Nghiên cứu đặc điểm hình thái và di truyền của loài ếch cây đầu to polypedates megacephalus hallowell, 1861 ở khu vực đảo hòn mê và ven biển ở huyện tĩnh gia, tỉnh thanh hóa

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO UBND TỈNH THANH HÓA TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC MAI THỊ ĐỨC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ DI TRUYỀN CỦA LỒI ẾCH CÂY ĐẦU TO Polypedates megacephalus HALLOWELL, 1861 Ở KHU VỰC ĐẢO HÒN MÊ VÀ VEN BIỂN Ở HUYỆN TĨNH GIA, TỈNH THANH HÓA LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THANH HÓA, NĂM 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO UBND TỈNH THANH HÓA TRƢỜNG ĐẠI HỌC HỒNG ĐỨC MAI THỊ ĐỨC NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI VÀ DI TRUYỀN CỦA LOÀI ẾCH CÂY ĐẦU TO Polypedates megacephalus HALLOWELL, 1861 Ở KHU VỰC ĐẢO HÒN MÊ VÀ VEN BIỂN Ở HUYỆN TĨNH GIA, TỈNH THANH HÓA LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC CHUYÊN NGÀNH: ĐỘNG VẬT HỌC MÃ SỐ: 842 01 03 NGƢỜI HƢỚNG DẪN: TS ĐẬU QUANG VINH THANH HÓA, NĂM 2019 Danh sách Hội đồng chấm luận văn Thạc sĩ khoa học theo Quyết định số ngày tháng năm 2019 Hiệu trưởng Trường Đại học Hồng Đức: Học hàm, học vị, Họ tên Cơ quan Công tác Chức danh Hội đồng Chủ tịch Phản biện Phản biện Ủy viên Thƣ ký Học viên chỉnh sửa theo ý kiến Hội đồng Xác nhận Ngƣời hƣớng dẫn TS Đậu Quang Vinh i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan luận văn khơng trùng lặp với khóa luận, luận văn, luận án cơng trình nghiên cứu cơng bố Ngƣời cam đoan Mai Thị Đức ii LỜI CẢM ƠN Luận văn đƣợc thực khu vực xã Hải Bình huyện Tĩnh Gia tỉnh Thanh Hóa với hƣớng dẫn TS Đậu Quang Vinh - Trƣờng Đại học Hồng Đức Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành TS Đậu Quang Vinh hƣớng dẫn bảo tơi cách tận tình q trình thực luận văn Xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo tổ môn Động vật, thầy cô giáo khoa Sinh học - Trƣờng Đại học Hồng Đức, Ủy ban nhân dân xã Hải Bình, Trạm Bộ Đội đảo Mê đóng xã Hải Bình huyện Tĩnh Gia tỉnh Thanh Hóa giúp đỡ tơi để tơi hồn thành tốt luận văn Và xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè anh chị lớp giúp đỡ, tạo điều kiện để tơi học tập nghiên cứu tốt Thanh Hóa, tháng 11 năm 2019 Tác giả Mai Thị Đức iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Lƣợc sử nghiên cứu lƣỡng cƣ 1.2 Lƣợc sử nghiên cứu ếch 1.2 Tổng quan điều kiện tự nhiên 11 1.2.1 Diện tích vị trí địa lý hyện Tĩnh Gia 11 1.2.2 Địa hình 12 1.2.3 Khí hậu 12 1.2.4 Đặc điểm sơng ngịi thủy văn 13 1.2.5 Thổ nhƣỡng 13 1.3 Đặc điểm xã hội huyện Tĩnh Gia 14 1.4 Đặc điểm khu vực nghiên cứu 16 1.4.1 Đặc điểm chung khu vực Hải Bình 16 1.4.2 Đặc điểm chung quần đảo Hòn Mê 17 CHƢƠNG II THỜI GIAN, ĐỊA ĐIỂM, NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 20 2.2 Thu thập mẫu vật 20 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 22 2.3.1 Xác định quần thể 22 2.3.2 Đặc điểm hình thái 23 2.2.