NGUYỄN văn HANH xây DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METHAMPHETAMIN và một số CHẤT độn TRONG nước THẢI BẰNG LC MSMS NHẰM PHÁT HIỆN cơ sở sản XUẤT MA túy LUẬN văn THẠC sĩ dược học

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN VĂN HANH XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METHAMPHETAMIN VÀ MỘT SỐ CHẤT ĐỘN TRONG NƯỚC THẢI BẰNG LC-MS/MS NHẰM PHÁT HIỆN CƠ SỞ SẢN XUẤT MA TÚY LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Người hướng dẫn khoa học TS Trần Nguyên Hà PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ƠN Luận văn hoàn thành Viện khoa học hình - Bộ cơng an Trường Đại học Dược Hà Nội hướng dẫn TS Trần Nguyên Hà PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà Lời xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới TS Trần Nguyên Hà PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà hướng dẫn nghiên cứu góp ý giúp tơi hồn thành luận văn Tôi xin cảm ơn PGS.TS Nguyễn Xuân Trường anh chị cán Trung tâm giám định ma túy – Viện khoa học hình - Bộ công an hỗ trợ cho thiết bị, hóa chất, tạo điều kiện để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn sâu sắc tới Ths Nguyễn Thị Thùy Linh – Giảng viên Bộ mơn Hóa phân tích – Độc chất giúp đỡ truyền đạt cho kiến thức cần thiết, tảng để tơi xây dựng, thực hoàn thành đề tài nghiên cứu Tôi xin cảm ơn thầy cô Trường Đại Học Dược Hà Nội, đặc biệt thầy Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất truyền đạt cho kiến thức cần thiết, tảng để tơi xây dựng, thực hồn thành đề tài nghiên cứu Tơi xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè quan tâm, chăm sóc, động viên giúp đỡ tơi q trình học tập nghiên cứu Cuối xin kính chúc thầy ln mạnh khỏe, hạnh phúc gặt hái nhiều thành công công việc sống Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 20 tháng 04 năm 2022 Học viên Nguyễn Văn Hanh MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG TỔNG QUAN .3 1.1 Tổng quan chất gây nghiện .3 1.2 Tình hình sử dụng sản xuất ma túy giới Việt Nam .3 1.2.1 Sử dụng sản xuất ma trúy giới 1.2.2 Sử dụng sản xuất ma túy Việt Nam .4 1.3 Tổng quan đối tượng nghiên cứu 1.3.1 Các phương pháp tổng hợp Methamphetamin 1.3.2 Chất độn vai trò chất độn sản xuất MET 1.3.3 Tính chất lý, hóa MET chất độn 1.3.4 Tác dụng dược lý MET chất độn 10 1.4 Các phương pháp định lượng MET chất độn 13 1.4.1 Các phương pháp định lượng MET, số ma túy khác chất chuyển hóa nước thải 13 1.4.2 Các phương pháp định lượng MET chất độn có chế phẩm 15 1.5 Tổng quan sắc ký lỏng khối phổ .18 1.5.1 Sắc ký lỏng hiệu cao .18 1.5.2 Sắc ký lỏng khối phổ 18 1.6 Các phương pháp chiết tách .21 1.6.1 Chiết lỏng – lỏng 21 1.6.2 Chiết pha rắn (SPE) 22 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Đối tượng nghiên cứu, nguyên liệu trang thiết bị nghiên cứu .24 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 24 2.1.2 Chất chuẩn, dung mơi, hóa chất 24 2.1.3 Trang thiết bị nghiên cứu 25 2.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu .26 2.2.1 Chuẩn bị mẫu 26 2.2.2 Nội dung nghiên cứu .27 2.2.3 Phương pháp nghiên cứu .27 2.2.3.1 Khảo sát điều kiện xử lý mẫu .27 2.2.3.2 Xây dựng phương pháp phân tích 28 2.3 Thẩm định lại phương pháp phân tích xây dựng 28 2.3.1 Sự phù hợp hệ thống 29 2.3.2 Độ đặc hiệu-chọn lọc: .29 2.3.3 Khoảng tuyến tính đường chuẩn (Linearity): .30 2.3.4 Độ xác 30 2.3.5 Tỷ lệ thu hồi phương pháp 32 2.3.6 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 33 CHƯƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 34 3.1 Xây dựng phương pháp phân tích MET chất độn LC-MS/MS 34 3.1.1 Khảo sát điều kiện khối phổ 34 3.1.2 Khảo sát điều kiện sắc