Đánh giá sinh trưởng và phát triển của một số chủng nấm đầu khỉ (hericium erinacium) được lưu giữ tại học viện nông nghiệp việt nam (khóa luận tốt nghiệp)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM ĐẦU KHỈ (Hericium erinacium) ĐƯỢC LƯU GIỮ TẠI HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Hà Nội - 2022 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ĐÁNH GIÁ SINH TRƯỞNG VÀ PHÁT TRIỂN CỦA MỘT SỐ CHỦNG NẤM ĐẦU KHỈ (Hericium erinacium) ĐƯỢC LƯU GIỮ TẠI HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Người thực : NGUYỄN THỊ THÙY Khóa : 63 Ngành : CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Thị Bích Thùy ThS Nguyễn Thị Luyện Hà Nội - 2022 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài “Đánh giá sinh trưởng phát triển số chủng nấm Đầu khỉ (Hericium erinacium) lưu giữ Học viện Nông nghiệp Việt Nam.” trực tiếp thực hướng dẫn TS Nguyễn Thị Bích Thùy ThS Nguyễn Thị Luyện Số liệu kết nghiên cứu khóa luận hồn tồn trung thực, xác chưa công bố tài liệu, báo tạp chí Mọi thơng tin tham khảo báo cáo trích dẫn rõ ràng tên tác giả, tên cơng trình, thời gian, địa điểm nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Thuỳ i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian học tập, nghiên cứu hồn thành khóa luận, nhận hướng dẫn, bảo tận tình thầy giáo anh chị, giúp đỡ, động viên bạn bè gia đình Tơi xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Học viện, Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học thầy cô truyền đạt cho kiến thức thiết thực thời gian học tập rèn luyện Học viện Nông nghiệp Việt Nam Tôi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Thị Bích Thùy, Ths Nguyễn Thị Luyện, Bộ môn Công nghệ Vi sinh, khoa Công nghệ sinh học, Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình hướng dẫn, dạy bảo tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Tôi xin gửi lời cảm ơn đến TS Ngô Xuân Nghiễn, ThS Trần Đông Anh, KS Nguyễn Thị Huyền Trang, KS Ngơ Chí Quyền, Bộ mơn Cơng nghệ Vi sinh, khoa Công nghệ sinh học giúp đỡ hướng dẫn thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Trong q trình thực đề tài, xin gửi lời cảm ơn đến anh chị, bạn em Trung tâm đào tạo, Nghiên cứu Phát triển nấm ăn nấm dược liệu, Khoa Công nghệ Sinh học giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho suốt thời gian thực tập hồn thành khóa luận Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng gửi lời cảm ơn chân thành tới gia đình, người thân bạn bè bên cạnh động viên, tạo động lực cho tơi hồn thành khóa luận tốt nghiệp Hà Nội, ngày tháng năm 2022 Sinh viên Nguyễn Thị Thuỳ ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH ẢNH vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii BẢN TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP viii PHẦN I MỞ ĐẦU PHẦN II TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Tình hình nghiên cứu, sản xuất nấm giới Việt Nam 2.1.1 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm giới 2.1.2 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm Việt Nam 2.2 Giới thiệu chung nấm Đầu khỉ ( Hericium erinaceus) 10 2.2.1 Nguồn gốc nấm Đầu khỉ ( Hericium erinaceus) 10 2.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển nấm Đầu khỉ 16 2.3.1 Các yếu tố ngoại cảnh 17 2.3.2 Nguồn chất 18 2.4 Giá trị dinh dưỡng Đầu khỉ 19 2.5 Giá trị dinh dưỡng Đầu khỉ 20 2.5.1 Polysaccharides 21 2.5.2 Terpenoids: Sesterpenes diterpenoids 24 2.5.3 Sterols 25 2.6.1 Đặc tính chống bệnh tiểu đường, chống tăng đường huyết giảm lipid máu nấm Đầu khỉ 25 2.6.2 Chức bảo vệ não hệ thần kinh khác 26 2.6.3 Khả chống ung thư điều hoà miễn dịch 26 2.6.4 Khả chống oxy hóa 26 PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 28 3.7.1 Nhân giống