phát triển phôi sớm cá ngựa vằn

PF phẳng thành hìnhdạng vây với tuần hoàn xuất hiện; iridophorevõng mạc vòng điềnvào, tế bào đốm trong sọc vằn trên lưng; NO: PF sụn và, đường ruột, 2khoang tại hốc tai; sụn hàm sớm; tuầ

Tổng kết phát triển phôi sớm ở cá ngựa vằn

I Các thời kì phát triển của phôi:

+ Chia làm 7 thời kì phát triển của phôi:

- Hợp tử

- Phân cắt

- Phôi nang

- Phôi vị

- Phân đốt

- Hình thành các đặc điểm của ngành(phân hóa)

- Nở

+Cụ thể:

Giai đoạn Time (h) Mô tả Hợp tử

Phân cắt

Phôi nang

Phôi vị

0 ¾ 2 ¼ 5 ¼ -Chỉ có 1 tế bào - Kéo dài từ khi trứng bắt đầu thụ tinh cho đến khi xảy ra phân cắt đầu tiên

-Lớp đệm bên ngoài trương lên, tách khỏi phôi TBC dồn về cực động vật. 2 đến 7 chu kỳ tế bào xảy ra nhanh chóng và đồng bộ

Nhanh chóng,chu trình phát triển không đồng nhất.Sự che phủ bắt đầu.Chuyển đổi phôi thành phôi nang giữa; hình thành lớp hợp bào noãn hoàng Phát sinh hình thái di chuyển của

sự cuốn vào, hội tụ, và mở rộng hình thành các ngoại phôi bì,nội phôi bì và trục phôi;thông qua cuối quá trình che phủ

Sự tạo phôi vị bắt đầu khi quá trình bao phủ đạt 50%, sau đó sẽ thấy một vùng biên dày xuất hiện được gọi là liềm mầm Từ vùng liềm ở trên, các tế bào sẽ tiếp tục dày lên tạo phôi khiên Khi vùng liềm và phôi khiên hình thành, quá trình bao

Phân đốt

Phân hóa Nở

Ấu trùng

10 24 48 72 phủ sẽ tạm dừng, sau đó quá trình bao phủ mới trở lại cho tới khu bao phủ hoàn toàn.Có thể thấy rất rõ chồi đầu, chồi đuôi - được phân biệt dựa trên kích thước Trục đầu đuôi, lưng bụng giờ đã rất rõ ràng Phân đốt,mầm vòm hầu,đốt thần kinh phát triển,các cơ quan cơ bản,đuôi xuất hiện Giai đoạn phân hóa phôi trục cơ thể thẳng từ túi noãn hoàng,tuần hoàn,sắc tố,tim bắt đầu phát triển Hoàn thành nhanh chóng hình thái của hệ thống cơ quan chính; sụn phát triển ở đầu và ngực,nở không đồng bộ

Phồng bong bóng,bắt đầu hoạt động tìm kiếm thức ăn

Đi sâu vào các giai đoạn

Giai đoạn hợp tử

(Zygote period)

1-cell

Giai đoạn phân cắt

(Cleavage period)

2-cell

4-cell

8-cell

16-cell

32-cell

64-cell

Giai đoạn phôi nang

0

3/4 1 11/4

1 1/2 13/4

2

1,2

3 4 5 6 7 8

Dòng tế bào chất di chuyển tới cực động vật để hình thành đĩa phôi

2 x 2 mảng phôi bào

2 x 4 mảng phôi bào

4 x 4 mảng phôi bào

2 lớp phôi bào sometimes in 4 x 8 mảng

3 lớp phôi bào

3 2/34

41/3

42/3

5 1/452/3

6

9

10

5 lớp phôi bào,quá trình phân cắt ko thường xuyên

7 lớp phôi bào

9 lớp phôi bào,NO: dạng YSL

11 lớp phôi bào,NO:hàng đơn hạt nhân của YSL ,phân hóa đĩa phôi

>11 lớp phôi bào, đĩa phôi bắt đầu phẳng hóa, YSL hạt nhân trong 2 hàng.Mặt phẳng tạo hình elip,NO: nhiều hàngYSL nuclei

Dạng hình cầu.có mặt phẳng ngăn giữa noãn hoàng và đĩa phôi

Dạng hình cầu,noãn hoàng tế bào phồng lên(doming) phía cực động vật vì quá trình che phủ bắt đầu

Đĩa phôi đảo ngược chiều dày bằng nhau,biên độ đạt 30% khoảng cách giữa cực động vật vàcực thực vật

