Chưng cất phân đoạn tinh dầu tràm gió từ tỉnh thừa thiên huế, việt nam

E ~ TRƯỜNG ĐẠI HOC NGUYEN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỤC PHẨM VÀ MÔI TRƯỜNG NGUYEN TAT THANH KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP CHƯNG CẤT PHÂN ĐOẠN TINH DẢU TRÀM GIÓ TỪ TỈNH THỪA THIÊN HUẾ, VIỆT NAM NGUYỄN HOÀNG TUẤN Tp.HCM, tháng 10 năm 2020 i TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỤC PHẨM VÀ MƠI TRƯỜNG KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP CHƯNG CẤT PHÂN ĐOẠN TINH DẦU TRÀM GIÓ TỪ TỈNH THỪA THIÊN HUÉ, VIỆT NAM NGUYỄN HOÀNG TUẤN PHẠM HOÀNG DANH Tp.HCM, tháng 10 năm 2020 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TẤT THÀNH Cán hướng dần: (ghi tên ký duyệt) Cán chấm phản biện: (ghi tên ký duyệt) Khóa luận bảo vệ HỘI ĐỒNG CHẤM BẢO VỆ LUẬN VÀN ĐẠI HỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỀN TẤT THÀNH, ngày 09 tháng 10 năm 2020 Bộ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO CỘNG HÒA XÀ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỀN TẤT THÀNH Độc lập - Tự - Hạnh phúc KHOA KỸ THUẬT THỤC PHÁM & MÔI TRƯỜNG BỌ MÔN: CÔNG NGHỆ KỸ THUẬT HÓA HỌC NHIỆM VỤ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP HỌ VÀ TÊN: NGUYỀN HOÀNG TUẤN MSSV: 1600002659 LỚP: 16DHH1A NGÀNH: HĨA Hữu co Tên Khóa luận: Tiếng Việt: Chưng cất phân đoạn tinh dầu tràm gió từ tỉnh Thừa Thiên Huế, Việt Nam Tiếng Anh: Vacuum fractional distillation of cajeput essential oil from Thua Thien Hue, Central Vietnam Nhiệm vụ Khóa luận: Khảo sát yếu tố ảnh hưởng lên trình chưng cất phân đoạn quy mơ phịng thí nghiệm ■ Ảnh hưởng áp suất chưng cất; ■ Ảnh hưởng loại cột khác nhau; ■ Ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt Đánh giá cảm quan, khả kháng oxi hóa kháng khuẩn phân đoạn tinh dầu Ngày giao Khóa luận: 01/02/2020 Ngày hồn thành nhiệm vụ: 30/09/2020 Họ tên cán hướng dẫn: Phạm Hoàng Danh Nội dung yêu cầu KLTN đà Hội Đồng chuyên ngành thông qua TP.HCM, ngày thảng 10 năm 2020 TRƯỞNG Bộ MƠN CÁN Bộ HƯỚNG DẢN TRƯỞNG/ PHĨ KHOA LỜI CẢM ƠN Trong thời gian nghiên cứu để hoàn thành khóa luận khoa Kỳ thuật Thực phẩm Mơi trường, trường Đại học Nguyền Tất Thành, em nhận nhiều quan tâm, hướng dần quý thầy cơ, bạn bè Với lịng biết on sâu sắc, em xin chân thành gửi lời cảm cm đến thầy Phạm Hồng Danh, người tận tụy, nhiệt tình dìu dắt giúp đỡ em suốt thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Em xin chân thành cảm cm sâu sắc tới tồn thể thầy mơn CNKT Hóa học đà tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em suốt thời gian thực khóa luận Em xin cám om thầy trường Đại học Nguyễn Tất Thành bạn lóp Cơng nghệ hóa học KI6 giảng dạy, hồ trợ động viên em thời gian học trường TÓM TẮT Các sản phẩm tinh dầu thị trường đa phần tinh dầu thô, lẫn tạp chất nên chưa tận dụng hết giá trị kinh tế mang lại từ nguồn nguyên liệu nông nghiệp Trong nghiên cứu này, sừ dụng phương pháp chưng cất phân đoạn chân không với cột vigreux cột đệm để phân tách tinh dầu tràm gió thô thành phân đoạn dựa vào nhiệt độ sôi khác Phân đoạn F1 giàu Eucalyptol giúp trị