cấp 30 3.7.2 Nhân giống cấp mơi trường thóc hạt 31 iii 3.7.3 Ni trồng chất mùn cưa có bổ sung dinh dưỡng 32 3.9.1 Các tiêu theo dõi sinh trưởng hệ sợi môi trường nhân giống cấp 33 3.9.2 Các tiêu theo dõi sinh trưởng hệ sợi môi trường nuôi trồng 34 3.9.3 Các tiêu theo dõi hình thành phát triển thể 34 PHẦN IV KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 35 4.1.1 Khả nhiễm bệnh hệ sợi nấm Đầu khỉ môi trường nhân giống cấp 37 4.3.1 Sinh trưởng phát triển chủng nấm Đầu khỉ giai đoạn hình thành phát triển hệ sợi 41 4.3.2 Sinh trưởng phát triển thể chủng nấm Đầu khỉ giai đoạn hình thành thể 44 PHẦN V KẾT LUẬN 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO .49 PHỤ LỤc .54 iv DANH MỤC BẢNG Bảng hàm lượng chất dinh dưỡng thể nấm đầu khỉ loài khác .20 Bảng 2 giá trị dược liệu nấm đầu khỉ 21 Bảng nguồn gốc thành phần polysaccharid .23 Bảng nguồn gốc thành phần sesterpenes diterpenoids .24 Bảng tốc độ hệ sợi chủng nấm đầu khỉ môi trường nhân giống cấp qua giai đoạn sinh trưởng 35 Bảng tỉ lệ nhiễm bệnh chủng nấm đầu khỉ môi trường nhân giống cấp .38 Bảng tốc độ hệ sợi chủng nấm đầu khỉ chủng nấm đầu khỉ môi trường nhân giống cấp giai đoạn sinh trưởng 39 Bảng 4 sinh trưởng phát triển chủng nấm đầu khỉ môi trường nuôi trồng qua giai đoạn 42 Bảng thời gian kín bề mặt, kín 1/3 bịch thời gian hình thành thể nấm đầu khỉ môi trường nuôi trồng .43 Bảng tỉ lệ nhiễm bệnh cuả chủng nấm đầu khỉ môi trường nuôi trồng .46 v DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình sản lượng nấm lưu thơng thị trường giới từ 2010-2019 .4 Hình 2 giá trị xuất nấm giới từ năm 2010 – 2019 .5 Hình tốc độ tăng trưởng sản lượng nấm việt nam qua năm Hình nấm đầu khỉ ngồi tự nhiên 11 Hình bào tử nấm đầu khỉ 13 Hình chu trình sống nấm đảm 14 Hình nấm đầu khỉ nuôi trồng nhân tạo 16 Hình hệ sợi chủng nấm đầu khỉ môi trường pga sau 20 ngày .36 Hình hình ảnh giống cấp chủng nấm đầu khỉ ni cấy mơi trường thóc hạt (a sau 15 ngày cấy giống; b sau 25 ngày cấy giống) .40 Hình hình ảnh hệ sợi chủng nấm đầu khỉ nuôi trồng giá thể sau 25 ngày .42 Hình 4 hình ảnh thể nấm đầu khỉ môi trường nuôi trồng 45 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Ý nghĩa Kí hiệu PGA Potato Glucose Agar CT1 Cơng thức CT2 Công thức CT3 Công thức CT4 Công thức CT5 Công thức CV (%) Sai số thí nghiệm TGST Thời gian sinh trưởng LSD0,05 Độ lệch tiêu chuẩn mức ý nghĩa % vii BẢN TÓM TẮT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP Tên đề tài: “Đánh giá sinh trưởng phát triển số chủng nấm Đầu khỉ (Hericium erinacium) lưu giữ Học viện Nông nghiệp Việt Nam” Nấm Đầu khỉ loại nấm có giá trị dinh dưỡng dược liệu cao Các hợp chất hoạt tính sinh học bao gồm polysaccharid β-glucan, hericenones sterol, erinacinetecpenoit, isoindolinones,… chất dinh dưỡng có khả có đặc tính bảo vệ thần kinh tái tạo thần kinh Đề tài “đánh giá sinh trưởng phát triển số chủng nấm Đầu khỉ (Hericium erinacium) lưu giữ Học viện Nông nghiệp Việt Nam” nhằm đánh tốc độ hệ sợi, đặc điểm hệ sợi, suất hình thái thể chủng nấm He2, He3, He4, He5, He6 môi trường nuôi cấy cấp 1, cấp 2, cấp Kết nghiên cứu thu cho thấy: Cả chủng nấm Đầu khỉ sinh trưởng tốt mơi trường nhân giống cấp (PGA) Trong chủng He5 có thời gian sinh trưởng ngắn nhất, hệ sợi phát triển kín đĩa sau 19 ngày cấy giống tốc độ hệ sợi nhanh 2,3mm/ngày Hệ sợi chủng nấm Đầu khỉ sinh trưởng, phát triển tốt môi trường nhân giống cấp Hệ sợi phát triển kín chai nhanh chủng He2 sau 26 ngày He5 sau 28 ngày cấy giống Trên môi trường nuôi trồng hệ sợi chủng nấm Đầu khỉ bám sâu vào nguyên liệu hình thành mầm mống thể Trong chủng He4 cho kích thước thể lớn 85,71 x 99,29 (mm) viii nhiễm bệnh cao 40% Hai chủng He3 He4 có tỉ lệ nhiễm bệnh chiếm 20% Yếu tố ảnh hưởng tới