Đánh giá, xác định nồng độ virus sars cov 2 theo thời gian của các bệnh nhân trên địa bàn hà nội

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “ĐÁNH GIÁ, XÁC ĐỊNH NỒNG ĐỘ VIRUS SARS – COV – THEO THỜI GIAN CỦA CÁC BỆNH NHÂN TRÊN ĐỊA BÀN HÀ NỘI” Ngƣời thực : NGUYỄN THỦY TIÊN Mã sinh viên : 637280 Lớp : K63CNSHC Ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Ngƣời hƣớng dẫn : GS.TS PHAN HỮU TÔN Hà Nội - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu tơi thời gian qua Những số liệu kết nghiên cứu trung thực, hoàn toàn thực phòng Xét nghiệm vi sinh – Labo TH Việt Nam khơng chép nguồn khác Ngồi ra, báo cáo có sử dụng số nguồn tài liệu tham khảo trích dẫn nguồn thích rõ ràng Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm với lời cam đoan trên! Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thủy Tiên i LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành tốt đề tài tốt nghiệp này, ngồi nỗ lực thân, tơi cịn nhận đƣợc quan tâm giúp đỡ nhiều tập thể cá nhân Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tri ân sâu sắc tới PGS.TS.Triệu Tiến Sang – Bộ môn Sinh học Di truyền học – Học viện Quân y, GS TS Phan Hữu Tôn - Bộ môn Công nghệ Sinh học phân tử - Khoa Công nghệ Sinh học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam tạo điều kiện cho tôi, hƣớng dẫn tận tình, chu đáo giúp tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp B n cạnh đó, tơi c ng xin chân thành cảm ơn giúp đỡ qu báu, nhiệt tình tập thể cán phịng t nghiệm vi sinh – abo TH Việt Nam, nơi tơi tiến hành khóa luận tốt nghiệp Cuối cùng, gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy cô Bộ môn Sinh học Phân tử - Khoa Công nghệ Sinh học - Học viện Nông nghiệp Việt Nam có kiến đóng góp để tơi hồn thành khóa luận cách hồn thiện Tơi xin chân thành cảm ơn giúp đỡ qu báu đó! Hà Nội, ngày 20 tháng 08 năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thủy Tiên ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG v DANH MỤC HÌNH vi TÓM TẮT vii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1.Tình hình dịch bệnh COVID – 19 giới Việt Nam 2.1.1.Lịch sử phát Coronavirus: 2.1.2.Tình hình dịch bệnh năm qua giới 2.1.3.Tình hình dịch bệnh Covid – 19 Việt Nam 2.2 Chỉ số CT Covid 2.3.Ý nghĩa giá trị CT xét nghiệm virus SARS – CoV – 2.4.Quy trình thí nghiệm: 2.5.Phương pháp tách chiết DNA 2.6.Phương pháp PCR 2.6.1 Tổng quan phương pháp PCR 2.6.2 Realtime PCR PHẦN VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 3.1 Vật liệu: 12 3.2 Phương pháp nghiên cứu 13 3.2.1.Phương pháp tách chiết AND máy tách chiết AND tự động 13 3.2.2 Phản ứng Real – time PCR 13 3.2.3 Biểu thị kết PCR Realtime : 14 3.2.4.Kiểm soát chất lượng 16 iii 3.2.5.Giới hạn phân tích 17 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 26 5.1 Kết luận 26 5.2 Kiến nghị 26 Tài liệu tham khảo 27 iv DANH MỤC