Bộ YTÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ÍTY MỴ THỊ KHANH HUYEN NGHIÊN CỬU BẢO CHÊ PELLET SAPONIN TAM THAT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI 2022 Bộ YTÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI MỴ THỊ KHÁNH HUYỀN Mã sin[.]
Bộ YTÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ÍTY MỴ THỊ KHANH HUYEN NGHIÊN CỬU BẢO CHÊ PELLET SAPONIN TAM THAT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ HÀ NỘI - 2022 Bộ YTÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI MỴ THỊ KHÁNH HUYỀN Mã sinh viên: 1701271 NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ PELLET SAPONIN TAM THÁT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC sĩ Người hướng dẫn: PGS TS Vũ Thị Thu Giang NCS Nguyễn Văn Khanh Nơi thực hiện: Bộ môn Bào chế, Truông ĐH Duọc Hà Nội Bộ môn Bào chế CNDP, Trường Đại học Y dược, ĐHQGHN HÀ NỘI - 2022 LỜI CẢM ON Lời đầu tiên, tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới PGS TS Vũ Thị Thu Giang NCS Nguyễn Văn Khanh - người tận tình hướng dẫn, giúp đờ, động viên tơi hồn thành khố luận Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, Ban giám hiệu - Trường Đại học Dược Hà Nội truyền đạt cho kiến thức quý báu suốt năm học tập trường Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, anh chị kỹ thuật viên môn Bào chế - Trường Đại học Dược Hà Nội quan tâm, giúp đỡ tạo điều kiện tốt cho tơi suốt q trình thực đề tài môn Tôi xin cảm ơn toàn thể bạn sinh viên K72 đồng hành giúp đỡ tơi q trình nghiên cứu Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn đến gia đình bạn bè ln ủng hộ, động viên, giúp đỡ đế tơi hồn thành khố luận Xin chân thành cảm ơn Hà Nội, Ngày tháng năm 2022 Sinh viên Mỵ Thị Khánh Huyền MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỊ THỊ ĐẶT VẤN ĐÈ CHƯƠNG I: TỐNG QUAN .2 1.1 Tổng quan tam thất thành phần hóa học tam thất 1.1.1 Tên khoa học 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng sinh học saponin tam thất 1.2 Một số nghiên cứu sinh khả dụng saponin tam thất 1.3 Một số chế phẩm chứa saponin tam thất thị trường 1.4 Tổng quan pellet 1.4.1 Pellet 1.4.2 Một số nghiên cứu bào chế pellet chứa saponin tam thất 11 CHƯƠNG II: ĐỔI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 13 2.1 Đối tượng nghiên cứu 13 2.2 Nguyên liệu, thiết bị 13 2.3 Nội dung nghiên cứu 15 2.3.1 Nội dung 1: Nghiên cứu tiền công thức 15 2.3.2 Nội dung 2: Xây dựng cơng thức quy trình bào chế pellet saponin tam thất 15 2.3.3 Nội dung 3: Nghiên cứu bao màng tan ruột đánh giá đặc tính pellet bào chế 15 2.4 Các phương pháp sử dụng nghiên cứu tiền công thức 15 2.4.1 Định lượng notoginsenosid Rl, ginsenosid Rgl, ginsenosid Re, ginsenosid Rbl, ginsenosid Rd phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 15 2.4.2 Định lượng hàm lượng saponin toàn phần bằngphương pháp đo quang 16 2.4.3 Đánh giá đặc tính cao khơ saponin tam thất nguyên liệu 17 