xây dựng phương pháp định lượng gluataraldehde trong nhiên liệu và thành phẩm thuốc thú y

WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA CƠNG NGHỆ   LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG GLUATARALDEHYDE TRONG NGUN LIỆU VÀ THÀNH PHẨM THUỐC THÚ Y CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN Ths NGUYỄN PHƢƠNG HẢI ĐẶNG MINH THÀNH MSSV: 2082237 LỚP CƠNG NGHỆ HĨA K34 Cần Thơ, tháng năm 2012 Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON LỜI CẢM ƠN  Qua q trình thực luận văn này, tơi học hỏi đƣợc nhiều kiến thức, kinh nghiệm kỹ thực hành bổ ích Đó nhờ giúp đỡ nhiệt tình gia đình, thầy bạn bè Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến: Chú Nguyễn Phương Hải động viên, giúp đỡ tận tình, tạo điều kiện tốt vật chất lẫn tinh thần giúp tơi hồn thành luận văn Các anh chị phòng thí nghiệm hố lý, Cơng ty Vemedim ln động viên, giúp đỡ, chia sẻ kinh nghiệm q báu sống nhƣ học tập Tất q thầy mơn Cơng nghệ Hố, khoa Cơng nghệ truyền đạt cho tơi kiến thức vơ bổ ích học tập nghiên cứu Gia đình ln ủng hộ, động viên chăm lo cho tơi vật chất lẫn tinh thần Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn bạn lớp Cơng nghệ Hóa Học K34 ln bên cạnh, động viên giúp đỡ tơi suốt thời gian học tập trƣờng Cần Thơ, tháng năm 2012 ii Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN HƢỚNG DẪN -Cần Thơ, Ngày …Tháng … Năm… Giáo Viên Hƣớng Dẫn iii Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON NHẬN XÉT CỦA GIÁO VIÊN PHẢN BIỆN -Cần Thơ, Ngày …Tháng … Năm… Giáo Viên Phản Biện iv Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON TĨM TẮT ĐỀ TÀI  Glutaraldehyde đƣợc nhiều cơng ty lĩnh vực chăn ni thú y sử dụng cho chế phẩm thuốc sát trùng, đặc biệt dùng vệ sinh chuồng trại tiêu diệt vi khuẩn Gluataraldehyde có khả giết chết tế bào nhanh, có khả diệt khuẩn phổ rộng Vì việc định lƣợng glutaraldehyde cần thiết Có nhiều phƣơng pháp định lƣợng glutaraldehyde, phƣơng pháp quang phổ với ƣu điểm đơn giản, chi phí thấp phù hợp với phòng thí nghiệm việc lựa chọn thích hợp Mục tiêu đề tài xây dựng phƣơng pháp xác định hàm lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu thành phẩm thuốc thú y, b ng phƣơng pháp quang phổ UV-vis Đánh giá so sánh với phƣơng pháp định lƣợng khác đƣợc cơng bố Sau thời gian thực đề tài kết thu đƣợc nhƣ sau:  Xây dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu thành phẩm b ng phƣơng pháp quang phổ UV-Vis Đáp ứng đƣợc u cầu: ngun liệu có sai số 5,0 , Đối với thành phẩm có sai số 10  Nội dung phƣơng pháp xây dựng  Chuẩn bị dung dịch : - Dung dịch phenol 10 5g Phenol ethanol vđ 50ml - DD acid sulfuric: acid H2SO4đđ 98 - Ethanol ngun chất - DD đ c Glu 0,04 : Lấy 1ml Glutaraldehyde chuẩn 100 ethanol vđ 50ml Pha lỗng 50 với dung mơi 400mg L  Chuẩn bị mẫu: Dự đốn sơ hàm lƣợng Glutaraldehyde mẫu thử để pha loảng mẫu cho