Thẩm định phương pháp đánh giá tạp chất bằng hplc

13/09/2021 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ TẠP CHẤT BẰNG KỸ THUẬT HPLC Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất, quy định kiểm soát tạp chất nguyên liệu thành phẩm thuốc  Yêu cầu chung thẩm định phương pháp phân tích tạp chất thuốc  Tiến hành thẩm định pp đánh giá tạp chất HPLC 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất nguyên liệu hoạt chất dược dụng - Tạp chất hữu (liên quan tới quy trình bào chế, hoạt chất tá dược) - Tạp chất vô - Dung môi tồn dư Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất nguyên liệu hoạt chất dược dụng -Tạp chất hữu cơ: + Nguyên liệu ban đầu để tổng hợp hoạt chất + Sản phẩm phụ + Sản phẩm trung gian + Sản phẩm phân hủy + Thuốc thử, xúc tác 13/09/2021 Ví dụ tạp hữu cơ: 1-Nguyên liệu paracetamol (acetaminophen) – USP 40 2-Chế phẩm chứa paracetamol - USP 40 13/09/2021 4-aminophenol Acetaminophen Acetaminophen Related Compound C Acetaminophen Related Compound D Acetaminophen Related Compound B Acetaminophen Related Compound J 13/09/2021 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất nguyên liệu hoạt chất dược dụng -Tạp chất vô cơ: + Thuốc thử, xúc tác + Kim loại nặng vết kim loại khác + Muối vô + Các dạng vật chất khác (VD: than hoạt, v.v.) 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất nguyên liệu hoạt chất dược dụng -Dung môi tồn dư: + hữu vô + dùng để tạo dung dịch, hỗn dịch trình tổng hợp hoạt chất 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Quy định kiểm soát tạp chất nguyên liệu hoạt chất dược dụng  Tạp hữu -Giới hạn tạp chất có định danh -Giới hạn tạp xác định không định danh -Giới hạn tạp không xác định -Tổng giới hạn tạp chất  Tạp vô  Dung môi tồn dư Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Phân loại tạp chất thành phẩm thuốc -Tạp chất hữu cơ: sản phẩm phân hủy -Tạp chất vô -Dung môi tồn dư 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Quy định kiểm soát tạp chất thành phẩm thuốc  Tạp hữu -Giới hạn tạp chất có định danh -Giới hạn tạp xác định không định danh -Giới hạn tạp không xác định -Tổng giới hạn tạp chất  Tạp vô  Dung môi tồn dư 13/09/2021 10 13/09/2021  Xây dựng đề cương thẩm định - Nội dung thẩm định + Mục đích, đối tượng áp dụng đề cương + Các chuẩn mực dùng để triển khai đề cương + Các tiêu chí cần thẩm định Đặc hiệu Tuyến tính Chụm, Nhạy (LOD, LOQ)  Xây dựng đề cương thẩm định - Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, quy trình phân tích + Quy trình phân tích cần thẩm định + Thiết bị, dụng cụ + Hóa chất, dung mơi + Chất đối chiếu 57 13/09/2021  Xây dựng đề cương thẩm định - Chú ý an toàn  Xây dựng đề cương thẩm định - Thiết kế thực nghiệm cho tiêu chí cụ thể + Cách chuẩn bị mẫu thử, mẫu đối chiếu + Trình tự, số lượng thí nghiệm cần thực + Phương thức đánh giá đạt, không đạt 58 13/09/2021  Xây dựng đề cương thẩm định - Hình thức báo cáo, lưu trữ liệu - Tài liệu tham khảo - Lịch sử thay đổi  Báo cáo thẩm định - Thông tin chung - Mục đích - Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, quy trình phân tích - Kết bàn luận - Kết luận 59 13/09/2021  Báo cáo thẩm định - Thơng tin chung - Mục đích - Thiết bị, dụng cụ, hóa chất, quy trình phân tích  Báo cáo thẩm định - Kết bàn luận + Trình bày đầy đủ theo nội dung, trình tự đề cương + Kết tiêu chí kèm minh chứng thực nghiệm gốc + Bàn luận, đánh giá tiêu chí theo đề cương 60 13/09/2021  Báo cáo thẩm định - Kết luận + Phương