Chưng cất phân đoạn tinh dầu Tràm gió từ tỉnh Thừa Thiên Huế, Việt Nam

E ~ TRƯỜNG ĐẠI HOC NGUYEN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỤC PHẨM VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP CHƯNG CẤT PHÂN ĐOẠN TINH DẢU TRÀM GIÓ TỪ TỈNH THỪA THIÊN HUẾ, VIỆT NAM NGUYỄN HỒNG TUẤN Tp.HCM, tháng 10 năm 2020 i TĨM TẮT Các sản phẩm tinh dầu thị trường đa phần tinh dầu thơ, cịn lẫn tạp chất nên chưa tận dụng hết giá trị kinh tế mang lại từ nguồn nguyên liệu nông nghiệp Trong nghiên cứu này, sừ dụng phương pháp chưng cất phân đoạn chân không với cột vigreux cột đệm để phân tách tinh dầu tràm gió thơ thành phân đoạn dựa vào nhiệt độ sôi khác Phân đoạn F1 giàu Eucalyptol giúp trị cảm, giảm ho, giảm sốt trẻ Phân đoạn F2 giàu P-Caryophyllene hoạt chất có khả điều trị chứng lo âu, trầm cảm Các phân đoạn khác mặt cảm quan độ thẩm thấu Thông số vận hành cho trình chưng cất phân đoạn lựa chọn sử dụng cột đệm áp suất 60 mmHg công suất bếp 100 w Hàm lượng Eucalyptol P-Caryophyllene thu điều kiện 27.96 24.81% Độ thu hồi tương ứng 96.81 85.58% 11 MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iii MỤC LỤC ỉv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC BẢNG ỉx MỞ ĐẦU Chuông TÔNG QUAN VỀ NGHIÊN cứu 1.1 Tràm gió tinh dầu tràm gió 1.1.1 Tràm gió 1.1.2 Tinh dầu tràm gió 1.2 Phân đoạn tinh dầu 1.2.1 Tinh dầu phân đoạn 1.2.2 Công nghệ thiết bị 1.3 Những nghiên cứu giới Chương ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu .11 2.1 Nguyên liệu 11 2.2 Dụng cụ - Thiết bị - Hóa chất 11 2.3 Phuong pháp nghiên cúu .12 2.3.1 Quy trình cơng nghệ 12 2.3.2 Sơ đồ nghiên cứu 14 2.3.3 Bố trí thí nghiệm 14 2.4 Phuong pháp phân tích 15 IV 2.4.1 Phân tích định tính 15 2.4.2 Phân tích định lượng 15 Chuông KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 3.1 Thành phần tinh dầu thô 17 3.2 Ảnh hưởng áp suất lên q trình phân đoạn vói cột Vigreux 19 3.3 Ảnh hưởng áp suất lên trình phân đoạn vói cột đệm 22 3.4 Ảnh hướng loại cột phân đoạn 25 3.5 Ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt 28 3.6 Đánh giá chất lượng sản phẩm 30 3.6.1 Định tính 30 3.6.2 Định lượng 30 Chuông KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ 33 4.1 Kết luận 33 4.2 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC 36 V DANH MỤC CHỮ VIÉT TẮT CFU : Colony Forming Unit (Đơn vị hình thành khuẩn lạc) ĐK : Đường kính F1, 2, : Phân đoạn 1,2,3 GC : Gas Chromatography (Sắc kỷ khí) IR : Infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại) ISO : International Organization for Standardization (Tổ chức tiêu chuẩn hoá quốc tế) LB : Luria Bertani ( mi : Khối lượng hợp chất i MS : Mass Spectrometry (Khối phổ) NL : Nguyên liệu NMR : Nuclear Magnetic Resonance (Cộng hưởng từ hạt nhân) ODsampie : optical Density of Sample (Mật độ quang mẫu) ODsoivent : optical Density of Solvent (Mật độ quang dung môi) PA : Patchouli Alcohol Ri : Recovery of i (Độ thu hồi cấu tử i) Rt : Retention time (Thời gian lưu) TB : Trung bình TT : Thứ tự Vig : Vigreux VI DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây tràm gió Hình 1.2 Công thức cấu tạo (a) Eucalyptol (b) P-Caryophyllene Hình 1.3 Tinh dầu ban đầu phân đoạn tinh dầu Hình 2.1 Cột chưng cất phân đoạn vật liệu đệm 12 Hình 2.2 Quy trình cơng nghệ chưng cất phân đoạn tinh dầu tràm gió 