Theo dõi một số chỉ tiêu sinh sản và quá trình phát triển phôi của cá hô (catlocarpio siamensis)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA SINH HỌC ỨNG DỤNG KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH NUÔI TRỒNG THUỶ SẢN MÃ SỐ: 52620301 THEO DÕI MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH SẢN VÀ QUÁ TRÌNH PHÁT TRIỂN PHÔI CỦA CÁ HÔ (Catlocarpio siamensis) Cán hướng dẫn Sinh viên thực Ts PHẠM MINH THÀNH Ths ĐẶNG VĂN TRƯỜNG BÙI SƠN NÊN MSSV: 0853040072 Lớp: NTTS K3 Cần Thơ, 2012 CHƯƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ 1.1 Giới thiệu Hệ thống sông Mê Công xem hệ thống sông lớn mầu mớ Việt Nam Nó cung cấp thực phẩm sinh kế cho hàng triệu cư dân Sông Mê Công chứa đựng khu hệ cá phong phú đa dạng giới Có 1.200 loài cá sống đại diện cho nhiều họ, có 40 loài cá quan trọng loài liệt vào loài có nguy tuyệt chủng nguy đặc biệt (MRC, 2005) Trong đó, cá Hô (Catlocarpio siamensis) loài giống Catlocarpio Ủy hội sông Mê Công (MRC) xếp vào danh sách loài cá sông quan trọng hạ lưu sông Mê Công cần bảo vệ Cá Hô loài cá bật kích thước lớn, chất lượng thịt ngon, có giá trị kinh tế cao, cá lớn Cá Hô xem loài cá lớn họ Cá Chép (Cyprinidae), dài đến 3m nặng đến 300 kg Cá Hô xếp vào 10 loài cá khổng lồ sông Mê Công bên cạnh cá Tra dầu, Vồ cờ…Tuy nhiên, số lượng cá Hô đánh bắt tự nhiên giảm sản lượng nghiêm trọng, người ta nghi ngờ số ngư cụ sử dụng gây nên giảm sút Đi đôi với loại ngư cụ bất hợp pháp sử dụng phổ biến nổ mìn đánh thuốc độc số ngư cụ hợp pháp đặc biệt lưới bén gây ảnh hưởng nghiêm trọng Nhưng mối đe dọa loài cá ảnh hưởng phương thức quản lý nguồn nước thủy lợi, thủy điện, chống lũ gây nên Vì vậy, việc nghiên cứu sinh sản nhân tạo loài cá Hô yêu cầu cấp thiết để tìm giải pháp khôi phục đàn cá tự nhiên, bảo tồn nguồn gen quí hiếm, gìn giữ đa dạng sinh học thủy sản Ngoài ra, chủ động cung cấp giống cho người nuôi, làm phong phú cấu giống loài, tăng thêm nguồn thực phẩm thủy sản quý đáp ứng cho nhu cầu xã hội Trước tình hình đó, phân công Khoa Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại học Tây Đô, đề tài “Theo dõi số tiêu sinh sản trình phát triển phôi cá Hô (Catlocarpio siamensis)” thực 1.2 Mục tiêu nghiên cứu Thu thập số dẫn liệu kết kích thích sinh sản cá Hô loại liều lượng hormone khác nhau; góp phần làm sở cho giải pháp kỹ thuật, đạt hiệu kích thích sinh sản 1.3 Nội dung nghiên cứu Xác định tỷ lệ thành thục của cá bố mẹ ao nuôi vỗ Kích thích sinh sản cá Hô não thùy + LHRH_a + Dom Kích thích sinh sản cá Hô não thùy + HCG Xác định thời gian phát triển phôi cá Xác định thời gian cá dinh dưỡng noãn hoàng Xác định thời điểm cá bắt đầu ăn thức ăn môi trường