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu 25 2.3.4 Phân tích mối quan hệ di truyền 26 2.3.4.1 Tách chiết DNA tổng số 26 2.3.4.2 Nhân đoạn ADN đích kỹ thuật PCR 27 2.3.4.3 Điện di ADN gel agarose 28 2.3.4.4 Tinh sản phẩm PCR 29 2.3.4.5 Giải phân tích trình tự DNA 30 2.3.3.6 Phân tích số liệu 31 CHƢƠNG III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 iv 3.1 Đặc điểm hình thái phân loại 33 3.1.1 Vị trí phân loại 33 3.1.2 Đặc điểm hình thái 33 3.2 Đặc điểm hình thái phân loại lồi Ếch đầu to Hải Bình đảo Mê 36 3.2.1 Đặc điểm hình thái đực Đảo Mê Hải Bình 36 3.2.3 Đặc điểm hình thái Đảo Mê Hải Bình 37 3.3 So sánh tính trạng hình thái quần thể đảo Mê Hải Bình 40 3.3.1 So sánh tính trạng hình thái cá thể đực hai quần thể đảo Mê Hải Bình 40 3.3.2 So sánh tính trạng hình thái cá thể hai quần thể Đảo Mê Hải Bình 43 3.4 Phân biệt giới tính 47 3.4.1 So sánh cách đặc điểm hình thái đực 47 3.4.1.1 So sánh tính trạng hình thái cá thể đực quần thể Đảo Mê 47 3.4.1.2 So sánh tính trạng hình thái cá thể đực quần thể Hải Bình 50 3.5 Phân tích mối quan hệ di truyền hai quần thể 53 3.5.1 Kết giải trình tự gen 53 3.5.2 Kết so sánh 59 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 65 Kết luận 65 Kiến nghị 65 TÀI LIỆU THAM KHẢO 66 Tài liệu tiếng việt 66 v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT KBTTN: Khu bảo tồn thiên nhiên LC: Lƣỡng cƣ, BS: Bò sát ĐDSH: Đa dạng sinh học Tr: Trang (Tiếng Việt) VQG: Vƣờn quốc gia SĐVN: Sách Đỏ Việt Nam IUCN: Tổ chức bảo tồn thiên nhiên giới NĐ: Nghị định EN: Nguy cấp IB: Nghiêm cấm khai thác sử dụng IIB: Khai thác sử dụng hạn chế, có kiểm sốt LR/nt: Sắp đe dọa (theo Danh lục Đỏ IUCN 2019) VU: Sẽ nguy cấp CR: Cực kỳ nguy cấp CS: Cộng vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Đặc điểm hình thái Ếch đầu to Đảo Mê Hải Bình 34 Bảng Đặc điểm hình thái cá thể đực Ếch đầu Đảo Mê Hải Bình 36 Bảng 3 Đặc điểm hình thái cá thể Ếch đầu to Đảo Mê Hải Bình 38 Bảng So sánh tính trạng hình thái cá thể đực quần thể Đảo Mê Hải Bình 42 Bảng So sánh tính trạng hình thái cá thể quần thể Đảo Mê Hải Bình 46 Bảng So sánh tính trạng hình thái cá thể đực quần thể Đảo Mê 49 Bảng So sánh tính trạng hình thái cá thể đực quần thể Hải Bình 52 Bảng Khoảng cách di truyền mẫu vật nghiên cứu đoạn gen 16SrRNA 62 Bảng Khoảng cách di truyền mẫu vật nghiên cứu đoạn gen 16SrRNA (tiếp theo) 64 vii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1 Bản đồ huyện Tĩnh Gia 11 Hình Vị trí Xã Hải Bình 16 Hình Khu vực quần đảo Hòn Mê 17 Hình Một số địa điểm thu mẫu Đảo Mê (A, B) Hải Bình (C, D) 23 Hình 2 Sơ đồ đo ếch nhái không đuôi (theo Banikov A G et al., 1977) 24 Hình Ảnh đực đảo Mê Hải Bình 41 Hình Ảnh đảo Mê Hải Bình 44 Hình 3 Ảnh đực đảo Mê 49 Hình Ảnh đực Hải Bình 51 58 CCAACCAAAAACCTTATAACAGGGCTTAAATTTATAGTGGGGTAAG TGGTTAAGTTGTTATTTGGTTTTAAGCTCCATGGGGTCTTCTCGTCT TATAAGCTTATTCCCGCTTCTTCACGGGAAGATCAATTTCACTGATC AAAAAGAGGAGACAGTAAAACCCTCGTGATGCCGTTGATACAAGT CCCCATTTAAAGAACAAGTGATTATGCTACCTTCGCGCGGTTAGGA TACCGCGGCCGTTTAAAATTCACTGGGCAGGCTGGACCTCTTATTA CAAGTCAAGAGGCGATGTTTTTGGTAAACAGGCGGGGCCGTCATTT GCCGAATTCCTTCTCTTTTTTTAAATCTTTCCTATAATGCGCTGGTG TTAGGTTAACGAGTAAGTACTGCAGAGTTTTCTTGTGGGTGTTATT GCAGTAAATTTAGATTCGGTGACTACCAATGGTCTATCCATGTTGG TTTATACTTGCATTTTGGAGAATTATAAATTCTTGTTACTAATCCTA GCATGGTGTCTTCCATATAAATATGGAGTCATTCATTATAAATTGA GGGTTCATGAAGATTAATGGTATTTGGGGGTTAAGGTTACGCTTTG ACGCGTTTTAAAAGGTGGCTGCTTTCAGGCCCACTTGGTAGTGTTA AGATTTTACCCGGCTGCTTAGGTTGTGTCCTGGCTTAAATAAGCTGT