Bài viết Ảnh hưởng của hình thái noãn có lưới nội chất trơn đến kết quả thụ tinh ống nghiệm trình bày xác định tỷ lệ thụ tinh và chất lượng phôi ngày 2, kết quả thụ tinh ống nghiệm của noãn trưởng thành có hình ảnh lưới nội chất trơn.
TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 518 - THÁNG - SỐ CHUYÊN ĐỀ - 2022 PHẦN II HỖ TRỢ SINH SẢN VÀ DI TRUYỀN ẢNH HƯỞNG CỦA HÌNH THÁI NỖN CĨ LƯỚI NỘI CHẤT TRƠN ĐẾN KẾT QUẢ THỤ TINH ỐNG NGHIỆM Nguyễn Minh Đức1, Đặng Tiến Trường2, Nguyễn Thanh Tùng2 TÓM TẮT 19 Mục tiêu: xác định tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi ngày 2, kết thụ tinh ống nghiệm noãn trưởng thành có hình ảnh lưới nội chất trơn Đối tượng phương pháp nghiên cứu: 498 noãn trưởng thành (MII) chia thành nhóm: 311 nỗn có SERa 187 nỗn khơng có SERa so sánh tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi ngày 176 chu chuyển phôi đông lạnh, chia thành hai nhóm: 82 chu kỳ có nỗn SERa 94 chu kỳ khơng có nỗn SERa Kết quả: tỷ lệ thụ tinh nỗn có SERa thấp so với nỗn khơng có SERa, tương ứng 72,67% 80,74% với p < 0,05, tỷ lệ phôi tốt ngày nỗn có SERa cao nỗn khơng có SERa tương ứng 63,02% 47,59% với p < 0,001 Khơng có khác biệt tỷ lệ thai lâm sàng có tim thai trẻ sinh sống chu kỳ chuyển phơi đơng lạnh ngày có nỗn SERa chu kỳ khơng có nỗn SERa, tương ứng (53,66% 56,38%), (48,78% 42,55%) với p > 0,05 Kết luận: nỗn có SERa khơng ảnh hưởng đến tỷ lệ Bệnh viện Nam học muộn Hà Nội Học viện Quân y Chịu trách nhiệm chính: Nguyễn Thanh Tùng Email: tung_ttcnp@yahoo.com Ngày nhận bài: 28/7/2022 Ngày phản biện khoa học: 12/08/2022 Ngày duyệt bài: 19/08/2022 thụ tinh, chất lượng phôi ngày Chu kỳ chuyển phơi đơng lạnh ngày có nỗn SERa có tỷ lệ thai lâm sàng có tim thai trẻ sinh sống tương tự chu kỳ nỗn SERa Từ khóa: lưới nội chất trơn tạo cụm (SERa), ICSI, IVF SUMMARY EFFECT OF SMOOTH ENDOPLASMIC RETICULUM AGGREGATES IN METAPHASE II OOCYTES ON THE OUTCOME OF IVF CYCLES Objective: Determine the rate of fertilization and embryo quality on day 2, IVF result of mature oocytes with smooth endoplasmic reticulum aggregates Subjects and methods: 311 metaphase II oocytes with SERa was compared to 187 metaphase II oocytes without SERa about the rate of fertilization and embryo quality on day 176 cycles were performed to transfer frozen embryos including 81 cycles having SERa+ oocytes and 94 cycles having SERa- oocytes Results: Fertilazation rate was slightly (p 0.05 However, the rate of embryo quality (good and medium) in SERa+ oocytes was higher than SERa- oocytes (63.02 vs 47.59), p 0.05), (44.78% vs 42.55%; p > 0,05) Conclusions: SERa+ oocytes could not affect fertilization and embryo quality on day The clinical pregnant and live birth rates of SERa+ cycles were similar to SERa – cycles Key words: SERa (Smooth Endoplasmic Reticulum aggregates), ICSI (Intra-cytoplasmic sperm injection), IVF (Invitro fertilization) I ĐẶT VẤN ĐỀ Thụ tinh ống nghiệm phương pháp đánh giá hình thái nỗn phơi quan sát trực tiếp kính hiển vi Kỹ thuật tiêm tinh trùng vào bào tương noãn (Intra-cytoplasmic sperm injection ICSI) đánh giá chất lượng noãn đầy đủ tất tế bào