2.4.4 Đánh giá tương tác dược chất tá dược 21 2.4.5 Khảo sát loại tỉ lệ chất hóa dẻo/polyme 22 2.5 Phương pháp bào chế .22 2.5.1 Phương pháp bào chế pellet nhân 23 2.5.2 Phương pháp bao màng tan ruột cho pellet 23 2.6 Phương pháp đánh giá đặc tính pellet 24 2.7 Phương pháp xử lý số liệu 28 CHƯƠNG III: THỤC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 29 3.1 Kết nghiên cứu tiền công thức 29 3.1.1 Định lượng notoginsenosid Rl, ginsenosid Rgl, ginsenosid Re, ginsenosid Rbl, ginsenosid Rd phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao 29 3.1.2 Kết xây dựng phương pháp định lượng saponin toàn phần phương pháp đo quang phổ ƯV-VIS 29 3.1.3 Đánh giá đặc tính saponin tồn phần tam thất 30 3.1.4 Đánh giá tương tác dược chất tá dược 34 3.1.5 Khảo sát loại tỉ lệ chất hóa dẻo/polyme .35 3.2 Xây dựng cơng thức quy trình bào chế pellet saponin tam thất 35 3.2.1 Khảo sát ảnh hưởng tá dược độn tỉ lệ Avicel PH 101 đến số đặc tính pellet 36 3.2.2 Khảo sát loại tá dược dính 37 3.2.3 Khảo sát nồng độ tá dược dính 38 3.2.4 Khảo sát lượng tá dược dính 38 3.2.5 Khảo sát loại tá dược trơn 39 3.2.6 Khảo sát thời gian ủ 40 3.2.7 Khảo sát tốc độ đùn 41 3.2.8 Khảo sát tốc độ vo 42 3.2.9 Khảo sát thời gian vo 42 3.2.10 Đánh giá số đặc tính pellet nhân 43 3.3 Bước đầu nghiên cứu bao màng tan ruột đánh giá đặc tính pellet thu 44 3.3.1 Khảo sát thơng số kĩ thuật máy bao 46 3.3.2 Khảo sát độ tăng kích thước màng bao 46 3.3.3 Đánh giá chất lượng pellet bao tan ruột bào chế .46 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT .50 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Ký hiệu viết tắt Tên đu Diện tích đường cong đồ thị biểu diễn biến thiên nồng độ AUC thuốc máu theo thời gian r Nồng độ đỉnh thuốc máu '-'maxv Chất hóa dẻo CHD % saponin giải phóng môi trường pH 1,2 120 phút C120 CT Công thức DBP Dibutyl phthalat Dược chất DC Dược điển Việt Nam V DĐVN V Phân tích nhiệt quét vi sai DSC EtOH Ethanol Quang phố hồng ngoại biến đổi Fourier FTIR Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Sắc kí lỏng hiệu cao ghép nối đầu dị lần khối phổ HPLC-MS-MS HPMC Hydroxypropyl methylcellulose Hiệu suất HS MeOH Methanol NaLS Natri lauryl sulfat Tổ chức Hợp tác Phát triển Kinh tế OECD Polyethylen glycol PEG PVP Polyvinyl pyrrolydon OVA Phản ứng tế bào chồng lại ovalbumin PDS Saponin loại protopanaxadiol Các saponin Tam thất PNS % saponin giải phóng mơi trường pH 6,8 30 phút Q30 % saponin giải phóng mơi trường pH 6,8 60 phút Q60 Độ lệch chuẩn SD Kính hiển vi điện tử quét SEM Tmax Thời gian thuốc đạt nồng độ đỉnh máu Tiêu chuấn co sở TCCS Tiêu chuấn nhà sản xuất TCNSX TEC Triethyl citrat TLTK Tài liệu tham khảo PL Phụ lục DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Tóm tắt thành phần hóa học Panax notoginseng (Burk.) F H Chen Bảng 1.2 Một số hướng nghiên cứu cải thiện sinh khả dụng đường uống ginsenosid saponin tam thất Bảng 1.3 Một