& ị i Sool O;WrlO; BẨNH GIA KHA NANG CHốNG ƯNG THU GAN CỦA CÁC HỢP CHAT TRONG CÂ¥ Diệp Hậ CHAO ỈPKyỉỉanttau atnarttâ) DỰA THEN MÔ PHỗNG KHẪ HẪHIỈ y V \ H / _ f A I Ỉ SVTH : NGUYEN QUANG Kffi&l NGẰNHỉ CÔNG NGHỆ SĨNH HỘC KHOA IW5-3017 GVHD I ThS, VỌ THỈ HUYỀN TRẠNG TP HỒ CHÍ MINH-NAM JOI? TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỀN TÁT THÀNH KHOA NƠNG NGHIỆP CƠNG NGHỆ CAO VÀ CĨNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TÓT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG CHÓNG UNG THƯ GAN CỦA CÁC HỢP CHẤT TRONG CÂY DIỆP HẠ CHÂU (Phyllanthus amarus) DựA TRÊN MÔ PHỎNG KHẢ NĂNG GẮN KÉT VÀ LÀM MẤT HOẠT TÍNH CÁC PROTEIN LIÊN QUAN SVTH : NGUYỄN QUANG KHẢI NGÀNH : CỒNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA : 2015-2017 GVHD : ThS vũ THỊ HUYỀN TRANG TRƯỜNG ĐH NGUYỄN TẤT THÀNH TRUNG TÂM THÕNG TIN-THƯVIỆN TP HỒ CHÍ MINH - NÃM 2017 ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG CHỐNG UNG THU GAN CỦA CÁC HỢP CHẤT TRONG CÂY DIỆP HẠ CHÂU (Phyllanthus amarus) DựA TRÊN MÔ PHỎNG KHẢ NĂNG GẤN KÉT VÀ LÀM MẤT HOẠT TÍNH CÁC PROTEIN LIÊN QUAN NGUYỄN QUANG KHẢI Khóa luận đệ trình để đáp ứng yêu cầu cấp bàng Kỹ sư ngành Công nghệ sinh học Giảng viên hướng dẫn ThS VŨ THỊ HUYỀN TRANG Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2017 CẢM ƠN Đê hoàn thành khóa luận tốt nghiệp này, xin cảm ơn cha mẹ tạo điều kiện động viên suốt trình học tập Xin chân thành gửi lời cảm ơn đến cô Th.s Vũ Thị Huyền Trang - Khoa Nông nghiệp công nghệ cao & Công nghệ sinh học - Trường Đại học Nguyễn Tắt Thành tận tình hướng dẫn tạo điều kiện cho tơi suốt q trình thực luận vãn Xin chân thành cảm ơn: Ban giám hiệu trường Đại học Nguyễn Tất Thành tạo điều kiện cho suốt thời gian học tập trường Ban giảng viên khoa Khoa Nông nghiệp công nghệ cao & Công nghệ sinh học Đại học Nguyễn Tất Thành giảng viên trực tiếp giảng dạy tòi suốt khóa học trường Tập thể lớp 15DSH.CLT1 A thân mến giúp suốt thời gian học tập Tp Hồ Chí Minh, tháng 08 năm 2017 NGUYEN QUANG KHAI ii TÓM TẮT Đề tài: “ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG CHỐNG UNG THU GAN CỦA CÁC HỢP CHÁT TRONG CÂY DIỆP HẠ CHÂU (Phyllanthus amarus) DựA mô PHỎNG KHẢ NĂNG GẮN KẾT VÀ LÀM MẤT HOẠT TÍNH CÁC