Khóa luận tốt nghiệp ngành Dược: Nghiên cứu đặc điểm thực vật và thành phần hóa học của cây Xương chua (Hibiscus suratte...
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN NGUYỄN CAO TỒN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY XƢƠNG CHUA (Hibiscus surattensis L., họ Bơng Malvaceae) KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC DƢỢC Hậu Giang - Năm 2016 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VÕ TRƯỜNG TOẢN NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT VÀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY XƢƠNG CHUA (Hibiscus surattensis L., họ Bông Malvaceae) Chuyên ngành: Dƣợc liệu KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC DƢỢC Giảng viên hƣớng dẫn: TS.DS Lê Ngọc Kính Hậu Giang - Năm 2016 i LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực khóa luận, tơi nhận đƣợc ủng hộ tạo điều kiện Ban giám hiệu Trƣờng Đại học Võ Trƣờng Toản, Trung Tâm thực hành Y-Dƣợc Bộ môn Dƣợc liệu - Y học cổ truyền nơi học tập Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy TS.DS Lê Ngọc Kính hƣớng dẫn truyền đạt nhiều kinh nghiệm quý báu nghiên cứu khoa học cho Tôi xin chân thành cảm ơn thầy ThS.DS Huỳnh Lời, cô ThS.DS Lê Vinh Bảo Châu, cô ThS.DS Bùi Thị Cẩm Tƣơi góp ý cho tơi q trình nghiên cứu hồn thiện khóa luận Trong q trình thực k h ó a l u ậ n , nhận đƣợc hỗ trợ nghiên cứu Trung tâm dịch vụ phân tích thí nghiệm thành phố Hồ Chí Minh - Sở khoa học cơng nghệ thành phố Hồ Chí Minh Đồng thời, tơi nhận đƣợc đóng góp quý báu thầy cô giáo thuộc nhiều lĩnh vực Nhân dịp xin trân trọng cảm ơn giúp đỡ nhiệt tình thầy cơ, anh chị trung tâm thực hành Y-Dƣợc, phịng ban trƣờng ln tạo điều kiện tốt để tơi hồn thành khóa luận Cảm ơn bạn Dƣợc k4, Dƣợc k5, Y k5 ln tơi suốt q trình nghiên cứu vừa qua Lời sau cùng, xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới ngƣời bạn, ngƣời thân gia đình ba, má anh, chị kịp thời động viên tạo điều kiện thuận lợi để tơi hồn thành đề tài Xin trân trọng cảm ơn tất giúp đỡ quý báu Nguyễn Cao Toàn ii LỜI CAM ĐOAN Tơi cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng dƣới dẫn TS.DS Lê Ngọc Kính Các kết trình bày khóa luận trung thực chƣa đƣợc cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn Sinh viên Nguyễn Cao Toàn iii NHẬN XÉT CỦA NGƢỜI HƢỚNG DẪN H A LUẬN Tinh thần, thái độ làm việc Sinh viên Nguy n Cao Toàn c hoài o học tập nghiên cứu C c s ng tạo ln chủ động tìm t i hành động Tận tụy với công việc không sợ kh khăn vất vả say mê nghiên cứu khoa học để c thể hoàn thành tốt đề tài Nội dung khoa học luận văn Đ lập đƣợc hình ảnh vi phẫu Xƣơng chua g p phần xây dựng tiêu chuẩn chất lƣợng nguyên liệu làm thuốc Đ x c định đƣợc c c nh m chất ch nh Xƣơng chua phần m t đất ỏ r gồm: alkaloid acid hữu acid uronic anthocyanin carotenoid chất béo, đƣờng khử phytosterol saponin tanin tinh dầu làm sở để tiếp tục x c định đƣợc hoạt chất tiến tới chiết xuất tinh chế để c thể tạo sản phẩm ng phƣơng ph p đại ICP-MS đ x c định đƣợc hàm lƣợng số nguyên tố vô quan trọng nhƣ: Ca Fe Mg Mn Zn Cu Cr Se; nguyên tố liên quan đến nhiều chức sinh học g p phần làm s ng tỏ t c dụng Xƣơng chua Khả ứng dụng đề tài Đề tài g p phần xây dựng sở khoa học để tiếp tục nghiên cứu sâu Xƣơng chua làm s ng tỏ t c dụng trị liệu