Microsoft Word NGUY?N M?NH DUNG NOP THU VIEN BỘ GIÁO DỤC VÀO ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN MẠNH DŨNG NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH TRUẬT (ATRACTYLODES MACROCEPHAL[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀO ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - NGUYỄN MẠNH DŨNG NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH TRUẬT (ATRACTYLODES MACROCEPHALA KOIDZ) NHẬP NỘI BẰNG NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀO ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP & PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM - NGUYỄN MẠNH DŨNG NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG CÂY BẠCH TRUẬT (ATRACTYLODES MACROCEPHALA KOIDZ) NHẬP NỘI BẰNG NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Mã ngành: 60.42.02.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS NGUYỄN THỊ LÝ ANH HÀ NỘI - 2014 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực không trùng lặp với đề tài khác Tôi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn ghi rõ nguồn gốc Học viên Nguyễn Mạnh Dũng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page i LỜI CẢM ƠN Trong q trình thực luận văn, tơi nhận quan tâm, giúp đỡ nhiều cá nhân quan đơn vị Nay luận văn hoàn thành, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành, sâu sắc tới: PGS TS Nguyễn Thị Lý Anh, người tận tình hướng dẫn tạo điều kiện, giúp đỡ nghiên cứu thực đề tài Các thầy giáo, cô giáo thuộc Khoa Công nghệ sinh học, trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội nhiệt tình giảng dạy tạo điều kiện cho tơi hồn thành khóa học Các cán bộ, kỹ thuật viên Viện Sinh học Nông nghiệp - Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội nhiệt tình hướng dẫn, giúp đỡ tạo điều kiện cho thực luận văn Phịng Cơng nghệ tế bào thực vật - Viện Sinh học Nông nghiệp cung cấp mẫu vật nghiên cứu Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn người thân gia đình bạn bè giúp đỡ động viên suốt thời gian học tập Hà Nội, tháng năm 2014 Học viên Nguyễn Mạnh Dũng Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page ii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN .i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix PHẦN I: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề: 1.2 Mục đích, yêu cầu 1.2.1 Mục đích 1.2.2 Yêu cầu 1.3 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN II: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Giới thiệu chung Bạch Truật: 2.1.1 Nguồn gốc phân loại 2.1.2 Đặc điểm thực vật học 2.1.3 Đặc điểm sinh thái nơi phân bố 2.1.4 Thành phần hóa học 2.1.5 Tác dụng dược lý 2.2 Nhân giống trồng in vitro 2.2.1 Các giai đoạn nhân giống in vitro 2.2.2 Vai trị ánh sáng ni cấy thực vật in vitro 10 2.2.3 Ảnh hưởng nguồn carbon hữu đến hình thành củ in vitro 13 2.3 Các nghiên cứu nhân giống Bạch truật 14 2.3.1 Ngoài nước 14 2.3.2 Trong nước 17 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iii PHẦN III VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP 19 3.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu: 19 3.1.1 Đối tượng: 19 3.1.2 Vật liệu: 19 3.1.3 Thời gian địa điểm thí nghiệm: 19 3.2 Nội dung nghiên cứu: 19 3 Phương pháp nghiên cứu: 20 3.3.1 Phương pháp nuôi cấy in vitro: 20 3.3.2 Phương pháp khử trùng mẫu cấy: 20 3.3.3 Phương pháp xác định khối lượng củ in vitro: 20 3.3.4 Phương pháp bố trí thí nghiệm: 21 3.3.5 Các tiêu theo dõi: 25 3.3.6 Phương pháp xử lý số liệu: 27 PHẦN IV KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 28 4.1 Nghiên cứu tạo nguồn vật liệu ban đầu: 28 4.1.1 Ảnh hưởng HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng 28 4.1.2 Ảnh hưởng PRESEPT 0,5% (0,5% Troclosene sodium NaDCC) đến hiệu khử trùng 29 4.2 Nghiên cứu nhân nhanh chồi: 31 4.2.1 Ảnh hưởng nồng độ BA đến khả nhân chồi in vitro Bạch Truật 31 4.2.2 Ảnh hưởng tổ hợp BA Kinetin đến khả nhân chồi in vitro Bạch Truật 34 4.2.3 Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin α NAA đến khả nhân chồi in vitro Bạch truật 37 4.2.4 Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin IBA đến khả nhân chồi in vitro Bạch truật 39 4.3 Nghiên cứu tạo rễ cho chồi Bạch truật: 42 4.3.1 Ảnh hưởng