Nghiên cứu nấm chaetomium đối kháng với nấm colletotrichum gây bệnh thán thư trên cây sầu riêng (khóa luận tốt nghiệp)

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: “NGHIÊN CỨU NẤM Chaetomium ĐỐI KHÁNG VỚI NẤM Colletotrichum GÂY BỆNH THÁN THƯ TRÊN CÂY SẦU RIÊNG” Sinh viên thực : Nguyễn Thị Thanh Thu Khóa : 62 Ngành : Công nghệ sinh học Giảng viên hướng dẫn : TS Nguyễn Đức Thành TS Nguyễn Thanh Hảo HÀ NỘI – THÁNG 01/2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan kết nghiên cứu trình bày khóa luận trung thực, khách quan chưa dùng bảo vệ để lấy học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn, thơng tin trích dẫn luận án rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày 28 tháng 01 năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thu i LỜI CÁM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Đức Thành TS Nguyễn Thanh Hảo tận tình hướng dẫn giúp đỡ động viên tơi q trình thực đề tài hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời chân thành cám ơn tới Ban Giám đốc Viện Di truyền Nông nghiệp, Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt Nam, thầy cô giáo Khoa Công nghệ sinh học trực tiếp giảng dạy trang bị kiến thức bổ ích suốt thời gian học đại học Tơi xin chân thành cám ơn tập thể cán Bộ môn Công nghệ Vi sinh - Viện Di truyền Nông nghiệp nhiệt tình giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho suốt thời gian thực đề tài Tôi xin gửi lời cám ơn chân thành tới tất người thân, bạn bè người bên cạnh động viên giúp đỡ trình học tập thực đề tài Hà Nội, ngày 28 tháng 01 năm 2021 Sinh viên Nguyễn Thị Thanh Thu ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CÁM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii TÓM TẮT ix PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích yêu cầu đề tài 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Cây sầu riêng 2.1.1 Nguồn gốc xuất xứ 2.1.2 Tình hình sản xuất sầu riêng giới 2.1.3 Tình hình sản xuất sầu riêng Việt Nam 2.2 Nấm đối kháng Chaetomium 2.2.1 Giới thiệu chung 2.2.2 Đặc điểm hình thái 2.2.3 Sinh thái phân bố nấm Chaetomium 2.2.4 Nghiên cứu đặc điểm sinh học nấm Chaetomium 2.2.5 Cơ chế đối kháng nấm Chaetomium với nấm bệnh hại trồng 10 2.2.6 Ứng dụng nấm Chaetomium phòng trừ bệnh hại Việt Nam 12 2.3 Nấm Colletotrichum 12 2.3.1 Giới thiệu chung 12 2.3.2 Triệu chứng bệnh 13 iii 2.3.3 Nguyên nhân chế gây bệnh thán thư sầu riêng 13 2.3.4 Biện pháp phòng trừ 14 PHẦN NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 3.1 Vật liệu nghiên cứu 16 3.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 18 3.3 Nội dung nghiên cứu 18 3.4 Phương pháp nghiên cứu 18 3.4.1 Phương pháp phân lập kỹ thuật đặt bẫy giấy 18 3.4.2 Phương pháp đánh giá hiệu lực đối kháng với nấm Colletotrichum sp 19 3.4.3 Phương pháp định danh nấm đối kháng Chaetomium tuyển chọn dựa vào mô tả đặc điểm hình thái kỹ thuật PCR 20 3.4.4 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng, phát triển nấm Chaetomium tuyển chọn 22 3.4.5 Phương pháp đánh giá khả chịu mặn muối NaCl, hoạt tính enzym cellulase nấm Chaetomium tuyển chọn 24 3.4.6 Phương pháp xử lý số liệu thí nghiệm 25 PHẦN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 26 4.1 Phân lập nấm đối kháng Chaetomium 26 4.2 Đánh giá hiệu lực đối kháng với nấm Colletotrichum sp gây bệnh thán thư sầu riêng 29 4.3 Định danh nấm đối kháng Chaetomium tuyển chọn 30 4.3.1 Định danh nấm dựa vào mô tả đặc điểm hình thái 30 4.3.2 