượu bậc cao (propanol, alcohol isobutyl, alcol amylic) Furfural mẫu 31 Bảng 3.7: Độ lặp lại độ thu hồi Mrthanol Furfural .31 Bảng 3.8: Độ lặp lại độ thu hồi rượu bậc cao 31 Bảng 3.9: Độ không đảm bảo đo Methanol, Rượu bậc cao Furural mức nồng độ thấp, trung bình, cao 33 Bảng 3.10: Kết phân tích số mẫu thực tế thị trường 35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ ĐỒ THỊ Hình 1.1: Cấu trúc phân tử Methanol .3 Hình 1.2: Cấu trúc phân tử Propanol Hình 1.3: Cấu trúc phân tử Alcol amylic Hình 1.4: Cấu trúc phân tử Alcohol isobutyl Hình 1.5: Cấu trúc phân tử Furfural Hình 1.6: Hệ thống Sắc ký khí 10 Hình 1.7: Bộ phận tiêm mẫu chế độ chia dòng (split) 10 Hình 1.8: So sánh hiệu tách cột nhồi cột mao quản 11 Hình 1.9: Detector FID 12 Hình 3.1: Sắc ký đồ sử dụng chương trình nhiệt độ .22 Hình 3.2: Sắc ký đồ sử dụng chương trình nhiệt độ .22 Hình 3.3 Sắc ký đồ sử dụng chương trình nhiệt độ .23 Hình 3.4 Sắc ký đồ mẫu trắng nạp chuẩn nội ACN 0,1% .24 Hình 3.5 Sắc ký đồ mẫu trắng nạp chuẩn nội n-butanol 0,1% 25 Hình 3.6: Sắc ký đồ mẫu trắng nạp chuẩn nội 3-pentanol 0,1% 25 Hình 3.7: Sắc ký đồ mẫu placebo 27 Hình 3.8: Sắc ký đồ mẫu chuẩn 27 Hình 3.9: Sắc ký đồ mẫu placebo nạp chuẩn 28 Hình 3.10: Đồ thị đường chuẩn Methanol, Rượu bậc cao Furfural 30 ĐẶT VẤN ĐỀ Theo thống kê hiệp hội bia, rượu, nước giải khát Việt Nam (VBA), nước ta lượng rượu bất hợp pháp nằm quản lý nhà nước chiếm tới 63% tổng khối lượng lít cồn nguyên chất tiêu thụ Việt Nam, lượng rượu quản lý quan chức chiếm 37% Không Việt Nam, khu vực ASEAN dự báo vào năm 2025, lượng rượu bia không quản lý tăng cao Tại Việt Nam, rượu tự nấu ưa chuộng hàng đầu giá thành rẻ dễ mua Việc sản xuất rượu thủ công hộ gia đình khơng đảm bảo điều kiện vệ sinh an tồn thực phẩm Người dân khơng có đầy đủ kiến thức chất độc cách loại bỏ tạp chất có rượu, nhiều cịn trộn thêm cồn cơng nghiệp (methanol) để tăng dung tích giảm chi phí Việc quản lý rượu thủ cơng cịn lỏng lẻo làm nguy gây ngộ độc rượu tăng cao Ngoài rượu thủ công, nhiều sở doanh nghiệp cố tình sản xuất rượu giả, rượu nhái để thu lợi nhuận cao Sau sử dụng cồn công nghiệp không qua xử lý độc tố để pha với nước thành rượu, doanh nghiệp làm rượu giả sử dụng nhiều biện pháp để làm giả bao bì, hình thức để qua mắt quan chức người tiêu dùng Một biện pháp làm giả rượu lấy chai rỗng sau sử dụng rượu ngoại để đánh vào tâm lý sính ngoại người dân ruột rượu bị làm giả khó phát mắt thường Rượu thủ công rượu giả bày bán tự nhiều tiệm tạp hóa, sở bn bán nhỏ lẻ mà khơng có kiểm sốt quan chức Vài năm gần đây, tình trạng ngộ độc rượu ngày trở nên