(Luận văn) nghiên cứu quy trình ra ngôi sau in vitro cho cây lan kim tuyến anoectochilus staceus blume

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MAI THỊ NGỌC CHÂM lu an n va p ie gh tn to Đề tài: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH RA NGƠI SAU IN VITRO CHO CÂY LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus setaceus Blume) Ở GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM nl w d oa KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC nf va an lu lm ul : Chính quy : Nông lâm kế t hơ ̣p : Lâm nghiêp̣ : 2011-2015 z at nh oi Hê ̣đào ta ̣o Chuyên ngành Khoa Khóa học z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên - 2015 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM MAI THỊ NGỌC CHÂM lu an n va p ie gh tn to Đề Tài: NGHIÊN CỨU QUY TRÌNH RA NGƠI SAU IN VITRO CHO CÂY LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus setaceus Blume) Ở GIAI ĐOẠN VƢỜN ƢƠM d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC nf va an lu : Chính quy : Nông lâm kế t hơ ̣p : 43 - NLKH : Lâm nghiêp̣ : 2011-2015 : PGS.TS Trần Thị Thu Hà z at nh oi lm ul Hê ̣đào ta ̣o Chuyên ngành Lớp Khoa Khóa học Giảng viên hƣớng dẫn z m co l gm @ an Lu Thái Nguyên - 2015 n va ac th si CỘNG HÕA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc GIẤY XÁC NHẬN THỰC TẬP TỐT NGHIỆP lu an n va to Viện nghiên cứu phát triển Lâm Nghiệp - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên xác nhận: Sinh viên : Mai Thị Ngọc Châm Lớp : 43NLKH Khoa : Lâm Nghiệp Trường : Đại học Nông Lâm Thái Nguyên Đã thực tập tốt nghiệp Viện nghiên cứu phát triển Lâm Nghiệp Trường Đại Học Nông Lâm Thái Nguyên để thực nghiên cứu đề tài: p ie gh tn “Nghiên cứu quy trình ngơi sau in vitro cho lan Kim Tuyến (Anoectochilus staceus Blume)” Trong thời gian thực tập từ ngày / /2015 đến ngày / /2015 Chúng nhận thấy: Sinh viên Mai Thị Ngọc Châm có ý thức kỉ luật tốt, chấp hành tốt nội quy quan, tích cực việc tiến hành nghiên cứu, thu thập số liệu phục vụ cho đề tài, chịu khó tìm tịi, học hỏi cô, chú, anh chị quan nội dung nghiên cứu Chúng xác nhận sinh viên Mai Thị Ngọc Châm hết thời gian thực tập Đề nghị Ban chủ nhiệm khoa Lâm Nghiệp trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên thầy cô giáo tạo điều kiện giúp đỡ sinh viên Mai Thị Ngọc Châm hồn thành tốt đề tài d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ Thái Nguyên, ngày Tháng Năm 2015 Xác nhận quan nơi thực tập an Lu n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan rằng, số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố Tôi xin cam đoan rằng, giúp đỡ việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Thái nguyên, ngày 30 tháng 05 năm 2015 Ngƣời viết cam đoan XÁC NHẬN CỦA GVHD Đồng ý cho bảo vệ kết lu trước Hội đồng khoa học an n va tn to Mai Thị Ngọc Châm p ie gh PGS TS Trần Thị Thu Hà d oa nl w lu nf va an XÁC NHẬN CỦA GV CHẤM PHẢN BIỆN Giáo viên chấm phản biện xác nhận sinh viên lm ul sửa chứa sai sót sau Hội đồng chấm yêu cầu z at nh oi z m co l gm @ an Lu n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Được