PROTEIN LIÊN QUAN ” thực từ tháng 01/2017 đến tháng 06/2017 Khoa Nông nghiệp công nghệ cao & Công nghệ sinh học - Trường Đại học Nguyễn Tất Thảnh ưèn hợp chất sinh học có Diệp hạ châu (Phyllanthus amariis) vả protein gây bệnh ung thư gan với mục tiêu phát hợp chất sinh học ưong cả} Diệp hạ châu có khả làm phối tử (ligand) để gắn kết (dock) làm hoạt tính gảy bệnh ung thư gan protein liên quan Đe tài gồm năm nội dung: - Thu thập xử lý liệu cấu trúc 3D hợp chất Diệp hạ châu - Thu thập xử lý liệu cấu trúc 3D protein gây bệnh (protein target/receptor) gây bệnh ung thư gan - Thực mô gắn kết cứng (Rigid Docking) - Phân tích hình thái hoạt tính dược (Pharmacophore) mơ phịng gắn kết cứng - Thực mô gắn kết linh động (Flexible Docking) Kết đạt được: Mô gắn kết cứng (Rigid Docking) protein với ligand (phối từ) cho thấy hợp chất astragalin, epigallocatechin gallate, isoquercitrin quercitrin cho lực tương tác tốt (< -10,0 kcal/mol) với protein tham gia Giải thích hình thái hoạt tính dược (Pharmacophore) mơ gắn kết cứng dựa tương tác protein-phối tử chương trình Ligandscout xác định số acid amin linh hoạt để làm flexible docking cho protein Sau mơ phịng gắn kết linh động (Flexible Docking) phối tử protein mục tiêu chương trình cmd cho thấy kết gắn kết mạnh gắn kết cứng từ 0,1 kcal/mol đến 0,5 kcal/mol hợp chất epigallocatechin gallate quercitrin iii MỤC LỤC Trang CẢM ƠN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH SÁCH VIẾT TẮT vii DANH SÁCH CÁC BẢNG viii DANH SÁCH CÁC HÌNH ix MỎ ĐẦU 1 Tính cấp thiết đề tài Mục tiêu Chương TỔNG QUAN 1.1 Giới thiệu chung Diệp hạ châu 1.1.1 Tên khoa học vị ưí Diệp hạ châu hệ thống phân loại 1.1.2 Đặc điểm hình thái 1.1.3 Phân bố, sinh học sinh thái 1.1.4 Giá trị y học 1.2 Tổng quan ung thư gan 1.2.1 Đại cương ung thư gan 1.2.2 Các giai đoạn ung thư gan .6 1.2.3 Nguyên nhân ung thư gan 1.2.4 Các protein lên quan đến ung thư gan 1.3 Thiết kế thuốc (Drug design) 11 1.3.1 Khái niệm 11 1.3.2 Nguyên tắc 11 1.3.3 Phương pháp 11 1.3.4 Gắn kết (Docking) 11 1.3.4.1 Gắn kết cứng (Rigid Docking) 11 iv 1.3.4.2 Gắn kết linh động (Flexible Docking) 12 1.4 Các cơng trình nghiên cứu khoa học có liên quan 13 1.4.1 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 