nghiêm trọng Ngày 9/11/2022, bệnh viện đa khoa tỉnh Kiên Giang có bệnh nhân nhập viện cấp cứu ngộ độc methanol, bệnh nhân có người tử vong Ngày 13/2/2023, Nghệ An có người phải nhập viện cấp cứu sau uống rượu Ngày 28/4/2023, Cà Mau có người nhập viện ngộ độc rượu methanol, bệnh nhân có người tử vong Theo thống kê Cục An toàn thực phẩm-Bộ y tế, 10 năm qua, tồn quốc có 500 người bị ngộ độc sử dụng rượu không đảm bảo chất lượng, có 100 ca tử vong Xuất phát từ thực tế đó, chúng tơi tiến hành đề tài: “ Xây dựng phương pháp định lượng methanol, rượu bậc cao furfural rượu trắng GC-FID” với mục tiêu: - Xây dựng thẩm định phương pháp định lượng methanol, rượu bậc cao furfural rượu trắng GC-FID - Áp dụng phương pháp thẩm định để kiểm tra số mẫu rượu trắng lưu hành thị trường PHỤ LỤC Phụ lục 1: Một số sắc ký đồ khảo sát chế độ chia dòng Phụ lục 2: Độ lặp lại độ thu hồi nồng độ LOQ Phụ lục 3: Kết khảo sát khoảng tuyến tính Methanol, rượu bậc cao Furfural Phụ lục 4: Kết độ lặp lại độ thu hồi Methanol, rượu bậc cao Furfural Phụ lục 5: Một số sắc ký đồ chất phân tích nồng độ khảo sát Phụ lục 6: Quy định AOAC độ lặp lại độ thu hồi Phụ lục 7: Sắc ký đồ số mẫu rượu trắng thị trường Phụ luc 8: Bảng tra độ cồn chưng cất PHỤ LỤC 1: MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ KHẢO SÁT CHẾ ĐỘ CHIA DỊNG Hình 1: Nồng độ µl/L chế độ 100:1 Hình 2: Nồng độ µl/L chế độ 50:1 Hình 3: Nồng độ 20 µl/L chế độ 100:1 Hình 4: Nồng độ 20 µl/L chế độ 50:1 PHỤ LỤC 2: ĐỘ LẶP LẠI VÀ ĐỘ THU HỒI TẠI NỒNG ĐỘ LOQ Bảng 3.7: Độ lặp lại độ thu hồi mức LOQ rượu bậc cao HL chất chuẩn vial (µl/L) Propanol (a.pro) Ca.pro (ml/L) Ca.pro (mg/L) Alcohol isobutyl (a.iso) Độ thu hồi (%) Ca.iso (ml/L) Ca.iso (mg/L) Alcol amylic (a.a) Độ thu hồi (%) Ca.a Ca.a (ml/L) (mg/L) Độ thu hồi (%) 5,47 4,30 109,31 4,66 3,67 93,28 5,38 4,23 107,68 4,82 3,78 96,30 3,95 3,10 78,92 4,86 3,82 97,12 4,93 3,88 98,64 4,11 3,23 82,27 5,17 4,06 103,31 4,85 3,81 96,94 4,68 3,68 93,69 5,57 4,38 111,45 4,91 3,86 98,22 4,35 3,42 87,03 4,86 3,82 97,13 4,95 3,89 99,07 4,34 3,41 86,77 5,42 4,26 108,40 4,74 3,72 94,77 4,44 3,49 88,82 5,20 4,09 104,01 TB (mg/L) 3,89 3,43 4,09 TB ĐTH(%) 99,04 87,25 104,16 SD (mg/L) 0,19 0,21 0,22 RSD (%) 4,82 6,19 5,31 Bảng 3.8: Độ lặp lại độ thu hồi Methanol furfural nồng độ LOQ HL chất chuẩn vial (µl/L) Methanol (Me) CME CME Độ thu hồi HL chất chuẩn (ml/L) (mg/L) (%) vial (ml/L) Furfural (fur) Cfur Cfur Độ thu hồi (ml/L) (mg/L) (%) 20 19,87 15,74 99,36 4,97 5,76 99,33 20 19,93 15,79 99,67 3,93 4,56 78,67 20 20,12 15,94 100,60 4,05 4,70 80,99 20 19,83 15,71 99,17 4,37 5,07 