CHƯƠNG LƯỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Đặc điểm sinh học cá Hô 2.1.1 Phân loại Theo Boulenger (1898), cá Hô phân loại sau: Ngành: Chordata Lớp: Actinopterygii Bộ: Cypriniformes Họ: Cyprinidae Giống: Catlocarpio Loài: Catlocarpio siamensis Boulenger, 1898 Tên tiếng Anh: Giant barb 2.1.2 Hình thái Hình 2.1 Cá Hô (Nguồn: www.bestfish4u.com) Theo Trương Thủ Khoa Trần Thị Thu Hương (1982), cá Hô có đầu to, miệng rộng co duỗi được, lỗ mang rộng, màng mang phát triển Phần trước thân có tiết diện tròn, phần sau dẹp bên Vảy tròn, to phủ khắp thân, phần lộ vảy có hình lục giác Đường bên hoàn toàn chạy dài từ mép lỗ mang chấm dứt điểm góc vi đuôi, phần sau đường bên nằm trục thân Vây lưng nằm lệch sau thân Tia đơn vây lưng vây hậu môn hóa xương không hoàn toàn Vây đuôi chẻ rảnh sâu 1/2 chiều dài vây Mặt lưng thân đầu có màu xám đen lợt dần xuống bụng, bụng có màu trắng bạc Ở mặt bên lưng có sắc tố đen viền xung quanh phần lộ vảy tạo thành hình mạng lưới Phần tia vi có màu đen Theo Mai Đình Yên (1992), cá Hô có thân thon dài, hẹp hai bên Đầu rộng Miệng đầu mõm, hàm kéo dài đến viền trước mắt Môi dày Mõm hếch lên, mặt lưng đầu mắt mõm lõm xuống Mắt to, râu, vây lưng cao, tia đơn không hoá xương, gốc phủ vẩy nhỏ Vây ngực, vây bụng, vây hậu môn ngắn Các vây màu đỏ có viền đen Cá có kích thước lớn Giá trị kinh tế cao 2.1.3 Phân bố Theo Trương Thủ Khoa Trần Thị Thu Hương (1982), Cá Hô sống nước ngọt, phân bố sông Mê Công, cá có mặt Lào, Thái Lan, Campuchia Đồng sông Cửu Long (ĐBSCL) Việt Nam Cá Hô gặp nơi thuộc hạ lưu sông Mê Công, đoạn từ thác Khôn trở lên (MRC, 2005) Những nơi thường đánh cá giống vùng ngập, cá cở lớn (A.F Poulsen, 2005) Ở Thái Lan, cá giống có chiều dài từ - cm tìm thấy Chian Saen thuộc tỉnh Chiang Rai, Tab Phanom Khemaratah thuộc tỉnh Ubol Ratchathani (MRC Catch and Culture, 2005) Ở Campuchia vào mùa sinh sản, cá giống xuôi dòng từ Stung Streng đến hồ Tonle Sap nhánh sông nhỏ, thu mẫu tìm thấy ngày có 10 triệu cá trôi dạt xuôi dòng xuống hạ lưu sông Mê Công, có cá Hô giống cỡ 10 - 12 cm tìm thấy (Hortle et al, 2004) (Trích Thi Thanh Vinh, 2008) Ở Việt Nam thường thấy cá Hô có kích thước lớn phân bố khu vực Vàm Nao, vùng tiếp giáp sông Tiền sông Hậu, nơi có nhiều hố xoáy sâu thích hợp cho cá đến trú ẩn, gặp cỡ cá lớn hàng trăm kg (Thi Thanh Vinh, 2008) Cá non thường bắt khắp vùng ngập Campuchia Việt Nam Nghề đáy Tonle Sap thường bắt cá non cỡ lớn số lượng không nhiều Cá trưởng thành đánh dọc theo lưu vực sông ngày (A.F Poulsen, 2005) Hiện nay, Sản lượng cá Hô giảm sút đến mức báo động, đánh bắt được, có nguy bị diệt chủng Cá Hô loài cá ghi sách Đỏ Việt Nam, mức độ diệt chủng bậc E, cần