Đĩa phôi vẫn thống nhất độ dày

Vòng mầm có thể nhìn thấy ở cực động vật,độ che phủ 50%

Phôi khiên có thể

22

1819

20

nhìn thấy từ cực động vật , 50% epiboly(độ che phủ)Vây lưng bên rõ ràng dày hơn; ngoại

bì, nội bì,khu vực evacuation có thể nhìn thấy

Mầm não bộ dày lên,mầm dây sống bước đầu phân biệt

từ đĩa phân đốt.Gai đuôi được phát hiện,mầm dây sống ban đầu đã được phân biệt từ sống thần kinh,polster sớm,rãnh giữa trong sống thần

kinh,100% che phủ

Đốt sống đầu tiênPolster xuất hiện,hốc mắt,túi Kupffer

EL = 0,9 mm; mầm tai ; não

neuromeres, thân đốt thần kinh theo hình chữ V; YE hầu như không hình thành; NO: ống tiền thận

EL = 1,4 mm; YE / YB> 0,5 và <1, cơ xoắn lại, nhân mắt(thủy tinh thể), túi Otic, có hình thoiuốn; não sau xuất hiện; đuôi dài ra

EL = 1,6 mm; HTA

= 125 "side-to-side flexures; ốc tai;

Prim-3não sau xuất hiện, đuôi dài ra.

EL = 1,9 mm; HTA

= 120 "; OVL = 5;

YE / YB = 1;xuất hiện sắc tố ở võng mạc và da

EL = 2,5 mm; HTA

= 95 "; OVL = 3; YEiYB> 1; YB /

HD = 2,cảm ứng phản xạ xuất hiệnvàgiảm nếp gấp vây; các tế bào máu đỏ hình thành ở noãn hoàng,phát nhịp tim,võng mạc sắc tố; lưng dải đốt sống

12, lưu thông yếu; vây đuôi

động mạch bên kết thúc ở đuôi,tĩnh mạch bên đuôi; màm vây ngực xuất hiện, đuôi thẳng; NO:

thoái hóa tế bào ở cuối đuôi, lưu thông trong động mạch chủ vòm 1

EL = 2,7 mm; HTA

= 75 "; OVL = 1; PF(HIW) = 3 giờ, chuyển động trong túi ối, đuôi và bụng

có sọc, đôi vòm động mạch chủ duy nhất, vây đuôi động mạch là 3/4 đường.cuối đuôi, màng ngoài tim không

EL = 2,9 mm; HTA

= 55 "; OVL <1>%; YEiYB = 1,5; YB /

HD <1,3; PF (H / W) = 1; ko có màng đệm phôi còn lại về phía sau khi bơi; YEcòn lại hình trụ; PF đỉnhcầu

xuất hiện; ban đầu đường bên có sọc; lưng có sọc hoàn chỉnh, sắc tố vàng duy nhất trong đầu; lớp tế bào trongvõng mạc; màng ngoài tim nổi bật; NO: buồng tim, các mạch máu phân đoạn; hàm dưới vàvòmsụn dưới lưỡi; foregut phát triển, lông mao khứu giác,hốc tai dày lên

EL = 3,1 mm; HTA

= 45 "; OVL = PF (H / W) = 2;vây lưng dựng lên, YE bắt đầu để thon; PFnhọn; sọc lưng và bụng có cả ở đuôi;

ca 6 sắc tố đen trong dải bên; tuần hoàn 2-4 vòm động mạch chủ và phong phú trên võng mạc; NO:

phân đoạn mạch; khứu giác lông mao hoạt động, có cơ quan đường bên

EL = 3,3 mm; HTA

PF phẳng thành hìnhdạng vây với tuần hoàn xuất hiện; iridophorevõng mạc vòng điềnvào, tế bào đốm trong sọc vằn trên lưng; NO: PF sụn

và, đường ruột, 2khoang tại hốc tai; sụn hàm sớm; tuần hoàn thông trong 5-

6 vòm động mạch chủ, miệng nhỏ và

mở tại vị trí vây bụng giữa chừng giữa hai mắt

EL = 3,5 mm; HTA

= 25 ", mở rộng miệng nhô ra trước mắt, tế bào đốm trong noãn hoàng cósọc;

1/2 mắt được bao phủ bởi tế bào đốm, thân vây lưng màu vàng là người đứng đầu; NO: ail1 khe và

nụ filament: sụn tại thuộc về mang cá vòm 1 và 5;

opercuhm bao gồm các kiến trúc thuộc về mang cá 1 hoặc 2; clerithrum

"EL: chiều dài phôi thai; PF: vây ngực; h: giờ phát triển 28,5độ C; HB: khoảng giai đoạn.trong Hisaoka và Battle(1958) phân giai đoạn hàng loạt cá ngựa vằn (hợp lý chính xác thông qua HB giai đoạn 20); HD: đầu đường kính trong xem vây lưng; NO: kinhs

Nomarsk; H / W: chiều cao / chiều rộng; YB: bóng noãn hoàng; YE: noãn hoàng mở rộng; YSL: lớp noãn hoàng hợp bào; HTA: đầu thân thần kinh; OVL chiều dài.hốc tai-Chi tiết hơn ở 1 số giai đoạn(Lấy của Tâm):