87,36 20 20,31 16,09 101,55 4,08 4,73 81,54 20 20,78 16,46 103,88 4,56 5,29 91,22 20 20,08 15,90 100,38 4,73 5,48 94,55 TB (mg/L) 15,94 TB (mg/L) 5,08 SD (mg/L) 0,26 SD (mg/L) 0,45 TB ĐTH (%) RSD(%) 100,66 1,63 87,67 RSD (%) 8,82 PHỤ LỤC 3: KẾT QUẢ KHẢO SÁT TUYẾN TÍNH CỦA METHANOL RƯỢU BẬC CAO VÀ FURFURAL Bảng 1: Kết khảo sát tuyến tính rượu bậc cao Tỉ lệ Diện tích pic Propanol Alcohol isobutyl Alcol amylic thể n-butanol Diện tích Tỉ lệ Diện tích Tỉ lệ Diện tích pic tích pic diện pic diện tích tích Tỉ lệ diện tích 20,00 26.382,85 511.863,05 19,40 612.354,22 23,21 639.591,88 24,24 5,00 93.109,34 442.740,44 4,76 529.278,19 5,68 554.512,56 5,96 2,00 188.933,12 355.504,78 1,88 426.951,10 2,26 445.807,12 2,36 1,00 278.097,88 305.446,14 1,10 311.003,37 1,12 328.253,87 1,18 0,50 383.006,31 177.064,10 0,46 212.856,80 0,56 220.958,15 0,58 0,20 466.465,66 83.814,90 0,18 101.710,20 0,22 106.225,24 0,23 0,10 522.464,70 45.313,22 0,09 55.209,28 0,11 57.425,00 0,11 0,05 547.069,70 24.528,23 0,04 29.766,33 0,05 31.122,26 0,06 Bảng 2: Kết khảo sát tuyến tính methanol Furfural Methanol Furfural Dung dịch chuẩn Tỉ lệ thể tích Chuẩn 20,00 26.382,85 327.214,78 12,40 626.053,76 23,73 Chuẩn 5,00 93.109,34 284.772,47 3,06 541.403,57 5,81 Chuẩn 2,00 188.933,12 228.313,83 1,21 431.125,79 2,28 Chuẩn 1,00 278.097,88 200.874,00 0,72 310.440,70 1,12 Chuẩn 0,50 383.006,31 113.610,96 0,30 213.933,93 0,56 Chuẩn 0,20 466.465,66 52.355,00 0,11 106.213,72 0,23 Chuẩn 0,10 522.464,70 26.847,69 0,05 57.432,65 0,11 Chuẩn 0,05 547.069,70 11.111,54 0,02 30.973,60 0,06 Diện tích pic n-butanol Diện tích pic Tỉ lệ diện tích Diện tích pic Tỉ lệ thể tích PHỤ LUC 4: ĐỘ LẶP LẠI VÀ ĐỘ THU HỒI CỦA METHANOL, RƯỢU BẬC CAO VÀ FURFURAL Bảng 1: Độ lặp lại độ thu hồi Methanol HL vial (mg/L) 21,60 28,80 57,60 Mẫu SMe SIS 7 7.831,46 7.657,71 8.077,77 7.922,07 7.974,91 7.459,01 7.520,55 11.620,42 11.309,23 10.360,25 11.757,86 10.854,03 11.373,77 11.200,02 23.065,44 22.799,30 22.461,47 22.972,24 22.602,63 23.218,73 22.418,29 48.365,72 48.034,79 49.013,02 49.036,02 49.036,02 47.272,28 46.820,68 49.923,17 48.708,59 48.218,36 48.813,83 47.312,64 48.578,95 46.645,37 46.852,57 47.949,73 48.506,31 48.213,45 49.895,94 48.990,58 48.019,63 HL mẫu (mg/L) 20,20 19,91 20,54 20,16 20,29 19,72 20,05 28,51 28,44 26,41 29,46 28,12 28,67 29,37 51,55 49,98 48,82 50,08 47,89 49,84 49,18 HL trung bình (mg/L) 20,12 28,43 49,62 Độ thu hồi (%) 93,53 92,17 95,09 93,33 93,91 91,28 92,82 99,00 98,77 91,71 102,31 97,64 99,56 101,99 89,50 86,78 84,76 86,94 83,13 86,53 85,38 Độ thu hồi trung bình (%) SD (mg/L) RSD (%) 