(Luận văn) khảo sát thành phần hóa học cao etyl axetat của lá cây chùm ngây moringa oleifera lam, họ moringacea

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐH SƯ PHẠM TP.HCM KHOA HÓA HỌC  KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HĨA HỌC lu Chun ngành Hóa Hữu an n va to gh tn Tên đề tài: p ie KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC d oa nl w CAO ETYL AXETAT CỦA LÁ CÂY CHÙM NGÂY va an lu MORINGA OLEIFERA LAM, ll u nf HỌ MORINGACEAE oi m z at nh GVHD: TS MAI ĐÌNH TRỊ z VÕ TẤN THANH MAI MSSV: 34106033 Niên khóa: 2008-2012 an Lu n va Tp.Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 m co l gm @ SVTH: ac th si LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành xong luận văn tốt nghiệp, cố gắng nỗ lực thân, tơi cịn nhận giúp đỡ, động viên nhiều Nhân xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc đến TS Mai Đình Trị (GVHD tơi), phịng Cơng nghệ hợp chất có hoạt tính sinh học, viện Cơng nghệ Hóa học Thầy nhiệt tình việc hướng dẫn tơi suốt thời gian làm thực nghiệm, giúp đỡ tơi gặp khó khăn Ở thầy khơng học kiến thức chuyên môn quý báu cho việc thực đề tài mà tơi cịn nhận thấy gương nghiên cứu khoa học nhiều điều sống Một lần xin gửi lời tri ân sâu sắc đến thầy lu Ba, mẹ, anh, chị người thân gia đình ln động viên, giúp an n va đỡ mặt vật chất tinh thần trình thực đề tài to TS Lê Tiến Dũng, TS Phạm Thị Nhật Trinh-Viện Cơng nghệ Hóa học thầy gh tn nhiệt tình bảo cho kiến thức cần thiết thực nghiệm, tạo p ie điều kiện cho tơi hồn thành đề tài w Thầy khoa hóa trường Đại học Sư phạm thành phố Hồ Chí Minh nhiệt d nghiệp oa nl tình giảng dạy giúp tơi có kiến thức q giá để hồn thành xong luận văn tốt lu va an Cuối cùng, xin gửi lời chân thành cảm ơn đến anh chị năm trước ll trình làm việc u nf bạn lớp hóa 4C thí nghiệm với tơi ln ủng hộ góp ý giúp đỡ tơi oi m Xin chân thành cảm ơn! z at nh Võ Tấn Thanh Mai z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN CHƯƠNG TỔNG QUAN ĐẠI CƯƠNG VỀ CÂY CHÙM NGÂY 1.1 1.1.1 Khái quát 1.1.2 Mô tả 1.1.3 Sinh thái phân bố 10 1.1.4 Cơng dụng – Lợi ích 11 1.1.5 Tác dụng dược lý 11 lu an 1.1.5.1 Theo y học cổ truyền 11 1.1.5.2 Theo y học đại 13 n va 1.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC 18 tn to 1.2.1 Trong nước 18 1.2.2 Ngoài nước 18 Hóa chất, thiết bị, phương pháp 35 p 2.1 ie gh Chương THỰC NGHIỆM VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 2.1.2 Thiết bị 35 2.1.3 Phương pháp nghiên cứu 35 d oa lu 2.1.3.1 Phương pháp phân lập hợp chất 35 2.1.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hóa học hợp chất 36 u nf va an THỰC NGHIỆM 36 ll 2.2 nl w Hóa chất 35 2.1.1 m Giới thiệu chung 36 2.2.2 Quá trình phân lập chất 36 oi 2.2.1 z at nh Nguyên liệu 36 2.2.2.2 Phân lập hợp chất từ cao thô 37 2.2.2.3 Phân lập hợp chất từ cao EtoAc 38 gm @ Hằng số vật lý số liệu phổ nghiệm hợp chất phân lập 41 m co l 2.2.3 z 2.2.2.1 Hợp chất MO7 41 2.2.3.2 Hợp chất MO12 41 an Lu 2.2.3.1 Chương KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 42 va Xác định cấu trúc hợp chất 42 n 3.1 ac th si 3.1.1 Xác định cấu trúc hợp chất MO7 42 3.1.2 Hợp chất MO12 44 Chương KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 4.1 Kết luận 48 4.2 Kiến nghị 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO 49 PHỤ LỤC 57 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục Các phổ MO7 Phụ lục 1.1 Phổ ESI-MS MO7… 58 Phụ lục 1.2 Phổ 1H-NMR MO7 59 Phụ lục 1.3 Phổ 13C-NMR MO7 .60 Phụ lục 1.4 Phổ DEPT 90 135 MO7 61 Phụ lục 1.5 Phổ HMBC MO7 62 Phụ lục 1.6 Phổ HSQC MO7 63 lu an Phụ lục Các phổ MO12 n va Phụ lục 2.1 Phổ ESI-MS MO12 64 to gh tn Phụ lục 2.2 Phổ 1H-NMR MO12 .65 p ie Phụ lục 2.3 Phổ 13C-NMR MO12 66 Phụ lục 2.4 Phổ DEPT 90 135 MO12 67 nl w d oa Phụ lục 2.5 Phổ HMBC MO12 68 ll u nf va an lu Phụ lục 2.6 Phổ HSQC MO12 69 oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Cây chùm ngây lúc nhỏ Hình 1.2 Cây chùm ngây lúc lớn .9 Hình 1.3 Hoa chùm ngây 10 Hình 1.4 Lá chùm ngây tươi 10 Hình 1.5 Quả chùm ngây 10 Hình 2.1 Cấu trúc hóa học hợp chất MO7 .43 lu Hình 2.2 Cấu trúc hóa học hợp chất MO12 46 an n va p ie gh tn to DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ VÀ BẢNG BIỂU w Sơ đồ Q trình điều chế cao thơ từ mẫu Chùm ngây 38 oa nl Bảng 1.1 Sắc ký cột cao EtOAc 40 d Bảng 1.2 Sắc ký cột phân đoạn E5 40 lu va an Bảng 1.3 Sắc ký cột phân đoạn E54 40 ll u nf Bảng 1.4-Kết khảo sát phân đoạn E544 .41 oi m Bảng 1.5 -Kết khảo sát phân đoạn E54533 41 z at nh Bảng 2.1 Dữ liệu phổ hợp chất MO7 .43 Bảng 2.2 Dữ liệu phổ hợp chất MO12 .46 z m co l gm @ an Lu n va ac th si DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT Kí hiệu Tiếng Anh EA Ethyl acetate EtOH Ethanol H Hexane MeOH Methanol CHCl Chloroform Tiếng Việt lu an n va SKLM Sắc kí lớp mỏng SKC Sắc kí cột tn to Reversed Phase 18 Pha đảo C-18 Nuclear Magnetic Resonance Phổ cộng hưởng từ hạt nhân p ie gh Rp18 C-NMR Carbon (13) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance carbon (13) d oa 13 nl w NMR an lu Hydro (1) Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance proton (1) ll u nf H-NMR va m Phổ DEPT Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị hạt nhân qua nhiều liên kết l gm Coherence @ Heteronuclear Single Quantum Phổ tương tác dị hạt nhân qua m co Correlation liên kết Chemical shift Độ chuyển dịch hóa học an Lu δ Polarization Transfer z HSQC z at nh HMBC Distortionless Enhancement by oi DEPT n va ac th si lu an n va ppm Part per million Một phần triệu s Singlet Mũi đơn d Doublet Mũi đôi t Triplet Mũi ba m Multiplet Mũi đa J Coupling constant Hằng số ghép spin (M)Hz (Mega) Hertz g Gram mg Milligram tn to Kilogram Phân đoạn p w Tài liệu tham khảo Số thứ tự ll u nf va an lu STT d oa nl TLTK Pđ ie gh kg oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỞ ĐẦU Nền y dược học cổ truyền Việt Nam có từ bao đời nay, coi hệ thống kho báu có vai trị tiềm to lớn nghiệp bảo vệ sức khoẻ phòng chống loại dịch bệnh phục vụ cho nhân dân Từ nhiều kỷ nay, chế phẩm y học cổ truyền coi kho tàng dược liệu quí báu Đảng Nhà nước xây dựng chiến lược phát triển y học cổ truyền y tế phối hợp với ngành khoa học tự nhiên, tổ chức xã hội nghiên cứu, kế thừa, bảo tồn phát triển nhằm xây dựng y dược học Việt lu Nam ngày khoa học đại nhằm nâng cao tính khoa