cảm, giảm ho, giảm sốt trẻ Phân đoạn F2 giàu P-Caryophyllene hoạt chất có khả điều trị chứng lo âu, trầm cảm Các phân đoạn khác mặt cảm quan độ thẩm thấu Thông số vận hành cho trình chưng cất phân đoạn lựa chọn sử dụng cột đệm áp suất 60 mmHg công suất bếp 100 w Hàm lượng Eucalyptol P-Caryophyllene thu điều kiện 27.96 24.81% Độ thu hồi tương ứng 96.81 85.58% 11 ABSTRACT Today, the essential oils on the market are mostly raw products, so it has not taken advantage of the economic value from agricultural materials In this study, we used the vacuum fractionation method with vigreux and packed columns to separate raw cajeput essential oil into fractions based on different boiling temperatures Eucalyptol-rich fraction helps treat colds, reduces cough and fever in children P-Caryophyllene -rich fraction active ingredient with the ability to treat anxiety, depression These fractions are also very different in terms of sensory and permeability The operating parameters for fractional distillation were packed-column, the pressure of 60 mmHg and the power of 100 w The Eucalyptol and ị3-Caryophyllene content obtained were 27.96 and 24.81% The recoveries were 96.81 and 85.58%, respectively MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i TÓM TẮT ii ABSTRACT iii MỤC LỤC ỉv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC BẢNG ỉx MỞ ĐẦU Chng TƠNG QUAN VỀ NGHIÊN cứu 1.1 Tràm gió tinh dầu tràm gió 1.1.1 Tràm gió 1.1.2 Tinh dầu tràm gió 1.2 Phân đoạn tinh dầu 1.2.1 Tinh dầu phân đoạn 1.2.2 Công nghệ thiết bị 1.3 Những nghiên cứu giới Chương ĐÓI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu .11 2.1 Nguyên liệu 11 2.2 Dụng cụ - Thiết bị - Hóa chất 11 2.3 Phuong pháp nghiên cúu .12 2.3.1 Quy trình cơng nghệ 12 2.3.2 Sơ đồ nghiên cứu 14 2.3.3 Bố trí thí nghiệm 14 2.4 Phuong pháp phân tích 15 IV 2.4.1 Phân tích định tính 15 2.4.2 Phân tích định lượng 15 Chuông KÉT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 17 3.1 Thành phần tinh dầu thô 17 3.2 Ảnh hưởng áp suất lên trình phân đoạn vói cột Vigreux 19 3.3 Ảnh hưởng áp suất lên q trình phân đoạn vói cột đệm 22 3.4 Ảnh hướng loại cột phân đoạn 25 3.5 Ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt 28 3.6 Đánh giá chất lượng sản phẩm 30 3.6.1 Định tính 30 3.6.2 Định lượng 30 Chuông KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ 33 4.1 Kết luận 33 4.2 Kiến nghị 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO 34 PHỤ LỤC 36 V DANH MỤC CHỮ VIÉT TẮT CFU : Colony Forming Unit (Đơn vị hình thành khuẩn lạc) ĐK : Đường kính F1, 2, : Phân đoạn 1,2,3 GC : Gas Chromatography (Sắc kỷ khí) IR : Infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại) ISO : International Organization for Standardization (Tổ chức tiêu chuẩn hoá quốc tế) LB : Luria Bertani ( mi : Khối lượng hợp chất i MS : Mass Spectrometry (Khối phổ) NL : Nguyên liệu NMR : Nuclear Magnetic Resonance (Cộng hưởng từ hạt nhân) ODsampie : optical Density of Sample (Mật độ quang mẫu) ODsoivent : optical Density of Solvent (Mật độ quang dung môi) PA : Patchouli Alcohol