dd mẫu thử có nồng độ  400mg/L Lấy 1ml DD mẫu thử 3ml DD phenol 10 37ml dd acid sulfuric + H2O vđ 50ml  Đo phổ: Set-ref = 482nm, cốc so sánh: mẫu trắng Qu t phổ từ 190  1100nm  Đọc kết quả: v Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON So sánh Abs max DD thử với DD đ c để suy hàm lƣợng Glutaraldehyde có mẫu thử  Thẩm định lại phƣơng pháp xây dựng:  Độ chọn lọc: Trung bình Pp ch thực đƣợc mẫu ch có Glutaraldehyde hay ch có chất khơng tham gia phản ứng với h n hợp Phenol + acid H2SO4đđ  Độ lặp lại: Rất cao RSD = 0.562939%  Độ đúng: đạt u cầu Hệ số tìm lại: RC = 95,37%  Độ tuyến tính: cao Hệ số tƣơng quan tuyến tính: R = 0,9999 ; Phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính: Abs = 0.2014*CGlu + 0.0269 (CGlu : nồng độ Glutaraldehyde tính theo mol l - Giới hạn phát hiện: thấp Pp nhạy LOD = 0,45178.10-5 mol/L hay 0,45mg/L Glutaraldehyde - Giới hạn định lƣợng: thấp Pp tinh LLOQ = 0,53047.10-5 mol/L  0,53mg/L Glutaraldehyde HLOQ = 12.10-5 mol/L hay  12mg/L Glutaraldehyde  Khoảng làm việc: rộng từ 0,53047.10-5  12.10-5 mol/L Glutaraldehyde 0,53  12mg/L Glutaraldehyde Trãi rộng gần hết thang đo máy: từ 0,112 đến 2,432 vi Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON MỤC LỤC  Trang LỜI CẢM ƠN ii LỜI TĨM TẮT v MỤC LỤC vii DANH MỤC HÌNH x DANH MỤC BẢNG xi DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT VÀ KÝ HIỆU xii PHẦN 1: MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶC VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU U CẦU 1.3 ĐỊA ĐIỂM VÀ THỜI GIAN THỰC HIỆN PHẦN 2: TỔNG QUAN CHƢƠNG 2: KHÁI QT VỀ GLUTARALDEHYDE 2.1 GIỚI THIỆU 2.2 ĐẶC ĐIỂM 2.3 TÍNH CHẤT 2.3.1 Tính chất vật lý 2.3.2 Tính chất hóa học 2.4 ĐIỀU CHẾ GLUTARALDEHYDE 10 2.5 ỨNG DỤNG 11 CHƢƠNG 3: PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH GLUTARALDEHYDE 13 3.1 PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH 13 vii Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON 3.1.1 Phân tích thành phần 13 3.1.2 Phản ứng hóa học 14 3.1.3 Sắc ký lỏng đầu dò UV UV-HPLC) 15 3.1.4 Sắc ký lỏng đầu dò huỳnh quang 16 3.2 PHƢƠNG PHÁP ĐỊNH LƢỢNG 17 3.2.1 Phƣơng pháp Chuẩn độ 17 3.2.2 Phƣơng pháp Quang phổ 18 3.2.3 Sắc ký lỏng đầu dò UV-Vis 19 CHƢƠNG 4: THẨM ĐỊNH PHƢƠNG PHÁP PHÂN TÍCH 21 4.1 GIỚI THIỆU 21 4.1.1 Mục đích 21 4.1.2 Nội dung 21 4.2 PHƢƠNG PHÁP THỰC HIỆN 22 4.2.1 Tính đặc hiệu 22 4.2.2 Độ 23 4.2.3 Độ chụm 24 4.2.4 Độ tuyến tính 26 4.2.5 Giới hạn phân tích – Khoảng áp dụng 27 4.2.5.1 Giới hạn phân tích 27 4.2.5.2 Khoảng áp dụng 27 PHẦN 3: THỰC NGHIỆM CHƢƠNG 5: HOẠCH ĐỊNH THÍ NGHIỆM 28 5.1 PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 28 5.2 PHƢƠNG PHÁP THỰC HIỆN 28 5.2.1 Hóa chất, thuốc thử 28 5.2.2 Thiết bị dụng cụ 28 5.3 HOẠCH ĐỊNH THÍ NGHIỆM 29 viii Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON 5.3.1 Thí nghiệm phƣơng pháp quang phổ 29 