TCCTTATTTAAATAACTCTTAAGCCTTGAATGTTGTTGAGGTTCATT GGGGGAAAAAAGCTTAAGGCAGAACTTATATTCTTTTCATGAATAA CCAGCTATTTCTAGGCTCGGTAGGCTTTTCACTACTACTTAAAAATC ATCCCACTCTATTGCTACAGAGACGGGTTGGCCCAATAGGCTGTTT TAAAGTAGCTCGCCTAGGTTCGGGGTTAAAAC P_megacephalus_DK5_1100bp_2419_ CCTTCGGTAGCGGCTGCACCACCGGGATACCCTGATCCAACATCGA GGTCGTAAGCCTACTTGTCGATATGGGCTCTTGAAGTAGATTGCGC TGTTATCCCCAGGGTAACTTGGTCCGTTGATCGATTGTCGGGTCAG TAAACGTTAGTATACTAATTTCTAGAATTGTGGTTCTTAAATAAAG AGTGTGTTCTTTCCGTCGTGGAGGATGTGTTTTACTCCGCGGTCACC 59 CCAACCAAAAACCTTATAACAGGGCTTAAATTTATAGTGGGGTAAG TGGTTAAGTTGTTATTTGGTTTTAAGCTCCATGGGGTCTTCTCGTCT TATAAGCTTATTCCCGCTTCTTCACGGGAAGATCAATTTCACTGATC AAAAAGAGGAGACAGTAAAACCCTCGTGATGCCGTTGATACAAGT CCCCATTTAAAGAACAAGTGATTATGCTACCTTCGCGCGGTTAGGA TACCGCGGCCGTTTAAAATTCACTGGGCAGGCTGGACCTCTTATTA CAAGTCAAGAGGCGATGTTTTTGGTAAACAGGCGGGGCCGTCATTT GCCGAATTCCTTCTCTTTTTTTAAATCTTTCCTATAATGCGCTGGTG TTAGGTTAACGAGTAAGTACTGCAGAGTTTTCTTGTGGGTGTTATT GCAGTAAATTTAGATTCGGTGACTACCAATGGTCTATCCATGTTGG TTTATACTTGCATTTTGGAGAATTATAAATTCTTGTTACTAATCCTA GCATGGTGTCTTCCATATAAATATGGAGTCATTCATTATAAATTGA GGGTTCATGAAGATTAATGGTATTTGGGGGTTAAGGTTACGCTTTG ACGCGTTTTAAAAGGTGGCTGCTTTCAGGCCCACTTGGTAGTGTTA AGATTTTACCCGGCTGCTTAGGTTGTGTCCTGGCTTAAATAAGCTGT TCCTTATTTAAATAACTCTTAAGCCTTGAATGTTGTTGAGGTTCATT GGGGGAAAAAAGCTTAAGGCAGAACTTATATTCTTTTCATGAATAA CCAGCTATTTCTAGGCTCGGTAGGCTTTTCACTACTACTTAAAAATC ATCCCACTCTATTGCTACAGAGACGGGTTGGCCCAATAGGCTGTTT TAAAGTAGCTCGCCTAGGTTCGGGGTTAAAAC 3.5.2 Kết so sánh Kết giải trình tự AND gen 16S rRNA loài Polypedates megacephalus đảo Mê Hải Bình, Tĩnh Gia, Thanh Hóa mẫu loài số khu phân bố khác cho thấy sai khác mặt di truyền mẫu loài nhỏ, khoản 0-0,03% (Bảng 3.8) Nhƣ phân hóa mặt di truyền quần thể loài P megacephalus theo khu vực phân bố nƣớc nƣớc lân cận không đáng kể 60 Cụ Thể, từ bảng 3.8 so sánh sai khác mặt di truyền mẫu loài khu vực nhƣ sau: - So sánh mẫu lồi đảo Mê Hải Bình: so sánh trình tự nucleic cho thấy khơng có sai khác mẫu thu đƣợc đảo Mê Hải Bình - So sánh mẫu lồi đảo Mê Hải Bình với số nơi khác + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0009%) mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB728036.1” “ AB728038”.1 thu đƣợc Vĩnh Phúc + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0018%) mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB564283.1” Hong Kong “AY458598.1” thu đƣợc Quảng Tây + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0283%) giữa mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB728056.1”, “AB728031.1”, “AB728067.1”, “AB728051.1”, “AB728056.1” Huế, Hồng kong Kon Plong + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0284%) giữa mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB728087.1” Thailand:Kanchanaburi + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0293%) giữa mẫu thu đảo Mê, Hải “AB728082.1”, Bình với “AB728086.1”, mẫu “AB728081.1”, “AB728088.1” “AB728083.1”, NarKan Thailan, Thailand:Kanchanaburi, Petchanburi Thailan, Chanthaburi Thai Lan + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0303%) giữa mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB728063.1”, “AB728061.1”, Huế “AB728061.1”, “AB728083.1”, 61 + Có sai khác cặp nu (tƣơng ứng 0.0312%) giữa mẫu thu đảo Mê, Hải Bình