ký 35 3.1.2.1 Lựa chọn pha tĩnh 35 3.1.2.2 Khảo sát pha động 36 3.1.3 Khảo sát quy trình xử lý mẫu 39 3.1.3.1 Quy trình chiết pha rắn 40 3.1.3.2 Quy trình chiết lỏng – lỏng 42 3.2 Thẩm định phương pháp 43 3.2.1 Sự phù hợp hệ thống 43 3.2.2 Độ chọn lọc phương pháp .44 3.2.3 Đường chuẩn khoảng tuyến tính 45 3.2.4 Độ đúng, độ lặp lại 48 3.2.5 Tỷ lệ thu hồi chất phân tích .50 3.2.6 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lượng (LOQ) 54 CHƯƠNG BÀN LUẬN .57 4.1 Phương pháp xử lý mẫu .57 4.2 Phương pháp phân tích .59 4.3 Thẩm định phương pháp phân tích 61 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 65 PHỤ LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu Tiếng Anh APCI Atmospheric pressure chemical ionization APPI Atmospheric pressure photoionization ATS CAFE CV ESI H% HLB HPLC IPB IS KET KLPT LCMS/MS LD50 LOD LOQ MDMA MeCN MeOH MET MTTH PARA PRO R (%) RSD (%) S/N SD TB TLTK UNODC VKNTTW Amphetamin Type Stimulants Cafeine Coefficient of Variation Electrospray ionization Hydrophilic-lipophilic balance High performance liquid Isopropylbenzylamine Internal standard Ketamine Liquid chromatography - Tadem mass spectrophometry Lethal Dose 50 Limit of detection Limit of quantification 3,4-methylenedioxyMethamphetamine Acetonitrile Methanol Methamphetamine Paracetamol Procaine Recovery Relative standard deviation Signal/noise Standard Deviation United Nations Office on Drugs and Crime Tiếng Việt Ion hóa hóa học áp suất khí Ion hóa photon áp suất khí Các chất kích thích dạng Amphetamin Cafein Hệ số biến thiên Ion hóa phun điện tử Tỷ lệ thu hồi Hệ số cân dầu - nước Sắc ký lỏng hiệu cao Isopropylbenzylamin Chuẩn nội Ketamin Khối lượng phân tử Sắc ký lỏng khối phổ Liều lượng hoá chất phơi nhiễm gây chết cho 50% (một nửa) Giới hạn phát Giới hạn định lượng 3,4-methylenedioxyMethamphetamin Acetonitril Methanol Methamphetamin Ma túy tổng hợp Paracetamol Procain Độ thu hồi Độ lệch chuẩn tương đối Tín hiệu/nhiễu Độ lệch chuẩn Trung bình Tài liệu tham khảo Văn phịng Liên Hiệp Quốc chống Ma túy Tội phạm Viện kiểm nghiệm thuốc trung ương DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Đặc tính MET chất độn Bảng 1.2 Một số nghiên cứu định lượng chất gây nghiện nước thải .14 Bảng 1.3 Một số nghiên cứu định lượng MET chất độn chế phẩm 16 Bảng 2.1 Chất chuẩn chuẩn nội .24 Bảng 2.2 Dung mơi hóa chất 25 Bảng 2.3 Pha tĩnh cột SPE .26 Bảng 2.4 Độ thu hồi chấp nhận nồng độ khác theo AOAC 2016 31 Bảng 2.5 Độ lặp lại tối đa chấp nhận nồng độ tương ứng theo AOAC 2016 .32 Bảng 3.1 Các điều kiện khối phổ 34 Bảng 3.2 Chương trình gradient hệ pha động .36 Bảng 3.3 Chương trình gradient hệ pha động .36 Bảng 3.4 Chương trình gradient hệ pha động chọn 39 Bảng 3.5 Kết đánh giá độ thích hợp hệ thống .43 Bảng 3.6 Quan hệ tuyến tính nồng độ tỷ lệ diện tích pic MET chất độn với chuẩn nội MDMA-d5 .46 Bảng 3.7 Kết thẩm định độ đúng, độ xác MET chất độn 48 Bảng 3.8 Kết khảo sát độ thu hồi MET 50 Bảng 3.9 Kết khảo sát độ thu hồi Paracetamol 51 Bảng 3.10 Kết khảo sát độ thu hồi Cafein 51 Bảng 3.11 Kết khảo sát độ thu hồi Procain 52 Bảng 3.12 Kết khảo sát độ thu hồi Isopropylbenzylamin .52 Bảng 3.13 Kết khảo sát độ thu hồi chuẩn nội 53 Bảng 3.14 Tỷ lệ thu hồi hệ số biến thiên chất với phương pháp xử lý mẫu .54 Bảng 3.15 Giới hạn phát giới hạn định lượng chất .55 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1 Quy trình tổng hợp MET từ Ephedrin/Pseudoephedrin Hình 1.2 Quy trình tổng hợp MET từ P2P .7 Hình 1.3 Sơ đồ hệ thống LC-MS/MS 18 Hình 1.4 Sơ đồ tạo ion dương nguồn ESI 19 Hình 1.5 Sơ đồ phân tích tứ cực .20 Hình 1.6 Bốn bước trình chiết pha rắn 22 Hình 3.1 