13 1.4.2 Tình hình nghiên cứu nước 14 Chương 15 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 15 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 15 2.2 Nội dung nghiên cứu 15 2.3 Phương pháp nghiên cứu 15 2.3.1 Phần mềm máy tính 15 2.3.2 Thu thập xử lý liệu hợp chất phối tử (ligand) có Diệp hạ châu 17 2.3.3 Thu thập xử lý liệu phân tử protein (receptor) liên quan bệnh ung thư gan 17 2.3.4 Thực gắn kết cứng (Rigid Docking) 18 2.3.5 Phân tích Pharmacophore .19 2.3.6 Thực mơ phịng gắn kết linh động (Flexible Docking) 21 Chương 24 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 24 3.1 Bộ liệu hợp chất Diệp hạ châu 24 3.1.1 Thu thập liệu ligand có Diệp hạ châu 24 3.1.2 Xử lý liệu ligand có Diệp hạ châu 24 3.2 Bộ liệu protein có liên quan đến bệnh ung thư gan 26 3.3 Kết lực tương tác (Affinity) sau thực mô gắn kết cứng (rigid docking) 29 3.4 Kết phân tích Pharmacophore gắn kết cứng (Rigid Docking) 33 3.5 Kết lực tương tác (Affinity) sau thực mô gắn kết linh động (Flexible Docking) 39 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 43 V PHỤ LỤC Phụ lục 1: Hình cấu trúc 2D cùa 46 đồng phân từ 17 hợp chất Diệp hạ châu chọn lọc Phụ lục 2: Tọa độ hộp Grid Phụ lục 3: Kết lượng tương tác 46 đồng phân 17 hợp chất thụ thê protein tham gia Grid box vi DANH SÁCH CÁC CHŨ VIÉT TẤT ADN Acid Deoxyribonucleic AF Aflatoxin AFP Alpha foetoprotein DCP Des-y-Carboxy Prothrombin HBV Hepatitis B virus HCC Hepatocellular Carcinoma HCV Hepatitis c virus LCA Lens culinaris agglutinin PDB Protein data bank UTG ưng thư gan WHO World Health Organization - Tổ chức y tế giới YHCT Y học cổ truyền YHHĐ Y học đại vii DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 3.1: Các hợp chất thu từ Diệp hạ châu thông tin liên quan 25 Bảng 3.2: Các thông tin thu từ trang PDB protein dược khão sát 27 Bảng 3.3: Hình cấu trúc 3D protein khảo sát 27 Bảng 3.4: Ái lực gắn kết linh động acid amin với phối tử tương ứng 40 viii PHỤ LỤC Phụ lục 1: Hình câu trúc 2D 46 đồng phân từ 17 hựp chất Diệp hạ châu • chọn • lọc • acid ascorbic-14438802 acid ellagic-38“2446 epigallocatechin gallate-3870412 epigallocatechin gallate-21992198 gallocatechin-3870338 gallocatechin-3 870337 isoquercitrin-4096845 