High: phôi bào bắt đầu phẳng hoá, hạt nhân YSL trong hai hàng

Trạng thái này đánh dấu kết thúc thời kình trong đó đĩa phôi nằm ở trên đỉnh của các tế bào noãn hoàng Vẫn còn một vòng ở đó các tế bào biên gặp YSL (yolk syncytial

layer= ) Một đặc điểm phân biệt high stage với những trạng thái trước đó bởi sự xuất hiện và số lượng của cả các tế bào đĩa phôi và hạt nhân YSL Góc nhìn phía bên cho thấy

có hơn 11 tầng của các tế bào EVL có thể nhìn thấy được giữa rìa và cực động vật Ở trong mọi khu vực của các đĩa phôi suốt trạng thái này; tế bào trong gian kỳ và một số khác đang nguyên phân Hầu hết các tế bào đĩa phôi đã hoàn thiện chu kỳ tế bào hợp tử

12 trong khi mộtt số đã hoàn thiện chu kỳ thứ 13.YSL vẫn còn có dạng một chiếc nhẫn = mỏng, nhưng cạnh ngoài (cạnh nằm xa đĩa phôi) là trơn tru hơn viền trong Hạt nhân của YSL xuất hiện trở lại từ sự phân chia thứ hai mà không phân bào (phân chia zygotic 11) Nói chung tất cả vẫnn còn bên ngoài lề đĩa phôi, và đóng gói chặt chẽ với nhau

Oblong:

Phôi tiếp tục rút ngắn dọc theo trục động vật thực tạo thành phôi nang giai đoạn cuối có hình dạng mịn và gần cầu Hình dạng này sau đó thay đổi nhỏ trong vài giờ tới, cũng vào khoảng thời gian tạo phôi vị này, sự sắp xếp lại tế bào ngược lại bắt đầu xảy ra nhanh chóng hơn tại bất kì; thời điểm nào trong phát triển Một đặc điểm phân biệt trạng thái này với trạng thái dome tiếp theo là bởi sự xuất hiện một chiếc mặt nằm giữa phần dưới của đĩa phôi và phần trên của tế bào noãn hoàng, I-YSL Ở trạng thái cầu này mặtphẳng này gần như bằng phẳng

Sphere

Sâu vào với bề mặt đĩa phôi của I-YSL bắt đầu tạo thành vòm hướng vào cực động vật Điều này thay đổ;i này diễn ra nổi bật và nhanh chóng trong giao diện giữa đĩa phôi và noã hoàng Đó là dấu hiệu bắt đầu epiboly Tế bào EVL trong chu kỳ dài 13 và nhiều tế bào ở sâu bên trong đi vàochu kỳ 14 E-YSL bắt đầu thu hẹp (Krezel và Driever Solnica năm 1994)

30%-epiboly

Bao phủ, bao gồm tạo vòm của tb noãn hoàng, tạo thành phôi bì, có độ dày gần đồng nhất.Nó bao gồm một lớp EVL (khó quan sát) và một lớp tế bào gồm nhiều lớp (khoảng

4 lớp) nằm sâu ở bên dưới

Mức độ phôi bì che phủ bề mặt noãn hoàng cung cấp một giá trị cho trạng thái cho đến khi epibody kết thúc phần trăm được che phủ là tỷ lệ noãn hoàng bị phôi bì che phủ Do

đó, 30% epibody tức là viền của phôi bì che khoảng 30% khoảng cách từ cực động vật đến cực thực vật.

Độ dày của phôi bì không nhất thiến phải đồng nhất ở các phôi ở trạng thái này.Quan sát vùng viền từ phía bên cạnh, khi phôi vi được xoay theo cực động vật - thực vật sẽ lộ ra một vùng viền mỏng và phẳnng hơn các vùng khác

II Giai đoạn hợp tử:

- sau khoảng 2h sau khi thụ tinh, trên bề mặt cực động vật của trứng xuất hiện 1 đường

lõm là rãnh phân cắt, rãnh này kéo dài đến cực thực vật nhưng không phân cắt hết mà chỉ phân cắt đến hết vùng tế bào chất hoạt động

- rãnh phân cắt thứ 2 thẳng góc với rãnh phân cắt lần 1 và đi qua cực động vật

- rãnh thứ 3 nằm song song với mặt phẳng xích đạo của trứng, kết quả tạo nên 8 phôi bào

- rãnh thứ 4 lại đi qua trục động-thực vật theo mặt phẳng kinh tuyến của trứng

- sự phân cắt tiếp tục cho đến giờ thứ 16, ở giai đoạn này trong phôi xuất hiện xoang phôinang

IV.Giai đoạn phôi vị:

1.SỰ HÌNH THÀNH PHÔI VỊ:

các tế bào di chuyển, sắp xếp lại tế bào đặc trưng cho loài

- quá trình bao phủ được tiếp tục

- các tế bào di chuyển và cuộn lại, hội tụ và mở rộng tạo là mầm phôi, trục thân phôi

