Báo cáo thực hành vi sinh môi trường

Báo cáo thực hành vi sinh môi trường

BÀI 1: KHẢO SÁT HỆ SINH VẬT TRONG NƯỚC THẢI I. DỤNG CỤ-MÔI TRƯỜNG-HÓA CHẤT: 1. Dụng cụ: Kính hiển vi quang học Phiến kính, lá kính Hộp Petri Ống nghiệm Que cấy đầu tròn, đầu nhọn Pipet Đèn cồn Bình tia 2. Môi trường- hóa chất: Nước muối sinh lý 0,9% Mẫu nước thải Nước cất vô trùng Cồn 96 0 • Môi trường nuôi cấy vi khuẩn: Môi trường cao thịt – peptone: Cao thịt: 0,6g Peptone: 2g NaCl: 1g Agar: 4g Thêm nước cất đủ 200ml Lắc đều, điều chỉnh pH=7,0±0,2 Nấu sôi nhẹ, phân phối môi trường vào dụng cụ để khử trùng ở 121 0 C trong 30 phút. • .Môi trường nuôi cấy nấm men: Môi trường Hasen: Glucose, maltose (hoặc đường kính):10g Peptone: 2g K 2 HPO 4 : 0,6g MgSO 4 .7H 2 O: 0,4-1g Agar: 4g Thêm nước cất đủ: 200ml Lắc đều, điều chỉnh pH= 6,0±0,2 Nấu sôi nhẹ, phân phối môi trường vào các dụng cụ để khử trùng ở 121 0 C trong 30 phút. • Môi trường nuôi cấy nấm mốc: Môi trường czapek: Saccarose: 6g NaNO 3 : 6g K 2 HPO 4 : 0,2g MgSO 4 : 0,1g FeSO 4 : 0,1g Agar: 4g pH= 6,0±0,2 khử trùng 1atm/30 phút • Môi trường nuôi cấy xạ khuẩn: Môi trường Gause1: Tinh bột tan: 4g K 2 HPO 4 : 0,1g MgSO 4 .7H2O: 0,1g KNO 3 : 0,2g NaCl: 0,1g FeSO 4 : 0,02g Agar: 4g Thêm nước cất đủ: 200ml pH= 7,2 ÷ 7,4 khử trùng 1atm/30 phút • Môi trường nuôi cấy tảo: Môi trường Tamiya: KNO 3 : 1g MgSO 4 : 0,5g K 2 HPO 4 : 0,25g FeSO 4 .7H 2 O : 0,006g EDTA: 0,0074g Agar: 4g Thêm nước cất đủ: 200ml II. TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM: • Chuẩn bị một loạt các ống nghiệm chứa sẵn 9ml nước muối sinh lí vô trùng. • Hút 1ml mẫu nước ao, hồ, tiến hành pha loãng đến nồng độ 10 -6 • Lấy 3 nồng độ pha loãng cuối cùng để cấy. • Hút 0.1ml mẫu ở mỗi nồng độ nhỏ lên bề mặt môi trường nuôi cấy trong các đĩa petri. cấy ria 3 đĩa ở nồng độ 10 -1 để phân lập. • Dùng que trang, trải đều mẫu lên khắp bề mặt thạch. • Để khô rồi lật úp đĩa lại, gói đem ủ. Riêng những đĩa Petri nuôi cấy tảo thì đem ra ngoài sáng, không cần ủ. • Sau 3-5 ngày xem kết quả. III. KẾT QUẢ: Khuẩn lạc số Hình dạng Đường kính (mm) Độ sáng,độ trong Màu sắc Bề mặt mép Vẽ hình 1 Hình cầu 5 Đục Trắng Phẳng Không đều 2 elip 3 Đục Trắng Phẳng Không đều 3 10 Trắng trong Trắng Lồi Không đều 4 elip 3 Trắng đục Trắng lõm Đều 5 Hoa 5 Trắng đục Trắng Không đều Hình tham khảo: BÀI 2. ĐỊNH LƯỢNG TẢO ĐƠN BÀO TRONG NƯỚC AO, HỒ BẰNG PHƯƠNG PHÁP ĐẾM TRỰC TIẾP I. DỤNG CỤ- MÔI TRƯỜNG-HÓA CHẤT: 1. Dụng cụ: Kính hiển vi quang học Phiến kính, lá kính khuẩn lạc nấm men khuẩn lạc nấm mốc xạ khuẩn Ống nghiệm Pipet 1ml Đèn cồn Bình tia 2. Môi trường-hóa chất: Nước muối sinh lý 0,9% Mẫu nước ao, hồ Nước cất vô trùng Cồn 96 0 II. TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM: Đặt lamelle sạch phủ lên khung đếm. Dùng ống nhỏ giọt hút dung dịch mẫu đã pha loãng, bỏ đi vài giọt đầu vào rãnh buồng đếm, dung dịch thấm vào kẽ buồng đếm và lamelle. Dung dịch chảy tràn từ từ vào các