Đang tải... (xem toàn văn)
LÝ THUYẾT Chương 1: Giới thiệu chung Thuốc là gì Thuốc là những sản phẩm có nguồn gốc từ ĐV TV KV, sinh học, sản xuất để nhằm phòng, chữa bệnh, phục hồi, giảm triệu chứong, chẩn đoán bệnh, phục vụ cho quá trình điều trị bệnh, vật liệu dùng trong y tế cũng được gọi là thuốc. Tại sao phải kiểm tra chất lượng thuốc? Vì Thuốc là sản phẩm hàng hóa đặc biệt, có quan hệ trực tiếp đến sức khỏe cộng đồng, đến chất lượng và hiệu quả của việc phòng chữa bệnh. Thế nào là thực hành tốt sản xuất thuốc ? Tất cả quy trình sản xuất phải được quy định rõ ràng và thực hành theo, bằng những cán bộ nhân viên được đào tạo đạt yêu cầu được quy định. Trong quá trình sản xuất, phải có sự kiểm tra, theo dõi, ghi chép để chứng minh tính đúng đắn của sản xuất. Hồ sơ sản xuất và phân phối cần phải lưu lại khi cần tra dấu về lịch sử một lô thuốc, cũng như có một hệ thống tổ chức để quản lý và xử lý các lô thuốc không đạt yêu cầu. Thực hành tốt phòng kiểm nghiệm thuốc? Đáp ứng các yêu cầu cơ bản như cán bộ được đào tạo chu đáo, tổ chức tốt, có trình độ và trách nhiệm kèm theo cơ sở vật chất, trang bị đầy đủ, đảm bảo vệ sinh và quá trình kiểm nghiệm tốt. Có hồ sơ lưu trữ tốt. Đảm bào chất lượng hóa chất, chất chuẩn, thuốc thử, quy trình lấy mẫu và xử lí số liệu. Thực hành tốt bảo quản thuốc?
7CÂU HỎI ÔN TẬP LÝ THUYẾT Chương 1: Giới thiệu chung Thuốc Thuốc sản phẩm có nguồn gốc từ ĐV TV KV, sinh học, sản xuất để nhằm phòng, chữa bệnh, phục hồi, giảm triệu chứong, chẩn đốn bệnh, phục vụ cho q trình điều trị bệnh, vật liệu dùng y tế gọi thuốc Tại phải kiểm tra chất lượng thuốc? Vì Thuốc sản phẩm hàng hóa đặc biệt, có quan hệ trực tiếp đến sức khỏe cộng đồng, đến chất lượng hiệu việc phòng chữa bệnh Thế thực hành tốt sản xuất thuốc ? Tất quy trình sản xuất phải quy định rõ ràng thực hành theo, cán nhân viên đào tạo đạt yêu cầu quy định Trong q trình sản xuất, phải có kiểm tra, theo dõi, ghi chép để chứng minh tính đắn sản xuất Hồ sơ sản xuất phân phối cần phải lưu lại cần tra dấu lịch sử lơ thuốc, có hệ thống tổ chức để quản lý xử lý lô thuốc không đạt yêu cầu Thực hành tốt phòng kiểm nghiệm thuốc? Đáp ứng yêu cầu cán đào tạo chu đáo, tổ chức tốt, có trình độ trách nhiệm kèm theo sở vật chất, trang bị đầy đủ, đảm bảo vệ sinh q trình kiểm nghiệm tốt Có hồ sơ lưu trữ tốt Đảm bào chất lượng hóa chất, chất chuẩn, thuốc thử, quy trình lấy mẫu xử lí số liệu./ Thực hành tốt bảo quản thuốc? Gồm yêu cầu quản lý cán đào tạo đầy đủ, đảm bảo điều kiện bảo quản tốt, thực theo quy trình bảo quản, vận chuyển Các văn pháp luật quy định thực hành tốt sản xuất thuốc, thực hành tốt phòng kiểm nghiệm thuốc, thực hành tốt bảo quản thuốc Hệ thống nhà nước kiểm tra chất lượng thuốc? Bộ Y tế chịu trách nhiệm, chia thành phần: Hệ thống quản lý chất lượng thuốc, kiểm tra chất lượng thuốc, tra Dược Cơ quan: Trung Ương – Viện Kiểm nghiệm thuốc QG, Phân viện Kiểm nghiệm Tỉnh, TP trực thuộc – Trung tâm kiểm nghiệm dược phẩm, mỹ phẩm Có tiêu chuẩn ngành dược? Tiêu chuẩn dược điển VN, tiêu chuẩn sở Nêu quy trình để lấy mẫu kiểm tra chất lượng thuốc theo tiêu chuẩn? Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Lấy mẫu cần phải xem xét đối tượng lấy mẫu thuốc, nguyên liệu làm thuốc chưa đóng gói, thành phẩm hay q trình lưu thông tồn trữ kho, tùy thuộc vào hệ thống tự kiểm tra hay hệ thống quản lý nhà nước Các trường hợp lấy mẫu tự kiểm tra hay tra phải có lượng mẫu định cho phù hợp, tồn lơ thuốc thuốc chữa bệnh có giá trị kinh tế cao Tùy thuộc vào tình hình kiểm tra giám sát chất lượng đột xuất Cần phải ý điều kiện lấy mẫu nơi lấy mẫu, người lấy mẫu, trang thiết bị phục vụ việc lấy mẫu, quy trình cách thức lấy mẫu Tiến hành lấy mẫu: Cách thức tiến hành phương pháp kiểm nghiệm dược? Nhận mẫu mà mẫu có đáp ứng đủ yêu cầu lấy thủ tục, đóng gói niêm phong, có kèm biên bản, cơng văn, tài liệu phụ kèm theo Sau kiểm nghiệm xử lý kết quả, gồm nội dung chuẩn bị tài liệu theo tiêu chuẩn, chuẩn bị dụng cụ hóa chất, tiến hành phân tích theo tiêu chuẩn, có ghi chép xử lý để định đạt tiêu chuẩn hay khong Viết phiếu trả lời kết phiếu kiểm nghiệm hay phiếu phân tích có sẵn Cuối lưu mẫu kiểm nghiệm quan kiểm nghiệm theo tiêu chuẩn Yêu cầu việc kết luận lập báo cáo kiểm nghiệm dược phẩm? Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Báo cáo đầy đủ để thấy rõ mục đích thử nghiệm, nơi thử nghiệm, tên mẫu, ngày thử nghiệm, phương pháp, cán bộ, kết quả, bàn luận kết luận, ký xác nhận, nơi lưu trữ mẫu, hồ sơ, tài liệu Chương 2: Kiểm nghiệm thuốc phương pháp hóa học Yêu cầu phản ứng định tính thành phần thuốc? Nhanh, đơn giản, đặc hiệu, dễ nhận biết Phản ứng diễn nhanh, phải phản ứng khơng thuận nghịch khí Phản ứng có thay đổi rõ rệt như: đổi màu, tạo hòa tan kết tủa, tạo màu cho chất 10 Nguyên tắc phương pháp chuẩn độ acid-base khả áp dụng kiểm nghiệm dược phẩm? Sử dụng thuyết proton Bronsted – Lowry, acid base tạo cặp acid base liên hợp, khác proton A1 + B2 A2 + B1, phản ứng cho nhận proton Dung mơi solvat hóa chất tan, tác động lên q trình điện ly cặp ion Điểm tương đương sử dụng để định lượng thành phần Có ứng dụng kiểm nghiệm thuốc chất phân tích khơng hịa tan nước, sức acid base yếu nước nên khó phát điểm tương đương hay acid base đa chức có số điện ly nước khác biệt 11 Nguyên tắc phương pháp chuẩn độ điện khả áp dụng kiểm nghiệm dược phẩm? Chuẩn độ điện phương pháp phòng thí nghiệm để xác định nồng độ chất phân tích định Trong phương pháp này, khơng sử dụng chất thị hóa học Thay vào đó, đo hiệu điện dung dịch đó, với điểm kết thúc xác định thay đổi đột ngột điện hổn hợp dung dịch chuẩn độ Chương 3: Các phương pháp hóa lý kiểm nghiệm thuốc 12 Trình bày nguyên tắc phương pháp quang phổ? Dựa bước chuyển dời lượng electron chất kích thích, cách tính hiệu mức lượng, ta thu bước sóng hấp thụ xạ để tính độ hấp thụ, từ xác định mối tương quan nồng độ độ hấp thụ Qua đường chuẩn, ta xác định nồng độ chất phân tích 13 Nguyên tắc phương pháp quang phổ hồng ngoại, quang phổ hấp thụ UV-VIS quang phổ huỳnh quang? Phổ hấp thụ UV-Vis dựa bước chuyển dời lượng electron nhận lượng kích thích có tần số phù hợp nằm vùng tử ngoại – khả kiến Bằng cách tính lượng hấp thụ, qua định luật Lambert-Beer tính độ hấp thụ (A=-log(Eout/Ein)=e.C.b) Phổ hồng ngoại IR dựa kích thích xạ nằm vùng hồng ngoại lên phân tử, khiến cho phân tử có dao động quay dao động xung quanh vị trí đồng thời Với nhóm chức khác nhau, chúng có lượng dao động đặc chưng khác kích thích Chỉ dao động khiến thay đổi moment lưỡng cực quan sát phổ IR Phổ IR dung để xác định nhóm chức đặc chưng Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Quang