- sự phôi vị hóa sẽ tạo ra một phôi có 2 lớp tế bào: một lớp ngoài là ngoại phôi bì và một lớp trong Sau đó lớp trong phân thành hai lớp là nội phôi bì và trung phôi bì Lớp trung phôi bì nằm ở phần lưng( hướng về phía trên) giữa ngoại phôi bì và nội phôi bì Trung phôi bì về sau phát sinh ra dây sống, nội phôi bì cuộn lại thành ống về sau trở thành ống tiêu hóa

Sau giai đoạn phôi vị là sự hình thành phôi thần kinh

2.Tạo phôi vị 2 lá:

- Sự tạo phôi vị giống như ở lưỡng tiêm, khác biệt ở chỗ: Cực thực vật ở phôi Ếch gồm các tế bào lớn, rất giàu noãn hoàng nên có sức ì lớn Chúng không lõm vào xoang phôi nang mà bị đẩy sâu vào do:

+ Cuộn vào của môi lưng

+ Sự lan phủ của các tế bào cực động vật

+ Sự cuộn vào của môi bên và môi bụng

- Phôi khẩu xuất hiện như là một khe lõm ở bán cầu thực vật, dưới liềm xám

- Nguyên liệu liềm xám qua môi lưng đi vào rất nhanh tạo phần nóc của xoang phôi vị

- Xoang phôi nang bị chen lấn dần

Hai khe môi bên được tạo nên do hai bên mép lưng của phôi khẩu lan dần sang cộng với

sự lan phủ của bán cầu động vật.Cung khe lan dần và bán kính của cung nhỏ dần, khi xuất hiện môi bụng thì nó khép kín thành “vòng tròn phôi khẩu”

Khối noãn hoàng chưa vào hết tạo nên nút noãn hoàng nút lấy miệng phôi khẩu

Lực kéo của thành xoang phôi và lực đẩy của các môi làm khối noãn hoàng cuộn vào trong tạo đáy ruột nguyên thủy, phôi khẩu nhỏ dần và khép lại, trung bì và nội bì lộn vào

- Vùng rìa của tấm nhô cao tạo bờ TK.

- Tấm TK chìm sâu xuống, bờ TK cao dần lên đồng thời phôi dài dần ra làm tấm TK có dạng máng và được gọi là máng TK

- Máng TK cuộn lại, hai bên bờ máng dần tiếp xúc nhau tạo ống TK

- Một thời gian ống TK vẫn có lỗ thông với bên ngoài gọi là lỗ TK

- Phần máng TK phía sau khi khép lại sẽ trùm lên cả phôi khẩu hình thành nền ống TK ruột

- Khi 2 bờ trên khép lại, dọc sống lưng nổi lên gờ gọi là mào TK

Song song với quá trình trên là sự tách trung bì theo kiểu túi

+ Dây sống cuộn lại thành một ống trụ

+ Trung bì lan xuống phía dưới chen vào giữa 2 lá nội bì và ngoại bì

+ Nội bì lan lên lưng, bám theo mặt trong của trung bì rồi gặp nhau ở giữa lưng, dưới dâysống

Kết quả: Tạo phôi 3 lá: Nội bì, ngoại bì, trung bì với 3 mặt đối xứng đầu–đuôi, lưng–bụng,

phải-trái

Ngoại bì cho ra:

+ Hệ thần kinh chiếm 1/3 diện tích ngoại bì

+ Biểu bì: Da, sản phẩm của da(móng, tuyến da)

Nội bì cho ra: biểu mô của ruột, tuyến tiêu hóa, biểu mô hô hấp

Trung bì:

+ Trung bì phân đốt(nằm hai bên dây sống):

Phần giáp ngoại bì cho mô liên kết của da(đốt sinh da)

Thành trong và lưng của thể tiết cho cơ(đốt sinh cơ)

Phần còn lại cho sụn và xương

+ Trung bì không phân đốt: Nằm giữa thành ruột và ngoại bì, cho ra các tấm bên Trong tấm bên hình thành nên khe xoang tách tấm bên thành 2 lá: lá thành và lá tạng

Lá thành cho cấu trúc trung bì của chi, da

Lá tạng cho cấu trúc mô liên kết, cơ trơn của ruột, cơ tim, cơ quan trong xoang bụng

Những giai đoạn Thời kỳ Phôi vị :

+ 50 %- Giai đoạn Mọc phủ (5.25 h): Sự Mọc phủ đổi chỗ phias ngoaif bì phôi tới 50% giữa khoảng cách cực động vật và cực thục vật Điều quan trọng để phân biệt những giai đoạn này là bằng cách kiểm tra độ dày và dọc theo biên (khu vực phía ngoài) của các phôi Đặc biệt, soi cực đv dưới kinh thì chua nhin thay ro rang

