Nghiên cứu chưng cất phân đoạn tinh dầu tiêu nâng cao hàm lượng hoạt chất β-caryophyllene

TRƯỜNG ĐẠI HỌC NGUYỄN TÁT THÀNH KHOA KỸ THUẬT THỤC PHẤM VÀ MƠI TRƯỜNG NGUYF2N TAT THANH KHĨA LUẬN TĨT NGHIỆP NGHIÊN CỨU CHƯNG CẤT PHÂN ĐOẠN TINH DẢU TIÊU NÂNG CAO HÀM LƯỢNG HOẠT CHẤT P-CARYOPHYLLENE Phạm Quốc Thắng Tp.HCM, tháng 10 năm 2020 TÓM TẮT Các yếu tố ảnh hướng đến trình chưng cất tinh dầu tiêu đen phương pháp lôi nước khào sát Một số thông so vận hành toi ưu kích thước ngun liệu từ 0.25-0.707mm, cơng suất 200W, nhập liệu 300g chưng cất giờ, thu hiệu suất 3.93% Một số hợp chất chỉnh tinh dầu tiêu /ỉ-caryophyllene (24.28%), D-Limonene (20.76%), 3-carene (20.36%), p-pinene (10.67%) a-pinene (10.12%) Nghiên cứu sừ dụng phương pháp chưng cất phân đoạn chân không nham thu phân đoạn giàu Ị3caryophyllene Phân đoạn gàu p-caryophyllene đạt 75.68% khả khảng oxy hóa vượt trội so với dầu thơ phân đoạn cịn lại MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC TÙ VIẾT TẮT iv DANH MỤC BẢNG V DANH MỤC HÌNH vii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TÓNG QUAN VỀ NGHIÊN cúu 1.1 Tổng quan nguyên liệu ỉ I ỉ Giới thiệu hồ tiêu 1.1.2 Cách trồng hồ tiêu ỉ 1.3 Giới thiệu hạt tiêu đen ỉ 1.4 Giới thiệu tinh dầu tiêu đen 1.2 Tổng quan hoạt chất BCP 1.3 Tổng quan phương pháp chưng cất lôi nước 1.4 Tổng quan phương pháp chưng cất phân đoạn 1.5 Tổng quan phương pháp bắt gốc tự DPPH 1.6 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 10 1.6.1 Tình hình nghiên cứu nước 10 1.6.2 Tình hình nghiên cứu nước 11 Chương TÓNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 13 2.1 Nguyên liệu 13 2.1.1 Nguyên liệu 13 2.1.2 Dụng cụ - thiết bị — hóa chất 13 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu 16 2.2 ỉ Thời gian nghiên cứu 16 i 2.2 Địa điểm nghiên cứu 16 2.3 Phương pháp nghiên cứu 16 2.3.1 Quy trình công nghệ 16 2.4 Sơ đồ nghiên cứu 19 2.5 Bố trí thí nghiệm .20 2.5.1 Khảo sát yếu to ảnh hưởng tới trình chưng cất tinh dầu tiêu 20 2.5.2 Kháo sát ảnh hường so điều kiện chưng cất phân đoạn lên hàm lượng BCP phân đoạn 21 2.5.3 Đánh giả khả khảng oxy hóa cùa tinh dầu tiêu đen trước sau phân đoạn phương pháp DPPH 22 2.6 Phương pháp phân tích 23 2.6.1 Phương pháp đảnh giả cảm quan 23 2.6.2 Phương pháp phân tích định lượng sắc kỉ khí ghép khối phô (GC-MS) 23 2.7 Phương pháp xử lý số liệu 23 2.7 ỉ Xác định khối lượng nguyên liệu khô 23 2.7.2 Xác định khói lượng riêng tinh dầu .23 2.7.3 Xác định hiệu suất thu tinh dầu 24 2.7.4 Xác định độ thu hồi chất 24 2.7.5 Xác định bat gốc tự phương pháp DPPH 25 2.7.6 Xác định khả kháng oxy hóa cùa tỉnh dầu TEAC (trolox equivaent antioxidant capacity) 25 Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 26 3.1 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình chưng cất 26 ỉ Anh hưởng kích thước nguyền liệu 26 3.1.2 Anh hưởng thời gian chưng cat công suất gia nhiệt .26 3.1.3 Anh hưởng the tích nguyên liệu 27 ii 3.2 Các yếu tố ảnh hưởng tới trình chưng cất phân đoạn 28 3.2.1 Thành phần tinh dầu tiêu đen thô 28 3.2.2 Anh