Ri : Recovery of i (Độ thu hồi cấu tử i) Rt : Retention time (Thời gian lưu) TB : Trung bình TT : Thứ tự Vig : Vigreux VI 3.5 Ảnh hưởng công suất bếp gia nhiệt Các mẫu phân đoạn cột đệm (chiều cao 200 mm), vật liệu đệm đổ đầy ngầu nhiên Đồng thời, cố định áp suất 60 mmHg sau khảo sát yếu tố thay đổi công suất bếp gia nhiệt Bảng 3.5 Nhiệt độ khối lượng cua phân đoạn vói cơng suất khác Cơng suất (W) Phân đoạn Raw Nhiệt độ (°C) Khối lượng (g) Hiệu suất (%) 150 100 30.00 200 Fl F2 F3 F1 F2 F3 F1 F2 F3 85-110 110-170 208 82-112 112-175 225 85-110 110-175 230 10.47 10.4 3.3 9.2 10.8 3.8 9.3 11 3.3 34.9 34.67 11 30.7 36 13 31 36.67 11 ■ Eucalyptol ■y-Terpinen ■ P-Caryophyllene ■ a-Caryophyllene ■ Terpinolene Hình 3.12 Thành phần hóa học F1 (phân đoạn giàu Eucalyptol) phân tách vói cơng suất từ 100 đến 200 w 28 ■ Eucalyptol ■ y-Terpinen ■ P-Caryophyllene ■ a-Caryophyllene ■ Terpinolene Hình 3.13 Thành phần hóa học F2 (phân đoạn giàu p-CaryophyIIene) phân tách với cơng suất từ 100 đến 200 w Hình 3.12 3.13 cho thấy hàm lượng Eucalyptol [3-Caryophyllene công suất bếp tăng đáng kể so với tinh dầu thô, từ 10% lên đến gần 25-28% Nhưng công suất khác lại không ảnh hưởng đến thay đổi hàm lượng Eucalyptol Ngược lại, công suất thấp (100 W) cho hàm lượng (3-Caryophyllene cao hon đáng kể so với 150 200 w (hình 3.13) Điều cơng suất thấp, tốc độ bay từ từ nên khả phân tách cấu tử khỏi tốt hon Hình 3.14 Độ thu hồi Eucalyptol F1 P-Caryophyllene F2 đưọc phân tách vói cơng suất từ 100 đến 200 w 29 Hình 3.14 cho thấy cơng suất 100 w có khối lượng thu lớn so với cơng suất cịn lại Độ thu hồi Eucalyptol (3-Caryophyllene khơng có nhiều thay đổi cơng suất bếp khác Nhược điểm trình phân đoạn với công suất nhỏ thời gian thu hồi F1 F2 dài so với công suất lớn Tuy nhiên, hàm lượng độ thu hồi cấu tử cao nên cơng suất 100 w vần ưu tiên lựa chọn 3.6 Đánh giá chất lượng sản phẩm 3.6.1 Định tính Các phân đoạn tràm gió khác mặt cảm quan màu sắc (Hình 3.15) Ở phân đoạn F3, màu sắc tinh dầu trở nên nâu thầm, nhờn rít da, có mùi Phân đoạn F1 gần khơng màu, có mùi thơm mạnh, đặc trưng Eucalyptol Phân đoạn F2 có màu vàng nhạt, mùi thơm trung bình, đặc trưng P-Caryophyllene Hình 3.15 Màu sắc ba phân đoạn phân tách dưói điều kiện tối ưu 3.6.2 Định lượng a) Hoạt tỉnh kháng oxy hóa phân đoạn Các phân đoạn F1, F2, F3 kiểm tra hoạt tính kháng oxy hóa thơng qua % hoạt tính bắt gốc tự DPPH Kết thể hình 3.16 30 Hình 3.16 Hoạt tính kháng oxy hóa tinh dầu thơ ba phân đoạn phân tách điều kiện tối ưu Kết cho thấy tất phân đoạn có khả bắt gốc tự Tuy nhiên, khả bắt gốc tự cao đạt 75.16% F3 thấp 6.24% Fl Khả kháng oxy hóa tỷ lệ thuận với nồng độ phân đoạn Phân đoạn F1 có % hoạt tính bắt gốc tự thấp tỉ lệ pha loãng 1:25 chưa đủ để thể hoạt tính Do đó, cần sử dụng với nồng độ cao để hoạt tính kháng oxy hóa mạnh b) Hoạt tỉnh kháng khuẩn phản đoạn Bảng 3.6 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F1 thử nghiệm bốn chung vi khuẩn gây bệnh Vùng ức chế (mm) TT Vi khuấn F1 Chứng âm Chứng dương p.aeruginosa NRRL B-14781 15.6±0.5 35.3±0.5 s aureus