+ Giai đoạn vòng Mầm (5.63 h) Nhìn rõ cực động vật Sự xuất hiện gần như thống nhất trong cấu trúc của phôi Trong vòng mầm phôi bao gồm hai lớp, ngoài là EVL Các epiblast tiếp, và dày khoảng ba tế bào.Hypoblast nằm bên dưới epiblast, tiếp giáp trực tiếp với các YSL Dày chỉ có khoảng 1-2 tế bào

Các tế bào vẫn còn khoảng một nửa được bao phủ (tức là, epiboly vẫn còn ở mức 50%)

+ Giai đoạn Màn chắn (6 h): Cực đv dễ nhìn thấy nhất Các tế bào noãn hoàng có thể là hơn một nửa được bao phủ, cả hai epiblast và hypoblast làm dày lá chắn Từ gd này có thể p biệt lưng và phần bụng của phôi thai, bởi vì các tế bào ở cực động vật sẽ phát triển thành những cấu trúc đầu.

+ 75%-giai đoạn mọc phủ (8h) : Tiếp tục hình dạng của phôi thai dọc theo trục cực thực vật và động vật Lá chắn phôi thai trở nên khó phân biệt Cái móc phôi thai ít phân biệt hơn so vs giai đoạn màn chắn, trong khi những tế bào đóng gói để làm dài ra cái móc dọctheo trục AP và thu hẹp khoảng cách giữa-bên (tiếp theo thì khó hiểu quá )

+ 90%-giai đoạn mọc phủ (9 h) : Phía lưng của phôi dày hơn ở phía bụng Tế bào noãn hoàng để hở kéo ra từ khu lân cận của cực thực vật có thể bây giờ được coi là một nút noãn hoàng (hình 111- K)

+ Giai đoạn chồi (10 h): Sự mọc phủ đến khi bì phôi hoàn toàn bao trùm nút noãn hoàng Đay là gd hoàn thiên đay, xh day song cac loại

Giai đoạn phát triển chồi đuôi

Chúng ta có thể gọi là giai đoạn này là giai đoạn “chồi đuôi” vì chồi đuôi xuất hiện ở cuốiphần kéo dài trục trong suốt toàn bộ giai đoạn Thật vậy, bởi vì sự tạo hình đuôi dễ dàng nhận thấy trong giai đoạn phát triển này Đánh giá sơ bộ hình dạng của phôi là một cách hiệu quả để xác định giai đoạn phát triển của nó Hơn thế nữa, khi phần đuôi mở rộng, tổng chiều dài phôi sẽ tăng một cách nhanh chóng, vì vậy mà chiều dài phôi sẽ là một chỉ

số hữu ích để đánh giá sau khoảng 15h (hình 16)

Chiều dài phôi, ở bất cứ giai đoạn nào,cũng được xem như là kích cỡ lớn nhất của phôi

Từ hình 1 và 15 sẽ cho thấy rằng đuôi không mở rộng đối diện trực tiếp với đầu Thay vào đó, phần trục mở rộng (ở phía mặt lưng) cuộn xung quanh cực thực vật ban đầu, sát nhập với các tế bào nằm ở mặt bụng trong phôi vị và cuối cùng chồi đuôi sẽ phát triển về phía đầu Các cực đảo ngược trong phần sau của thời kỳ phân chia, phần đuôi kéo dài sẽ được duỗi thẳng nhanh chóng (hình 15L-N) Đầu duỗi thẳng muộn hơn, sau khi hình thành hầu hết các bộ phận trong giai đoạn phát triển tiếp theo, giai đoạn pharyngula (???).Hình16 Biểu diễn mức độ thay đổi chiều dài phôi theo thời gian phát triển (ở 285 ° C) Chiều dài phôi, ở bất cứ giai đoạn nào, cũng được cho là kích cỡ lớn nhất của phôi Không có sự thay đổi chiều dài xảy ra trong suốt 16 giờ đầu tiên (qua các giai đoạn 14-đốt) Đuôi và đầu được tạo ra trong khoảng 16h đến 32 h Sau đó, chiều dài phôi tăng tỷ

lệ với thời gian Chúng tôi tiến hành với một mẫu có thể thấy được bằng mắt thường, bằng cách sử dụng kính hiển vi soi nổi Mỗi điểm dữ liệu đại diện cho giá trị trung bình chiều dài trong các nhóm của phôi (thường là 5-15, không ít hơn 3) phát triển cùng với nhau Dữ liệu thu được từ một vài thí nghiệm riêng biệt được bao gồm trong hình

