Khoá luận tốt nghiệp nhân nhanh cây hoa dã yên thảo (petunia hybrida) bằng kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật

TRƯỜNG ĐẠI HỌC sư PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH - KTNN NGUYỄN THÙY VÂN NHÂN NHANH CÂY HOA DÃ YÊN THẢO (PETUNIA HYBRIDA) BẰNG KĨ THUẬT NUÔI CẤY MÔ TÉ BÀO THựC VẬT KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC •• •• Chuyên ngành: Sinh lý học thực vật Ngưòi hướng dẫn khoa học Th.s La Việt Hồng HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới Th.s La Việt Hồng - Khoa Sinh KTNN Trường Đại học Sư phạm Hà Nội tận tình hướng dẫn, giúp đỡ tơi suốt q trình thực đề tài Tơi xin cảm ơn tới Ban Giám hiệu trường ĐHSP Hà Nội 2, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh - KTNN trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện để hồn thành khóa luận Trong thời gian thực đề tài nhận giúp đỡ tận tình Mai Thị Hồng - Phịng thí nghiệm Sinh lý thực vật, thầy Ong Xuân Phong - Trung tâm Hỗ trợ Nghiên cứu Khoa học Chuyến giao Cơng nghệ giúp đỡ, đóng góp ý kiến đế tơi hồn thành đề tài khóa luận, nhân tơi xin gửi lời cảm ơn Tôi xin chân thành cảm ơn tập thể cán Trung tâm Hỗ trợ Nghiên cứu Khoa học Chuyển giao Công nghệ, Phịng thí nghiệm Sinh lí thực vật, Phịng thí nghiệm Thực vật- trường ĐHSP Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi thiết bị, phương tiện đế hồn thành khóa luận Cảm ơn gia đình bạn bè ln động viên, góp ý cho tơi qua trình học tập hồn thành đề tài Hà Nội, ngày 10 thảng 04 năm 2015 Sinh viên NGUYỄN THÙY VÂN LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi Các số liệu, kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố Hà Nội, 10 tháng 04 năm 2015 Sinh viên NGUYỄN THÙY VÂN LỜI CẢM ƠN NAA: Napthlacetic acid BAP: 6-Benzyl amino purin MS: Murashige Skoog Tp.HCM: Thành phố Hồ Chí Minh Nxb: Nhà xuất Ctv Cộng tác viên Bảng 2.1 Các cơng thức thí nghiệm xác định hiệu chất khử trùng 18 Bảng 2.2 Ánh hưởng BAP Kinetin đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo .19 Bảng 2.3 Ảnh hưởng a-NAA nước dừađến tạo rễ Dã yên thảo in vitro 20 Bảng 2.4 Ánh hưởng giá thể tới tỷ lệ sống Dã yên thảo .21 Bảng 3.1 Hiệu chất khử trùng chồi hoa Dã yên thảo 23 Bảng 3.2 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến hệ số nhân chồi Dã yên thảo29 LỜI CAM ĐOAN Bảng 3.3 Ảnh hưởng a-NAA nước dừa đến hình thành rễ Dã yên thảo .31 Bảng 3.4: Ảnh hưởng giá thể tới rèn luyện tự nhiên 33 Hình 3.1 Hiệu chất khử trùng mẫu đỉnh sinh trưởng 23 Dã yên thảo .23 Hình 3.2 Chồi hoa Dã yên thảo (Trái) mẫu in vỉtro vô trùng sau ngày nuôi cấy, (Phải) mẫu in vỉtro bị nhiễm sau ngày nuôi cấy 24 Hình 3.3 Các bước đơn giản tạo vật liệu in vitro từ đỉnh sinh trưởng Dã yên thảo 25 Hình 3.4 Q trình phát sinh phơi mầm (Arabidopsis) 27 Hình 3.5 Quá trình phát sinh phôi soma Dã yên thảo .28 Hình 3.6 Ảnh hưởng nồng độ BAP Kinetin đến hệ số nhân nhanh từ chồi hoa Dã yên thảo .29 Hình 3.7 Cụm chồi Dã yên thảo sau tuần nuôi cấy mơi trường có bố sung BAP 30 LỜI CẢM ƠN Hình 3.8 Tạo rễ Dã yên thảo in vỉtro .32 Hình 3.9 Dã yên thảo giai đoạn rèn luyện 34 Hình 3.10 Dã yên thảo in vitro hoa tự nhiên .34 Hình 3.11 Nhân nhanh hoa Dã yên thảo in vitro .35 MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lý chọn đề tài Mục đích nghiên cứu .2 Nội dung nghiên cứu .2 Ý nghĩa đề tài NỘI DUNG CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu Dã yên thảo (petunia hybrỉda) 1.1.1 Vị trí, phân loại 1.1.2 Mô tả 1.1.3 Nguồn gốc, phân bố 1.1.4 Một số đặc điểm hoa Dã yên thảo .5 1.1.5 Kỹ thuật chăm sóc hoa Dã yên thảo 1.2 Sơ lược nhân giống in vỉtro 1.2.