5.3.2 Thí nghiệm nội dung thẩm định 33 5.3.3 Thí nghiệm đánh giá so sánh phƣơng pháp 36 CHƢƠNG 6: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 39 6.1 THÍ NGHIỆM VỀ XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ 39 6.2 THÍ NGHIỆM VỀ NỘI DUNG THẨM ĐỊNH 49 6.3 THÍ NGHIỆM VỀ PHƢƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ 55 PHẦN 4: KẾT LUẬN 62 A-KẾT LUẬN 62 B-KIẾN NGHỊ 63 TÀI LIỆU THAM KHẢO 64 PHỤ LỤC 66 PHỤ LỤC 68 ix Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON DANH MỤC HÌNH ẢNH  Trang Hình 2.1: Glutaraldehyde thùng 250kg Hình 2.2 : chế phẩm VIME-PROTEX cơng ty Vemedim Hình 2.3: Glutaraldehyde thị trƣờng Hình 2.4 :Chế phẩm VIME-PROTEX Vemedim-Việt Nam 11 Hình 2.5 :Chế phẩm VBK cơng ty ViBo-Việt Nam 12 Hình 4.1: So sánh độ nhạy phƣơng pháp b ng đồ thị 26 Hình 6.1: Sự phụ thuộc độ hấp thu Abs theo bƣớc sóng ) 39 Hình 6.2: Sự phụ thuộc Abs mẫu trắng theo bƣớc sóng ) 40 Hình 6.3: Sự phụ thuộc Abs phức Glu-Phe theo  41 Hình 6.4: Sự phụ thuộc Abs phức theo nồng độ acid H2SO4 43 Hình 6.5: Sự phụ thuộc Abs phức theo nồng độ Phenol 44 Hình 6.6: Sự phụ thuộc Abs phức theo thời gian đo phổ 45 Hình 6.7: Sự phụ thuộc Abs phức theo nồng độ Glutaraldehyde 47 Hình 6.8 : Khoảng tuyến tính nồng độ Glutaraldehyde 52 Hình 6.9: LLOQ Glutaraldehyde pp Quang phổ 54 Hình 6.10: Kết khảo sát mẫu ngun liệu 56 Hình 6.11: Thành phẩm Vime-Protex cơng ty vemedim 58 Hình 6.12: Kết đo mẫu thành phẩm 59 x Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết 6.3 THÍ NGHIỆM VỀ ĐÁNH GIÁ PHƢƠNG PHÁP Thực thí nghiệm nhƣ sau: TN 3.1: Định lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu Protectol GA 50 Định lƣợng mẫu ngun liệu Protectol GA 50 có  50% Glutaraldehyde BASF Chemical Co – Đức số lơ 09339756PO b ng Pp quang phổ chuẩn độ Hàm lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu khoảng 47,0  53,0% TN 3.1.1: Pp Quang phổ a) Thực hiện:  Chuẩn bị dung dịch : - Dung dịch phenol 10 5g Phenol ethanol vđ 50ml - DD acid sulfuric: acid H2SO4đđ 98 - Ethanol ngun chất - DD Glu chuẩn: Lấy 1ml Glutaraldehyde chuẩn 97,5 w v 50ml Pha loảng 50 dung mơi DD có nồng độ 390mg l ethanol vđ  Chuẩn bị mẫu: - DD mẫu thử: mẫu lơ hàng Lấy m1>3 mg mẫu thử Lấy 1ml 3ml DD phenol 10 Ethanol vđ 100ml Pha loảng 50 dung mơi 37ml dd acid sulfuric + H2O vđ 50ml - DD đ c: Lấy 1ml DD Glu chuẩn 3ml DD phenol 10 sulfuric + H2O vđ 50ml DD đ c có nồng độ 7,8mg l  Đo phổ: Set-ref = 482nm, cốc so sánh: mẫu trắng 37ml dd acid Qu t phổ từ 190  1100nm  Đọc kết quả: So sánh Abs max DD thử với DD đ c để suy hàm lƣợng Glutaraldehyde có mẫu thử SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 55 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết b) Kết quả: Hình 6.10:Kết khảo sát mẫu ngun liệu Bảng 6.10: Kết định lƣợng Glu b ng phƣơng pháp quang phổ Mẫu Lƣợng cân mẫu m1>3) (mg) 1514,2 523,6 517,6 / / / 