theo kinh nghiệm dân gian ổ sung vào kho tàng l luận đông dƣợc thêm thuốc đầy triển vọng Đồng ý cho học viên bảo vệ luận văn trƣớc Hội đồng: u n n t Ngƣời nhận xét L Ngọc iv nh n n m NHẬN XÉT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN v T M TẮT H A LUẬN Mở đầu đặt vấn đề Xƣơng chua loài mọc hoang Việt Nam Theo dân gian, có hiệu rõ rệt bệnh sinh dục hô hấp Trên giới nƣớc ta chƣa c nhiều tài liệu nói lồi Vì vậy, đề tài “Nghiên cứu đ c điểm thực vật thành phần h a học Xƣơng chua Hibiscus surattensis L họ ông Malvaceae” đƣợc thực Đối tƣợng phƣơng pháp nghi n cứu Đối tượng nghiên cứu: toàn thân m t đất (bỏ r ) P ươn p pn ên cứu thực v t: quan s t mô tả đ c điểm hình th i thực vật gi m định tên khoa học P ươn p tố vô pn ên cứu t n p ần ó ọc: x c định hàm lƣợng c c nguyên ng thiết ị ICP-MS x c định sơ ộ thành phần hữu thứ cấp ng c c phản ứng định t nh đ c hiệu dịch chiết Xƣơng chua với hệ dung môi c độ phân cực tăng dần Kết nghiên cứu Về đ c điểm thực vật loài Hibiscus surattensis L - Đ mô tả chi tiết đ c điểm thực vật loài nghiên cứu x c định tên khoa học Xƣơng chua Hibiscus surattensis L thu h i x An Mỹ huyện Tuy An tỉnh Phú Yên - Đ x c định đ c điểm vi phẫu l thân đ c điểm ột l hoa thân loài nghiên cứu g p phần tiêu chuẩn h a dƣợc liệu Về thành phần h a học loài Hibiscus surattensis L Qua c c phản ứng định t nh sơ ộ kết luận Xƣơng chua phần m t đất ỏ r c chứa: alkaloid acid hữu acid uronic anthocyanin, carotenoid chất éo đƣờng khử phytosterol saponin tanin tinh dầu X c định đƣợc hàm lƣợng số nguyên tố vô quan trọng gồm: Ca (24389 mg/kg), Mg (1443 mg/kg), Fe (230 mg/kg), Mn (53.2 mg/kg), Zn (19.2 mg/kg), Cu (6.49 mg/kg), Cr (0.65 mg/kg), Se (0.057 mg/kg) vi MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN .ii LỜI CAM ĐOAN iii NHẬN XÉT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN v TÓM TẮT KHÓA LUẬN vi MỤC LỤC .vii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT ix DANH MỤC CÁC HÌNH x DANH MỤC CÁC BẢNG xi PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 ĐẶT VẤN ĐỀ 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.3.1 ĐẶC ĐIỂM THỰC VẬT 1.3.2 THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA MỘT SỐ LOÀI THUỘC CHI HIBISCUS L 1.3.3 PHƢƠNG PHÁP QUANG PHỔ PHÁT XẠ PLASMA ICP-MS 1.3.4 VAI TRỊ CÁC NGUN TỐ VƠ CƠ TRONG CƠ THỂ 1.3.4 TÁC DỤNG SINH HỌC VÀ CÔNG DỤNG 14 PHẦN NỘI DUNG 18 CHƢƠNG 18 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 18 1.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 18 1.1.1 Đối tƣợng nghiên cứu 18 1.1.2 Dung mơi, hóa chất 19 1.1.3 Thiết bị dụng cụ dùng nghiên cứu 19 1.1.4 Địa điểm nghiên cứu 20 vii 1.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 21 1.2.1 Nghiên cứu thực vật 21 1.2.2 Nghiên cứu thành phần hóa học 21 CHƢƠNG 25 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 2.1 NGHIÊN CỨU VỀ THỰC VẬT 25 2.1.1 Mơ tả đ c điểm hình thái thực vật giám định tên khoa học Xƣơng chua 25 2.1.2 Đ c điểm vi học cấu tạo giải phẫu 27 2.1.3 Đ c điểm bột dƣợc liệu 29 2.2 NGHIÊN CỨU VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 32 2.2.1 Phân tích thành phần hóa học dịch chiết Xƣơng chua ởi hệ dung môi c độ phân cực từ thấp đến cao 32 2.2.2 Phân t ch hàm lƣợng số nguyên tố vô Xƣơng chua 40 CHƢƠNG 42 BÀN LUẬN 42 