Xác định hàm lượng polysaccharides và triterpen trong các tiến trình nhân sinh khối nấm thượng hoàng phellinus linteus

ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NÔNG NGHIỆP - TÀI NGUYÊN THIÊN NHIÊN KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG POLYSACCHARIDES VÀ TRITERPEN TRONG CÁC TIẾN TRÌNH NHÂN SINH KHỐI NẤM THƢỢNG HOÀNG Phellinus linteus LƢ THANH HIỀN AN GIANG, THÁNG NĂM 2022 ĐẠI HỌC QUỐC GIA THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH TRƢỜNG ĐẠI HỌC AN GIANG KHOA NƠNG NGHIỆP - TÀI NGUN THIÊN NHIÊN KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC XÁC ĐỊNH HÀM LƢỢNG POLYSACCHARIDES VÀ TRITERPEN TRONG CÁC TIẾN TRÌNH NHÂN SINH KHỐI NẤM THƢỢNG HOÀNG Phellinus linteus LƢ THANH HIỀN MÃ SỐ SV: DSH182628 CÁN BỘ HƢỚNG DẪN TS HỒ THỊ THU BA AN GIANG, THÁNG NĂM 2022 CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG Đề cƣơng khóa luận “ Xác định hàm lƣợng polysaccharides triterpen tiến trình nhân sinh khối nấm thƣợng hoàng Phellinus linteus”, sinh viên Lƣ Thanh Hiền thực dƣới hƣớng dẫn TS Hồ Thị Thu Ba Tác giả báo cáo đề cƣơng nghiên cứu đƣợc Hội đồng khoa học Đào tạo thông qua ngày……………………………………………………… Phản biên Phản biện TS Đoàn Thị Minh Nguyệt ThS Văn Viễn Lƣơng Cán hƣớng dẫn TS Hồ Thị Thu Ba i LỜI CẢM TẠ Trong suốt trình học tập, em cảm thấy tự hào vinh hạnh sinh viên thuộc ngành Công nghệ Sinh học thuộc khoa Nông nghiệp – Tài nguyên – Thiên nhiên trƣờng đại học An giang tạo điều kiện cho tơi hồn thành tốt khóa luận tốt nghiệp Trƣớc tiên cho tơi chân thành cảm ơn Ban giám hiệu Trƣờng đại học An Giang giảng viên môn ngành Công nghệ Sinh học dạy dỗ giúp đỡ em trình học tập năm vừa qua Tiếp theo em xin cảm ơn sâu sắc đến cô TS Hồ Thị Thu Ba, ngƣời hƣớng đẫn em suốt q trình thực khóa luận, quan tâm, tận tình hƣớng đẫn giúp trao dồi thêm nhiều kiến thức Tôi cảm ơn cô nhiều, chúc cô dịi sức khỏe thành cơng đƣờng giảng dạy Cuối xin gửi lời cảm ơn đến bạn tập thể lớp DH19SH, giúp đỡ em suốt năm học vừa qua.Cùng trải qua buổi học căng thăng, hay vui đùa Cùng trải qua kỉ niệm đẹp chuyến thực tế Chúc bạn tập thể DH19SH khỏe mạnh thành công đƣờng nghiệp tƣơng lai ……….ngày…… tháng….năm 2022 Ngƣời thực Lƣ Thanh Hiền ii LỜI CAM KẾT Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu công trình nghiên cứu có xuất xứ rõ ràng Những kết luận khoa học cơng trình nghiên cứu chƣa đƣợc công bố nghiên cứu khác ………,ngày….tháng……năm 2022 Ngƣời thực Lƣ Thanh Hiền iii TÓM TẮT Nghiên cứu “Xác định hàm lƣợng polysaccharides triterpen trình nhân sinh khối nấm thƣợng hoàng Phellinus linteus” đƣợc thực nhằm khảo sát sinh trƣởng phát triển tơ nấm thƣợng hoàng (Phenllinus linteus) nhƣ diện polysaccharide triterpen tơ nấm qua giai đoạn nhân giống Kết nghiên cứu cho thấy, tơ nấm lan nhanh môi trƣờng phân lập Rapper (4,15 cm) sau ngày cấy nấm Đối với môi trƣờng hạt sau ngày cấy nấm, sử dung hạt lúa (6,01 cm) để cấy sang môi trƣờng nuôi trồng Tơ nấm lan đầy