12 Hình 2.3 Hệ thống chưng cất phân đoạn quy mơ phịng thí nghiệm 13 Hình 3.1 Đường cong nhiệt độ sơi cấu từ theo áp suất 19 Hình 3.2 Thành phần hóa học tinh dầu thơ phân đoạn phân tách cột Vig áp suất 60 mmHg 20 Hình 3.3 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 21 Hình 3.4 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu P-Caryophyllene) phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 21 Hình 3.5 Độ thu hồi Eucalyptol Fl p-Caryophyllene F2 phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 22 Hình 3.6 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 23 Hình 3.7 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu P-Caryophyllene) phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 24 Hình 3.8 Độ thu hồi cùa Eucalyptol Fl P-Caryophyllene F2 phân tách áp suất từ 60 đến 260 mmHg 25 Hình 3.9 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách với loại cột khác 26 Hình 3.10 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu P-Caryophyllene) phân tách với loại cột khác 26 vii Hình 3.11 Độ thu hồi Eucalyptol Fl (3-Caryophyllene F2 phân tách với loại cột khác 27 Hình 3.12 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách với công suất từ 100 đến 200 w 28 Hình 3.13 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu [3-Caryophyllene) phân tách với công suất từ 100 đến 200 w 29 Hình 3.14 Độ thu hồi Eucalyptol Fl [3-Caryophyllene F2 phân tách với công suất từ 100 đến 200 w 29 Hình 3.15 Màu sắc ba phân đoạn phân tách điều kiện tối ưu 30 Hình 3.16 Hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu thơ ba phân đoạn phân tách điều kiện tối ưu 31 viii DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Thông số cột chưng cất phân đoạn 11 Bảng 2.2 Các giá trị khảo sát 14 Bảng 3.1 Thành phần (%) hợp chất tinh dầu tràm thô 17 Bảng 3.2 Nhiệt độ khối lượng phân đoạn với cột Vig áp suất khác 19 Bảng 3.3 Nhiệt độ khối lượng phân đoạn với cột đệm áp suất khác 23 Bảng 3.4 Nhiệt độ khối lượng phân đoạn với loại cột khác 26 Bảng 3.5 Nhiệt độ khối lượng phân đoạn với công suất khác 28 Bảng 3.6 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F1 thử nghiệm bốn chủng vi khuẩn gây bệnh 31 Bảng 3.7 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F2 thử nghiệm bốn chủng vi khuẩn gây bệnh 32 ix MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Công nghệ chiết tách tinh dầu công nghệ lâu đời phổ biến Tuy vậy, để chiết tách tinh dầu có hàm lượng hoạt chất cao, đáp ứng tiêu chuẩn dược phẩm mỹ phẩm hạn chế Ví dụ tinh dầu sả chanh có hàm lượng hoạt chất khoảng 60% Citral yêu cầu 80%, tinh dầu bưởi có D-limonene khoảng 80% yêu cầu 92% theo tiểu chuẩn Việt Nam Các sản phẩm tinh dầu thị trường đa phần tinh dầu thơ, cịn lẫn tạp chất nên chưa tận dụng hết giá trị kinh tế mang lại từ nguồn nguyên liệu nông nghiệp Do vậy, việc đa dạng hóa sản phẩm dựa tinh dầu giúp tạo sản phẩm có giá trị kinh tế cao, đưa lĩnh vực sản xuất tinh dầu trở thành ngành mới, đóng góp vào giá trị sản xuất cơng nghiệp Một số tinh dầu mạnh Việt Nam tràm gió, quế, sả Chúng tơi chọn tinh dầu tràm gió để nghiên cứu, vỉ tinh dầu sử dụng nhiều nước Việt Nam số nước có nguồn nguyên liệu tốt Mục tiêu nghiên cún Mục tiêu đề tài tạo phân đoạn tinh dầu có hàm lượng hoạt chất cao từ nguồn nguyên liệu tràm gió, định hướng