Khóa luận khảo sát thành phần hóa học cao ethyl acetate lá cây me rừng phyllanthus emblica

Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo LỜI MỞ ĐẦU Ngày nay, bên cạnh phát triển mạnh mẽ khoa học kĩ thuật, chất lượng sống người nâng cao, vấn đề chăm sóc sức khỏe trở thành mối quan tâm lớn nghiên cứu khoa học Các sản phẩm có nguồn gốc thảo mộc, vốn dùng từ lâu thuốc y học cổ truyền, sử dụng ngày nhiều loại thực phẩm chức Vì vậy, việc nghiên cứu thành phần hóa học hoạt tính sinh học chất có đóng vai trị quan trọng phát triển y học Kết thu từ nghiên cứu mở hướng phát triển việc tổng hợp hợp chất có hoạt tính q, có tác dụng chữa bệnh Hơn nữa, nghiên cứu thành phần hóa học từ loại thảo mộc cịn góp phần củng cố chứng khoa học cho y học cổ truyền Cây Me rừng (Phyllanthus emblica L.) nguồn thảo dược quý, thuộc chi Phyllanthus, họ Euphorbiaceae Me rừng có nhiều ứng dụng y học cổ truyền chữa cảm mạo, phát sốt, đau cổ họng, viêm ruột, đau bụng ngoài, cao huyết áp [1] Với mong muốn làm sáng tỏ kinh nghiệm sử dụng dân gian lồi thuộc chi Phyllanthus có nhiều hoạt tính sinh học, nên chọn Phyllanthus emblica L để nghiên cứu thành phần hóa học Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo Chương I TỔNG QUAN 1.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT Cây me rừng thuộc họ Thầu dầu Euphorbiaceae, có tên khoa học Phyllanthus emblica Linn Ngoài cịn có số tên khác du cam tử, ngưu cam tử, dư cam tử [1] Me rừng nhỡ cao m, phân nhiều cành nhỏ mềm, có lơng, dài 20 cm Hoa nhỏ, đơn tính gốc Cụm hoa thành xim co mọc nách phía cành, gồm nhiều hoa đực vài hoa Lá xếp thành hai dãy cành nhỏ trông giống kép lông chim, cuống ngắn Lá kèm nhỏ hình ba cạnh Quả hình cầu trước mọng, sau khơ thành nang Hạt hình ba cạnh, màu hồng nhạt Cây hoa từ tháng đến tháng 11 [1] Hình 1.1 Quả me rừng Trên giới, me rừng phân bố chủ yếu khu vực nhiệt đới cận nhiệt đới Trung Quốc, Ấn Độ, Indonesia bán đảo Malaysia [1] Ở nước ta, me rừng mọc phổ biến đồi trọc, bãi hoang, rừng thưa Cây ưa ánh sáng, chịu khô hạn [1] Khóa luận tốt nghiệp 1.2 Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo CÁC NGHIÊN CỨU VỀ DƯỢC TÍNH 1.2.1 Dược tính theo y học cổ truyền Ở Việt Nam: me rừng tính mát, có tác dụng nhuận phế, hóa đờm, sinh tân, thường dùng chữa cảm mạo, phát sốt, ho, đau cổ họng, miệng khô khát; rễ me rừng tính mát, có tác dụng thu liễm giáng áp, dùng chữa viêm ruột, đau bụng ngoài, cao huyết áp; me rừng dùng nấu nước rửa bên ngồi có tác dụng trị lở lt, mẩn ngứa [1] Ở Ấn Độ: me rừng loài thảo dược sử dụng phổ biến Ấn Độ cổ xưa Cây me rừng nguồn giàu vitamin C, có tác dụng phục hồi chức gan, hạ men gan, tăng hấp thụ thức ăn, cân lượng acid dày, tăng cường phổi hệ miễn dịch, kích thích nhuận tràng, hỗ trợ hệ tiết niệu, tốt cho da, mắt tóc [3] 1.2.2 Một số nghiên cứu dược tính + Hoạt tính kháng khuẩn kháng oxi hóa Theo nghiên cứu vào năm 2007 Xiaoli Liu cộng [13] nghiên cứu vào năm 2010 Wei Luo cộng [10], số hợp chất phenol 3-O-galloyl mucic acid 1,4-lactone (33), kaempferol 3-β-D-glucopyranoside (46), kaempferol (47), quercetin (48), isocorilagin (49), geraniin (50), isomallotusinin (59), chebulagic acid (60), chebulanin (61) cô lập chủ yếu từ vỏ me rừng có tác dụng kháng khuẩn kháng oxi hóa hiệu + Hoạt tính kháng herpes simplex virus (HSV) loại loại Năm 2011, Yangfei Xiang cộng [15] thử nghiệm khả kháng viêm nhiễm HSV-1 HSV-2 hợp chất 1,2,4,6-tetra-O-galloyl-β-D-glucose (1246TGG) (62) cô lập từ me rừng Kết cho thấy 1246TGG nồng độ 31.70 µM có khả ức chế phát triển virus Herpes dùng điều trị HSV + Tác dụng phục hồi chức gan hạ men gan Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo Dịch chiết ethanol me rừng có tác dụng hạ men gan, phục hồi chức tế bào gan với liều lượng 75 mg/kg/ngày thử nghiệm chuột [7] + Tác dụng gây độc tế bào ung thư Năm 2011, Xiaoli Liu với cộng [14] tiến hành nghiên cứu khả gây độc tế bào ung thư số hợp chất phenol cô lập từ me rừng Kết cho thấy hai hợp chất isocorilagin (49) geraniin (50) có khả gây độc tế bào ung thư vú (MCF-7) người với IC 50 13.2 80.9 µg/ml Ngồi ra, isocorilagin (49) cịn có tác dụng gây độc tế bào ung thư phổi (HELF) người với IC 50 51,4 µg/ml + Tác dụng phục hồi tổn thương tinh hoàn tác dụng phụ thuốc động kinh Valproic acid sử dụng rộng rãi điều trị bệnh động kinh lại gây tác dụng phụ ảnh hưởng đến khả sinh sản nam giới Theo nghiên cứu vào năm 2015 Sitthichai Iamsaard cộng [8], dịch chiết từ cành me rừng có tác dụng cải thiện nồng độ tinh dịch chuột đực tiêm valproic acid 1.3 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HOÁ HỌC Các nghiên cứu từ năm 1998 trở trước cho thấy me rừng có hợp chất: zeatin (1), zeatin nucleotide (2), zeatin riboside (3), chebulic acid (4), chebulinic acid (5), corilagin (6), 3,6-di-O-galloyl glucose (7), gallic acid (8), ethyl gallate (9), gluco-gallin (10), ellagic acid (11), gibberellin (A1, A3, A4, A7, A9) (1216), leucodelphinidin (17), rutin (18), β-sitosterol (19) [4] Từ 1999-2001, Ying-Jun Zhang cộng nghiên cứu thành phần từ phận khác me rừng Kết cho thấy nhóm tác giả cô lập nhận danh hợp chất sau: phyllaemblic acid (20), phyllaemblicin A-C (21-23), sáu hợp chất phenolic 2-O-galloyl L-malic acid(24), 2-O-galloyl mucic acid (25) ba dẫn xuất methyl ester (26-28), 2-O-galloyl mucic acid 1,4-lactone (29) dẫn xuất methyl ester (30), 5-O-galloyl mucic acid 1,4-lactone (31) dẫn xuất methyl ester (32), 3-O-galloyl mucic acid 1,4-lactone (33), 3,5-di-O-galloyl mucic acid 1,4-lactone (34), phyllaemblic acid B (35) phyllaemblic C (36), phyllaemblicin D (37), với hai hợp chất mới, 2-carboxylmethylphenol 1-O-β-D-glucopyranoside Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo (38) 2,6-dimethoxy-4-(2-hydroxyethyl)phenol 1-O-β-D-glucopyranoside (39), phyllanemblinin A-F (40-45) [9,16,18-20] Năm 2007, Xiaoli Lin cộng cô lập hợp chất từ me rừng, bao gồm: kaempferol 3-β-D-glucopyranoside (46), kaempferol (47), quercetin (48), isocorilagin (49) geraniin (50) Cũng vào năm này, hợp chất phyllanthunin (51) cô lập với hợp chất biết: daucosterol (52), stearic acid (53), lauric acid (54), cinnamic acid (55) [2][13] Năm 2008, S K EL-DESOUKY cộng cô lập hợp