0,608 1,015 1,414 49,02 49,11 49,08 Nơng độ Glu mg l Độ hấp thu Abs Hàm lƣợng Glu (%) Cơng thức tính Glu mẫu thử= DD đ c 7,8 1,597 Abs DDthu * CGlu _ d / c *100 * 50 * 50 *100% Abs Glu d / c * mthu _(13) *1000 Hàm lƣợng trung bình Glutaraldehyde mẫu thử = 49,07% SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 56 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết TN 3.1.2: Pp chuẩn độ  Theo British Pharmacopoeia 2007 Lấy xác 2g mẫu thử hòa tan vào 100ml dd hydroxylamine hydrochloride DD trƣớc đƣợc trung hòa b ng dd NaOH 1M với ch thị bromophenol blue Để n 30 phút, thêm 20ml Ether dầu hỏa có phân đoạn sơi 40 – 600C Chuẩn độ b ng dd NaOH 1M đến màu lớp nƣớc tƣơng đƣơng với màu dd hydroxylamine hydrochloride trung hòa trƣớc Each ml of 1M sodium hydroxide VS is equivalent to 50.05 mg of C5H8O2  Theo PTN Vemedim Lấy xác  800mg mẫu thử hòa tan vào 100ml dd hydroxylamine hydrochloride DD trƣớc đƣợc trung hòa b ng dd NaOH 1M với ch thị bromophenol blue Để n 30 phút, thêm 20ml Ether dầu hỏa có phân đoạn sơi 40 – 600C Chuẩn độ b ng dd NaOH 1M đến màu lớp nƣớc tƣơng đƣơng với màu dd hydroxylamine hydrochloride trung hòa trƣớc 1ml dd NaOH 1M  50,05mg Glutaraldehyde b) Thực hiện: Chuẩn độ mẫu theo Pp nhƣ c) Kết quả: Bảng 6.11: Kết định lƣợng ngun liệu b ng phƣơng pháp chuẩn độ Mẫu Lƣợng cân mẫu (m1>3) (mg) 601,8 806,4 907.5 Thể tích dd NaOH 1M chuẩn độ ml 5,9 7,9 8,9 Hàm lƣợng Glutaraldehyde (%) 49,07 49,03 49,08 Cơng thức tính Glu mẫu thử = VDDNaOH _ 1M * 50,05 * 100% mthu _(13) Hàm lƣợng trung bình Glutaraldehyde mẫu thử = 49,06% SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 57 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết TN 3.2: Định lƣợng Glutaraldehyde thành phẩm Định lƣợng mẫu thuốc thú y Vime-Protex Cơng ty Vemedim b ng Pp quang phổ chuẩn độ Chai 1000ml, số lơ: 04-020412 Hàm lƣợng Glutaraldehyde chế phẩm  20g/100ml THÀNH PHẦN: Trong 000ml có: - Glutaraldehyde … 200g - Alkyldimethylbenzylammonium chloride … 152g - Tá dƣợc vừa đủ 000ml CƠNG DỤNG: VIME-PROTEX dung dịch thuốc sát trùng phổ rộng, tiêu diệt vi khuẩn, virus, nấm gây bệnh cho gia súc , gia cầm - Vi khuẩn : E coli, Salmonella, Pasteurella, mycoplasma, Pseudomonas, , - Virus : Bệnh cúm influenza , Lở mồm long móng F.M.D , Gumboro, Dịch tả , Bệnh dại, * Dùng sát trùng : - Trại chăn ni trâu bò, heo, gà, vịt - Dụng cụ chun chở gia súc, lò giết mổ - Tẩy trùng thiết bị, dụng cụ dùng chăn ni Hình 6.11: Thành phẩm VimeProtex cơng ty vemedim CÁCH DÙNG: - Liều chung : 1lít pha với 200-500 lít nƣớc Chai 250ml pha với 50 - 125 lít nƣớc - Sát trùng trại chăn ni : 1:200, phun sƣơng khắp trại hay phƣơng tiện chun chở - Tẩy trùng thiết bị : 1:500, ngâm dụng cụ Làm dụng cụ, sau dùng thuốc pha lỗng phun, xịt ngâm dụng cụ SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 58 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết TN 3.2.1: Pp Quang phổ a) Thực hiện:  Chuẩn bị dung dịch : - Dung dịch phenol 10 5g Phenol ethanol vđ 50ml - DD acid sulfuric: acid H2SO4đđ 98 - Ethanol ngun chất - DD Glu chuẩn: Lấy 1ml Glutaraldehyde chuẩn 97,5 w v 50ml Pha loảng 50 dung mơi DD có nồng độ 390mg l ethanol vđ  Chuẩn bị mẫu: - DD thử: Lấy xác 5ml mẫu thử dung mơi Lấy 1ml 3ml DD phenol 10 50ml - DD đ c: Lấy 1ml DD Glu chuẩn sulfuric + H2O vđ 50ml Ethanol vđ 50ml Pha loảng 50 37ml dd acid sulfuric H 2O vđ 3ml DD phenol 10 37ml dd acid DD đ c có nồng độ 7,8mg l  Đo phổ: Set-ref = 482nm, cốc so sánh: mẫu trắng Qu t phổ từ 190  1100nm  Đọc kết quả: So sánh Abs max DD thử với DD đ c để suy hàm lƣợng Glutaraldehyde có mẫu thử d) Kết quả: Hình 6.12:Kết đo mẫu thành phẩm SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 59 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết Bảng 6.12: Kết định lƣợng thành phẩm b ng phƣơng pháp quang phổ Mẫu Lƣợng mẫu m1>3) (ml) 5 Nơng độ Glu mg l / / / 7,8 Độ hấp thu Abs Hàm lƣợng Glu (g/L) 1,607 1,606 1,608 1,597 196,24 196,09 196,34 Cơng thức tính Glu g L mẫu thử: DD đ c Abs DDthu * CGlu _ d / c * 50 * 50 * 50 Abs Glu d / c * *1000 Hàm lƣợng trung bình Glutaraldehyde mẫu thử = 196,19g/L TN 3.2.2: Pp chuẩn độ Thực theo PTN Vemedim Tiêu chuẩn sở TC-QA-02-152XK) Lấy xác  800mg mẫu thử hòa tan vào 100ml dd hydro ylamine hydrochloride ( trước đư c trung hòa b ng dd NaOH M với ch thị bromophenol blue Để n 30 phút, thêm 20ml Ether dầu hỏa có phân đoạn sơi 40 – 600C Chuẩn độ b ng dd NaOH 1M đến màu lớp nƣớc tƣơng đƣơng với màu dd hydroxylamine hydrochloride 7% trung hòa trƣớc 1ml dd NaOH 1M  50,05mg Glutaraldehyde a) Thực hiện: Chuẩn độ mẫu theo Pp nhƣ b) Kết quả: Bảng 6.13: Kết định lƣợng thành phẩm b ng phƣơng pháp chuẩn độ Mẫu Lƣợng mẫu m1>3) (ml) Thể tích dd NaOH 1M chuẩn độ ml Hàm lƣợng Glutaraldehyde (g/L) SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú 3 11,8 15,7 19,6 196,86 196,44 196,19 Trang: 60 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần III: Thực Nghiệm Chương 6: Thực Nghiệm Kết VDDNaOH _ 1M * 50.05 *1000 Cơng thức tính Glu mẫu thử: Vthu _(13) *1000 Hàm lƣợng trung bình Glutaraldehyde mẫu thử = 196,49% Bảng so sánh kết định lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu thành phẩm b ng Pp: Quang phổ Chuẩn độ Bảng 6.14: So sánh kết phƣơng pháp ngun liệu thành phẩm Hàm lƣợng Glutaraldehyde Lý thuyết Quang phổ Chuẩn độ Ngun liệu Protectol GA 50  50% 49,07% 49,06% Thành phẩm Vime-Protex 200g/1000ml 196,19g/L 196,49g/L SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 61 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần IV: Kết Luận KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ A KẾT LUẬN Trong phạm vi đề tài nghiên cứu này, luận văn đạt đƣợc kết sau: 1/ Xây dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng Glutaraldehyde ngun liệu thành phẩm b ng phƣơng pháp quang phổ UV-Vis Pp có thực tƣơng đối đơn giản, hóa chất dễ tìm, thời gian nhanh có giá trị thực tiễn cao Đáp ứng đƣợc u cầu: Đối với ngun liệu có sai số Đối với thành phẩm có sai số 5,0 10 2/ Nội dung phƣơng pháp xây dựng  Chuẩn bị dung dịch : - Dung dịch phenol 10 5g Phenol ethanol vđ 50ml - DD acid sulfuric: acid H2SO4đđ 98 - Ethanol ngun chất - DD đ c Glu 0,04 : Lấy 1ml Glutaraldehyde chuẩn 100 ethanol vđ 50ml Pha loảng 50 với dung mơi 400mg L  Chuẩn bị mẫu: Dự đốn sơ hàm lƣợng Glutaraldehyde mẫu thử để pha loảng mẫu cho dd mẫu thử có nồng độ  400mg/L Lấy 1ml DD mẫu thử 3ml DD phenol 10 37ml dd acid sulfuric + H2O vđ 50ml  Đo phổ: Set-ref = 482nm, cốc so sánh: mẫu trắng Qu t phổ từ 190  1100nm  Đọc kết quả: So sánh Abs max DD thử với DD đ c để suy hàm lƣợng Glutaraldehyde có mẫu thử SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 62 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần IV: Kết Luận 3/ Đặc điểm phƣơng pháp:  Độ chọn lọc: Trung bình Pp ch thực đƣợc mẫu ch có Glutaraldehyde hay ch có chất khơng tham gia phản ứng với h n hợp Phenol + acid H2SO4đđ  Độ lặp lại: Rất cao RSD = 0,562939%  Độ đúng: đạt u cầu Hệ số tìm lại: RC = 95,37%  Độ tuyến tính: cao Hệ số tƣơng quan tuyến tính: R = 0,9999 ; Phƣơng trình tƣơng quan tuyến tính: Abs = 0,2014*CGlu + 0,0269 (CGlu : nồng độ Glutaraldehyde tính theo mol l - Giới hạn phát hiện: thấp Pp nhạy LOD = 0,45178.10-5 mol/L hay 0,45mg/L Glutaraldehyde - Giới hạn định lƣợng: thấp Pp tinh LLOQ = 0,53047.10-5 mol/L  0,53mg/L Glutaraldehyde HLOQ = 12,10-5 mol/L hay  12mg/L Glutaraldehyde  Khoảng làm việc: rộng từ 0,53047.10-5  12.10-5 mol/L Glutaraldehyde 0,53  12mg/L Glutaraldehyde Trãi rộng gần hết thang đo máy: từ 0,112 đến 2,432 B KIẾN NGHỊ Do thời gian thực có hạn khối lƣợng cơng việc nhiều nên đề tài chƣa thực vấn đề sau: 1- Trong TN khảo sát độ chọn lọc, ch thực đƣợc Formaldehyde gây tủa, khơng áp dụng Pp đƣợc Đối với chất gây nhiễu khác chƣa thực đƣợc 2- Trong TN đánh giá & so sánh với Pp khác, ch thực đƣợc Pp chuẩn độ mà chƣa thực đƣợc với Pp HPLC, PTN Vemedim chƣa hồn thiện Pp 3- Trong TN định lƣợng thành phẩm, ch thực đƣợc sản phẩm tƣơng đối đơn giản Chƣa thử sản phẩm khác Các vấn đề đƣợc PTN Vemedim tiếp tục khảo sát thời gian tới  SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 63 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Tài Liệu Tham Khảo TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tiếng Việt (1) Ths Nguyễn Thị Diệp Chi 2008 , Giáo trình Kiểm nghiệm thực phẩm dư c phẩm, Trƣờng Đại học Cần Thơ (2) Ths Nguyễn Thị Diệp Chi 2008 , Giáo trình Các phương pháp phân tích đại, Trƣờng Đại học Cần Thơ (3) Trần Tứ Hiếu 2003 , Phân tích trắc quang - Phổ hấp thụ UV – Vis, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội (4) Nguyễn