ứng dụng dược phẩm phục vụ nhu cầu xuất Nội dung nghiên cứu - Khảo sát yếu tổ ảnh hưởng lên trinh chưng cất phân đoạn quy mơ phịng thí nghiệm - Đánh giá ảnh hưởng loại cột khác nhau; - Đánh giá ảnh hưởng áp suất chưng cất; - Đánh giá ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt - Đánh giá cảm quan, khả kháng oxi hóa kháng khuẩn phân đoạn tinh dầu Phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Tinh dầu tràm Huế thô - Thời gian nghiên cứu: Từ ngày 01/02/2020 đến ngày 30/09/2020 - Địa điểm nghiên cứu: ■ Quá trình thực nghiệm thực chủ yếu phịng thí nghiệm Hóa đại cương, khoa Kỳ thuật Thực phẩm Môi trường, trường Đại học Nguyền Tất Thành ■ Phân tích GC-MS thực viện Cơng nghệ Hóa học, số Mạc Đình Chi, Quận 1, Tp Hồ Chí Minh 3.5 Ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt Các mẫu phân đoạn cột đệm (chiều cao 200 mm), vật liệu đệm đổ đầy ngầu nhiên Đồng thời, cố định áp suất 60 mmHg sau khảo sát yếu tố thay đổi công suất bếp gia nhiệt Bảng 3.5 Nhiệt độ khối lượng cua phân đoạn vói cơng suất khác Cơng suất (W) Phân đoạn Raw Nhiệt độ (°C) Khối lượng (g) Hiệu suất (%) 150 100 30.00 200 Fl F2 F3 F1 F2 F3 F1 F2 F3 85-110 110-170 208 82-112 112-175 225 85-110 110-175 230 10.47 10.4 3.3 9.2 10.8 3.8 9.3 11 3.3 34.9 34.67 11 30.7 36 13 31 36.67 11 ■ Eucalyptol ■y-Terpinen ■ P-Caryophyllene ■ a-Caryophyllene ■ Terpinolene Hình 3.12 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách vói cơng suất từ 100 đến 200 w 28 ■ Eucalyptol ■ y-Terpinen ■ P-Caryophyllene ■ a-Caryophyllene ■ Terpinolene Hình 3.13 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu p-CaryophyIIene) phân tách với cơng suất từ 100 đến 200 w Hình 3.12 3.13 cho thấy hàm lượng Eucalyptol [3-Caryophyllene công suất bếp tăng đáng kể so với tinh dầu thô, từ 10% lên đến gần 25-28% Nhưng công suất khác lại không ảnh hưởng đến thay đổi hàm lượng Eucalyptol Ngược lại, công suất thấp (100 W) cho hàm lượng (3-Caryophyllene cao hon đáng kể so với 150 200 w (hình 3.13) Điều cơng suất thấp, tốc độ bay từ từ nên khả phân tách cấu tử khỏi tốt hon Hình 3.14 Độ thu hồi Eucalyptol F1 P-Caryophyllene F2 đưọc phân tách vói cơng suất từ 100 đến 200 w 29 Hình 3.14 cho thấy cơng suất 100 w có khối lượng thu lớn so với cơng suất cịn lại Độ thu hồi Eucalyptol (3-Caryophyllene khơng có nhiều thay đổi cơng suất bếp khác Nhược điểm q trình phân đoạn với công suất nhỏ thời gian thu hồi F1 F2 dài so với công suất lớn Tuy nhiên, hàm lượng độ thu hồi cấu tử cao nên cơng suất 100 w vần ưu tiên lựa chọn 3.6 Đánh giá chất lượng sản phẩm 3.6.1 Định tính Các phân đoạn tràm gió khác mặt cảm quan màu sắc (Hình 3.15) Ở phân đoạn F3, màu sắc tinh dầu trở nên nâu thầm, nhờn rít da, có mùi Phân đoạn F1 gần khơng màu, có mùi thơm mạnh, đặc trưng Eucalyptol Phân đoạn F2 có màu vàng nhạt, mùi thơm trung bình, đặc trưng P-Caryophyllene Hình 3.15 Màu sắc ba phân đoạn phân tách dưói điều kiện tối ưu 3.6.2 Định lượng a) Hoạt tỉnh kháng oxy hóa phân đoạn Các phân đoạn F1, F2, F3 kiểm tra hoạt tính kháng oxy hóa thơng qua % hoạt tính bắt gốc tự DPPH Kết thể hình 3.16 30 Hình 3.16 Hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu thơ ba phân đoạn phân tách điều kiện tối ưu Kết cho thấy tất phân đoạn có khả bắt gốc tự Tuy nhiên, khả bắt gốc tự cao đạt 75.16% F3 thấp 6.24% Fl Khả