rãnh, lan tỏa lắp đầy khắp lamelle, hơi thừa một ít. Nếu bị giọt mắc lại trong lamelle thì phải làm lại. Đặt buồng đếm lên bàn kẹp của kính hiển vi, dùng kẹp cố định buồng đếm. Thao tác kính hiển vi, dùng vật kính x10 để điều chỉnh sơ bộ trước, sau đó dùng kính x40 để đếm. Đếm số tế bào trong 5 ô lớn (4 ô ở cạnh, 1 ô ở giữa), đếm lần lượt từng ô nhỏ trong 1 ô lớn. Trong tất cả các ô nhỏ cần đếm số tế bào nằm hẳn trong ô trước, sau đó đếm số tế bào nằm cạnh phía trên và cạnh bên phải ô. Đếm tất cả 80 ô nhỏ có trong 5 ô lớn (trường hợp: 1 ô lớn có 16 ô nhỏ). Hoặc đếm 125 ô nhỏ có trong 5 ô lớn (trường hợp: 1 ô lớn có 25 ô nhỏ). Công thức tính: Số tế bào/1 ml mẫu = (a x 4.000 x 1.000)/H a: Số tế bào trung bình có trong 1 ô nhỏ (V = 1/4.000 mm 3 ) 4.000 = Số qui đổi từ 1/4.000 mm 3 thành 1 mm 3 . 1.000 = Số qui đổi từ 1 mm 3 thành 1 ml (1ml = 1.000 mm 3 ) H= hệ số pha loãng ( ví dụ: H= 10 -2 ) II. KẾT QUẢ: Số tế bào/1 ml mẫu = (a x 4.000 x 1.000)/H =11×4000 ×10 3 =44×10 6 tế bào/1ml mẫu [...]... coliforms hiện diện trong 100ml mẫu: BÀI 16: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VI SINH VẬT TRONG KHÔNG KHÍ Ngày thực hành 02/08/2010 I DỤNG CỤ-MÔI TRƯỜNG-HÓA CHẤT: 1 Dụng cụ: Hộp petri Ống nghiệm Tăm bông Pipet 1 ml, 10ml Đèn cồn Bình tia 2 Môi trường- hóa chất: Nước muối sinh lý 0.9% Mẫu đất Nước cất • Môi trường kiểm tra vi sinh vật bề mặt (môi trường czapek): Môi trường czapek: Saccarose: 6g NaNO3: 6g K2HPO4: 0,2g MgSO4:... loãng mẫu đến nồng độ 10-7 • Môi trường Giltay sau khi hấp khử trùng xong để nguội khoảng 50oC • Cấy 1ml dịch mẫu chứa vi sinh vật vào môi trường, chú ý đặt đầu pipet ở phần đáy ống nghiệm để đưa vi sinh vật vào phần đáy môi trường, rồi lắc • Mỗi nồng độ mẫu cấy 3 ống nghiệm từ 10-2 đến 10-7 • Đem đi chưng cách thủy ở 42oC trong 10 phút, để môi trường đông đặc • Cho 4ml môi trường agar vào mỗi ống nghiệm... TÍCH COLIFORMS TRONG NƯỚC THẢI THEO PHƯƠNG PHÁP MPN I DỤNG CỤ, MÔI TRƯỜNG, HÓA CHẤT: 1 Dụng cụ: Hộp petri Ống nghiệm Ống Durham Pipet 1 ml, 10ml Đèn cồn Bình tia 2 Môi trường, hóa chất: + Môi trường BGBL Peptone 2g Lactose 2g Nước cất đủ 200ml Nước muối sinh lý 0.9% Mẫu nước thải II TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM: • Nấu môi trường xong, ta phân phối môi trường vào trong ống nghiệm rồi thả ống duham vào đem đi hấp... TỔNG VI KHUẨN NITRAT HÓA I DỤNG CỤ - MÔI TRƯỜNG - HÓA CHẤT: 1 Dụng cụ: Ống nghiệm Pipet 1ml,10ml Erlen 250ml Đèn cồn Bình tia 2 Môi trường- hóa chất: Nước muối sinh lý 0.9% Mẫu đất Nước cất Cồn 900 Môi trường winogradski: (NH4)2SO4 0.4g K2HPO4 0.2g MgSO4 0.1g NaCl 0.4g FeSO4 0.08g CaCO3 một ít Để riêng FeSO4 sau khi hấp khử trùng hãy cho vào để tránh hiện tượng kết tủa môi trường Sau khi phân phối môi trường. .. Petri đã có môi trường thạch rắn • Ủ trong tủ ấm sau 3 ngày đọc kết quả • Môi trường PCA sau khi đổ xong, để nguội rồi đem ra hành lang (có thể tích 77.76m3), dở nắp hộp petri