hạt vành tia loại bỏ, trưởng thành nhân nỗn thơng qua việc xuất thể cực Lưới nội chất trơn tạo cụm (SERa) đặc điểm noãn dễ nhận biết qua trường sáng thường, xuất bào tương nỗn có hình ảnh đĩa dẹt giống khơng bào (hình A) Nó tập hợp ống lưới nội chất không hạt ribosom, bao quanh ti thể Rất nhiều nghiên cứu cho thấy nỗn có SERa ảnh hưởng tới tỷ lệ sảy thai sớm, bất thường thai [1], [2] khuyến cáo Hiệp hội Hỗ trợ sinh sản Châu Âu – ESHRE năm 2012 không thực thụ tinh cho noãn SERa Đây lý phần noãn SERa bị hạn chế nghiên cứu châu Âu Tuy nhiên có nghiên cứu ảnh hưởng SERa đến tỷ lệ chưa rõ ràng, có dẫn chứng em bé sinh khỏe mạnh từ noãn SERa Để góp phần vào tạo thêm liệu đánh giá, chúng tơi thực nghiên cứu nỗn SERa với mục tiêu 144 xác định tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi ngày 2, kết thụ tinh ống nghiệm nỗn trưởng thành có hình ảnh lưới nội chất trơn II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - Đối tượng: 498 noãn trưởng thành (MII) thu từ bệnh nhân định làm thụ tinh ống nghiệm chia thành nhóm: 311 nỗn có SERa (SERa+) 187 nỗn khơng có SERa (SER-) 176 chu chuyển phôi đông lạnh ngày 2, chia thành hai nhóm: 82 chu kỳ có nỗn SERa 94 chu kỳ khơng có nỗn SERa Tiêu chuẩn loại trừ: nỗn đơng lạnh, tinh trùng chích xuất từ mào tinh, tinh hoàn, tử cung bất thường, niêm mạc mỏng, dính buồng tử cung Tiêu chuẩn lựa chọn: tinh dịch đồ bình thường theo tiêu chuẩn WHO 2021 [3] - Thời gian nghiên cứu: tháng năm 2020 đến tháng 10 năm 2021 Bệnh viện Chuyên khoa Nam học Hiếm muộn Hà Nội - Phương pháp nghiên cứu: nghiên cứu mô tả tiến cứu Bệnh nhân kích trứng phác đồ antagonist với liều FSH phù hợp, có nang ≥ 17 mm gây trưởng thành nỗn HCG 5000 IU Sau 36 dùng HCG, thực chọc hút trứng hướng dẫn siêu âm qua đường ngả ba âm đạo Trứng rửa môi trường GMOPs (37oC), ủ trứng từ đến môi trường GIVF (37oC, 6% CO2 5% O2), sau thực tách lớp tế bào hạt môi trường HYAS (Vitrolife, Thụy Điển) Sau tách TẠP CHÍ Y HỌC VIỆT NAM TẬP 518 - THÁNG - SỐ CHUYÊN ĐỀ - 2022 trứng, kỹ thuật ICSI thực độ phóng đại 200 lần kính hiển vi soi ngược – Observe D1 (Carl Zeiss) có gắn vi thao tác Trong trình quan sát thấy nỗn có hình ảnh SERa bào tương khơng Sau thực ICSI, nỗn ni riêng giọt 20µl đến 30µl mơi trường LP 50 (Life Global, Hoa Kỳ) phủ dầu LightOil (Life Global, Hoa Kỳ) tủ ấm Forma 37oC, 6% CO2 5% O2 Đánh giá thụ tinh thực sau ICSI 16 đến 18 đánh giá phôi ngày hai sau 44 – 46 theo đồng thuận Alpha – Istanbul, Thổ Nhĩ Kỳ [4] Tồn phơi ngày đông lạnh kỹ thuật thủy tinh hóa Sau chu kỳ từ lúc chọc trứng, bệnh nhân chuẩn bị niêm mạc tử cung liệu pháp thay hormon chuyển phôi đông lạnh - Phương pháp xử lý số liệu tính tốn: phần mềm sử dụng cho thống kê Excel SPSS 21.0 với tiêu chuẩn Chi Test để so sánh hai tỷ lệ III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU Bảng So sánh tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi hai loại nỗn Nỗn MII có SERa Nỗn MII khơng có Chỉ tiêu n = 311 SERa (n =187) P Tỷ lệ thụ tinh (%) 72,67 80,75 < 0,05 Tỷ lệ phôi tốt (%) 63,02 47,59 < 0,001 Bảng cho thấy tỷ lệ thụ tinh noãn có SERa 72.67% thấp so với tỷ lệ thụ tinh nỗn