NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT

Tế bào động vật tách từ mô có thể được nuôi cấy trên các loại môi trường dinh dưỡng tổng hợp bên ngoài cơ thể, chúng sinh trưởng bằng cách tăng số lượng và kích thước tế bào. Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật đã tạo cơ hội để nghiên cứu các tế bào ung thư, phân loại các khối u ác tính, mô hình thực nghiệm để khảo sát tác động của hóa chất, xác định sự tương hợp của mô trong cấy ghép và nghiên cứu các tế bào đặc biệt cùng sự tương tác của chúng. Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật có vú có thể được ứng dụng để sản xuất các hợp chất hóa sinh quan trọng dùng trong chẩn đoán như các hormone sinh trưởng của người, interferon, hoạt tố plasminogen mô, các viral vaccine và các kháng thể đơn dòng. Theo phương pháp truyền thống các hợp chất hóa sinh này được sản xuất bằng cách sử dụng các động vật sống hoặc được tách chiết từ xác người chết. Chẳng hạn, các kháng thể đơn dòng có thể được sản xuất bằng cách nuôi cấy các tế bào hybridoma trong các khoang màng bụng (peritoneal cavity) của chuột, hoặc hormone sinh trưởng dùng để chữa bệnh còi (dwarfism) có thể được tách chiết từ xác người chết. Một vài sản phẩm gen của động vật có vú cũng có thể được sản xuất bởi công nghệ DNA tái tổ hợp. Ngày nay với sự phát triển của khoa học kỹ thuật nên công nghệ nuôi cấy tế bào động vật ngày càng được phát triển và ứng dụng rộng rãi trong rất nhiều lĩnh vực tuy nhiên lĩnh vực y tế được ứng dụng nhiều nhất, giúp cải thiện sức khỏe và chữa trị một số bệnh. Bài tiểu luận này sẽ giúp tìm hiểu sơ lược về các kỹ thuật cũng như ứng dụng của chúng trong y tế.

BỘ CÔNG THƯƠNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HỒ CHÍ MINH KHOA CƠNG NGHỆ SINH HỌC & KT MÔI TRƯỜNG NUÔI CẤY TẾ BÀO ĐỘNG VẬT GIẢNG VIÊN hướng dẫn: Phạm Minh Tuấn SINH VIÊN thực hiện: Nguyễn Thị Vân An 2008100094 Nguyễn Thị Hồng Gấm 2008100022 Đoàn Thị Nhựt Lan 2008100063 Nguyễn Thị Diễm Kiều 2008100223 Nguyễn Kim Tuyền 2008100166 LỚP: 01DHSH2 Tp HCM, ngày 21 tháng 10 năm 2012 MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU NỘI DUNG KẾT LUẬN .19 TÀI LIỆU THAM KHẢO 20 LỜI MỞ ĐẦU Tế bào động vật tách từ mơ ni cấy loại mơi trường dinh dưỡng tổng hợp bên ngồi thể, chúng sinh trưởng cách tăng số lượng kích thước tế bào Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật tạo hội để nghiên cứu tế bào ung thư, phân loại khối u ác tính, mơ hình thực nghiệm để khảo sát tác động hóa chất, xác định tương hợp mơ cấy ghép nghiên cứu tế bào đặc biệt tương tác chúng Kỹ thuật nuôi cấy tế bào động vật có vú ứng dụng để sản xuất hợp chất hóa sinh quan trọng dùng chẩn đoán hormone sinh trưởng người, interferon, hoạt tố plasminogen mô, viral vaccine kháng thể đơn dòng Theo phương pháp truyền thống hợp chất hóa sinh sản xuất cách sử dụng động vật sống tách chiết từ xác người chết Chẳng hạn, kháng thể đơn dịng sản xuất cách nuôi cấy tế bào hybridoma khoang màng bụng (peritoneal cavity) chuột, hormone sinh trưởng dùng để chữa bệnh cịi (dwarfism) tách chiết từ xác người chết Một vài sản phẩm gen động vật có vú sản xuất công nghệ DNA tái tổ hợp Ngày với phát triển khoa học kỹ thuật