số chế phẩm thuốc chứa saponin từ tam thất Băng 2.1 Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 13 Bảng 2.2 Thiết bị nghiên cứu 14 Báng 2.3 Môi trường thử độ tan saponin 18 Bảng 2.4 Tương tác dược chất - tá dược 22 Bảng 2.5 Thành phần dự kiến pellet chứa cao khô saponin tam thất 23 Báng 2.6 Công thức dự kiến dịch bao tan ruột .23 Bảng 3.1 Một số đặc tính vật lí cao khơ saponin tam thất ngun liệu 31 Bảng 3.2 Kết cảm quan khảo sát sơ loại tỷ lệ chất hóa dẻo/polyme 35 Bảng 3.3 Thành phần mẫu pellet với tỉ lệ Avicel PHI01- tá dược độn khác 36 Bảng 3.4 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với tá dược độn khác (n=3) 36 Bảng 3.5 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với loại tá dược dính khác (n=3) 37 Bảng 3.6 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với nồng độ tá dược dính khác (n=3) 38 Bảng 3.7 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với lượng tá dược dính khác (n=3) 39 Bảng 3.8 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với loại tá dược trơn khác (n=3) 40 Bảng 3.9 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với thời gian ủ khối déo khác (n=3) 40 Bảng 3.10 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với tốc độ đùn khác (n=3) .41 Bảng 3.11 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với tốc độ vo khác (n=3) 42 Bảng 3.12 Hiệu suất bào chế đặc tính pellet saponin tam thất bào chế với thời gian vo khác (n=3) 42 Bảng 3.13 Công thức pellet nhân lựa chọn 43 Bảng 3.14 Một số tiêu đánh giá pellet nhân (n=3) 43 Bảng 3.15 Công thức sơ bao film pellet .44 Bảng 3.16 Tốc độ giải phóng dược chất pellet bao với chất hóa dẻo khác (n=3) .45 Bảng 3.17 Tốc độ giải phóng dược chất thay đổi độ dày màng bao (n=3) 46 Bảng 3.18 Một số tiêu đánh giá pellet sau bao film (n=3) 47 Báng 3.19 Tốc độ giải phóng saponin saponin toàn phần pellet (n=3)48 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỎ THỊ Hình 1.1 Hình ảnh Panax notoginseng (Burk.) F H Chen Hình 1.2 Cấu trúc hóa học nhóm (a) protopanaxadiol (b) protopanaxatriol Hình 1.3 Cấu trúc hóa học notoginsenosides RI (a) ginsenosid Rbl (b) Hình 1.4 Cấu trúc hóa học ginsenoside Rgl (a) ginsenosid Rd (b) Hình 1.5 Cấu trúc hóa học ginsenoside Re ĐẶT VẤN ĐÈ Từ xa xưa, Tam thất (Panax notoginseng) (Burk.) F H Chen, họ Nhân sâm (Araliaceae) coi vị thuốc quý y học cổ truyền với công dụng hành ứ, cầm máu, tiêu thũng, dùng trường hợp chấn thưong, chảy máu, huyết ứ dẫn đến đau đớn, tiêu ung nhọt, [4], [9] Nhiều thành phần hóa học phân lập xác định cấu trúc hóa học từ Tam thất saponin, acid amin, polyacetylen, phytosterol, flavonoid, polysaccarid, [9] Hiện nay, nghiên cứu đà xác định thành phần có tác dụng trị liệu tam thất saponin nhóm triterpen Các saponin tam thất chất đóng vai trị tác dụng sinh học củ tam thất, có nhiều tác dụng quý chống lại thiếu máu cục mạch máu não, chống loạn nhịp tim, giãn mạch máu, cải