Định danh nấm kỹ thuật PCR 32 4.4 Ảnh hưởng số yếu tố đến sinh trưởng, phát triển nấm Chaetomium tuyển chọn 35 4.4.1 Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy 36 4.4.2 Ảnh hưởng nhiệt độ 37 4.4.3 Ảnh hưởng pH 38 4.4.4 Khả đồng hóa cacbon 40 iv 4.4.5 Khả đồng hóa nitơ 41 4.5 Khả chịu mặn muối NaCl hoạt tính enzym cellulase nấm Chaetomium tuyển chọn 42 4.5.1 Khả chịu mặn muối NaCl 42 4.5.2 Khả phân giải cellulose 43 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 45 Kết luận 45 Kiến nghị 45 TÀI LIỆU THAM KHẢO 46 PHỤ LỤC 51 v DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT TT Chữ viết tắt Diễn giải chữ viết tắt C globosum Chaetomium globosum CFU Colony forming unit (Số đơn vị khuẩn lạc) CT Công thức CTAB Cetyl trimethyl ammonium bromide Ctv Cộng tác viên ĐBSCL Đồng Bằng Sông Cửu Long ĐKTN Đường kính tản nấm DNA Deoxyribo nucleic acid NCBI National center for biotechnology information 10 Nts Nucleotides 11 Nxb Nhà xuất 12 PCR Polymerase chain reaction (Phản ứng chuỗi trùng hợp) 13 Sp Species 14 TP HCM Thành phố Hồ Chí Minh vi DANH MỤC BẢNG Bảng Kết phân lập nấm Chaetomium kỹ thuật đặt bẫy giấy 26 Bảng Một số đặc điểm hình thái thể mọc bẫy giấy 27 Bảng Hiệu lực đối kháng mẫu nấm Chaetomium với nấm bệnh Colletotrichum sp môi trường PDA 29 Bảng 4 Đặc điểm hình thái mẫu nấm T-BTR.03 mơi trường PDA 31 Bảng Kết kiểm tra PCR với mẫu nấm đối kháng T-BTR.03 tuyển chọn 33 Bảng Kết tìm kiếm trình tự gần gũi Ngân hàng Gen 34 Bảng Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 36 Bảng Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 37 Bảng Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 39 Bảng 10 Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 40 Bảng 11 Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 41 Bảng 12 Ảnh hưởng muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 42 Bảng 13 Khả phân giải cellulose nấm C globosum T-BTR.03 mơi trường có chất CMC sau ngày nuôi cấy 43 vii DANH MỤC HÌNH Hình Đặc điểm hình thái nấm Chaetomium globosum Hình Phân lập nấm kỹ thuật đặt bẫy giấy 28 Hình Đánh giá hiệu lực đối kháng kỹ thuật đồng nuôi cấy môi trường PDA mẫu nấm T-BTR.03 sau ngày nuôi cấy 30 Hình Đặc điểm hình thái mẫu nấm T-BTR.03 32 Hình 4 Cây phả hệ dựa trình tự vùng 5’ gen tub2 mẫu nấm Chaetomium spp 35 Hình Ảnh hưởng mơi trường ni cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 37 Hình Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 mơi trường PDA 38 Hình Ảnh hưởng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 39 Hình Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 41 Hình Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 42 Hình 10 Ảnh hưởng nồng độ muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm đối kháng C globosum T-BTR.03 môi trường PDA 43 Hình 11 Hoạt tính phân giải cellulose nấm đối kháng C globosum TBTR.03 môi trường có chất CMC sau ngày ni cấy 44 viii TÓM TẮT Sầu riêng đánh giá trồng cho suất kinh tế cao Gần bệnh thán thư sầu riêng diễn biến phức tạp ngày lan rộng ảnh hưởng đến suất chất lượng trồng Để khắc phục tình trạng bệnh giảm thiểu việc sử dụng thuốc hóa học gây nhiễm mơi trường Chúng tơi hướng tới biện pháp sinh học an toàn cách lợi dụng vi sinh vật đối kháng Trong có nấm thuộc chi Chaetomium có khả cạnh tranh mạnh với nấm bệnh, đối kháng cao với tác nhân gây bệnh loài Chaetomium globosum Chúng tiến hành phân lập tuyển chọn mẫu nấm có khả đối kháng với nấm Colletotrichum