với mẫu “AB728091.1”, “AB728059.1”, “AB728059.1”, Trat: Thai lan Hue Nhận xét: kết phân tích di truyền cho thấy cá thể ếch đầu to quần thể đảo Mê Hải Bình khơng có sai khác gen Nhƣ khoảng cách địa lý khơng có ý nghĩa việc làm biến đổi tính di truyền nhóm cá thể lồi Bên cạnh so sánh cá thể hai quần thể đảo Mê Hải bình với số khu vực khác nhận thấy có sai khác Sự sai khác mặt di truyền quần thể với cao hay thấp phụ thuộc vào khoảng cách địa lý, điều kiện tự nhiên khu vực với 62 Bảng Khoảng cách di truyền mẫu vật nghiên cứu đoạn gen 16SrRNA Kí hiệu mẫu Địa điểm P_megacephalus_DL0_1100bp 3057_Hai Binh P_megacephalus_DK7_1100bp 2425_Dao Me 0,0000 P_megacephalus_DK9_1100bp 3060_ Hai Binh 0,0000 0,0000 P_megacephalus_DK8_1100bp 3059_ Hai Binh 0,0000 0,0000 0,0000 P_megacephalus_DK6_1100bp 2415_ Dao Me 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 P_megacephalus_DK5_1100bp 2419_ Dao Me 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728040.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728049.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728044.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728046.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728045.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 AB728036.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 AB728038.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0009 0,0000 AB564283.1_P._megacephalus Hong Kong 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0027 0,0027 AY458598.1_P._megacephalus Quang Tay 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0018 0,0027 0,0027 0,0018 AB728039.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0018 0,0018 0,0027 AB728041.1_P._megacephalus Vinh Phuc 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0018 0,0018 0,0027 EU215550.1_P._leucomystax Quang Dong 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0027 0,0036 0,0036 0,0009 AB728056.1_P._megacephalus Hue 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0292 0,0292 0,0302 AB728031.1_P._megacephalus Hong Kong 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0292 0,0292 0,0301 AB728067.1_P._megacephalus Kon Plong 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0292 0,0292 0,0302 AB728051.1_P._megacephalus Hue 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0292 0,0292 0,0302 AB728056.1_P._megacephalus Hue 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0283 0,0292 0,0292 0,0302 AB728087.1_P._megacephalus Chanthaburi Thai Lan 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0293 0,0293 0,0302 AB728087.1_P._megacephalus Chanthaburi Thai Lan 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0284 0,0293 0,0293 0,0302 AB728081.1_P._megacephalus NarKan Thailan 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0312 63 AB728083.1_P._megacephalus Thailand:Kanchanaburi 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0312 AB728082.1_P._megacephalus Thailand:Kanchanaburi 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0312 AB728086.1_P._megacephalus Petchanburi Thailan 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0312 AB728088.1_P._megacephalus Chanthaburi Thai Lan 