BẢNG Bảng Số cá nhiễm số ca tử vong quốc gia giới Bảng Thành phần phản ứng PCR Realtime 14 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân xuất triệu chứng 20 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm 21 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm 22 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm 23 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân BN3, BN4, BN10 24 v DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Hình ảnh virus Corona Hình 2.2: Sơ đồ quy trình thí nghiệm xác định nồng độ virus SARS – CoV – Hình 2.3 Hệ thống tách chiết Acid Nucleic EXM6000 Hình 2.4 Cơ chế đánh dấu Taqman probe phát huỳnh quang 10 Hình 2.5 Biểu đồ nhân Realtime PCR 10 Hình 3.1 Bộ hóa chất Lilif COVID -19 12 Hình 4.1 Biểu đồ biểu thị CT gene E qua lần xét nghiệm bệnh nhân 25 Hình 4.2 Biểu đồ biểu thị CT gene N qua lần xét nghiệm bệnh nhân 25 vi TÓM TẮT COVID-19 thường gây triệu chứng hơ hấp, cảm thấy giống cảm lạnh, cúm viêm phổi COVID-19 cơng khơng phổi hệ hô hấp Các phận khác thể bị ảnh hưởng bệnh Tải lượng virus số lượng virus có máu hay dịch tiết người bệnh bị virus cơng, tìm thấy thơng qua xét nghiệm PCR hay Realtime RT-PCR Dựa số liệu virus phát được, bác sĩ có sở đánh giá tình trạng bệnh, lên chiến lược điều trị hay cho người bệnh xuất viện Hiện nay, tải lượng virus SARS-CoV-2 tìm thấy người bệnh khơng có triệu chứng Điều cho thấy người khơng có triệu chứng truyền bệnh Chính vậy, để góp phần phục vụ cho cơng tác kiểm sốt dịch bệnh lây lan cộng đồng , em thực đề tài tốt nghiệp “Đánh giá, xác định nồng độ virus SARS – CoV – theo thời gian bệnh nhân địa bàn Hà Nội” Đề tài thực thời gian từ tháng 3/2022 đến hết tháng 6/2022 Ph ng Xét nghiệm vi sinh – Labo TH Việt Nam vii PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Đại dịch COVID –19 lây lan, ảnh hưởng đến sức khỏe, kinh tế, đời sống người dân toàn giời Các chuyên gia y tế giới tập trung nghiên cứu tải lượng virus SARS – CoV – để có chiến lược điều trị hiệu cho người không may bị nhiễm COVID – 19 Tải lượng virus số lượng virus có máu hay dịch tiết người bệnh bị virus công, tìm thấy thơng qua xét nghiệm PCR hay Realtime RT-PCR Dựa số liệu virus phát được, bác sĩ có sở đánh giá tình trạng bệnh, lên kế hoạch điều trị cho bệnh nhân Tải lượng virus có thơng số khác tùy theo thời điểm sức đề kháng, hay khả đáp úng điều trị nhân Tải lượng virus SARS – CoV – tìm thấy người bệnh khơng có triệu chứng Điều cho thấy người khơng có triệu chứng truyền bệnh Do đó, cơng tác xét nghiệm sàng lọc người nhiễm COVID-19, xác định tải lượng virus, đánh giá khả lây truyền… có vai tr quan trọng chiến dịch kiểm soát bệnh truyền nhiễm lây lan cộng đồng 1.2 Mục đích Xác định nồng độ virus có thể bệnh nhân theo giai đoạn PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1.Tình hình dịch bệnh COVID – 19 giới