thiện lưu lượng tuần hồn máu, điều hịa nồng độ hormon steroid Trong đó, loại saponin triterpen có hàm lượng cao tam thất notoginsenosid RI (7 - 10%), ginsenosid Rbl (30 - 36%), Rgl (20 - 40%), Rd (5 - 8,4%) Re (3,9 - 6%) [50J PNS có khả hịa tan tốt nước Tuy nhiên, ốn định, bị thủy phân môi trường acid dịch vị, khả thấm kém, khối lượng phân tử cao làm cho sinh khả dụng đường uống PNS [54], [24] Các saponin ginsenosid phân loại vào nhóm III hệ thống phân loại sinh dược học BCS [27], [35] Nhiều dạng bào chế khác nghiên cứu để cải thiện sinh khả dụng PNS, pellet kết dính sinh học [36], viên nén giải phóng kéo dài theo co chế bơm thẩm thấu [15], viên nén bao tan ruột [76], viên nén kết dính sinh học [19], Pellet ứng dụng với nhiều dược chất khác nhau, có ưu điềm dễ phân tán khắp dày, kích thước nhỏ dễ qua mơn vị nên xuống nhanh vị trí hấp thu tối ưu ruột non, đồng thời giảm sai khác sinh khả dụng cá thể PNS bền mơi trường acid dịch vị, việc lựa chọn màng bao thích hợp giúp kiểm sốt giải phóng dược chất dày ruột, góp phần cải thiện độ ốn định sinh khả dụng thuốc [54] Vì vậy, chúng tơi thực đề tài “Nghiên cứu bào chế pellet saponin tam thất” với mục tiêu: - Xây dựng cơng thức quy trình bào chế pellet cao tam thất phương pháp đùn-tạo cầu - Bước đầu xây dựng công thức màng bao tan ruột đánh giá số đặc tính pellet bào chế 64 Zhang, Y et al (2019), "Optimal Selection of Incoming Materials from the Inventory for Achieving the Target Drug Release Profile of High Drug Load Sustained-Release Matrix Tablet”, AAPS PharmSciTech 20(2), pp 76 65 Zhou, z et al (2021), "Physicochemical, Digestive, and Sensory Properties of Panax Notoginseng Saponins Encapsulated by Polymerized Whey Protein”, Foods 10(12) 66 Chen, z et al (2003), "[Comparison of amino acid contents in Panax notoginseng from different habitats] ”, Zhong Yao Cai 26(2), pp 8-86 67 Wei, J X and Wang, J F (1987), "[Studies on the flavonoids from the leaves of Panax notoginseng (Burk.) F H Chen]”, Zhong Yao Tong Bao 12(11), pp 3-31, 33-62 68 Amidon, Gordon L et al (1995), "A Theoretical Basis for a Biopharmaceutic Drug Classification: The Correlation of in Vitro Drug Product Dissolution and in Vivo Bioavailability”, Pharmaceutical Research 12(3), pp 413-420 69 Chinese Pharmacopoeia (2015) 70 Deng, Bing et al (2017), "An AP2/ERF family transcription factor PnERFl raised the biosynthesis of saponins in Panax notoginseng ”, Journal of Plant Growth Regulation 36(3), pp 691-701 71 FDA (2011), Quality by Design for ANDAs: An Example for Modified Release Dosage Forms, pp 28-35 72 Ghebre-Sellassie, I and Knoch, A , Informa Healthcare, New York (2007), "Pelletization Techniques”, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology 3rd Edition, pp pp 2651-2663 73 Ghebre-Sellassie, Isaac et al (2003), Pharmaceutical extrusion technology, CRC Press 74 Lalduhsanga Pachuau (2014), "Muli bamboo (Melocanna