nên công nghệ nuôi cấy tế bào động vật ngày phát triển ứng dụng rộng rãi nhiều lĩnh vực nhiên lĩnh vực y tế ứng dụng nhiều nhất, giúp cải thiện sức khỏe chữa trị số bệnh Bài tiểu luận giúp tìm hiểu sơ lược kỹ thuật ứng dụng chúng y tế NỘI DUNG I Tế bào động vật: Các tế bào động vật tế bào eukaryote, chúng liên kết với nguyên liệu gian bào để tạo thành mô Mơ động vật thường phân chia theo bốn nhóm: biểu mô (epithelium), mô liên kết (connective tissue), mô (muscle) mô thần kinh (nerve) Gồm kiểu tế bào: Tế bào dịch huyền phù (tế bào bạch huyết), tế bào dính bám (tế bào biểu mơ, ngun bào sợi) Hình 6.1 Các tế bào động vật thường sử dụng nuôi cấy (a) tế bào bạch huyết, (b) tế bào biểu mô, (c) nguyên bào sợi  Phương pháp xác định tế bào để nuôi cấy: Đầu tiên, tách mảnh mô điều kiện vô trùng  Đem xử lí với enzyme proteasa (thường trypsin): enzyme cắt mô tách tế bào rời  Đem cấy dịch tế bào vào môi trường dinh dưỡng lỏng thích hợp II Các ưu điểm hạn chế nuôi cấy tế bào động vật: a Ưu điểm: - Hệ thống tế bào động vật “nhà máy tế bào” thích hợp cho việc sản xuất phân tử phức tạp kháng thể dùng làm thuốc phịng bệnh, điều trị chẩn đốn (Bảng 6.1) - Các tế bào động vật đáp ứng q trình hậu dịch mã xác sản phẩm protein sinh-dược (biopharmaceutical) - Sản xuất viral vector dùng liệu pháp gen (biến nạp gen bình thường vào tế bào soma mang gen tương ứng bị khiếm khuyết để chữa bệnh khiếm khuyết gây ra) Các mục đích liệu pháp bệnh ung thư, hội chứng suy giảm miễn dịch (HIV), chứng viêm khớp, bệnh tim mạch xơ hóa u nang - Sản xuất tế bào động vật để dùng làm chất in vitro nghiên cứu độc chất học dược học - Phát triển công nghệ mô phát sinh quan để sản xuất quan thay nhân tạo-sinh học/các dụng cụ trợ giúp, chẳng hạn: + Da nhân tạo để chửa bỏng + Mô gan để chữa bệnh viêm gan + Đảo Langerhans để chữa bệnh tiểu đường Bảng 6.1: Các sản phẩm nuôi cấy tế bào động vật Nhóm I Enzyme Urokinase, hoạt tố plasminogen mô (t-PA) Hormone Hormone sinh trưởng (GH) Các nhân tố sinh trưởng Các cytokine khác Bệnh dại, bệnh quai bị, bệnh sởi người… Nhóm II Vaccine Nhóm III Kháng thể đơn dịng Các cơng cụ chuẩn đốn Nhóm IV Virus trùng Thuốc trừ sâu sinh học cho Baculovirus Nhóm V Các chất điều hịa miễn dịch Interferon interleukin Nhóm VI Các tế bào nguyên vẹn Thử nghiệm độc chất học Veterinary-FMD vaccine, New Cattle’s Disease b Hạn chế: - Các tế bào động vật có kích thước lớn cấu trúc phức tạp tế bào vi sinh vật - Tốc độ sinh trưởng tế bào động vật chậm so với tế bào vi sinh vật Vì thế, sản lượng chúng thấp việc trì điều kiện nuôi cấy vô trùng thời gian dài thường gặp nhiều khó khăn - Các tế bào động vật bao bọc màng huyết tương, mỏng nhiều so với thành tế bào dày thường thấy vi sinh vật tế bào thực vật, kết chúng dễ bị biến dạng vỡ - Nhu cầu dinh dưỡng tế bào động vật chưa xác định cách đầy đủ, mơi trường ni cấy thường địi hỏi bổ sung huyết máu đắt tiền - Tế bào động vật phần mô tổ chức (phân hóa) thể đơn bào riêng biệt vi sinh vật - Hầu hết tế bào động vật sinh trưởng gắn bề mặt III Môi trường nuôi cấy: Môi trường dinh dưỡng tốt điều kiện hàng đầu cho tăng trưởng sinh sản tế bào tách mô khỏi thể, động vật không trao đổi chất nitrogen vơ Vì