có mẫu T-BTR.03 có hiệu lực ức chế cao (51,4%) so với mẫu nấm lại Nấm T-BTR.03 định danh loài Chaetomium globosum T-BTR.03 Tiến hành đánh giá khả sinh trưởng nấm số điều kiện môi trường cho thấy: nấm phát triển tối ưu môi trường PDA với nhiệt độ 25oC, pH 8, nguồn cacbon mannitol, nguồn nitơ NaNO có khả chịu mặn cao với nồng độ – 5% NaCl Nấm Chaetomium globosum T-BTR.03 có khả phân giải cellulose ix 39 Soytong K., S Kanokmadhakul, V Kukongviriyapa, and M Isobe (2001) Application of Chaetomium species (Ketomium®) as a new broad spectrum biological fungicide for plant disease control: a review article Fungal Diversity pp 1-15 40 Tamura K., D Peterson, N Peterson, G Stecher, M Nei, and S Kumar (2013) MEGA5: molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods Molecular Biology and Evolution Vol 28 (10) pp 2731-2739 41 Thiep N V., and K Soytong (2015) Chaetomium spp as biocontrol potential to control tea and coffee pathogens in Vietnam Journal of Agricultural Technology Vol 11 (6) pp 1381-1392 42 Thongkham D., Soytong, K., Kanokmedhakul, S., and Kanokmedhakul, K (2018) Nano-particles derived from Chaetomium elatum against Phytophthora rot of durian International Journal of Agricultural Technology Vol 14 (7 Special Issue) pp 2115-2124 43 Tongon R., Soytong, K., Kanokmedhakul, S., and Kanokmedhakul, K (2018) Nano-particles from Chaetomium brasiliense to control Phytophthora palmivora caused root rot disease in durian var Montong International Journal of Agricultural Technology Vol 14 (7 Special Issue) pp 2163-2170 44 UniProt Knowledgebase (2020) Chaetomium globosum (soil fungus) Retrieved on 28 november 2020 at https://www.uniprot.org/taxonomy/38033 45 von Arx J A., J Guarro, and M J Figueras (1986) Ascomycete genus Chaetomium Beih Nova Hedwigia Vol 84 pp 1-162 46 Wang X W., L Lombard, J Z Groenewald, J Li, S I R Videira, R A Samson, and P W Crous (2016) Phylogenetic reassessment of the Chaetomium globosum species complex Persoonia-Molecular Phylogeny and Evolution of Fungi Vol 36 pp 83-133 47 Wang Y., Xu, L., Ren, W., Zhao, D., Zhu, Y., and Wu, X (2012) Bioactive metabolites from Chaetomium globosum L18, an endophytic fungus in the medicinal plant Curcuma wenyujin Phytomedicine Vol 19 (3-4) pp 364-368 50 48 Zhang G., Zhang, Y., Qin, J., Qu, X., Liu, J., Li, X., and Pan, H (2013) Antifungal metabolites produced by Chaetomium globosum No 04, an endophytic fungus isolated from Ginkgo biloba Indian Journal of Microbiology Vol 53 (2) pp 175180 PHỤ LỤC 1) Phân tích phả hệ 51 Bảng Các lồi nấm Chaetomium spp dùng phân tích phả hệ vùng gen TUB2 Tên loài Mẫu phân lập Mã truy cập Ngân Nguồn gốc mẫu phân lập hàng Gen Quốc gia C ascotrichoides CBS 113.83T KC109770 Rễ Argentina C ascotrichoides CBS 110.83T KC109771 Đất Israel C citrinum CBS 693.82T KT214764 Đất Nhật Bản C cochliodes CBS 155.52T KC109772 Phân động vật Hoa Kỳ C cochliodes CGMCC JN256145 Rễ Trung Quốc 3.9440 C cochliodes DTO 013-C2 KX976947 Không rõ Hà Lan C cochliodes DTO 089-E2 KX976948 Không rõ Hà Lan C elatum CBS 910.70T KC109775 Tàn dư thực vật Đức C elatum CBS 374.66T KC109776 Tàn dư thực vật Hoa Kỳ C fimeti CBS 139034T KT214736 Đất Đức C interruptum CBS 126660T KT214741 Rễ Iran C globosporum CBS 108.83T KC109768 Rễ Ấn Độ C globosum CBS 164.62T JN256190 Không rõ Ba Lan C globosum CBS 371.66T JN256148 Giấy Hoa Kỳ C globosum CBS 147.60T JN256179 Áo tơi Hoa Kỳ C globosum XJ160930 KY355135 Không rõ Trung