hypophyllanthin-15778313 isoquercitrin-86865005 isoquercitrin-86865004 Phụ lục 2: Tọa độ hộp Grid PDB ID Grid box Tọa độ X Tọa độ Y Tọa độ z 11.197 10.160 15.358 20.941 21.550 14.271 9.600 8.539 22.451 12.924 2.000 3.132 -4.958 7.470 - 8.625 - 15.322 - 9.000 -2.916 - 20.000 - 23.924 - 12.594 - 19.204 - 16.804 -31.765 - 66.866 -48.817 - 66.989 -46.312 - 48.433 -51.045 -41.833 -60.014 -61.017 11.000 16.371 2.502 0.138 - 0.640 - 1.198 10.415 10.639 10.639 12.304 17.860 27.482 40.146 44.372 45.345 36.513 28.846 19359 21.453 60.994 31.731 32.000 18.835 31.927 - 3.696 - 19.883 - 10.000 - 10.028 -7.944 - 2.470 - 24.432 -24.134 - 15.376 - 15.376 25.996 36.048 15.983 23.687 3.941 8.595 -3.415 21.266 20.381 12.000 5.161 2DVW 4IS8 4PLD 4PLE 5L11 10 (CPS) 10 (EPH) CPS) ■ (CPS) (CPS) (RJW) 9.727 9.432 16.000 14.972 24.507 30.818 28.060 2.904 18.000 15.000 17.000 7.887 16.096 9.976 - 0.485 4.154 - 14.405 - 16.990 5.667 - 18.301 - 4.350 - 9.299 - 8.801 - 17.291 - 8.803 24.000 49.109 5SYZ (71W) 13.913 9.770 24.566 5.266 14.871 11.454 11.000 22.888 3.531 42.252 23.747 33.669 25.583 25.804 -0.614 - 18.000 - 17.190 - 13.794 20.368 7.780 14.779 17.778 19.456 12.501 2.980 6.329 19.224 Ốx bx bx bx sb bx 90 so bx po k> ■ S’ SO 90 b so po 90 MD bo S’ ‘so S’ MS S’ 90 S’ bo po 90 S’ bo S’ 90 MS MS S’ sb © © © lu sb © S’ © S’ © po SO • © k) © S’ S’ S’ po bo 90 bo SO 90 SO po so po so po LU Ị- ỳ> xb sb & so bx so bo 90 MX 9C » p íu 90 P 90 kj t p © 90 b 90 Ịk 90 X© Õ> Ị d • bx ki • Cx 90 LU po po po so sb © S’ o po SO »■— P b» © sb 90 S’ 90 S’ óc 90 se 4» & 4* óc b kl P bo » © 4» -J éo © *4 Mx po k> p S’ 90 S’ so S’ © © p b» © © kỉ © k> © bx bs © bs S’ xb • I bx so bo po Ox â i ô !a u astragalin astragalin astragalin astragalin catechin catechin catechin epigallocatechin so bs gallate Epigallocatechin © © — 90 o © bt ,-b X© 90 b Í0 b» 9C Lư b c 4- ■b 90 po ■ — é c © 90 b 90 po tu k) 3= © acid ursolic © po so Ìa Ịb c S â b *4 ã 90 OS S o óc acid gallic S’ © pc X LA bo k> 90 90 b ỳ* 90 b b Ạ' bx px bx 4- b acid ellagic S’ © S’ bx —• (Ỉ0 bx s o s bx • po so b bx — acid ascorbic k) xb bx bx po bx b k) 'o MX © u> tu © bx ộs bo so *4 io S’ © S’ bx jb bs s S’ S’ s bo S’ bo © bs 1 © © S’ sb S’ bx 09 90 © so SO po xo 90 po gallate Epigallocatcchin gallate Epigallocatcchin gallate © © © 90 po bs po bx oo bx 90 90 S’ © S’ S’ 1 MS Epigallocatechin © o i 4| b po k> 1 SO px bo I P' bo ô â ế Õ gallate gallocatechin gallocatechin hypophyllanthin isoqucrcitrin 95 po isoqucrcitrin b S’ isoquercitrin 4- óc b *4 © © Ơ xb b bx » 4» 4- 4i so b © 90 © 90 © S’ -J i> ■b S’ bo S’ Ờ» 4a b 4> I © © © © >_ © © isoquercitrin Phụ lục 3: Kết lưọng tương tác 46 đồng phân 17 hựp chất thụ thể protein tham gia tùng Grid box bo ẻs 90 Ị' òo G rid S’ k> G rid S’ k> po S’ k> 90 © G rid S’ k> óc G rid ? 90 bs P LU G rid G rid s Grids G rid ờ> òo G rid G rid 10 po bs G rid po bs px G rid G rid X© A' MS G rid G rid ỜI Ị' LU 90 PDBID 2DVW 4IS8 4PLD ổx k> ỳ" Ị' Ịx ■fe Ổx 4X M» ù> 5- ?■ d 4PLE 5L11 Grid -6.0 -9.0 -6.5 -7.8 -8.3 -9.5 -8.7 -8.8 -9.3 -9.5 -9.4 -8.7 -8.3 -10.0 -9.1 -8.6 -9.9 -9.5 -7.1 -8.3 -11.8 Grid -6.0 -9.1 -6.4 -7.9 -8.7 -9.5 -9.8 -9.7 -9.2 -9.5 -9.3 -10.1 -9.5 -9.1 -9.7 -8.7 -9.9 -9.5 -7.0 -8.4 -11.8 Grid -6.0 -9.7 -6.5 -8.3 -8.7 -9.5 -9.8 -9.8 -9.2 -9.5 -9.3 -7.8 -7.9 -8.6 -8.5 -7.8 -9.9 -9.5 -7.0 -8.3 -11.8 -8.4 -11.2 Grid -6.0 -8.2 -6.4 -8.7 -8.8 -9.5 -9.6 -9.5 -9.3 -9.2 -9.4 -10.3 -9.7 -9.2 -10.1 -9.3 -9.4 -9.6 -7.0 -8.9 -9.6 -9.1 -9.6 Grid -6.0 -8.2 -6.1 -8.3 -8.6 -9.1 -9.6 -9.5 -9.1 -7.4 -8.3 -10.4 -9.1 -8.9 -9.0 -9.3 -7.5 -9.5 -7.0 -8.9 -9.7 -9.0 -9.6 Grid? -6.0 -9.1 -6.5 -7.8 -8.3 -9.5 -9.3 -9.3 -9.2 -9.5 -9.4 -8.6 -8.8 -9.3 -8.0 -8.5 -9.9 -9.5 -6.8 -8.4 -11.8 -8.7 -11.2 Grid -6.0 -8.2 -6.5 -7.5 -8.3 -8.6 -9.6 -9.7 -9.3 -9.2 -9.4 -8.5 -8.8 -9.3 -9.1 -8.4 -9.9 -9.1 -6.8 •8.4 •9 -8.7 -9.3 Grid -6.0 -8.4 -6.4 -7.8 -8.0 -8.7 -8.4 -8.8 -7.8 -7.6 -7.8 -8.7 -8.3 -10.0 -8.4 -8.6 -8.0 -7.6 -7.0 -8.3 -9.1 -8.5 -9.6 Grid 10 -5.9 -7.6 -6.1 -7.5 -7.5 -7.8 -8.1 -8.0 -7.7 -7.5 -7.4 -8.6 -8.3 -9.5 -8.6 -8.4 -8.0 -7.6 -6.8 -7.7 -8.5 -8.3 -8.5 Grid -5.1 -7.7 -5.2 -8.9 -8.9 -9.0 -8.7 -8.7 -7.7 -7.5 -7.6 -9.4 -9.3 -9.1 -9.7 -9.1 -7.8 -7.7 -6.8 -9.2 -10.2 -9.1 -10.3 Grid -5.6 -6.9 -5.3 -8.6 -9.0 -9.0 -8.8 -8.7 -7.4 -7.5 -7.3 -8.4 -8.3 -8.6 -9.1 -8.3 -7.8 -7.4 -6.9 -9.0 -8.6 -9.0 -8.5 Grid -4.5 -6.9 -4.9 -8.0 -7.8 -8.1 -7.9 -7.9 -7.3 -7.1 -7.3 -8.3 -8.1 -8.0 -8.2 -8.0 -7.1 -7.7 -6.6 -7.8 -8 -7.6 -8.3 Grid -6.3 -8.6 -6.3 -9.0 -9.5 -9.2 -8.8 -8.8 -9.4 -9.7 -9.6 -9.4 -9.3 -10.7 -9.6 -9.2 -10.1 -9.1 -6.9 -9.1 -10 -9.1 ■10.3 Grid -6.3 -9.0 -6.3 -8.5 -10.4 -10.7 -10.0 -9.9 -9.4 -9.8 -9.6 -11.1 -11.5 -10.7 -11.2 -9.6 -10.1 -9.4 -8 -10 -11.6 -11.6 -11.2 Grid -6.4 -9.0 -6.3 -8.8 -10.5 -10.7 -10.0 -9.9 -9.4 -9.7 -9.6 -11.1 -11.5 -10.7 •11.2 -9.6 -10.1 -9.3 -8.3 -100 -11.6 -11.6 -11.2 Grid? -5.5 -8.6 -6.3 -9.0 -9.1 -8.8 -8.9 -8.9 -8.9 -8.3 -8.4 -7.8 •8,2 •10 •8 -7.5 -8.2 •8.4 •7.2 -8 -9.5 -10.9 -10.5 Grid -5.1 -7.9 -5.6 -8.7 -9.0 -9.0 -8.7 -8.8 -7.9 -8.6 -7.9 -9.3 •9.2 •9.1 •9.6 $ ' ■8.7 •8 -6 -9.1 -10.2 -9.2 -10.3 Grid -5.1 -7.8 -5.6 -8.0 -8.8 -8.4 -8.5 -8.7 -8.7 -8.6 -8.9 -8.3 -8.3 -8.4 -8.5 -8 •8.2 •8.9 -6.8 -8.9 -8.3 -8.6 -8.7 Grid -5.8 -8.3 -6.8 -7.6 -10.6 -9.2 -10.7 -9.6 -9.0 -9.6 -8.9 -11.6 -11.1 -7.9 -9.3 -9.6 ■9.4 -8.7 ■6.5 -10.8 -9.3 -10.4 -9.4 -8.7 -11.2 -11.2 po DO Ml po po bx po lu po bx Ml bo bx bo A' bo bx bo px bo 1 bx bo ện kaempferol po bx po po Ạ' bo niranthin Cx Ị* Ml ổx CX Ml bx nor-securinine Ml Ml Ml X© ộ» ỳ> nor-securinine p p ro po po bx p p bx p bx po X© -tl CX P' phyllanthỉn X© X© po 'o po ƠO p o xb N) X© to ộc ộo quercetin X© X© 4k po p p quercetin p o X© o oo po Xâ p ã iu o oo Grid bo Ml **© X© Ml X© Grid Ml bx Grid bx Grids Ổx io Grid ẻx io Grid Ạ' òc bo o iu Ị0 ỔX Ơ Grid ộo Ml o Grid ộo 4k X© Grid ộc 4k isoqucrcitnn $ Grid Grid X© Grid Ị> B- H 00 Ml bo securinine ý> sccurinme to Ĩc •zzajrmuK b« ổx Ạ $ecurinine p p 4k 4k •b 4- 4- 4- p 4k b 4» bx • Grids -9.5 -8.4 -6.9 -5.8 -5.9 -7.0 -8.7 -8.6 -8.8 -9.3 -9.2 -9.0 -9.3 -9.0 -8.8 -9.5 -9.2 -10.1 -9.3 -6.3 -6.3 -6.2 -6.0 Grid -10.2 -8.5 -7.5 -6.0 -5.9 -6.8 -9.3 -8.6 -8.8 -9.9 -9.9 -10.6 -10.0 -10.5 -10.5 -9.5 -10.2 -9.9 -10.3 -6.2 -6.3 -6.3 -6.1 Grid -10.2 -8.5 -7.5 -6.0 -5.9 -6.7 -9.3 -8.1 -8.5 -9.8 -9.9 -10.4 -10.0 -10.4 -10.4 -9.6 -10.2 -10.1 -10.2 -6.1 -6.1 -6.3 -6.2 Grid -9.0 -8.1 -6.8 -5.9 -5.7 -6.3 -8.5 -7.7 -8.0 -9.1 -9.5 -9.1 -9.8 -9.1 -9.0 -9.0 -10.1 -9.8 -9.1 -6.1 -5.9 -5.8 -6.1 Grid -10.2 -8.4 -7.0 -6.0 -5.9 -6.4 -9.3 -8.1 -8.5 -9.9 -9.9 -10.6 -9.9 -10.5 -10.5 -9.3 -10.2 -10.0 -10.3 -6.2 -6.0 •6,3 -6.1 Grid 10 -8.3 -7.1 -6.5 -5.7 -5.7 -6.7 -7.4 -7.2 -6.7 -8.4 -8.6 -8.1 -8.6 -8.0 -8.0 -8.2 -8.1 -8.2 -8.1 -5.5 •5.7 -6.0 -5.0 Grid -7.S -9.4 -6.3 -7.3 -7.3 -5.8 -9.9 -8.4 -10.4 -7.8 -8.1 -7.8 -9.7 -7.9 -7.8 -7.9 -7.7 -7.7 -7.6 -7.7 -7.7 •7.7 -7.7 Grid -7.3 -9.4 -6.1 -7.3 -7.3 -5.6 -9.9 -8.4 -10.4 -7.8 -8.2 -7.6 -9.7 -7.7 -7.6 -7.8 -7.4 -8.2 -7.5 -7.7 -7.7 -7.8 -7.7 Grid -9.2 -9.4 -8.1 -7.1 -6.9 -8.3 -9.9 -8.5 -10.3 -8.4 -8.8 -8.6 -9.6 -8.5 -8.8 -10.3 -9.3 -9.4 -8.5 -7.7 -7.3 -7.5 -7.3 Grid -10.2 -9.4 -8.2 -7.4 -7.4 -9.1 -9.6 -9.3 -10.4 -10.2 -10.0 -10.2 -10.1 -10.4 -10.4 -10.6 -10.1 -10.2 -10.2 -8.0 -7.4 -7.7 -7.7 Grid -8.4 -9.4 -7.2 -6.5 -6.9 -6.7 -9.6 -8.8 -8.8 -8.4 -8.9 -8.4 -10.1 -8.5 -8.6 -12.1 -9.3 -9.0 -8.4 -7.5 -7.4 •7.1 -6.9 Grid -8.7 -9.2 -6.3 -7.1 -6.9 -7.3 -9.7 -8.8 -8.8 -8.9 -9.1 -8.8 -9.2 -9.2 -8.4 -12.0 -9.3 -10.1 -8.8 -7.3 -7.4 -7.4 -7.3 Grid -8.4 -9.3 -7.3 -7.0 -6.9 -6.8 -9.7 -8.8 -8.4 -9.3 -8.7 -10.1 -8.6 -8.6 -12.0 -9.3 -10.1 -8.6 -7.5 ■7.4 -7.4 -7.3 Grid -8.4 -9.4 -7.1 -7.1 -6.9 -6.3 -9.7 -8.8 -8.8 -7.8 -9.0 -8.8 -10.1 -8.7 -8.6 -12.1 -9.3 -10.0 -8.6 w? -7.5 -7.4 -7.3 Grids -9.1 -9.4 -7.2 -7.1 -6.8 -6.8 -9.7 -8.2 -8.8 -8.9 -9.6 -8.9 -9.3 -9.0 -8 -9.4 -9.0 -9 •9.1 •7.1 -7.1 -7.4 -7.3 Grid -9.1 -7.5 -6.6 -6.1 -5.6 -6.6 -7.8 -8.2 -8.2 -8.9 -9.3 -8.9 -9.0 -9 -8 Ọ -9 -9.1 -6.0 -6.0 -6.4 -6.3 Grid -8.6 -9.4 -7.2 -7.1 -6.9 -7.0 -9.7 -8.8 -8.8 -8.9 ■9.1 -8.6 •10 -9.2 -RO •12 •9 -8 -8 -7.5 -7.5 -7.4 -7.3 Grid -8.6 -9.4 -6.6 -7.1 -6.9 -6.8 -9.7 -8.4 -8.8 -8.8 -9.1 -8.7 -9.3 -9.2 -8.0 -9.0 -7.9 -8.5 -8.7 -7.4 ■7.1 -7.4 -7.3 Grid -8.6 -8.3 -6.4 -7.1 -6.8 -7.3 -8.5 -8.3 -8.7 -8.4 -8.7 -8.5 -8.9 -8.4 -8.4 -9.6 -9.0 -8.7 -8.8 -6.9 -7.1 -7.4 -7.3 4IS8 4PLD _ 4PLE 5L11 Grid 10 -8.3 -8.1 -7.0 -6.1 -6.0 -6.7 -8.4 -7.2 -7.5 -8.1 -7.8 -7.8 -8.0 -7.6 -7.9 -8.1 -7.9 -7.8 -7.8 -6.4 -6.0 -5.9 -6.1 Grid -9.0 -8.1 -7.0 -6.9 -7.0 -6.7 -8.0 -6.9 -7.6 -9.0 -8.9 -8.9 -9.1 -89 -9.0 -8.4 -9.1 -8.8 -9.0 -7.3 -7.3 -7.2 -7.6 Grid -8.9 -7.7 -7.0 -5.8 -5.6 -7.2 -7.8 -7.2 -7.3 -8.5 -8.5 -8.8 -8.8 -8.9 -8.1 -8.8 -8.5 -8.7 -8.5 -5.6 -5.8 -5.9 -5.8 Grid -7.8 -6.7 -6.5 -5.3 -5.2 -7.4 -7.1 -6.6 -6.7 -7.2 -8.2 -7.9 -7.8 -7.5 -7.8 -8.1 -7.8 -7.8 -8.0 -5.7 -5.7 -5.6 -5.5 Grid -9.1 -9.9 -6.9 -7.3 -7.0 -6.7 -10.4 -9.2 -9.1 -9.8 -10.9 -8.9 -10.4 -9.1 -9.6 -8.8 -9.1 -8.8 -10.2 -7.6 -7.5 -7 •7.0 Grids -U.S -9.9 -7.4 -7.3 -7.0 -9.8 -10.4 -9.2 -9.0 -10.7 -11.2 -10.5 -11.2 -9.4 -10.1 -11.6 -11.5 -11.8 -10.8 -7.6 -7.5 -7.3 -7.6 Grid -11.6 -9.9 -7.4 -7.3 -7.0 -9.8 -10.4 -9.2 -9.1 -10.7 -11.3 -10.6 -11.3 -9.4 -10.1 -11.7 -11.6 -11.9 -10.8 -7.0 •7.5 -7.3 -7.6 Grid -11.3 -8.0 -6.6 -6.1 -6.8 -8.4 -8.5 -8.1 -8.3 -8.9 -10.7 -9.0 -10.1 -8.9 -7.9 -9.8 -9.8 -9.8 -8.8 -6.6 -7.1 -6.6 -6.6 Grid -9.0 -8.6 -6.9 -6.9 -7.0 -6.7 -8.8 -9.2 -8.5 -9.0 -8.9 -8.9 -9.1 -9.0 -9.0 -8.4 -9.0 -8.8 -9.0 -7.6 -7.5 -7.4 •7.6 Grid -8.6 -8.3 -6.5 -6.9 -7.0 -7.0 -8.4 -8.5 -7.8 -8.9 -8.6 -8.8 -8.4 -8.5 -8.6 -8.1 -8.4 -7.9 -8.9 -7.6 -7.4 -7 -7.6 Grid -10.6 -8.9 -7.4 -6.7 -6.6 -7.0 -9.6 -8.9 -9.2 -7.9 -9.3 -10.5 -10.0 -10.7 -9.5 -9.8 -10.2 -9.1 -7.8 -6.8 -6.9 -6.9 -7.0 Grid -9.2 -7.9 -7.7 -6.6 -6.5 -7.1 -8.0 -7.7 -7.5 -9.1 -9.3 -8.9 -9.2 -8.9 -9.0 -8.7 -9.1 -9.1 -9.2 -7.3 -o s -7.0 -6.7 Grid -9.2 -8.4 -6.6 -5.7 -6.2 -6.7 -8.8 -7.7 -8.0 -8.5 -9.4 -8.6 -9.2 -8.9 -9.0 -8.7 -8.5 -9.6 -8.5 -0 -6 -6.3 -5.7 Grid -10.6 -8.9 -6.8 -6.7 -6.6 -6.7 -9.6 -8.9 -9.2 -7.9 -9.4 -10.5 -10.1 -10.7 -9.5 -9.7 -10.3 -9.1 77 •0-$ -6 -6 -7.0 Grids -9.2 -8.4 -7.4 -6.7 -6.6 -7.5 -8.8 -8.3 -8.7 -8.5 -9.5 -10.5 -9.3 • 10.7 -9.5 -9.7 -8.9 -9.4 -8 -0.8 -6.9 -6.9 -7.1 Grid -10.6 -8.9 -6.9 -6.7 -6.6 -6.4 -9.6 -8.9 -9.2 -7.9 -9.3 -10.5 ■ 10 • 10 -U -10 I -9.0 -7.8 -6.8 •6.9 -6.9 -7.0 Grid -10.6 -8.9 -7.1 -6.7 -6.6 -6.7 -9.6 -8.9 -9.1 -8.0 -9.3 -105 -10.1 •10.7 -U -10.1 -9 -7.9 -6.8 -7.0 -6.9 •7.0 Grid -11.0 -9.5 -7.4 ■7.2 -7.1 ■7.2 -9.8 ■9.7 -9.0 -9.8 ■11.5 -10.8 -11.6 -10.8 -12.0 -9.5 ■ 109 -109 -9.9 -7.5 •7.7 -7.7 ■7.5 Grid -9.4 -9.2 ■7.2 ■7.2 -7.0 -6.6 -8.5 -7.6 -7.5 -9.1 -9.6 -8.8 -9.2 -8.8 -8.9 -8.6 ■9.5 -9.2 -8.9 -7.2 -7.7 -7.4 -7.4 5SYZ Grid -9.3 -9.5 -7.3 -7.1 -6.9 -6.5 -9.1 -8.2 -8.9 -8.9 -9.4 -8.8 -8.7 -8.8 -8.8 -8.8 -9.5 -9.2 -8.8 -7.5 -7.3 -7.6 -7.2 Grid -9.3 -9.4 -7.5 -7.2 -7.1 -7.6 -9.8 -9.7 -9.1 -9.8 -11.5 -8.7 -11.6 -8.9 -9.4 -9.5 -10.5 -10.3 -9.7 -7.5 -7.7 -7.7 -7.6 Grids -10.6 -9.5 -7.5 -7.2 -7.1 -7.6 -9.8 -9.7 -9.1 -9.9 -11.5 -10.1 -11.5 -10.4 -12.0 -9.6 -10.9 -10.9 -9.8 -7.5 -7.7 -7.7 -7.6 Ỷ kiến giảng viên hướng dẫn Tp Hổ Chí Minh, ngày 12 tháng 08 năm 2017 Người thực Nguyễn Quang Khải