kháng oxy hóa tỷ lệ thuận với nồng độ phân đoạn Phân đoạn F1 có % hoạt tính bắt gốc tự thấp tỉ lệ pha loãng 1:25 chưa đủ để thể hoạt tính Do đó, cần sử dụng với nồng độ cao để hoạt tính kháng oxy hóa mạnh b) Hoạt tỉnh kháng khuẩn phản đoạn Bảng 3.6 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F1 thử nghiệm bốn chung vi khuẩn gây bệnh Vùng ức chế (mm) TT Vi khuấn F1 Chứng âm Chứng dương p.aeruginosa NRRL B-14781 15.6±0.5 35.3±0.5 s aureus NRRL B-313 9.6±0.5 18.3±2.8 s typhimurium Ys 1646 15.6±0.5 36 E coli NRRL B-409 13±1 23.3±1.1 31 Bảng 3.7 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F2 thử nghiệm bốn chủng vi khuẩn gây bệnh Vùng ức chế (mm) TT Vi khuấn F2 Chứng âm Chứng dương p.aeruginosa NRRL B-14781 19.66±0.57 31.33±1.15 s aureus NRRL B-313 15±0.1 16.33±0.57 s.typhimurium YS1646 u±l 32±2 E coli NRRL B-409 16.66±1.15 23±1.73 Tinh dầu tràm gió có khả ức chế mạnh phát triển chủng vi khuẩn p aeruginosa, s aureus, s typhimurium E.coli với đường kính vùng ức chế thể bảng 3.6 3.7 Kết cho thấy tinh dầu tràm gió có khả kháng chủng vi khuẩn kiểm định bao gồm vi khuẩn Gram âm Gram dương Đặc biệt, phân đoạn F2 có khả kháng aureus cao gần đối chứng dương - chất kháng sinh thường dùng điều trị nhiễm khuẩn Kết cho thấy tiềm ứng dụng phân đoạn tinh dầu Tràm gió thích họp cho việc sản xuất loại nước rửa tay diệt khuẩn - sản phẩm có nhu cầu lớn 32 Chuông 4.1 KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ Kết luận Trong nghiên cứu này, phương pháp chưng cất phân đoạn chân không với cột Vigreux cột đệm sử dụng để phân tách tinh dầu tràm gió thơ thành phân đoạn dựa vào nhiệt độ sôi khác nhau: Phân đoạn F1: phân đoạn đỉnh gồm thành phần dề bay hơi, giàu Eucalyptol - Đây thành phần giúp trị cảm, giảm ho, giảm sốt trẻ - Phân đoạn F2: phân đoạn trung gian giàu P-Caryophyllene - hoạt chất có khả điều trị chứng lo âu, trầm cảm - Phân đoạn F3: phân đoạn nặng chứa nhiều nhựa, khơng có thành phần có hàm lượng vượt trội Các phân đoạn khác mặt cảm quan độ thẩm thấu Phân đoạn có nhiệt độ sơi lớn màu sắc tinh dầu trở nên nâu thầm, mùi hơn, rít da nhớt Thông số vận hành cho trình chưng cất phân đoạn lựa chọn là: - Cột đệm: đường kính 29 mm, chiều cao 200 mm, đổ đầy vật liệu đệm xếp ngẫu nhiên - Vật liệu đệm: lò xo dài 1.8 mm, đường kính 0.4 mm, chất liệu nhựa - Áp suất chưng cất: 60 mmHg - Công suất bếp gia nhiệt: 100 w Hàm lượng Eucalyptol P-Caryophyllene thu điều kiện 27.96 24.81% Độ thu hồi tương ứng 96.81 85.58% 4.2 Kiến nghị - Phân đoạn tinh dầu tràm gió khoảng nhiệt độ hẹp hon - Chưng cất phân đoạn với có mặt nước - Kiểm tra hoạt tính sinh học phân đoạn tinh dầu thu 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng Việt Jolie, “Phân biệt tràm gió tràm trà - Đặc điểm, nguồn gốc công dụng,” 2018 T B Trần, “Chống cúm với dầu tràm,” 2009 Gold, “Cơng dụng hoạt chất a-terpineol cineol có tinh dầu tràm,” 2019 PGS.TS Nguyễn Thọ, “Kĩ thuật khai thác tinh dầu.” Tài liệu tham khảo tiếng Anh Aisyah, Y., & Anwar, s H (2012) Physico-chemical properties of patchouli oils (Pogostemon cablin) separated by fractional distillation method Proceedings of The Annual International Conference, Syiah Kuala University-Life Sciences & Engineering Chapter, 2(2) Amanzadeh, Y., Ashrafi, M., & Mohammadi, F (2006) New Elaborated Technique for