trí Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Lâm nghiệp em tiến hành thực đề tài: “Nghiên cứu quy trình ngơi sau in vitro cho lan Kim Tuyến (Anoectochilus staceus Blume) giai đoạn vƣờn ƣơm” Qua thời gian làm việc phịng ni cấy mơ nhà lưới Viện nghiên cứu phát triển Lâm nghiệp đến em hoàn thành đề tài Để đạt kết ngày hôm em xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu lu an nhà trường, Ban chủ nhiệm khoa Lâm nghiệp thầy cô giáo n va môn tạo điều kiện giúp đỡ em suốt thời gian qua tn to Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới giảng viên PGS.TS Trần Thị ie gh Thu Hà anh chị quan tận tình bảo, hướng dẫn em p thời gian thực đề tài nl w Cuối cùng, em xin chân thành cảm ơn gia đình, thầy cơ, bạn bè hết oa lòng động viên giúp đỡ tạo điều kiện vật chất tinh thần cho em d trình học tập nghiên cứu an lu nf va Mặc dù thân cố gắng đề tài em tránh khỏi sai sót Em mong nhận đóng góp thầy lm ul bạn để đề tài em hoàn thiện z at nh oi Em xin chân thành cảm ơn ! z Thái Nguyên, ngày 26 tháng 05 năm 2015 Sinh viên thực co l gm @ Châm m Mai Thị Ngọc Châm an Lu n va ac th si ii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT ADN : Ạid deoxyribonucleic CT : Công thức Đ/C : Đối chứng IAA : Indol acetic acid MS : Murashige and Skoog’s NAA : α - Naphlene axetic acid cs : Cộng lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si iii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 4.1: Ảnh hưởng thời gian cảm ứng ánh sáng tự nhiên lan Kim Tuyến trước thời gian sau 30 ngày 30 Bảng 4.2: Ảnh hưởng giá thể đến tỷ lệ sống sinh trưởng phát triển giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày 33 Bảng 4.3: Tác dụng số thuốc nấm đến giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày 35 lu Bảng 4.4: Ảnh hưởng dinh dưỡng tới tỷ lệ sống (%) phát triển an n va giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày 38 tn to Bảng 4.5: Ảnh hưởng chu kì bón phân đến sinh trưởng, phát triển p ie gh giai đoạn sau in vitro sau 30 ngày 40 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1 Biểu đồ ảnh hưởng thời gian cảm ứng ánh sáng tự nhiên trước 31 Hình 4.2 Biểu đồ ảnh hưởng giá thể tới tỷ lệ sống (%) sinh trưởng phát triển sau 20 ngày 33 Hình 4.3: Biểu đồ tác dụng số thuốc nấm đến giai đoạn in vitro sau 20 ngày 36 Hình 4.4 Biểu đồ ảnh hưởng dinh dưỡng tới tỷ lệ sống (%) phát lu an triển giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày 38 n va Hình 4.5: Biểu đồ ảnh hưởng chu kỳ bón phân đến sinh trưởng phát p ie gh tn to triển giai đoạn sau in vitro sau 30 ngày 40 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si v MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT ii DANH MỤC CÁC BẢNG iii DANH MỤC CÁC HÌNH iv MỤC LỤC v Phần 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề lu an 1.2 Mục đích nghiên cứu n va 1.3 Mục tiêu nghiên cứu tn to 1.4 Ý nghĩa nghiên cứu gh 1.4.1 Ý nghĩa học tập nghiên cứu khoa học p ie 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU w oa nl 2.3 Giới thiệu chung hoa lan 