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0312 AB728061.1_P._megacephalus A Luoi: Hue 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0312 0,0312 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0303 0,0312 0,0312 0,0303 AB728061.1_P._megacephalus AB728091.1_P._megacephalus Trat: Thai lan 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0322 0,0322 0,0313 AB728059.1_P._megacephalus Hue 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0321 0,0321 0,0312 AB728059.1_P._megacephalus Hue 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0312 0,0321 0,0321 0,0312 AB728063.1_P._megacephalus A Luoi: Hue 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0293 0,0303 0,0303 0,0294 64 Bảng Khoảng cách di truyền mẫu vật nghiên cứu đoạn gen 16SrRNA (tiếp theo) 0,0045 0,0045 0,0000 0,0027 0,0036 0,0036 0,0302 0,0311 0,0311 0,0312 0,0301 0,0311 0,0311 0,0311 0,0163 0,0302 0,0311 0,0311 0,0312 0,0000 0,0163 0,0302 0,0311 0,0311 0,0312 0,0000 0,0163 0,0000 0,0302 0,0311 0,0311 0,0312 0,0000 0,0163 0,0000 0,0000 0,0302 0,0312 0,0312 0,0312 0,0181 0,0182 0,0181 0,0181 0,0181 0,0302 0,0312 0,0312 0,0312 0,0181 0,0182 0,0181 0,0181 0,0181 0,0000 0,0312 0,0321 0,0321 0,0322 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0009 0,0009 0,0312 0,0321 0,0321 0,0322 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0009 0,0009 0,0000 0,0312 0,0321 0,0321 0,0322 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0009 0,0009 0,0000 0,0000 0,0312 0,0321 0,0321 0,0322 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0009 0,0009 0,0000 0,0000 0,0000 0,0312 0,0321 0,0321 0,0322 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0191 0,0009 0,0009 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,0322 0,0312 0,0312 0,0313 0,0154 0,0173 0,0154 0,0154 0,0154 0,0127 0,0127 0,0136 0,0136 0,0136 0,0136 0,0136 0,0322 0,0312 0,0312 0,0313 0,0154 0,0173 0,0154 0,0154 0,0154 0,0127 0,0127 0,0136 0,0136 0,0136 0,0136 0,0136 0,0000 0,0331 0,0322 0,0322 0,0322 0,0172 0,0191 0,0172 0,0172 0,0172 0,0136 0,0136 0,0127 0,0127 0,0127 0,0127 0,0127 0,0027 0,0027 0,0331 0,0322 0,0322 0,0322 0,0145 0,0182 0,0145 0,0145 0,0145 0,0136 0,0136 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0009 0,0009 0,0036 0,0331 0,0322 0,0322 0,0322 0,0145 0,0182 0,0145 0,0145 0,0145 0,0136 0,0136 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0009 0,0009 0,0036 0,0000 0,0312 0,0303 0,0303 0,0303 0,0145 0,0164 0,0145 0,0145 0,0145 0,0136 0,0136 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0145 0,0009 0,0009 0,0036 0,0018 0,0018 65 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận - Đặc điểm hình thái cá thể đực quần thể đảo Mê nhƣ Hải Bình có biến dị Sự biến dị thể rõ đặc điểm dài mõmhuyệt (SVL) dài nách bẹn (AG) cá thể hai quần thể cá thể đực quần thể Hải Bình, nhiên mức độ biến dị thấp - Giữa cá thể đực hai quần thể có sai khác 14 tính trạng, cá thể hai quần thể có sai khác 13 tính trạng, cá thể đực quần thể đảo Mê có kích thƣớc lớn so với quần thể Hải Bình - Giữa đực quần thể: quần thể đảo Mê, số đo hình thái đực có sai khác, nhiên tỉ lệ sai khác tỉ lệ TD/ED, FTL/FFTL (đực lớn hơn) ED/ESL (cái lớn hơn) Ở quần thể Hải Bình, đực sai