Các đốt xuất hiện tuần tự trong thân và đuôi (Hình 17).Các đốt đầu phát triển đầu tiên và các đốt phía sau phát triển muộn hơn.Các đốt đầu tiên dường như hình thành nhanh hơn hơn so với những cái sau này, và chúng tôi ước tính tỷ lệ 3 đốt cho mỗi giờ đầu tiên, và 2 đốt cho mỗi giờ sau đó tại nhiệt độ tiêu chuẩn (Hanneman và Westerfield, 1989) Để xác định chính xác số đốt của sử dụng kính hiển vi quang học, bao gồm cả những đốt hình thành cuối cùng trong giai đoạn (xem hình 17)

Một thời gian ngắn sau khi mỗi đốt được hình thành, trên bề mặt của nó sẽ xuất hiện biểu

mô Biểu mô bao quanh khu vực trung mô (ví dụ, đốt thứ ba trong hình 17A, hai đốt trong hình 17D) Phần lớn các tế bào bên trong mỗi đốt sẽ phát triển như một khúc cơ (???) (đôi khi gọi là một myomere), hoặc cơ phân khúc (Hình 17C; xem thêm dưới đây,

hình 34B) Khúc cơ tạo ra sự sắp xếp phân tách của các đốt, làm cho các đốt liền kề được ngăn cách rõ ràng bởi các cầu ngang được tạo thành bởi mô liên kết.

Trong một số loài động vật có xương sống, bao gồm cả một số Cá xương, các đốt đầu tiên dường như là các cấu trúc tạm thời Tuy nhiên, một tế bào được đánh dấu bằng chất phóng xạ trong 1 đốt sớm ở cá ngựa vằn (ví dụ, ở giai đoạn ba đốt) tạo ra một dòng tế bào

cơ tương ứng trong khúc cơ (Hình 19) Như vậy, không có cấu trúc tạm thời trong cá ngựa vằn, đốt đầu tiên hình thành nên khúc cơ rõ ràng đầu tiên và cứ thế tiếp diễn

Các tế bào đầu tiên để kéo dài các sợi cơ được lấy từ một phần của biểu mô đốt trung gian, khu vực "hướng trục" (Thisse et al, 1993) Các tập hợp con sớm phát triển của các

tế bào hướng trục có thể bao gồm một lớp tế bào đặc biệt, dạng cơ tiên phong (Felsenfeld

et al, 1991), được phát hiện bởi biểu hiện tăng cường của các chỉ thị đặc trưng (Hatta et

al, 1991a) Dạng cơ tiên phong được đặt tên như vậy vì chúng phát triển từ rất sớm, và tên gọi này không bao hàm vai trò tạo hình cần thiết của chúng như ở côn trùng (Ho et al.,1984) Ở côn trùng chúng có những tính năng rất khác so với ở cá ngựa vằn Từ các dạng cơ tiên phong, các khúc cơ sẽ tạo nên cấu trúc chữ V Các dạng cơ tiên phong sẽ nằm ở vị trí đỉnh chữ V, sau đó các vách cơ ngang sẽ phát triển sang hai phía từ cùng mộtđỉnh đó

Một dạng phát sinh thứ hai của các đốt là các sclerotome, sau này hình thành sụn xương sống Trong một đốt sớm, các tế bào sclerotome phát triển đi vào giữa biểu mô đốt Cuối giai đoạn phân đốt, các tế bào sclerotome phân lớp, trung mô xuất hiện, và di chuyển dọc theo con đường giữa khúc cơ và notochord (B Morin-Kensicki)

Tiền thận phát triển song song cùng với cặp đốt thứ ba Chúng rất khó để nhận thấy trongquá trình sinh trưởng và phát triển khi chúng đang phình to dần và còn trống rỗng, tuy nhiên ống dẫn của thận lại dễ dàng nhận thấy (Hình 20) Mỗi mầm ống dẫn của thận, lúc đầu không có lòng ống, sau đó phát triển vào cuối giai đoạn này sẽ mở rộng để tạo lòng ống (xem dưới đây), để đưa tới vị trí trung tâm gần hậu môn, vị trí mà sau này các cặp ống dẫn song song sẽ gộp vào với nhau Lòng ống được hình thành và mở ra phía ngoài

1 dạng notochord khác, cũng trong chuỗi AP Một số tế bào của nó hình thành hốc để trở thành thành tố cấu tạo nên cơ quan này (Hình 21, và so sánh với hình 34C dưới đây), và một số tế bào khác sau đó tạo thành vỏ, một đơn lớp biểu mô bao quanh Nội bì chuyển sang hình thái đặc biệt từ lúc bắt đầu của thời kỳ phân đốt, làm lộ ra các phần xuyên qua trục thần kinh (R Warga)

Hình 26 Những tế bào sinh ba nguyên thủy (mũi tên trong A, giai đoạn 9 đốt lúc 13,5h)

sẽ hình thành các tế bào thần kinh cảm giác của hạch sinh ba (mũi tên trong B, giai đoạn

18 đốt lúc 18h) Sợi trục thần kinh ngoại vi có thể nhìn thấy phía dưới bên trái Bên trái Nomarski nhìn, lưng tới đỉnh, mặt trước tới bên trái Các tế bào não giữa nguyên thủy định khu tại dorsolateral tơi não sau giữa otic primordial và octics Các tế bào mào hộp

sọ thần kinh có thể nhìn thấy sự di cư gần primordium sinh ba ở cả hai giai đoạn Khoảng cách vạch = 50 µm.