suất thu hoạch thể ngồi bệnh nhiễm cịn có bịch hình thành lên mầm thể khơng phát triển thành thể hệ sợi chưa tích luỹ đủ dinh dưỡng, chăm sóc cịn chưa đúng, trùng phá hoại ruồi, chuột,… Kết từ bảng cho thấy chủng nấm Đầu khỉ có tỉ lệ khơng hình thành thể, He5, He2 chiếm tỉ lệ cao 100% 47 PHẦN V KẾT LUẬN 5.1 Kết luận Trên mơi trường nhân giống cấp (PGA) có bổ sung giá đỗ, hệ sợi chủng nấm Đầu khỉ sinh trưởng, phát triển tốt Trong chủng He5 có thời gian hệ sợi kín đĩa sau 19 ngày tốc độ hệ sợi (2,3mm/ngày) nhanh so với chủng lại Mật độ hệ sợi chủng He2, He6 dày, chủng He3 khơng có tỷ lệ nhiễm bệnh Trên môi trường nhân giống cấp (99% thóc hạt + 1%CaCO3), hệ sợi chủng nấm sinh trưởng, phát triển kín chai Trong chủng He2 He5 có thời gian hệ sợi ăn kín chai nhanh sau 26 ngày 28 ngày với mật độ sợi dày Chủng He3 He6 có đặc điểm hệ sợi bị xù có xu hướng hình thành mầm thể sớm chưa kín chai Cả chủng nấm không cho tỷ lệ nhiễm môi trường nuôi cấy cấp Trên môi trường ni trồng, giai đoạn hệ sợi chủng He4 có tốc độ sinh trưởng nhanh, mật độ hệ sợi cao so với chủng lại Trong giai đoạn hình thành thể, kích thước thể to He4 đạt 85,71x99,29 (mm), tua dài, thịt Quả thể nấm Đầu khỉ bị chuyển màu để ngày thu hái Tỷ lệ nhiễm bệnh thấp chủng He3 He6 33,33% 5.2 Kiến nghị Tiếp tục đánh giá sinh trưởng phát triển chủng nấm đầu khỉ môi trường nhân giống cấp 1, cấp môi trường nuôi trồng với yếu tố khác nhiệt độ, môi trường, thời điểm, mùa vụ nuôi trồng… khác để tìm điều kiện tối ưu cho phát triển chủng nấm Đầu khỉ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Lân Dũng (2003), Công nghệ trồng nấm tập 2, NXB Nông nghiệp Nguyễn Lân Dũng (2010), Kỹ thuật nuôi trồng nấm, NXB Nông nghiệp Trần Văn Mão, Trần Tuấn Kha (2014) Kỹ thuật trồng nấm ăn nấm dược liệu Nhà xuất Nông nghiệp Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Thị Sơn (2007) Kỹ thuật trồng, chế biến nấm ăn, nấm dược liệu Nhà xuất Nông nghiệp Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn ,Kỹ thuật trồng, chế biến nấm ăn nấm dược liệu (2010), NXB Nông nghiệp Khuất Hữu Trung cộng (2003) Kết bước đầu nghiên cứu đánh giá, tuyển chọn thử nghiệm nuôi trồng nấm Hầu thủ, Hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, Hà Nội, tr 136-140 Lê Xuân Thám (1999) Nấm công nghệ chuyển hóa mơi trường Nấm Hầu thủ Hericium erinaceus Nhà xuất Khoa học kỹ thuật Thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Duy Trình, Nguyễn Nam Giang, Trần Thu Hà (2018) Báo cáo kết điều tra tình hình sản xuất nấm ăn giới hóa số vùng sản xuất nấm chủ lực Việt Nam, 74tr Tài liệu tiếng Anh BoddyL, Wald P.2003 Creolophus cirrhatus, Hericium erinaceum and H Coralloides in England English Nature Research Reports Malinowska E, Krzyczkowski W, Lapienis G, Herold F Improved simultaneous production of mycelial biomass and polysaccharides by submerged culture of Hericium erinaceum: optimization using a central composite rotatable design (CCRD) J Ind Microbiol Biotechnol 2009;36(12):1513-27 Kuo M Hericiumerinaceus Retrieved from the Mushroom Expert Com 2003 Ho LH, Zulkifli NA, Tan TC 2020 – Edible mushroom: Nutritional properties, potential nutraceutical values, and its utilisation in food product development An Introduction to Mushroom 19–38 Wang Z, Luo D, Liang Z Structure of polysaccharides from the fruiting body of Hericium erinaceus Pers Carbohydrate polymers 2004;57(3):2417 49 Ryu SH, Hong SM, Khan Z, Lê SK et al 2021-Neurotrophic isoindolinones from the fruiting bodies of Hericium erinaceus Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 31, 127714 Sokół S, Golak-Siwulska I, Sobieralski K, Siwulski M et al 2015 – Biology, cultivation, and medicinal functions of the mushroom Hericium erinaceum Acta Mycologica 