hưởng áp suất lên nhiệt độ sôi so hợp chất chỉnh 30 3.2.3 Kháo sát ảnh hưởng áp suất lên hàm lượng BCP sau phân đoạn 31 3.2.4 Khảo sát ảnh hưởng công suất lên hàm lượng BCP sau phân đoạn 40 3.3 Đánh giá khả kháng oxy hóa dầu thô sau phân đoạn 51 Chương KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 54 4.1 Kết iuận 54 4.2 Khuyến nghị 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 56 iii DANH MỤC TÙ VIẾT TẮT ASCK: áp suất chân không BCP: P-caryophyllene IV DANH MỤC BANG Bảng 2.1 Dụng cụ sử dụng nghiên cứu 13 Bảng 2.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 14 Bảng 2.3 Hóa chất sử dụng nghiên cứu 15 Bảng 2.4 Bảng bố trí thí nghiệm nghiên cứu 22 Bảng 3.1 So sánh thành phần tiêu đen thơ so vói so vùng quốc gia 28 Bảng 3.2 Khối lượng phân đoạn ASCK khác 31 Bảng 3.3 Nhiệt độ ASCK 500mmHg 32 Bảng 3.4 Độ thu hồi hợp chất tinh dầu ASCK 500mmHg 32 Bảng 3.5 Nhiệt độ ASCK óOOmmH 34 Bảng 3.6 Độ thu hồi họp chất tinh dầu ASCK óOOmmHg 34 Bảng 3.7 Nhiệt độ ASCK 700mmHg 36 Bảng 3.8 Độ thu hồi họp chất tinh dầu ASCK 700mmHg 36 Bảng 3.9 Nhiệt độ ASCK 745mmHg 38 Bảng 3.10 Độ thu hồi hợp chất tinh dầu ASCK 745mmHg 38 Bảng 3.11 Khối lượng phân đoạn công suất khác cột chưng cất 200mm 40 Bảng 3.12 Ảnh hưởng công suất lên hàm lượng BCP cột chưng cất 200mm 41 Bảng 3.13 Độ thu hồi ciia tinh dầu công suất 230W tháp chưng cất 200mm 43 Bảng 3.14 Khối lượng phân đoạn công suất khác cột chưng cất 300mm 44 Bảng 3.15 Ảnh hưởng ciia công suất lên hàm lượng BCP cột chưng cat 300mm 45 Bảng 3.16 Độ thu hồi tinh dầu công suất 230W tháp chưng cất 300mm 46 V Bảng 3.17 Khối lượng phân đoạn công suất khác cột chưng cất 400mm 48 Bảng 3.18 Ảnh hưởng công suất lên hàm lượng BCP cột chưng cất 400mm 48 Bảng 3.19 Độ thu hồi tinh dầu công suất 230W tháp chưng cất 400mm 50 Bảng 3.20 Khả kháng oxy hóa dầu thô phân đoạn phương pháp DPPH 52 VI DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cây hồ tiêu Hình 1.2 Hạt tiêu đen Hình 1.3 Tinh dầu tiêu đen Hình 1.4 Cấu trúc phân tử p-caryophyllene Hình 2.1 Quy trình chưng cất tinh dầu tiêu đen 16 Hình 2.2 Quy trình chưng cất phân đoạn tinh dầu tiêu đen 17 Hình 2.3 Quy trình phân tích khả kháng oxy hóa phương pháp DPPH 18 Hình 2.4 Bố trí thí nghiệm chưng cất lơi nước 20 Hình 2.5 Bố trí thí nghiêm chưng cất phân đoạn 21 Hình 3.1 Ảnh hưởng kích thước ngun liệu 26 Hình 3.2 Ảnh hưởng cua thời gian chưng cất công suất gia nhiệt 27 Hình 3.3 Ảnh hưởng khối lượng nhập liệu 28 Hình 3.4 Ảnh hưởng ciia áp suất chân không lên nhiệt độ sôi cấu tử 31 Hình 3.5 Độ thu hồi ciia BCP phân đoạn nhiều áp suất 39 Hình 3.6 Hàm lượng cua BCP phân đoạn nhiều áp suất 40 Hình 3.7 Hàm lượng độ thu hồi ciia BCP cột chưng cất 200mm 42 Hình 3.8 Hàm lượng độ thu hồi BCP cột chưng cat 300mm 46 Hình 3.9 Hàm lượng độ thu hồi BCP cột chưng cất 400mm 49 Hình 3.10 Đường cong chuẩn nồng độ Trolox 52 vii MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Hiện nay, nhu cầu sử dụng sản phẩm từ tự nhiên cùa người ngày cao Tinh dầu nhùng báu vật thiên nhiên ban tặng cho chúng