phổ huỳnh quang gần tương tự UV-Vis, ánh sáng không bị giới hạn bước sóng định UV-Vis Yêu cầu chất phân tích cần có khả phát sáng (các hợp chất huỳnh quang có F, Cl, Br) 14 Nguyên tắc định lượng phương pháp phổ? 15 Vẽ sơ đồ nguyên tắc hoạt động thiết bị sắc kí lỏng hiệu cao (HPLC) Credit: NCQB & PĐQ & PĐH 16 Nguyên tắc lựa chọn dung mơi pha động sắc kí lỏng? Hỗn hợp Pha động phải trộn lẫn vào nhau, có khả hịa tan hỗn hợp cần tách, có độ phân cực phù hợp với phương pháp, pha động phải có độ tinh khiết cao, khơng có bọt hay chất rắn lơ lửng, phải có độ ổn định theo thời gian cao 17 Nguyên tắc lựa chọn cột tách phương pháp HPLC? Phân biệt sắc kí pha thuận sắc kí pha đảo? Tùy thuộc vào hỗn hợp tách mục đích tách, chọn cột có kích thước lỗ xốp, kích thước hạt cột, độ dài đường kính cột khác nhau, chất liệu phủ cột silica gel (với đa số hợp chất) hay polymer (đối với hỗn hợp có tính acid/base mạnh base hòa tan cấu trúc silica, acid phân hủy cầu nối Si-O-Si) Sắc kí pha thuận dùng pha tĩnh phân cực, pha động phân cực; Sắc kí pha đảo dùng pha tĩnh phân cực, pha động phân cực 18 Trình bày số loại detector sử dụng phổ biến phương pháp HPLC: PDA, RF, CDD, MS PDA (photo diode array): detector dựa độ hấp thụ quang chất qua dải sóng rộng, cho kết trục quy chiếu (thời gian, bước sóng, cường độ ánh sáng), sử dụng rộng rãi detector UV/Vis RF (fluorescence detector): xác định chất có khả huỳnh quang, độ nhạy cao chọn lọc cho số nhóm hợp chất CDD (conductivity detector): Xác định chất điện li, sử dụng nhiều với sắc ký ion, ngồi cịn xác định nguyên tử phân tử có LOD thấp RID (refractive index detector): Xác định chất dựa vào số khúc xạ Buồng đựng mẫu chia thành khu, khu đựng mẫu đối chứng khu đựng mẫu phân tích, chiếu ánh sáng qua có có khúc xạ phụ thuộc vào thành phần buồng mẫu MS (Mass spectrometry): Xác định dựa số khối, có khả xác định hầu hết chất hữu cơ, xác định cấu trúc nguyên tử/phân tử có LOD thấp 19 Các thông số đặc phương pháp HPLC yêu cầu chuẩn hóa hệ thống HPLC? Yêu cầu chuẩn hóa: Khởi động tắt hệ thống quy trình, đảm bảo ổn định hệ thống, kiểm tra phận tiêu hao định kỳ (kim tiêm, degaser, filament MS), Credit: NCQB & PĐQ & PĐH MS cần đảm bảo chân khơng tốt hiệu chỉnh mảnh phổ Cần làm hệ thống sau vận hành với pha động dung dịch đệm Ngoài số yêu cầu mẫu cho HPLC: Bắt buộc phải có chất chuẩn, thể tích mẫu nhỏ 0.1-1 ml, cần làm giàu làm mẫu trước có lượng mẫu phù hợp đáp ứng với độ nhạy máy 20 Khả áp dụng phương pháp HPLC kiểm nghiệm dược phẩm? Có thể tách chất có nhiệt độ sơi tương đối cao, phân tích định tính định lượng với đa số loại cấu trúc với hàm lượng nhỏ Có độ xác độ chọn lọc cao, chọn pha phù hợp để tang hiệu tách 21 Sơ đồ nguyên tắc hoạt động máy sắc kí khí bản? Các thông số đặc trưng phương pháp sắc kí khí? Là q trình tách hợp phần riêng lẻ từ hỗn hợp phức tạp nhờ tương tác khác với pha động (khí) pha tĩnh (rắn, rắn-lỏng) điều kiện thích hợp 22 Trình bày nguyên tắc lựa chọn khí mang pha động pha tĩnh (cột tách) phân tích sắc kí khí? Khí mang phải khí trơ, tùy vào thành phần hỗn hợp tách để chọn pha tĩnh độ phân cực, nhiệt độ hóa hơi,… để chọn loại cột phù hợp Đặc biệt, GC-MS khí trơ bắt buộc phải He sử dụng khí khác gây detector MS detect chất 23 Vẽ cấu tạo trình bày số loại detector sử dụng phổ biến sắc kí khí: FID, ECD MS Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Credit: NCQB & PĐQ & PĐH 24 Khả áp dụng phương pháp sắc kí khí kiểm nghiệm dược phẩm Xác dịnh hợp chất hữu có nhiệt độ khoảng 320 độ hợp chất hydrocarbon, halogen, OH, CO, amine, SH,… hợp chất thường có dược phẩm 25 Chất chuẩn, chất nội chuẩn, chất đồng hành cách pha chế, bảo quản để sử dụng phương pháp phân tích hóa lí Chất chuẩn: đơn chất hợp chất tinh khiết (hoặc có nồng độ xác định), ổn định dùng để định tính định lượng Chất nội chuẩn: Có tính chất vật lý hóa tương tự chất cần phân tích Có tính ổn định có tính chất khác biệt so với chất phân tích điều kiện xác định Khơng có có (với lượng biết trước) mẫu Chất đồng hành: chất thêm vào với mẫu kiểm nghiệm, ko ảnh hưởng tới mẫu có vai trị quan sát thay đổi mẫu kiểm nghiệm Ví dụ: cho 10 cam chất đồng hành vào giỏ, sau nhiều giai đoạn đo mẫu rơi rớt 10 cam quả, tương ứng chất đồng hành giảm theo 0,8 ⇒ nắm thay đổi mẫu kiểm nghiệm Bảo quản: Bảo quan chất nơi thống mát, khơng ẩm ướt, pha chế bảo quản cần có ghi lại ngày pha, sau thời gian dài cần phải chuẩn độ lại Chương 4: Các phương pháp sinh học kiểm nghiệm thuốc 26 Nguyên tắc phương pháp sinh học kiểm nghiệm thuốc? “So sánh hiệu lực đặc tính riêng chất (mẫu) thử với chất (mẫu) chuẩn tương ứng điều kiện thời gian thí nghiệm định” - Thử nghiệm thuốc phương pháp thử động vật: Thỏ, chuột, chó - Thử nghiệm thuốc thử nghiệm vi sinh vật: Vi khuẩn, vi nấm - Thử nghiệm thuốc người (phương pháp tương đương sinh học) 27 Kiểm nghiệm phương pháp thử động vật? Nguyên tắc: Dựa đáp ứng động vật phịng thí nghiệm chế phẩm đưa vào thể liều lượng theo quy định Yêu cầu động vật phòng thí nghiệm: Đồng đều: tuổi, thể trạng ; Thuần khiết giống nòi Các cách thức thử - In vivo: Thử động vật sống (đo thông số: nhiệt độ, nhịp tim, thay đổi hormone - In vitro: Thử quan lập động vật (cịn gọi phương pháp thử ống nghiệm - Liều (dose) Khái niệm: LD0, LD50, LD100: Nồng độ gây chết cần để 0%/50%/100% số cá thể thử nghiệm chết Khái niệm: ED0, ED50, ED100: Nồng độ có hoạt tính cần đề 0%/50%/100% số thể thử nghiệm có hoạt tính Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Các thử nghiệm động vật - Thử độc tính bất thường - Thử chất hạ huyết (áp liều hạ áp) - Thử chất gây sốt (liều gây sốt) - Định lượng hormone - Kiểm tra tính an tồn vaccine sinh phẩm - Xác định hiệu lực vaccine 28 Kiểm nghiệm phương pháp thử vi sinh vật? Khái niệm vi sinh vật: VSV thể sống có kích thước nhỏ mà mắt thường khơng thể nhìn thấy được: Phương pháp thử vi sinh vật phương pháp thử thuốc môi trường vi sinh vật nuôi cấy * Các bước chuẩn bị môi trường thử nghiệm - Chuẩn bị dụng cụ hóa chất - Cân đong nguyên liệu - Hòa tan nguyên liệu - Điều chỉnh pH, nồng độ muối… - Làm mơi trường - Đóng gói bảo quản mơi trường + Bảo quản: 5-10oC tránh ánh sáng * Các phương pháp tiệt trùng môi trường - Tiệt trùng nhiệt khô: 160-180oC - Tiệt trùng nước + Tiệt trùng nồi hấp: 121oC + Tiệt trùng gián đoạn + Tiệt trùng nhiệt độ thấp cách đun cách thủy - Tiệt trùng phương pháp lọc - Tiệt trùng tia xạ: tia UV 29 Phương pháp kiểm nghiệm tương đương sinh học? Tương đương sinh học thuật ngữ dược động học sử dụng để đánh giá tương đương sinh học in vivo dự kiến hai chế phẩm độc quyền loại thuốc Nếu hai sản phẩm cho tương đương sinh học, điều có