Quốc Achaetomium CBS 333.67T AY681238 Đất Trung Quốc strumarium Ghi chú: * Mẫu chuẩn loài (type species) PHỤ LỤC XỬ LÝ THỐNG KÊ 52 1) Ảnh hưởng môi trường nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE MT 27/ 1/** 4: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3_NSC NDT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1365.68 682.840 427.66 0.000 * RESIDUAL 9.58005 1.59667 * TOTAL (CORRECTED) 1375.26 171.908 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE MT 27/ 1/** 4: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 2560.38 1280.19 969.84 0.000 * RESIDUAL 7.91997 1.32000 * TOTAL (CORRECTED) 2568.30 321.038 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE MT 27/ 1/** 4: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3471.26 1735.63 ****** 0.000 * RESIDUAL 4.37984 729974 * TOTAL (CORRECTED) 3475.64 434.455 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9_NSC FILE MT 27/ 1/** 4: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V006 9_NSC Cuchuoi LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 3216.02 1608.01 ****** 0.000 * RESIDUAL 2.96006 493344 * TOTAL (CORRECTED) 3218.98 402.373 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MT 27/ 1/** 4: 53 PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ PDA PCA CMA NOS 3 3_NSC 52.2000 40.0000 22.2000 5_NSC 74.4000 64.1000 34.6000 7_NSC 82.2000 83.3000 41.1000 9_NSC 90.0000 90.0000 49.9000 SE(N= 3) 0.729537 0.663324 0.493279 0.405522 5%LSD 6DF 2.52359 2.29454 1.70633 1.40276 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MT 27/ 1/** 4: PAGE Anh huong cua moi truong nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC 9_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 38.133 57.700 68.867 76.633 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.111 1.2636 3.3 0.0000 17.918 1.1489 2.0 0.0000 20.844 0.85438 1.2 0.0000 20.059 0.70238 0.9 0.0000 54 | | | | 2) Ảnh hưởng nhiệt độ nuôi cấy đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE ND1 27/ 1/** 4:12 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3_NSC NDT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 6598.58 3299.29 ****** 0.000 * RESIDUAL 1.71985 286641 * TOTAL (CORRECTED) 6600.30 825.037 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE ND1 27/ 1/** 4:12 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 9446.64 4723.32 ****** 0.000 * RESIDUAL 4.11961 686601 * TOTAL (CORRECTED) 9450.76 1181.34 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE ND1 27/ 1/** 4:12 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 11130.3 5565.16 ****** 0.000 * RESIDUAL 1.85909 309849 * TOTAL (CORRECTED) 11132.2 1391.52 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 9_NSC FILE ND1 27/ 1/** 4:12 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V006 9_NSC Cuchuoi LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 8978.00 4489.00 ****** 0.000 * RESIDUAL 979425 163237 * TOTAL (CORRECTED) 8978.98 1122.37 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE ND1 27/ 1/** 4:12 55 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ 25oC 30oC 35oC NOS 3 3_NSC 60.0000 56.3000 0.800000 5_NSC 78.1000 80.3000 10.5000 7_NSC 90.0000 90.0000 15.4000 9_NSC 90.0000 90.0000 23.0000 SE(N= 3) 0.309107 0.478400 0.321377 0.233265 5%LSD 6DF 1.06925 1.65486 1.11169 0.806900 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE ND1 27/ 1/** 4:12 PAGE Anh huong cua nhiet nuoi cay