50, 1069 Nguyen Thi Bich Thuy, Ngo Xuân Nghien, Le Van Ve, Nguyen Thi Luyen, Tran Đong Anh & Nguyen Lam Hai (2018) Identification of optimal culture conditions for mycelial growth and Cultivation of Monkey Head Mushrooms (Hericium erinaceus (Bull.: fr.) Pers) Vietnam Journal of Agricultural Sciences 1(2): 117-126 Nguyen Thi Bich Thuy, Ngo Xuân Nghien, Le Van Ve, Nguyen Thi Luyen, Tran Đong Anh, Nguyen Thi Huyen Trang & Nguyen Thu Nhuong (2020) Improvement of Yield Performance and Mycelial Growth of Monkey Head Mushrooms (Hericium erinaceus (Bull.: fr.) Pers) by Optimizing Nutritional Conditions 19(3): 311-321 10 Blagodatski A, Yatsunskaya M, Mikhailova V, Tiasto V et al 2018 – Medicinal mushrooms as an attractive new source of natural compounds for future cancer therapy Oncotarget 9, 29259 11 Gonkhom D, Luangharn T, Raghoonundon B, Hyde KD and Thongklang N (2021 A review of the cultivation, health-enhancing applications, economic importance, industrial, and pharmaceutical applications Fungal Biotec 1(2), 118–130 12 Liang B, Guo Z, Xie F, Zhao A 2013 Antihyperglycemic and antihyperlipidemic activities of aqueous extract of Hericium erinaceus in experimental diabetic rats BMC Complementary and Alternative Medicine 13, 1–7 13 Miles PG, Chang ST 2004 – Mushrooms: cultivation, nutritional value, medicinal effect, and environmental impact CRC press 14 Jinn Chyi Wang Shu Hui Hu Jih Terng Wang Ker Shaw Chen Yi Chen Chia (2005) Hypoglycemic effect of extract of Hericium erinaceus Journal of the Science of Food and Agriculture 85 (4) : 641-646 15 The Science of Food and Agriculture 85 (4) : 641-646 16 Li G, Yu K, Li F, Xu K et al 2014 – Anticancer potential of Hericium erinaceus extracts against human gastrointestinal cancers Journal of Ethnopharmacology 153, 521–530 50 17 Jiang S, Liu S, Qin M 2019–Effects of extraction conditions on crude polysaccharidesan dantioxidant activities of the lion's mane medicinal mushroom, Hericium erinaceus (Agaricomycetes) International Journal of Medicinal Mushrooms 21, 1007–1018 18 Hassan, F.R.H (2007), Cultivation of the Monkey Head Mushroom (Hericium erinaceus) in Egypt Journal of Applied Sciences Research, 3(10), pp 1229-1233 19 Mau JL, Lin HC, Ma, JT, Song SF 2001 Nonvolatile taste components of several speciality mushrooms Food chemistry 73, 461-466 20 Suzuki C, Mizuno T 1997 – XI Cultivation of yamabushitake (Hericium erinaceum) 21 Sawant A 2021 Commercial Mushroom Cultivation Guide 2021 Agriculture Guruji 22 Royse, D.J (2014) A global perspective on the high five: Agaricus, Pleurotus, Lentinula, Auricularia and Flamulina International Conference on Mushroom Biology and Mushroom Products: 1-6 23 Chang ST, Miles PG Edible Mushrooms and Their Cultivation Delhi, India: CBS Publ; 1993 pp 8–40 24 Martínez, A.T., Speranza, M., Ruiz-Dueñas, F.J., Ferreira, P., Camarero, S., Guillén, F., Martinez, M.J., Gutierrez, A and J.C del Rio 2005 Biodegradation of lignocellulosics: microbial, chemical, and enzymatic aspects of the fungal attack of lignin International Microbiology, 8: 195–204 25 Syed Asim Shah Bacha, Shujaat Ali, Ye Li, Hamid ur Rehman, Saqib Farooq, Aamar Mushtaq, Safdar Ali Wahocho, Syed Muhammad Aslam Lion’s mane mushroom; new addition to food and natural bounty for human wellness: A review J Bio Env Sci 13(4), 396-402, October 2018 26 Siwulski, M., Sobieralski, K and M Wojnilowicz 2005 Influence of some growing substrate additives on the Hericium erinaceus (Bull Fr.) Pers yield Sodininkystė ir Daržininkystė 24 (3): 250–253 27 Ko, H.G., W.M.,Park basidiomata mushroom 1439–1444 Park, H.G., Park, S.H., Choi, C.W., Kim, S.H and 2005 Comparative study of mycelial growth and formation in seven different