ta, đa số thành phần tinh dầu có đặc tính tốt kháng khuẩn, kháng nấm, kháng oxy hóa Tinh dầu sử dụng làm nguyên liệu nhiều lĩnh vực khác thực phẩm, mỳ phẩm, thuốc bảo vệ thực vật Các sản phẩm có xuất tinh dầu đa dạng nước lau sàn, nước rửa tay, nước rửa chén, kem đánh răng, kem dưỡng da, thuốc xịt đuối muồi, thuốc bảo vệ thực vật, thuốc trừ sâu Hiện nhu cầu thị trường sử dụng sản phẩm tự nhiên ngày gia tăng dầu hay tinh dầu tự nhiên để làm đẹp trọng Với thành phần kháng khuẩn, kháng nấm, kháng oxy hóa, ức chế ung thư nên tinh dầu tiêu đen ngày sử dụng phố biến Hoạt chất p-caryophyllene (BCP) có nhiều tính chất ưu việt khả chống trùng có the áp dụng vào mỹ phàm, hoạt chất trao đối có lợi cho việc giảm tích lũy lipid tế bào mờ, cải thiện hoạt động hấp thu glucose tế bào mơ áp dụng cho dược phẩm Hàm lượng BCP tinh dầu tiêu nhiều so với nhùng loại tinh dầu thực vật khác Tuy nhiên tinh dầu tiêu đen thành phần BCP chưa cao, để ứng dụng vào mỹ phẩm dựa đặc tính tot cùa BCP, cần phải nâng cao hàm lượng BCP tinh dầu tiêu đen Tinh dầu tiêu đen có hàm lượng BCP cao sè chất tự nhiên hữu hiệu để sản xuất loại mỳ phẩm chăm sóc bảo vệ da, chống loại côn trùng nguy muồi Đồng thời tinh dầu tiêu đen có hàm lượng BCP làm tăng giá trị tinh dầu tiêu đen truyền thống tăng thu nhập cho doanh nghiệp sản xuất Với mục đích tăng hàm lượng BCP tinh dầu tiêu, chưng cất phân đoạn phương pháp hữu ích Đe nâng cao giá trị hạt tiêu đen, chọn đề tài “Nghiên cứu chưng cất phân đoạn tinh dầu tiêu đe nâng cao hàm lượng hoạt chất Pcaryophyllene” đe thực q trình nghiên cứu khóa luận tốt nghiệp thân Mục tiêu nghiên cứu 4.2 Khuyến nghị Do hạn che thời gian kinh phí nên đề tài chưa sâu vào nghiên cứu đầy đủ trình chưng cất phân đoạn Qua q trình thực nghiệm, tơi có số khuyến nghị sau: - Khảo sát trình phân đoạn với công suất cao hơn; - Khảo sát trình phân đoạn tinh dầu tháp đệm; - Khảo sát ảnh hưởng khối lượng nhập liệu lên thành phần khối lượng sản phấm phân đoạn; - Chưng cất phân đoạn tinh dầu thơ có nước; - Đánh giá hoạt tính kháng khuân tinh dầu thô sau phân đoạn - Phát triển sản phẩm mỹ phẩm từ phân đoạn sau nghiên cứu 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO Abate, w (2018) Optimization and Characterization of Essential Oil from Black Pepper (Nigrum) seed and Leave Using Steam Distillation for Cosmetics Application Process Addis Ababa University, Ethiopia Alam, p N., Husin, H., Asnawi, T M., & Adisalamun (2018) Extraction of citral oil from lemongrass (Cymbopogon Citratus) by steam-water distillation technique IOP Conference Series: Materials Science and Engineering, 345(1), 012-022 Andriana, Y., Xuan, T D., Quy, T N., Tran, H D., & Le, Q T (2019) Biological Activities and Chemical Constituents of Essential Oils from Piper cubeba Bojer and Piper nigrum L Molecules, 24(10), 1876 Brand-Williams, w., Cuvelier, M.