pháp thẩm định đạt hay không đạt yêu cầu Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Triển khai thẩm định tiêu chuẩn cụ thể - VD1: chuyên luận nguyên liệu ofloxacin – USP 40 61 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Triển khai thẩm định cụ thể Chuyên luận Ofloxacin - USP 40 Cần xác định: - Có loại tạp chất (ko định danh, có định danh, v.v.) - Pp đánh giá tạp chất (chuẩn hóa diện tích, nồng độ cao – thấp, ngoại chuẩn) - Độ nhạy pp Thiết lập thí nghiệm cho trình thẩm định 62 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Triển khai thẩm định cụ thể Chuyên luận Ofloxacin - USP 40 Yêu cầu độ phân giải PP ngoại chuẩn điểm C hoạt chất dd thử: 0,2 mg/mL G/hạn tối đa LOQ  Độ đặc hiệu  Các dd: chuẩn ofloxacin, nguyên liệu ofloxacin (mới, stress) dd thử độ phân giải (ofloxacin + RC A)  Đánh giá: - Dd nguyên liệu: tR pic oflo = tR pic oflo với dd chuẩn - Dd thử độ phân giải: pic oflo RC A có Rs đạt yêu cầu - Dd nguyên liệu stress: pic phụ có xuất phải tách khỏi nhau, khỏi pic oflo pic RC A, pic đảm bảo độ tinh khiết 63 13/09/2021 Độ tuyến tính  Khoảng nồng độ phải đánh giá: 0,02% đến 0,6 % Coflo dd thử (0,04 g/mL tới 1,2 g/mL theo ofloxacin)  Yêu cầu đánh giá: + R  0,99 + y-intercept khác khơng có ý nghĩa (P  0,05)  Độ chụm Mẫu thử: -Nếu có điều kiện: nguyên liệu ofloxacin ko có stress điều kiện thích hợp (để xuất mức tạp khoảng tỷ lệ từ 0,02% tới 0,6%) -Dd chuẩn ofloxacin mức nồng độ  Đánh giá: RSD (%) của: + Hàm lượng ofloxacin chuẩn xác định dc mức thêm chuẩn + hàm lượng tạp đơn lẻ phát mẫu nguyên liệu thực (nếu có) 64 13/09/2021  Độ chụm Yêu cầu: - RSD (%) phải ko mức g/hạn cho phép (tham khảo AOAC Int.) VD: - Dd thêm chuẩn ofloxacin: + Mức 1: 0,02% (C = 0,04 g/mL) -> RSD ≤ 5,3% + Mức 2: 0,1% (C = 0,2 g/mL) -> RSD ≤ 3,7% + Mức 3: 0,6% (C = 1,2 g/mL) -> RSD ≤ 3,7%  Độ Mẫu thử: -nguyên liệu ofloxacin chuẩn bị thành dd có nồng độ biết trước, thêm chuẩn ofloxacin mức nồng độ  Đánh giá: tỷ lệ thu hồi (%) của: + hàm lượng ofloxacin chuẩn xác định dc mức thêm chuẩn 65 13/09/2021  Độ Yêu cầu: - Tỷ lệ thu hồi nằm khoảng cho phép (tham khảo AOAC Int.) - RSD (%) mức thêm chuẩn phải ko mức g/hạn cho phép (tham khảo AOAC Int.) VD: - Dd thêm chuẩn ofloxacin: + Mức 1: 0,02% (C = 0,04 g/mL) -> thu hồi: 90 107%, RSD ≤ 5,3% + Mức 2: 0,1% (C = 0,2 g/mL) -> thu hồi: 95 105%, RSD ≤ 3,7% + Mức 3: 0,6% (C = 1,2 g/mL) -> thu hồi: 95 105%, RSD ≤ 3,7%  LOQ  Mẫu thử: nguyên liệu ofloxacin pha xác nồng độ pha lỗng dần  Đánh giá: dùng S/N SD/a  Yêu cầu: :LOQ ≤ 0,04 g/mL với ofloxacin 66 13/09/2021 Thẩm định đánh giá tạp chất HPLC  Triển khai thẩm định tiêu chuẩn cụ thể -VD2: chuyên luận viên nén olanzapin – USP 40 Liều tối đa: 20 mg/ngày 67 13/09/2021  Độ đặc hiệu 68 13/09/2021 Độ tuyến tính 120% g/hạn tạp (1,8% Cdd thử = 6,75 – µg/ml) RTh (0,4 µg/ml) G/hạn tạp (1,5%) Cdd thử 375 – 500 µg/ml Khoảng nồng độ cần đánh giá tuyến tính  Độ xác Mức thấp (0,08% C = 0,4 µg/ml) RSD ≤ 5,3% Mức TB (0,5% C = 2,5 µg/ml) RSD ≤ 3,7% Mức cao (1,8% C = µg/ml) RSD ≤ 2,7% 120% g/hạn tạp (1,8% Cdd thử = 6,75 – µg/ml) RTh (0,4 µg/ml) G/hạn tạp (1,5%) Cdd thử 375 – 500 µg/ml Khoảng nồng độ cần đánh giá tuyến tính 69 13/09/2021  Độ Mức thấp (0,08% C = 0,4 µg/ml) 90 – 107 % Mức TB (0,5% C = 2,5 µg/ml) 95 – 105 % Mức cao (1,8% C = µg/ml) 97 – 103 % 120% g/hạn tạp (1,8% Cdd thử = 6,75 – µg/ml) RTh (0,4 µg/ml) G/hạn tạp (1,5%) Cdd thử 375 – 500 µg/ml Khoảng nồng độ cần đánh giá tuyến tính  LOQ 70 13/09/2021 71