species of the edible genus Hericium Bioresource Technology, 96 (13): 51 28 Ehlers, S and W Schnitzler 2000 Studies on the growth of the basidomycete Hericium erinaceus (Bull.Ex.Fr.) Pers Champignon 415:147–150 29 Thongbai B, Rapior S, Hyde KD, et al Hericium erinaceus, an amazing medicinal mushroom Mycol Progress 2015; 14:91 30 Wang K, Bao L, Qi Q, et al Erinacerins C-L, isoindolin-1-ones with alphaglucosidase inhibitory activity from cultures of the medicinal mushroom Hericium erinaceus J Nat Prod 2015; 78(1);146–54 31 Shen JW, Yu HY, Ruan Y, et al Hericenones and erinacines: stimulators of nerve growth factor (NGF) biosynthesis in Hericium erinaceus Mycol Int J Fungal Biol 2010; 1:92–8 32 Mizuno T, Wasa T, Ito H, et al Antitumor-active polysaccharides isolated from the fruiting body of Hericium erinaceum, an edible and medicinal mushroom called Yamabushitake or Houtou Biosci Biotechnol Biochem 1992; 56:347–8 33 Moldavan MG, Gryganski AP, Kolotushkina OV, et al Neurotropic and trophic action of lion’s mane mushroom Hericium erinaceus (Bull.: Fr.) Pers (Aphyllophoromycetideae) extracts on nerve cells in vitro Int J Med Mushrooms 2007; 9:15–28 34 Gershenzon J, Dudareva N The function of terpene natural products in the natural world Nat Chem Biol 2007; 3(7):408–14 35 Chappell J The genetics and molecular genetics of terpene and sterol origami Curr Opin Plant Biol 2002; 5(2):151–7 36 Guillamon E, García-Lafuente A, Lozano M, et al Edible mushrooms: role in the prevention of cardiovascular diseases Fitoterapia 2010; 81(7):715–23 37 Debora Figlas,Ramiro Gonzalez Matute and Nestor Curvetto,(2007) Cultivation of Culinary-Medicinal Lion's Mane Mushroom Hericium erinaceus (Bull: Fr.) Pers (Aphyllophoromycetideae) on Substrate Containing Sunflower Seed Hulls International Journal of Medicinal Mushrooms 38 Rahman MA, Abdullah N, Aminudin N Inhibitory effect on in vitro LDL oxidation and HMG Co-A reductase activity of the liquid-liquid partitioned fractions of Hericium erinaceus (Bull.) persoon (lion’s mane mushrooms) BioMed Res Int.2014; 2014:828149 39 Lee KF, Chen JH, Teng CC, et al Protective effects of Hericium erinaceus mycelium and its isolated erinacine A against ischemia-injury- 52 induced neuronal cell death via the inhibition of iNOS/p38 MAPK and nitrotyrosine Int J Mol Sci 2014; 15(9):15073–89 40 Yaoita Y, Kakuda R, Machida K, et al Ceramide constituents from five mushrooms Chem Pharmaceut Bull 2002; 50(5):551–3 41 Mori K, Obara Y, Hirota M, et al Nerve growth factor-inducing activity of Hericium erinaceus in 1321N1 human astrocytoma cells Biol Pharm Bull 2008; 31:1727–32 42 Tzeng TT, Chen CC, Lee LY, et al Erinacine A-enriched Hericium erinaceus mycelium ameliorates Alzheimer’s disease-related pathologies in APPswe/PS1dE9 transgenic mice J Biomed Sci 2016; 23:49 43 Trovato A, Siracusa R, Di Paola R, et al Redox modulation of cellular stress response and lipoxin A4 expression by Hericium erinaceus in rat brain: relevance to Alzheimer’s disease pathogenesis Immun Ageing 2016; 13:23 44 Zhang J, An S, Hu W, et al The neuroprotective properties of Hericium erinaceus in glutamate-damaged differentiated PC12 cells and an Alzheimer’s disease mouse model Int J Mol Sci 2016; 17(11); 1810 45 Spelman, K., Sutherland, E., & Bagade, A (2017) Neurological Activity of Lion’s Mane (Hericium erinaceus) Journal of Restorative Medicine, 6(1), 19–26 53 PHỤ LỤC Thí nghiệm 1: Sinh trưởng hệ sợi chủng nấm Đầu khỉ môi trường nhân giống cấp BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NGAY FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V003 3NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 109200E-01 546000E-02 0.24 0.791 GIONG$ 