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật .8 1.2.2 Hiện trạng nuôi cấy mô Việt Nam 1.2.3 Thành phần môi trường dinh dưỡng nuôi cấy mô 1.3 Các nghiên cứu nhân giống in vỉtro Dã yên thảo 13 CHƯƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP .15 2.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 15 2.2 Vật liệu thiết bị nghiên cứu .15 2.2.1 Đối tượng nghiên cứu 15 2.2.2 Thiết bị dụng cụ 15 2.2.3 Môi trường nuôi cấy 16 2.2.4 Điều kiện nuôi cấy in vitro 17 2.3 Phương pháp nghiên cứu 17 2.3.1 Bố trí thí nghiệm 17 2.3.2 Nội dung nghiên cứu .17 2.3.3 Phương pháp phân tích số liệu 21 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 3.1 Tạo vật liệu khởi đầu ỉn vỉtro từ chồicây hoa Dã yên thảo .22 3.2 Nhân nhanh Dã yên thảo phương pháp tạo cụmchồi ỉn vỉtro 26 3.2.1 Quan sát phát sinh hình thái q trình tạo mơ sẹo Dã yên thảo in vỉtro 26 3.2.2 Ảnh hưởng BAP Kinetin đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo 28 3.3 Tạo 1'ễ Dã yên thảo ỉn vỉtro (Ảnh hưởngcủa a-NAA nước dừa đến khả tạo rễ) 30 3.4 Rèn luyện Dã n thảo ỉn vỉtro ngồi mơi trường tự nhiên 32 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 36 4.1 Kết luận 36 4.2 Kiến nghị 36 TÀI LIỆU THAM KHẢO 37 MỞ ĐÀU Lý chọn đề tài Sau phút giây bận bịu với cơng việc, người tìm cho thú chơi tao nhã giúp xả stress Có người đến trung tâm thể dục thể thao, bơi lội để rèn luyện sức khỏe, có người lại tìm tới lóp nấu ăn, làm đẹp, có người lại nhà xem tivi, máy tình hay chơi điện tử Bên cạnh đó, có khơng người tìm đến thú vui trồng hoa đế có khoảng khơng gian thoáng đảng với chậu hoa rực rõ' sắc màu [13] Xã hội thị hóa đất chật người đơng với người u thích xanh việc có mảnh vườn trồng thật khó Vì việc tận dụng ban công để trồng hoa ý kiến sáng suốt Hiện việc trồng hoa trang trí ban cơng thịnh hành ưa chuộng đặc biệt khu đô thị Mỗi sớm thức dậy bạn đứng hít thở khí trời, ngắm nhìn ánh bình minh hay ngắm cảnh mặt trời mọc, làm để nhà nhỏ xinh bạn trông quyến rũ, phong cách mà không cần ban cơng q cầu kì Xu hướng tận dụng ban cơng để làm đẹp cho ngơi nhà ngày trở nên ưa chuộng, đặc biệt ngơi nhà có diện tích khơng lớn, khơng đủ đế thiết kế sân vườn, hay không gian thống rộng nơi mặt đất Ket họp ban cơng sắt với họa tiết trang trí đơn giản điểm tơ vài chậu hoa ý kiến sáng tạo cho trang trí ngơi nhà bạn Chỉ cần chút khéo léo kết họp ban công sắt với cảnh, cỏ hoa lá, bạn sở hữu không gian độc đáo ấn tượng [14] Nhưng giá thành số lồi hoa, cảnh cao có hoa Dã n thảo - “nữ hồng hoa ban cơng” Hoa Dã yên thảo du nhập vào nước ta chủ yếu nhân giống từ hạt Tuy nhiên theo Verdork (2005) hoa Dã yên thảo có hạt nhỏ chậm để xử lý nhân giống hạt Đối với nhân giống cành hệ số nhân thấp, không đồng nên chưa thể đáp ứng nhu cầu cần trồng với số lượng lớn, đồng loạt Trong ni cấy mơ phương pháp hiệu nhân giống Đe chủ động việc sản xuất giống giảm giá thành thực nghiên cứu đề tài: “Nhân nhanh hoa Dã yên thảo (petunia hybrida) bang kĩ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật Mục đích nghiên cứu Nhân giống hoa Dã yên thảo (petunỉa hybrida) phương pháp tạo cụm chồi điều kiện in vỉtro Nội dung nghiên cứu - Tạo vật liệu in vitro từ chồi đỉnh Dã yên thảo (petunia hybrỉda) - Ảnh hưởng BAP đến khả tạo cụm chồi Dã yên thảo (petunia hybrỉda) in vitro - Ảnh hưởng a - NAA đến khả rễ Dã yên thảo (petunỉa hybrỉda) ỉn vỉtro Ý nghĩa đề tài Ý nghĩa lí luận: Góp phần bổ sung vào nguồn tài liệu nghiên cứu nhân giống in vitro Dã yên thảo (petunia hybrida) Ý nghĩa thực tiễn: Góp phần sản xuất giống Dã yên thảo có hiệu cao, chất lượng tốt