NRRL B-313 9.6±0.5 18.3±2.8 s typhimurium Ys 1646 15.6±0.5 36 E coli NRRL B-409 13±1 23.3±1.1 31 Bảng 3.7 Hoạt tính kháng khuẩn phân đoạn F2 thử nghiệm bốn chủng vi khuẩn gây bệnh Vùng ức chế (mm) TT Vi khuấn F2 Chứng âm Chứng dương p.aeruginosa NRRL B-14781 19.66±0.57 31.33±1.15 s aureus NRRL B-313 15±0.1 16.33±0.57 s.typhimurium YS1646 u±l 32±2 E coli NRRL B-409 16.66±1.15 23±1.73 Tinh dầu tràm gió có khả ức chế mạnh phát triển chủng vi khuẩn p aeruginosa, s aureus, s typhimurium E.coli với đường kính vùng ức chế thể bảng 3.6 3.7 Kết cho thấy tinh dầu tràm gió có khả kháng chủng vi khuẩn kiểm định bao gồm vi khuẩn Gram âm Gram dương Đặc biệt, phân đoạn F2 có khả kháng aureus cao gần đối chứng dương - chất kháng sinh thường dùng điều trị nhiễm khuẩn Kết cho thấy tiềm ứng dụng phân đoạn tinh dầu Tràm gió thích họp cho việc sản xuất loại nước rửa tay diệt khuẩn - sản phẩm có nhu cầu lớn 32 Chuông 4.1 KÉT LUẬN VÀ KIÉN NGHỊ Kết luận Trong nghiên cứu này, phương pháp chưng cất phân đoạn chân không với cột Vigreux cột đệm sử dụng để phân tách tinh dầu tràm gió thơ thành phân đoạn dựa vào nhiệt độ sôi khác nhau: Phân đoạn F1: phân đoạn đỉnh gồm thành phần dề bay hơi, giàu Eucalyptol - Đây thành phần giúp trị cảm, giảm ho, giảm sốt trẻ - Phân đoạn F2: phân đoạn trung gian giàu P-Caryophyllene - hoạt chất có khả điều trị chứng lo âu, trầm cảm - Phân đoạn F3: phân đoạn nặng chứa nhiều nhựa, khơng có thành phần có hàm lượng vượt trội Các phân đoạn khác mặt cảm quan độ thẩm thấu Phân đoạn có nhiệt độ sơi lớn màu sắc tinh dầu trở nên nâu thầm, mùi hơn, rít da nhớt Thơng số vận hành cho q trình chưng cất phân đoạn lựa chọn là: - Cột đệm: đường kính 29 mm, chiều cao 200 mm, đổ đầy vật liệu đệm xếp ngẫu nhiên - Vật liệu đệm: lị xo dài 1.8 mm, đường kính 0.4 mm, chất liệu nhựa - Áp suất chưng cất: 60 mmHg - Công suất bếp gia nhiệt: 100 w Hàm lượng Eucalyptol P-Caryophyllene thu điều kiện 27.96 24.81% Độ thu hồi tương ứng 96.81 85.58% 4.2 Kiến nghị - Phân đoạn tinh dầu tràm gió khoảng nhiệt độ hẹp hon - Chưng cất phân đoạn với có mặt nước - Kiểm tra hoạt tính sinh học phân đoạn tinh dầu thu 33 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tham khảo tiếng Việt Jolie, “Phân biệt tràm gió tràm trà - Đặc điểm, nguồn gốc công dụng,” 2018 T B Trần, “Chống cúm với dầu tràm,” 2009 Gold, “Cơng dụng hoạt chất a-terpineol cineol có tinh dầu tràm,” 2019 PGS.TS Nguyễn Thọ, “Kĩ thuật khai thác tinh dầu.” Tài liệu tham khảo tiếng Anh Aisyah, Y., & Anwar, s H (2012) Physico-chemical properties of patchouli oils (Pogostemon cablin) separated by fractional distillation method Proceedings of The Annual International Conference, Syiah Kuala University-Life Sciences & Engineering Chapter, 2(2) Amanzadeh, Y., Ashrafi, M., & Mohammadi, F (2006) New Elaborated Technique for Isolation and Purification of Limonene from Orange Oil Iranian Journal of Pharmaceutical Sciences, 2(2), 87-90 Castillo-Herrera, G A., GarciA-Fajardo, J A., & Estarrón-Espinosa, M (2007) Extraction method that enriches phenolic content in oregano (lippia