Isolation and Purification of Limonene from Orange Oil Iranian Journal of Pharmaceutical Sciences, 2(2), 87-90 Castillo-Herrera, G A., GarciA-Fajardo, J A., & Estarrón-Espinosa, M (2007) Extraction method that enriches phenolic content in oregano (lippia graveolens H.B.K.) essential oil Journal of Food Process Engineering Eden, w T., Alighiri, D., Cahyono, E., Supardi, K I., & Wijayati, N (2018) Fractionation of Java Citronella Oil and Citronellal Purification by Batch Vacuum Fractional Distillation IOP Conference Series: Materials Science and Engineering, 349(V), 12067 Farah, A., Afifi, A., Fechtal, M., Chhen, A., Satrani, B., Taibi, M., & Chaouch, A (2006) Fractional distillation effect on the chemical composition of Moroccan myrtle (Myrtus communis L.) essential oils Flavour and Fragrance Journal, 2/(2), 351-354 Kumiawan, c., Haryani, s., Kadarwati, s., & Cahyono, E (2019) The fractional separation of citronella, cajeput, and patchouli crude oils using spinning band 34 distillation Journal of Physics: Conference Series Legault, J., & Pichette, A (2007) Potentiating effect of p-caryophyllene on anticancer activity of a-humulene, isocaryophyllene and paclitaxel Journal of Pharmacy and Pharmacology, 59(12), 1643-1647 Perini, J F., Silvestre, w p., Agostini, F., Toss, D., & Pauletti, G F (2017) Fractioning of orange (Citrus sinensis L.) essential oil using vacuum fractional distillation Separation Science and Technology, 52(8), 1397-1403 PGS.TS Nguyền Thọ (n.d.) Kĩ thuật khai thác tinh dầu Silvestre, w p., Agostini, F., Muniz, L A R., & Pauletti, G F (2016) Fractionating of green Mandarin (Citrus deliciosa Tenore) essential oil by vacuum fractional distillation Journal of Food Engineering Su, z Q., Wu, X L., Bao, M J., Li, c w., Kong, s z., Su, z R., Lai, X p., Li, Y c., & Chen, J N (2014) Isolation of (-)-patchouli alcohol from patchouli oil by fractional distillation and crystallization Tropical Journal of Pharmaceutical Research Warsito, w., Palungan, M H., & ưtomo, E p (2017) Profiling study of the major and minor components of kaffir lime oil (Citrus hystrix DC.) in the fractional distillation process The Pan African Medical Journal Wikipedia (2015) Eucalyptol 35 PHỤ LỤC Phụ lục Khảo sát áp suất (cột Vig.2) Compound 4.12 a-Thujene 0.98 3.14 4.25 a-Pinene 3.16 9.83 0.07 5.01 p-Pinene 2.46 6.63 0.05 5.21 p-Myrcene 0.35 5.50 a-Phellandrene 5.62 Raw 160 mmHg 60 mmHg Rt (min) No Fl F2 F3 Fl F2 260 mmHg F3 Fl F2 2.32 2.31 1.46 7.88 7.66 0.02 6.01 5.85 0.99 0.86 0.86 0.92 2.27 2.18 3-Carene 0.22 0.79 0.78 0.80 5.74 (X-Terpinene 1.59 3.79 0.09 3.73 3.64 5.89 O-Cymene 1.80 4.88 0.24 0.05 4.41 5.99 D-Limonene 2.16 5.48 0.19 0.89 5.47 10 6.05 Eucalyptol 10.08 24.69 1.32 2.03 24.61 0.25 11 6.60 y-Terpinen 8.68 18.03 2.00 19.87 12 7.24 Terpinolene 8.52 15.49 3.44 13 7.44 p-Linalool 1.25 1.53 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 15 9.51 a-Terpineol 1.87 16 13.57 a-ylangene 0.96 1.72 1.50 2.19 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.76 0.72 0.90 18 14.62 p-Caryophyllene 10.05 19 14.99 a-Guaiene 0.12 20 15.33 a-Caryophyllene 6.15 21 15.79 isoledene 2.18 3.88 22 15.86 a-Amorphene 1.74 3.41 23 16.02 Eremophilene 5.55 24 16.08 Cadinene 2.38 25 16.19 a-Selinene 5.44 26 16.41 p-Cadinene 27 16.72 28 29 0.03 2.13 