chất acylated apigenin glucoside (apigenin-7-O-(6”-butyryl-β-glucopyranoside)) (56) hợp chất khác 1,2,3,4,6-penta-O-galloyglucose (57) Xiaoli Liu cộng cô lập thêm quercetin-3-O-β-D-glucopyranoside (58) [5,12] Từ vỏ me rừng, năm 2011, Wei Lou cộng cô lập isomallotusinin (59), chebulagic acid (60), chebulanin (61) [9] Hợp chất 1,2,4,6-tetra-O- galloyl-β-D-glucose (62) cô lập từ cành me rừng Yangfei Xiang cộng vào năm 2011 [15] Năm 2012, Wei-Yan Qi cộng cô lập β-sitosterol (19), daucosterol (52), 12 hợp chất sterol khác (63-74), có hợp chất sterol 5α,6β,7α-trihydroxysitosterol (64) 7α-acetoxysitosterol (65) từ cành me rừng [11] Các công thức cấu tạo số hợp chất Phyllanthus emblica L NH OH N N OH N N N HO N H (1) N NH O HO P O OH N N O OHOH (2) N N H OH O HO OH N N (3) Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo RO OR O OR OR O HO HOOC O HO O O O COOH O OH O OH HO OH HO HO OH R=Galloyl (6) OH OH HOOC (4) O O O HO O HO O R=Galloyl (5) COOH O OH OR OH RO HO RO O OH HO OH R=Galloyl (7) R2 O O HO O H OR OH R=Galloyl (10) OH (8) R=H (9) R=C2H5 O O HO HO OH O OH HO O OH OH O H OH O H H R1 HO R (13) R=OH (15) R=H (12) R1=R2=OH (14) R1=H, R2=OH (16) R1=R2=H O O 11 ( ) OH OH OH HO O HO O OH OH OR OH O OH OH OH (17) R=Rha-glu (18) O HO O H OH H H HO H H (19) O OH (20) O O O Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo O HO O HO O OH HO HO O O O OH O OH O OH HO HO HO O O (21) OH O HO HO O O O O O O OH (22) O HO O OH HO HO OH HO O HO OH O OH O HO HO O O O O O O O (23) HOOC RO H ORH H OH R1OOC COOR2 H OHOHH R=Galloyl (25) R1=R2=H (26) R1=R2=CH3 (27) R1=H, R2=CH3 (28) R1=CH3, R2=H COOH R=Galloyl (24) O H OR3 OR4 O RO H R1O HO R1O OR2 (29) R1=Galloyl, R2=R3=R4=H (30) R1=Galloyl, R2=R3=H, R4=CH3 (33) R1=R3=R4=H, R2=G (34) R1=R4=H, R2=R3=G O O O H HO OH R=Galloyl (31) R1=H (32) R1=CH3 O Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo OH OH O H H OH R1 O HO OR2 COOH O HOOC (35) R1=OH, R2=H (36) R1=R2=H (37) R1=H, R2=Glu HO OH O OR R=Glu (38) R=Glu (39) HO HO OR O O OG O O O O O O O HO HO OH OH O HO HO OH HO O HO H OH OH R=Galloyl (41) R=Galloyl (40) HO O OR OH HO OH O OR O O O O O O O OR4 O H HOOC R3O R2O OH HO O COOH O OR1 OH (43) R1=G, R2=neoche, R3=R4=H (44) R1=G, R3=neoche, R2=R4=H (45) R1=G, R4= neoche, R2=R3=H OH R=Galloyl (42) Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo R OH HO OH O HO O O OH O O HO OH OH OH O OH HO (46) (47) R=H (48) R=OH HO O HO O HO O HO HO O OR OH O HO HO R=Galloyl (49) HO OH HO OH HO OH O OR O O O OH OR OH O O O O O O O H O HO HO OH O OHOH O OH O O O O HO OH O HO OH OH O R=Galloyl (51) R=Galloyl (50) OH Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo H OH H O HO HO H O OH (52) O O HO HO O R COOH OH (53) R=n-C17H35 (54) R=n-C11H23 OH O O O OH OH O (56) (55) OH OH HO O O OR OH O O OH HO O RO RO OR OH HO OR R=Galloyl (57) (58) OH HO HO OH HO HO OH O O O O OR O O O O OH O O O OH HO O OR O OH HO O HOOC O O O O HO HO HO OH O O O OH OH OH R=Galloyl (59) R=Galloyl (60) 10 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo COOCH3 COOCH3 HO OH HO OH OH OH Methyl