Sắc ký đồ chất với hệ dung môi pha động hai chương trình gradient 37 Hình 3.2 Sắc ký đồ chất với chương trình gradient hệ pha động .38 Hình 3.3 Sắc ký đồ chất với chương trình gradient hệ pha động .39 Hình 3.4 Sơ đồ xử lý mẫu nước thải SPE 41 Hình 3.5 Sơ đồ xử lý mẫu nước thải chiết lỏng – lỏng 42 Hình 3.6 Sắc ký đồ mẫu khơng có chất phân tích 45 Hình 3.7 Sắc ký đồ mẫu thêm chất chuẩn nội MDMA-d5 (hình A) sắc ký đồ mẫu thêm chuẩn MET, chất độn chuẩn nội MDMA-d5 (hình B) 45 Hình 3.8 Đồ thị quan hệ tuyến tính tỷ lệ diện tích pic nồng độ MET chất độn 48 Hình 3.9 Sắc ký đồ LOD LOQ chất phân tích 56 Hình 4.1 Cân acid – base Cafein 58 ĐẶT VẤN ĐỀ Việc lạm dụng chất gây nghiện không ảnh hưởng đến cá nhân người sử dụng sức khỏe giảm sút, giảm trí nhớ, rối loạn tâm thần… mà cịn ảnh hưởng tới cộng đồng, tăng chi phí gánh nặng cho xã hội, gia tăng tội phạm xã hội Tuy nhiên với lợi nhuận cao, tổ chức tội phạm tiếp tục sản xuất phân phối chất Trong số loại ma túy tổng hợp, nhóm ma túy dạng Amphetamin (ATS) sản xuất sử dụng phổ biến Trong báo cáo “World Drug Report 2021” Văn phòng Liên Hiệp Quốc chống Ma túy Tội phạm (UNODC), số ATS sản xuất Methamphetamin sản xuất phổ biến nhất Trong giai đoạn 2015 - 2019, gần 24.000 sở sản xuất ATS bị phát triệt phá 45 quốc gia Hơn 95% số đó sản xuất Methamphetamin; 2% Amphetamin; % sản x́t MDMA, cịn lại chất kích thích khác [39] Đồng thời, việc sản xuất Methmphetamin mở rộng khu vực xung quanh Tam giác vàng đó có Campuchia Việt Nam Theo số liệu Cục Cảnh sát điều tra tội phạm ma túy, từ năm 2012 đến 2019, lực lượng phòng chống ma túy triệt phá 45 vụ sản xuất ma túy trái phép, tập trung chủ yếu vào chất ma túy tổng hợp Các năm trước đây, chủ yếu vụ nhỏ lẻ, đối tượng thu gom thuốc tân dược chứa tiền chất, sử dụng làm nguyên liệu sản x́t ma túy với quy mơ kilơgram, chục kg Tuy nhiên từ năm 2016-2018 số lượng vụ sản xuất có xu hướng gia tăng Với tình hình thực tế trên, bên cạnh việc khai thác thông tin hoạt động tội phạm từ trinh sát từ quần chúng nhân dân, cần thiết phải có nghiên cứu để giám sát việc sản xuất ma túy theo hướng vừa có hiệu chi phí, vừa phát nhanh, xác để phát sớm sở sản xuất ma túy, trước nó đưa tiêu thụ thị trường Điều mang lại lợi ích to lớn việc thu giữ triệt để giúp giải tận gốc nguồn cung ma túy thị trường Một yếu tố phát sớm sở sản xuất ma túy MET việc phát ma túy hóa chất sử dụng làm chất độn trình sản xuất, đóng gói Các chất có khả rò gỉ nước thải sở sản xuất Do đó, đề tài “Xây dựng phương pháp định lượng Methamphetamin số chất độn nước thải LC-MS/MS nhằm phát sở sản xuất ma túy” thực với mục tiêu sau: Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng Methamphetamin và số chất độn nước thải sắc ký lỏng khối phổ hai lần (LC-MS/MS) Sắc ký đồ đường chuẩn BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI NGUYỄN VĂN HANH XÂY DỰNG PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG METHAMPHETAMIN VÀ MỘT SỐ CHẤT ĐỘN TRONG NƯỚC THẢI BẰNG LC-MS/MS NHẰM PHÁT HIỆN CƠ SỞ SẢN XUẤT MA TÚY LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC HÀ NỘI - 2022 ... Các phương pháp định lượng MET chất độn 13 1.4.1 Các phương pháp định lượng MET, số ma túy khác chất chuyển hóa nước thải 13 1.4.2 Các phương pháp định lượng MET chất độn. .. ma túy hóa chất sử dụng làm chất độn trình sản xuất, đóng gói Các chất có khả rò gỉ nước thải sở sản xuất Do đó, đề tài ? ?Xây dựng phương pháp định lượng Methamphetamin số chất độn nước. .. có nghiên cứu tiến hành để định lượng MET số chất độn nước thải sở sản x́t ma túy 1.3.3 Tính chất lý, hóa MET chất độn Một số chất độn sử dụng phổ biến trình sản xuất MET ghi nhận từ nhiều