khác rõ số đo hình thái, nhiên không sai khác tỉ lệ phần thể Ở hai quần thể, cá thể có kích thƣớc lớn cá thể đực - Về di truyền, phân tích trình tự DNA gen 16S rRNA hai quần thể đảo Mê Hải Bình cho thấy khơng có sai khác trình tự nucleotit, so với trình tự khác genbank có sai khác 0-0,03% cá thể hai quần thể với trình tự khác cơng bố lồi địa điểm khác nƣớc giới Kiến nghị Cần có nghiên cứu khu hệ Lƣỡng cƣ nhƣ nhóm động, thực vật khác quần đảo Hịn Mê để xác định tính đa dạng sinh học tính độc đáo quần đảo gần bờ ven biển Việt Nam 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt Ngô Đắc Chứng, 1995 “ Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần lồi ếch nhái, Bị sát vƣờn Quốc gia Bạch Mã” Tuyển tập cơng trình nghiên cứu hội thảo ĐDSH Bắc Trường Sơn (lần thứ I): Nxb KH & KT Hà Nội Lê Trung Dũng (2015), “Nghiên cứu lƣỡng cƣ, bò sát khu bảo tồn thiên nhiên Mƣờng Nhé, tỉnh Điện Biên”, Luận án tiến sĩ Sinh học, Tr.111 Phạm Văn Hòa, (2005) “Nghiên cứu khu hệ ếch nhái, bị sát tỉnh phía Tây, Miền Đơng Nam Bộ (Tây Ninh, Bình Dƣơng, Bình Phƣớc) Luận án Tiến sĩ Sinh học Trƣờng Đại học Sƣ phạm, Đại học Huế Trần Kiên, Hoàng Xuân Quang, Nguyễn Thị Bích Mẫu, Cao Tiến Trung, 2002 "Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần lồi ếch nhái, bị sát mật độ chúng đồng ruộng khu dân cƣ thành phố Vinh huyện Quỳnh Lƣu, tỉnh Nghệ An" Tạp chí Sinh học tập 24 số 2A (tháng 3-2000) Tr 75-79 Lê Vũ Khôi, Bùi Hải Hà, Đỗ Tƣớc, Đinh Thị Phƣơng Anh (2002), “Kết bƣớc đầu khảo sát thành phần loài Ếch nhái khu vực Bà Nà (Hịa Vang, Đà Nẵng)” Tạp chí Sinh học, 24(2A), tr 47-51 Lê Vũ Khôi, Võ văn Phú, Ngô Đắc Chứng, Lê Trọng Sơn (2004), Đa dạng Sinh học Động vật Vườn Quốc gia Bạch Mã Nxb Tuận Hóa: 131-146 Trung tâm bảo tồn rừng sến Tam Quy (2010), Báo cáo trạng rừng sến Tam Quy, huyện Hà Trung, tỉnh Thanh Hóa Lê Nguyên Ngật, Phạm Văn Anh, 2009 " Sự đa dạng trạng phân bố lƣỡng cƣ, bò sát khu bảo tồn thiên nhiên Xuân Liên, tỉnh Thanh Hóa" Báo cáo khoa học Hội thảo Quốc gia lưỡng cư bò sát Việt Nam (lần thứ nhất) NXB Đạ học Huế Tr 109-114 67 Hòang Thị Nghiệp, (2012) “Khu hệ lưỡng cư, bò sát vùng An Giang Đồng Tháp” Luận án Tiến sĩ Sinh học Trƣờng Đại học Sƣ phạm, Đại học Huế 10 Hà Thị Tuyết Nga (2008): Nghiên cứu đặc điểm sinh học, sinh thái kỹ thuật nhân ni lồi chàng xanh đốm (Polypedates denysi Blanford, 1881) điều kiện nuôi nhốt Luận Văn thạc sỹ khoa học 11 TS Dƣơng Bá Phƣợng (2010) “Dƣ Địa Chí Tĩnh Gia” nxb Từ điển bách khoa 12 Trần Kiên, Hoàng Xuân Quang (1992), “Về phân khu động vật địa lý học ếch nhái, bị sát Việt Nam” Tạp chí Sinh học, Hà Nội 14(3) Tr 813 13 Trần Kiên, Hoàng Xuân Quang, Nguyễn Thị Bích Mẫu, Cao Tiến Trung, 2002 "Bƣớc đầu nghiên cứu thành phần lồi ếch nhái, bị sát mật độ chúng đồng ruộng khu dân cƣ thành phố Vinh huyện Quỳnh Lƣu, tỉnh Nghệ An" Tạp chí Sinh học tập 24 số 2A (tháng 3-2000) Tr 75-79 14 Lê Vũ Khôi, Bùi Hải Hà, Đỗ Tƣớc, Đinh Thị Phƣơng Anh (2002), “Kết bƣớc đầu khảo sát thành phần loài Ếch nhái khu vực Bà Nà (Hịa Vang, Đà Nẵng)” Tạp chí Sinh học, 24(2A), tr 47-51 15 Lê Vũ Khôi, Võ văn Phú, Ngô Đắc Chứng, Lê Trọng Sơn (2004), Đa dạng Sinh học Động vật Vườn Quốc gia Bạch Mã Nxb Tuận Hóa: 131146 16 Hồng Xn Quang, 