4.03629 1.00907 44.91 0.000 * RESIDUAL 179746 224683E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.22696 301926 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 6NGAY FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V004 6NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 104533E-01 522666E-02 0.21 0.819 GIONG$ 1.75537 438843 17.26 0.001 * RESIDUAL 203347 254183E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.96917 140655 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9NGAY FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V005 9NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 110560 552800E-01 2.06 0.189 GIONG$ 2.20764 551910 20.55 0.000 * RESIDUAL 214840 268550E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.53304 180931 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 12NGAY FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V006 12NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 208173 104087 2.34 0.157 GIONG$ 1.17496 293740 6.61 0.012 * RESIDUAL 355560 444450E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.73869 124192 54 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V007 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 129053 645267E-01 1.15 0.365 GIONG$ 462093 115523 2.06 0.178 * RESIDUAL 448147 560184E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.03929 742352E-01 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAYKIN FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V008 NGAYKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= LN 239413 119707 1.66 0.249 GIONG$ 40.2640 10.0660 139.58 0.000 * RESIDUAL 576923 721154E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 41.0804 2.93431 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM MEANS FOR EFFECT LN LN NOS 3NGAY 6NGAY 9NGAY 12NGAY 3.79200 2.71200 2.40200 2.16400 3.76200 2.73600 2.43400 2.35800 3.82800 2.77600 2.59800 2.44600 SE(N= 5) 0.670347E-01 0.712998E-01 0.732871E-01 0.942815E-01 5%LSD 8DF 0.218593 0.232502 0.238982 0.307442 LN NOS 15NGAY NGAYKIN 2.27000 21.8000 2.45600 21.5320 2.47600 21.5320 SE(N= 5) 0.105847 0.120096 5%LSD 8DF 0.345158 0.391621 MEANS FOR EFFECT GIONG$ GIONG$ He2 He3 He4 He5 He6 NOS 3NGAY 6NGAY 4.07333 2.80667 2.39000 3.42000 2.37333 2.17667 4.68667 3.19000 2.60667 3.31667 3.01000 3.15000 3.47333 2.32667 2.06667 SE(N= 3) 0.865415E-01 0.920477E-01 0.946132E-01 0.121717 5%LSD 8DF GIONG$ 9NGAY 12NGAY 2.17667 2.36333 2.33333 2.79667 1.94333 0.282203 0.300158 0.308524 0.396906 NOS 15NGAY NGAYKIN 55 He2 He3 He4 He5 He6 3 3 2.17000 2.47000 2.47333 2.65333 2.23667 23.5533 20.5533 21.7800 19.1100 23.1100 SE(N= 3) 0.136648 0.155043 5%LSD 8DF 0.445597 0.505581 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN1THUY 24/ 6/22 10:29 :PAGE THI NGHIEM F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |LN |GIONG$ | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | 3NGAY 15 3.7940 0.54948 0.14989 4.0 0.7915 0.0000 6NGAY 15 2.7413 0.37504 0.15943 5.8 0.8193 0.0007 9NGAY 15 2.4780 0.42536 0.16387 6.6 0.1893 0.0004 12NGAY 15 2.3227 0.35241 0.21082 9.1 0.1574 0.0123 15NGAY 15 2.4007 0.27246 0.23668 9.9 0.3646 0.1777 NGAYKIN 15 21.621 1.7130 0.26854 1.2 0.2492 0.0000 Thí nghiệm 2: Sinh trưởng hệ sợi chủng nấm Đầu khỉ môi trường nhân giống cấp BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5NGAY FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V003 5NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.35525 677627 3.63 0.075 GIONG$ 1.45504 363760 1.95 0.195 * RESIDUAL 1.49168 186460 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.30197 307284 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 10NGAY FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V004 10NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 2.86729 1.43365 4.97 0.039 GIONG$ 4.89977 1.22494 4.25 0.039 * RESIDUAL 2.30551 288188 * TOTAL (CORRECTED) 14 10.0726 719469 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V005 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER 56 SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 958533E-01 479267E-01 0.40 0.688 GIONG$ 4.38003 1.09501 9.10 0.005 * RESIDUAL 963013 120377 * TOTAL (CORRECTED) 14 5.43889 388492 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 20NGAY FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V006 20NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 237214 118607 2.79 0.120 GIONG$ 6.44149 1.61037 37.83 0.000 * RESIDUAL 340586 425733E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.01929 501378 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 25NGAY FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V007 25NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 550933E-01 275467E-01 1.32 0.319 GIONG$ 2.84807 712017 34.24 0.000 * RESIDUAL 166373 207966E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.06953 219252 BALANCED ANOVA FOR VARIATE NGAYKIN FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM VARIATE V008 NGAYKIN LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 400000 200000 0.62 0.568 GIONG$ 424.900 106.225 326.85 0.000 * RESIDUAL 2.59997 324996 * TOTAL (CORRECTED) 14 427.900 30.5643 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5NGAY 10NGAY 15NGAY 20NGAY 1.15000 2.64600 3.03400 3.52200 1.01000 2.56800 2.99400 3.68000 1.70600 3.53200 3.18000 3.83000 SE(N= 5) 0.193111 0.240078 0.155162 0.922749E-01 5%LSD 8DF 0.629717 0.782871 0.505969 0.300899 NL NOS 25NGAY NGAYKIN 57 3.94000 31.8000 3.87600 31.6000 4.02400 32.0000 SE(N= 5) 0.644929E-01 0.254949 5%LSD 8DF 0.210305 0.831364 MEANS FOR EFFECT GIONG$ GIONG$ He2 He3 He4 He5 He6 NOS 5NGAY 10NGAY 15NGAY 1.78333 3.60000 3.89333 4.51667 1.06667 2.41667 3.02333 3.64333 0.866667 2.20000 2.19000 2.51000 1.39333 3.54333 3.10333 3.94000 1.33333 2.81667 3.13667 3.77667 20NGAY SE(N= 3) 0.249306 0.309940 0.200314 0.119126 5%LSD 8DF 0.812961 1.01068 0.653203 0.388459 GIONG$ He2 He3 He4 He5 He6 NOS 25NGAY NGAYKIN 4.27000 26.0000 3.98000 34.1667 3.10000 41.0000 4.25000 28.1667 4.13333 29.6667 SE(N= 3) 0.832599E-01 0.329138 5%LSD 8DF 0.271502 1.07329 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN2THUY2 24/ 6/22 10:32 :PAGE THI NGHIEM F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NL |GIONG$ | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | 5NGAY 15 1.2887 0.55433 0.43181 33.5 0.0748 0.1950 10NGAY 15 2.9153 0.84822 0.53683 18.4 0.0393 0.0393 15NGAY 15 3.0693 0.62329 0.34695 11.3 0.6877 0.0049 20NGAY 15 3.6773 0.70808 0.20633 5.6 0.1199 0.0001 25NGAY 15 3.9467 0.46824 0.14421 3.7 0.3191 0.0001 NGAYKIN 15 31.800 5.5285 0.57008 1.8 0.5679 0.0000 Thí nghiệm 3: Sinh trưởng phát triển chủng nấm Đầu khỉ môi trường nuôi trồng BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5NGAY FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE THI NGHIEM BICH VARIATE V003 5NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.23600 618000 2.61 0.133 GIONG$ 171493 428733E-01 0.18 0.940 * RESIDUAL 1.89647 237058 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.30396 235997 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 10NGAY FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE 58 tTHI NGHIEM BICH VARIATE V004 10NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 846573 423287 1.42 0.297 GIONG$ 2.54153 635383 2.13 0.168 * RESIDUAL 2.38843 298553 * TOTAL (CORRECTED) 14 5.77653 412610 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 