Việt Nam 2.1.1.Lịch sử phát Coronavirus: - Virus Corona phát vào năm 1960 người viêm phế quản truyền nhiễm virus gà virus từ khoang mũi bệnh nhân bị cảm lạnh thông thường Hai loại virus đặt tên 229E OC43 người Các thành viên khác họ xác định, bao gồm Sac-CoV năm 2003, HcoV NL63 năm 2004, MERs-CoV năm 2012 SARs-CoV-2 năm 2019 (Covid-19) Các triệu chứng điển hình nhiễm trùng đường hơ hấp nghiêm trọng - Tên Coronavirus có nguồn gốc từ tiếng Latin, corona có nghĩa “vương miện” “vịng hoa”, kình hiển vi điện tử, chúng có mép ngồi nhơ giống vương miện Hình 2.1 Hình ảnh virus Corona - Virus corona tìm thấy động vật người Một số chủng virus corona gây cảm lạnh thơng thường nghiêm trọng Hội chứng Hô hấp Trung Đông (MERS) Hội chứng Hơ hấp cấp tính nặng (SARS) Trong đó, virus corona chủng corona virus chưa phân lập người trước Virus có tên gọi 2019-nCoV, chưa phát trước bùng phát dịch báo cáo thành phố Vũ Hán, tỉnh Hồ Bắc, Trung Quốc vào tháng 12/2019 Đại dịch viêm đường hô hấp cấp - Chuẩn bị ống phản ứng cho mẫu : ống 1, 2: DNA mẫu thử nghiệm thứ ống 3, 4: DNA mẫu thử nghiệm thứ Tùy số lượng mẫu thử nghiệm để bố trí thêm ống 5: Đối chứng dương tính gen mục tiêu ống 6: Đối chứng âm tính ADN -Chuẩn bị hỗn hợp phản ứng riêng với thành phần -Số lượng phản ứng cần chuẩn bị tính sau: nphản ứng= 2x 2(master mix) x nmẫu thử + (2 QC ) + (1 chứng âm) + (1 hao hụt cho 10 phản ứng) Hỗn hợp phản ứng không chứa DNA khuôn phân phối vào giếng phản ứng, sau 5µl DNA (mẫu thử, chuẩn, mẫu đối chứng) phân phối vào ống phản ứng Vị trí ống phản ứng thay đổi cho phù hợp với số lượng mẫu thử Bảng Thành phần phản ứng PCR Realtime Hóa chất Master mix Nồng độ cuối Thể tích(µl) 2x 10 Gen E/ Gen N ADN 40 ng Tổng thể tích/ ống phản ứng 20 - Đánh giá kết dựa giá trị Ct thu được: 3.2.3 Biểu thị kết PCR Realtime : Với Control mãu bệnh phẩm, giá trị cut off cho mục tiêu áp dụng xem “phát được” (+) giá trị Ct ≤40 Giá trị CT Kết ≤40 Phát (+) > 40 Không phát (-) Trị giá Ct 40 tín hiệu FAM Texas Red VIC kết 14 việc khuếch đại không đặc hiệu Giá trị cut-off sản phẩm 40, giá trị điều chỉnh lại, tùy vào mơi trường ph ng thí nghiệm Nếu viêc nhiễm chéo thường xảy khoảng giá trị Ct từ 35 đến 40, giá trị cut-off điều chỉnh thủ cơng để giảm nguy dương tính giả tăng hiệu phân tích Giá trị Ct thường chia làm nhóm: CT < 20, CT từ 20 – 29, CT≥ 30  CT 20 mốc cần thận trọng, đặc biệt đối tượng có nguy như: người cao tuổi, có bệnh Nhóm đối tượng có CT thấp khả bệnh trở nặng cao, tốt nên đưa họ nhập viện sớm Tuy nhiên, có người CT thấp lại thấy khỏe, thường gặp người trẻ tuổi Điều họ có hệ miễn dịch tốt, kiểm sốt nên bệnh không tiến triển nặng  CT 20 – 29: Ở người lớn tuổi, có bệnh có nguy trở nặng, cần theo dõi sát Ngoài ra, tải lượng vius thời điểm c n nguy lây nhiễm, nên người bệnh cần tuân thủ biện pháp ph ng dịch Bộ Y tế  CT ≥ 30 tiêu chuẩn