Khảo sát tình hình nhiễm nấm và mức độ nhạy cảm với thuốc kháng nấm của nấm da tại Bệnh viện Da liễu TP.HCM.pdf

NTTU-NCKH-04 CỘNG HÒA XẢ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chủ trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỐNG KÉT ĐÈ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 2018 Tên đề tài: Khảo sát tình hình nhiềm nấm mức độ nhạy cảm với thuốc kháng nấm nấm da bệnh viện Da liều TPHCM Số hợp đồng: 2018.01.44 Chủ nhiệm đề tài: Nguyễn Thị Ngọc Yen Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: 06/2018 - 02/2019 TP Hồ Chỉ Minh, ngày 26 tháng 04 năm 2019 CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự - Hạnh phúc Đơn vị chù trì: Trường Đại học Nguyễn Tất Thành BÁO CÁO TỎNG KẾT ĐỀ TÀI NCKH DÀNH CHO CÁN Bộ - GIẢNG VIÊN 201 Tên đề tài: Khảo sát tình hình nhiềm nấm mức độ nhạy cảm với thuốc kháng nấm nấm da bệnh viện Da liều TPHCM Số họp đồng: 2018.01.44 Chủ nhiệm đề tài: Nguyễn Thị Ngọc Yen Đơn vị công tác: Khoa Dược Thời gian thực hiện: 06/2018 - 02/2019 Các thành viên phối họp cộng tác: STT Họ tên Chuyên ngành Cơ quan công tác Ký tên MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỪ VIÊT TẤT V DANH MỤC CÁC BẢNG vi DANH MỤC CÁC HÌNH vii DANH MỤC CÁC sơ ĐÒ viii MỞ ĐẦU ĐẶT VÁN ĐỀ TÓM TẤT CHƯƠNG 1: TỐNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TÔNG QUAN VỀ NẤM DA GÂY BỆNH 1.2.1 Lịch sữ phát nấm da 1.2.2 Tổng quan nấm da 1.2.3 Phân loại nam da 1.2.4 Các bệnh nấm da người 1.2.5 Một số nghiên cứu nước ve nấm da 11 1.2 CÁC KỲ THUẬT TRONG PHÂN LẬP VÀ ĐỊNH DANH NẤM DA 14 1.2.1 Xác định có mặt cùa nấm da từ mẫu bệnh phẩm 14 1.2.2 Nuôi cấy phân lập nấm da 15 1.2.3 Phương pháp định danh nam da 17 1.2.3.1 Đặc điểm hình thái khóm nấm 17 1.2.3.2 Đặc điểm hình thái hiển vi 17 1.3 CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ HIỆU Lực KHÁNG NẤM 18 1.3.1 Phương pháp pha loãng 18 1.3.2 Phương pháp khuếch tán 19 1.3.3 Phương pháp khuếch tán dùng để xác định mức độ nhạy cùa chất kháng nấm nấm da 19 1.4 TỎNG QUAN MỘT só THUỐC KHÁNG NẤM VÀ ĐIỀU TRỊ 20 1.4.1 Thuốc kháng nấm ketoconazole 20 1.4.2 Thuốc kháng nấm terbinaíĩne 22 1.4.3 Một số phác đồ điều trị nấm da 23 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cửu 25 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN cứu 25 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu .25 2.1.2 Thiết kế nghiên cứu 25 2.1.3 Địa điểm nghiên cứu 25 2.1.4 Hóa chất thiết bị 25 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CÚƯ 26 2.2.1 Sàng lọc định danh nam da 26 2.2.2 Phương pháp thứ độ nhạy cảm nấm da với thuốc kháng nấm 31 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 33 3.1 KẾT QUẢ 33 3.1.1 Đặc điểm mầu nghiên cứu 33 3.1.2.1 Tỷ lệ nhiễm nấm da theo độ tuổi 33 3.1.2.2 Tỷ lệ nhiễm nấm da theo giới tính 34 3.1.2.3 Tỳ lệ nhiễm nấm theo vị trí the bệnh nhân 35 3.1.2 Sàng lọc định danh vi nấm 36 3.1.2.1 Soi tươi trực tiếp 36 3.1.2.2 Sàng lọc nấm da môi trường DTM 37 3.1.2.3 Đặc điểm hình thái khóm nấm đặc điểm hình thái hiển vi 37 3.1.2.4 Định danh phàn ứng khác 41 3.1.3 