1993 “Góp phần điều tra nghiên cứu ếch nhái, bò sát tỉnh Bắc Trung Bộ (trừ bò sát biển)” Luận án PTS Sinh học, Đại học Sƣ phạm Hà Nội, Đại học Quốc Gia Hà Nội 17 Hoàng Xuân Quang (1993), Bảo vệ đa dạng động vật có xương sống (Cá, lưỡng cư - bò sát) hệ sinh thái rừng khu vực Tây bắc Nghệ An Đề tài cấp bộ, Mã số B2005-42-84 68 18 Hoàng Xuân Quang, Nguyễn Văn Sáng, Lê Ngun Ngật (1997) "Thành phần lồi ếch nhái, bị sát Tây nam Nghệ An" Thông báo khoa học, số Trƣờng Đại học Sƣ Phạm - Đại học Quốc gia Hà Nội 19 Hoàng Xuân Quang, Mai Văn Quế (1999), " Thành phần lồi ếch nhái, bị sát khu vực núi Chúc A (Hƣơng Khê, Hà Tĩnh)" Hội nghị khoa học kỷ niệm 40 năm thành lập Trường Đại học Vinh NXB Đại học Vinh Tr 1015 20 Hoàng Xuân Quang, Hoàng Ngọc Thảo, Hồ Anh Tuấn, Cao Tiến Trung, Nguyễn Văn Quế (2007), “Kết điều tra nghiên cứu thành phần lồi Lƣỡng cƣ Bị sát Vƣờn Quốc gia Bạch Mã (1996-2006)” Tạp chí Khoa học, Trường Đại học Vinh Tập XXXVI, Số 3A-2007, 62-72 21 Hoàng Xuân Quang, Hoàng Ngọc Thảo, Andrew Grieser Johns, Cao Tiến Trung, Hồ Anh Tuấn, Chu Văn Dũng (2008), “Ếch nhái, Bò sát khu bảo tồn thiên nhiên Pù Huống”, Nxb Nông Nghiệp, 128 trang 22 Nguyễn Văn Sáng, Hồ Thu Cúc (1996), “Danh mục ếch nhái bò sát Việt Nam”, Nxb KH&KT, Hà Nội, 264 trang 23 Nguyễn Văn Sáng, Hồng Xn Quang (2000), “Khu hệ bị sát, ếch nhái Vƣờn Quốc gia Bế En (Thanh Hóa)” Tạp chí Sinh học, Hà Nội 22 (15): 15-23 24 Nguyễn Thiên Tạo (2010): Phân loại quan hệ di truyền nhóm ếch xanh Phacaphorus (Amphibia: Phacophoridae) Việt Nam (Luận văn thạc sỹ) 25 Hoàng Ngọc Thảo, Hoàng Xuân Quang, Cao Tiến Trung, Ông Vĩnh An, Nguyễn Thị Lƣơng (2012), “Đa dạng thành phần lồi ếch nhái, bị sát khu dự trữ sinh Tây Nghệ An” Hội thảo quốc gia lưỡng cư bò sát Việt Nam lần thứ Nxb Đại học Vinh: 245-252 69 26 Đào Văn Tiến 1977 Về định loại ếch nhái Việt Nam Tạp chí sinh vật - địa học, Hà Nội XV(2): Tr 33-40 27 Đào Văn Tiến (1978), “Về định loại Rùa Cá sấu Việt Nam”, Tạp chí Sinh vật-địa học, XVI(1), Hà Nội, tr 1-6 28 Nguyễn Kim Tiến, Trần Sỹ Luận (2004), “Kết nghiên cứu thành phần loài động vật rừng đặc dụng Lam Sơn số giải pháp bảo tồn khu di tích lịch sử Lam Kinh Thanh Hóa” Thơng tin khoa học Sở KH&CN Thanh Hóa, số năm 2004 29 Nguyễn Kim Tiến (2007), “Kết bƣớc đầu thành phần lồi lƣỡng cƣ bị sát xã Cẩm Lƣơng Cẩm Thủy Thanh Hóa” Báo cáo khoa học Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ hai Phần tài nguyờn sinh vật; đa dạng sinh học bảo tồn NXB Nông nghiệp, HN 2007 Tr 603-607 30 Nguyễn Kim Tiến (2009), “Nghiên cứu lƣỡng cƣ, bò sát vƣờn quốc gia khu bảo tồn thiên nhiên tỉnh Thánh Hóa” Báo cáo khoa học Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ ba Phần tài nguyên sinh vật; đa dạng sinh học bảo tồn NXB Nông nghiệp, HN 2009,tr 840-845 31 Nguyễn Kim Tiến (2009), “Một số đặc điểm sinh học, sinh thái học ếch Nam mỹ (Rana catesbeiana Shaw, 1802) điều kiện ni tỉnh Thanh Hố, Việt Nam”, Báo cáo khoa học Hội thảo quốc gia lần thứ nhất: Lưỡng cư Bò sát Huế, 11-2009 Tr 309-313 NXB Đại học Huế, 2009 32 Nguyễn Kim Tiến (2013), “Nghiên cứu thành phần lồi lưỡng cư, bị sát khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hu, huyện Quan Hóa, tỉnh Thanh Hóa” Báo cáo tổng kết Đề tài