bảo vệ khẩn cấp (Nguyễn Văn Hảo, 1993) 2.1.4 Đặc điểm dinh dưỡng Dinh dưỡng chức quan trọng thể cá Nhờ hoạt động hệ tiêu hoá mà vật chất dinh dưỡng từ môi trường chuyển vào thể dạng thức ăn, nhằm cung cấp lượng cho hoạt động sống thể bơi lội, kiếm ăn, sinh trưởng sinh sản (Trần Ngọc Tuyền, 2008) Theo Phạm Minh Thành Nguyễn Văn Kiểm (2009), lài cá ăn số loại thức ăn định người ta gọi “phổ thức ăn” Có nhiều làm sở cho hình thức phân chia tính ăn cá Theo số loại thức ăn tính ăn cá đơn thực, hẹp thực, rộng thực Tuy nhiên, nay, tính ăn cá chia theo nhóm: cá ăn thực vật, cá ăn động vật cá ăn tạp Theo MRC (2005), cá Hô thuộc loài ăn tạp, di chuyển chậm Thức ăn phần thủy sinh vật tảo, động vật nhỏ, nhuyễn thể, giáp xác, giun, rong trái cây,… Thỉnh thoảng ăn cá Cá Hô có miệng rộng, thuộc loại miệng trên, cá tìm thức ăn tầng mặt tầng giữa, bắt mồi chủ động tầng số bắt mồi thấp (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) Cá Hô từ - 30 ngày tuổi sử dụng loại thức ăn như: Tảo lục (Chlorophyta), Moina, Artemia thức ăn công nghiệp dạng viên mảnh (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) Trong nuôi thương phẩm dùng thức ăn viên có hàm lượng đạm từ 25 - 30% thức ăn tự chế gồm 50% cám 50% bột cá Khẩu phần ăn hàng ngày 3% trọng lượng thân (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) 2.1.5 Đặc điểm sinh trưởng Theo Phạm Minh Thành Nguyễn Văn Kiểm (2009), sinh trưởng gia tăng kích thước, khối lượng cá theo thời gian, kết trình trao đổi chất Những loài cá khác có tốc độ sinh trưởng khác Sống điều kiện môi trường thuận lợi (nhất dinh dưỡng) cá có tốc độ tăng trưởng nhanh, đặc biệt quan trọng cá giai đoạn đầu chu kỳ sống Thức ăn sở cung cấp vật chất dinh dưỡng cho cá, cần phải đáp ứng đủ chất lượng theo nhu cầu dinh dưỡng cá trì nhịp điệu sinh trưởng tốt (Phạm Minh Thành Nguyễn Văn Kiểm, 2009) Theo Huỳnh Hữu Ngãi (2009), cá Hô thuộc giai đoạn từ cá bột lên cá hương khoảng 30 ngày, từ cá hương lên cá giống khoảng 60 ngày Ấu trùng nở dài khoảng cm Cá tăng trưởng từ 100 - 700 gram năm đầu tăng đến 2kg vào năm thứ nhì Trong điều kiện môi trường nhân tạo cá phải năm để trưởng thành Trích Thi Thanh Vinh (2008), theo Potharos (1967) cá Hô loài tăng trưởng nhanh, tự nhiên tăng trọng từ - kg thời gian tháng Vì tự nhiên có nguồn thức ăn phong phú, điều kiện sống thuận lợi, tính ăn rộng nên chúng tìm thức ăn ưa thích dễ dàng Trong thử nghiệm nuôi đơn ao Trung Tâm Quốc gia Giống Thủy sản nước Nam (Viện NCNTTS II), năm thứ sau tháng nuôi cá đạt trọng lượng trung bình 456 g/con, năm thứ hai sau 21 tháng cá đạt trọng lượng trung bình 2.614 g/con sau 32 tháng đạt 6.000 g/con (Nguyễn Văn Khánh, 2005) Nuôi ghép bè