để F0 xuất viện, tải lượng virus thời điểm khó lây Và theo số nghiên cứu tin cậy, giá trị CT > 33 hồn tồn khơng có khả lây bệnh Tuy nhiên cần lưu ý, người chưa xét nghiệm, làm PCR có CT≥ 30 khơng đồng nghĩa với việc tải lượng virus thấp, khó lây trường hợp mắc bệnh Trên thực tế, tải lượng virus diễn tiến theo đường parabol, ban đầu số CT cao giảm dần (virus nhiều lên dần), sau qua giai đoạn tồn phát CT tăng dần trở lại Trong trường hợp này, người bệnh không chủ quan, nên tự cách ly tiếp tục xét nghiệm sau vài ngày 15 * Giải thích kết bệnh phẩm: Gene E Gene N Biện luận IPC (VIC) + +/- - + Dương tính với SARS-CoV-2 Âm tính với SARS-CoV-2 + - +/- Không kết luận** - + +/- Mẫu cần kiểm tra lại Kết khơng có giá trị / Tách chiết - - - RT-PCR lại Nếu kết lặp lại không đạt, xem xét thu lại mẫu **Không kết luận: Kết dương tính mục đơn lẻ (gene E gene N) 1) Nồng độ mẫu gần thấp giới hạn phát kiểm tra 2) Đột biến vùng đích vị trính bám oligo, 3) Nhiễm số Sarbecovirus khác (ví dụ SARS-CoV số loạiSarbecovirus trước chưa biết có lây nhiễm sang người), 4) Nhiễm chéo từ mẫu control 1,2, mẫu bệnh phẩm, 5) Các yếu tố khác Mẫu phải kiểm tra lại ※ Lưu ý: Ct ≤40 = Đã phát (+), Ct> 40 = Khơng phát (-) 3.2.4.Kiểm sốt chất lượng *Control nên chạy với mẻ ●DEPC DW (nước DEPC) cung cấp kit làm chứng âm (NC).Chứng âm cần thiết để đánh giá có hỗn hợp phản ứng bị nhiễm Chứngâm chay qua toàn quy trình kiểm tra, bao gồm tách chiết Nếuthể tích hóa chất NC cung cấp kit khơng đủ, chấp nhận sửdụng chứng âm riêng biệt (nuclease-free water) NC âm tính khơngthể đường cong tăng trưởng huỳnh quang vượt qua đường ngưỡng.Nếu dương tính giả xảy với phản ứng NC, mẫu bị nhiễm.Khơng chứng nhận q trình chạy lặp lại phân tích 16 ●Controlchứa gen E, N IPC sử dụng mẫu chứng dương Mẫuchứng dương cần thiết để đánh giá trình phát khuếch đại, tínhtồn vẹn primer probe tính xác lần chạy.Mỗi mẫu chứng dương nên cho kết dương tính cho mục tiêu thửnghiệm (giá trị Ct≤40) Nếu không đạt kết dương tính mongđợi, lượt chạy vơ hiệu cần lặp lại với đối chứng ●IPC (Kiểm sốt dương tính nội bộ) nên có cho mẫu bệnh phẩm vàđược đồng tinh với mục tiêu cho virus SARS-CoV2 Vì , IPC cóthể dùng để làm kiểm sốt q trình tách chiết làm chứng nội IPCcần thiết để đánh giá xem trình tách chiết khuếch đại có hợp lệ haykhơng IPC phải phát (giá trị Ct ≤40) mẫu âm tính cho SARSCoV-2 RNA Thất bại việc phát IPC bệnh phẩm cho thấy trìnhtách chiết axit nucleic từ vật liệu lâm sàng khơng phù hợp, dẫn đến mấtacidnucleic mang theo chất ức chế PCR từ bệnh phẩm, khơng cóhoặc khơng đủ tế bào người mẫu Nếu kết dương tính IPCkhơng đạt mong đợi mẫu âm tính với SARS-CoV-2, cần thực hiệnlấy mẫu kiểm tra lại Các yêu cầu kiểm tra chất lượng phải thực phù hợp với quyđịnh công nhận địa phương, tiểu bang/ liên bang yêu cầu vàkiểm soát chất lượng tiêu chuẩn – quy trình kiểm sốt chất lượng