bịch phôi với thời gian ngắn chất trồng mạt cƣa cao su 90% + 5% cám gạo + 5% bắp xây ( 33 ngày) Trong q trình định tính triterpen nhỏ thuốc thử vào cho sản phẩm màu vàng cam cho thấy diện triterpen tơ nấm, cịn q trình định lƣợng polysaccharide hàm lƣợng polysaccharide cao MT cấp I môi trƣờng Rapper với hàm lƣợng 0,78%, MT cấp II môi trƣờng hạt gạo lứt với hàm lƣợng 0,74%, cịn MT ni trồng mạt cƣa cao su 90% bổ sung 5% cám gạo 5% cám bắp hàm lƣợng cao 0,84% iv MỤC LỤC CHẤP NHẬN CỦA HỘI ĐỒNG i LỜI CẢM TẠ ii LỜI CAM KẾT iii TÓM TẮT iv MỤC LỤC v DANH SÁCH BẢNG viii DANH SÁCH HÌNH ix DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT x CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 TÍNH CẤP THIẾT CỦA ĐỀ TÀI 1.2 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 1.3 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 1.4 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 1.5 NHỮNG ĐÓNG GÓP CỦA ĐỀ TÀI CHƢƠNG TỔNG QUAN VỀ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.1 SƠ LƢỢC NẤM THƢỢNG HOÀNG 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Phân bố 2.1.3 Đặc điểm hình thái 2.2 THÀNH PHẦN DINH DƢỠNG VÀ DƢỢC CHẤT NẤM THƢỢNG HOÀNG (Plellinus linteus) 2.2.1 Thành phần dinh dƣỡng nấm thƣợng hoàng 2.2.2 Dƣợc chất nấm 2.3 HOẠT ĐỘNG SINH HỌC 16 2.3.1 Hoạt động chống viêm 16 2.3.2 Chống oxy hóa 17 2.3.3 Hoạt động kháng vi khuẩn chống virus 17 2.4 ỨNG DỤNG DƢỢC LÝ 17 2.4.1 Chống ung thƣ 17 2.4.2 Tác dụng chống ung thƣ 17 v 2.4.3 Hạ đƣờng huyết 18 2.4.4 Bảo vệ thần kinh 18 2.4.5 Bảo vệ gan 18 2.4.6 Dƣợc lý khác 19 2.5 MỘT SỐ THÀNH PHẦN TRONG MÔI TRƢỜNG NUÔI TRỒNG NẤM 19 2.6 CÁC NGHIÊN CỨU LIÊN QUAN 20 2.6.1 Nghiên cứu nƣớc 20 2.6.2 Nghiên cứu nƣớc 21 CHƢƠNG VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 23 3.1 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 23 3.1.1 Thời gian thực 23 3.1.2 Địa điểm thực 23 3.1.3 Vật liệu nghiên cứu 23 3.2 PHƢƠNG PHÁP TIẾN HÀNH 23 3.2.1 Nội dung 1: Nghiên cứu xác định hàm lƣợng polysaccharide triterpen ảnh hƣởng môi trƣờng đến nhân giống cấp nấm thƣợng hoàng (Phellinus linteus) 23 3.2.2 Nội dung 2: Nghiên cứu xác định hàm lƣợng polysaccharide triterpen ảnh hƣởng môi trƣờng đến nhân giống cấp nấm thƣợng hoàng (Phellinus linteus) 29 3.2.3 Nôi dung Nghiên cứu xác định hàm lƣợng polysaccharide triterpen ảnh hƣởng mơi trƣờng trồng nấm thƣợng hồng (Phellinus linteus) 30 3.3 PHÂN TÍCH DỮ LIỆU 32 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 4.1 PHÂN TÍCH CHỈ TIÊU ẢNH HƢỞNG CỦA MƠI TRƢỜNG NHÂN GIỐNG CẤP ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN TƠ NẤM THƢỢNG HỒNG 33 4.2 PHÂN TÍCH TRITERPEN TRONG TƠ NẤM NHÂN GIỐNG CẤP I 37 4.3 KẾT QUẢ ĐỊNH LƢỢNG POLYSACCHARIDE CỦA NẤM THƢỢNG HỒNG TRÊN MƠI TRƢỜNG CẤP I 38 4.4 PHÂN TÍCH CHỈ TIÊU ẢNH HƢỞNG CỦA MƠI TRƢỜNG NHÂN GIỐNG CẤP II ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN TƠ NẤM THƢỢNG HỒNG 40 4.5 PHÂN TÍCH TRITERPEN TRONG TƠ NẤM NHÂN GIỐNG CẤP II 43 vi 4.6 ĐỊNH LƢỢNG POLYSACCHARIDE CỦA NẤM THƢỢNG HỒNG TRÊN MƠI TRƢỜNG CẤP II 45 4.7 PHÂN TÍCH CHỈ TIÊU ẢNH HƢỞNG CỦA MƠI TRƢỜNG NUÔI TRỒNG ĐẾN SỰ PHÁT TRIỂN TƠ NẤM THƢỢNG HỒNG 46 4.8 PHÂN TÍCH TRITERPEN TRONG TƠ NẤM TRONG MÔI TRƢỜNG NUÔI TRỒNG 50 4.9 ĐỊNH LƢỢNG POLYSACCHARIDE CỦA NẤM THƢỢNG HOÀNG TRÊN MÔI TRƢỜNG NUÔI TRỒNG 51 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 57 5.1 KẾT LUẬN 57 5.2 KIẾN NGHỊ 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ CHƢƠNG 58 vii DANH SÁCH BẢNG Bảng Thành phần dinh dƣỡng thể nấm thƣợng hoàng P igniarius P linteus Bảng Thành phần khoáng chất nấm thƣợng hồng cho mg/100g nấm khơ Bảng Hàm lƣợng acid amin tự nấm thƣợng hồng cho mg/100g nấm khơ Bảng Thành phần monosaccharide PPC chiết xuất từ P linteus 13 Bảng Các nghiệm thức sử dụng thí nghiệm 24 Bảng Thành phần dung dịch dùng để dựng đƣờng chuẩn glucose 28 Bảng Các nghiệm thức sử dụng thí nghiệm 29 Bảng Các nghiệm thức sử dụng thí nghiệm 31 Bảng Bán kính trung bình tơ nấm sau 3, 5, ngày sau cấy nấm 33 Bảng 10 Hàm lƣợng polysaccharide môi trƣờng cấp I 40 Bảng 11 Sự lan tơ trung bình mơi trƣờng hạt 41 Bảng 12 Hàm lƣợng polysaccharide môi trƣờng cấp II 46 Bảng 13 Tốc độ trung bình số ngày lan tơ môi trƣờng nuôi trồng 47 Bảng 14 Hàm lƣợng polysaccharide môi trƣờng nuôi trồng 53 Bảng 15: Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp nấm thƣợng hoàng (cm) 63 Bảng 16 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I 63 Bảng 17 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp nấm thƣợng hoàng (cm) 64 Bảng 18 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I 64 Bảng 19 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại mơi trƣờng nhân giống cấp nấm thƣợng hồng (cm) 65 Bảng 20 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I 65 Bảng 21 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hoàng (cm) 66 Bảng 22 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II 66 Bảng 23 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hoàng (cm) 67 Bảng 24 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II 67 Bảng 25 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hoàng (cm) 68 Bảng 26 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II 68 Bảng 27 Độ lan tơ nấm thƣợng hoàng đạt 50% bịch phôi (ngày) 69 Bảng 28 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ 50% môi trƣờng trồng 69 Bảng 29 Độ lan tơ nấm thƣợng hồng đạt 100% bịch phơi (ngày) 70 Bảng 30 ANOVA Về tiêu tốc độ lan tơ 100% môi trƣờng trồng 70 viii Sau q trình nghiên cứu từ thí nghiệm 3, thí nghiệm thí nghiệm tổng hợp bƣớc để định lƣợng từ nấm Thƣợng hoàng Phellinus linetus nhƣ sau: Tơ nấm (1g) Đun nóng + bình kín+ 30 mL ethanol + 70oC + bể điều nhiêt 1h Phần rắn sấy khô 60oC 24h Ngâm 42,8 mL NaOH 5%, to 60oC, 77 phút Hỗn hợp đƣợc lọc thu dịch lọc Trung hịa HCl 5% Cơ đặc 45oC, 6h Thẩm tích nƣớc ion 10oC, ngày Cơ đặc 45oC, đạt thể tích 10 mL 40 mL ethanol 96% Kết tủa Ly tâm (10.000 vòng/phút, 10 phút, 4oC) Kết tủa rửa nhiều lần ethanol 96% Ly tâm (10.000 vịng/phút, 10 phút) Tách polysaccharide thơ Polysaccharide sấy khô 500C 56 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Qua trình khảo sát rút số kết luận sau Môi trƣờng nhân giống cấp I, mơi trƣờng Rapper mơi trƣờng có tốc độ lan tơ nhanh bán kính nấm đạt 4,15 cm sau ngày cấy nấm Ngồi sử dụng mơi trƣờng PDA để nhân giống nấm thƣợng hồng Môi trƣờng nhân giống cấp II môi trƣờng hạt lúa tốc độ tơ lan 6,01 cm sau ngày cấy nấm Môi trƣờng nuôi trồng môi trƣờng mạt cƣa cao su 90% bổ sung 5% cám gạo 5% bắp xây thời gian tơ lan kín bịch phơi ngắn dao động 33 ngày Trong trình định tính triterpen nhỏ thuốc thử vào cho sản phẩm màu vàng cam cho thấy diện triterpen tơ nấm, màu đậm chứng tỏ hàm lƣợng triterpen nhiều Hàm lƣợng polysaccharide cao MT cấp I môi trƣờng Rapper với hàm lƣợng 0,78%, MT cấp II môi trƣờng hạt gạo lứt với hàm lƣợng 0,74%, cịn MT ni trồng mạt cƣa cao su 90% bổ sung 5% cám gạo 5% cám bắp hàm lƣợng cao 0,84% 5.2 KIẾN NGHỊ Khảo sát thêm hiệu loại môi trƣờng phối trộn tỉ lệ khác thành phần khác để giảm chi phí sản xuất mà đảm bảo hiệu trình nhân giống nuôi trồng Bên cạnh giới hạn thời gian cần có thêm thời gian để hồn chỉnh Cần có thêm nhiều nghiên cứu sâu hoạt chất có dƣợc tính nấm thƣờng hồng để nâng cao khả ứng dụng 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO Dƣơng Thanh Liêm, Lê Thanh Hải, Vũ Thủy Tiên (2010), Thực phẩm chức năng, Sức khỏe bền vững, Nhà xuất khoa học kỹ thuật Nguyễn Ngọc Trai (2015), ảnh hƣởng thành phần chất đến sinh trƣởng suất hai giống nấm linh chi đỏ (Ganoderma lucidum) trông Trà Vinh Khoa học & cơng nghệ 47 Nguyễn Nhƣ Quỳnh (2018) Tìm hiểu loại nấm linh chi thu hái Thủ Đức-TP HCM Đại học Nơng Lâm TP Hồ Chí Minh Nguyễn Tân Thành (2018) Nghiên cứu công nghệ thu nhận số hợp chất hoạt tính sinh học từ hai loài nấm thƣợng hoàng( Phellinus igniarius Phellinus nigheriensis) Việt Nam, ứng dụng thực phẩm Bộ giáo dục đào tạo trƣờng đại học Bách Khoa Hà Nội Nguyễn Văn Bình, Phạm Thị Hƣơng, Nguyễn Tá Lợi (2018) Nghiên cứu số yếu tố ảnh hƣởng đến q trình trích ly hàm lƣợng polysaccharide tồn phần nấm linh chi đỏ Tạp chí khoa học & cơng nghệ 180(04), – Nguyễn Văn Giang, Nguyễn Thị Bích Thuỳ, Vũ Thị Khánh Linh, Nguyễn Duy Trình, Trần Thu Hà (2021) Ảnh hƣởng điều kiện nuôi cấy đến sinh trƣởng hệ sợi nấm Phellinus linteus Bản B Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Việt Nam 63 (2) Trần Thị Trúc, Đỗ Tấn Khang, Bùi Thị Minh Diệu Trần Nhân Dũng (2019) Khảo sát ảnh hƣởng nguồn dinh dƣỡng đến sinh trƣởng phát triển nấm chân dài Panus giganteus (Berk.) Corner Tạp chí Khoa học Trƣờng Đại học Cần Thơ Tập 55, Số chuyên đề: Công nghệ Sinh học (2019)(2): 110-118 Trịnh Tam Kiệt, (2011), Nấm lớn Việt Nam, tập, NXB Khoa học Tự nhiên Công nghệ Hà Nội Barclaya, T G., Daya, C M., Petrovsky, N., and Garga, S (2019) Review of polysaccharide particle-based