thế, nhiều amino acid vitamin cần phải bổ sung vào môi trường Môi trường đặc trưng dùng nuôi cấy tế bào động vật bao gồm amino acid, vitamin, hormone, nhân tố sinh trưởng, muối khống glucose Trong đó, huyết môi trường cần thiết cho phát triển tồn tế bào nuôi cấy huyết có thành phần chưa xác định đầy đủ Tuy nhiên, chúng lại mắc nguồn nhiễm bẩn virus mycoplasma, số trường hợp diện nhiều protein khác huyết gây khó khăn cho q trình phân tách tinh đầu Huyết thanh: + Cung cấp chất dinh dưỡng quan trọng cho tế bào amino acid thiết yếu, tiền chất acid nucleic, nguyên tố vi lượng + Cung cấp nhân tố tăng trưởng, kích thích cho tế bào tăng trưởng phân chia + Kích thích hồi phục tổn thương sau tách tế bào khỏi mô hay khỏi bề mặt dụng cụ nuôi cấy + Cải thiện tính tan chất dinh dưỡng + Chống oxy hoá khử tế bào mức cho phép Trong huyết có khả chống oxy hố (acid ascorbic, H 2SeO3) để đảm bảo oxy hoá khử tế bào Phân loại: Môi trường nuôi tự nhiên: dịch huyết tương, cục máu đông, nước ối bào thai, dịch chiết phôi Môi trường nuôi tổng hợp: Thành phần chủ yếu thiếu môi trường huyết tương máu (chiếm 5-10%) Thành phần bản: dung dịch sinh lí hay dung dịch muối cân Môi trường Eager thường sử dụng nhiều nuôi cấy tế bào động vật Bảng: Thành phần môi trường Eager (1959) Thành phần Nồng độ (mg/l) L-Amino acid Arginine 105 Cystine 24 Glutamine 292 Histidine 31 Isoleucine 52 Leucine 52 Lysine 58 Methionine 15 Phenylalanine 32 Threonine 48 Tryptophan 10 Tyrosine 36 Valine 46 Carbohydrate Glucose 1000 Serum 5-10% IV Thành phần Nồng độ (mg/l) Vitamin Choline Folic acid Inositiol Nicotinamide Pantothenate Pyridoxal Riboflavin 0,1 Thiamine Muối NaCl 6800 KCl 400 CaCl2 200 MgCl2.6H2O 200 NaH2PO4 2H2O NaHCO3 150 2000 Kỹ thuật nuối cấy tế bào động vật: Phương pháp ni cấy tế bào động vật có vú để sản xuất sản phẩm sinh-dược dựa sở nuôi cấy dịch huyền phù hệ lên men Tuy nhiên, nuôi cấy tế bào động vật thực vật khó khăn nhiều so với vi sinh vật, trình trao đổi chất loại tế bào diễn chậm, điều phản ánh tốc độ sinh trưởng chậm tế bào Các tế bào động vật có nhu cầu dinh dưỡng phức tạp so với vi khuẩn nấm men, chúng khơng có thành tế bào vi khuẩn dễ biến dạng vỡ Do đó, hệ thống khuấy sục khí thiết kế khác với nuôi cấy vi khuẩn Đặc điểm dễ biến dạng dễ vỡ tế bào động vật khắc phục cách: Sử dụng hệ lên men có cánh khuấy hình mái chèo Cung cấp khí trực tiếp tạo bọt khí dễ làm vỡ tế bào, cần cung cấp khí cách khuếch tán thông qua ống silicone Môi trường chứa nhiều protein huyết có khả gây tượng tạo bọt nên cần khuấy chậm nhẹ Đối với nuôi cấy mật độ cao, cần cung cấp thêm oxygen Như hệ lên men vi sinh vật cải tiến thích hợp dùng để ni cấy sinh khối tế bào động vật sinh trưởng dịch huyền phù Nếu muốn ni cấy dịng tế bào dính bám nên dùng hệ thống chất mang microcarrier Các dịng tế bào động vật có vú thường sử dụng nuôi cấy CHO (Chinese hamster ovary: tế bào buồng trứng chuột đồng Trung Quốc), NS0 (Mouse myeloma: tế bào u tủy chuột), BHK (Baby hamster kidney: tế bào thận chuột đồng sơ sinh), HEK - 293 (Human embryo kidney: tế bào thận phôi người) tế bào võng mạc người Sơ đồ nuôi cấy: V Ứng dụng nuôi cấy tế bào động vật: Sản xuất Interferon: Interferon