3.1 VỀ THỰC VẬT 42 3.2 VỀ THÀNH PHẦN HÓA HỌC 43 3.2.1 Về kết định tính 44 3.2.2 Về hàm lƣợng số nguyên tố vô 44 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 48 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC viii DANH MỤC CÁC Ý HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT TÊN VIẾT TẮT TÊN ĐẦY ĐỦ NGHĨA TIẾNG VIỆT ATP Adenosine triphosphate Adenosine triphosphate DHSA Dihydrosterculic acid Acid Dihydrosterculic DSCs Dye-sensitized solar cells GC-FID GC-MS GH ICP-MS IGF-1 RDA Pin m t trời nhạy cảm với chất màu Gas chromatography-flame Sắc k đầu dị ion hóa ionization detector lửa Gas-chromatography-mass Sắc ký khí kết hợp khối spectrometry phổ Growth hormon Hormon tăng trƣởng Inductively-Coupled-Plasma Quang phổ phát xạ plasma Mass Spectrometry kết hợp khối phổ Insulin-like growth factor-1 Yếu tố tăng trƣởng giống Insulin-1 Recommended Dietary Khẩu phần ăn kiêng Allowance khuyến nghị Ultra high performance UHPLC liquid chromatography- -ESI-UHR electrospray ionization - -Qq-TOF-MS tandem mass spectrometric method ix Phƣơng ph p đo khối phổ sắc ký lỏng siêu hiệu [35] Prabhu S., Vijayakumar S., J.E Morvin Yabesh, K Ravichandran, B Sakthivel 14 “Documentation and quantitative analysis of the local knowledge on medicinal plants in Kalrayan hills of Villupuram district, Tamil Nadu India” Journal of Ethnopharmacology 157, pp 7-20 [36] Ryan M Warner and John E Erwin “Variation in Floral Induction Requirements of Hibiscus sp” Journal of the American Society for Horticultural Science 126(3), pp 262–268 [37] Takhtajan A.L.(1997), Diversity and Classification of Flowering Plants, Columbia University Press, New York, USA [38] Wang ML., Morris B 12 “Assessment of oil content and fatty acid composition variability in two economically important Hibiscus species” J.Agric Food Chem 4, 60(26):6620-6, doi: 10.1021/jf301654y [39] Wilson F.D 1999 “Revision of Hi iscus section Furcaria Malvaceae in Africa and Asia” Bulletin of the Natural History Museum, Botany Series 29, pp 47-79 [40] 木槿属 mu jin shu “Hi iscus Linnaeus, Sp Pl 2: 693.1753, nom cons” Floral of China 12, pp 286-294 PHỤ LỤC DANH MỤC PHỤ LỤC CỦA LUẬN VĂN PHỤ LỤC KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC XƢƠNG CHUA……ii PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐỊNH LƢỢNG CÁC NGUYÊN TỐ VÔ CƠ TRONG XƢƠNG CHUA iii PHỤ LỤC ĐẶC ĐIỂM MỘT SỐ LOÀI TRONG CHI HIBISCUS L ……… vi PHỤ LỤC XÁC NHẬN ĐÃ Ổ SUNG, CHỈNH SỬA LUẬN VĂN………xiv i PHỤ LỤC KẾT QUẢ GIÁM ĐỊNH TÊN KHOA HỌC CỦA LOÀI XƢƠNG CHUA ii PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐỊNH LƢỢNG CÁC NGUYÊN TỐ VÔ CƠ TRONG XƢƠNG CHUA iii iv v PHỤ LỤC ĐẶC ĐIỂM MỘT SỐ LOÀI TRONG CHI HIBISCUS L Bảng So sánh màu sắc đƣờng nhiệt độ nh hoa 21 oài Hibiscus hi trồng C úc hoa[36] vi Bảng Sự phân bố tự nhi n oài Hibiscus theo vùng theo vĩ độ [36] vii Bảng Thành phần cao chiết nƣớc đài hoa oài Hibiscus sabdariffia [26] viii Bảng Danh sách chất phát phƣơng pháp UHPLC-ESI-UHRQq-TOF-MS đài Hibiscus sabdariffia [26] ix Bảng Thành phần chất hóa học chiết từ vỏ thân hạt oài Hibiscus cannabinus [19] x Bảng Thành phần tinh dầu ồi Hibiscus cannabinus phân tích GC-MS [32] xi xii Bảng Bƣớc sóng hấp thụ hiệu suất quang điện dịch chiết sắc tố hoa oài nghi n cứu [24] xiii xiv