93,16 0,27 1,32 98,71 1,02 3,57 86,15 1,15 2,32 Bảng 2: Độ lặp lại độ thu hồi Propanol (a.pro) HL vial (mg/L) 5,36 57,16 142,10 Mẫu 7 Sa.pro 2.658,25 2.908,87 3.039,67 3.056,11 3.045,23 3.023,12 2.986,96 32.702,89 34.629,05 35.473,14 34.483,95 36.714,95 33.784,88 36.874,88 86.456,37 88.725,96 85.732,48 91.690,44 93.354,16 91.532,35 92.654,26 SIS 48.525,94 45.791,78 47.603,34 47.046,38 49.310,07 48.703,66 46.831,35 49.605,48 50.187,51 47.814,43 49.375,47 48.813,00 45.213,23 51.136,15 50.149,76 51.831,46 49.810,07 47.735,85 51.318,08 47.971,39 48.919,45 HL mẫu (mg/L) 4,56 5,23 5,26 5,34 5,10 5,12 5,25 51,56 53,94 57,95 54,59 58,74 58,36 56,34 133,87 132,94 133,66 149,09 141,23 148,11 147,02 HL trung bình (mg/L) 5,12 55,93 140,85 Độ thu hồi (%) 85,10 97,61 98,08 99,66 95,08 95,53 97,97 90,20 94,36 101,37 95,49 102,76 102,10 98,56 93,68 93,02 93,53 104,33 98,83 103,64 102,88 Độ thu hồi trung bình (%) SD (mg/L) RSD (%) 95,58 0,26 5,10 97,84 2,68 4,78 98,56 7,32 5,20 Bảng 3: Độ lặp lại độ thu hồi Alcohol isobutyl (a.iso) HL vial (mg/L) 5,45 58,18 145,4 Mẫu Sa.iso SIS 7 3.262,37 3.477,30 3.477,08 3.565,95 3.400,12 3.575,30 3.400,77 42.218,86 42.665,15 42.904,62 42.749,36 44.132,57 40.502,49 44.671,32 104.182,60 106.616,70 101.704,17 110.257,21 111.630,63 110.090,30 110.385,90 48.525,94 45.791,78 47.603,34 47.046,38 49.310,07 48.703,66 46.831,35 49.605,48 50.187,51 47.814,43 49.375,47 48.813,00 45.213,23 51.136,15 50.149,76 51.831,46 49.810,07 47.735,85 51.318,08 47.971,39 48.919,45 HL mẫu (mg/L) 4,35 4,90 4,72 4,89 4,46 4,74 4,69 54,73 54,67 57,62 55,65 58,05 57,53 56,14 131,49 130,21 129,26 146,03 137,62 145,10 142,70 HL trung bình (mg/L) 4,68 56,34 137,49 Độ thu hồi (%) 81,10 91,48 88,03 91,31 83,16 88,47 87,52 95,74 95,63 100,80 97,35 101,55 100,64 98,20 92,01 91,12 90,45 102,19 96,30 101,54 99,85 Độ thu hồi trung bình (%) SD (mg/L) RSD (%) 87,30 0,21 4,46 98,56 1,41 2,50 96,21 7,24 5,27 Bảng 4: Độ lặp lại độ thu hồi Alcol amylic (a.a) HL vial (mg/L) 5,36 57,16 147,7 Mẫu Sa.a SIS 7 3.848,99 4.133,31 4.115,26 4.214,62 4.200,88 4.178,06 4.143,19 44.532,56 43.781,75 45.627,26 44.945,53 46.736,70 42.683,87 46.571,30 108.394,12 111.434,35 108.119,43 114.215,56 115.893,04 114.066,79 115.170,34 48.525,94 45.791,78 47.603,34 47.046,38 49.310,07 48.703,66 46.831,35 49.605,48 50.187,51 47.814,43 49.375,47 48.813,00 45.213,23 51.136,15 50.149,76 51.831,46 49.810,07 47.735,85 51.318,08 47.971,39 48.919,45 HL mẫu (mg/L) 5,11 5,79 5,55 5,74 5,47 5,51 5,68 54,96 53,44 58,34 55,71 58,53 57,73 55,73 130,52 129,84 131,07 144,35 136,32 143,46 142,06 HL