15NGAY FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V005 15NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 759053 379527 1.31 0.323 GIONG$ 1.55844 389610 1.34 0.334 * RESIDUAL 2.31868 289835 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.63617 331155 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 20NGAY FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V006 20NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 1.09324 546620 3.59 0.077 GIONG$ 1.74223 435557 2.86 0.096 * RESIDUAL 1.21929 152412 * TOTAL (CORRECTED) 14 4.05476 289626 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 25NGAY FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V007 25NGAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 610680 305340 2.80 0.119 GIONG$ 1.01131 252827 2.32 0.144 * RESIDUAL 871453 108932 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.49344 178103 BALANCED ANOVA FOR VARIATE MOCMAM FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V008 MOCMAM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 21.4333 10.7167 3.19 0.095 GIONG$ 901.000 225.250 66.99 0.000 59 * RESIDUAL 26.9000 3.36250 * TOTAL (CORRECTED) 14 949.333 67.8095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 1/3BICH FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V009 1/3BICH LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 15.0453 7.52267 3.22 0.093 GIONG$ 45.9307 11.4827 4.92 0.027 * RESIDUAL 18.6613 2.33267 * TOTAL (CORRECTED) 14 79.6373 5.68838 BALANCED ANOVA FOR VARIATE KIN MAT FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH VARIATE V010 KIN MAT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= NL 693334E-01 346667E-01 0.32 0.737 GIONG$ 5.45600 1.36400 12.63 0.002 * RESIDUAL 864000 108000 * TOTAL (CORRECTED) 14 6.38933 456381 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE tTHI NGHIEM BICH MEANS FOR EFFECT NL NL NOS 5NGAY 10NGAY 15NGAY 20NGAY 0.374000 2.28200 2.34000 2.09600 0.914000 2.41800 2.64400 2.36800 1.03400 2.84000 2.89000 2.75400 SE(N= 5) 0.217742 0.244358 0.240763 0.174592 5%LSD 8DF 0.710035 0.796826 0.785105 0.569327 NL NOS 25NGAY MOCMAM 1/3BICH KIN MAT 2.14600 35.6000 26.2400 7.08000 2.28400 37.4000 25.4800 7.20000 2.62600 38.5000 23.8400 7.04000 SE(N= 5) 0.147602 0.820061 0.683032 0.146969 5%LSD 8DF 0.481315 2.67413 2.22730 0.479252 MEANS FOR EFFECT GIONG$ GIONG$ He2 He3 He4 He5 He6 NOS 5NGAY 10NGAY 0.653333 1.90000 2.21667 0.793333 2.91667 2.69333 0.960000 2.99667 3.10667 0.776667 2.51333 2.78333 0.686667 2.24000 2.32333 15NGAY 2.28000 2.53000 3.01000 2.14667 2.06333 20NGAY SE(N= 3) 0.281104 0.315464 0.310824 0.225397 5%LSD 8DF 0.916652 1.02870 1.01357 0.734997 60 GIONG$ He2 He3 He4 He5 He6 NOS 25NGAY 2.26333 43.1667 2.45000 28.3333 2.81000 36.6667 2.13667 48.3333 2.10000 29.3333 MOCMAM 1/3BICH KIN MAT 25.3333 7.40000 25.5333 6.80000 22.1333 6.26667 27.6000 8.06667 25.3333 7.00000 SE(N= 3) 0.190553 1.05869 0.881791 0.189737 5%LSD 8DF 0.621375 3.45229 2.87543 0.618712 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE TN3THUY2 24/ 6/22 10:37 :PAGE 10 tTHI NGHIEM BICH F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN STANDARD DEVIATION C OF V |NL |GIONG$ | (N= 15) SD/MEAN | | | NO BASED ON BASED ON % | | | OBS TOTAL SS RESID SS | | | 5NGAY 15 0.77400 0.48580 0.48689 62.9 0.1335 0.9400 10NGAY 15 2.5133 0.64235 0.54640 21.7 0.2974 0.1683 15NGAY 15 2.6247 0.57546 0.53836 20.5 0.3228 0.3336 20NGAY 15 2.4060 0.53817 0.39040 16.2 0.0767 0.0962 25NGAY 15 2.3520 0.42202 0.33005 14.0 0.1187 0.1442 MOCMAM 15 37.167 8.2347 1.8337 4.9 0.0952 0.0000 1/3BICH 15 25.187 2.3850 1.5273 6.1 0.0932 0.0272 KIN MAT 15 7.1067 0.67556 0.32863 4.6 0.7371 0.0018 61