An Giang sau 32 tháng nuôi cá đạt trọng lượng trung bình kg/con, lớn 11 kg nhỏ 6kg (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) Theo Huỳnh Hữu Ngãi (2009), cá Hô nuôi ghép có tốc độ tăng trưởng nhanh nuôi đơn, nên chọn mô hình nuôi ghép để góp phần tăng thu nhập trình nuôi cá Hô có kích thước lớn nên đòi hỏi thời gian nuôi phải dài cá đạt kích cỡ thương phẩm theo yêu cầu thị trường Cá Hô lớn tới 300 cm, thông thường đến 100 – 200 cm (A.F Poulsen, 2005) Cở cá ngư dân thường đánh bắt có khối lượng từ 80 – 150 kg (Nguyễn Văn Hảo, 1993) 2.1.6 Đặc điểm sinh sản Sinh sản đặc trưng cá để tạo hệ trì phát triển nòi giống, hoạt động thể cao thích nghi với điều kiện môi trường sống (Phạm Minh Thành Nguyễn Văn Kiểm, 2009) Theo Bộ Thủy sản (1996), mùa vụ sinh sản cá Hô từ tháng đến tháng Nhưng điều kiện nhân tạo nuôi ao nước tĩnh, mùa vụ sinh sản kéo dài từ tháng đến tháng 11, điều kiện nuôi cá cho ăn đầy đủ chất lượng, bố trí mật độ nuôi thích hợp chăm sóc kỹ chế độ thay nước, kích thích phát dục, quản lí môi trường,… Theo MRC (2005), Cá thể 60 kg đẻ 400.000 trứng, cá Hô có đặc điểm di cư sinh sản gần giống với số loài cá khác sông Mê Công, tức chúng đẻ trứng dòng chính, trứng ấu trùng trôi xuôi dòng đến nơi kiếm mồi sinh trưởng suốt mùa lũ Khi mức nước bắt đầu xuống chúng di chuyển ngược lại sông chính, di cư đến nơi ẩn náu cho mùa khô Tuy nhiên, so sánh với nhiều loài khác loài phải trải qua nhiều năm thành thục Cá thành thục sinh dục đạt trọng lượng kg, tương ứng với tuổi thành thục tuổi Đến mùa sinh sản cá di cư lên phần trung lưu sông để đẻ trứng Cá có sức sinh sản lớn Ở cá lớn số lượng đạt - triệu trứng, trứng có màu vàng nhạt hay nâu lớn khoảng mm, sau ngấm nước thành mm Số lượng trứng tùy theo trọng lượng cá (Bộ thủy sản, 1996) Cá Hô loài cá đẻ trứng bán trôi nổi, có đường kính trứng 0,09 - 1,17 mm, tương đương với số loài thuộc họ cá chép khác cá ét mọi, cá mè hôi Sau trương nước trứng lơ lững điều kiện có nước chảy nhẹ Do ấp trứng bình weise, bể composite, bể vòng có kết hợp với sục khí, nhiệt độ 28 - 30 oC trứng nở sau 12 – 12 30 phút (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) 2.2 MỘT SỐ VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 2.2.1 Nuôi vỗ Nuôi vỗ cá bố mẹ khâu có ý nghĩa quan trọng sở vật chất có ý nghĩa định việc sinh sản nhân tạo Sự phát dục tuyến sinh dục có quan hệ chặt chẽ với chế độ dinh dưỡng Kỹ thuật nuôi vỗ hợp lý ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ thành thục, tỷ lệ cá đẻ, tỷ lệ thụ tinh, tỷ lệ nở tỷ lệ sống cá Thức ăn có nguồn gốc động vật hay thực vật điều có thành phần protid, lipid, carbohydrate, vitamin chất khoáng Thành phần chất lượng