Đình Triệu 2001 , Các phương pháp phân tích vật lý hóa lý,NXB Đại Học Quốc Gia Hà Nội (5) Lê Xn Mai, Nguyễn Bạch Tuyết, Giáo trình phân tích đinh lư ng, Đại Học Bách Khoa TP HCM (6) Bùi Long Biên, Hóa học phân tích định lư ng, NXB Khoa Học Kỹ Thuật, 2001 Tiếng Anh (7) J BARTOS M PESEZ, Colorimetric and Fluorimetric determination of aldehydes and ketones, 1979 (8) J Boratyński, T Zal ,Colorimetric micromethods for glutaraldehyde determination by means of phenol and sulfuric acid or phenol and perchloric acid, 1989 (9) British Pharmacopoeia ( 2007) (10) Lloyd R Snyder , Joseph J Kirkland , John W Dolan, Introduction to Modern Liquid Chromatography (11) The Merck index (12) Francis A.Carey, Organic Chemistry,2001 (13) Veronika R.Meyer, Practical High – Chromatography,fourth edition, 2005, John Wiley & Sons SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Performance Liquid Trang: 64 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Tài Liệu Tham Khảo (14) D L Pavia, G M Lampman, Introduction To Spectroscopy, W B Saunders, Philadelphia, 1979 (15) J Brand, G Eghington, Ứng ụng Quang Phổ Trong Hóa Hữu cơ, NXB Học Kỹ Thuật, Hà nội , 1972 (16) James H Bedino, Embalming Chemistry: Glutaraldehyde Vesus Formaldehyde, The Champion Company Website (17) http://tailieu.vn/xem-tai-lieu/chuong-1-phan-tich-trac-quang.306742.html (18)http://tailieu.vn/xem-tai-lieu/ly-thuyet-sac-ky-long-hieu-nang-caohplc.216528.html (19) http://en.wikipedia.org/wiki/Glutaraldehyde (20) http://uv-vietnam.com.vn/NewsDetail.aspx?newsId=1096 (21) http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/0003269790906772 (22) http://www.vemedim.vn/chitietsanpham.php?id=22 (23) www.inchem.org/documents/sids/sids/111308.pdf (24)http://vibo.com.vn/ProductDetail.aspx?productId=103 SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 65 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phụ Lục Phụ lục A- Hóa chất TT Tên–Phân loại- Code Merck – Cas No Cơng thức Phenol ; loại analysis; Code-Merck: 100206 Cas-No: 108-95-2 C6H6O Hydroxylamin HCl ; loại synthesis ; Code-Merck: 822334 M = 94 HONH2· HCl M = 69,49 Cas-No: 5470-11-1 Cấu tạo Natri hydroxit; loại analysis; CodeMerck: 106495 NaOH M = 40 Cas-No: 1310-73-2 O H2SO4 Acid Sunfuric; loại analysis; CodeMerck: 101833; Cas No: 7664-93-9 O S H O O H M = 98 Formalin; ; loại synthesis; Code-Merck: 818708; Cas No: 7664-93-9 Amoniac; ; loại analysis; Code-Merck: 101832; Cas No: 7664-93-9 O CH2O M = 32 H NH3 H M = 17 C H N H H OH Br Bromophenol xanh; ; loại indicator; Code-Merck: 108122; Cas No: 766493-9 C19H10Br4O5S M = 669 O O Br O S Br OH Br SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 66 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phụ Lục B-Chất chuẩn STT Tên–Phân loại- Code Merck – Cas No Glutaraldehyde; loại synthesis; Code-Merck: 814393 Cas-No: 