Một sự co thắt đặc trưng đó là phần quan trọng cho sự xuất hiện phần sau của noãnhoàng, nơi ở phía cuối của đuôi, tạo cho noãn hoàng mang hình dáng quả thận (Hình15H) Sự co thắt nhanh chóng trở nên dễ quan sát hơn (Hình 15J) và ép dần dần vào bêntrong (Hình 15L) Vùng thắt phát triển về phía sau trở nên mỏng hơn và có hình trụ kéodài về phía noãn hoàng, (yolk extension) phần mở rộng của noãn hoàng (Milos and Dingle,1978) Hình dạng của phần mở rộng noãn hoàng sẽ tiếp tục phân biết nó với phần phía

trước, (yolk ball) bóng noãn hoàng

Mầm đuôi bây giờ bắt đầu nhô ra khỏi cơ thể của phôi và nang của Kupffer dễ quan sáttại khu vực của nó (Hình 15H,J (mũi tên), K, 28B)

Giai đoạn 20 đốt (19h) Tạo hình được găn liền với sự co thắt noãn hoàng bắt đầu duỗi

ra thân sau, và điều này, cùng với sự tiếp tục phát triển của đuôi tạo ra một sự tăng đáng

kể chiều dài của phôi thai tới một EL 1,4 mm (Hình 15M) Bây giờ chiều dài của phần

mở rộng noãn hoàng nhiều hơn một nửa đường kính của khối lòng đỏ Thấu kính nguyênthủy xuất hiện và hốc otic nguyên thủy đi vào nang otic (Hình 15 (mũi tên), 25, 27B)trong đó có hai sỏi tai rất nhỏ vào lúc này do đó phải sử dụng Nomarski để quan sátchúng (Hình 25) Não bây giờ cũng trở thành một cấu trúc rỗng, với não thất hiện diệndọc theo chiều dài của nó, và với quang học Nomarski lần đầu tiên có thể nhận ra tiểunão sơ khai Bảy rhombomeres dễ thấy hơn rất nhiều trong một số phôi so với nhữngphôi khác (So sánh hình 25 với hình 30, phía dưới) Đục lỗ từ thành thần kinh bây giờ đãgần hoàn tất trong suốt chiều dài của thân Mầm (các tế bào nguyên thủy) của dây đuôibên nằm ở ngoại bì nguyên thủy giữa nang octic và đốt đầu tiên Một phần đáng kể củamầm sẽ sớm bắt đầu di chuyển ra sau, và sẽ là một giai đoạn quan trong như miêu tả dướiđây Các tế bào thần kinh, bao gồm các tế bào thần kinh vận động nguyên thủy ở cột

sống, tế bào thần kinh hạch sinh ba (Hình 26B), các tế bào thần kinh Rohon-Beard đãphát triển sợi trục thần kinh.

Hình 27 Hình thái của đốt Otic Bên trái Nomarski cái nhìn, lưng tới đỉnh, trước tới bên

trái A: mầm (được trình bày bằng các mũi tên) của tai trong xuất hiện như là một Otic nguyên thủy vững chắc bên cạnh não sau giai đoạn chín đốt (13.5 h) B: Ở giai đoạn 19-

đốt (18,5 h) placode đã rỗng vào túi Otic Mũi tên chỉ ra ranh giới giữa rhombomeres 4

và 5 dọc theo bức tường lưng – hông của não sau C: sỏi tai trở nên nổi bật trong các túi Otic giai đoạn prim – 6 (25 h) D: Pec vây giai đoạn tại 60 h.Hình thái của các bức tường

của nang đã hình thành các mầm của các ống bán nguyệt lưng, tách ra từ buồng chứa sỏitai vùng bụng Lúc này, các túi được đặt trong một viên nang sụn có tính khúc xạ Bóngtối phía dưới nhưng tế bào mang hắc tố ngoài tiêu điểm Khoảng cách thanh = 50 µm cho

A – C, 100 µm cho D

Bây giờ gần như tất cả các gai xương của thân có hình dạng my - otomal chevron và cácthân my - otomal tạo ra các cơn co thắt yếu Nomarski cho thấy rằng các cơ trẻ phíatrước có sự xiên – dọc Lần đầu tiên các cơ co thắt xảy ra ở giai đoạn 17 đốt, liên quan tớinhững myotomes riêng lẻ, và, như đã nói trước đó tương qua với sự mọc vào trong sợitrục thần kinh từ những tế bào thần kinh vận động nguyên thủy đầu tiên (Hanneman và

Westerfield, 1989) Dần dần các cơn co thắt bắt đầu kéo theo một chuỗi myotomes và trởnên mạnh mẽ hơn, phối hợp nhiều hơn và thường xuyên hơn.