khơng có SERa (p < 0,05), tỷ lệ phôi tốt ngày nỗn có SERa cao nỗn khơng có SERa, tương ứng 63,02% 47,59% (p< 0,001), khác biệt có ý nghĩa thống kê Bảng So sánh kết lâm sàng chu kỳ chuyển phôi đông lạnh có nỗn SERa khơng có SERa Chu kỳ có nỗn Chu kỳ khơng có Chỉ tiêu SERa (n = 82) noãn SERa (n= 94) P Tuổi 33,15 ± 3,25 34,34 ± 4,18 > 0,05 Số phơi chuyển trung bình 2,08 ± 0,25 2,13 ± 0,34 > 0,05 >Tỷ lệ thai lâm sàng có tim 44/82 (53,66%) 53/94 (56,38) > 0,05 thai (%) Tỷ lệ ca có trẻ sinh sống (%) 40/82 (48,78) 40/94 (42,55) >0,05 Bảng cho thấy tỷ lệ thai lâm sàng có tim thai chu kỳ chuyển phơi đơng lạnh ngày có nỗn SERa khơng có nỗn SERa tương ứng 53,66% 56,38%, khơng có khác biệt với p > 0,05 Tỷ lệ ca có trẻ sinh sống hai nhóm 48,78% 42,55%, khơng có khác biệt với p > 0,05 145 HỘI NGHỊ KHOA HỌC HÌNH THÁI HỌC TỒN QUỐC LẦN THỨ XVIII NĂM 2022 Hình A Nỗn có SERa Hình B Nỗn khơng có SERa (1.Màng śt; Thể cực 1; Lưới nội chất trơn – SERa) Nguồn: Viện Mô Phôi lâm sàng Quân đội – Học viện Quân y IV BÀN LUẬN Với số lượng lớn phôi tốt hình thành từ hình thái nỗn SERa, việc loại bỏ hồn tồn số phơi gặp bất lợi bệnh nhân tuân theo khuyến cáo ESHRE Trước hết, tỷ lệ noãn SERa bắt gặp từ 1% đến 12% theo thông báo tác giả Ebner (2008) [5] gần Gurunath (2019) [6] Nghiên cứu hình thái nỗn SERa Balanba (2006) Ebner (2006) cho noãn có SERa ảnh hưởng đến hình thành phát triển thai nhi, gây sảy thai dị tật thai nhi sớm [1], [2] Vì lý đạo đức y học, hình thái phơi yếu tố định cho nhà phôi học đưa định lựa chọn phôi để chuyển cho bệnh nhân, phơi lên từ nỗn có SERa không ưu tiên chuyển phôi lên từ nỗn khơng có SERa Năm 2016, Chloe cộng thực chuyển phơi cho 21 bệnh nhân có phơi từ nỗn SERa, có tổng cộng bệnh nhân có thai Trong số đó, bệnh nhân khơng có tim thai, bệnh nhân sảy thai tự 146 nhiên, bệnh nhân chửa tử cung, bệnh nhân có sinh con, tất khỏe mạnh với trẻ sinh [7] Như vậy, việc sử dụng noãn SERa tùy thuộc vào trung tâm hỗ trợ sinh sản Do đó, việc ngăn ngừa phịng tránh dị tật bất thường nhiễm sắc thể thực kỹ thuật sàng lọc di truyền trước chuyển phôi (PGT – Preimplantation Genetic Testing) phôi lên từ nỗn có SERa V KẾT LUẬN Nỗn có SERa khơng ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phôi ngày Chu kỳ chuyển phôi đông lạnh ngày có nỗn SERa có tỷ lệ thai lâm sàng có tim thai trẻ sinh sống tương tự chu kỳ khơng có nỗn SERa VI LỜI CẢM ƠN Nghiên cứu hoàn thành với giúp đỡ đồng nghiệp labo thụ tinh ống nghiệm Bệnh viện Nam học Hiếm muộn Hà Nội ... đánh giá, thực nghiên cứu noãn SERa với mục tiêu 144 xác định tỷ lệ thụ tinh chất lượng phôi ngày 2, kết thụ tinh ống nghiệm nỗn trưởng thành có hình ảnh lưới nội chất trơn II ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG... từ nỗn có SERa V KẾT LUẬN Nỗn có SERa khơng ảnh hưởng đến tỷ lệ thụ tinh, chất lượng phôi ngày Chu kỳ chuyển phơi đơng lạnh ngày có nỗn SERa có tỷ lệ thai lâm sàng có tim thai trẻ sinh sống tương... xuất bào tương nỗn có hình ảnh đĩa dẹt giống khơng bào (hình A) Nó tập hợp ống lưới nội chất không hạt ribosom, bao quanh ti thể Rất nhiều nghiên cứu cho thấy nỗn có SERa ảnh hưởng tới tỷ lệ sảy