Thẩm định phương pháp chuẩn độ thể tích

THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP CHUẨN ĐỘ THỂ TÍCH Nội dung • Thẩm định phương pháp • Phương pháp chuẩn độ thể tích • Thẩm định phương pháp chuẩn độ thể tích: - Nguyên liệu - Thành phẩm THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP Định nghĩa: Thẩm định (validation) trình triển khai tồn cơng việc quy trình phân tích để chứng minh phương pháp phân tích đủ xác, đủ độ tin cậy đáp ứng mục đích sử dụng dự kiến Khi tiến hành TĐQTPT: • Công việc thẩm định phải tiến hành trước sử dụng phương pháp vào công việc phân tích hàng ngày • Ngồi việc tái thẩm định quy trình phân tích cần xem xét trường hợp: • Do có thay đổi q trình tổng hợp hoạt chất • Do có thay đổi thành phần thuốc • Do có thay đổi quy trình phân tích: Thay đổi nhà cung cấp thuốc thử quan trọng, thay đổi trang thiết bị: Thay thiết bị phân tích (VD: máy HPLC) Ai tiến hành thẩm định phương pháp: Phòng thí nghiệm dự kiến sử dụng phương pháp phân tích có trách nhiệm đảm bảo phương pháp thẩm định đầy đủ Chuẩn bị thẩm định: - Thuốc thử hoá chất sử dụng đáp ứng tiêu chuẩn kỹ thuật, phù hợp với mục đích sử dụng - Chất đối chiếu sử dụng phải có nguồn gốc, có COA - Kiểm sốt điều kiện mơi trường thử nghiệm thẩm định phương pháp - Tính tồn vẹn mẫu - Thiết bị hiệu chuẩn theo định kỳ - Cán phân tích đủ lực: Các tiêu đặc trưng cho thẩm định quy trình phân tích: - Tính đặc hiệu (specificity) - Độ tuyến tính (linearity) - Khoảng xác định (range) - Độ (accuracy) - Độ xác (precision) - Độ chắn (Robustness) - Giới hạn phát (limit of detection - LOD) - Giới hạn định lượng (limit of quantitation LOQ) Tính đặc hiệu Là khả phương pháp xác định xác chất cần phân tích có mặt thành phần khác có mẫu thử (các tạp chất, sản phẩm phân huỷ, chất ) Một quy trình phân tích thiếu tính đặc hiệu bổ trợ cách tiến hành thêm quy trình phân tích khác Độ tuyến tính (tiếp) x y 10 100 15 120 20 150 25 170 30 200 Độ tuyến tính (tiếp) No Weight (g) V tt (ml) V lt (ml) Residual (Vtt –Vlt) 0.2026 5.483 5.469 0.014 0.2196 5.919 5.926 -0.007 0.2491 6.713 6.718 -0.005 0.2581 6.971 6.960 0.011 0.3008 8.080 8.106 -0.026 0.3047 8.204 8.211 -0.007 0.3540 9.553 9.535 0.018 0.3501 9.432 9.430 0.002 0.4055 10.916 10.917 -0.001 10 0.4043 10.887 10.885 0.002 Độ tuyến tính (tiếp) Độ • Mẫu tự tạo: Thêm lượng hoạt chất biết vào mẫu placebo (chứa tất thành phần công thức bào chế trừ hoạt chất cần phân tích) Thực tối thiểu mức khối lượng (từ 80% - 120% lượng cân qui định, 70% 130% ĐĐHL), mức lần riêng biệt Độ (tiếp) • Khơng có mẫu tự tạo: Thêm lượng biết chất cần phân tích (tương ứng với 10 %; 20 %; 30 % lượng hoạt chất cần định lượng) Thực tối thiểu mức khối lượng, mức tiến hành lần riêng biệt Lượng thêm vào khơng nên q 50 % lượng HC có sẵn Tổng lượng thêm vào phải nằm khoảng tuyến tính Độ (tiếp) • Áp dụng qui trình phân