nghĩa chúng giống nhau, cho tất mục đích mục đích, giống Chương 5: Kiểm nghiệm dạng bào chế 30 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc dạng bột Thuốc bột kiểm nghiệm phải đáp ứng yêu cầu kĩ thuật tính chất, độ ẩm, độ mịn, độ đồng khối lượng, độ đồng hàm lượng Thuốc bột có nguồn gốc dược liệu phải đạt yêu cầu “giới hạn nhiễm khuẩn” Các phương pháp thử: - Định tính : Tiến hành định tính theo phương pháp qui định tiêu chuẩn, thuốc bột phải cho phản ứng hoạt chất có chế phẩm Credit: NCQB & PĐQ & PĐH - Định lượng: Lấy thuốc đơn vị đóng gói nhỏ , trộn Tiến hành định lượng theo phương pháp qui định tiêu chuẩn, hàm lượng hoạt chất chế phẩm phải nằm giới hạn cho phép Lượng ghi nhãn Tới 100 mg Trên 100 mg tới 1g Trên 1g đến 5g Trên 5g Phần trăm chênh lệch ± 15 ± 10 ±5 ±1 31 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc dạng lỏng Thuốc dạng lỏng kiểm nghiệm phải đáp ứng yêu cầu kĩ thuật tính chất, độ trong, thể tích, pH, độ nhiễm khuẩn, tỷ trọng, độ đồng hàm lượng Các phương pháp thử: - Định tính: Tiến hành định tính theo phương pháp quy định tiêu chuẩn, chế phẩm thuốc phải cho phản ứng hoạt chất có chế phẩm Định lượng: Lấy thuốc đơn vị đóng gói nhỏ bất kỳ, trộn Tiến hành định lượng theo phương pháp quy định tiêu chuẩn, hàm lượng hoạt chất chế phẩm phải nằm giới hạn cho phép 32 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc dạng viên nang Thuốc nang kiểm nghiệm phải đáp ứng yêu cầu kĩ thuật tính chất, độ đồng khối lượng, độ đồng hàm lượng, độ rã, độ hòa tan Các phương pháp thử: - Định tính : Tiến hành định tính theo phương pháp qui định tiêu chuẩn, viên nang phải cho phản ứng hoạt chất có chế phẩm Định lượng: Cân thuốc 20 viên, tính khối lượng trung bình viên, làm đồng cách nghiền ( viên nang chứa bột cốm) trộn (nang chứa chất lỏng) Tiến hành định lượng theo phương pháp qui định tiêu chuẩn, hàm lượng hoạt chất chế phẩm phải nằm giới hạn cho phép theo bảng Lượng ghi nhãn Tới 50 mg Trên 50mg tới 100mg Trên 100mg Phần trăm chênh lệch ± 10 ± 7,5 ±5 33 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc dạng viên nén Thuốc nang kiểm nghiệm phải đáp ứng yêu cầu kĩ thuật tính chất, độ rã, độ đồng khối lượng, độ đồng hàm lượng, độ rã, độ hòa tan Các phương pháp thử: Credit: NCQB & PĐQ & PĐH - Định tính : Tiến hành định tính theo phương pháp qui định tiêu chuẩn, viên nén phải cho phản ứng hoạt chất có chế phẩm Định lượng: Cân xác 20 viễn xác định khối lượng trung bình viên Cân riêng khối lượng viên so sánh với khối lượng trung bình, tính độ lệch theo tỷ lệ phần trăm khối lượng trung bình từ tính khoảng giới hạn giá trị trung bình Khơng q viên có khối lượng chênh lệch khoảng giới hạn khối lượng trung bình khơng có viên có chênh lệch q gấp đối độ lệch tính theo tỷ lệ phần trăm theo bảng Lượng ghi nhãn Phần trăm chênh lệch Tới 80 mg Trên 80mg tới 250mg Trên 250mg ± 10 ± 7,5 ±5 34 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc mỡ - Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử + Tính chất: Thuốc mỡ phải mịn, đồng nhất, không cứng lại tách lớp điều kiện thường, không chảy lỏng nhiệt độ 37 độ C phải bắt dính da hay niêm mạc bôi Màu sắc, mùi: tùy chế phẩm Cách thử: Bằng cảm quan + Độ đồng khối lượng: Cách thử đánh giá: giống thuốc bột + Độ đồng nhất: Các tiểu phân phải phân tán đồng + Định tính: định