Trung phôi bì phía trước có các không bào (Hình 21) Các ống dẫn tiền thận mở rộng quatoàn bộ chiều dài của thân và đường cong bụng xung quanh phần mở rộng noãn hoàng,phơi bày nơi hậu môn cuối cùng sẽ phát triển theo đường giữa bụng ở cấp độ đốt thứ 17,

và phục vụ để phân biệt ranh giới giữa thân và đuôi (Sau đó bởi vì sự sắp xếp lại hìnhthái vị trí của hậu môn sẽ dịch chuyển tới đốt thứ 15)

Phía sau và vây lưng tơi phía cuối của ống tiền thận trong bụng đuôi giai đoạn đầu, tíchlũy trung mô trong một khối trung gian của trung bì, tiền thân đầu tiên của hòn đảo tạomáu (Hình 17D, 20A)

Giai đoạn 26 đốt (22h) Tại giai đoạn này EL=1,6 mm Sự nắn thẳng thân là gần như

hoàn chỉnh nhưng đuôi kéo dài vẫn cong ở trên bụng (Hình 15N,O) Phần noãn hoàng mởrộng bây giờ dài gần bằng phần bóng nõa hoàng Mầm tiểu não đã thấy rõ và ta có thểnhận ra sơ bộ cả mấu trên não và vùng dưới đồi ở não trung gian (Hình 23C) Tấm khứugiác dày trước và lưng tới não trước, và bây giờ ta có thể nhìn rõ hai sỏi tai trong mõinang Otic với kính lúp soi nổi Với quang học Nomarski giai đoạn sơm sự di chuyển đivào đường ranh giới mầm đã được chứng minh; đỉnh tiến của mầm ở quá đốt thứ ba (vìthế, sẽ được giải thích dưới đây, chúng ta có thể gọi đây là giai đoạn giai đoạn Prim-3).Các đốt cuối cung của chuỗi hình thành thành chậm hơn so với những đốt khác (khôngđược hiển thị trong các đường cong lý tưởng hóa của hình 18), và tổng số lượng cuốicùng hình thành biến động từ 30 tới 34 cặp Đảo máu bây giờ đã có sự phân biết với các

tế bào máu Sơ bộ của vây không cặp đôi trung bình xuất hiện trong các đường giữa lưng,dọc theo chiều dài của đuôi (Hình 28C), đôi khi tại 22 h, nhưng thường xuyên hơn ở 23 h(Gai đoạn 28 đốt)

Các cơn co thắt tự phát myotomal bây giờ sản xuất một chằng buộc từ bên này sang bênkia, và tần số của chúng tăng thoáng qua khi dechorionation

GIAI ĐOẠN PHARYNGULA (24-48 H)

Ballard (1981) đặt ra thuật ngữ "pharyngula" để đề cập đến phôi thai đã phát triển đếngiai đoạn phyolotypic, khi nó sở hữu bauplan động vật có xương sống cổ điển Dựa theonhững định luật nổi tiếng của Baer (thảo luận bởi Gould, 1977) là một cách dễ dàng nhất

đế so sánh hình thái phôi đa dạng ở các loài động vật có xương sống, và cho cá ngựa vằnchúng tôi xấp xỉ thời kì 2 của ngày thứ 3 trong quá trình phát triển phôi (Hình 29) Phôilúc này rõ ràng là một sinh vật được tổ chức 2 bên song song, đang đi vào giai đoạnpharyngula với một trung phôi bì phát triển tốt, và một tập hợp các đốt vừa được hoànthành kéo dài tới cuối hậu môn ở cái đuôi dài Hệ thống thần kinh rỗng và mở rộng vềphía trước Với việc tạo hình nhanh chóng tiểu não của não cuối (Hình 30A), chỉ trướcgiai đoạn pharyngula, não được chạm khắc thành năm thùy (Hình 23C)

Tên giai đoạn tập trung sự phát triển của các vòm họng, vào giai đoạn sơm có hiện diệnnhưng khó phân biệt các vòm họng riêng lẻ Các vòm họng phát triển nhanh chóng tronggiai đoạn ngày thứ 2 từ một vùng nguyên thủy có thể hình dung ở phần bụng và bằngkhoảng hai lần nang otic (Hình 31) Tất cả bảy vòm họng phát triển từ mầm này, mộtranh giới nổi bật bên trong nó (mũi tên trong hình 31) xảy ra giữa vòm họng 2 và 3 Ranhgiới này là quan trọng, vòm trước sau (hàm dưới và vòm xương móng) tạo thành hàm vànắp mang, và vòm (thuộc về mang cá) sau nó sẽ hình thành mang