-E., & Berset, c (1995) Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity LWT-Food Science and Technology, 28(1), 2530 Calleja, M A., Vieites, J M., Montero-Meterdez, T., Torres, M I., Faus, M J., Gil, A., & Suarez, A (2012) The antioxidant effect of p-caryophyllene protects rat liver from carbon tetrachloride-induced fibrosis by inhibiting hepatic stellate cell activation British Journal of Nutrition, 109(03), 394-401 Dahham, s., Tabana, Y., Iqbal, M., Ahamed, M., Ezzat, M., Majid, A., & Majid, A (2015) The Anticancer, Antioxidant and Antimicrobial Properties of the Sesquiterpene p-Caryophyllene from the Essential Oil of Aquilaria crassna Molecules, 20(7), 11808-11829 De Souza, s p., Valverde, s s., Costa, N F., Calheiros, A s., Lima, K s., Frutuoso, V s., & Lima, A L (2014) Chemical composition and antinociceptive activity of the essential oil of Piper mollicomum and Piper rivinoides Journal of Medicinal Plants Research, 8(22), 788-793 Deng, Y., Sriwiriyajan, s., Tedasen, A., Hiransai, p., & Graidist, p (2016) Anti-cancer effects of Piper nigrum via inducing multiple molecular signaling in vivo and in vitro Journal of ethnopharmacology, 188, 87-95 Dilworth, L., Riley, c., & Stennett, D (2017) Plant Constituents: Carbohydrates, oils, resins, balsams, and plant hormones In Pharmacognosy (pp 61-80): Elsevier Diwekar, u., & Kim, K.-J (2005) Batch Distillation In Batch processes (pp 107-150) Dorman, H D., & Deans, s G (2000) Antimicrobial agents from plants: antibacterial activity of plant volatile oils Journal of applied microbiology, 88(2), 308-316 Farah, A., Afifi, A., Fechtal, M., Chhen, A., Satrani, B., Taibi, M., & Chaouch, A (2006) Fractional distillation effect on the chemical composition of Moroccan myrtle (Myrtus communis L.) essential oils Flavour fragrance Journal 21(2), 351-354 Ferreira, s R., Nikolov, z L., Doraiswamy, L., Meireles, M A A., & Petenate, A J (1999) Supercritical fluid extraction of black pepper (Piper nigrun L.) essential oil The Journal of Supercritical Fluids, 14(3), 235-245 56 Fidyt, K., Fiedorowicz, A., Strzqdala, L., & Szumny, A (2016) p-caryophyllene andpcaryophyllene oxide-natural compounds of anticancer and analgesic properties Cancer Medicine, 5(10), 3007-3017 Fitriady, M A., Sulaswatty, A., Agustian, E., Salahuddin, & Aditama, D p F (2017) Steam distillation extraction of ginger essential oil: Study of the effect of steam flow rate and time process Paper presented at the AIP Conference Proceedings Huệ, N T., Khang, T M., Sơ, N T H., & Thuyền, N T B (2012) Khảo sát thành phần hóa học hoạt tính kháng vi sinh vật tinh dâu gừng (Zingiber Officinale Roscoe) tinh dâu tiêu (Piper Nigrum L.) Tạp chí Khoa học 2012, 2la, 139143 Huong, L T., Hung, N H., Dai, D N., Tai, T A., Hien, V T., Satyal, p., & Setzer, w N (2019) Chemical Compositions and Mosquito Larvicidal Activities of Essential Oils from Piper Species Growing Wild in Central Vietnam Molecules, 24(21), 1-30 Jeena, K., Liju, V B., ưmadevi, N p., & Kuttan, R (2014) Antioxidant, Anti­ inflammatory and Antinociceptive Properties of Black Pepper Essential Oil (Piper nigrum Linn) Journal of Essential Oil Bearing Plants, 17(1), 1-12 Kedare, s B., & Singh, R (2011) Genesis and development of DPPH method of antioxidant assay Journal of food science and technology, 48(4), 412-422 Kister, H z., Haas, J R., Hart, D R., & Gill, D R (1992) Distillation design (Vol 1): McGraw-Hill New York Klauke, A.