Nghiên cứu điều chế sản phẩm polyphenol từ hạt bơ (persea americana mill ) nhằm nâng cao hiệu quả nuôi tôm thẻ chân trắng (litopenaeus vannamei)

ỦY BAN NHÂN DÂN TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM KỸ THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH THUẬT TP.HCM SỞ KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ TP.HCM CHƯƠNG TRÌNH KHOA HỌC VÀ CƠNG NGHỆ CẤP THÀNH PHỐ BÁO CÁO NGHIỆM THU KẾT QUẢ NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ NGHIÊN CỨU ĐIỀU CHẾ SẢN PHẨM POLYPHENOL TỪ HẠT BƠ (PERSEA AMERICANA MILL.) NHẰM NÂNG CAO HIỆU QUẢ NUÔI TÔM THẺ CHÂN TRẮNG (LITOPENAEUS VANNAMEI) Chủ nhiệm nhiệm vụ: Phan Thị Anh Đào Cơ quan chủ trì nhiệm vụ (ký tên đóng dấu) Thành phố Hồ Chí Minh, 9/2021 i MỤC LỤC MỤC LỤC i DANH MỤC HÌNH VẼ v DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC PHỤ LỤC x DANH MỤC CHỮ CÁI VIẾT TẮT xiii MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan bơ (Persea americana Mill) 1.1.1 Phân loại khoa học 1.1.2 Phân bố sinh thái 1.2 Nghiên cứu dược học hạt bơ 1.2.1 Ứng dụng dân gian 1.2.2 Hoạt tính sinh học 1.3 Thành phần hóa học hạt bơ 10 1.3.1 Thành phần dinh dưỡng 10 1.3.2 Thành phần kháng dưỡng 11 1.3.3 Thành phần hóa học 12 1.3.4 Nghiên cứu hàm lượng polyphenol bơ 13 1.4 Tổng quan tôm thẻ chân trắng Việt Nam 15 1.4.1 Sơ lược trạng nuôi tôm thẻ Việt Nam 15 1.4.2 Thức ăn nuôi tôm thẻ 16 1.4.3 Một số nghiên cứu đáp ứng miễn dịch tôm nuôi 17 1.4.4 Chất lượng tôm nuôi 19 1.4.5 Chất chống oxy hóa tự nhiên bổ sung thức ăn nuôi tôm 21 2.6 Mục tiêu nhiệm vụ 23 CHƯƠNG NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.1 Nguyên liệu – Hóa chất - Thiết bị 24 i 2.1.1 Nguyên liệu 24 2.1.2 Hóa chất 24 2.1.3 Thiết bị 24 2.2 Nội dung nghiên cứu 26 2.3 Nội dung 1- Phân tích nguồn cung cấp nguyên liệu hạt bơ địa bàn tỉnh Đăk Lăk Lâm Đồng 28 2.4 Nội dung 2: Điều chế cao polyphenol phịng thí nghiệm 28 2.4.1 Công việc 1- Xây dựng thông số chất lượng nguyên liệu Đăk Lăk Lâm Đồng 28 2.4.2 Cơng việc 2- Nghiên cứu phương pháp trích ly điều kiện trích ly cao polyphenol từ hạt bơ 32 2.5 Nội dung 3- Điều chế sản phẩm polyphenol dạng bột 34 2.5.1 Công việc 4: Lựa chọn chất mang điều kiện phối trộn chất mang 34 2.5.2 Công việc 5: Nâng cấp sản xuất sản phẩm qui mô pilot 36 2.5.3 Công việc 6: Phân tích tiêu chất lượng sản phẩm polyphenol so sánh với đối chứng dương vitamin C 40 2.5.7 Cơng việc 7: Phân tích độc tính cảm quan (màu, mùi) sản phẩm polyphenol 41 2.5.8 Công việc 8: Theo dõi độ ổn định điều kiện bảo quản đề xuất hạn sử dụng sản phẩm 41 2.6 Nội dung 4: Nuôi thử nghiệm tôm cho ăn với sản phẩm polyphenol 41 2.6.1 Công việc 9: Xây dựng công thức sản xuất thức ăn với sản phẩm polyphenol 41 2.6.2 Công việc 10: Đánh giá kết nuôi tôm tiêu chất lượng tôm sau thu hoạch 46 2.7 Nội dung 5: Đánh giá khả tăng cường miễn dịch tôm thẻ 48 2.7.1 Công việc 11: Thực cảm nhiễm vi khuẩn gây bệnh Vibrio parahaematolycus 48 2.7.2 Công việc 12: Đánh giá thông số miễn dịch 50 2.8 Phương pháp nghiên cứu 51 2.8.1 Xác định độ ẩm nguyên liệu 51 2.8.2 Hiệu suất trình trích ly 51 ii 2.8.3 Xác định thành phần dinh dưỡng 51 2.8.4 Xác định sơ thành phần hóa học 52 2.8.5 Xác định tổng hàm lượng polyphenol 54 2.8.6 Xác định hoạt tính ức chế DPPH 62 2.8.9 Phương pháp thử hoạt tính kháng khuẩn Vibrio parahaematolycus 64 2.8.10 Phương pháp xác định độc tính cấp 67 2.8.11 Phương pháp phân tích đánh giá chất lượng thức ăn 68 2.8.12 Phương pháp tính tốn tăng trưởng, hệ số thức ăn tỷ lệ sống 68 2.8.13 Phương pháp đánh giá cảm quan đo cấu trúc thịt tôm 68 2.8.14 Phương pháp đánh giá tiêu miễn dịch 70 2.9 Xử lý số liệu 72 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 73 3.1 Nội dung 1: Phân tích nguồn cung cấp nguyên liệu hạt bơ địa bàn tỉnh Đăk Lăk Lâm Đồng 73 3.2 Nội dung 2: Điều chế cao polyphenol phịng thí nghiệm 74 3.2.1 Công việc 1: Xây dựng thông số chất lượng nguyên liệu Đăk Lăk Lâm Đồng, thu mua HTX nông nghiệp Ba Zan 74 3.2.2 Công việc - Nghiên cứu phương pháp trích ly điều kiện trích ly cao polyphenol từ hạt bơ 81 3.2.3 Cơng việc 3: Phân tích tiêu hóa học sinh học cao polyphenol (hàm lượng tổng polyphenol, hoạt tính ức chế gốc tự DPPH, thăm dò khả ức chế Vibrio parahaematolycus) 85 3.3 Nội dung 3: Điều chế sản phẩm polyphenol dạng bột 90 3.3.1 Công việc 4: Lựa chọn chất mang điều kiện phối trộn chất mang 90 3.3.2 Công việc 5: Nâng cấp sản xuất sản phẩm qui mô pilot 93 3.3.3 Cơng việc 6: Phân tích tiêu chất lượng sản phẩm polyphenol so sánh với đối chứng dương vitamin C 95 3.3.4 Công việc 7: Phân tích độc tính cảm quan (màu, mùi) sản phẩm polyphenol 97 3.3.5 Công việc 8: Theo dõi độ ổn định điều kiện bảo quản đề xuất hạn sử dụng sản phẩm 98 3.4 Nội dung 4: Nuôi thử nghiệm tôm cho ăn với sản phẩm polyphenol 103 iii 3.4.1 Công việc 9: Xây dựng công thức sản xuất thức ăn với sản phẩm polyphenol 103 3.4.2 Công việc 10: Đánh giá kết nuôi tôm tiêu chất lượng tôm sau thu hoạch 104 3.5 Nội dung 5: Đánh giá khả tăng cường miễn dịch tôm thẻ 107 3.5.1 Công việc 11: Thực cảm nhiễm vi khuẩn gây bệnh Vibrio parahaematolycus 107 3.5.2 Công việc 12: Đánh giá thông số miễn dịch 108 CHƯƠNG KẾT QUẢ ĐẠT ĐƯỢC 116 4.1 Các sản phẩm Khoa học & Công nghệ 116 4.1.1 Sản phẩm Dạng I 116 4.1.2 Sản phẩm Dạng II 116 4.1.3 Sản phẩm Dạng III 117 4.1.4 Kết