cho khong khí vào • Sau 10 phút đậy nắp lại đem ủ • Sau 3 ngày đọc kết quả III KẾT QUẢ: Vi sinh vật trong không khí Vi sinh vật trên bề mặt BÀI LÀM LẠI: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VI KHUẨN PHẢN NITRAT TRONG ĐẤT III DỤNG CỤ-MÔI TRƯỜNG-HÓA... mật độ vi khuẩn phản nitrat hiện diện trong MPN/100ml mẫu Định tính vi khuẩn phản nitrat: Độ pha loãng Đục môi trường Sinh khí pH môi trường 10-4 có Có Giảm 10-5 Có Không thấy Giảm 10-6 có Không thấy Giảm BÀI 10: ĐỊNH LƯỢNG TỔNG VI KHUẨN PHÂN GIẢI CÁC HỢP CHẤT KHÓ TAN TRONG ĐẤT I MÔI TRƯỜNG, HÓA CHẤT, DỤNG CỤ: 1 Dụng cụ: Hộp petri Bình tia Bình tam giác Que trải Đèn cồn Pipet 1 ml, 10ml 2 Môi trường, ... thành ống nghiệm nhưng không để cho giấy quỳ đụng vào thành ống • Ủ trong 72 giờ • Môi trường thạch đã đông lại thì hút 0.1ml mẫu cho vào từng hộp Petri, dùng que trang trải đều lên bề mặt thạch • Ủ trong 72 giờ III KẾT QUẢ: Định tính vi sinh vật amon: Độ pha loãng Đục môi trường Tạo bông Tạo cặn Sinh NH3 Sinh H2S 10-5 có có có Có Có 10-6 có có có có có 10-7 có có có Không có Không có Định lượng vi. .. Pipet 1 ml, 10ml 2 Môi trường, hóa chất: Nước muối sinh lý 0.9%, Mẫu đất Nước cất vô trùng Môi trường nuôi cấy: + Môi trường kiểm tra vi sinh vật phân giải các hợp chất phospho vô cơ khó tan Glucoza 4g Ca3(PO4)2 2g (NH4)2SO4 0.2g KCl 0.08g MgSO4.7H2O 0.04g MnSO4 0.004g FeSO4 0.004g Nấm men 0.2g Agar 8g Nước cất đủ 400ml pH 6.8 – 7.0 + Môi trường kiểm tra vi sinh vật phân giải các hợp chất phospho hữu cơ... acetate chì Giấy quỳ Môi trường canh thịt – peptone: Cao thit 1.95g Peptone 6.5g NaCl 3.25g Thêm nước cất cho đủ 650ml Đo pH =7±0.2 Chia ra làm 2 phần Phần 1: 200ml là môi trường lỏng, phân phối vào ống nghiệm để hấp khử trùng Phần 2: 450ml cân 0.9g aga trộn vào môi trường lỏng để là môi trường thạch II TIẾN HÀNH THÍ NGHIỆM: • Lấy 10g đất cho vào erlen chứa sẵn 90ml nước muối sinh lí 0.9%, lắc đều... mỗi nồng độ cấy 3 hộp trong môi trường phospho vô cơ không tan và phospho hữu cơ không tan • Dùng que trang thủy tinh, trải đều mẫu lên khắp bề mặt môi trường • Cấy xong, úp ngược hộp lồng petri và đưa vào tủ ấm, sau 2 đến 3 ngày xem kết quả III KẾT QUẢ: Vi sinh vật phân giải hợp chất phospho vô cơ khó tan Vi sinh vật phân giải hợp chất phospho hữu cơ khó tan Do lượng vi sinh vật quá nhiều nên không . SINH VẬT TRONG NƯỚC THẢI I. DỤNG CỤ-MÔI TRƯỜNG-HÓA CHẤT: 1. Dụng cụ: Kính hiển vi quang học Phiến kính, lá kính Hộp Petri Ống nghiệm Que cấy đầu tròn, đầu nhọn Pipet Đèn cồn Bình tia 2. Môi trường- . Pipet Đèn cồn Bình tia 2. Môi trường- hóa chất: Nước muối sinh lý 0,9% Mẫu nước thải Nước cất vô trùng Cồn 96 0 • Môi trường nuôi cấy vi khuẩn: Môi trường cao thịt – peptone: Cao thịt: 0,6g Peptone:. đều, điều chỉnh pH=7,0±0,2 Nấu sôi nhẹ, phân phối môi trường vào dụng cụ để khử trùng ở 121 0 C trong 30 phút. • .Môi trường nuôi cấy nấm men: Môi trường Hasen: Glucose, maltose (hoặc đường kính):10g Peptone: