NGHIÊN cứu GENE CAGA của VI KHUẨN HELICOBACTER PYLORI TTH nhung

NGHIÊN CỨU GENE CAGA CỦA VI KHUẨN HELICOBACTER PYLORI Ở BỆNH NHÂN CÓ BỆNH LÝ DẠ DÀY TÁ TRÀNG Ths Bs Thái Thị Hồng Nhung NỘI DUNG Đặt vấn đề Đối tượng phương pháp nghiên cứu Kết nghiên cứu Kết luận ĐẶT VẤN ĐỀ  Được phát Marshall Warren, 1983  Tác nhân gây VDD mạn, loét dày tá tràng, ung thư dày u lympho MALT  IARC: tác nhân nhóm I gây ung thư dày  Cơ chế bệnh sinh phức tạp, phối hợp yếu tố độc lực VK, yếu tố di truyền vật chủ yếu tố mơi trường  Hp có tính đa dạng di truyền cao nên mối liên quan yếu tố độc lực với bệnh lý DD-TT khác biệt theo vùng địa lý Marshall BJ, Warren JR Lancet 1984 Kao, Cheng-Yen, et al Biomedical Journal 2016, 39, pp 14–23 Yamaoka, Yoshio Nature Reviews Gastroenterology & Hepatology 2010, (11), pp 629– GIỚI THIỆU - 48,5% Khác khu vực, quốc gia, vùng quốc gia Hooi et al Gastroenterology 2017 Quach, Duc Trong, et al Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 2018, 19, pp 3565–69 GIỚI THIỆU - Việt Nam: 60% Tỷ lệ UTDD cao nước Đông Nam Á Quach, Duc Trong, et al Asian Pacific Journal of Cancer Prevention 2018, 19, pp 3565–69 Cơ chế bệnh sinh nhiễm Hp Trước tiên, Hp sử dụng enzyme urease để sống sót mơi trường axit dịch vị Sau đó, Hp sử dụng lơng roi để di chuyển phía tế bào biểu mô niêm mạc dày Tiếp đến, Hp dùng yếu tố kết dính để gắn vào thụ thể màng tế bào biểu mô dày Cuối cùng, Hp tiết độc tố gây tổn thương tế bào Kao, C Y Biomed J 2016, 39(1) Gene cagA protein CagA  CagA độc tố H pylori, mã hóa gene cagA nằm đoạn cuối đầu 3’ cagPAI  Sau vận chuyển vào tế bào chủ, CagA trải qua q trình phosphoryl hóa kinase Src Abl tế bào vật chủ gốc tyrosine motif EPIYA (Glu-Pro-Ile-Tyr-Ala) lặp lại đầu C tận Yamaoka Y Nat Rev Gastroenterol Hepatol 2010;7:629-41 Jones KR et al (2010), Front Microbiol, Gene cagA protein CagA  Trong tế bào biểu mơ, CagA phosphoryl hóa hoạt hóa enzyme SHP-2 khơng phosphoryl hóa thơng qua hoạt động NF-κB β-catenin, làm suy yếu nhiều hệ thống tín hiệu nội bào dẫn đến thay đổi hình thái tế bào Yamaoka Y Nat Rev Gastroenterol Hepatol 2010;7:629-41 Jones KR et al (2010), Front Microbiol, MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU (1) Xác định tần suất gene cagA vi khuẩn H pylori bệnh nhân bệnh dày tá tràng (2) Khảo sát mối liên quan gene cagA với bệnh lý dày tá tràng ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 125 bệnh nhân bệnh dày tá tràng có nhiễm H pylori nội soi Trung Tâm Nội Soi Tiêu Hóa- Bệnh Viện Trường Đại Học Y Dược Cần Thơ Tiêu chuẩn chọn bệnh Tiêu chuẩn loại trừ + Có triệu chứng lâm sàng gợi ý bệnh dày tá tràng + Bệnh nhân có dùng PPI tuần, + Kết nội soi chẩn đoán bệnh dày tá tràng như: viêm Bismuth/ kháng sinh tuần trước dày, loét dày tá tràng + Khơng ni cấy H pylori + Có kết mô bệnh học viêm mạn, viêm teo, dị sản, loạn sản + Được chẩn đoán xác định nhiễm H pylori test urease nhanh, nuôi cấy PCR PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Thiết kế NC: tiến cứu, mô tả cắt ngang Nội dung nghiên cứu Tuyển chọn mẫu nghiên cứu Nuôi cấy vi khuẩn H pylori Tách chiết DNA, chẩn đoán xác định H pylori PCR Xác định gene cagA kỹ thuật PCR với cặp mồi đặc hiệu NUÔI CẤY VÀ TÁCH CHIẾT DNA  Ni cấy H pylori vịng 4h sau lấy mẫu  Tách chiết DNA từ mẫu vi khuẩn nuôi cấy sinh phẩm Wizard Genomic DNA Purification (Promega) theo protocol chuẩn  Dung dịch DNA sau tách chiết đo nồng độ đánh giá độ tinh máy NanoDrop, lưu trữ -200C phân tích Chẩn đốn nhiễm H pylori PCR Kit GoTaq Green MasterMix (Promega) ureC-F: 5’-AAGCTTTTAGGGGTGTTAGGGGTTT-3’ ureC-R: 5’-AAGCTTACTTTCTAACACTAACGC-3’ Chứng (+) ( +) 294 bp (-) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA MẪU NGHIÊN CỨU Đặc điểm chung Số lượng Tỷ lệ (%) Tuổi: 40,8± 14,5