Luận văn tốt nghiệp xây dựng phương pháp định lượng butafosfan trong nguyên liệu và thành phẩm thuốc thú y

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA KHOA HỌC TỰ NHIÊN BỘ MƠN HỐ HỌC   LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH HÓA HỌC XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG BUTAFOSFAN TRONG NGUYÊN LIỆU VÀ THÀNH PHẨM THUỐC THÚ Y CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Ths Nguyễn Thị Diệp Chi Phan Thị Hiên MSSV: 2072050 Ths Nguyễn Phƣơng Hải Trần Ni Kha MSSV: 2072060 Lớp Hóa học K33 Cần Thơ, tháng năm 2011 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi LỜI CẢM ƠN  Qua q trình thực luận văn này, chúng tơi học hỏi đƣợc nhiều kiến thức, kinh nghiệm kỹ thực hành bổ ích Đó nhờ giúp đỡ nhiệt tình gia đình, thầy cô bạn bè Chúng xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Cô Nguyễn Thị Diệp Chi động viên tinh thần giúp đỡ chúng em suốt trình thực luận văn Chú Nguyễn Phương Hải động viên, giúp đỡ tận tình, tạo điều kiện tốt vật chất lẫn tinh thần giúp chúng em hoàn thành luận văn Các anh chị phịng thí nghiệm hố lý, Cơng ty Vemedim động viên, giúp đỡ, chia sẻ kinh nghiệm quý báu sống nhƣ học tập Tất quý thầy cô môn Hoá, khoa Khoa học tự nhiên truyền đạt cho chúng em kiến thức vơ bổ ích học tập nghiên cứu Gia đình ln ủng hộ, động viên chăm lo cho chúng vật chất lẫn tinh thần Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn bạn lớp Hoá Học K33 bên cạnh, động viên giúp đỡ suốt thời gian học tập trƣờng Cần Thơ, tháng năm 2011 Phan Thị Hiên Trần Ni Kha SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi MỤC LỤC  LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU PHẦN MỞ ĐẦU I Đặt vấn đề II Mục tiêu nghiên cứu PHẦN I TỔNG QUAN Chƣơng KHÁI QUÁT VỀ BUTAFOSFAN 11 1.1 GIỚI THIỆU 12 1.2 ĐẶC ĐIỂM 13 1.3 TÍNH CHẤT 14 1.3.1 Tính chất vật lý 14 1.3.2 Tính chất hố học 14 1.4 ĐIỀU CHẾ BUTAFOSFAN 24 1.5 ỨNG DỤNG 25 Chƣơng CÁC PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH BUTAFOSFAN 26 2.1 CÁC PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH 27 2.1.1 Đo độ nóng chảy 27 SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi 2.1.2 Phân tích thành phần 27 2.1.3 Phản ứng hoá học 29 2.1.4 Sắc ký lỏng đầu dò UV 31 2.1.5 Sắc ký lỏng đầu dò huỳnh quang 32 2.1.6 Sắc ký lỏng đầu dò độ dẫn 33 2.2 CÁC PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG 34 2.2.1 Phƣơng pháp chuẩn độ 34 2.2.2 Phƣơng pháp quang phổ 35 2.2.2 Sắc ký lỏng đầu dò UV-Vis 36 Chƣơng THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 37 3.1 GIỚI THIỆU 38 3.1.1 Mục đích 38 3.1.2 Nội dung 38 3.2 PHƢƠNG PHÁP THỰC HIỆN 39 3.2.1 Tính đặc hiệu 39 3.2.2 Độ 40 3.2.3 Độ chụm 41 3.2.4 Độ tuyến tính 42 3.2.5 Giới hạn phân tích - Khoảng áp dụng 43 3.2.5.1 Giới hạn phân tích 43 3.2.5.2 Khoảng áp dụng 43 3.2.6 Độ bền vững 44 3.2.7 Giới hạn tin cậy 44 SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Chƣơng THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 47 4.1 PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 48 4.2 PHƢƠNG TIỆN THỰC HIỆN 48 4.2.1 Hoá chất, thuốc thử 48 4.2.2 Thiết bị, dụng cụ 48 4.3 ĐỊA ĐIỂM, THỜI GIAN THỰC HIỆN 48 4.4 HOẠCH ĐỊNH THÍ NGHIỆM 49 4.5 THỰC NGHIỆM 51 4.5.1 Khảo sát phƣơng pháp chuẩn độ 51 4.5.2 Khảo sát phƣơng pháp quang phổ 58 4.5.3 Khảo sát phƣơng pháp HPLC 69 4.5.4 Thí nghiệm đánh giá, so sánh phƣơng pháp 75 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A KẾT LUẬN 82 B KIẾN NGHỊ 82 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 Phụ lục HOÁ CHẤT VÀ THUỐC THỬ 85 Phụ lục THIẾT BỊ VÀ DỤNG CỤ 87 SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi DANH MỤC HÌNH Hình ảnh Thuyết minh Hình 1.1 Butafosfan chứa thùng 25kg Hình1.2 Chế phẩm VIMEKAT Cơng ty Vemedim Hình 3.1 So sánh độ nhạy phƣơng pháp đồ thị 33 Hình 4.1 Đƣờng cong chuẩn độ acid HCl - Butafosfan 41 Hình 4.2 Đƣờng cong chuẩn độ acid HClO4 - Butafosfan 42 Hình 4.3 Đồ thị hàm số Vtđ = 0,053.mBu + 0,258 47 Hình 4.4 Phổ đồ dung môi DMF, Chloranil DMF Butafosfan DMF Hình 4.5 Phổ đồ phức Bu – Ch DMF Hình 4.6 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Abs phức Bu – Ch theo tỷ lệ Chloranil/Butafosfan Hình 4.7 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Abs phức Bu – Ch theo nhiệt độ Hình 4.8 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Abs phức Bu – Ch theo thời gian đun Hình 4.9 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Abs phức Bu – Ch theo thời gian đo mẫu Hình 4.10 Phổ đồ phức Bu – Ch có mặt chất nhiễu Hình 4.11 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Abs phức Bu – Ch theo nồng độ Butafosfan Hình 4.12 SK đồ mẫu với pha động 30 Acetonitril : 70 dd đệm Hình 4.13 SK đồ mẫu với pha động 30 Acetonitril : 70 dd đệm (khảo sát độ chọn lọc Pp HPLC) Hình 4.14 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Speak vào CBu mẫu số Hình 4.15 Đồ thị biểu diễn phụ thuộc Speak vào CBu mẫu số (thành phẩm Vimekat) SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Trang 48 49 51 52 53 54 55 58 60 61 64 68 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi DANH MỤC BẢNG Thuyết minh Bảng Bảng 3.1 Các nội dung thẩm định 29 Bảng 3.2 Bảng giá trị RC 31 Bảng 3.3 Bảng giá trị RSD 32 Bảng 3.4 Bảng giá trị chuẩn Student t 35 Bảng 4.1 Kết Vtđ thí nghiệm xác định độ lặp lại pp chuẩn độ 45 Bảng 4.2 Kết Vtđ thí nghiệm xác định độ pp chuẩn độ 46 Bảng 4.3 Kết khảo sát thể tích tƣơng đƣơng theo lƣợng Butafosfan 47 Bảng 4.4 Kết khảo sát phụ thuộc Abs phức theo lƣợng dƣ Chloranil 50 Bảng 4.5 Kết khảo sát phụ thuộc Abs phức theo nhiệt độ 52 Bảng 4.6 Kết khảo sát phụ thuộc Abs phức theo thời gian đun 53 Bảng 4.7 Kết khảo sát phụ thuộc Abs phức theo thời điểm đo mẫu Bảng 4.8 Kết khảo sát độ lặp lại phƣơng pháp quang phổ Bảng 4.9 Kết khảo sát phụ thuộc Abs phức theo nồng độ Butafosfan Bảng 4.10 Giá trị Speak theo thời gian lƣu SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Trang 54 56 58 62 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi TỪ VIẾT TẮT & KÝ HIỆU Sử dụng luận văn Từ viết tắt Pp, pp DD, dd HPLC HPLC-UV HPLC-FL Bu-Ch Bu U R Rc SD RSD LOD LOQ LLOQ HLOQ TN DMF Abs tđun t tre SK Speak vđ Thuyết minh Phƣơng pháp Dung dịch Sắc ký lỏng cao áp (High-performance liquid chromatography) Sắc ký lỏng đầu dò UV Sắc ký lỏng đầu dị huỳnh quang Phức Butafosfan - Chloranil Butafosfan Độ khơng đảm bảo đo Hệ số tƣơng quan tuyến tính Độ Độ lệch chuẩn Độ lệch chuẩn tƣơng đối Giới hạn phát Giới hạn định lƣợng Giới hạn định lƣợng dƣới Giới hạn định lƣợng Thí nghiệm Dimethylformamide Độ hấp thụ Thời gian đun Nhiệt độ đun Thời gian lƣu Sắc ký Diện tích peak Vừa đủ SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi PHẦN MỞ ĐẦU I ĐẶT VẤN ĐỀ II MỤC ĐÍCH YÊU CẦU SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi I Đặt vấn đề [13] Butafosfan có tên hóa học 1-(n-Butylamino)-1-methylethyl phosphonous acid (C7H18NO2P), hợp chất hữu có chứa đồng thời nguyên tố N P, đƣợc sử dụng làm chất dinh dƣỡng đặc biệt dùng thú y Các chế phẩm có chứa Butafosfan kích thích q trình trao đổi chất, tăng cƣờng miễn dịch chống stress vật nuôi Đặc biệt Butafosfan kết hợp vitamin B12 chế phẩm bổ máu dạng tiêm hiệu Nguyên liệu Butafosfan đƣợc định lƣợng phƣơng pháp chuẩn độ khan với dung dịch chuẩn độ Tetrabutylammoniumhydroxide (n-C4H9)4NOH máy chuẩn độ điện Tuy phƣơng pháp đơn giản đúng, nhƣng có số hạn chế định là: độ chọn lọc không cao, phạm vi áp dụng hẹp Trong chế phẩm dạng dung dịch, phƣơng pháp chuẩn độ khan không thực đƣợc Đến chƣa có phƣơng pháp định lƣợng Butafosfan chế phẩm đƣợc công bố Để đảm bảo chất lƣợng nguyên liệu nhập kho chất lƣợng sản phẩm, thực đề tài: “Xây dựng phương pháp định lượng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y” II Mục tiêu nghiên cứu Xây dựng phƣơng pháp định lƣợng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y phƣơng pháp chuẩn độ điện thế, quang phổ UV-Vis HPLC Áp dụng phƣơng pháp chế phẩm Vimekat Công ty Vemedim Tiến hành thẩm định, đánh giá phƣơng pháp so sánh kết định lƣợng phƣơng pháp với SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi 4.5.4 Thí nghiệm đánh giá, so sánh phƣơng pháp  TN 4.1: Định lƣợng Butafosfan nguyên liệu (Bằng pp chuẩn độ, quang phổ HPLC) a) Mục đích: - Xác định độ xác pp định lƣợng Butafosfan mẫu nguyên liệu Thể qua hệ số tìm lại RC - Theo yêu cầu, RC ≥ 98,0% b) Thực hiện:  Đối với pp chuẩn độ: 1- Chuẩn bị dd thử: cân xác mt  200,0mg nguyên liệu Butafosfan + 50ml hỗn hợp 50 Anhydric acetic : 50 Acid acetic băng 2- Chuẩn bị dãy chuẩn Butafosfan nhƣ TN 1.6: Bình số: Lƣợng Butafosfan (mg) 20.1 40.3 80.6 160.4 320.2 640.5 3- Dùng pp chuẩn độ để xác định Vtđ dd thử dãy chuẩn  Đối với pp quang phổ HPLC: 1- Chuẩn bị dd thử: cân xác mt  500,0mg nguyên liệu Butafosfan + 1ml H2O + DMF vđ 25ml Pha loảng 1/25 với DMF (nồng độ  800mg/l) 2- Chuẩn bị dãy chuẩn Butafosfan nhƣ sau: - DD Butafosfan: 250mg Butafosfan chuẩn + 1ml H2O + DMF vđ 100ml - Dãy Butafosfan chuẩn: Lấy V ml dd Butafosfan + DMF vđ 10ml Bình số: DD Butafosfan (V ml) Nồng độ Butafosfan (mg/l) 250 500 750 000 250 3- Dùng pp quang phổ pp HPLC để đo dd thử dãy chuẩn  Vẽ đồ thị y = a.CBu + b dãy chuẩn  Lấy kết đo đƣợc (yđo) dd thử thay vào phƣơng trình y = a.CBu + b để tính giá trị xđo từ suy giá trị tìm lại mđo dd thử SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 75 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi  Tính hệ số tìm lại RC pp để nhận xét RC = mdo  mt 100% mt c) Kết quả: Phƣơng pháp Lƣợng mẫu thử mt Phƣơng trình Chuẩn độ Quang phổ HPLC 200,0mg 800mg/l 800mg/l Vtđ = dãy chuẩn Giá trị đo đƣợc Abs = Speak = 0,053.mBu + 0,258 0,0007.CBu + 0,1665 3569 CBu + 342 07 Vtđ = 10,76ml Speak = 2847258 Abs = 0,717 dd thử Lƣợng mẫu thử tìm lại mđo (mg) Hệ số tìm lại RC 198,2mg 786,9mg/l 788,2mg/l 99,12% 98,37% 98,5238% d) Nhận xét: Cả pp có hệ số tìm lại > 98,0% Trong pp chuẩn độ có hệ số tìm lại cao (99,12%) SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 76 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi  TN 4.2: Định lƣợng Butafosfan thành phẩm Vimekat (Bằng phƣơng pháp HPLC) Trong chế phẩm Vimekat có nhiều thành phần nhƣ: H2O, Cyanocobalamin, benzyl alcohol, propylene glycol … gây nhiễu nên pp chuẩn độ quang phổ không định lƣợng đƣợc Sử dụng pp HPLC để định lƣợng Butafosfan chế phẩm Vimekat a) Mục đích: - Xác định độ xác pp định lƣợng Butafosfan mẫu thành phẩm VIMEKAT Công ty Vemedim - Độ xác thể qua hệ số RC Theo yêu cầu, RC ≥ 95,0% b) Thực hiện: 1- Chuẩn bị mẫu thử: cân xác thành phần để pha chế thành phẩm VIMEKAT có hàm lƣợng Butafosfan mt  100mg/ml Thành phần Vimekat: Tính cho mẽ 100 lít -Butaphosphan 10kg -Vitamin B12 6g -Benzyl alcohol 1lít -Dextrose 5kg -Propylene glycol 10lít -Sorbitol 3kg -Nƣớc cất … vđ 100lít -Glycerol 10lít Lấy 1ml Vimekat + 4ml dd Chloranil 0,1mol/l + DMF vđ 100ml (nồng độ Butafosfan  1000mg/l) 2- Chuẩn bị dãy chuẩn Butafosfan có khoảng nồng độ phù hợp: - Dãy chuẩn pp HPLC: Cân xác 100mg Butafosfan chuẩn hòa tan vào H2O vđ 50ml Lấy Vml pha loảng với DMF vđ 10ml theo bảng sau: Bình số: V (ml) Nồng độ Butafosfan (mg/l) 2 10 400 800 1200 1600 2000 3- Dùng pp để chạy dãy chuẩn tƣơng ứng Vẽ đồ thị y = a.x + b ứng pp Dùng pp tƣơng ứng để chạy dd thử SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 77 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi 4- Lấy kết đo đƣợc (yđo) dd thử thay vào phƣơng trình y = a.x + b để tính giá trị xđo từ suy hàm lƣợng Butafosfan (mđo) có VIMEKAT 5- Tính hệ số tìm lại RC pp để nhận xét RC = mdo  mt 100% mt c) Kết quả:  Dãy chuẩn: Hình 4.15: Đồ thị hàm số Speak = 3985.CBu + 23999 mẫu số  Diện tích peak dd thử: Speak = 358199 Phƣơng pháp Lƣợng mẫu thử mt (mg) Phƣơng trình dãy chuẩn Chuẩn độ Quang phổ Không thực đƣợc Khơng thực đƣợc Lƣợng mẫu thử tìm lại mđo (mg) Hệ số tìm lại