functional drug delivery Carbohydr Polym 221: 94–112 Chen, W., Tan, H., Liu, Q., Zheng, X., Zhang, H., Liu, Y., and Xu, L (2019) A Review Bioactivities and Pharmacological Applications of Phellinus linteus" Molecules 24, no 10: 1888 Chen, Y S., Lee, S M., Lin, C C., and Liu, C Y (2014) Hispolon Decreases Melanin Production and Induces Apoptosis in Melanoma Cells 58 through the Downregulation of Tyrosinase and Microphthalmia-Associated Transcription Factor (MITF) Expressions and the Activation of Caspase-3, -8 and -9 International journal of molecular sciences 15(1)1201-1215 Cho, J Y , Kwon, Y, J., Sohn, M J., Seok, S J., and Kim, W G (2011) Phellinstatin, a new inhibitor of enoyl-ACP reductase produced by the medicinal fungus Phellinus linteus Bioorganic & medicinal chemistry letters 21 (6), 1716-1718 Choi, D J., Cho, S., Seo, J Y., Lee, H B., and Park, Y Il (2016) Neuroprotective effects of the Phellinus linteus ethyl acetate extract against H2O2-induced apoptotic cell death of SK-N-MC cells Nutrition Research 36 (1), 31-43 G Franz (1989) Polysaccharides in pharmacy:Current applications and future concepts Planta medica 55(06), 493-497 Ge, Q., Zhang, A , and Sun, P (2009) Purification and structural elucidation of a novel fucoglucan from the fruiting bodies of Phellinus baumii Pilat Journal of the science of Food Agriculture 89(2), 343–348 Huang, S C., Wang, P W., Kuo, P C., Hung, H Y , and Pan, T L (2018) Hepatoprotective principles and other chemical constituents from the mycelium of Phellinus linteus Molecules 23 (7), 1705 Huang, S C., Wang, P W., Kuo, P C., Hun, H Y., and Pan, T L (2018) Hepatoprotective principles and other chemical constituents from the mycelium of Phellinus linteus.Molecules 23(7),1705 Kang, H S., Choi, J H., Cho, W K., Park, J C., and Choi, J S (2004) A sphingolipid and tyrosinase inhibitors from the fruiting body of phellinus linteus.Archives of pharmacal research 27(7),742-750 Kim, G Y., Lee, J Y., Lee, J O., Ryu, C H., Choi, B T., Jeong, Y K., Lee, K W., Jeong, S C., and Choi, Y H (2016) Partial Characterization and Immunostimulatory effect novel Polysaccharide-Protein Complex Extracted from Phellinus linteus Biosci Biotechnol Biochent, 70 (5), 1218-1226 Kim, G Y., Lee, J Y., Lee, J O., Ryu, CH., Choi, B T., Jeong, Y K., Lee, KW., Jeong, S C and Choi, Y H (2006) Partial Characterization and Immunostimulatory effect novel Polysaccharide-Protein Complex Extracted from Phellinus linteus Biosci Biotechnol Biochent, 70 (5), 1218-1226 59 Kim, G Y., Park, H S., Nam, B H., Lee, S J., and Lee J D (2003) Purification and characterization of acidic proteo-heteroglycan from the fruiting body of Phellinus linteus (Berk & M.A Curtis) Teng Bioresour Technology, 89(1), 81–87 Kim, J H., Kwon, H J., and Kim, B W (2016) Protective effect of 4-(3, 4Dihydroxyphenyl)-3-Buten-2-One from Phellinus linteus on naproxeninduced gastric antral ulcers in rats Journal