gallate Hình 3.1 Một số tương quan HMBC PEAT1 (PEAT1) Bảng 3.1 Dữ liệu phổ hợp chất PEAT1 Vị trí Cacbon Hợp chất PEAT1 (acetone - d ) δ H ppm 2,6 3,5 >C=O -OCH 7.11 (s) 3.78 (s) Methyl gallate (CDCl ) [6] δ C ppm δ C ppm 121.3 109.3 145.6 138.3 166.8 51.5 118.8 107.9 144.1 137.0 165.6 50.4 3.2 KHẢO SÁT CẤU TRÚC HÓA HỌC CỦA HỢP CHẤT PEAT2 Hợp chất PEAT2 thu từ phân đoạn EA1.9.3 bảng có đặc điểm sau: • Hợp chất dạng bột màu vàng • Kết sắc kí lớp mỏng với hệ mơi hexane : acetone : 1, hình thuốc thử H SO 20%, nung nóng bảng mỏng thu vết tròn màu vàng, R f = 0.42 • Phổ 1H-NMR (acetone - d , phụ lục 5), δ H ppm: 8.16 (2H, d, J=9.0 Hz, H-2’ H-6’), 7.02 (2H, d, J=8.5 Hz, H-3’ H-5’), 6.54 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8), 6.27 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6) • Phổ C-NMR (acetone - d , phụ lục 6), δ C ppm: 176.8 (>C=O) Độ dịch 13 chuyển carbon khác trình bày bảng 3.2 19 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo Biện luận cấu trúc Phổ 1H-NMR hợp chất PEAT2 cho tín hiệu cộng hưởng sáu proton vòng thơm vùng δ H 8.16 – 6.27 Trong đó, hai proton ghép cặp ortho cộng hưởng δ H 8,16 (2H, d, J=9.0 Hz), hai proton khác ghép cặp ortho cộng hưởng δ H 7.02 (2H, d, J=8.5 Hz) Ngồi phổ cịn có tín hiệu cộng hưởng hai proton ghép cặp meta δ H 6.54 (1H, d, J=2.0 Hz) 6.27 (1H, d, J=2.0 Hz) Phổ 13 C-NMR kết hợp với phổ HSQC cho thấy hợp chất có 15 carbon cộng hưởng vùng δ C 176.8 – 94.7, có carbon >C=O cộng hưởng δ C 176.8 cho phép dự đoán PEAT2 flavonol Phổ HMBC cho thấy tương quan proton cộng hưởng δ H 8.16 (H-2’ H-6’) với carbon δ C 160.4, 147.2 Hai proton cộng hưởng δ H 7.02 (H-3’ H-5’) tương quan HMBC với carbon δ C 160.4, 123.5 Như vòng B cấu trúc PEAT2 có nhóm –OH vị trí 4’ Mũi cộng hưởng –OH kiềm nối cộng hưởng δ H 12,17 giúp xác định vị trí C-5 mang nhóm -OH Phổ đồ cịn ghi nhận tương quan proton cộng hưởng δ H 6.54 (1H, d, J=2.0 Hz, H-8) với carbon δ C 162.3, 158.0, 99.3; tương quan proton cộng hưởng δ H 6.27 (1H, d, J=2.0 Hz, H-6) với carbon δ C 162.3 Từ liệu phổ NMR kết hợp so sánh với liệu phổ kaempferol [21] cho thấy có tương đồng nên cấu trúc hợp chất PEAT2 đề nghị kaempferol 3' HO 4' OH OH 2' O 1' 5' HO O 6' 10 OH OH OH OH O Kaempferol (PEAT2) O Hình 3.2 Một số tương quan HMBC PEAT2 20 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo Bảng 3.2 Dữ liệu phổ hợp chất PEAT2 Vị trí Cacbon 10 1’ 2’, 6’ 3’, 5’ 4’ Hợp chất PEAT2 (acetone - d ) Kaempferol (acetone - d ) [21] δ H ppm (J, Hz) δ C ppm 6.27 (d, 2.0) 6.54 (d, 2.0) 8.16 (d, 9.0) 7.02 (d, 8.5) - 147.2 136.8 176.8 162.3 99.3 165.2 94.7 158.0 104.0 123.5 130.7 116.5 160.4 δ C ppm 147.1 136.7 176.6 162.4 99.2 165.0 94.5 157.8 104.2 123.4 130.5 116.4 160.2 21 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 KẾT LUẬN Việc khảo sát thành phần hóa học me rừng thu hái Bình Thuận thu kết sau: Từ phân đoạn EA1.9 cao ethyl acetate, sử dụng phương pháp chiết xuất, sắc kí lập hai hợp chất kí hiệu PEAT1 PEAT2 Sử dụng phương pháp phân tích hóa lí đại kết hợp so sánh với liệu tài liệu tham khảo đề nghị cấu trúc