6.04 0.16 5.66 0.10 24.69 0.48 0.34 18.93 0.95 18.21 0.80 17.55 2.32 0.71 1.65 0.24 1.79 0.41 0.28 0.63 0.37 0.46 0.33 0.73 0.77 2.52 1.00 1.98 0.88 2.82 0.04 17.21 0.01 0.55 2.15 12.00 0.50 0.42 0.03 0.09 18.72 0.78 0.79 0.47 13.52 2.51 3.70 1.79 1.47 3.94 1.95 9.64 5.08 10.39 6.21 4.48 1.29 5.32 10.57 5.91 2.36 4.20 Ỗ-Cadinene 0.59 1.35 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.36 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 1.80 0.63 0.23 0.14 0.09 F3 0.44 0.14 14.63 0.64 1.75 2.38 12.29 3.47 5.20 3.57 0.06 9.64 8.47 2.36 0.01 6.00 4.46 11.80 8.24 0.06 10.43 11.92 2.51 4.49 3.05 4.16 2.99 1.52 1.51 1.65 1.50 3.15 0.45 0.40 0.30 0.33 1.79 2.64 1.95 4.26 2.07 0.08 0.14 2.97 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 1.95 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.36 32 18.20 Guaiol 5.34 4.53 14.41 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.15 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 35 19.01 Agarospirol 36 19.23 37 38 1.81 5.53 3.39 2.02 0.42 0.11 3.60 14.75 2.87 10.20 0.22 0.11 0.68 2.04 13.69 1.21 11.40 1.08 11.10 0.01 0.09 1.20 0.27 1.33 0.04 0.76 p-Eudesmol 2.51 1.50 11.98 1.16 10.86 0.63 4.82 19.28 a-Eudesmol 2.95 2.22 17.28 1.98 15.12 1.08 9.74 19.52 Bulnesol 1.29 0.88 6.94 0.62 6.72 0.40 3.56 Phụ lục Khảo sát áp suất (cột đệm) 160 mmHg 60 mmHg Rt (min) Compound 4.12 a-Thujene 0.98 3.6 4.25 a-Pinene 3.16 11.49 0.17 0.05 7.50 5.01 p-Pinene 2.46 8.5 0.47 0.02 5.21 p-Myrcene 0.35 1.3 5.50 a-Phellandrene 0.92 5.62 3-Carene 5.74 No 260 mmHg Raw Fl F2 F3 Fl F2 F3 Fl F2 2.29 2.26 7.59 0.10 5.75 5.70 0.07 0.07 0.83 0.82 2.92 0.54 2.11 2.05 0.22 1.08 0.14 0.75 0.74 a-Terpinene 1.59 4.6 1.18 3.62 3.51 0.02 5.89 O-Cymene 1.80 2.98 0.10 5.17 5.78 0.25 5.99 D-Limonene 2.16 6.04 2.46 0.05 5.49 5.38 0.09 10 6.05 Eucalyptol 10.08 27.05 10.41 0.36 24.19 0.35 23.58 0.84 11 6.60 y-Terpinen 8.68 16.26 14.77 0.32 19.29 0.47 18.54 0.52 12 7.24 Terpinolene 8.52 11.12 19.53 0.41 18.62 1.13 18.35 0.74 13 7.44 p-Linalool 1.25 0.64 3.17 0.02 1.98 0.30 2.18 0.12 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 1.87 0.01 0.51 0.76 0.73 0.63 15 9.51 (I-Terpineol 1.87 6.41 0.19 1.39 3.45 2.08 3.38 16 13.57 a-ylangene 0.96 2.06 1.60 0.03 3.12 0.07 4.08 0.07 F3 0.02 0.06 0.08 0.18 0.01 0.14 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.89 0.78 18.00 14.62 p-Caryophyllene 10.05 13.02 22.08 19 14.99 a-Guaiene 0.12 0.29 0.74 20 15.33 a-Caryophyllene 6.15 5.50 16.20 21 15.79 isoledene 2.18 1.38 22 15.86 a-Amorphene 1.74 23 16.02 Eremophilene 24 16.08 25 1.34 0.05 24.26 5.31 0.94 0.47 13.97 7.14 5.13 4.27 1.19 4.38 5.55 3.05 Cadinene 2.38 16.19 a-Selinene 26 16.41 27 2.01 0.05 25.68 5.97 1.21 0.28 13.89 8.29 3.10 4.34 3.25 4.00 3.18 4.21 3.19 11.47 9.36 9.02 8.05 9.29 1.57 5.22 5.05 3.82 5.12 4.30 5.44 2.99 12.30 10.12 10.54 9.04 10.96 p-Cadinene 2.36 1.06 4.05 3.87 3.84 2.77 3.06 16.72 S-Cadinene 0.59 0.20 1.58 1.15 1.97 1.39 2.33 28 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.01 0.39 0.26 0.47 29 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 0.18 1.87 1.36 2.84 1.09 2.82 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 0.24 1.88 1.37 3.35 1.13 3.23 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.27 0.14 0.49 0.05 0.58 32 18.20 Guaiol 5.34 