học phát huy y học cổ an truyền công tác chăm sóc sức khoẻ nhân dân va n Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới nên thừa hưởng nguồn thiên tn to nhiên vô phong phú đa dạng sinh học với nhiều loài dược liệu quí Các hợp ie gh chất thiên nhiên thể hoạt tính sinh học phong phú định p hướng để người tổng hợp tìm nhiều loại thuốc chống lại bệnh w hiểm nghèo, chất bảo quản thực phẩm chế phẩm phục vụ nông oa nl nghiệp có hoạt tính cao mà khơng ảnh hưởng đến môi sinh d Việc sử dụng loại thuốc thảo dược theo cách cổ truyền hay từ hợp chất lu va an nguồn gốc tự nhiên có xu hướng ngày tăng chiếm vị trí quan trọng u nf y học Chế phẩm thảo dược dù có loại dược liệu lại hỗn hợp ll nhiều hợp chất khác trường hợp hầu hết chưa xác định rõ hoạt m oi chất chất Vì vậy, thuốc sử dụng thảo dược đối tượng z at nh nhà khoa học nghiên cứu cách đầy đủ chất hoạt chất có cỏ thiên nhiên Từ định hướng cho việc nghiên cứu, chiết xuất để tìm loại thuốc z gm @ hay đường tổng hợp để tạo chất có hoạt chất việc chữa trị nhiều loại bệnh Chính việc nghiên cứu thành phần hóa học từ cỏ m co l thiên nhiên có ý nghĩa khoa học thực tiễn cao Nhằm đóng góp phần hiểu biết thêm thành phần hóa học thuốc an Lu dân gian, đề tài “Khảo sát thành phần hóa học chùm ngây n va (Moringacaeae)” nội dung luận văn ac th si CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ CÂY CHÙM NGÂY 1.1.1 Khái quát Tên khoa học: Moringa oleifera Lam, Moringa pterygosperma Gaertn, thuộc họ Chùm ngây (Moringaceae) Họ Chùm ngây gồm chi chi Chùm ngây (Moringa) bao gồm khoảng 10 loài phân bố vùng nhiệt đới giới (Mabberley, 1987) Các loài chi có hoa lưỡng tính, khơng đối xứng hai bên, nhị - 10, nhị đơn bào có cấu tạo uốn ngược, nang thuôn dài.[1],[3] Tên Việt Nam: chùm ngây, cải ngựa, bồn bồn, độ sinh (tree of life) … lu Tên nước ngoài: drumstick tree, horseradish tree, ben tree (Anh), moringe an graine ailée, Morungue (Pháp), ángela, ben, moringa (Tây Ban Nha) va n 1.1.2 Mô tả to gh tn Cây Chùm ngây xanh quanh năm, gỗ nhỏ phát triển nhanh từ 5- ie 10m vòng năm, trồng lâu năm chiều cao tối đa đến 10-12m, đường kính p thân 20-40cm Cây rủ theo hình vương miện, cành khẳng khiu, có lơng tơ, có - nl w đơi chét hình trứng Hoa trắng có cuống mọc thành chùy nách lá, có lơng tơ, oa bắc hình sợi Quả mọc treo, có cạnh, dài 25 - 30 cm, gồ lên chỗ có hạt, khía d rãnh dọc Hạt màu đen, to hạt đậu Hà Lan, trịn có cạnh cánh màu trắng ll u nf va an lu dạng màng [3] oi m z at nh z m co l gm @ Hình Cây chùm ngây lúc lớn an Lu Hình Cây chùm ngây lúc nhỏ n va ac th si [60] S Patel, A S Thakur, A Chandy and A Manigauha (2010), Moringa Oleifera: A Review of There Medicinal and Economical Importance to the Health and Nation, Sajjan Singh Nagar, Raisen Road, Bhopal, India - 402021 [61] S Sreelatha & P R Padma, (2009), Antioxidant Activity and Total Phenolic Content of Moringa oleifera Leaves in Two Stages of Maturity, Plant Foods Hum Nutr, 64: 303 - 311 [62] Shaheen Faizi, Bina Shaheen Siddiqui, Rubeena Saleem, (1995), Fully acetylated carbamate and hypotensive thiocarbamate glycosides from Moringa oleifera, Phytochemistry, Volume 38, Issue 4, March, Pages 957 - 963 [63] Siddhuraju P, Becker K (2003), Antioxidant properties of various solvent lu extract of total phenolic constituents from three different ago - climatic origins of an n va drumstick tree (Moringa oleifera Lam), J Agic Food Chem, 15: 2144 - 2155 tn to [64] Soumitra Mondal, (2004), Structural studies of immunoenhancing polysaccharid.e isolated from mature pods of Moringa oleifera, Med Chem Res, gh p ie 13: 6/7, 390 - 400 [65] Stavros Lalas, John Tsaknis, (2002), Extraction and Identification of Natural w Vol 79, No d oa nl Antioxidant from the Seeds of the Moringa oleifera Tree Variety of Malawi, Jaocs, lu va an [66] Stephanie Grond, Ina Papastavrou and Axel Zeeck (2002), Novel u nf α-L-Rhamnopyranosides from a Single Strain of Streptomyces by Supplement - ll Induced Biosynthetic Steps, Eur J Org Chem 2002, 3237 - 3242 m oi [67] Tieshan Wang, Zhaoyu Wang, Lijing Chen, Shengtan Zhang and Jingming z at nh Lin (2010), Isolation and characterization of (6S,9R) 6-Hydroxy-4,4,7a-trimethyl5,6,7,7a-tetrahydro-1-benzofuran-2(4H)-one from Scutellaria barbata, Guangdong z gm @ Pharmaceutical University, Guangzhou 510006, People’s Republic of China l [68] Trapti Rastogi, Vijay Bhutda (2009), Comparative Studies on Anthelmintic an Lu April - June m co Activity of Moringa Oleifera and Vitex negundo, Asian J Research Chem (2): [69] Umer rashid, Farooq Anwar, Bryan R Moser, Gerhard Knothe (2008), va n Moringa oleifera oil: A possible source of biodiesel, Agicultural Research Service, ac th si U.S Department of Agiculture, 1815 North University Street, Peoria, IL 61604, USA [70] Zahida Parveen, Yulin Deng, Muhammad Khalid Saeed, Rongji dai, Waqar Ahmad, Yuhong Yu and Tahmina Yasmeen (2006), Optimizations of Conditions for Maximum Recovery of Astragalin from Thesium chinense Turcz, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100081, People’s Repuplic of China lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to PHỤ LỤC d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si PHỤ LỤC 1: CÁC PHỔ CỦA MO7 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ Phụ lục 1.1 Phổ ESI-MS MO7 an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul Phụ lục 1.2 Phổ 1H-NMR MO7 z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu Phụ lục 1.3 Phổ 13C-NMR MO7 z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu Phụ lục 1.4 Phổ DEPT 90 135 MO7 z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Phụ lục 1.5 Phổ HMBC MO7 n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Phụ lục 1.6 Phổ HSQC MO7 n va ac th si PHỤ LỤC 2: CÁC PHỔ CỦA MO12 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Phụ lục 2.1 Phổ ESI-MS MO12 n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul Phụ lục 2.2 Phổ 1H-NMR MO12 z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ Phụ lục 2.3 Phổ 13C-NMR MO12 an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ Phụ lục 2.4 Phổ DEPT 90 135 MO12 an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ Phụ lục 2.5 Phổ HMBC MO12 an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Phụ lục 2.6 Phổ HSQC MO12 n va ac th si