nhóm protein tự nhiên sản xuất tế bào hệ miễn dịch hầu hết động vật nhằm chống lại tác nhân ngoại lai virus, vi khuẩn, kí sinh trùng tế bào ung thư Nó tổng hợp có mặt chất sinh interferon (cịn gọi interferonogen) Interferon thuộc lớp lớn glycoprotein biết đến tên cytokine (chất hoạt hoá tế bào) Interferon đóng vai trị quan trọng cửa ngõ miễn dịch, hàng rào bảo vệ thể chống lại virus phát triển bất thường tế bào Nó phần hệ thống miễn dịch không đặc hiệu (nonspecific immune system) kích hoạt giai đoạn đầu q trình cảm nhiễm trước hệ miễn dịch đặc hiệu (specific immune system) có thời gian để phản ứng Cần phân biệt interferon nội sinh sinh thể interferon ngoại sinh ni cấy tế bào ngồi thể Muốn có 40mg Interferon tinh khiết, người ta phải dùng 2.000 trứng gà để chiết xuất Trong ấy, công nghệ sinh học lên men nuôi cấy tế bào E.coli tái tổ hợp cần lít mơi trường ni cấy Vai trị Interferon Nhìn chung, Interferon có hoạt tính sau: - Kháng virus - Điều hòa miễn dịch - Chống tăng sinh khối - Kích thích biệt hóa tế bào - Điều hòa sinh trưởng tế bào - Giải độc - Kháng đột biến Dạng gồm IFN IFN sản xuất từ tế bào nhiễm virus Dạng thứ hai interferon tiết từ tế bào T hoạt hoá Các IFN γ tạo đối kháng chống lại trình nhiễm virus tế bào khơng bị nhiễm Ngồi ra, IFN cịn kiểm tra tương tác lympho tế bào gây độc tế bào bị nhiễm 10 + Interferon alpha beta sản sinh nhiều loại tế bào bao gồm tế bào T, B, đại thực bào, nguyên bào xơ, tế bào màng trong, nguyên bào xương loại khác Chúng có đặc tính kháng vi rút đặc tính kháng ung thư Chúng kích thích đại thực bào tế bào NK + Interferon gamma có liên quan đến điều hòa miễn dịch phản ứng viêm Ở người có loại Interferon gamma Nó sản sinh tế bào T hoạt động tế bào NK Interferon gamma có vài tác dụng kháng vi rút kháng ung thư tác dụng yếu Do vậy, Interferon gamma không sử dụng để điều trị ung thư Công dụng Interferon-alfa: IFN-α sử dụng điều trị đa hồng cầu sau có chứng cho thấy hiệu thuốc điều trị loại bệnh tăng sinh tủy ác tính khác bệnh lơxêmi kinh dịng hạt IFN-α có tác dụng ức chế tủy xương nên gây giảm hematocrit, số lượng tiểu cầu bạch cầu máu ngoại vi Ưu điểm thuốc tác dụng trì sau ngưng dùng thuốc không gây chuyển dạng thành ung thư máu khơng gây đột biến gen, sử dụng cho bệnh nhân trẻ tuổi, IFN-α khơng qua thai nên dùng phụ nữ có thai Một nhược điểm quan trọng IFN-α đắt tiền Interferon alpha tái tổ hợp sử dụng lĩnh vực điều trị bệnh như: viêm gan siêu vi B, C, bệnh hủi, leishmaniasis, toxoplasmosis, bệnh ung thư u hắc tố (melanoma) u bướu thịt Kaposi (Kaposi’s sarcoma)… Melanoma (Ung thư da) 11 Bệnh hủi Công dụng IFN gama: Điều trị bệnh viên gan C Điều trị bệnh nhân HIV/AIDS: dùng kết hợp IFN với thuốc trị HIV (AZT) gia tăng hiệu kháng virus IFN γ vũ khí hữu hiệu điều trị cúm A/H5N1 Sản xuất virus vaccine: Các vaccine virus sản xuất từ tế bào động vật ni cấy đóng góp vơ giá vào cải thiện Y tế cộng đồng toàn giới, điển hình hiệu ngừa bệnh đậu mùa ho gà, lao, sởi, bạch hầu, uốn ván, chứng bại liệt trẻ em Trong lĩnh vực thú y: vacxin lở mồm long móng cho súc vật ni, vacxin phịng dại,… Cịn gọi vaccine DNA tái tổ hợp, loại nucleic acid vaccine, dựa nguyên lý gen mã hóa cho protein kháng nguyên đặc hiệu tiêm vào vật chủ (tế bào động vật vi sinh vật) để sản xuất kháng nguyên khởi động phản ứng miễn dịch Nhiều vaccine phòng virus (sởi, tê liệt, dại…) sản xuất từ nuôi cấy tế bào động vật mà tế bào vi sinh vật Để sản xuất vaccine, người ta cho nhiễm nhân virus tế bào để đạt mật độ tối đa Sau virus trích ly xử lý tác nhân gây bất hoạt formaldehyde trước sử dụng làm vaccine Nguyên tắc: - Chọn dòng tế bào thích ứng với virus - Phân lập nhân virus tế bào - Thu hoạch dịch tế bào nhiễm virus - Bất hoạt virus từ dịch tế bào 12 - Làm tinh virus thu siêu li tâm - Sử dụng virus làm vaccine Hình minh họa mơ hình sản xuất điều trị liệu pháp vaccine virus Phân lập nhiều gen từ tác nhân gây bệnh (pathogen), đưa gen vào vịng DNA plasmid đóng lại (a) Các vịng DNA sau đưa vào nhóm tế bào nhỏ, thường cách tiêm vào tế bào (b) đẩy vào da nhờ súng bắn gen (c) Các gen chọn lựa mã hóa cho kháng nguyên, chất gây đáp ứng miễn dịch, thường sản xuất tác nhân gây bệnh Một số virus vaccine: Vaccine ngừa viêm gan B (Được sản xuất dòng tế bào ung thư gan người) Vaccine ngăn chặn HIV Vaccine ngừa bệnh dại Vaccine ngừa bệnh cúm A/H5N1 (được sản xuất tế bào thận khỉ) Vaccine chống lở mồm long móng gia súc (được sản xuất te bào thận chuột) Sản xuất protein tái tổ hợp – Chất kích hoạt plasminogen mơ t-PA: 13 Hoạt tố plasminogen mô t-PA tổng hợp nuôi cấy tế bào động vật có vú chuyển gen t-PA protease có tác dụng phân hủy sợi tơ huyết fibrin (dạng hoạt hóa protein gây đơng máu fibrinogen13, protein không tan đông kết thành sợi để hình thành cục máu đơng) sử dụng để chữa bệnh nghẽn mạch máu Bệnh nhân bị đau tim thường uống t-PA phá tan cục máu nhỏ có khả làm tắc mạch Các nghiên cứu gần cho thấy sử dụng tuyến sữa động vật chuyển gen để sản xuất protein người Chẳng hạn, gen t-PA đưa vào phôi chuột công nghệ DNA tái tổ hợp, sau phơi chuột cấy vào chuột tạo thành chuột chuyển gen có khả tiết t-PA người qua sữa Sản xuất kháng thể đơn dịng – Chuẩn đốn ung thư: Nghiên cứu kháng thể đơn dịng Q trình hình thành kháng thể hệ miễn dịch ứng dụng nhiều lĩnh vực y học: - Các dạng thuốc vaccine kháng nguyên đưa vào thể để tạo kháng thể mong muốn giúp phòng ngừa bệnh tật - Rất nhiều xét nghiệm chẩn đoán dựa hình thành phức hợp kháng nguyên – kháng thể - Trong điều trị số bệnh lý, việc đưa trực tiếp huyết chứa kháng thể giúp tạo miễn dịch tạm thời đưa dần lượng nhỏ kháng nguyên vào 14 thể giúp thể quen dần với hình thành kháng thể liệu pháp giảm mẫn cảm bệnh nhân dị ứng Tuy nhiên, việc ứng dụng kháng thể điều trị gặp phải hai vấn đề sau: - Trong mẫu huyết chứa nhiều loại kháng thể khác - Số lượng kháng thể để ứng dụng điều trị Để giải vấn đề hai nhà khoa học César Milsrein Georges Kohler nghiên cứu khám phá kháng thể đơn dòng, kháng thể đặc hiệu tạo với số lượng lớn, đáp ứng với kháng nguyên chuyên biệt Đế sản xuất kháng thể đơn dòng, nhà khoa học gây miễn nhiễm cho chuột vòng - tuần cách tiêm vào thể chuột loại kháng nguyên mong muốn Các kháng nguyên kích thích tế bào lympho B chuột sinh kháng thể Các tế bào lympho B trích từ lach chuột cho kết hợp với tế bào myeloma (Tế bào ung thư tuỷ xương nuôi cấy từ chuột khác) để tạo thành