tích xác định lượng hoạt chất thu hồi -> tính % thu hồi: % thu hồi = Mtt / Mlt x100 • Yêu cầu: 98,0 % - 102,0 % RSD ≤ 2,0 % Độ lặp lại • Tiến hành mẫu thực đồng • Hoặc tiến hành mẫu tự tạo Độ lặp lại • Tiến hành định lượng lần mẫu chế phẩm làm đồng khối lượng hoạt chất 100 % (hoặc mức khối lượng x lần) Tính RSD % kết thu Yêu cầu: RSD ≤ 2,0 % Độ xác trung gian • Thực nghiệm tối thiểu lần mẫu thử với điều kiện thay đổi (kiểm nghiệm viên, thiết bị, ngày tiến hành) • Đánh giá kết quả: - Tính RSD % kết thu được: ≤ 3,0 % (n = 12) - So sánh dãy kết phương pháp thống kê (test ANOVA, student t-test) Độ tái lặp • Thực qui trình phân tích xây dựng tiến hành khác phòng thí nghiệm • Được sử dụng xây dựng chuyên luận dược điển, chuyển giao phương pháp • Khơng bắt buộc thực nghiên cứu độ xác trung gian Độ chắn phương pháp Khảo sát thay đổi yếu tố: - Thiết bị (điện cực, máy chuẩn độ, buret…) - Thay đổi dung mơi pha mẫu, hóa chất, thuốc thử, - Thay đổi nhiệt độ dung dịch phân tích, - Các điều kiện bảo quản dung dịch chuẩn độ (ví dụ tiếp xúc với O2, CO2, …) LOD - LOQ - Dựa vào quan sát (phân tích mẫu biết nồng độ xác định nồng độ tối thiểu quan sát đáp ứng) - Dựa vào tỷ lệ đáp ứng so với nhiễu (áp dụng cho phương pháp phân tích có nhiễu đường nền) - Dựa vào độ lệch chuẩn đáp ứng độ dốc LOD - LOQ (tiếp) Cách tính LOD, LOQ dựa vào độ lệch chuẩn đáp ứng độ dốc: LOD = 3.3 S/a; LOQ = 10 S/a - S: Độ lệch chuẩn đáp ứng (xác định mẫu trắng/placebo, đo đáp ứng đường tính độ lệch chuẩn) S xác định từ độ lệch chuẩn tập hợp giá trị b đường chuẩn - a: Hệ số góc đường hồi quy tuyến tính nồng độ - đáp ứng chất cần phân tích Tài liệu tham khảo • FDA guidance – Guidance on Validation of Analytical Methods • Method Validation in Pharmaceutical Analysis Edited by Joachim Ermer John H McB Miller Copy right © 2005 WILEY-VCH Verlag GmbH &Co.KGaA, Weinhein • Validation of Titration Methods, Applicant brochure 16, Mettler Toledo • Validation of analytical procedures text and Methodology – ICH Q2(R1) • Technical Guide for elaboration of monographs European Directorate for the Quantity of Medicine & HealthCare 7th Edition- 2015 • USP 37 Titrimetry Điện thoại : 0983099011 Địa email: vanhiep261074@yahoo.com.vn ...Nội dung • Thẩm định phương pháp • Phương pháp chuẩn độ thể tích • Thẩm định phương pháp chuẩn độ thể tích: - Nguyên liệu - Thành phẩm THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP Định nghĩa: Thẩm định (validation)... Chuẩn độ acid – base • Chuẩn độ oxy hóa – khử • Chuẩn độ tạo phức • Chuẩn độ kết tủa Các phương pháp chuẩn độ thể tích thơng dụng (tiếp) Phân loại theo phương pháp xác định điểm tương đương: • Dùng... chất chuẩn để so sánh; - Thường cho độ lặp lại cao; - Có thể tiến hành tự động; - Kinh tế Các phương pháp chuẩn độ thể tích thơng dụng Phân loại theo phản ứng hóa học: • Chuẩn độ acid – base • Chuẩn