ph ngthí nghiệm bạn 3.2.5.Giới hạn phân tích Mẫu phải thu thập, vận chuyển bảo quản theo quy trình vàđiều kiện thích hợp Thu gom, vận chuyển bảo quản mẫu khơng đúngcáchcó thể cản trở khả phát trình tự mục tiêu xét nghiệm Acid nucleic tách chiết khuếch đại từ bệnh phẩm lâm sàngphảiđược thực theo phương pháp định liệt kê quytrình Các phương pháp tách chiết hệ thống xử lý khác chưa đượcđánh giá.Kết âm tính khơng loại trừ việc nhiễm SARS-CoV-2 không nên 17 đượcsử dụng làm sở để điều trị định quản lý khác.Kết âm tính giả do: - Thu mẫu không phù hợp - Đứt gãy RNA virus trình vận chuyển, lưu trữ - Sử dụng hóa chất tách chiết hóa chất xét nghiệm chưa đượcđánh giá - Có chất ức chế RT-PCR - Virus SARS-CoV-2 có đột biến - Khơng tuân theo hướng dẫn sử dụng Kết dương tính giả do: - Nhiễm chéo q trình thao tác chuẩn bị mẫu - Nhiễm chéo mẫu bệnh phẩm khác - Xáo trộn mẫu - Nhiễm RNA trình thao tác sản phẩm • Tác dụng vaccine, thuốc điều trị kháng vi-rút, thuốc kháng sinh, hóatrị liệu thuốc ức chế miễn dịch chưa đánh giá • Kết âm tính không loại trừ việc nhiễm vi rút SARS-CoV-2 nên sở định quản lý bệnh nhân • Kết dương tính cho thấy việc phát axit nucleic từ SARS-CoV-2 • Kết không phản ánh tải lượng virus bệnh phẩm • Axit nucleic tồn virus khơng c n tồn • Các ph ng thí nghiệm yêu cầu báo cáo tất kết dương tính cho quan y tế cơng cộng • Rửa / hút tỵ hầu hút mũi, mẫu mũi mũi trước tự lấy, hoặcnhà cung cấp dịch vụ chăm sóc sức khỏe thu thập Các mẫu bệnh phẩm đường hô hấp chấp nhận bổ sung kiểm tra với1copy™ COVID-19 qPCR Triplex Kit; nhiên, hiệu suất với loại mẫu chưa xác định • Thử nghiệm nhằm mục đích sử dụng để phát SARS-CoV-2 RNA từ que phết hầu họng, mũi trước mũi bệnh phẩm rửa 18 /hút hầu họng mẫu hút mũi thu thập Môi trường vận chuyển chung( UTM) Môi trường bận chuyển virus (VTM) Kiểm tra loại mẫu khác với 1copy ™ COVID-19 qPCR Triplex Kit dẫn đến kết khơng xác • Như với xét nghiệm phân tử nào, đột biến vùng mục tiêu 1copy ™ COVID-19 qPCR Triplex Kit ảnh hưởng đến việc gắn mồi / đầu d , dẫn đến không phát diệncủa virus • Dựa phân tích in silico, SARS-coronavirus phản ứng chéo với1copy™ COVID-19 qPCR Triplex Kit SARS-coronavirus lưu hành dân số, khó có khả có mặt bệnh phẩm bệnh nhân 19 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân xuất triệu chứng STT Mẫu bệnh phẩm Ct, Gene E Ct, Gene N 29.1 Kết BN1 31.3 + BN2 30.1 28.8 + BN3 32.2 28.1 + BN4 29.1 27.3 + BN5 30.4 28.9 + BN6 31.9 29.6 + BN7 32.9 27.4 + BN8 30.3 28.5 + BN9 31.0 27.7 + 10 BN10 32.4 28.5 + Kết xét nghiệm lần 1, bệnh nhân xuất triệu chứng Kết cho thấy số CT >30, khả lây nhiễm thấp 20 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm STT Mẫu bệnh phẩm Ct, Gene E Ct, Gene N Kết BN1 18.2 22.5 + BN2 18.9 15.9 + BN3 23.2 20.0 + BN4 29.0 27.0 + BN5 22.9 17.3 + BN6 22.2 19.2 + BN7 25.7 23.7 + BN8 26.6 20.2 + BN9 20.4 15.9 + 