Độ nhạy cảm cùa nấm da với thuốc kháng nấm 45 3.2 THẢO LUẬN 51 3.2.1 Đặc điểm mẫu nghiên cứu 51 3.2.2 Định danh nấm da 52 3.2.3 Độ nhạy cảm nấm da với thuốc kháng nấm 52 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ 54 4.1 KÉT LUẬN 54 4.2 KIÉN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO 55 Tiếng Việt 55 Tiếng Anh 56 PHỤ LỤC PL1 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TÁT BCP Tên Tiếng Việt Tên Tiếng Anh Chữ viết tắt Bromocresol Purple Bromocresol Purple Milk Solid BCP - MS - G Glucose Agar Viện Tiêu chuẩn Lâm Clinical and Laboratory Standard sàng phòng xét CLSI Institute nghiệm Hoa Kỳ CMDA Cornmeal Dextrose Agar DTM Dermatophyte Test Medium Đường kính vịng kháng ĐKVKN LPCB nấm Lactophenol coton blue ủy ban quốc gia tiêu National Committee for Clinical NCCLS chuẩn phịng thí nghiệm Laboratory Standards Lâm sàng MIC Minium inhibited concentration Nong độ ức che toi thiểu Phàn ứng khuếch đại gen Polymerase Chain Reaction PCR-RFLP Fragment Length Polymorphism PDA Potato dextrose agar SDA Sabouraud dextrose agar đa hình chiều dài đoạn cắt giới hạn DANH MỤC CÁC BẢNG • Bàng 1.1 Giai đoạn sinh sản vơ tính hữu tính cùa nấm da Bàng 1.2 Phân bố chi nam Microsporum người động vật [19], [20], [27] Bàng 1.3 Phân bố chi nấm Trichophyton người động vật [19], [20], [27] Bảng 1.4 Sinh thái học nấm da Bàng 1.5 Tiêu chuẩn ve mức độ nhạy nấm da theo Neo-Sensitabs [30] 20 Bàng 1.6 Cấu trúc tính chất ketoconazole 21 Bàng 2.1 Đặc điểm khóm nấm [38] 27 Bàng 2.2 Đặc điểm quan sát kính hiến vi cùa nấm da [19], [20], [27] 29 Bàng 2.3 Ket thử nghiệm ure số chủng nấm da [14] 30 Bàng 2.4 Tiêu chuẩn đánh giá mức độ nhạy vi nam với ketoconazole terbinafme [30] 32 Bàng 3.1 Tỷ lệ nhiễm nấm phân bố theo độ tuổi 33 Bàng 3.2 Tỷ lệ nhiễm nấm da theo giới tính nhóm tuổi 34 Bàng 3.3 Tỳ lệ nhiễm nấm phân bố theo vị trí giới tính 35 Bàng 3.4 Đặc điểm hình thái khóm nấm đặc điểm hiển vi 38 Bàng 3.5 Hình ảnh khóm nam hình thái hiển vi 40 Bàng 3.6 Ket quâ định danh vi nấm phân lập từ bệnh phàm 45 Bàng 3.7 ĐK.VK.N đoi với chùng nấm T rubrum 45 Bàng 3.8 ĐK.VK.N T mentagrophytes 46 Bàng 3.9 ĐKVK.N T tonsurans, T verrucosum T violaceum 47 Bàng 3.10 ĐKVK.N M canis M gypseum 48 Bàng 3.11 Mức độ nhạy cảm cùa nấm da với ketoconazole terbinafine 50 DANH MỤC CÁC HÌNH • Hình 1.1 Mơ tà quy trình ni cay vi nam lam 16 Hình 1.2 Cấu trúc hóa học terbinafine 22 Hình 3.1 Sợi nấm quan sát soi tươi vật kính 40X 37 Hình 3.2 Ket quà môi trường DTM 37 Hình 3.3 Mỉcrosporum canis phát triển môi trường cháo hoa 38 Hình 3.4 Ket thừ nghiệm mơi trường ure 42 Hình 3.5 Ket thừ nghiệm mơi trường BCP-MS-G 42 Hình 3.6 Ket thừ nghiệm môi trường CMDA 43 Hình 3.7 Thừ độ nhạy cảm với thuốc kháng nấm terbinafme phương pháp khuếch tán 49 Hình 3.8 ĐKVKN ketoconazole T mentagrophytes 49 Hình 3.9 Phân bo mức độ nhạy cảm nấm da với ketoconazole theo lồi 51 DANH MỤC • CÁC sơ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Quy trình thực nghiên cứu 26 Sơ đồ 3.1 Tỷ lệ phân bố nấm da theo độ tuổi 34 Sơ đo 3.2 Tỳ lệ nhiễm nấm phân bố