2.3.1 Nguồn gốc d an lu 2.3.2 Hình thái nf va 2.4 Tổng quan lan Kim Tuyến 12 2.4.1 Phân loại 12 lm ul 2.4.2 Đặc điểm thực vật học lan Kim Tuyến 13 z at nh oi 2.4.3 Đặc điểm phân bố 14 2.4.4 Số lượng quần thể 15 z 2.4.5 Giá trị lan Kim Tuyến 15 gm @ 2.4.6 Tình hình nghiên cứu lan Kim Tuyến giới, nước 16 2.5 Giá thể cho giai đoạn sau in vitro 18 l co 2.5.1 Đặc điểm 18 m 2.5.2 Giá thể trồng 19 an Lu 2.6 Tổng quan khu vực nghiên cứu 22 n va ac th si vi Phần 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG, PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 25 3.1 Đối tượng nghiên cứu phạm vi nghiên cứu 25 3.1.1 Đối tượng nghiên cứu 25 3.1.2 Phạm vi nghiên cứu 25 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 25 3.3 Nội dung nghiên cứu 25 3.4 Phương pháp nghiên cứu 26 3.4.1 Điều kiện thí nghiệm 26 3.4.2 Tiến hành thí nghiệm 26 lu an 3.4.3 Chỉ tiêu theo dõi phương pháp thu thập 29 n va 3.5 Phương Pháp xử lý số liệu 29 4.1 Nghiên cứu ảnh hưởng thời gian cảm ứng ánh sáng tự nhiên gh tn to Phần 4: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 30 ie trước 30 p 4.2 Nghiên cứu ảnh hưởng giá thể đến phát triển giai đoạn nl w sau in vitro 32 d oa 4.3 Nghiên cứu tác dụng số thuốc nấm đến giai đoạn sau in an lu vitro sau 20 ngày 35 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng dinh dưỡng tới phát triển giai nf va đoạn sau in vitro sau 20 ngày 37 lm ul 4.5 Nghiên cứu ảnh hưởng chu kỳ bón phân đến sinh trưởng, phát z at nh oi triển giai đoạn sau in vitro sau 30 ngày 39 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 42 5.1 Kết luận 42 z TÀI LIỆU THAM KHẢO m co l PHỤ LỤC gm @ 5.2 Đề nghị 43 an Lu n va ac th si 37 4.4 Nghiên cứu ảnh hƣởng dinh dƣỡng tới phát triển giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày Cây in vitro sống điều kiện nhân tạo cung cấp đầy đủ dinh dưỡng đưa vườn ươm chuyển sang giai đoạn sống quang tự dưỡng Dựa vào thí nghiệm 2, tơi chọn giá thể xơ dừa để thực thí nghiệm Công thức (đối chứng) CT1 (ĐC): Không phun dinh dưỡng Công thức (CT2): Phun dinh dưỡng A1 (phân đầu trâu NPK) lu Công thức (CT3): Phun dinh dưỡng A2 (phân bón lá) an Cơng thức (CT4): Phun dinh dưỡng A3 (dung dịch MS/2) va n Mỗi công thức trồng 50 lặp lại lần, thực phun nước giữ gh tn to ẩm cho sau ngày phun dinh dưỡng, liều lượng lít/ 1m2 giá ie thể/ngày, ngày phun lần, trồng chưa ổn định rễ nên p phun dạng phun sương Sau 20 ngày trồng điều kiện nhà lưới thực nl w đo đếm tiêu sinh trưởng tỷ lệ sống Kết thí d oa nghiệm thể bảng sau nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 38 Bảng 4.4: Ảnh hưởng dinh dưỡng tới tỷ lệ sống (%) phát triển giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày STT Công thức Tỷ lệ Tăng chiều Tăng số lá Tăng số rễ sống (%) cao (cm) (chiếc) (chiếc) CT1(ĐC) 78 0,64 0,86 0,33 CT2 89 1,07 1,16 0,60 CT3 77 1,66 0,92 0,43 CT4 77 1,53 0,73 0,25 lu an va n 1.8 1.4 gh tn to 1.6 Tăng chiều cao (cm) p ie 1.2 d oa 0.4 nl 0.6 Tăng số rễ (chiếc) w 0.8 Tăng số lá (chiếc) lu 0.2 CT1 nf va an CT2 CT3 CT4 lm ul Hình 4.4 Biểu đồ ảnh hưởng dinh