2.39 1.81 11.10 1.40 11.05 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.05 0.56 0.57 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 0.76 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 0.41 0.34 7.08 0.22 6.67 37 19.28 a-Eudesmol 2.95 0.59 0.47 9.64 0.34 8.99 38 19.52 Bulnesol 1.29 0.20 0.18 4.37 0.09 4.06 0.34 0.29 0.04 0.37 0.05 0.50 0.68 7.48 7.17 0.33 0.67 0.57 Phụ lục Khảo sát loại cột Packed Compound 4.12 a-Thujene 0.98 1.57 4.25 a-Pinene 3.16 5.09 0.05 7.58 5.01 p-Pinene 2.46 3.94 0.02 5.21 p-Myrcene 0.35 0.60 Raw Fl Vig Vig Rt (min) No F2 F3 Fl F2 F3 Fl Vig F2 F3 3.14 2.29 Fl 2.17 9.83 0.07 1.46 7.87 5.88 6.63 0.05 0.02 5.78 0.87 0.99 g 0.03 F2 0.83 0.01 F3 5.5 aPhellandrene 0.92 1.54 1.86 2.27 2.07 5.62 3-Carene 0.22 0.54 0.75 0.79 0.80 5.74 a-Terpinene 1.59 2.59 3.02 0.01 5.89 O-Cymene 1.80 3.67 0.10 0.16 7.75 0.08 5.99 D-Limonene 2.16 3.86 0.05 0.10 5.49 10 6.05 Eucalyptol 10.08 16.98 0.36 0.48 11 6.6 y-Terpinen 8.68 14.46 0.32 12 7.24 Terpinolene 8.52 14.61 13 7.44 P-Linalool 1.25 14 9.22 Terpinen-4-ol 15 9.51 16 3.79 0.09 0.20 4.88 0.24 0.05 4.26 0.06 0.05 0.19 5.48 0.19 0.89 5.50 0.04 24.40 0.40 2.42 24.69 1.32 2.03 27.21 0.46 0.95 16.85 0.64 0.02 18.03 2.00 20.02 1.01 0.41 2.32 16.49 1.13 15.49 3.44 17.14 2.22 1.86 0.02 0.41 1.88 0.26 1.53 0.71 1.59 0.67 0.43 0.94 0.01 0.73 0.52 0.35 0.28 0.63 0.21 0.67 a-Terpineol 1.87 3.24 0.19 2.82 1.47 1.58 0.77 2.52 0.47 2.72 13.57 a-ylangene 0.96 1.03 1.60 2.19 0.15 1.55 1.72 1.46 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.45 0.78 0.90 0.77 0.76 0.79 18 14.62 0Caryophy Ilene 10.05 6.51 22.08 14.63 19 14.99 a-Guaiene 0.12 0.15 0.74 1.75 20 15.33 aCaryophyllene 6.15 2.75 16.20 12.29 21 15.79 isoledene 2.18 0.69 5.13 22 15.86 a-Amorphene 1.74 0.60 4.38 23 16.02 Eremophilene 5.55 1.53 24 16.08 Cadinene 2.38 25 16.19 a-Selinene 26 16.41 27 1.27 0.16 0.17 0.04 17.21 0.01 0.55 2.15 12.00 0.50 16.86 1.39 0.57 0.24 0.50 12.17 2.20 0.05 4.40 1.53 3.88 5.20 0.06 3.58 1.41 3.41 11.47 9.64 0.27 10.02 5.25 0.79 5.22 6.00 0.08 4.43 1.35 5.44 1.50 12.30 10.43 0.27 10.90 6.87 P-Cadinene 2.36 0.53 4.05 4.16 0.03 4.21 16.72 Ỗ-Cadinene 0.59 0.10 1.58 1.50 28 16.78 a-Guijunene 0.01 0.01 0.39 29 16.99 0.88 0.09 30 17.13 1.11 0.12 31 17.53 p-Maaliene 0.11 32 18.2 Guaiol 5.34 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.05 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 0.76 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 37 19.28 a-Eudesmol 38 19.52 Bulnesol Guaia-3,9diene Selina3,7(1 l)-diene 3.59 19.65 0.09 0.59 0.01 14.75 0.60 4.27 0.44 1.47 4.02 0.59 9.64 5.08 10.91 2.81 4.48 1.29 5.04 0.79 10.57 5.91 12.04 4.21 1.34 4.20 2.51 4.54 1.36 1.57 1.73 1.35 1.52 1.36 1.02 0.30 0.46 0.22 0.36 0.43 0.27 1.87 1.95 2.13 2.11 1.80 2.07 1.69 1.80 1.88 2.02 2.28 2.92 1.95 2.97 1.71 2.42 0.27 0.11 0.41 0.21 0.36 0.26 0.50 2.39 2.87 5.53 16.80 4.53 14.41 2.34 18.21 0.29 1.14 0.15 0.22 0.08 1.57 1.08 2.85 13.08 2.04 13.69 0.82 14.75 0.04 0.18 1.07 0.09 1.20 0.04 1.73 0.41 0.63 2.08 11.71 1.50 11.98 0.52 14.94 2.95 0.59 1.08 3.12 15.89 2.22 17.28 0.75 19.75 1.29 0.20 0.40 1.24 6.88 0.88 6.94 0.29 9.10 0.17 0.01 0.63 0.23 0.14 0.09 0.20 0.11 0.06 0.01 Phụ lục Khảo sát công suất 150 w 100 w Rt (min) Compound 4.12 a-Thujene 4.25 No 200 w Raw F3 F2 F1 F2 