theo giới tính 35 Sơ đồ 3.3 Tỷ lệ nhiễm nấm phân bố theo vị trí nhiễm bệnh the 36 Sơ đồ 3.4 Sơ đồ định danh vi nấm da [38] 44 Đặt vấn đề TÓM TÁT KÉT QUẢ NGHIÊN cứu Sản phẩm thực đạt Sản phẩn đăng ký thuyết minh So liệu tình hình phân bố chi/ lồi Số liệu tình hình phân bố chi/ lồi nấm da gây bệnh người nam da gây bệnh người Số liệu mức độ đáp ứng nấm da với Số liệu mức độ đáp ứng cùa nấm da với số thuốc kháng nấm thường dùng số thuốc kháng nấm thường dùng Bài đăng Tạp chí Y Học thành phố Hồ Kỳ yểu Hội nghị ĐH Nguyễn Tất Thành Chí Minh (Đã duyệt đăng tháng 3/2019) tạp chí chuyên ngành nước Tham gia đào tạo Dược sĩ Đại học Tham gia đào tạo Dược sĩ Đại học - Tơn Hồng Diệu (13DDS07) - Nguyễn Lê Phương Un (13DDS01) Thời gian đăng ký: từ ngày 06/2018 đến ngày 11/2018 Thòi gian nộp báo cáo: ngày 16/11/2018 Nguyễn Thị Ngọc Yen Đặt vấn đề MỞ ĐẦU Mở đầu: Bệnh nấm da phổ biến vùng khí hậu nóng ẩm Việt Nam, bệnh khu trú da nông ảnh hưởng nghiêm trọng den chất lượng song Thời gian điều trị dài tác động lớn đen tuân thù trị liệu cùa bệnh nhân, hội phát sinh đe kháng với thuốc kháng nấm Đối tượng: Bệnh nhân chẩn đoán nhiễm nấm (da, tóc) điều trị bệnh viện Da liều TP HCM với tiêu chuẩn chọn mầu: Bệnh nhân đen khám Bệnh viện Da liễu từ 11-12/2017 Bệnh nhân có ket soi tươi dương tính với hình ánh “Sợi nam có vách ngăn” Vị trí nhiễm bệnh có nhiều vảy Phương pháp nghiên cứu: Phân lập nấm da từ bệnh phẩm môi trường chọn lọc dermatophytes test medium (DTM), định danh bàng hình thái học sinh hố, xác định tính nhạy cảm với ketoconazole, terbinafme theo hướng dần CLSIM44-A2, thay đổi theo Nweze cs (2010) Kết quả: Từ 104 mầu cho kết quà nhiễm "sợi nấm có vách ngăn”, phân lập DTM thu 55 mẫu đó: Có lồi nấm da.- T rubrutn (36,36%), T mentagrophytes (32,73%), T tonsurans (14,55%), T verrucosum (3,64%), T violaceum (3,64%), M canis (5,45%) M gypseum (3,64%) Nam mắc bệnh cao nữ (65,38% so với 34,62%) Độ tuổi 16-25 chiếm có tỷ lệ mắc bệnh cao (41,35%), < 15 tuổi chiêm tỷ lệ thấp (3,85%) vị trí nhiễm nấm, bẹn vị trí nhiễm bệnh cao (25,96%) sau đen đầu (1,92%) Ve mức độ nhạy căm với thuốc kháng nấm, có 52,7% chùng nhạy cảm với ketoconazole; 21,8% nhạy cảm trung gian có 25,5% chùng bị đề kháng với ketoconazole Tất chùng nấm da ly trích từ bệnh nhân nhạy câm với terbinafine (2 pg/ đĩa) Kết luận: Hau het chùng nam da thuộc chi Trichophyton, 100% chủng nhạy cảm terbinafme, có 52,73% chủng nhạy cảm với ketoconazole Nguyễn Thị Ngọc Yen ... điển Khảo sát độ nhạy cảm vi nấm với thuốc kháng nấm ketoconazole terbinafine Đe cập nhật số liệu lâm sàng ve tình hình bệnh nhiễm nấm mức độ đáp ứng với thuốc ketoconazole terbinafme chủng nấm da. .. đe kháng với thuốc kháng nấm Đối tượng: Bệnh nhân chẩn đốn nhiễm nấm (da, tóc) điều trị bệnh viện Da liều TP HCM với tiêu chuẩn chọn mầu: Bệnh nhân đen khám Bệnh viện Da liễu từ 11-12/2017 Bệnh. .. xuất nhiều bệnh nhân điều trị thất bại Xuất phát từ thực te trên, chúng tơi lựa chọn đe tài “Khâo sát tình hình nhiễm nam mức độ nhạy cảm với thuốc kháng nấm cùa nấm da bệnh viện Da liều TpHCM”