dưỡng tới tỷ lệ sống (%) phát z at nh oi triển giai đoạn sau in vitro sau 20 ngày Qua bảng 4.4 hình 4.4, cho thấy việc bổ sung dinh dưỡng quan z trọng Ở công thức phun dinh dưỡng phân đầu trâu có ảnh @ gm hưởng rõ rệt tới sinh trưởng giai đoạn sau in vitro đạt l tiêu như: Tỷ lệ sống 89%, tăng chiều cao 1,88cm/cây, tăng số 1,16 m co chiếc/cây, tăng số rễ 0,60 chiếc/cây Trái với cơng thức cơng thức an Lu không phun dinh dưỡng đạt tỷ lệ sống 78%, tăng chiều cao 1,64cm/cây, tăng số 0,86 chiếc/cây, tăng số rễ 0,33 chiếc/cây Cơng thức có tỷ lệ sống n va ac th si 39 đạt 77%, tăng chiều cao 1,66cm/cây, tăng số 0,92 chiếc/cây, tăng số rễ 0,43 rễ/cây Cơng thức có tỷ lệ sống đạt 77%, tăng chiều cao 1,53cm/cây, tăng số 0,73 chiếc/cây, số rễ 0,25 chiếc/cây Từ kết nghiên cứu phân tích đây, đưa kết luận việc phun dinh dưỡng cho lan Kim Tuyến giai đoạn sau in vitro cần thiết cho phát triển tất phận Phun dinh dưỡng có tỷ lệ NPK 1:1:2 tức 12mg/l NH4NO3 + 33mg/l NH4H2PO4 + 87mg/l KNO3 có bổ sung 20mg/l CaCl2 35mg/l MgSO4, liều lượng lít/1m giá thể/ngày, chu kỳ lu ngày/lần có hiệu tốt an 4.5 Nghiên cứu ảnh hƣởng chu kỳ bón phân đến sinh trƣởng, va n phát triển giai đoạn sau in vitro sau 30 ngày to gh tn Mỗi loại cần bổ sung phân bón để nguồn dinh dưỡng ni kích thích sinh trưởng phát triển tốt Với lan Kim ie p Tuyến giai đoạn sau in vitro chu kỳ bón phân định nhiều đến khả nl w sinh trưởng phát triển Từ thí nghiệm tơi chọn loại oa phân bón thích hợp để thực thí nghiệm phân đầu trâu NPK d Thành phần dinh dưỡng 1: 1: tức 12 mg/l NH4NO3 + 33 mg/l an lu NH4H2PO4 + 87 mg/l KNO3 có bổ sung 20 mg/l CaCl2 35 mg/l MgSO4, nf va liều lượng lít/1m giá thể/ngày, chu kỳ ngày/lần (dung dịch lm ul pha chế theo hướng dẫn bao bì sản phẩm) Sau trồng giá thể xơ z at nh oi dừa ngày phun CT1 ( ngày/lần), sau ngày phun CT2 (7 ngày/lần), sau 10 ngày phun CT3 (10 ngày/lần), sau 15 ngày phun CT4 (15 ngày/lần) Sau 30 ngày tơi tiến hành kiểm tra tiêu sinh trưởng z m co l gm @ phát triển an Lu n va ac th si 40 Bảng 4.5: Ảnh hưởng chu kì bón phân đến sinh trưởng,phát triển giai đoạn in vitro sau 30 ngày STT Công thức Tỷ lệ Tăng chiều Tăng số lá Tăng số rễ sống (%) cao (cm) (chiếc) (chiếc) CT1 65 1,48 0,63 0,41 CT2 89 1,74 0,98 0,63 CT3 77 1,6 0,8 0,51 CT4 68 1,52 0,87 0,30 lu an n va gh tn to 1,8 1,6 1,4 1,2 0,8 0,6 0,4 0,2 ie Tăng chiều cao (cm) p Tăng số (chiếc) d oa nl w Tăng số rễ (chiếc) an lu CT2 CT3 nf va CT1 CT4 lm ul Hình 4.5: Biểu đồ ảnh hưởng chu kỳ bón phân đến sinh trưởng phát triển giai đoạn sau in vitro sau 30 ngày z at nh oi Qua bảng 4.5 hình 4.5, tơi thấy chu kỳ bón phân ảnh hưởng lớn tới khả sinh trưởng phát triển giai đoạn vườn trồng Các công z thức có tỷ lệ sống chênh lệch cao CT1 đạt 65% CT4 đạt @ gm 68%, CT3 đạt 77%, trái với cơng thức CT2 có chu kỳ bón phân co l ngày/lần có tỷ lệ sống đạt 88% Ở CT1 chu kỳ bón phân dày dẫn m đến việc thừa chất dinh dưỡng làm cho rễ thân bị úng dẫn tới an Lu thối phát triển Ở CT3 tiêu phát triển bình thường n va ac th si 41 tăng chiều cao 1,6cm/cây, tăng số 0,8 chiếc/cây, tăng số