thức ăn nuôi vỗ cá có ý nghĩa định đến thành thục cá Thức ăn yếu tố quan trọng ảnh hưởng đến sinh trưởng sinh sản cá Các chất dinh dưỡng cung cấp từ thức ăn nguồn lượng cho hoạt động sinh lý thể Sự phát dục tuyến sinh dục có quan hệ chặt chẽ với chế độ dinh dưỡng, không phụ thuộc vào số lượng mà phụ thuộc chất lượng thức ăn Điều kiện dinh dưỡng có ảnh hưởng lớn đến tỷ lệ thành thục mà có ảnh hưởng lớn đến sức sinh sản thực tế Khi số lượng thức ăn đầy đủ chất lượng phù hợp điều kiện tốt cho trình thành thục sinh dục Hiện tượng sinh sản trình thích nghi nhằm trì nòi giống Để chuẩn bị cho mùa sinh sản, trước cá phải trải qua thời kỳ tích luỹ chất dinh dưỡng Qui luật chung loài cá trước mùa thành thục sinh dục, cá có thời gian tăng cường độ bắt mồi, tích luỹ chất dinh dưỡng Trong tự nhiên thông thường trước mùa sinh sản thời kỳ vỗ béo, thể tăng khối lượng, chiều dài, độ béo Các loài cá có thời kỳ vỗ béo dài ngắn khác tuỳ loài Muốn cho việc sinh sản đạt kết quả, cá nuôi ao phải trải qua thời kỳ vỗ béo Các chất dinh dưỡng tích luỹ từ trước sử dụng cho hoạt động phát dục Sự tích luỹ vật chất thời kỳ đầu nuôi vỗ quan trọng Vật chất cung cấp cho giai đoạn chủ yếu hấp thụ trực tiếp từ thức ăn bên Còn giai đoạn nuôi vỗ thành thục, nguồn dinh dưỡng cung cấp cho buồng trứng chủ yếu điều tiết nội Thức ăn nguồn vật chất cho sinh trưởng, lượng cho trao đổi chất mà nguyên liệu cung cấp cho buồng trứng tinh sào Những cá đói có hệ số thành thục thấp không thành thục yếu tố khác môi trường thời gian thành thục trước vụ đẻ thuận lợi Những cá thời kỳ tạo noãn hoàng bị đói thời gian dài buồng trứng bị thoái hoá tiêu biến Thức ăn nuôi vỗ cá bố mẹ có ảnh hưởng đến chất lượng trứng tỷ lệ sống cá (Wantanabe et al., 1985)(Trích Đặng Văn Trường ctv., 2011) 2.2.2 Kích thích sinh sản nhân tạo Kích thích sinh sản đóng vai trò quan trọng thực tiển sản xuất loài cá nuôi Trong điều kiện nuôi, cá không sinh sản tự phát Các nguyên nhân ức chế sinh sản chưa biết đến, liên quan đến stress thiếu yếu tố môi trường gây sinh sản tự nhiên Sự phát triển tuyến sinh dục tái thành thục thường xãy cách bình thường cá nuôi, ức chế trình sinh sản gây yếu tố ngăn cản thành thục cuối chín rụng trứng Đa số loài cá nuôi vỗ ao với chế độ dinh dưỡng điều kiện sinh thái thích hợp cá thành thục sinh dục Kích thích sinh sản cá tiêm hoạt chất hormone có khả trực tiếp hay gián tiếp đưa đa số noãn bào chuyển sang giai đoạn chín rụng trứng, trở nên cần thiết để vượt qua trở ngại kích thích cá đẻ (Đặng Văn Trường ctv., 2011) Tùy loài cá mà sử dụng loại hormon khác để kết sinh sản đạt tỷ lệ cao Theo Huỳnh Hữu Ngãi (2009), cá Hô, năm 2007 2008 loại liều lượng kích dục tố để