tính theo phương pháp quy định tiêu chuẩn, thuốc mỡ phải cho phản ứng hoạt chất chế phẩm + Định lượng: Hàm lượng hoạt chất phải nằm giới hạn quy định - Thuốc mỡ tra mắt: + Độ vô khuẩn: thuốc mỡ tra mắt phải vô khuẩn + Các phần tử kim loại: số lượng phần tử kim loại phải nằm giới hạn cho phép + giới hạn kích thước phần tử: khơng lớn 75 micro mét 35 Nguyên tắc kiểm nghiệm thuốc đạn, thuốc trứng Credit: NCQB & PĐQ & PĐH - Tính chất: - Độ đồng khối lượng: - Độ rã: - Định tính: Credit: NCQB & PĐQ & PĐH - Định lượng: 36 Nguyên tắc kiểm nghiệm độ tan rã viên nang, viên nén Khái niệm: Độ rã khả tan rã chúng môi trường theo qui định (thường nước), thiết bị thử độ rã qui định thời gian định Vận hành máy thử đỗ rã, tiến hành đánh giá kết quả, mẫu thử cho đạt u cầu độ rã khơng cịn cặn, trừ mảnh vỏ vỏ bao, lại mặt lưới thiết bị dính vào bề mặt đĩa đậy Nếu cịn cặn khối mềm, khơng có nhân khơ rắn sờ thấy Chương 6: Độ ổn định tuổi thọ thuốc 37 Khái niệm độ ổn định thuốc? Theo WHO, độ ổn định thuốc khả nguyên liệu chế phẩm bảo quản điều kiện xác định giữ đặc tính vốn có hóa lý, vi sinh, sinh dược học… giới hạn định 38 Các tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định thuốc? Có tiêu chuẩn đánh giá độ ổn định thuốc - - Độ ổn định hóa học: Các tính chất hóa học (thành phần định tính định lượng) (các) hoạt chất có mặt chế phẩm nằm giới hạn cho phép theo tiêu chuẩn chất lượng Độ ổn định vật lý: Các đặc điểm vật lý nguyên liệu làm thuốc như: màu sắc, trạng thái tinh thể, độ tan, điểm chảy, không thay đổi Các đặc điểm chế phẩm màu sắc, độ cứng, độ rã, độ hòa tan dao động khoảng giới hạn cho phép tiêu chuẩn chất lượng Độ ổn định vi sinh: Độ vô trùng giới hạn nhiễm khuẩn chế phẩm phải đáp ứng yêu cầu tiêu chuẩn Nếu chế phẩm có chứa chất kháng khuẩn hàm lượng khơng vượt q giới hạn cho phép Độ ổn định điều trị: Tác dụng điều trị chế phẩm không thay đổi Độ ổn định độc tính: Độc tính chế phẩm khơng tăng lên suốt trình bảo quản lưu hành thị trường 39 Cách xác định độ ổn định thuốc: Phương pháp thử cấp tốc? Phương pháp thử dài hạn? Credit: NCQB & PĐQ & PĐH BÀI TẬP Công thức cần nhớ: Độ hấp thu quang phép đo quang: A= ε.l.C = log Trong đó: A: độ hấp thụ quang ε: hệ số hấp thụ (L/cm.mol) l: chiều dài cuvet cm C: nồng độ chất đo T: độ truyền qua Số đĩa lý thuyết trung bình: n t T tR = 16 ( wR )2 = 5.54 ( w )2 /2 Trong đó: n: số đĩa lý thuyết trung bình w: độ rộng peak w1/2: độ rộng nửa peak tr: thời gian lưu L Chiều cao đĩa lý thuyết: H = N Trong đó: L: chiều dài cột N: số đĩa lý thuyết 2(t Rb−t Ra ) Độ phân giải chất: R = W + W A B Trong đó: tRB, tRA: thời gian lưu chất B chất A (2 chất cần tính tốn) WA, WB : độ rộng peak chất A chất B Bài tập 1: Một cột sắc kí dài 40 cm Khi chạy sắc kí tách hỗn hợp chất A, B C thu kết quả: Hãy tính: Số đĩa lý thuyết trung bình cột? Chiều cao đĩa lý thuyết? Độ phân giải cho cặp chất A B; B C; A C? t RA t 10 Số đĩa lý thuyết trung bình cột: tính theo chất A: n A= 16 ( R )2 = 16 ( ) = 16 ( ) = 1,52 WA w 692,52 (đĩa) ≈ 692 (đĩa) 10,9 Số đĩa lý thuyết trung bình cột: tính theo chất B: n B= 16 ( ) = 706,78 (đĩa) ≈ 706 1,64 (đĩa) Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Số đĩa lý thuyết trung bình cột: tính theo chất C: n C= 16 ( 13,4 ) = 639,23 (đĩa) ≈ 639 2,12 (đĩa) ⇒ Số đĩa lý thuyết trung bình: (nA + nB + nC)/3 = 679 (đĩa) Chiều cao đĩa lý thuyết: H = L/N = 40/679 = 0,059 (cm) 2(t Rb−t Ra ) 2(10,9−10) Độ phân giải cặp chất A B: RA,B = = = 0,57 W A+ W B 1,52+1,64 2(13,4−10,9) Độ phân giải cặp chất B C: RB,C = = 1,33 2,12+1,64 2(13,4−10,0) Độ phân giải cặp chất A C: RA,C = = 1,87 2,12+1,52 Bài tập 2: Hãy xác định chiều rộng đáy peak độ phân giải R hợp chất A (tr, A= 4,4 phút) chất B (tr, B = 5,0 phút) tiến hành chạy sắc kí cột có chiều dài 900 mm H = 1mm cột có chiều dài 900 mm H = 3mm? *Trên cột 900mm H = 1mm Số đĩa lý thuyết là: N = L/H = 90/0.1 = 900 (đĩa lý thuyết) t R, A tR,B Lại có n = 16 ( ) = 16 ( ) WA WB ⇒ WA = 0,57 phút ⇒ WB = 0,67 phút 2(t Rb−t Ra ) 2(5,0−4,4) = = 0,97 W A+ W B 0,57 +0,67 *Trường hợp lại làm tương tự Bài tập 3: Một dung dịch chất có nồng độ 6.10 -5 mol/L, đem đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng 255 nm với cuvet cm, thu mật độ quang A = 0,845 Tính hệ số hấp thụ ε chất bước sóng 255 nm Ta có: A = ε.l.c ⇔ 0,845 = ε.1.6.10-5 ⇒ ε = 14083 (L/cm.mol) Độ phân giải: R = Bài tập 4: Dung dịch chứa 3,80 mg/mL chất hữu có khối lượng phân tử 220 đ.v.C, có độ truyền qua T = 40,5%, với chiều dày cuvet 1,5 cm bước sóng 480 nm Hãy xác định hệ số hấp thụ phân tử mol chất trên? A = log 1/T = log (1/0,405) = 0,392 Nồng độ c (mol/L): c = 0,01727 mol/L = 1,727.10-2 mol/L A = 0,392 = ε.l.c = ε.1,5 1,727.10-2 ⇒ ε = 15,13 (l/cm.mol) Bài tập 5: Một chất có khối lượng phân tử 270 đ.v.C, có hệ số hấp thụ phân tử ε = 703 (L.mol ̶1 cm ̶1 ) bước sóng 262 nm Lấy a gam chất hịa tan hồn tồn nước định mức đến 100 mL (dung dịch A) Tiếp tục lấy mL dung dịch A pha loãng định mức đến 100 mL (dung dịch B) Độ hấp thụ dung dịch B bước sóng 262 nm với cuvet có chiều dày cm 0,515 Tính khối lượng a ban đầu? Nồng độ chất dung dịch B là: cB = A/l.ε = 7,32.10-4 mol/L (Định luật lamber-beer) Nồng độ chất dung dịch A là: cA = (100.cB)/4 = 1,83.10-2 mol/L Credit: NCQB & PĐQ & PĐH Số mol chất dung dịch A: n =C.V= 1,83.10-2 x 100.10-3 = 1,83.10-3 mol Khối lượng a: m = n.M = 1,83.10-3.270 = 0,4941g Bài tập 6: Pha chất cần phân tích methanol với nồng độ đo độ hấp thụ dung dịch bước sóng hấp thụ cực đại λmax = 257 nm, độ dày cuvet cm a) Hệ có tuân theo định luật Lambert-Beer không? Định luật Lambert - Beer: A = ε.l.C Ta thấy nồng độ C tăng lên, độ hấp thụ quang A tăng lên theo tỉ lệ gần tương đương ⇒ Hệ tuân theo định luật Lambert-Beer b) Tính hệ số hấp thụ phân tử mol ε Biết khối lượng phân tử Mw = 451 đ.v.C? A = ε.l.C 0.1 0,105 = ε.1 ⇒ ε = 473,55 (L/cm.M) 451 0.2 0,207 = ε.1 ⇒ ε = 466.78 (L/cm.M) 451 0.3 0.317 = ε.1 ⇒ ε = 476.55 (L/cm.M) 451 0.4 0.422 = ε.1 ⇒ ε = 475.80 (L/cm.M) 451 0.5 0.530 = ε.1 ⇒ ε = 478.06 (L/cm.M) 451 => ε = (473.55 + 466.78 + 476.55 + 475.80 + 478.06)/5 = 474.148 (L/cm.M) Link chữa dài dài: https://drive.google.com/drive/folders/1U3pHaCaXBqVsBrd1uUEk2f1fnMwfWJEk? usp=share_link Bài tập 7: Cân 20 viên thuốc ephedrin hydroclorid có khối lượng 5g, nghiền thành bột mịn Sau cân xác x (g), pha methanol định mức đến 100 mL Lấy xác 10 mL dung dịch định mức 100 mL Tiến hành phân tích sắc ký Giả sử diện tích peak dung dịch ephedrin hydroclorid chuẩn (dung dịch ephedrin hydroclorid chuẩn 0,1% methanol 60%) a dịch tích peak mẫu thử b Hàm lượng ghi nhãn 200 mg, sai số ±7,5% Lập biểu thức mối quan hệ x, a b để mẫu