of microbiology and biotechnology 26 (5), 823-828 Kong, S Z., Li, J C., Dong, S., Liao, M N., Li, C P., Zheng, P J., Guo, M H., Tan, W X., and Zheng, Z H (2018) Anti-aging effect of chitosan oligosaccharide on d-galactose-induced subacute aging in mice Marine drugs 16(6), 181 Lee, J H., Cho, S M., Kim, H M., Hong, N D., and Yoo, I D (1996) Immunostimulating activity of polysaccharides from mycelia of Phellinus linteus grown under different culture conditions Journal of Microbiology and biotechnology vol No 6, 52-55 Lee, J H., Cho, S M., Ko, K S., Hong, N D., and Yoo, I D (1995) Effect of cultural conditions on polysaccharide production and its monosaccharide composition in Phellinus linteus L13202 The Korean Journal of Mycology 23 (4), 325-331 Lee, J H., Cho, S M., Song, K S., Hong, N D., and Yoo, I D (1996) Characterization of Carbohydrate-Peptide Linkage of Acidic Heteroglycopeptide with Immuno-Stimulating Activity from Mycelium of Phellinus linteus Chem Pharm Bull 44(5) 1093-1095 Lee, J K., Song, J H., and Lee, J S (2010) Optimal Extraction Conditions of Anti-obesity Lipase Inhibitor from Phellinus linteus and Nutritional Characteristics of the Extracts Mycobiology, 38(1), 58-61 Liu, Y., Wang, C., Li, J., Mei, Y., and Liang, Y (2019) Hypoglycemic and hypolipidemic effects of Phellinus linteus mycelial extract from solid-state culture in a rat model of type diabetes Nutrients 11 (2), 296 Marta Lemiesek., and Wojciech Rzeski (2012) Anticancer properties of polysaccharides isolated from fungi of the Basidiomycetes class Contemporary oncology16(4),285 Min, B S., Yun, B S., Lee, H K., Jung, H J., Jung, H A., and Choi, J S (2006) Two novel furan derivatives from Phellinus linteus with anti60 complement activity 16(12),3255-3257 Bioorganic & medicinal chemistry letters Ota, K., Yamzaki, I., Saigoku, T., Fuki, M., Mivata, T., Kamaike, K., Shirahata, T., Mizuno, F., Asada, Y., Hirotani, Masao, Yoshikawa, C I T., Kobayashi, Y., and Miyaoka, H (2017) Phellilane L, Sesquiterpene metabolite of Phellinus linteus isolation,structure elucidation and asyemetric total synthesis The journal of organic chemistry 82(23),1237712385 Shah, T R., Prasad, K., and Kumar, P (2016) Maize-A potential source of human nutrition and health: A review Cogent Food & Agriculture (1), 1166995 Song, K S., Cho, S M., Lee, J H, Kim, H M., Han, S B., Ko, K S., and Yoo, I D (1995) B-Lymphocyte-Stimulating Polysaccharide from Mushroom Phellinus linteus Chem Pharm Bull 43(12) 2105-2108 Sun, H., Fang, W S., Wang, W Z., and Hu, C (2006) Structure-activity relationships of oleanane- and ursanetype triterpenoid Botanical Studies 47: 339-368 Tae-Il Jeon, Chang-Hwa Jung, Jeong-Yong Cho, Dong Ki Park, Jae-Hak Moon (2013) Identification of an anticancer compound against HT-29 cells from Phellinus linteus grown on germinated brown rice Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine (10), 785-789 Wang G.B., Dong L.L., Zhang Y.Y., Ji Y.Y., Xiang W.H., Zhao M., (2012), Polysaccharides from Phellinus linteus inhibit cell growth and invasion and induce apoptosis in HepG2 human hepatocellular carcinoma cells, Biol Plant., 67, 247–254 Wang Y., Wang S.J., Mo S.Y., Yang Y.C., Shi J.G., (2006), An abiteane diteroene and a sterol from fungus Phellinus igniarius, Chin Chem Lett., 17 481–484 Wang, G J., Tsai, T H., Chang, T T., Chou, C J., and Lin, L C (2009) Lanostanes from Phellinus igniarius and their iNOS inhibitory activities Planta Med 75(15), 1602- 1607 Wu, F., Yang, N., Toure, A., Jin, Z., and Xu, X (2013) Germinated brown rice and its role in human health Critical reviews in food science and nutrition 53 (5), 451-463, 2013 61 Xiao, S., Tian, Z., Wang, Y., Si, L L., Zhang, L., and Zhou, D (2018) Recent progress in the antiviral activity and mechanism study of pentacyclic triterpenoids and their derivatives Medicinal research reviews 38 (3), 951-976, 2018 Xin Meng., Hebin Liang., and Lixi Luo (2014) Antiumor polysaccharides from mushroorms:a review on the structural characteristics,antitumor mechanisms and immunomodulating activities.Carbohydrate research 424,30-41 Yong, J WH., Ge, L., Ng, Y F., and Tan, S N (2009) The chemical composition and biological properties of coconut (Cocos nucifera L.) water Molecules 14 (12), 5144-5164 Zaheer, K., and Akhtar, M H (2016) Potato production, usage, and nutritiona review.Critical reviews in food science and nutrition 56 (5), 711-721 Zaporaa, E., Wolkowyckia, M., Bakiera, S , and Zjawiony, J K (2016) Phellinus igniarius: A Pharmacologically Active Polypore Mushroom Article in Natural Product Communications Vol 11 No 1043 – 1046 Zhang, M , Cui, SW , Cheung, PCK , and Wang, Q (2007) Antitumor polysaccharides from mushrooms:a review on their isolation process, structural characteristics and antitumor activity Trends in food science & technology 18(1),4-19 Elsayed, E A., Enshasy, H El., Wadaan, M AM., and Aziz, R (2014) Mushrooms:a protential natural source of anti-inflammatory compounds for medical applications Mediators of inflammation 62 PHỤ CHƢƠNG Thí nghiệm 1: Bảng 15: Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp nấm thƣợng hồng (cm) Đĩa Petri PDA Muối khống PDA nƣớc Raper dừa 2,8 2,4 1,8 3,1 3,2 3,2 2,4 2,3 2,7 3,4 2,7 2,7 3,1 2,6 3,1 2,2 2,7 3,2 2,3 3,2 2,2 2,5 3,4 2,8 2,9 2,6 3,5 3,5 2,7 2,5 3,2 2,3 3,2 2,4 3,3 10 2,4 2,8 2,6 3,2 Bảng 16 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I Nguồn động biến Tổng bình Độ tự phƣơng Trung bình bình phƣơng F 4,14* Nghiệm thức 2,55 0,85 Sai số 7,4 36 0,20 Tổng cộng 9,95 39 CV 16,47 Trung bình 2.75 63 Bảng 17 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp nấm thƣợng hoàng (cm) Đĩa Petri PDA Muối khoáng PDA nƣớc Raper dừa 3,8 3,6 3,4 3,5 3,6 3,8 2,9 3,1 4,1 3,8 3,5 3,7 3,8 3,9 3,1 3,5 3,3 3,8 3,6 3,6 3,2 2,9 1,6 4,2 3,5 3,4 3,6 4,1 4,2 3,5 3,4 3,8 2,9 3,8 2,8 3,9 10 2,7 3,5 3,4 Bảng 18 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 2,04 0,68 0,20 Sai số 7,25 36 Tổng cộng 9,29 39 CV 12,84 Trung bình 3,49 64 3,38* Bảng 19 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại mơi giống cấp nấm thƣợng hồng (cm) Đĩa Petri PDA PDA+ Muối PDA+ nƣớc khoáng dừa 4,4 3,8 37 3,9 4,4 3,1 4,2 4,5 3,7 4,5 4,1 3,6 3,7 4,1 3,8 3,3 3,8 3,8 3,9 4,5 3,9 3,7 3,4 4,2 3,7 10 3,1 3,8 3,6 trƣờng nhân Raper 4,2 3,6 4,1 3,9 4,5 4,3 4,1 4,3 4,5 Bảng 20 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp I Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 2,31 0,77 0,18 Sai số 6,77 36 Tổng cộng 9,08 39 CV 11,14 Trung bình 3,89 65 4,09* Thí nghiệm 4: Bảng 21 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hồng (cm) Bình nƣớc biển Gạo Lúa Bắp 2,3 3,9 2,9 2,1 3,4 2,5 2,5 3,2 1,9 1,3 3,4 3,6 1,3 1,8 2,6 2,1 2,8 2,4 1,9 2,3 1,6 2,3 1,2 2,9 1,7 2,3 10 2,8 2,4 3,7 Bảng 22 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 3,72 1,86 0,42 Sai số 11,,36 27 Tổng cộng 15,08 29 CV 26,63 Trung bình 3,89 66 4,41* Bảng 23 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại môi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hoàng (cm) Bình nƣớc biển Gạo Lúa Bắp 5.,1 2,8 4,6 4,5 3,7 5,6 4,6 4,2 4,5 3,4 2,9 6,2 6,2 3,5 3,9 3,4 3,5 5,6 4,3 3,8 4,7 5,1 4,2 2,6 3,8 3,6 5,8 10 5,1 4,5 5,6 Bảng 24 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 8,13 4,06 0,74 Sai số 20,13 27 Tổng cộng 28,26 29 CV 19,73 Trung bình 4,37 67 5,45* Bảng 25 Độ lan tơ sau ngày theo dõi loại mơi trƣờng nhân giống cấp II nấm thƣợng hồng (cm) Bình nƣớc biển Gạo Lúa Bắp 6,1 3,7 6,4 5,2 4,6 8,5 5,7 6,2 7,2 5,9 4,2 5,6 7,2 5,4 5,8 5,3 6,2 6,4 6,1 5,2 6,2 6,4 5,7 4,8 5,7 5,4 6,8 10 6,5 5,8 6,5 Bảng 26 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ ngày môi trƣờng cấp II Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 7,17 3,58 0,67 Sai số 18,29 27 Tổng cộng 25,46 29 CV 5,89 Trung bình 13,97 68 5,29* Thí nghiệm 7: Bảng 27 Độ lan tơ nấm thƣợng hoàng đạt 50% bịch phôi (ngày) Bịch Mùn cƣa Mùn cƣa + Mùn cƣa Mùn cƣa + 100% 5% cám gạo +5% bột bắp 5% cám gạo, 5% bột bắp 20 18 18 22 18 19 22 19 31 20 21 17 21 21 24 19 21 18 23 16 20 34 28 12 28 35 21 17 19 22 18 19 24 18 19 16 10 32 24 25 14 Bảng 28 ANOVA so sánh tốc độ lan tơ 50% môi trƣờng trồng Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 249,67 83,22 21,47 Sai số 773,1 36 Tổng cộng 1022,78 39 CV 11,38 Trung bình 40,7 69 3,87* Bảng 29 Độ lan tơ nấm thƣợng hồng đạt 100% bịch phơi (ngày) Bịch Mùn cƣa Mùn cƣa + Mùn cƣa Mùn cƣa + 100% 5% cám gạo +5% bột bắp 5% cám gạo, 5% bột bắp 38 38 36 35 36 36 31 42 46 35 40 39 40 41 47 35 38 38 47 29 38 45 36 27 47 48 32 28 43 34 35 39 41 32 34 35 10 49 37 41 28 Bảng 30 ANOVA Về tiêu tốc độ lan tơ 100% môi trƣờng trồng Nguồn biến Tổng bình Độ tự động phƣơng Trung bình F bình phƣơng Nghiệm thức 315,8 105,26 26,55 Sai số 955,8 36 Tổng cộng 1271,6 39 CV 7,14 Trung bình 72,125 70 3,96*