den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC 9_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 39.033 56.300 65.133 67.667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 28.723 0.53539 1.4 0.0000 34.371 0.82861 1.5 0.0000 37.303 0.55664 0.9 0.0000 33.502 0.40403 0.6 0.0000 56 | | | | 3) Ảnh hưởng ngưỡng pH đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE PH 27/ 1/** 4:19 PAGE Anh huong cua pH moi truong den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3_NSC NDT LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 434.340 217.170 723.87 0.000 * RESIDUAL 1.80006 300011 * TOTAL (CORRECTED) 436.140 54.5175 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE PH 27/ 1/** 4:19 PAGE Anh huong cua pH moi truong den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 1800.14 900.070 950.77 0.000 * RESIDUAL 5.68006 946677 * TOTAL (CORRECTED) 1805.82 225.728 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE PH 27/ 1/** 4:19 PAGE Anh huong cua pH moi truong den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 24.5000 12.2500 23.56 0.002 * RESIDUAL 3.12001 520001 * TOTAL (CORRECTED) 27.6200 3.45250 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE PH 27/ 1/** 4:19 PAGE Anh huong cua pH moi truong den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ pH pH pH NOS 3 3_NSC 33.2000 46.4000 49.1000 5_NSC 55.3000 79.1000 89.0000 7_NSC 86.5000 90.0000 90.0000 SE(N= 3) 0.316233 0.561746 0.416334 5%LSD 6DF 1.09390 1.94317 1.44016 - 57 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE PH 27/ 1/** 4:19 PAGE Anh huong cua pH moi truong den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 42.900 74.467 88.833 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 7.3836 0.54773 1.3 0.0000 15.024 0.97297 1.3 0.0000 1.8581 0.72111 0.8 0.0018 58 | | | | 4) Ảnh hưởng nguồn cacbon đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3NSC FILE 4CB 27/ 1/** 4:24 PAGE Anh huong cua nguon cac bon den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 174.300 58.1000 294.17 0.000 * RESIDUAL 1.58002 197503 * TOTAL (CORRECTED) 11 175.880 15.9891 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5NSC FILE 4CB 27/ 1/** 4:24 PAGE Anh huong cua nguon cac bon den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 122.723 40.9075 43.75 0.000 * RESIDUAL 7.47999 934999 * TOTAL (CORRECTED) 11 130.203 11.8366 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7NSC FILE 4CB 27/ 1/** 4:24 PAGE Anh huong cua nguon cac bon den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 384.742 128.247 167.10 0.000 * RESIDUAL 6.14004 767505 * TOTAL (CORRECTED) 11 390.883 35.5348 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 4CB 27/ 1/** 4:24 PAGE Anh huong cua nguon cac bon den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ Glu Manni Sacc Mat SE(N= 5%LSD 3) 8DF NOS 3 3 3NSC 39.2000 45.4000 42.3000 35.1000 5NSC 56.6000 58.2000 50.3000 52.2000 7NSC 75.5000 86.2000 88.4000 90.0000 0.256582 0.836688 0.558271 1.82046 0.505801 1.64937 59 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 4CB 27/ 1/** 4:24 PAGE Anh huong cua nguon cac bon den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3NSC 5NSC 7NSC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 40.500 12 54.325 12 85.025 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 3.9986 0.44441 1.1 0.0000 3.4404 0.96695 1.8 0.0001 5.9611 0.87607 1.0 0.0000 60 | | | | 5) Ảnh