kích thích sinh sản cá thể bảng 2.1 sau: Bảng 2.1 Loại liều lượng kích thích tố sinh sản cá Hô, thực năm 2007 2008 Liều sơ bộ/kg Liều định/kg Năm loại kích thích tố Cá Cá đực Cá Cá đực Não thùy (mg) 1-2,5 3,5-4 1,75-2 HCG (UI) 500 2.000-4.000 1.000-2.000 2007 Não thùy (mg) 1,5-3 0,75 1,5-2,5 LH-Rha (ug) 180-200 90-100 DOM (mg) 18-20 9-10 Não thùy (mg) 2008 HCG (UI) 500 4.000 2.000 (Nguồn: Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) Sau cá đẻ sử dụng phương pháp thụ tinh khô cho trứng, trứng thụ tinh cho vào bể composite để ấp, bể có nước chảy sục khí liên tục (Huỳnh Hữu Ngãi, 2009) 2.2.3 Sự phát triển phôi hậu phôi Theo Phạm Minh Thành Nguyễn Văn Kiểm (2009), sau trứng thụ tinh trở thành hợp tử hình thành màng sơ cấp trương lên với màng thụ tinh Kết tạo khoảng trống xung quanh trứng (gọi xoang bao trứng) chứa đầy nước, có tác dụng môi trường đệm (bảo vệ cho phôi phát triển) Mức độ trương nước khác theo loài, cao trứng bán trôi Quá trình phát triển phôi từ lúc thụ tinh, tạo hợp tử từ kết hợp tinh trùng trứng trải qua trình biến đổi với nhiều giai đoạn Cuối cá thể trưởng thành, hoàn chỉnh, bao gồm nhiều tượng sinh học quan trọng Tốc độ phát triển cá thể nhanh hay chậm phụ thuộc vào loài, điều kiện môi trường (Nhiệt độ, pH, Oxy,…) số tác nhân khác Theo Đặng Văn Trường ctv (2011), trình phát triển phôi hậu phôi cá trải qua giai đoạn sau: a Giai đoạn I Ngay rơi vào nước bắt đầu hoạt hoá trứng Trước tiên tách màng thụ tinh tạo xoang quanh noãn (periviteline) thông bào vỏ (các hạt vỏ) trương nước vỡ Quá trình vỡ hạt vỏ làm cho lớp tế bào chất vỏ tách làm đôi Bên chứa đầy chất dịch xuất khe quanh noãn Phần lớp vỏ, với phần chất chứa hạt vỏ gắn với màng noãn hoàng màng phóng xạ tạo nên màng thụ tinh Phần lớp vỏ đông đặc lại hình thành lớp vỏ trứng thụ tinh Một phần chất hạt vỏ tiếp tục hấp thụ nước làm cho xoang quanh noãn tiếp tục lớn lên Màng thụ tinh xoang quanh noãn có vai trò ngăn cản không cho tinh trùng khác xâm nhập (Ginzburg, 1961) Trong noãn bào có không bào chứa số chất đặc biệt mà sau thụ tinh chất tiết thúc đẩy hút nước làm trứng trương lên (Sakun, 1960; Zotin, 1961) Sự hình thành xoang quanh noãn tạo khoảng trống màng trứng phía noãn hoàng bên phôi phát triển sau Bên dịch periviteline có áp suất thẩm thấu cao để hấp thụ nước từ bên Sự tăng kích thước sau thụ tinh nhiều tác giả cho tượng có lợi tạo khoảng không gian cho phôi phát triển, giúp cho phôi cử động cách tự do, tăng cường xáo trộn chất dịch quanh noãn hoàng cải thiện điều kiện trao đổi khí trình phát triển (S G Soin,…) Lúc màng trứng căng phồng giống bóng bơm đầy Màng thụ tinh trở nên cứng lại đóng vai trò bảo vệ cho phôi phát triển sau 10