10 BN10 24.1 21.9 + Kết xét nghiệm lần 2, thời điểm lấy mẫu ngày sau lần xét nghiệm Kết cho thấy số CT nằm khoảng từ 18 - 25, khả lây nhiễm cao, có nguy trở nặng cần theo dõi sát Người bệnh cần tuân thủ biện pháp ph ng dịch Bộ Y tế 21 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm STT Mẫu bệnh phẩm Ct, Gene E Ct, Gene N Kết BN1 19.4 14.7 + BN2 23.6 20.2 + BN3 20.4 15.9 + BN4 22.2 19.2 + BN5 27.7 23.7 + BN6 16.4 14.4 + BN7 25.4 22.3 + BN8 23.3 20.5 + BN9 24.1 21.3 + 10 BN10 15.0 12.7 + Kết xét nghiệm lần 3, thời điểm lấy mẫu ngày sau lần xét nghiệm Kết cho thấy số CT nằm khoảng từ 15 - 30, khả lây nhiễm cao, có nguy trở nặng cần theo dõi sát Người bệnh cần tuân thủ biện pháp ph ng dịch Bộ Y tế 22 Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân sau ngày sau lần xét nghiệm STT  Mẫu bệnh phẩm Ct, Gene E Ct, Gene N Kết BN1 31.2 29.7 + BN2 32.4 29.0 + BN3 31.8 - BN4 30.1 - BN5 33.8 31.2 + BN6 32.3 27.5 + BN7 29.6 26.2 + BN8 33.2 28.2 + BN9 30.3 27.5 + 10 BN10 32.5 - Kết xét nghiệm lần 4, thời điểm lấy mẫu ngày sau lần xét nghiệm Kết cho thấy số CT nằm khoảng từ 28 – 30, nhiều mẫu bệnh phẩm không xuất số Ct gene E, có khả lây nhiễm Giá trị CT > 33 hồn tồn khơng có khả lây bệnh  Các BN3, BN4, BN10 lần xét nghiệm thứ không xuất số gene E, cần theo dõi thêm đề ph ng trường hợp âm tính giả 23  Hiện tượng dương tính giả, âm tính giả: + Dương tính giả kết xét nghiệm Dương tính người kiểm tra thực khơng có bệnh + Âm tính giả kết xét nghiệm Âm tính người kiểm tra thực có bệnh Người bệnh cần tuân thủ biện pháp ph ng dịch Bộ Y tế Bảng Kết xét nghiệm bệnh nhân BN3, BN4, BN10 STT Mẫu bệnh phẩm Ct, Gene E Ct, Gene N Kết BN1 - - - BN2 - - - BN3 - - - Các bệnh nhân BN3, BN4, BN10 lấy mẫu xét nghiệm lại sau sau ngày sau lần xét nghiệm Ở lần xét nghiệm số gene E gene N bệnh nhân không phát hiện, bệnh nhân không c n triệu chứng Covid -19 (theo tờ khai y tế bệnh nhân) Có thể kết luận bệnh nhân âm tính, khỏi bệnh không c n khả lây nhiễm 24 40 35 30 25 Lần Lần 20 Lần 15 Lần 10 BN1 BN2 BN3 BN4 BN5 BN6 BN7 BN8 BN9 BN10 Hình 4.1 Biểu đồ biểu thị CT gene E qua lần xét nghiệm bệnh nhân 35 30 25 Lần 20 Lần 15 Lần Lần 10 BN1 BN2 BN3 BN4 BN5 BN6 BN7 BN8 BN9 BN10 Hình 4.2 Biểu đồ biểu thị CT gene N qua lần xét nghiệm bệnh nhân 25 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Kết xét nghiệm cho thấy khoảng thời gian từ 3-5 ngày kể từ xuất triệu trứng, nồng độ virus có thể bệnh nhân cao dẫn đến khả lây nhiễm bệnh nhân người xung quanh cao Trong khoảng thời gian này, bệnh nhân cần theo dõi sát tuân thủ biện pháp ph ng dịch Bộ Y tế Lần xét nghiệm thứ – ngày sau lần xét nghiệm bệnh nhân không c n triệu chứng Covid -19 (theo tờ khai y tế bệnh nhân) Đối với người bệnh COVID-19, tải lượng virus thay đổi theo dạng đồ thị Parabol Ở thời điểm khởi phát, lấy mẫu xét nghiệm COVID-19, giá trị CT xét nghiệm