rễ 0,51 rễ/cây, đặc điểm cây, to khỏe, có màu xanh sẫm, rễ mập dài Ở CT1 CT4 tiêu phát triển kém, CT1 có tăng chiều cao đạt 1,48cm/cây, tăng số 0,63 chiếc/cây, tăng số rễ 0,41 chiếc/cây, CT4 có tiêu sinh trưởng tăng chiều cao 1,52cm, tăng số 0,87 chiếc, tăng số rễ 0,30 Qua kết nghiên cứu phân tích thí nghiệm, tơi đưa kết luận: Chu kỳ phun dinh dưỡng thích hợp cho lan Kim Tuyến giai đoạn lu vườn ươm sau in vitro chu kì sau ngày phun lần, chu kỳ phun dinh an dưỡng đạt tiêu sinh trưởng phát triển cao với tỷ lệ sống va n 89%, tăng chiều cao 1,74cm, tăng số 0,98 chiếc, tăng số rễ 0,63 p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si 42 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Từ trình nghiên cứu quy trình ngơi sau in vitro cho Lan kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume )‖ giai đoạn vườn ươm, rút số kết luân đề nghị sau: 5.1 Kết luận Từ kết nghiên cứu rút số kết luận sau: - Ảnh hưởng thời gian cảm ứng ánh sáng tự nhiên lu an trước cần thiết cho thí nghiệm mốc thời gian n va cảm ứng ánh sáng ảnh hưởng tới tỷ lệ sống sinh trưởng cây, tn to mốc thời gian cảm ứng ngày, ngày, 10 ngày 15 ngày thời gian gh cảm ứng ánh sáng tốt 10 ngày, mốc thời gian kết đạt p ie cao so với mốc thời gian lại có tỷ lệ sống đạt 91% w - Các loại giá thể khác có ảnh hưởng đến sinh trưởng oa nl sau in vitro giai đoạn vườn ươm So sánh loại giá thể cát, xơ d dừa, đất + mùn cưa + phân ủ hoai giá thể xơ dừa thích hợp cho điều kiện lu sống 88% nf va an sinh trưởng lan Kim Tuyến sau in vitro Ở loại giá thể đạt tỷ lệ lm ul - Thuốc trừ nấm thích hợp cho lan Kim Tuyến giai đoạn sau z at nh oi in vitro nấm Ridomin Gold Tỷ lệ sống 88% cao so với thuốc trừ nấm Anvil có tỷ lệ sống 84% z - Việc cung cấp chất dinh dưỡng cho giai đoạn sau in vitro @ gm cần thiết để tăng số sinh trưởng tỷ lệ sống, số lá, số rễ l chiều cao Trong ba loại dinh dưỡng phân đầu trâu (NPK), phân bón m co lá, dung dịch MS/2 lan Kim Tuyến giai đoạn sau in vitro an Lu thích hợp với dinh dưỡng phân đầu trâu có tỷ lệ NPK thích hợp 1:1:2 tức 12mg/l NH4NO3 + 33mg/l NH4H2PO4 + 87mg/l KNO3 có bổ sung n va ac th si 43 20mg/l CaCl2 35mg/l MgSO4, liều lượng lít/1m giá thể/ngày, phun loại dinh dưỡng lan Kim Tuyến đạt tỷ lệ sống cao 89%, tăng chiều cao 1,88cm, tăng số 1,16 chiếc, tăng số rễ 0,60 - Chu kỳ phun dinh dưỡng cho lan Kim Tuyến giai đoạn sau in vitro thích hợp chu kỳ ngày/lần Có tỷ lệ sống đạt 89%, tăng chiều cao 1,74cm, tăng số 0,98 chiếc, tăng số rễ 0,63 5.2 Đề nghị Do thời gian thực đề tài lực thân có hạn nên đề tài lu thực qua năm thí nghiệm với quy mơ nghiên cứu cịn nhiều hạn an chế va n Kết nghiên cứu nhiều hạn chế nên phù hợp với nghiên cứu gh tn to quy mô nhỏ chưa thể đại diện cho khu vực nghiên cứu ie Để có kết tốt, tồn diện có khả vận dụng p thực tế cao hơn, xin mạnh dạn đề xuất số kiến nghị sau: nl w - Lan Kim Tuyến trồng lâu năm, sinh trưởng chậm Do vậy, d oa thời gian ngắn nghiên cứu, kết luận bước đầu an lu tảng nghiên cứu cho nghiên cứu Đề nghị có nghiên lm ul hiệu cao nf va cứu sâu nhằm trồng chăm sóc lan