graveolens H.B.K.) essential oil Journal of Food Process Engineering Eden, w T., Alighiri, D., Cahyono, E., Supardi, K I., & Wijayati, N (2018) Fractionation of Java Citronella Oil and Citronellal Purification by Batch Vacuum Fractional Distillation IOP Conference Series: Materials Science and Engineering, 349(V), 12067 Farah, A., Afifi, A., Fechtal, M., Chhen, A., Satrani, B., Taibi, M., & Chaouch, A (2006) Fractional distillation effect on the chemical composition of Moroccan myrtle (Myrtus communis L.) essential oils Flavour and Fragrance Journal, 2/(2), 351-354 Kumiawan, c., Haryani, s., Kadarwati, s., & Cahyono, E (2019) The fractional separation of citronella, cajeput, and patchouli crude oils using spinning band 34 distillation Journal of Physics: Conference Series Legault, J., & Pichette, A (2007) Potentiating effect of p-caryophyllene on anticancer activity of a-humulene, isocaryophyllene and paclitaxel Journal of Pharmacy and Pharmacology, 59(12), 1643-1647 Perini, J F., Silvestre, w p., Agostini, F., Toss, D., & Pauletti, G F (2017) Fractioning of orange (Citrus sinensis L.) essential oil using vacuum fractional distillation Separation Science and Technology, 52(8), 1397-1403 PGS.TS Nguyền Thọ (n.d.) Kĩ thuật khai thác tinh dầu Silvestre, w p., Agostini, F., Muniz, L A R., & Pauletti, G F (2016) Fractionating of green Mandarin (Citrus deliciosa Tenore) essential oil by vacuum fractional distillation Journal of Food Engineering Su, z Q., Wu, X L., Bao, M J., Li, c w., Kong, s z., Su, z R., Lai, X p., Li, Y c., & Chen, J N (2014) Isolation of (-)-patchouli alcohol from patchouli oil by fractional distillation and crystallization Tropical Journal of Pharmaceutical Research Warsito, w., Palungan, M H., & ưtomo, E p (2017) Profiling study of the major and minor components of kaffir lime oil (Citrus hystrix DC.) in the fractional distillation process The Pan African Medical Journal Wikipedia (2015) Eucalyptol 35 PHỤ LỤC Phụ lục Khảo sát áp suất (cột Vig.2) Compound 4.12 a-Thujene 0.98 3.14 4.25 a-Pinene 3.16 9.83 0.07 5.01 p-Pinene 2.46 6.63 0.05 5.21 p-Myrcene 0.35 5.50 a-Phellandrene 5.62 Raw 160 mmHg 60 mmHg Rt (min) No Fl F2 F3 Fl F2 260 mmHg F3 Fl F2 2.32 2.31 1.46 7.88 7.66 0.02 6.01 5.85 0.99 0.86 0.86 0.92 2.27 2.18 3-Carene 0.22 0.79 0.78 0.80 5.74 (X-Terpinene 1.59 3.79 0.09 3.73 3.64 5.89 O-Cymene 1.80 4.88 0.24 0.05 4.41 5.99 D-Limonene 2.16 5.48 0.19 0.89 5.47 10 6.05 Eucalyptol 10.08 24.69 1.32 2.03 24.61 0.25 11 6.60 y-Terpinen 8.68 18.03 2.00 19.87 12 7.24 Terpinolene 8.52 15.49 3.44 13 7.44 p-Linalool 1.25 1.53 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 15 9.51 a-Terpineol 1.87 16 13.57 a-ylangene 0.96 1.72 1.50 2.19 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.76 0.72 0.90 18 14.62 p-Caryophyllene 10.05 19 14.99 a-Guaiene 0.12 20 15.33 a-Caryophyllene 6.15 21 15.79 isoledene 2.18 3.88 22 15.86 a-Amorphene 1.74 3.41 23 16.02 Eremophilene 5.55 24 16.08 Cadinene 2.38 25 16.19 a-Selinene 5.44 26 16.41 p-Cadinene 27 16.72 28 29 0.03 2.13 6.04 0.16 