-L., Racz, I., Pradier, B., Markert, A., Zimmer, A., Gertsch, J., & Zimmer, A (2014) The cannabinoid CB2 receptor-selective phytocannabinoid beta­ caryophyllene exerts analgesic effects in mouse models of inflammatory and neuropathic pain European Neuropsychopharmacology, 24(4), 608-620 Lee, J.-G., Chae, Y., Shin, Y., & Kim, Y.-J (2020) Chemical composition and antioxidant capacity of black pepper pericarp Applied Biological Chemistry, 63(1), 1-9 Legault, J., & Pichette, A (2007) Potentiating effect of b-caryophyllene on anticancer activity of a-humulene, isocaryophyllene and paclitaxel Journal of Pharmacy and Pharmacology, 59(12), 1643-1647 Majdalawieh, A F., & Carr, R I (2010) In vitro investigation of the potential immunomodulatory and anti-cancer activities of black pepper (Piper nigrum) and cardamom (Elettaria cardamomum) Journal of Medicinal Food, 13(2), 371-381 Menon, A N., & Padmakumari, K p (2005) Essential Oil Composition of Four Major Cultivars of Black Pepper (Piper nigrumL.)—IV Journal of Essential Oil Research, 17(2), 206-208 Minh, p N., Chí, M T., Trung, p V., Đạt, B T., & Hạnh, N N (2006) Khảo sát thành phần hóa học tinh dầu tiêu (Piper Nigrum L.) chiết xuất phương pháp carbon dioxide lỏng siêu tới hạn Tạp chí Nghiên cứu Khoa học, 6, 97-102 Mujtaba, I M (2004) Batch distillation: Design and operation (Vol 3): World Scientific Publishing Company 57 Munakata, M., Kobayashi, K., Niisato-Nezu, J., Tanaka, s., Kakisaka, Y., Ebihara, T., Onuma, A (2008) Olfactory stimulation using black pepper oil facilitates oral feeding in pediatric patients receiving long-term enteral nutrition The Tohoku journal of experimental medicine, 214(4), 327-332 Nikolic, M., Stojkovic, D., Glamoclija, J., Ciric, A., Markovic, T., Smiljkovic, M., & Sokovic, M (2015) Could essential oils of green and black pepper be used as food preservatives? Journal of food science and technology, 52(10), 6565-6573 Orav, A., Stulova, I., Kailas, T., & Mủủrisepp, M (2004) Effect of storage on the essential oil composition of Piper nigrum L fruits of different ripening states Journal of Agricultural and Food Chemistry, 52(9), 2582-2586 Pino, J., Rodriguez - Feo, G., Borges, p., & Rosado, A (1990) Chemical and sensory properties of black pepper oil (Piper nigrum L.) Food/Nahrung, 34(6), 555-560 Prado, J M., Vardanega, R., Debien, I c., de Almeida Meireles, M A., Gerschenson, L N., Sowbhagya, H B., & Chemat, s (2015) Conventional extraction, in Food Waste Recovery (pp 127-148): Elsevier Prakash, A., Rigelhof, F., & Miller, E (2001) Antioxidant activity, Medallion Laboratories Analytical Progress Minnesota, 19(2), Ravindran, p., & Kallupurackal, J A (2012) Black pepper In Handbook of herbs and spices (Vol 8, pp 86-115): Elsevier Rose, J E., & Behm, F M (1994) Inhalation of vapor from black pepper extract reduces smoking withdrawal symptoms Drug and alcohol dependence, 34(3), 225-229 Salehi, B., Zakaria, z A., Gyawali, R., Ibrahim, s A., Rajkovic, J., Shinwari, z K., & Setzer, w N (2019) Piper Species: A comprehensive review on their phytochemistry, biological activities and applications Molecules, 24(7), 1-117 Santos-Sanchez, N F., Salas-Coronado, R., Villanueva-Canongo, c., & HernandezCarlos, B (2019) Antioxidant compounds and their antioxidant mechanism In Antioxidants: IntechOpen Silvestre, w p., Agostini, F., Muniz, L A R., & Pauletti, G F (2016) Fractionating of green mandarin ( Citrus deliciosa Tenore) essential oil by vacuum fractional distillation Journal of Food Engineering, 178, 90-94 Silvestre, w p., Medeiros, F R., Agostini, F., Toss, D., & Pauletti, G F (2019) Fractionation of rosemary (Rosmarinus officinalis L.) essential oil using vacuum fractional distillation Journal of food science and technology, 56(12), 5422-5434 Singh, G., Marimuthu, p., Catalan, c., & DeLampasona, M (2004) Chemical, antioxidant and antifungal activities of volatile oil of black pepper and its acetone extract Journal of the Science of Food and Agriculture, 84(14), 1878-1884 Tambe, Y., Tsujiuchi, H., Honda, G., Ikeshiro, Y., & Tanaka, s (1996) Gastric Cytoprotection of the Non-Steroidal Anti-Inflammatory Sesquiterpene, pCaryophyllene Planta medica, 62(5), 469-470 Tran, T H., Ha, L K., Nguyen, D c., Dao, T p., Nhan, L T H., Nguyen, D H., Bach, L G (2019) The Study on Extraction Process and Analysis of 58 Components in Essential Oils of Black Pepper (Piper nigrum L.) Seeds Harvested in Gia Lai Province, Vietnam Processes, 7(2), 15 Widayat, M H H., Nurdiana, L., Hadiyanto, N., Cahyono, B., & Satriadi, H (2013) Fractional distillation of clove oil at vacuum pressure Paper presented at the International Conference on Education, Technology, and Science Zhang, J., Ye, K.-P., Zhang, X., Pan, D.-D., Sun, Y.-Y., & Cao, J.-X (2017) Antibacterial Activity and Mechanism of Action of Black Pepper Essential Oil on Meat-Borne Escherichia coli Frontiers in Microbiology, 7, 1-10 59 PHỤ LỤC A - SẮC KÝ ĐỒ TINH DẦU THÔ PHỤ LỤC B - SẮC KÝ ĐÒ PĐ NHẸ ASCK 500mmHg PHỤ LỤC c - SẮC KÝ ĐỒ PĐ NẶNG ASCK SOOmmHg PHỤ LỤC D - SẮC KÝ ĐỒ PĐ NHẸ ASCK óOOmmHg PHỤ LỤC E - SẮC KÝ ĐỒ PĐ NẶNG ASCK óOOmmHg PHỤ LỤC F - SẮC KÝ ĐÒ PĐ NHẸ ASCK 700mmHg PHỤ LỤC G - SẮC KÝ ĐỊ PĐ TRUNG BÌNH ASCK 700mmHg RT 0.00 27.61 NL 3.62E6 TỈC MS AÙ5 14.62 -1—I 1—I 1—I i 1‘ 10 12 J 'TX V 'I JI 5?I I I I I I I I 19:I49 I I I I I I I I I I I I 14 16 16 20 22 24 Timc(rnn) PHỤ LỤC H - SẮC KÝ ĐỒ PĐ NẶNG ASCK 700mmHg PHỤ LỤC I - SẮC KÝ ĐÒ PĐ NHẸ ASCK 745mmHg 26 I I I PHỤ LỤC J - SẮC KÝ ĐỒ PĐ TRUNG BÌNH ASCK 745mmHg PHỤ LỤC K - SẮC KÝ ĐÒ PĐ NẶNG ASCK 745mmHg PHỤ LỤC L - SẮC KÝ ĐÒ PĐ NẶNG 100W CỘT 200mm PHỤ LỤC M - SẮC KÝ ĐỒ PĐ TRUNG BÌNH 130W CỘT 200mm PHỤ LỤC N - SẮC KÝ ĐÒ PĐ TRUNG BÌNH 160W CỘT 200mm RT 0.00 27.50 NL 9.aaEa TIC MS A18 14 63 100-3 « 40-ị 20-ị 10-: 15.33 13.67 J I ,