PEAT1 PEAT2 methyl gallate kaempferol 3' COOCH3 OH 2' HO 4' O 1' 5' 6' HO OH 10 OH OH Methyl gallate OH O Kaempferol (PEAT1) (PEAT2) 4.2 ĐỀ XUẤT Do hạn chế thời gian nên nhiều phân đoạn em chưa nghiên cứu Trong khóa luận này, em tiến hành phân lập với cao ethyl acetate Vì vậy, thời gian tới, em tiếp tục nghiên cứu cao phân đoạn khác mở rộng nghiên cứu sang khác chi 22 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo TÀI LIỆU THAM KHẢO  TÀI LIỆU TIẾNG VIỆT [1] Đỗ Tất Lợi (2004), Những thuốc vị thuốc Việt Nam, Nhà xuất Y học, trang 695-696  TÀI LIỆU TIẾNG ANH [2] Chun-Bin Yanga, Fan Zhang, Mei-Cai Denga, Guang-Yun Hea, Jian-Min Yuec, Run-Hua Lua (2007), A new ellagitannin from the fruit of Phyllanthus emblica L., Journal of the Chinese Chemical Society, 54, 1615-1618 [3] Ekta Singh, Sheel Sharma, Ashutosh Pareek, Jaya Dwivedi, Sachdev Yadav, Swapnil Sharma (2011), Phytochemistry, traditional uses and cancer chemopreventive activity of Amla (Phyllanthus emblica): The sustainer, Journal of Applied Pharmaceutical Science, 02 (01), 178-183 [4] João B Calixto, Adair R S Santos, Valdir Cechinel Filho, Rosendo A Yunes (1998), A review of the plants of the genus Phyllanthus: their chemistry, pharmacology, and therapeutic potential, Med Res Rev, 18 (4), 225-258 [5] S K El-Desouky, Shi Young Ryu, Young-Kyoon Kim (2008), A new cytotoxic acylated apigenin glucoside from Phyllanthus emblica L., Natural Product Research, 22 (1), 91-95 [6] Samuel Kamatham, Naresh Kumar, Padmaja Gudipalli (2015), Isolation and characterization of gallic acid and methylgallate from the seed coats of givotia rottleriformis griff andtheir anti-proliferative effect on human epidermoidcarcinoma A431 cells, Toxicology Reports, 2, 520-529 [7] Sharma Bhawna, Sharma Upendra Kumar (2010), Hepatoprotective activity of some indigenous plants, International Journal of PharmTech Research, 2(1), 568-572 [8] Sitthichai Iamsaard, Supatcharee Arun, Jaturon Burawat, Wannisa Sukhorum, Porntip Boonruangsri, Malivalaya Namking, Nongnut Uabundit, Somsak Nualkaew, Bungorn Sripanidkulchai (2015), Phyllanthus emblica L branch extract ameliorates testicular damage in Valproic acid-induced rats, Int J Morphol.,33 (3), 1016-1022 23 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo [9] Wei Luo, Lingrong Wen, Mouming Zhao, Bao Yang, Jiaoyan Ren, Guanglin Shen, Guohua Rao (2012), Structural identification of isomallotusinin and other phenolics in Phyllanthus emblica L fruit hull, Food Chemistry, 132, 1527–1533 [10] Wei Luo, Mouming Zhao, Bao Yang, Jiaoyan Ren, Guanglin Shen, Guohua Rao (2011), Antioxidant and antiproliferative capacities of phenolics purified from Phyllanthus emblica L fruit, Food Chemistry, 126, 277-282 [11] Wei-Yan Qi, Ya Li, Lei Hua, Ke Wang, Kun Gao (2013), Cytotoxicity and structure activity relationships of phytosterol from Phyllanthus emblica, Fitoterapia, 84, 252-256 [12] Xiaoli Liu, Chun Cui, Mouming Zhao, Jinshui Wang, Wei Luo, Bao Yang, Yueming Jiang (2008), Identification of phenolics in the fruit of emblica (Phyllanthus emblica