5.66 0.10 24.69 0.48 0.34 18.93 0.95 18.21 0.80 17.55 2.32 0.71 1.65 0.24 1.79 0.41 0.28 0.63 0.37 0.46 0.33 0.73 0.77 2.52 1.00 1.98 0.88 2.82 0.04 17.21 0.01 0.55 2.15 12.00 0.50 0.42 0.03 0.09 18.72 0.78 0.79 0.47 13.52 2.51 3.70 1.79 1.47 3.94 1.95 9.64 5.08 10.39 6.21 4.48 1.29 5.32 10.57 5.91 2.36 4.20 Ỗ-Cadinene 0.59 1.35 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.36 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 1.80 0.63 0.23 0.14 0.09 F3 0.44 0.14 14.63 0.64 1.75 2.38 12.29 3.47 5.20 3.57 0.06 9.64 8.47 2.36 0.01 6.00 4.46 11.80 8.24 0.06 10.43 11.92 2.51 4.49 3.05 4.16 2.99 1.52 1.51 1.65 1.50 3.15 0.45 0.40 0.30 0.33 1.79 2.64 1.95 4.26 2.07 0.08 0.14 2.97 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 1.95 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.36 32 18.20 Guaiol 5.34 4.53 14.41 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.15 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 35 19.01 Agarospirol 36 19.23 37 38 1.81 5.53 3.39 2.02 0.42 0.11 3.60 14.75 2.87 10.20 0.22 0.11 0.68 2.04 13.69 1.21 11.40 1.08 11.10 0.01 0.09 1.20 0.27 1.33 0.04 0.76 p-Eudesmol 2.51 1.50 11.98 1.16 10.86 0.63 4.82 19.28 a-Eudesmol 2.95 2.22 17.28 1.98 15.12 1.08 9.74 19.52 Bulnesol 1.29 0.88 6.94 0.62 6.72 0.40 3.56 Phụ lục Khảo sát áp suất (cột đệm) 160 mmHg 60 mmHg Rt (min) Compound 4.12 a-Thujene 0.98 3.6 4.25 a-Pinene 3.16 11.49 0.17 0.05 7.50 5.01 p-Pinene 2.46 8.5 0.47 0.02 5.21 p-Myrcene 0.35 1.3 5.50 a-Phellandrene 0.92 5.62 3-Carene 5.74 No 260 mmHg Raw Fl F2 F3 Fl F2 F3 Fl F2 2.29 2.26 7.59 0.10 5.75 5.70 0.07 0.07 0.83 0.82 2.92 0.54 2.11 2.05 0.22 1.08 0.14 0.75 0.74 a-Terpinene 1.59 4.6 1.18 3.62 3.51 0.02 5.89 O-Cymene 1.80 2.98 0.10 5.17 5.78 0.25 5.99 D-Limonene 2.16 6.04 2.46 0.05 5.49 5.38 0.09 10 6.05 Eucalyptol 10.08 27.05 10.41 0.36 24.19 0.35 23.58 0.84 11 6.60 y-Terpinen 8.68 16.26 14.77 0.32 19.29 0.47 18.54 0.52 12 7.24 Terpinolene 8.52 11.12 19.53 0.41 18.62 1.13 18.35 0.74 13 7.44 p-Linalool 1.25 0.64 3.17 0.02 1.98 0.30 2.18 0.12 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 1.87 0.01 0.51 0.76 0.73 0.63 15 9.51 (I-Terpineol 1.87 6.41 0.19 1.39 3.45 2.08 3.38 16 13.57 a-ylangene 0.96 2.06 1.60 0.03 3.12 0.07 4.08 0.07 F3 0.02 0.06 0.08 0.18 0.01 0.14 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.89 0.78 18.00 14.62 p-Caryophyllene 10.05 13.02 22.08 19 14.99 a-Guaiene 0.12 0.29 0.74 20 15.33 a-Caryophyllene 6.15 5.50 16.20 21 15.79 isoledene 2.18 1.38 22 15.86 a-Amorphene 1.74 23 16.02 Eremophilene 24 16.08 25 1.34 0.05 24.26 5.31 0.94 0.47 13.97 7.14 5.13 4.27 1.19 4.38 5.55 3.05 Cadinene 2.38 16.19 a-Selinene 26 16.41 27 2.01 0.05 25.68 5.97 1.21 0.28 13.89 8.29 3.10 4.34 3.25 4.00 3.18 4.21 3.19 11.47 9.36 9.02 8.05 9.29 1.57 5.22 5.05 3.82 5.12 4.30 5.44 2.99 12.30 10.12 10.54 9.04 10.96 p-Cadinene 2.36 1.06 4.05 3.87 3.84 2.77 3.06 16.72 S-Cadinene 0.59 0.20 1.58 1.15 1.97 1.39 2.33 28 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.01 0.39 0.26 0.47 29 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 0.18 1.87 1.36 2.84 1.09 2.82 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 0.24 1.88 1.37 3.35 1.13 3.23 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.27 0.14 0.49 0.05 0.58 32 18.20 Guaiol 5.34 2.39 1.81 11.10 1.40 11.05 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.05 0.56 0.57 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 0.76 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 0.41 0.34 7.08 0.22 6.67 37 19.28 a-Eudesmol 2.95 0.59 0.47 9.64 0.34 8.99 38 19.52 Bulnesol 1.29 0.20 0.18 4.37 0.09 4.06 0.34 0.29 0.04 0.37 0.05 0.50 0.68 7.48 7.17 0.33 0.67 0.57 Phụ lục Khảo sát loại cột Packed Compound 4.12 a-Thujene 0.98 1.57 4.25 a-Pinene 3.16 5.09 0.05 7.58 5.01 p-Pinene 2.46 3.94 0.02 5.21 p-Myrcene 0.35 0.60 Raw Fl Vig Vig Rt (min) No F2 F3 Fl F2 F3 Fl Vig F2 F3 3.14 2.29 Fl 2.17 9.83 0.07 1.46 7.87 5.88 6.63 0.05 0.02 5.78 0.87 0.99 g 0.03 F2 0.83 0.01 F3 5.5 aPhellandrene 0.92 1.54 1.86 2.27 2.07 5.62 3-Carene 0.22 0.54 0.75 0.79 0.80 5.74 a-Terpinene 1.59 2.59 3.02 0.01 5.89 O-Cymene 1.80 3.67 0.10 0.16 7.75 0.08 5.99 D-Limonene 2.16 3.86 0.05 0.10 5.49 10 6.05 Eucalyptol 10.08 16.98 0.36 0.48 11 6.6 y-Terpinen 8.68 14.46 0.32 12 7.24 Terpinolene 8.52 14.61 13 7.44 P-Linalool 1.25 14 9.22 Terpinen-4-ol 15 9.51 16 3.79 0.09 0.20 4.88 0.24 0.05 4.26 0.06 0.05 0.19 5.48 0.19 0.89 5.50 0.04 24.40 0.40 2.42 24.69 1.32 2.03 27.21 0.46 0.95 16.85 0.64 0.02 18.03 2.00 20.02 1.01 0.41 2.32 16.49 1.13 15.49 3.44 17.14 2.22 1.86 0.02 0.41 1.88 0.26 1.53 0.71 1.59 0.67 0.43 0.94 0.01 0.73 0.52 0.35 0.28 0.63 0.21 0.67 a-Terpineol 1.87 3.24 0.19 2.82 1.47 1.58 0.77 2.52 0.47 2.72 13.57 a-ylangene 0.96 1.03 1.60 2.19 0.15 1.55 1.72 1.46 17 13.67 a-Copaene 0.18 0.45 0.78 0.90 0.77 0.76 0.79 18 14.62 0Caryophy Ilene 10.05 6.51 22.08 14.63 19 14.99 a-Guaiene 0.12 0.15 0.74 1.75 20 15.33 aCaryophyllene 6.15 2.75 16.20 12.29 21 15.79 isoledene 2.18 0.69 5.13 22 15.86 a-Amorphene 1.74 0.60 4.38 23 16.02 Eremophilene 5.55 1.53 24 16.08 Cadinene 2.38 25 16.19 a-Selinene 26 16.41 27 1.27 0.16 0.17 0.04 17.21 0.01 0.55 2.15 12.00 0.50 16.86 1.39 0.57 0.24 0.50 12.17 2.20 0.05 4.40 1.53 3.88 5.20 0.06 3.58 1.41 3.41 11.47 9.64 0.27 10.02 5.25 0.79 5.22 6.00 0.08 4.43 1.35 5.44 1.50 12.30 10.43 0.27 10.90 6.87 P-Cadinene 2.36 0.53 4.05 4.16 0.03 4.21 16.72 Ỗ-Cadinene 0.59 0.10 1.58 1.50 28 16.78 a-Guijunene 0.01 0.01 0.39 29 16.99 0.88 0.09 30 17.13 1.11 0.12 31 17.53 p-Maaliene 0.11 32 18.2 Guaiol 5.34 33 18.75 y-Selinene 0.18 0.05 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 0.76 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 37 19.28 a-Eudesmol 38 19.52 Bulnesol Guaia-3,9diene Selina3,7(1 l)-diene 3.59 19.65 0.09 0.59 0.01 14.75 0.60 4.27 0.44 1.47 4.02 0.59 9.64 5.08 10.91 2.81 4.48 1.29 5.04 0.79 10.57 5.91 12.04 4.21 1.34 4.20 2.51 4.54 1.36 1.57 1.73 1.35 1.52 1.36 1.02 0.30 0.46 0.22 0.36 0.43 0.27 1.87 1.95 2.13 2.11 1.80 2.07 1.69 1.80 1.88 2.02 2.28 2.92 1.95 2.97 1.71 2.42 0.27 0.11 0.41 0.21 0.36 0.26 0.50 2.39 2.87 5.53 16.80 4.53 14.41 2.34 18.21 0.29 1.14 0.15 0.22 0.08 1.57 1.08 2.85 13.08 2.04 13.69 0.82 14.75 0.04 0.18 1.07 0.09 1.20 0.04 1.73 0.41 0.63 2.08 11.71 1.50 11.98 0.52 14.94 2.95 0.59 1.08 3.12 15.89 2.22 17.28 0.75 19.75 1.29 0.20 0.40 1.24 6.88 0.88 6.94 0.29 9.10 0.17 0.01 0.63 0.23 0.14 0.09 0.20 0.11 0.06 0.01 Phụ lục Khảo sát công suất 150 w 100 w Rt (min) Compound 4.12 a-Thujene 4.25 No 200 w Raw F3 F2 F1 F2 0.98 2.20 0.02 2.28 a-Pinene 3.16 7.93 0.11 8.11 0.04 5.01 p-Pinene 2.46 6.18 0.05 6.27 0.03 5.21 p-Myrcene 0.35 0.84 5.50 a-Phellandrene 0.92 2.17 5.62 3-Carene 0.22 0.86 5.74 a-Terpinene 1.59 3.69 0.06 3.83 0.06 5.89 O-Cymene 1.80 5.08 0.24 4.62 0.16 5.99 D-Limonene 2.16 5.75 0.19 5.80 0.16 10 6.05 Eucalyptol 10.08 27.96 1.15 27.44 0.94 11 6.60 ■y-Terpinen 8.68 19.58 3.21 19.62 12 7.24 Terpinolene 8.52 16.01 7.22 13 7.44 p-Linalool 1.25 1.16 14 9.22 Terpinen-4-ol 0.43 15 9.51 a-Terpineol 1.87 16 13.57 a-ylangene 0.96 3.23 17 13.67 a-Copaene 0.18 18 14.62 p-Caryophyllene 19 14.99 20 F1 F3 2.29 F2 F3 2.28 0.02 8.04 0.04 6.20 0.02 0.89 0.90 0.02 F1 2.26 0.02 0.87 0.02 0.86 3.87 0.05 4.62 0.17 5.77 0.15 0.15 27.90 1.05 0.06 2.17 0.04 19.79 2.47 0.01 16.08 4.33 0.03 15.78 4.84 0.01 2.41 1.24 1.31 1.16 1.27 0.11 2.03 0.12 1.10 0.12 1.02 0.19 7.76 0.19 4.27 0.01 0.18 4.04 0.06 1.96 0.02 1.80 0.02 1.15 10.05 24.81 4.10 21.07 1.29 20.95 1.62 a-Guaiene 0.12 0.81 0.17 0.71 0.04 0.63 0.13 15.33 a-Caryophyllene 6.15 11.83 7.03 13.78 2.86 13.84 3.11 21 15.79 isoledene 2.18 3.36 2.83 4.34 1.30 4.13 1.44 22 15.86 a-Amorphene 1.74 2.65 2.75 3.41 1.40 3.46 1.64 23 16.02 Eremophilene 5.55 6.40 9.14 9.11 5.30 9.33 5.96 24 16.08 Cadinene 2.38 3.08 3.37 4.09 1.64 4.14 1.94 25 16.19 a-Selinene 5.44 6.42 10.74 9.55 6.80 9.93 7.87 26 16.41 p-Cadinene 2.36 2.32 3.67 3.80 1.95 3.80 2.47 27 16.72 S-Cadinene 0.59 0.62 1.85 1.11 1.25 1.05 1.38 28 16.78 a-Gurjunene 0.01 0.18 0.51 0.36 0.37 0.34 0.38 29 16.99 Guaia-3,9-diene 0.88 0.67 2.80 1.38 2.13 1.35 2.26 30 17.13 Selina-3,7(1 l)-diene 1.11 0.63 3.24 1.32 2.67 1.33 2.86 31 17.53 p-Maaliene 0.11 0.07 0.67 0.20 0.55 0.20 0.52 0.01 0.01 1.80 0.01 1.04 11.85 1.77 15.84 1.79 14.37 0.85 0.07 1.33 0.06 1.13 8.12 0.56 12.57 0.61 11.90 0.89 0.03 1.38 0.03 1.15 0.09 7.63 0.29 12.85 0.37 11.95 2.95 0.13 9.65 0.47 15.45 0.56 16.07 1.29 0.04 4.44 0.17 7.30 0.20 6.99 32 18.20 Guaiol 5.34 33 18.75 y-Selinene 0.18 34 18.86 y-Eudesmol 2.58 35 19.01 Agarospirol 0.01 36 19.23 p-Eudesmol 2.51 37 19.28 ot-Eudesmol 38 19.52 Bulnesol 0.62 0.16 Phụ lục Khả kháng oxy hóa phân đoạn Mầu OD1 OŨ2 ODtb % hoạt tính bắt gốc tự DPPH Tinh dầu thơ 0.512 0.479 0.496 35.50 F1 0.722 0.719 0.721 6.24 F2 0.327 0.334 0.331 56.96 F3 0.197 0.184 0.191 75.16 Dung môi 0.764 0.773 0.769 Phụ lục Hoạt tính kháng khuẩn cua F1 chống lại vi khuẩn chọn lọc phương pháp khuếch tán đĩa (A): Fl, (B): Đối chứng âm tính, (C): Đối chứng dương tính - Amoxicillin Phụ lục Hoạt tính kháng khuẩn cua F2 chống lại vi khuẩn chọn lọc phương pháp khuếch tán đĩa (A): F2, (B): Đối chứng âm tính, (C): Đối chứng dương tính - Amoxicillin