α-NAA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật: 42 4.3.2 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật: 45 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page iv 4.4 Nghiên cứu ảnh hưởng loại đèn chiếu sáng đến khả sinh trưởng phát triển chồi Bạch truật 47 4.5 Nghiên cứu tạo củ in vitro 50 4.5.1 Ảnh hưởng hàm lượng đường đến khả tạo củ cho Bạch truật sáng 51 4.5.2 Ảnh hưởng hàm lượng đường αNAA đến khả tạo củ in vitro cho chồi Bạch Truật sáng 54 4.5.3 Ảnh hưởng điều kiện chiếu sáng đến khả tạo củ cho chồi Bạch truật 56 PHẦN V KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 59 5.1 Kết luận 59 5.2 Đề nghị 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 PHỤ LỤC 64 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page v DANH MỤC BẢNG STT TÊN BẢNG TRANG Bảng 4.1.A Ảnh hưởng HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng mẫu (Sau tuần) 28 Bảng 4.1.B Ảnh hưởng PRESEPT 0,5% (Troclosene sodium NaDCC) đến hiệu khử trùng mẫu (Sau tuần) 30 Bảng 4.2 Ảnh hưởng BA đến khả nhân chồi in vitro (sau tuần) 32 Bảng 4.3 Ảnh hưởng tổ hợp BA Kinetin đến khả nhân chồi in vitro (sau tuần) 35 Bảng 4.4 Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin α-NAA đến khả nhân chồi in vitro (sau tuần) 37 Bảng 4.5 Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin IBA đến khả nhân chồi in vitro Bạch truật (sau tuần) 39 Bảng 4.6 So sánh hệ số nhân chồi công thức tối ưu qua thí nghiệm nhân nhanh 41 Bảng 4.7 Ảnh hưởng α-NAA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật (sau tuần) 43 Bảng 4.8 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật (sau tuần) 45 Bảng 4.9 So sánh tạo rễ công thức tối ưu thí nghiệm tạo rễ 47 Bảng 4.10 Ảnh hưởng loại đèn chiếu sáng đến khả sinh trưởng phát triển chồi Bạch truật (sau tuần) 48 Bảng 4.11 Ảnh hưởng hàm lượng đường đến khả tạo củ in vitro sáng (sau tuần) 52 Bảng 4.12 Ảnh hưởng hàm lượng đường αNAA đến khả tạo củ in vitro sáng (sau tuần) 55 Bảng 4.13 Ảnh hưởng điều kiện chiếu sáng đến khả tạo củ in vitro cho chồi Bạch truật (sau tuần) 57 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vi DANH MỤC HÌNH STT Hình TÊN HÌNH TRANG Đặc điểm hình thái thân, lá, hoa rễ củ bạch truật Hình 4.1.A Ảnh hưởng HgCl2 0,1% đến hiệu khử trùng hạt Bạch truật 29 Hình 4.1.B Ảnh hưởng 0,5% Troclosene sodium (NaDCC) đến hiệu khử trùng hạt Bạch truật 30 Hình 4.2 A Ảnh hưởng BA đến khả nhân chồi in vitro Bạch Truật 33 Hình 4.2.B Động thái tăng trưởng chiều cao chồi Bạch truật mơi trường có BA 34 Hình 4.2.C Động thái tăng trưởng số chồi Bạch truật mơi trường có BA 34 Hình 4.3.A Ảnh hưởng tổ hợp BA Kinetin đến khả nhân chồi in vitro Bạch Truật 36 Hình 4.3.B Động thái tăng trưởng chiều cao chồi Bạch truật mơi trường có tổ hợp BA Kinetin 36 Hình 4.3.C Động thái tăng trưởng số chồi Bạch truật mơi trường có tổ hợp BA Kinetin 36 Hình 4.4.A Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin α-NAA đến khả nhân chồi in vitro Bạch truật 38 Hình 4.4.B Động thái tăng trưởng chiều cao chồi Bạch truật mơi trường có tổ hợp BA, Kinetin αNAA 38 Hình 4.4.C Động thái tăng trưởng số chồi Bạch truật môi trường có tổ hợp BA, Kinetin αNAA 39 Hình 4.5.A Ảnh hưởng tổ hợp chất BA, Kinetin IBA đến khả nhân chồi in vitro Bạch truật 40 Hình 4.5.B Động thái tăng trưởng chiều cao chồi Bạch truật môi trường có tổ hợp BA, Kinetin IBA 40 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page vii Hình 4.5.C Động thái tăng trưởng số chồi Bạch truật mơi trường có tổ hợp BA, Kinetin IBA 41 Hình 4.6 Ảnh hưởng αNAA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật 44 Hình 4.7 Động thái tăng trưởng số lượng rễ chồi Bạch truật mơi trường có bổ sung αNAA 44 Hình 4.8 Ảnh hưởng IBA đến khả tạo rễ cho chồi Bạch Truật 46 Hình 4.9 Động thái tăng trưởng chiều dài rễ chồi Bạch truật môi trường có bổ sung IBA 46 Hình 4.10 Ảnh hưởng loại đèn chiếu sáng đến khả sinh trưởng phát triển chồi Bạch truật 48 Hình 4.11 Ảnh hưởng hàm lượng đường đến khả tạo củ in vitro sáng 53 Hình 4.12 Ảnh hưởng hàm lượng đường αNAA đến khả tạo củ in vitro sáng 55 Hình 4.13 Ảnh hưởng điều kiện chiếu sáng đến khả tạo củ in vitro cho chồi Bạch truật 57 Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page viii