baccifera) as a new source of microcrystalline cellulose”, Journal of Applied Pharmaceutical Science 4(11), pp 087-094 75 Lin, Qi et al (1994), "Studies on lipophilic constituents of Panax notoginseng” 76 Liu HG Lai L, Lu SH (2012), "Pharmacokinetics and correlation between in vivo absorption and in vitro release of Panax notoginseng saponins enteric microcapsule”, Chin J New Drug 21(6), pp 693-696 77 M Zhang, et al (2016), "Influence of plate surface protuberance size and shape on the production of pellets by extrusion-spheronisation”, Chemical Engineering Research and Design(109f pp pp 97-107 78 Patent EP0283713B1 (1993), Complexes of saponins with phospholipids and pharmaceutical and cosmetic compositions containing them, chủ biên 79 Sagar Muley, Tanaji Nandgude andSushilkumar Poddar (2016), "Extrusionspheronization a promising pelletization technique: In-depth review”, Asian Journal of Pharmaceutical Sciences, pp pp 684-699 80 Wang, cz., McEntee, E., Wicks, s et al (2006), "Phytochemical and analytical studies of Panax notoginseng (Burk.)”, J Nat Med 60, pp 97-106 81 Wei, JX %J Acta Pharm Sin (1980), "Chemical studies of San-Chi Panax notoginseng (Burk.) FH Chen I Studies on the constituents of San-Chi root hairs” 15, pp 359-364 82 X.M Cui et al (2002), "Determination of flavonoids in Panax notoginseng ”, Chin Tradit Herb Drugs 07, pp 38-39 83 Xia, Pengguo et al (2015), "Comparative study on volatile oils of four Panax genus species in Southeast Asia by gas chromatography-mass spectrometry” 74, pp 478484 84 Ya-Li Zhao (2021), "Preparation of Panax notoginseng flower saponins entericcoated sustained-release pellets and its pharmacokinetics and in vitro-in vivo correlation”, Journal of Drug Delivery Science and Technology, pp 1-21 85 Yuan, J et al (2013), "Enabling direct compression of formulated Danshen powder by surface engineering”, Powder Technology(2AV), pp 211-218 86 Zhao p, Liu Y andC, Yang (1993), "Minor constituents from the roots of Panax notoginseng”, Acta Bot Yunnan 15, pp 409 412 PHỤ LỤC 1: KÉT QUẢ NGHIÊN cứu TIỀN CƠNG THỨC B 15 125 lữ Hình Sắc ký đồ mẫu chuẩn hồn hợp saponin (A) mẫu thử (B); 1, notoginsenosid Rl; 2, ginsenosid Rgl; 3, ginsenosid Re; 4, ginsenosid Rbl; 5, ginsenosid Rd ' \ £ Hình Đơ thị biêu diên mơi tương quan nông độ saponin độ hâp thụ quan ỉ Hình Hình ảnh SEM cao khơ saponin tam thât Hình Phổ FTIR cao khơ saponin tam thất ư) cu c -«cu 120 R1 100 ưì 20 C 60 Ẹ >cu 40 pH 4,5 pH 6.8 '«CUc 20 Nước pH 1,2 NaOH 1N pH 4,5 pH 6,8 Peroxid 3% 168 24 Thời gian (giờ) 120 80 Nưỡc pH 1,2 NaOH 1N Peroxid 3% Rgl 336 120 Rb1 120 Re -O 100 01 ọ tỉ 100 ■ọ ỉ 100 ■p 80 80 80 p ỉ CD Ẹ xu '2 VỊ 60- C CD Nước pH 1.2 NaOH 1N pH 4,5 pH 6.8 Peroxid 3% 4020 Ẹ xu C 2 Nước CD pH 1.2 40 Ẹ xu NaOH 1N pH 4.5 Thời gian (giờ) 168 336 0-1—I r 60 Nước 40 pH 1,2 NaOH 1N pH 4,5 C o Peroxid 3% 24 Rd ề 60 pH 6.8 168 336 24 Thời gian (giờ) 20 pH 6,8 Peroxid 3% O-1—1 r 24 Thời gian (giờ) 168 336 24 168 336 Thời gian (giờ) Hình Đơ thị biêu diên độ ôn định saponin môi trường khác Signal DADI A, Sig=203,4 Ref=off (TAMTHAT\TAMTHAT000036.D) —mÁU4 353025- 10 20 30 40 50 Hình Săc ký saponin tam that môi trường pH 1,2 sau Hình Phơ nhiêu xạ tia X cao khơ saponin điêu kiện khác Hình 10 Giản đô nhiệt DSC cao khô saponin điêu kiện khác mir Hình 11 Màng film gồm hỗn hợp polyme Eudragit LI00 chất hóa dẻo A: TEC B: PEG400 C: DBP 1:10% 2:25% 3:50% 4:100% Hình 12 Giản đồ nhiệt DSC hồn hợp polyme : chất hóa dẻo Bảng Kết đánh giá tính thích hợp hệ thống HPLC RI STT Thời gian lưu (phút) Rgl Diện tích pic (mAU*s) Thịi gian lưu (phút) Rbl Re Diện tích pic (mAU*s) Thời gian lưu (phút) Diện tích pic (mAU*s) Thịi gian lưu (phút) Rd Diện tích pic (mAU*s) Thịi gian lưu (phút) Diện tích pic (mAƯ*s) 16,898 83,3 24,069 251,7 25,047 301,4 36,372 183,6 39,686 178,5 16,845 84,6 24,051 253,5 25,036 308,7 36,200 187,4 39,685 182,3 16,821 83,8 24,013 252,8 25,002 302,6 36,198 185,3 39,677 177,4 16,832 85,2 24,083 252,5 25,069 301,3 36,211 182,5 39,696 179,4 16,828 83,8 24,077 251,0 25,048 305,0 36,318 188,4 39,842 184,3 16,883 84,9 24,072 250,6 25,055 300,4 36,284 186,3 39,704 182,9 TB 16,851 84,3 24,060 252,0 25,042 303,2 36,263 185,6 39,715 180,8 RSD (%) 0,19 0,88 0,11 0,44 0,09 1,03 0,20 1,21 0,16 1,52 _ •• A -W V X _ ' Bảng Kêt khảo sát độ tuyên tính phương pháp HPLC RI Rgl Re Rbl Rd Nồng độ (pg/mL) 12,5 25 33 50 100 Diện tích pic (mAƯ*s) 18,4 48,8 63,3 103,9 220,1 Nồng độ (pg/mL) 12,5 50 133 150 200 Diện tích pic (mAU*s) 30,8 83,2 210,1 244,4 307,2 Nồng độ (pg/mL) 10 15 30 45 200 Diện tích pic (mAU*s) 14,9 29,5 58,7 86,9 380,9 Nồng độ (pg/mL) 12,5 50 133 150 200 Diện tích pic (mAU*s) 15,6 63,1 156,2 176,6 227,7 Nồng độ (pg/mL) 12,5 78,2 117,5 156,3 235 Diện tích pic (mAƯ*s) 15,6 86,1 130,4 168,0 261,1 Kết thống kê Phương trình hồi quy Hệ số tương quan R2 Hệ sốr RI y = 2,2959x - 9,7486 0,9999 0,9999 Rgl y = l,5023x + 11,244 0,9982 0,9991 Re y= l,9085x-0,3285 0,9998 0,9999 Rbl y = 1,1323x4-4,3062 0,9990 0,9995 Rd y= 1,0983x4-0,5591 0,9992 0,9996 Bảng Độ hâp thụ quang tá dược (n=3) STT Tá dược • Nồng độ (pg/ml) Độ hấp thụ % độ hấp thụ quang quang (abs) so vói saponin Tinh bột 10 0,002 ± 0,001 0,4 ± 0,2 Lactose 10 0,243 ± 0,001 24,9 ± 0,2 Manitol 10 0,004 ± 0,001 0,8 ± 0,2 Avicel 20 0,002 ± 0,001 0,4 ± 0,2 Tween 80 0,004 ± 0,001 0,8 ± 0,2 HPMC E6 10 0,003 ± 0,001 0,6 ± 0,2 Talc 0,003 ± 0,001 0,6 ± 0,2 Magnesi stearat 0,005 ±0,001 1,0 ±0,2 Aerosil 0,002 ±0,001 0,4 ± 0,2 10 11 Eudragit L 10 0,004 ±0,001 0,8 ± 0,2 PEG 400 0,002 ±0,001 0,4 ± 0,2 12 TEC 0,002 ±0,001 0,4 ± 0,2 13 14 DBP 0,003 ±0,001 0,6 ± 0,2 TiO2 0,004 ±0,001 0,8 ± 0,2 15 Saponin 0,488 ±0,001 100 ± 0,2 Bảng Hàm lượng notoginsenosid Rl, ginsenosid Rgl, ginsenosid Re, ginsenosid Rbl, ginsenosid Rd mẫu cao khô saponin tam thất nguyên liệu -