0.98 2.20 0.02 2.28 a-Pinene 3.16 7.93 0.11 8.11 0.04 5.01 p-Pinene 2.46 6.18 0.05 6.27 0.03 5.21 p-Myrcene 0.35 0.84 5.50 a-Phellandrene 0.92 2.17 5.62 3-Carene 0.22 0.86 5.74 a-Terpinene 1.59 3.69 0.06 3.83 0.06 5.89 O-Cymene 1.80 5.08 0.24 4.62 0.16 5.99 D-Limonene 2.16 5.75 0.19 5.80 0.16 10 6.05 Eucalyptol 10.08 27.96 1.15 27.44 0.94 11 6.60 ■y-Terpinen 8.68 19.58 3.21 19.62 12 7.24 Terpinolene 8.52 16.01 7.22 13 7.44 p-Linalool 1.25 1.16 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 15 9.51 a-Terpineol 1.87 16 13.57 a-ylangene 0.96 3.23 17 13.67 a-Copaene 0.18 18 14.62 p-Caryophyllene 19 14.99 20 F1 F3 2.29 F2 F3 2.28 0.02 8.04 0.04 6.20 0.02 0.89 0.90 0.02 F1 2.26 0.02 0.87 0.02 0.86 3.87 0.05 4.62 0.17 5.77 0.15 0.15 27.90 1.05 0.06 2.17 0.04 19.79 2.47 0.01 16.08 4.33 0.03 15.78 4.84 0.01 2.41 1.24 1.31 1.16 1.27 0.11 2.03 0.12 1.10 0.12 1.02 0.19 7.76 0.19 4.27 0.01 0.18 4.04 0.06 1.96 0.02 1.80 0.02 1.15 10.05 24.81 4.10 21.07 1.29 20.95 1.62 a-Guaiene 0.12 0.81 0.17 0.71 0.04 0.63 0.13 15.33 a-Caryophyllene 6.15 11.83 7.03 13.78 2.86 13.84 3.11 21 15.79 isoledene 2.18 3.36 2.83 4.34 1.30 4.13 1.44 22 15.86 a-Amorphene 1.74 2.65 2.75 3.41 1.40 3.46 1.64 23 16.02 Eremophilene 5.55 6.40 9.14 9.11 5.30 9.33 5.96 24 16.08 Cadinene 2.38 3.08 3.37 4.09 1.64 4.14 1.94 25 16.19 a-Selinene 5.44 6.42 10.74 9.55 6.80 9.93 7.87 26 16.41 p-Cadinene 2.36 2.32 3.67 3.80 1.95 3.80 2.47 27 16.72 S-Cadinene 0.59 0.62 1.85 1.11 1.25 1.05 1.38 28 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.18 0.51 0.36 0.37 0.34 0.38 29 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 0.67 2.80 1.38 2.13 1.35 2.26 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 0.63 3.24 1.32 2.67 1.33 2.86 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.07 0.67 0.20 0.55 0.20 0.52 0.01 0.01 1.80 0.01 1.04 11.85 1.77 15.84 1.79 14.37 0.85 0.07 1.33 0.06 1.13 8.12 0.56 12.57 0.61 11.90 0.89 0.03 1.38 0.03 1.15 0.09 7.63 0.29 12.85 0.37 11.95 2.95 0.13 9.65 0.47 15.45 0.56 16.07 1.29 0.04 4.44 0.17 7.30 0.20 6.99 32 18.20 Guaiol 5.34 33 18.75 y-Selinene 0.18 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 37 19.28 ot-Eudesmol 38 19.52 Bulnesol 0.62 0.16 Phụ lục Khả kháng oxy hóa phân đoạn Mầu OD1 OŨ2 ODtb % hoạt tính bắt gốc tự DPPH Tinh dầu thơ 0.512 0.479 0.496 35.50 F1 0.722 0.719 0.721 6.24 F2 0.327 0.334 0.331 56.96 F3 0.197 0.184 0.191 75.16 Dung mơi 0.764 0.773 0.769 Phụ lục Hoạt tính kháng khuẩn cua F1 chống lại vi khuẩn chọn lọc phương pháp khuếch tán đĩa (A): Fl, (B): Đối chứng âm tính, (C): Đối chứng dương tính - Amoxicillin Phụ lục Hoạt tính kháng khuẩn cua F2 chống lại vi khuẩn chọn lọc phương pháp khuếch tán đĩa (A): F2, (B): Đối chứng âm tính, (C): Đối chứng dương tính - Amoxicillin ... NGHIÊN cứu 1.1 Tràm gió tinh dầu tràm gió 1.1.1 Tràm gió 1.1.2 Tinh dầu tràm gió 1.2 Phân đoạn tinh dầu 1.2.1 Tinh dầu phân đoạn ... Sản phẩm tinh dầu phân đoạn sản phẩm tinh dầu chất lượng cao dùng trực tiếp liệu pháp trị liệu Hình 1.3 Tinh dầu ban đầu phân đoạn tinh dầu Việc phân đoạn tinh dầu giúp lấy phân khúc tinh dầu có... Thái Lan, tràm gió sử dụng để chế trà thảo dược để trị bệnh - Cây tràm gió dùng chủ yếu để chiết xuất tinh dầu tràm gió, hay cịn gọi tắt dầu tràm Tinh dầu tràm gió thị thường hầu hết từ loại Melaleuca