thử đạt yêu cầu C thử = x/1000 (g/ml) = x (g/l) C chuẩn = 0.1% = (g/l) Credit: NCQB & PĐQ & PĐH => C thử / C chuẩn = S thử / S chuẩn = b/a => C thử = C chuẩn S thử/ S chuẩn => thay số có: x=b/a => x gam kiểm nghiệm có b/a gam ephedrin hydroclorid b => viên thuốc (250mg) có: 0.25 gram chất ax Để mẫu thử đạt yêu cầu => (m yêu cầu - m kiểm nghiệm)/m yêu cầu x 100% =< 7.5% => Biểu thức cần tìm |0.2-0.25b/ax|/0.2 x 100% = C thử = 0.01 x A thử / A chuẩn => C mẫu 200 = 0.02 x A thử / A chuẩn x 100 (mẫu đo pha loãng mẫu ban đầu 100 lần) -> 100mg có A thử / A chuẩn (mg) 500mg có 5xA thử / A chuẩn (mg) => để thuốc đạt yêu cầu sai số 7% => |500-5xA thử/ A chuẩn|/500 =< 7% Câu hỏi (Đề kì 2021-2022): Cân 50 mg bột Azithromycin (AZI, thuốc kháng sinh) chuẩn cho vào bình định mức 50 mL, hịa tan pha động vạch mức dung dịch chuẩn Cân 50 mg bột thuốc cần xác định hàm lượng AZI vào bình định mức 50 mL, thêm 30 mL pha động vào hịa tan, quay li tâm Pha lỗng pha động đến vạch mức sau lọc Tiến hành chạy sắc ký dung dịch chuẩn dung dịch thử thu peak sắc kí đồ có thời gian lưu Diệc tích peak dung dịch chuẩn S pic(chuẩn) =117,98 Diệc tích peak dung dịch thử S pic(thử) = 109,49 Nếu độ sai lệch khối cho phép ± 5% mẫu thử có đạt u cầu không? SS = Smẫu chuẩn = 117,98 Sx = Smẫu thử = 109,49 Vì tiến hành sắc kí điều kiện thể tích dung dịch nên: mchuẩn S chuẩn = mthử S thử Credit: NCQB & PĐQ & PĐH 50 117,98 ⇒ m = 109,49 thử mthử = 46,402 mg Độ sai lệch: (50 - 46,402)/50.100% = 7,2% Vì độ sai lệch cho phép 5%, nên mẫu thử không đạt yêu cầu Câu hỏi (Đề kì 2021-2022): Thuốc viên nén clarithromycin có công thức C 38H69NO13, loại thuốc kháng sinh, có khối lượng ghi nhãn 250 mg/viên Cân 20 viên nén clarithromycin thu g nghiền thành bột mịn Cân xác lượng bột viên tương ứng với 0,2 g clarithromyein vào bình định mức 50 mL, thêm khoảng 35 mL methanol, lắc 30 thêm methanol vừa đủ, để lắng Lấy 3,0 mL dịch thêm pha động vừa đủ 100,0 mL, trộn Pha xác lượng clarithromỵcin chuẩn methanol , lắc, siêu âm cần để có dung dịch có nồng độ xác khoảng 625 µg/mL Pha loãng 10,0 mL dung dịch thành 50,0 mL pha động, trộn Tiến hành sắc ký với dung dịch chuẩn dung dịch kiểm nghiệm Ta thu diện tích peak dung dịch chuẩn dung dịch kiểm nghiệm tương ứng Sc =1723; Skn = 1688 Nếu khối lượng hoạt chất clarithromycin cho phép ±10%, mẫu thử có đảm bảo chất lượng hay khơng Mẫu chuẩn có nồng độ 625 µg/mL pha lỗng lần ⇒ CS = 125 µg/mL Mẫu thử có nồng độ 0,2g → 50ml sau lấy 3ml đo Vì tiến hành đo điều kiện, ta có: Cchuẩn S chuẩn 125 1723 = ⇒ = ⇒ Cmẫu = 122,4608 µg/mL Cthử 1688 Cthử S thử 100 Nồng độ thuốc ban đầu:Cban đầu = Ckiểm nghiệm = 4082,0267 µg/mL Hàm lượng clarithromycin 0,2g cân ra: mban đầu = Cban đầu.V = 4082,0267 50 = 204101.33 µg = 204.1 (mg) Cân 20 viên nén thu 5g → viên thuốc nặng 0,25g viên thuốc chứa 250mg clarithromycin → hàm lượng thuốc phải đạt 100% (nghĩa 0,2g thuốc viên phải có 0,2g clarithromycin) Trong 0,2g thuốc có: (200-204,1)/200 100% = -2,05% ⇒ Nằm sai số cho phép ⇒ Mẫu đạt yêu cầu dịch chuẩn dung dịch kiểm nghiệm tương ứng Sc =1723; Skn = 1688 Nếu khối lượng hoạt chất clarithromycin cho phép ±10%, mẫu thử có đảm bảo chất lượng hay khơng Mẫu chuẩn có nồng độ 625 µg/mL pha lỗng lần ⇒ CS = 125 µg/mL Mẫu thử có nồng độ 0,2g → 50ml sau lấy 3ml đo Credit: NCQB & PĐQ & PĐH