tế bào ghép (hybridoma) Các tế bào ghép mang đặc tính tế bào ung thư tế bào lympho B, có khả phát triển nhanh chóng với số lượng lớn tạo kháng thể cần thiết Sau đó, tế bào phân lập cho phát triển để đưa vào quy trình sản xuất kháng thể đơn dịng Cơng nghệ sản xuất: 15 Ứng dụng điều trị: Nhiều xét nghiệm chẩn đoán xét nghiệm có thai, viêm gan siêu vi xét nghiệm HIV (bằng kỹ thuật Western Blot) ứng dụng kháng thể đơn dòng Kháng thể đơn dòng ứng dụng ngày rộng rãi y học nhóm thuốc ức chế miễn dịch Chúng sử dụng trường hợp sau: - Điều trị bệnh ung thư với loại thuốc như: Bavacizumab, Cetuximab, Panitumumab - Điều trị bệnh tự miễn (bệnh viêm khớp dạng thấp, bệnh viêm loét đại tràng, …) với loại thuốc như: Infliximab, Adalimumab,… - Ngăn ngừa tượng thải ghép với loại thuốc như: Basiliximab, Daclizumab,… Triển vọng cấy ghép nội tạng từ động vật sang người: Đây lĩnh vực ứng dụng nuôi cấy tế bào động vật có vú Trước đây, để khắc phục hỏng thể người ta sử dụng tác nhân thuốc, mô hay 16 quan ghép, phận giả Ngày nay, với phát triển kỹ thuật nuôi cấy tế bào, xu hướng cấy ghép tế bào trở nên ngày phổ biến - Phổi lợn sử dụng để cấy ghép vào thể người sau nhà khoa học người Australia đạt bước tiến đột phá việc nghiên cứu tìm cách chống đào thải quan nội tạng - Ghép tế bào tuỵ tạng sản sinh insulin heo vào người bệnh tiểu đường dể chữa trị bệnh tiểu đường Các mô lợn biến đổi gen cấy ghép vào thể người Công nghệ tế bào gốc – Tiềm ứng dụng: Sự diện bất ngờ, đầy kinh ngạc tế bào gốc gợi cho người nghĩ tới ứng dụng to lớn chúng nhiều lĩnh vực, đặc biệt y sinh học 17 Với khả kì lạ vốn có mình, tế bào gốc ngun liệu thần kì, đa cho nhiều mục đích sử dụng Tế bào gốc xem nhà máy sản xuất loại dược phẩm, mơ hình cho nhiều thử nghiệm khoa học Ứng dụng: - Cấy ghép tế bào gốc: Điều trị bệnh Parkinson, tiểu đường, chấn thương cột sống, bệnh tim,… - Công nghệ mô cấy ghép quan: công nghệ tự ghép da cách nuôi tế bào sừng, công nghệ mô xương - Liệu pháp gen - Kiểm nghiệm hoá chất - Biến đổi gen động vật - Điều trị bệnh tự miễn 18 KẾT LUẬN Nhìn chung, triển vọng mơ hình tế bào động vật ni cấy lớn, đặc biệt với phát triển nhiều kỹ thuật đại cho phép đảm bảo khả sống chức ổn định cho tất loại tế bào nuôi cấy, khả phục hồi sửa chữa hư hỏng tế bào tự động hóa thao tác 19 TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Kim Ngọc Hồ Huỳnh Thùy Dương 2001 Sinh học sinh sản NXB Giáo dục, thành phố Hồ Chí Minh Phạm Thành Hổ 2008 Nhập mơn công nghệ sinh học NXB Giáo dục, thành phố Hồ Chí Minh Nguyễn Hồng Lộc 2006 Giáo trình cơng nghệ tế bào NXB đại học Huế 20 ... thuật nuối cấy tế bào động vật: Phương pháp ni cấy tế bào động vật có vú để sản xuất sản phẩm sinh-dược dựa sở nuôi cấy dịch huyền phù hệ lên men Tuy nhiên, nuôi cấy tế bào động vật thực vật khó... huyền phù (tế bào bạch huyết), tế bào dính bám (tế bào biểu mơ, ngun bào sợi) Hình 6.1 Các tế bào động vật thường sử dụng nuôi cấy (a) tế bào bạch huyết, (b) tế bào biểu mô, (c) nguyên bào sợi ... tế bào thận phôi người) tế bào võng mạc người Sơ đồ nuôi cấy: V Ứng dụng nuôi cấy tế bào động vật: Sản xuất Interferon: Interferon nhóm protein tự nhiên sản xuất tế bào hệ miễn dịch hầu hết động