trung bình (mg/L) 5,55 56,35 136,80 Độ thu hồi (%) 95,40 107,97 103,59 107,19 102,15 102,83 105,91 96,14 93,48 102,05 97,45 102,39 100,98 97,50 91,33 90,85 91,72 101,01 95,39 100,39 99,40 Độ thu hồi trung bình (%) SD (mg/L) RSD (%) 103,58 0,23 4,08 98,57 1,91 3,38 95,73 6,45 4,72 Bảng 5: Độ lặp lại độ thu hồi Furfural (fur) HL vial (µl/L) 7,91 42,18 84,36 Mẫu 7 Sfur 3.342,74 3.458,53 3.283,86 3.242,64 3.478,36 3.833,77 3.778,76 23.556,23 23.762,03 23.578,04 23.512,13 23.011,51 23.751,67 22.866,15 44.318,79 43.409,15 45.666,09 43.754,21 46.162,14 42.919,70 45.803,75 SIS 48.525,94 45.791,78 47.603,34 47.046,38 49.310,07 48.703,66 47.201,36 49.923,17 48.708,59 48.218,36 48.813,83 47.312,64 48.578,95 46.645,37 49.605,48 50.187,51 47.814,43 49.375,47 48.813,00 45.213,23 51.136,15 Hàm lượng mẫu (mg/L) 6,40 7,03 6,41 6,40 6,55 7,33 7,45 44,43 45,94 46,05 45,36 45,80 46,04 46,16 84,36 81,66 90,21 83,67 89,32 89,66 84,58 Hàm lượng trung bình (mg/L) 6,80 45,68 86,21 Độ thu hồi (%) 80,90 88,83 81,02 80,95 82,88 92,64 94,23 105,33 108,91 109,17 107,53 108,58 109,15 109,44 99,99 96,79 106,93 99,18 105,87 106,28 100,25 Trung bình độ thu hồi (%) SD (mg/L) RSD (%) 85,92 0,46 6,82 108,30 0,61 1,34 102,18 3,44 3,99 PHỤ LỤC 5: MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ CỦA CHẤT PHÂN TÍCH TẠI CÁC NỒNG ĐỘ KHẢO SÁT SẮC KÝ ĐỒ CỦA CHUẨN HỖN HỢP Hình 1.2: nồng độ 6,81 µl/L (C1) Hình 1.3: nồng độ 36,36 µl/L (C3) Hình 1.4: nồng độ 72,72 µl/L (C4) Hình 1.5: nồng độ 182,82 µl/L (C5) SẮC KÝ ĐỒ CỦA METHANOL Hình 2.2: nồng độ 27,27 µl/L (C2) PHỤ LỤC 6: QUY ĐỊNH CỦA AOAC 2016 VỀ ĐỘ LẶP LẠI VÀ ĐỘ THU HỒI Bảng 1: Quy định độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ khác STT Hàm lượng(%) Tỷ lệ chất phân tích Đơn vị RSD(%) 100 100% 1,3 ≥10 10-1 10% 1,9 ≥1 10-2 1% 2,7 ≥0,1 10-3 0,1% 3,7 0,01 10-4 100 ppm 5,3 0,001 10-5 10 ppm 7,3 0,0001 10-6 ppm 11 0,00001 10-7 100 ppb 15 0,000001 10-8 10 ppb 21 10 0,0000001 10-9 ppb 30 Bảng 2: Quy định độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác STT Hàm lượng(%) Tỷ lệ chất phân tích Đơn vị Độ thu hồi (%) 100 100% 98- 102 ≥10 10-1 10% 98- 102 ≥1 10-2 1% 97- 103 ≥0,1 10-3 0,1% 95- 105 0,01 10-4 100 ppm 90- 107 0,001 10-5 10 ppm 80- 110 0,0001 10-6 ppm 80- 110 0,00001 10-7 100 ppb 80- 110 0,000001 10-8 10 ppb 65 – 115 10 0,0000001 10-9 ppb 40- 120 PHỤ LỤC 7: MỘT SỐ SẮC KÝ ĐỒ CỦA CÁC MẪU RƯỢU TRẮNG NGỒI THỊ TRƯỜNG Hình 7.1: Sắc ký đồ mẫu rượu M1 Hình 7.2: Sắc ký đồ mẫu rượu N1 Hình 7.3: Sắc ký đồ mẫu rượu N4 PHỤ LUC 8: BẢNG TRA ĐỘ CỒN CHƯNG CẤT Bảng 1: Bảng hiệu chỉnh độ cồn 20℃ khoảng 0oV đến 50 oV