Kim Tuyến có z at nh oi - Có thể ứng dụng kết nghiên cứu cho sản xuất lan Kim Tuyến giai đoạn vườn ươm giai đoạn đầu vườn trồng - Các nghiên cứu tôi, dừng lại giai đoạn đầu z vườn trồng, đề nghị nghiên cứu cần nghiên cứu giai đoạn @ m co l gm sau đến lan Kim Tuyến thu hoạch an Lu n va ac th si TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu tiếng việt Ngơ Xn Bình, Bùi Bảo Hồn, Nguyễn Thị Thúy Hà (2003), Giáo trình Cơng nghệ sinh học, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội Bộ Khoa Học Công Nghệ (2007), Sách đỏ Việt Nam (phần thực vật), Nxb Khoa học tự nhiên & công nghệ, Hà Nội Chính phủ nước Cộng hịa xã hội chủ nghĩa Việt Nam (2006), Nghị định số lu 32/2006/NĐ-CP an va Trịnh Đình Đạt (2009), Cơng nghệ sinh học (công nghệ di truyền), tập 4, n Mxb giáo dục Phương Đông p ie gh tn to Phan Thúc Huân (2005), Hoa lan nuôi trồng kinh doanh, Nxb Nguyễn Công Nghiệp (2000), Trồng hoa lan, Nxb trẻ, HCM oa nl w Trần Hợp (1990), Phong Lan Việt Nam, tập 2, Nxb Nông nghiệp, Tp HCM d Phùng Văn Phê (2008), ―Đặc điểm hình thái, phân bố sinh thái lồi an lu Lan Kim Tuyến Anoectochilus setaceus Blume số tỉnh miền núi nf va phía Bắc‖, Báo cáo khoa học, trường đại học Lâm Nghiệp lm ul Phùng Văn Phê cs (2010), ―Nghiên cứu kỹ thuật nhân giống loài lan z at nh oi Kim Tuyến Anoectochilus setaceus Blume số tỉnh miền núi phía Bắc‖, Báo cáo khoa học, trường đại học Lâm Nghiệp 10 Nguyễn Quang Thạch cs (2012), ―Nghiên cứu kỹ thuật nhân nhanh z gm @ loài Lan kim tuyến (Anoectochilus setaceus Blume) in vitro bảo tồn nguồn dược liệu quý‖, Tạp chí Khoa học Phát triển, 597-603 l co 11 Nguyễn Văn Uyển (1993), Nuôi cấy mô thực vật phục vụ công tác chọn m giống trồng, Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội an Lu n va ac th si 12 Vũ Văn Vụ, Nguyễn Mộng Hùng, Lê Hồng Điệp (2009), Công nghệ sinh học (công nghệ sinh học tế bào), tập 2, Nxb giáo dục II Tài liệu tiếng Anh 13 Chun-Nian He, Chun-Lan Wang, Shun-Xing Guo, Jun -Shan Yang and PeiGen Xiao (2006), ―A Novel Flavonoid Glucoside From Anoectochiluc roxbughii (Wall) Lindl‖, Integrat Plant Biol, 48(3), 359-363 14 C-C Hsieh, H-B Hsiao, W-C Lin (2010), ―A standardized aqueous extract of Anoectochilus formosanus modulated arway hyperresponsiveness in an lu OVA-inhaled murine model‖, Phytomedicine, 17, 557-562 an va 15 Doris C N Chang, L C Chou, G.C Lee (2007), ―New Cultivation n methods for Anoectochilus formosanus Hayata‖, Orchid Science and to gh tn Biotechnology, 1(2), 56-60 p ie 16 Doris Chi-Ning Chang and Ling-Chin Chou (2007), ―Growth responses, enzyme activities, and component changes as influenced by oa nl w Rhyzoctonia Orchid mycorrhiza on Anoectochilus formosanus Hayata‖ Botanical Studies, 48 445-451 d an lu 17 Dufour L 2002 ―Optimization of Anthurium and reanum mineral nf va nutrition in soilless culture under Tropical conditions‖ lm ul 18 Hao -Yuan Cheng, Wen- Chuan Lin, Fu-Mei Kiang, Long-Yuan Wu and z at nh oi Wen-Huang Peng (2003), ―Anoectochilus formosanus attenuates amnesia induced by scopolamine in rats‖ J Chin Med 14 (4) 