L.) and their antioxidant activities, Food Chemistry, 109, 909-915 [13] Xiaoli Liu, Mouming Zhao, Jinshui Wang, Wei Luo (2009), Antimicrobial and antioxidant activity of emblica extracts obtained by supercritical cacrbon dioxide extraction and methanol extraction, Journal of Food Biochemistry, 33, 307-330 [14] Xiaoli Liu, Mouming Zhao, Kegang Wua, Xianghua Chai, Hongpeng Yu, Zhihua Tao, Jinshui Wang (2012), Immunomodulatory and anticancer activities of phenolics from emblica fruit (Phyllanthus emblica L.), Food Chemistry, 131, 685-690 [15] Yangfei Xiang, Ying Pei, Chang Qu, Zhicai Lai, Zhe Ren, Ke Yang, Sheng Xiong, Yingjun Zhang, Chongren Yang, Dong Wang, Qing Liu, Kaio Kitazato, Yifei Wang (2011), In vitro anti‐herpes simplex virus activity of 1,2,4,6‐Tetra‐O‐galloyl‐β‐D‐ glucose from Phyllanthus emblica L (Euphorbiaceae), Phytother Res., 25, 975-982 [16] Ying-Jun Zhang, Takashi Tanaka, Chong-Ren Yang, Isao Kouno (2001), New phenolic constituents from the fruit juice of Phyllanthus emblica, Chem Pharm Bull., 49(5), 537-540 [17] Ying-Jun Zhang, Takashi Tanaka, Yoko Iwamoto, Chong-Ren Yang, Isao Kouno (2000), Novel norsesquiterpenoids from the roots of Phyllanthus emblica, J Nat Prod, 63, 1507-1510 [18] Ying-Jun Zhang, Takashi Tanaka, Yoko Iwamoto, Chong-Ren Yang, Isao Kouno (2000), Phyllaemblic acid, a novel highly oxygenated norbisabolane from the roots of Phyllanthus emblica, Tetrahedron Letters, 41, 1781-1784 24 Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo [19] Ying-Jun Zhang, Takashi Tanaka, Yoko Iwamoto, Chong-Ren Yang, Isao Kouno (2001), Novel sesquiterpenoids from the roots of Phyllanthus emblica, J Nat Prod., 64, 870-873 [20] Ying-Jun Zhang, Tomomi Abe, Takashi Tanaka, Chong-Ren Yang, Isao Kouno (2001), Phyllanemblinins A-F, new ellagitannins from Phyllanthus emblica, J Nat Prod., 64, 1527-1532 [21] Yu-Lan Li, Jun Li, Nai-Li Wang, Xin-Sheng Yao (2008), Flavonoids and a new polyacetylene from Bidens parviflora Willd, Molecules, 13, 1931-1941 25 Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEAT1 (acetone –d 6) Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEAT1 (acetone –d ) Phụ lục Phổ HSQC hợp chất PEAT1 (acetone –d6) Phụ lục Phổ HMBC hợp chất PEAT1 (acetone –d6) Phụ lục Phổ 1H-NMR hợp chất PEAT2 (acetone –d 6) Phụ lục Phổ 13C-NMR hợp chất PEAT2 (acetone –d ) Phụ lục Phổ HSQC hợp chất PEAT2 (acetone –d6) Phụ lục Phổ HMBC hợp chất PEAT2 (acetone –d6) ... Khóa luận tốt nghiệp Huỳnh Nguyễn Thanh Thảo CHƯƠNG IV KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 4.1 KẾT LUẬN Việc khảo sát thành phần hóa học me rừng thu hái Bình Thuận thu kết sau: Từ phân đoạn EA1.9 cao ethyl acetate, ... Chưa khảo sát EA1.7 C : Me 85 : 15 0,24 Vệt dài Chưa khảo sát EA1.8 C : Me 85 : 15 0,31 Vệt dài Chưa khảo sát EA1.9 C : Me : 9.73 Vết rõ ràng Khảo sát EA1.10 C : Me : 0.83 Nhiều vết Chưa khảo sát. .. HỮU CƠ TRONG CAO ETHYL ACETATE Cao ethyl acetate (143.1 g) sắc kí cột silica gel với hệ dung môi hexane: ethyl acetate (80-100% ethyl acetate) , ethyl acetate : methanol (5-100% methanol) Dịch