Microsoft Word Hang Tóm tắt luận án ver 8 docx BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH HÀNH PHỐ HỒ CHÍ LÊ THỊ THÚY HẰNG LÊ THỊ THUÝ HẰNG KHẢO SÁT QUẦN THỂ TẾ BÀO LYMPHO T C[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH HÀNH PHỐ HỒ CHÍ - LÊ THỊ THÚY HẰNG LÊ THỊ THUÝ HẰNG KHẢO SÁT QUẦN THỂ TẾ BÀO LYMPHO T CD4 TREG VÀ TH17 Ở BỆNH NHÂN NHIỄM HBV MẠN Ngành: Bệnh truyền nhiễm bệnh nhiệt đới Mã số: 9720109 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC TP Hồ Chí Minh, năm 2023 Cơng trình hoàn thành tại: Đại học Y Dược Thành Phố Hồ Chí Minh Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Phạm Thị Lệ Hoa PGS TS Phạm Thị Lệ Hoa Phản biện 1: ……………………………………………… Phản biện ……………………………………………… Phản biện 3: ……………………………………………… Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp trường họp Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh Đại học Y Dợc vào hồi ngày tháng năm 2023 Có thể tìm hiểu Luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Thư viện Khoa học Tổng hợp TP HCM - Thư viện Đại học Y Dược TP HCM - Thư viện Khoa học Tổng hợp TP HC-ư viện Đại học Y Dược I GIỚI THIỆU LUẬN ÁN 1.1 Lý tính cần thiết nghiên cứu Vi rút viêm gan B (HBV) tác nhân gây tử vong hàng đầu bệnh gan giai đoạn cuối ung thư biểu mô tế bào gan giới Việc điều trị khỏi chưa khả thi DNA HBV lồng ghép vào DNA người Trên người nhiễm HBV mạn, trình tương tác HBV phản ứng miễn dịch ký chủ diễn thường xuyên Tế bào T điều hoà (T regular- Treg) T trợ giúp (T helper- Th)17 quần thể tế bào lympho T CD4+có vai trò đối ngược Treg ức chế phản ứng miễn dịch, trì hỗn thải trừ HBV Th17 kích thích trợ giúp phản ứng viêm nhằm thải trừ vi rút gây tổn thương tế bào gan, suy gan Gần đây, Treg tiết IL (interleukine)-17A ghi nhận vai trị kích thích miễn dịch FOXP3 - yếu tố phiên mã liên quan đến hình thành Treg, RORgt - yếu tố phiên mã Th17 liên quan đến hình thành sản xuất cytokine đặc trưng Th17 Các nghiên cứu Trung Quốc, Đài Loan tế bào Treg, Th17, yếu tố phiên mã FOXP3, RORgt tương quan yếu tố với tổn thương gan thực chưa thống kết Các vấn đề chưa nghiên cứu Việt Nam Câu hỏi nghiên cứu “Phản ứng tế bào Treg, Th17 mức độ biểu yếu tố phiên mã FOXP3 RORgt tế bào bệnh nhân Việt Nam nhiễm HBV mạn HBeAg dương (HBVe+), viêm gan B mạn HBeAg dương (VGMe+) viêm gan B mạn đợt bùng phát (BP) khác nào” 1.2 Mục tiêu nghiên cứu a Mô tả so sánh tỉ lệ tế bào Treg, Th17 tỉ số Treg/Th17 bệnh nhân nhiễm HBV mạn thuộc nhóm: nhiễm HBV mạn HBeAg dương, viêm gan B mạn HBeAg dương bùng phát b Mô tả so sánh mức độ biểu yếu tố phiên mã FOXP3 Treg, RORgt Th17 tỉ số FOXP3/RORgt bệnh nhân thuộc nhóm nhiễm HBV mạn c So sánh đặc điểm tế bào yếu tố phiên