Thẩm định phương pháp phân tích

9/13/2021 THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP NGUYÊN TẮC CHUNG 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các loại quy trình cần thẩm định  Yêu cầu thẩm định cho loại quy trình  Cách tiến hành thẩm định đánh giá yêu cầu đạt thuộc tính phương pháp Định lượng X nguyên liệu dược dụng Hàm lượng  100% Hòa tan, lọc, pha loãng Định lượng X viên nén Hàm lượng : 10 mg/viên KLTB viên: 100 mg Hòa tan, lọc, pha lỗng Định lượng X mt hịa tan viên 10 mg/1000 mL mt Mức htan  100% Lọc Định lượng X huyết tương C ht  µg/ml C tiêm HPLC  10 µg/ml Làm giàu 10 lần 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các loại quy trình cần thẩm định (ICH Q2R1) Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ đặc hiệu (Specificity) -Phải thực với quy trình -Dựa vào đặc tính đáp ứng đối tượng với KTPT 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Nguyên tắc chung: Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Cách đánh giá: 1-P/pháp phân tích ko tích hợp kỹ thuật tách -Tín hiệu đặc trưng KTPT (định tính) -Cường độ tín hiệu (định lượng) 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Cách đánh giá: 1-P/pháp phân tích ko tích hợp kỹ thuật tách VD: pp quang phổ ht UV-Vis: -Định tính: so sánh phổ ht UV-Vis -Định lg: so sánh A  lựa chọn Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Cách đánh giá: 2-P/pháp phân tích có tích hợp kỹ thuật tách: -Đáp ứng với KT tách (định tính) -Tín hiệu đặc trưng KTPT (định tính) -Cường độ tín hiệu (định lượng) 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Cách đánh giá: 2-P/pháp phân tích có tích hợp kỹ thuật tách: VD: HPLC + quang phổ UV-Vis -tR -Phổ ht UV-Vis tR -S pic, h pic Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Dung dịch đánh giá: + Dung môi + Blank (placebo) + Thử + Chuẩn + Stress 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Thẩm định độ đặc hiệu Dung dịch đánh giá: +Stress Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp Placebo Thử 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Tuyến tính, khoảng làm việc -Định lượng tạp chất, dược chất (hàm lượng, hòa tan) 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Tuyến tính, khoảng làm việc -Tuyến tính: A = a.C + b -Khoảng làm việc: đúng, lặp, Clàm việc Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Tuyến tính (ICH Q2R1) + Có C làm việc: ≤80% – ≥120% C làm việc với pp định lượng ≤70% - ≥130% C làm việc với pp thử DDHL + Ko có C làm việc: yêu cầu ptich cụ thể Độ hòa tan: ± 20% dải tỷ lệ hòa tan Tạp chất: ngưỡng phát - ≥120% g/hạn 9/13/2021 Giới hạn khoảng làm việc tương ứng 45 – 20 = 25% 10 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ - Chọn C + Định lg/chế phẩm: C làm việc ± 20% + ĐĐHL: C làm việc ± 30 % + Htan: Cmin khoảng phóng thích - 20% đến 120% + Tạp: ≤ ngưỡng báo cáo – 120% g/hạn - Y/c: tối thiểu nồng độ x mẫu/nồng độ Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại - Phải thực với quy trình định lượng dược chất (hàm lượng, hòa tan), định lượng tạp - Dựa vào dải nồng độ làm việc 16 9/13/2021 Lặp lại RSD (%) Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại - Có C làm việc: lần/ C làm việc - Ko có C làm việc: lần x nồng độ khoảng làm việc 17 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại - Có C làm việc: ĐĐHL, định lg dược chất chế phẩm; htan: chế phẩm phóng