235-245 19 Hideo Ikeda, 2000‖Soilless Culture in Japan‖ The Internationnal Society for z gm @ Soilless Culture, College of Agricculute, University of Osaka Preferture 20 Kiet Van Nguyen (2004), ―Effect of environmental conditions on in vitro l co and ex vitro growth of jewel orchid Anoectochilus formosanus Hayata, m thesis for the degree of Doctor of Philosophy in Agriculture‖, The an Lu Graduate School of Chungbuk National University n va ac th si 21 Lazarus Agus Sukamto, Endah Dwi Rahayu and Edhi Sandra (2011), ―Characteristics between Anoectochilus setaceus and Anoectochilus formosanus by application of TDZ in vitro‖, International Conference of Science and Technology (AICST), ISBN No 978 979 1641593 22 Marco Van Hert 1998 Cultivation Guide Anthurium Global know-how for growers around the Globe Anthura B.V, Holland 23 Ozcelike A; C.F Ozkan 2002 EC and pH changes of the growing media and nutrient solution during Anthurium production in aclosed system lu In: ISHS Acta horticulture 573 an va 24 Paul Ormerod (2005), ―Notulae Goodyerinae (II)‖, Taiwania, 50(1), 1-10 n 25 Sonneveld C; W.Voogt 1993 The concentration of nutrient for growing to gh tn Anthurium in substrate In: ISHS Acta horticulture 342 p ie 26 Shu-Fen Cheng and Doris Chi-Ning Chan (2009), ―Growth responses and changes of active components as influenced by elevations and orchid oa nl w mycorrhizae on Anoectochilus formosanus Hayata‖, Botanical Studies, d 50 459-466 an lu 27 Yang Dan, Xue-mei Yu, Shun-Xing Guo, and Zhi-xia Meng (2012), nf va ―Effects of forty-two strains of orchid mycorrhizal fungi on growth of lm ul plantlets of Anoectochilus roxburghii‖, African Journal Microbiology z at nh oi Research, (7), 1411-1416 28 Yih-Juh Shiau, Abhay P.Sagare, Uei-Chin Chen, Shu-Ru Yang and HsinSheng Tsay (2001), ―Conservation of Anoectochilus formosanus z Bot Bull Acad Sin 43 (2002), 123-130 m co l gm @ Hayata by artificial cross-pollination and in vitro cultu re of seeds‖, an Lu n va ac th si PHỤ LỤC Một số kết ảnh thí nghiệm lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu Hình 1: Một số mẫu lan Kim Tuyến đạt tiêu chuẩn ng n va ac th si lu an va n a b p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul c d z Hình 2: Ảnh hưởng thời gian cảm ứng ánh sáng tự nhiên lan Kim Tuyến trước (a: ngày, b: ngày, c: 10 ngày, d: 15 ngày) m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va a b p ie gh tn to Hình 3: xử lý giá thể xơ dừa (a: ngầm nước vôi, b: phơi khô) d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul Hình 5: Xử lý ngâm thuốc nấm cho lan Kim Tuyến giai đoạn sau in vitro trước z m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an va n a b p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul c z Hình 5: Cây lan Kim Tuyến sau 20 ngày tuổi trồng ba loại giá thể khác (a: xơ dừa, b: đất + phân ủ hoai + mùn cưa ủ hoai, c: cát) m co l gm @ an Lu n va ac th si lu an n va p ie gh tn to Hình 6: Cây lan Kim Tuyến 30 ngày, có chu kỳ bón phân ngày/lần d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th si