Realtime RT-PCR cao, tải lượng virus thấp Sau vài ngày – triệu bệnh xuất hiện, lúc virus tiếp tục nhân lên mạnh mẽ nên số CT giảm dần Ở thời gian gần khỏi bệnh nhờ thể kích hoạt sức đề kháng, tác động thuốc kháng virus tải lượng virus giảm xuống, giảm dần mức lây nhiễm 5.2 Kiến nghị Tiếp tục theo dõi, đánh giá bệnh nhân khác địa bàn Hà Nội 26 Tài liệu tham khảo (n.d.) Retrieved from CỔNG THÔNG TIN CỦA BỘ Y TẾ VỀ ĐẠI DỊCH COVID19: https://covid19.gov.vn/ 199, B v (2022, 08 23) TẢI ƢỢNG VIRUS SARS-COV-2 TRONG CƠ THỂ NHƢ THẾ NÀO THÌ AN TỒN ? Retrieved from https://benhvien199.vn/tai-luongvirus-sarscov-trong-co-the-nhu-the-nao-thi-an-toan_ckct_11138 (2020, 06 02) Retrieved from Tai lieu huong dan su dung_Tieng Viet_Triplex.pdf: file:///C:/Users/Administrator.RCURRCGB3YTSGH4/Documents/Zalo%20Rece ived%20Files/HDSD%20-%20TRIPLEX%20-%20DICH.pdf (2022) Retrieved from SARS-CoV-2: https://vi.wikipedia.org/wiki/SARS-CoV-2 mức độ phân loại bệnh COVID-19 hƣớng dẫn vừa ban hành Bộ Y tế (n.d.) Retrieved from Bộ Y tế Cổng thông tin điện tử: https://moh.gov.vn/tinlien-quan/-/asset_publisher/vjYyM7O9aWnX/content/moi-5-muc-o-phan-loaibenh-covid-19-trong-huong-dan-vua-ban-hanh-cua-bo-y-te Bộ công cụ RT-PCR đa thời gian thực iliF ™ COVID-19 (2022, 08 23) Retrieved from Novatin: https://www.novatin.com/en/medical-devices/covid-19/lilif-covid19-multi-real-time-rt-pcr-kit/ BS.CKII Trần Thị Thanh Nga – Giám đốc Trung tâm Xét nghiệm, B v (2022, 08 23) TẢI ƢỢNG VIRUS CORONA BAO NHIÊU THÌ CÁCH Y TẠI NHÀ? Retrieved from https://tamanhhospital.vn/tai-luong-corona/ HIỂU ĐÚNG VỀ GIÁ TRỊ CT TRONG HIỆN VIRUS SARS-COV-2 ÉT NGHIỆM REA TIME RT-PCR PHÁT (2022, 15) Retrieved from https://hongngochospital.vn/gia-tri-ct-trong-xet-nghiem-realtime-rt-pcr/: https://hongngochospital.vn/gia-tri-ct-trong-xet-nghiem-realtime-rt-pcr/ hospital, H N (n.d.) Retrieved from https://hongngochospital.vn/gia-tri-ct-trong-xetnghiem-realtime-rt-pcr/ MEDLATEC, P T.-B (2022) Retrieved from Giá trị chẩn đoán xét nghiệm phân tử kháng thể bệnh nhân bị COVID-19: https://medlatec.vn/tin-tuc/giatri-chan-doan-cua-cac-xet-nghiem-phan-tu-va-khang-the-o-benh-nhan-bicovid19-s194-n17780 27 SK&ĐS (n.d.) http://dongnaicdc.vn/gia-tri-ct-trong-xet-nghiem-rt-pcr-cang-cao- cang-khong-lay-nhiem-covid-19 Retrieved from http://dongnaicdc.vn/gia-tri-cttrong-xet-nghiem-rt-pcr-cang-cao-cang-khong-lay-nhiem-covid-19 TP.HCM, T L.–T (2022, 08 23) Ý nghĩa số Ct x t nghiệm RT-PCR COVID-19 Retrieved from https://hcdc.vn/category/van-de-suc- khoe/covid19/tin-tuc-moi-nhat/y-nghia-cua-con-so-ct-cua-xet-nghiem-rtpcrcovid19-f0abcaad709b175ca09746711d6f3eeb.html TS.BS Đoàn Thi Hồng Hạnh - Khoa Xét nghiệm, B v (2022, 08 23) Thế dƣơng tính giả âm tính giả? Retrieved from https://www.vinmec.com/vi/tintuc/thong-tin-suc-khoe/suc-khoe-tong-quat/nao-la-duong-tinh-gia-va-am-tinhgia/ 28