thích tức thì, tan ruột - Ko có C làm việc: htan: chế phẩm phóng thích có kiểm sốt, mẫu dịch sinh học; định lg tạp Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại - Đánh giá: theo dao động kết ptich: + Định lg, ĐĐHL: theo hlg hoạt chất/đơn vị phân liều + Htan: theo C hoạt chất/mt hòa tan 18 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại -Yêu cầu: + RSD ko g/hạn + Đánh giá h/lg, C chất cần ptich mẫu Định lượng X nguyên liệu dược dụng Hàm lượng  100% Hòa tan, lọc, pha loãng Định lượng X viên nén Hàm lượng : 10 mg/viên KLTB viên: 100 mg Hòa tan, lọc, pha lỗng Định lượng X mt hịa tan viên 10 mg/1000 mL mt Mức htan  100% Lọc Định lượng X huyết tương C ht  µg/ml C tiêm HPLC  10 µg/ml Làm giàu 10 lần 19 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định  Độ lặp lại -Dd thẩm định: + Chuẩn + Định lg/chế phẩm: chế phẩm thực c/bị  C làm việc + Định lg/ng/liệu: ng/liệu c/bị  C làm việc + Hòa tan: placebo + hoạt chất/mt hòa tan C chọn + Tạp: mẫu thực có tạp, placebo + tạp, chuẩn dược chất 20 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Giới hạn phát (LOD) -Thử giới hạn tạp chất Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Giới hạn phát (LOD) -Y/c: LOD ≤ yêu cầu độ nhạy phương pháp 21 9/13/2021 - LOQ, LOD 22 9/13/2021 Mức giới hạn tạp 1% tương ứng nồng độ 0,2 mg/ml ≥ LOD Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Giới hạn phát (LOD) -Dung dịch dùng thẩm định: + Dd dược chất C so sánh + Dd tạp chuẩn C so sánh 23 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Giới hạn định lượng (LOQ) -Định lượng tạp chất: LOQ ≤ ngưỡng báo cáo -Độ hòa tan: LOQ ≤ điểm khoảng làm việc Mức tạp 0,1% tương ứng nồng độ µg/ml -> Mức tạp 0,03 % tương ứng nồng độ 0,6 µg/ml ≥ LOQ 24 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Độ ổn định phương pháp (Robustness) - Q2R1 chưa đưa vào thức - Được khuyến cáo thực với phương pháp Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Độ ổn định phương pháp (Robustness) - Mục đích: Chứng minh độ tin cậy kết phân tích có chênh lệch nhỏ điều kiện thực nghiệm - Nên kết hợp thiết kế nghiên cứu đa biến đánh giá - Tiêu chí cần đánh giá: điều kiện thực nghiệm, độ bền mẫu thử, mẫu chuẩn 25 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Độ ổn định phương pháp (Robustness) - Cách tiến hành: + Phân tích mẫu thử, mẫu chuẩn điều kiện thực nghiệm khác + So sánh thống kê kết phân tích (hàm lượng dược chất, tạp chất, v.v.) thu điều kiện thực nghiệm khác Kết thu với điều kiện khác phải khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê Ngun tắc chung thẩm định phương pháp  Các thuộc tính pp cần thẩm định Độ ổn định phương pháp (Robustness) - Điều kiện thực nghiệm cần thay đổi: + Thiết bị: tùy thuộc kỹ thuật (VD: UV-Vis: bước sóng; HPLC-UV: tốc độ dòng, tỷ lệ pha động, điều kiện gradient, bước sóng detector, v.v.) + Mẫu: thời gian từ lúc chuẩn bị đến phân tích 26 9/13/2021 Chỉ tiêu đánh giá Điều kiện đánh giá % Acetonitril pha động (tt/tt) 36 – 40 – 44 Tốc độ dịng 1,2 – 1,5 – 1,8 Bước sóng detector 222 – 224 – 226 Thể tích tiêm 18 – 20 – 22 Thời gian để mẫu trước tiêm (phút) 15 – 60 – 120 27 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Ví dụ: Chỉ tiêu thẩm định Điều kiện thực Yêu cầu 28 9/13/2021 Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Ví dụ: Nguyên tắc chung thẩm định phương pháp  Ví dụ: 29 9/13/2021 30