mã hai nhóm viêm gan B mạn đợt bùng phát nhẹ nặng d Phân tích tương quan tế bào yếu tố phiên mã với tình trạng HBeAg, HBV DNA, men gan chức gan nhóm nhiễm HBV mạn 1.3 Những đóng góp nghiên cứu mặt lý luận thực tiễn - Phản ứng tế bào Treg Th17 tăng tỷ lệ với mức độ tổn thương tế bào gan - Phát tế bào Treg tiết IL-17A tất nhóm nhiễm HBV mạn, tăng tỷ lệ với mức độ tổn thương gan - Chưa thấy tương quan tế bào với yếu tố phiên mã, cần thực lúc đếm tế bào yếu tố phiên mã - Phản ứng tế bào Treg dấu ấn chẩn đoán đợt viêm gan bùng phát nặng - Giữa tế bào yếu tố phiên mã nhóm nhiễm HBV mạn có tương quan thuận 1.4 Bố cục luận án Nội dung luận án gồm 115 trang: phần đặt vấn đề mục tiêu nghiên cứu (3 trang), chương tổng quan tài liệu (28 trang), chương đối tượng phương pháp nghiên cứu (18 trang), chương kết (34 trang), chương bàn luận (28 trang), phần kết luận (2 trang) kiến nghị (1 trang), danh mục cơng trình cơng bố (1 trang) Luận án có 18 bảng, 19 sơ đồ biểu đồ, hình, 134 tài liệu tham khảo với tài liệu nước 130 tài liệu nước II TỔNG QUAN TÀI LIỆU Nhiễm HBV mạn nguyên nhân hàng đầu gây bệnh gan giai đoạn cuối, HCC tử vong toàn giới Việt nam nằm vùng lưu hành cao với tỉ lệ mang HBsAg khoảng 10,5% dân số Nhiễm HBV mạn trải qua nhiều giai đoạn tương tác phản ứng miễn dịch thể HBV từ giai đoạn nhiễm HBV mạn HBeAg dương, viêm gan B mạn HBeAg dương, nhiễm HBV mạn HBeAg âm viêm gan B mạn HBeAg âm, đặc biệt đợt bùng phát viêm gan B mạn Tế bào T điều hoà (Treg) có vai trị ức chế miễn dịch đồng thời trì hỗn thải trừ HBV T giúp đỡ (Th)17 có vai trị kích thích viêm gây viêm gan, suy gan thúc đẩy thải trừ HBV FOXP3- yếu tố phiên mã Treg RORγt- yếu tố phiên mã Th17 tham gia vào q trình biệt hoá tế bào từ tế bào T CD4+ sơ khai thực chức tế bào Trong nhiễm HBV mạn, có nghiên cứu Treg, Th17, yếu tố phiên mã FOXP3, RORγt giai đoạn bệnh kết chưa đầy đủ thống III ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thiết kế nghiên cứu: tiến cứu mô tả hàng loạt ca 3.2 Dân số nghiên cứu: bệnh nhân nhiễm HBV mạn nhóm nhiễm HBV mạn HBeAg dương, viêm gan B mạn HBeAg dương bùng phát 3.3 Tiêu chuẩn chọn nhóm nghiên cứu Nhóm chứng (KM) - Không nhiễm HBV, ALT < 40 U/L - Không sốt, không nhiễm trùng hữu, không bệnh mạn tính Nhóm bệnh gồm nhóm: Nhóm nhiễm HBV mạn HBeAg dương (HBVe+) - HBsAg > tháng, HBeAg dương - ALT £ ULN liên tục > tháng (với ULN = 40 U/L), HBV DNA > log cps/mL - Mơ gan bình thường siêu âm xơ hoá gan mức tối thiểu (chỉ số APRI < 0,5) Nhóm viêm gan B mạn HBeAg dương (VGMe+) - HBsAg > tháng, HBeAg dương, HBV DNA > log cps/mL - ALT > đến ULN vòng tháng - Chưa điều trị đặc hiệu Nhóm viêm gan B mạn đợt bùng phát (BP) - HBsAg > tháng, HBeAg dương âm - ALT > ULN - HBV DNA > log cps/mL (> log cps/mL HBeAg âm) 3.4 Thời gian địa điểm Nghiên cứu từ tháng 1/2018 đến 3/2022 ĐHYD TP HCM Thu tuyển bệnh từ phòng khám viêm gan bệnh viện Đại học Y Dược khoa nhiễm A bệnh viện Bệnh Nhiệt đới 3.5 Các biến số nghiên cứu Biến số nền: - Tuổi, nhóm tuổi (£ 40 tuổi > 40 tuổi), giới - HBeAg, HBV DNA - AST, ALT - Bilirubin, INR, Albumin Biến số độc lập: - KM - HBVe+ - VGMe+ - BP (BP nhẹ BP nặng) • BP nhẹ: BP kèm bilirubin tồn phần < 85 µmol/L INR < 1,5 • BP nặng: BP kèm bilirubin tồn phần ³ 85 µmol/L INR ³ 1,5 Biến số phụ thuộc: - Tỉ lệ tế bào Treg, Th17 (%) - Tỉ lệ Treg tiết IL-17A (%) - Tỉ số Treg/Th17 - Mức độ biểu FOXP3 - Mức độ biểu RORγt - Tỉ số FOXP3/RORγt Định nghĩa biến số - Treg gồm tế bào Treg có biểu FOXP3 tiết IL-17A khơng tiết IL-17A - Treg tiết IL-17A: tế bào Treg biểu FOXP3 IL-17A - Th17: tế bào Th17 tiết IL-17A - Mức độ biểu FOXP3: mức độ biểu mRNA tương đối FOXP3 với gen chứng nội (GADPH) - Mức độ biểu RORgt: mức độ biểu mRNA tương đối RORgt với gen chứng nội (GADPH) 3.6 Kỹ thuật phân tích tế bào miễn dịch biểu yếu tố phiên mã Phương pháp đếm tế bào dòng chảy phát tế bào qua hệ thống dịng chảy thơng qua nhuộm kháng thể đặc hiệu với biểu tế bào Kháng thể với FOXP3 kháng thể với IL-17A dùng để nhận diện Treg Th17 máy đếm tế bào dòng chảy FACS Canto II Kỹ thuật RT-PCR với đoạn mồi thiết kế chuyên biệt, yếu tố phiên mã FOXP3 RORγt khuếch đại đo mức độ biểu 3.7 Thu thập phân tích số liệu Số liệu nhập phân tích phần mềm SPSS 20.0 So sánh biến số không liên tục phép kiểm Chi bình phương, biến số liên tục phép kiểm Mann-Whitney U Rank (đối với nhóm) hay Kruskal Wallis H (> nhóm) Tương quan biến liên tục so sánh phép kiểm Pearson đuôi với hệ số tương quan r Mơ hình hồi quy tuyến tính đa biến kiểm phép kiểm F với hệ số hồi quy B Mức ý nghĩa p < 0,05 3.8 Đạo đức nghiên cứu Nghiên cứu thông qua hội đồng đạo đức: Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh số 93/ĐHYD-HĐ bệnh viện Bệnh Nhiệt đới Thành phố Hồ Chí Minh số 25/HĐĐĐ IV KẾT QUẢ Trong 38 tháng, có 137 bệnh nhân viêm gan B mạn 22 người khỏe không nhiễm HBV đủ tiêu chuẩn, tự nguyện tham gia có mẫu phân tích thành cơng chọn vào nghiên cứu 4.1 Đặc điểm dân số nghiên cứu 4.1.1 Đặc điểm lúc vào nhóm nghiên cứu Bảng 3.1: Đặc điểm lúc vào nhóm nghiên cứu (n = 159) Đặc điểm KM (n = 22) Tuổi (năm)(n(%)) 15 (68) £ 40 Trung vị 31 (IQR) (23-43) Giới (n (%)) Nam 13 (59) HBeAg (n (%)) Dương HBVDNA (log10cps/mL) TC máu (K/uL) AST (U/L) ALT (U/L) Nhóm nghiên cứu HBVe+ VGMe+ (n = 52) (n = 24) BP (n = 61) p 42 (81) 29 (21-36) 17 (71) 27 (22-44) 31 (51) 40 (32-49) 0,009* 0,001 21 (40) 11 (46) 54 (89)