RC HPLC 100.0 Speak = 3985.CBu + 23999 98,1253 98,1253% d) Nhận xét: Pp HPLC có hệ số tìm lại > 98,0% Đáp ứng u cầu sai số cho phép định lƣợng thành phẩm thuốc thú y  2% SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 78 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Qua trình thực thí nghiệm ta rút đƣợc đặc điểm phƣơng pháp nhƣ sau:  Phƣơng pháp chuẩn độ khan: - Độ chọn lọc: Không cao Bị nhiễu nguyên nhân: + Lƣợng nƣớc chứa mẫu + Các amine bậc 1, 2, tham gia phản ứng chuẩn độ (gây nhiễu) + Các chất có tính kiềm tham gia phản ứng chuẩn độ (gây nhiễu) - Độ lặp lại: Rất cao Độ lệch chuẩn tƣơng đối: RSD = 0.255478% - Độ đúng: Khá cao Hệ số tìm lại: RC = 98,0% - Độ tuyến tính: Rất cao + Hệ số tƣơng quan tuyến tính: R = 0,9999 ; + Phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính: Vtđ = 0,053.mBu + 0,258 - Giới hạn định lƣợng: LLOQ = 4,7966mg Butafosfan - Giới hạn tin cậy:  0,5232mg Butafosfan (ứng với mức chuẩn độ 179mg)  Phƣơng pháp quang phổ: - Độ chọn lọc: Trung bình Bị nhiễu nguyên nhân: Các amine bậc 1, 2, tham gia phản ứng chuẩn độ (gây nhiễu) - Độ lặp lại: Rất cao Độ lệch chuẩn tƣơng đối: RSD = 0.109179% - Độ đúng: Khá cao Hệ số tìm lại: RC = 99,6% - Độ tuyến tính: Khá cao + Hệ số tƣơng quan tuyến tính: R = 0,99917 ; + Phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính: Abs = 143,0.CBu-Ch + 0,065 (CBu : nồng độ phức Bu-Ch tính theo mol/l) - Giới hạn định lƣợng: LLOQ = 21,38mg/l Butafosfan - Giới hạn tin cậy:  79,1mg Butafosfan (ứng với mức đo 1790mg/l)  Phƣơng pháp HPLC: - Độ chọn lọc: Rất cao Các chất gây nhiễu bị tách thành peak riêng biệt - Độ lặp lại: Rất cao + Thời gian lƣu: RSD (%) = 0,0232955% + Diện tích peak: RSD (%) = 0.0220942% - Độ đúng: Khá cao Hệ số tìm lại: RC = 99,08% - Độ tuyến tính: Khá cao + Hệ số tƣơng quan tuyến tính: R = 0,9997239 ; SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 79 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi + Phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính: Speak = 638 868 587,24 CBu + 342073,29 (CBu : nồng độ phức Bu-Ch tính theo mol/l) - Giới hạn định lƣợng: LLOQ = 4,28mg/l Butafosfan - Giới hạn tin cậy:  95,39mg Butafosfan (ứng với mức đo 1790mg/l) SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 80 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi PHẦN III KẾT LUẬN A- KẾT LUẬN B- KIẾN NGHỊ SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 81 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi A KẾT LUẬN Trong phạm vi đề tài nghiên cứu này, luận văn đạt đƣợc kết sau: Xây dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y Trong đó: có phƣơng pháp áp dụng đƣợc nguyên liệu (Chuẩn độ khan, Quang phổ HPLC) phƣơng pháp áp dụng đƣợc thành phẩm (HPLC) - Phƣơng pháp chuẩn độ khan đơn giản cho kết độ lặp lại, độ đúng, độ tuyến tính cao nhƣng độ chọn lọc khơng cao bị nhiễu amine bậc 1, 2, Do áp dụng phƣơng pháp để định lƣợng Butafosfan nguyên liệu - Phƣơng pháp quang phổ với ƣu điểm đơn giản, chi phí thấp độ đúng, độ lặp lại, độ tuyến tính cao Tuy nhiên phƣơng pháp có hạn chế định nhƣ độ chọn lọc trung bình bị nhiễu amine bậc 1, 2, Vì phƣơng pháp áp dụng đƣợc để định lƣợng Butafosfan nguyên liệu - Phƣơng pháp HPLC đắt tiền nhƣng lại cho kết xác với độ chọn lọc cao, đáp ứng đƣợc yêu cầu kiểm nghiệm nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y B KIẾN NGHỊ Do thời gian thực có hạn khối lƣợng công việc nhiều nên đề tài số kiến nghị nhƣ sau: 1- Trong pp quang phổ, mẫu đƣợc hịa tan mơi trƣờng DMF (là mơi trƣờng khan), nên có điện cực chuyên dụng (điện cực đo pH môi trƣờng khan) tiến hành khảo sát ảnh hƣởng tạo thành phức Bu-Ch 2- Trong phần thẩm định phƣơng pháp định lƣợng, có thời gian tiến hành khảo sát độ bền vững (Robustness), đặc trƣng độ tái lập (Reducibility) 3- Ngồi ra, có thời gian tiến hành định lƣợng Butafosfan mẫu khác  SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 82 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tiếng Việt: (1) ThS Nguyễn Thị Diệp Chi (2008), Giáo trình Kiểm nghiệm thực phẩm dược phẩm, Trƣờng Đại học Cần Thơ (2) ThS Nguyễn Thị Diệp Chi (2008), Giáo trình Các phương pháp phân tích đại, Trƣờng Đại học Cần Thơ (3) ThS Nguyễn Thị Diệp Chi (2008), Giáo trình thực tập Hố mơi trường Trường Đại học Cần Thơ (4) Trần Tứ Hiếu (2003), Phân tích trắc quang - Phổ hấp thụ UV – Vis, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội (5) Vũ Thành, Nguyễn Quốc Hƣng, Hoàng Thanh Lịch, Đánh giá ảnh hưởng Butaphosphan đến khả chịu đựng stress tôm sú, Hội thảo quốc gia phát triển thuỷ sản vùng hạ lƣu song Mekong Việt Nam Tiếng Anh: (6) Hesham Salem (2008), Analytical study for the charge-Transfer complexes of Gabapentin, African Journal of Pharmacy and Pharmacology Vol (7) pp 136-144, September, 2008 (7) Hindawi Publishing Corporation Organic Chemistry International (2010), Benzoylation of Amines sans Alkali: A Green Protocol in Neat Phase, 10.1155/2010/743186 (8) Mrs Laurence Coppex (1999-2000), Derivatives for HPLC Analysis, Faculty of Chemistry and Pharmacy University of Genf, November 1999 - February 2000 (9) N I Abdel Sayed (2003), Spectrophotometric and Conductometric Studies of Charge Transfer Interaction of 2-(1H)-Pyridinethione with Acceptors, Journal of the Chinese Chemical Society, No 50, 345-352 SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 83 Luận văn tốt nghiệp đại học (10) GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Ramzia I El-Bagary, Ehab F Elkady, Bassam M Ayoub (2011), Spectrophotometric Methods for the Determination of Sitagliptin and Vildagliptin in Bulk and Dosage Forms, International journal of Biomedical science, vol no March 2011 (11) Rasha Abdel- Aziz Shaalan (2010), Spectrofluorimetric and Spectrophotometric Determination of Pregabalin in Capsules and Urine Samples, International journal of Biomedical science, Vol No.3 December 2010 (12) The European Agency for the Evaluation of Medicinal Products (1999), Committee for veterinary medicinal product, Veterinary medicines and Information Technology Unit, 630/99-final Trang wed: (13) http://www.latest-science-articles.com/Agricultural_Science/Studies-onPharmacodynamics-of-Compound-Butafosfan-Solution-12628.html (14) http://www.chromatography-online.org/topics/ion/chromatography.html (15) http://tailieu.vn/xem-tai-lieu/chuong-1-phan-tich-trac-quang.306742.html (16) http://www.vemedim.com.vn/chitietsanpham.php?id=142 (17) http://www.made-in-china.com/showroom/hezhongchem/productdetailjopQiNrbfBkh/China-Butafosfan-N-A-.html (18) http://www.organic-chemistry.org/synthesis/C1P/phosphinates.shtm (19) http://www.chemblink.com/products/17316-67-5.htm (20) http://en.wikipedia.org/wiki/Hypophosphorous_acid (21) http://www.chemguide.co.uk/organicprops/amines/preparation.html (22) http://www.cliffsnotes.com/study_guide/Preparation-of-Amines.topicArticleId23297,articleId-23289.html (23) http://www.chemistry.ccsu.edu/glagovich/teaching/316/qualanal/tests/hinsberg (24) http://en.wikipedia.org/wiki/1-Fluoro-2,4-dinitrobenzene SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 84 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Phụ lục HÓA CHẤT VÀ THUỐC THỬ A- Hóa chất T Tên  Loại  Code Merck – Cas No T Acetic anhydride Loại analysis Merck; Code-No: 103053 Cas No: 68-12-2 Công thức Cấu tạo O O C4H6O3 M = 102,08 O Acetonitril Loại liquid chromatography Merck; CodeNo: 480448 Cas-No: 75-05-8 Acid acetic Loại analysis Merck; Code-No: 100063 Cas-No: 64-19-7 Acid boric Loại analysis Merck; Code-No: 100162 Cas-No: 10043-35-3 CH3CN M = 41,05 N C CH3 CH3 C2H4O2 M = 60,05 HO O OH H3BO3 M = 61,83 HO B OH Acid hydrochloric Loại analysis Merck; Code-No: 109060 Acid perchloric Loại analysis Merck; Code-No: 109065 HCl M = 36,5 H Cl OH HClO4 M = 100,5 O Cl O O Chloranil Loại synthesis Merck; Code-No: 802861 Cas-No: 118-75-28 Cl C6Cl4O2 M = 245,87 Cl O O Cl Dimethylamine Loại synthesis Merck; Code-No: 803010 Cas-No: 109-89-7 N,N-Dimethylformamide Loại analysis Merck; Code-No: 803034 Cas-No: 109-92-5 SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha (C6H5)2NH M = 169 C3H7ON M = 446 Cl H N H3 C CH3 N O 85 Luận văn tốt nghiệp đại học 10 Ethylamine Loại synthesis Merck; Code-No: 820024 GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi C2H5NH2 M = 45,05 NH2 11 Potassium Chloride Loại analysis Merck; Code-No: 104933 Cas-No: 7447-40-7 KCl M = 74,55 K 12 Sodium hydroxide Loại analysis Merck; Code-No: 106495 Cas-No: 1310-73-2 NaOH M = 40,00 Na Cl OH B- Thuốc thử Tên dung dịch DD HClO4 0,1M DD Chloranil 0,1M DD Hydrochloric 0,1M Cách pha ống chuẩn Merck (Code-No: 109065) + H2O vđ 1000ml 2,46g Chloranil + DMF vđ 100ml ống chuẩn Merck (Code-No: 109060) + H2O vđ 1000ml SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha 86 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Phụ lục THIẾT BỊ VÀ DỤNG CỤ A- Thiết bị T T Tên  Model  Hãng sản xuất Cân phân tích – CP 224S Sartorius – Đức pH kế – S20K Mettler Toledo – Đức • Khoảng đo: – 14 • Độ phân giải: 0,01 • Niệt đơ: – 1000C • Có chế độ bù nhiệt Bể siêu âm – 1510 Branson – • Kích thƣớc chung: 10"x12"x11.5" • Kích thƣớc chậu: 6" x 5.5" x 4" • Trọng lƣợng: 4,5kg • Tần số: 40 kHz Cân ẩm kế – MA45 Sartorius – Đức • Mức cân tối đa: 45g • Độ phân giải: 1mg • Nhiệt độ: 40 – 2300C • Nguồn nhiệt: hồng ngoại Đặc điểm • Mức cân tối đa: 320g • Độ phân giải: 0,1mg  Calib nội SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Hình/Cấu tạo 87 Luận văn tốt nghiệp đại học Bơm chân không – N86 KNF – USA Quang phổ kế UV-Vis • Khoảng quét: 190 – 1100nm Ultrospec 2000 • Độ phân giải: 1nm Pharmacia – Anh • Thang đo: – • Độ phân giải: 0,001 Bể ổn nhiệt nƣớc WNE 14 Đức 10 • Tốc độ: lít/phút • Độ chân khơng: 100mBar • Kích thƣớc: 164 x 141 x 90mm - Thể tích 14 lít; - Nhiệt độ 95  5oC - Độ lệch nhiệt độ : ± 0.1 oC - Chƣơng trình thời gian: tùy chọn - Kích thƣớc trong: 350 x 290 x 140mm - Trọng lƣợng : 15 kg - Nguồn: 230V, 50/60 Hz, 1.8KW Bể điều nhiệt tuần - Thể tích lít; hồn (Circulating - Nhiệt độ -20  +150oC Bath) - Độ lệch nhiệt độ : ± 0.5 oC Polyscience 9006 - Chƣơng trình thời gian: tùy chọn - Kích thƣớc trong: 350 x 290 x 140mm - Kích thƣớc ngồi:578 x 436 x 238 mm - Trọng lƣợng : 15 kg - Nguồn: 230V, 50/60 Hz, 1.6KW Máy chuẩn độ điện - Model: DL-50 tự động Hãng Metler Tpledo – Thụy sĩ Metler Toledo - Burete : 10ml – DL-50 - Độ xác: 0,2% - Độ phân giải: 0,1mV/0,002pH - Điều khiển trình tự động Hệ thống HPLC Hitachi – D7000 - Model: D 7000 Hãng Merck Hitachi – Nhật - Auto-sample - Bơm kênh - Detector UV - Điều khiển trình tự động SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi 88 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi B- Dụng cụ T T Tên dụng cụ Hãng sản xuất Cốc chịu nhiệt 400ml Bình tam giác 500ml có vịi Phểu chiết 250ml Buret 25ml Bình định mức loại  000ml Nhiệt kế thủy ngân – 500C  1000C  2000C Bình hút ẩm Điện trở đun nƣớc SVTH: Phan Thị Hiên & Trần Ni Kha Đặc điểm Schott – Đức Schott – Đức Schott – Đức Tốc độ chảy tối đa: 180ml/phút Isolab – Đức Phân vạch: 0,1ml EM – Đức Đức Phân vạch: 0,1; 0,2; 0,50C Việt Nam Việt Nam 220V; 1500W 89 ... sản phẩm, thực đề tài: ? ?X? ?y dựng phương pháp định lượng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y? ?? II Mục tiêu nghiên cứu X? ?y dựng phƣơng pháp định lƣợng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc. .. 4.4 HOẠCH ĐỊNH THÍ NGHIỆM Để thực định lƣợng Butafosfan nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y ta tiến hành khảo sát phƣơng pháp sau: Khảo sát phƣơng pháp định lƣợng Butafosfan phƣơng pháp chuẩn... 3,690 3,581 3,252 3,153 3,078 2,807 44 Luận văn tốt nghiệp đại học GVHD: ThS Nguyễn Thị Diệp Chi Trong phạm vi luận văn n? ?y, phƣơng pháp x? ?y dựng đƣợc thực thẩm định với nội dung: - Tính đặc hiệu