Khoa học Công nghệ cấp Bộ, 63 trang 33 Nguyễn Kim Tiến nnk (2012) “Thành phần loài lƣỡng cƣ, bò sát Khu Bảo tồn rừng sến Tam Quy, huyện Hà Trung, tỉnh Thanh Hóa” Báo cáo Khoa học Hội thảo Quốc gia LCBS lần thứ 2, Nxb Đại học Vinh: 260-266 70 34 Nguyễn Kim Tiến, Hoàng Ngọc Hùng (2014), “Thành phần lồi lƣỡng cƣ, bị sát khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hu, tỉnh Thanh Hóa” Tạp chí Khoa học Trường Đại học Hồng Đức, số 19: Tr 73-80 35 Nguyễn Kim Tiến, nnk (2011), “Thành phần lồi lƣỡng cƣ, bị sát khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hu, tỉnh Thanh Hóa” Báo cáo khoa học Hội nghị khoa học toàn quốc lần thứ tư Phần tài nguyên sinh vật; đa dạng sinh học bảo tồn, tr 40440 NXB Nông nghiệp, HN 2011 36 Lê Thị Thanh Đinh Thị Phƣơng Anh (2014): Nghiên cứu loài ếch phục vụ giảng dạy nghiên cứu 37 Ủy Ban Khoa học Kỹ thuật Nhà nƣớc (1981), Kết điều tra động vật miền Bắc Việt Nam Nxb Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội 38 Đậu Quang Vinh, Nguyễn Văn Sáng, Lê Thị Hồng Lam, Hoàng Xuân Quang (2010): Nghiên cứu đa dạng thành phân loài phân bố theo độ cạo họ ếch Rhacophoridae khu bảo tồn thiên nhiên Pù Hoạt Tài liệu tiếng anh 39 Cuong The Pham, Truong Quang Nguyen, Chung Van Hoang and Thomas Ziegler (2016), “New records and updates list of amphibians from Xuan Lien Nature Reserve, Thanh Hoa Province, Viet Nam”, Herpetology Notes, volume 9: 31 – 41 40 Kuraishi N., Matsui M., Hamidy A., Belabut D.M., Ahmad N., Panha S., Sudin A., Yong H.S., Jiang J.-P, Ota H., Ho T.T., Nishikawa K (2012), Phylogenetic and taxonomic relationships of the Polypedates leucomystax complex (Amphibia) Zoologica Scripta, 1-17 41 Li, J.-T., Che, J., Brain, R H., Zhao, E-M & Zhang, Y-P (2008) Molecular phylogeny of Rhacophoridae (Anura): A framework of taxonomic reassignment of species with the genera Aquixalus, Chiromantis, 71 Rhacophorus, and Philautus Molecular Phylogenetics and Evolution, 48: 302-312 42 Li, J.-T., Che., Murphy, R W, Zhao, H., Zhao, E., Rao, D-Q & Zhang, Y.-P (2009) New insights to the molecular phylogenetics and generic assessment in the Rhacophoridae (Amphibia: Anura) based on five nuclear anhd three mitochondrial genes, with comments on the evolution of reproduction Molecular Phylogenetics and Evolution, 53: 509 43 Nguyen Van Sang et all (2009), Herpetofauna of Vietnam DCM, Meckenheim, Germany, 2009 44.Ohler, A & Delorme, M (2006 Well know does not mean well studied: Morphological and molecular support for existence of siblingspecies in the Javanese gliding frog Rhacophorus reinwdtii (Amphibia, Anura) Comptes Rendus Biologies, 329: 86-97 45 Ziegler T., Truong Q N., (2011), “New discoveries of Amphibians and Reptiles from Vietnam”, Bonn zoological Bulletin, 57, pp 137-147 46 Yu, G., Rao, D.-Q., Yang, J.-X & Zhang, M.-W (2008) Phylogenneticrelationship among Rhacophorinae (Rhacophoridae, Anura, Aphibia), with an emphasis on the Chinese speries Zoologial Journal of the Linean Society, 153: 733-749 47 Wikinson, J.A., Drews, R C.& Tatum, O.L (2002) A molecularphylogennetic analysis of the family R hacophoridae with an emphasis on the Asian and Afican genera Molecular Phylogenetics anh Evolution, 24: 265-273