hưởng nguồn nitơ đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE 5CT 27/ 1/** 4:33 PAGE Anh huong cua nguon nito den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3_NSC Thanhf LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 227.063 75.6875 190.41 0.000 * RESIDUAL 3.18000 397501 * TOTAL (CORRECTED) 11 230.243 20.9311 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE 5CT 27/ 1/** 4:33 PAGE Anh huong cua nguon nito den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 79.5900 26.5300 31.87 0.000 * RESIDUAL 6.66000 832500 * TOTAL (CORRECTED) 11 86.2500 7.84091 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE 5CT 27/ 1/** 4:33 PAGE Anh huong cua nguon nito den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 215.242 71.7475 142.78 0.000 * RESIDUAL 4.02001 502502 * TOTAL (CORRECTED) 11 219.262 19.9329 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 5CT 27/ 1/** 4:33 PAGE Anh huong cua nguon nito den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ CT1 CT2 CT3 CT4 SE(N= 5%LSD 3) 8DF NOS 3 3 3_NSC 38.5000 32.1000 44.4000 38.3000 5_NSC 68.2000 63.7000 70.4000 69.5000 7_NSC 89.1000 80.3000 90.0000 82.1000 0.364006 1.18699 0.526783 1.71778 0.409268 1.33458 61 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 5CT 27/ 1/** 4:33 PAGE Anh huong cua nguon nito den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC GRAND MEAN (N= 12) NO OBS 12 38.325 12 67.950 12 85.375 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 4.5751 0.63048 1.6 0.0000 2.8002 0.91241 1.3 0.0001 4.4646 0.70887 0.8 0.0000 62 | | | | 6) Ảnh hưởng muối NaCl đến sinh trưởng, phát triển nấm C globosum T-BTR.03 môi trường PDA BALANCED ANOVA FOR VARIATE 3_NSC FILE 6MUOI 27/ 1/** 4:37 PAGE Anh huong cua muoi NaCl den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V003 3_NSC Kuchuoiyata LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 224.780 112.390 149.85 0.000 * RESIDUAL 4.49998 749997 * TOTAL (CORRECTED) 229.280 28.6600 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 5_NSC FILE 6MUOI 27/ 1/** 4:37 PAGE Anh huong cua muoi NaCl den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V004 5_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 669.140 334.570 256.05 0.000 * RESIDUAL 7.84000 1.30667 * TOTAL (CORRECTED) 676.980 84.6225 BALANCED ANOVA FOR VARIATE 7_NSC FILE 6MUOI 27/ 1/** 4:37 PAGE Anh huong cua muoi NaCl den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 VARIATE V005 7_NSC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT$ 183.140 91.5700 87.77 0.000 * RESIDUAL 6.26000 1.04333 * TOTAL (CORRECTED) 189.400 23.6750 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 6MUOI 27/ 1/** 4:37 PAGE Anh huong cua muoi NaCl den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 MEANS FOR EFFECT CT$ CT$ NaCl 1% NaCl 3% NaCl 5% NOS 3 3_NSC 31.5000 31.3000 20.8000 5_NSC 70.3000 75.4000 55.1000 7_NSC 90.0000 89.3000 80.1000 SE(N= 3) 0.499999 0.659966 0.589727 5%LSD 6DF 1.72958 2.28293 2.03996 - 63 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 6MUOI 27/ 1/** 4:37 PAGE Anh huong cua muoi NaCl den duong kinh tan nam C globosum T-BTR.03 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE 3_NSC 5_NSC 7_NSC GRAND MEAN (N= 9) NO OBS 27.867 66.933 86.467 STANDARD DEVIATION C OF V |CT$ SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 5.3535 0.86602 3.1 0.0000 9.1990 1.1431 1.7 0.0000 4.8657 1.0214 1.2 0.0001 64 | | | |