111-30-8 Cơng thức Cấu tạo C5H8O2 M = 100,12 C- Dung dịch thử Tên dung dịch Cách pha HydroxylaminHCl 7% 7g hydroxylamine HCl 100ml H2O SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Trang: 67 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phụ Lục Phụ lục THIẾT BỊ VÀ DỤNG CỤ A- Thiết bị Tên  Model  Hãng sản xuất Cân phân tích – CP 224S Sartorius – Đức • Mức cân tối đa: 320g • Độ phân giải: 0,1mg  Calib nội pH kế – S20K Mettler Toledo – Đức • Khoảng đo: – 14 • Độ phân giải: 0,01 • Niệt đơ: – 1000C • Có chế độ bù nhiệt Bể siêu âm – 1510 Branson – • Kích thƣớc chung: 10"x12"x11.5" • Kích thƣớc chậu: 6" x 5.5" x 4" • Trọng lƣợng: 4,5kg • Tần số: 40 kHz Quang phổ kế UVVis Ultrospec 2000 Pharmacia – Anh • Khoảng qu t: 190 – 1100nm • Độ phân giải: 1nm • Thang đo: – • Độ phân giải: 0,001 TT SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Đặc điểm Hình ảnh Trang: 68 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM WWW.DAYKEMQUYNHON.UCOZ.COM WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phụ Lục Bể ổn nhiệt nƣớc WNE 14 Đức Bể điều nhiệt tuần hồn Circulating Bath) Polyscience 9006 Máy chuẩn độ điện tự động Metler Toledo – DL-50 - Thể tích 14 lít; - Nhiệt độ 95  5oC - Độ lệch nhiệt độ : ± 0.1 oC - Chƣơng trình thời gian: tùy chọn - Kích thƣớc trong: 350 x 290 x 140mm - Trọng lƣợng : 15 kg - Nguồn: 230V, 50 60 Hz, 1.8KW - Thể tích lít; - Nhiệt độ -20  +150oC - Độ lệch nhiệt độ : ± 0.5 oC - Chƣơng trình thời gian: tùy chọn - Kích thƣớc trong: 350 x 290 x 140mm - Kích thƣớc ngồi:578 x 436 x 238 mm - Trọng lƣợng : 15 kg - Nguồn: 230V, 50 60 Hz, 1.6KW - Model: DL-50 Hãng Metler Tpledo – Thụy sĩ - Burete : 10ml - Độ xác: 0,2 - Độ phân giải: 0,1mV 0,002pH - Điều khiển trình tự động B- Dụng cụ TT Tên dụng cụ Cốc chịu nhiệt 400ml Bình tam giác 500ml có vòi Phểu chiết 250ml Buret 25ml Bình định mức loại  000ml Nhiệt kế thủy ngân – 500C  1000C  2000C SVTH: Đặng Minh Thành Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú Hãng sản xuất Schott – Đức Đặc điểm Schott – Đức Schott – Đức Isolab – Đức Tốc độ chảy tối đa: 180ml phút Phân vạch: 0,1ml EM – Đức Đức Phân vạch: 0,1; 0,2; 0,50C Trang: 69 WWW.BOIDUONGHOAHOCQUYNHON.BLOGSPOT.COM ... WWW.FACEBOOK.COM/DAYKEM.QUYNHON Phần I: Mở Đầu Chương 1: Mở Đầu 1.2 MỤC ĐÍCH Y U CẦU X y dựng phƣơng pháp xác định hàm lƣợng Glutaraldehyde nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y, b ng phƣơng pháp quang... nhƣ sau:  X y dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng Glutaraldehyde nguyên liệu thành phẩm b ng phƣơng pháp quang phổ UV-Vis Đáp ứng đƣợc y u cầu: nguyên liệu có sai số 5,0 , Đối với thành phẩm có sai... nêu trên, việc định lƣợng Glutaraldehyde nguyên liệu thành phẩm thuốc thú y quan trọng Nó giúp cho có cách sử dụng hợp lý glutaraldehyde Chính v y, đề tài “ X y dựng phƣơng pháp xác định hàm lƣợng