đào tạo 117 4.1.5 Tình hình đăng ký bảo hộ quyền sở hữu công nghiệp 118 4.2 Đánh giá hiệu nhiệm vụ mang lại 119 4.2.1 Hiệu khoa học công nghệ 119 4.2.2 Hiệu kinh tế xã hội 119 KẾT LUẬN 121 KIẾN NGHỊ 122 TÀI LIỆU THAM KHẢO 123 PHỤ LỤC 131 iv DANH MỤC HÌNH VẼ Hình 1.1 Cây bơ Hình 1.2 Các loại bơ Hình 2.1 Một số thiết bị 26 Hình 2.2 Sơ đồ nghiên cứu khảo sát giống bơ 29 Hình 2.3 Sơ đồ nghiên cứu đánh giá chất lượng bơ Đak Lăk Lâm Đồng 30 Hình 2.4 Sơ đồ nghiên cứu công việc 32 Hình 2.5 Sơ đồ quy trình sản xuất chế phẩm 37 Hình 2.6 Giai đoạn hạt bơ rửa sạch, thái lát sấy khô 38 Hình 2.7 Trích ly polyphenol từ hạt bơ 39 Hình 2.8 Sản phẩm thu sau cô quay dịch trích ly 39 Hình 2.9: Sản phẩm thu sau khuấy trộn bộp bắp 40 Hình 2.10 Chế phẩm Polyphenol 43 Hình 2.11 Chế phẩm BM 43 Hình 2.12 Quy trình phối trộn chế phẩm polyphenol vào thức ăn tơm thẻ 44 Hình 2.13 Hệ thống bể ni composite thí nghiệm đánh giá tăng trưởng 47 Hình 2.14 Hệ thống bố trí bể ni thí nghiệm đánh giá khả miễn dịch 49 Hình 2.15 Sinh khối vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus 50 Hình 2.16 Hệ thống nuôi cảm nhiễm vi khuẩn gây bệnh 50 Hình 2.17 Quy trình xây dựng đường chuẩn gallic 54 Hình 2.18 Đồ thị đường chuẩn acid gallic 55 Hình 2.19 Quy trình xác định hàm lượng polyphenol tổng 61 Hình 2.20 Phản ứng trung hòa gốc DPPH 62 Hình 2.21 Quy trình thử hoạt tính ức chế gốc tự DPPH 62 Hình 2.22 Hình thái khuẩn lạc 64 Hình 2.23 Hình thái kính hiển vi (100X) 65 Hình 2.24 Kết kiểm tra sinh hóa API 20E 65 Hình 2.25: điện di gen độc tố 449bp 66 Hình 2.26 Mẫu tơm xử lý dùng cho đánh giá 70 v cảm quan 70 Hình 2.27 Máy đo cấu trúc hiệu Rheo Tex SD-700 70 Hình 2.28 Thu mẫu máu tôm 71 Hình 3.1 Quy trình xử lý hạt bơ 79 Hình 3.2 Quy trình điều chế cao polyphenol 89 Hình 3.3 Qui trình sản xuất chế phẩm polyphenol qui mơ pilot 100 Hình 3.4 Các thức ăn nghiệm thức đánh giá tăng trưởng 103 Hình 3.5 Các thức ăn nghiệm thức đánh giá khả miễn dịch 103 Hình 3.6 Thu mẫu tơm sau 60 ngày nuôi tăng trưởng 105 Hình 3.7 Tỷ lệ sống tích lũy theo thời gian (ngày) tôm nuôi nghiệm thức cảm nhiễm vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus 110 Hình 3.8 Tơm thẻ chân trắng thí nghiệm cảm nhiểm với Vibrio parahaemolyticus 111 Hình 3.9 Đồ thị biểu THC tôm thẻ chân trắng theo thời gian 112 Hình 3.10 Đồ thị biểu PO tôm thẻ chân trắng theo thời gian 113 Hình 3.11 Đồ thị biểu SOD tôm thẻ chân trắng theo thời gian 113 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại khoa học bơ Bảng 1.2 Giải định sử dụng để tính kích cỡ vùng bơ Đăk Lăk (Phân tích chuỗi giá trị bơ Đăk lăk, 2006) Bảng 1.3 Thành phần dinh dưỡng hạt bơ (Justina cs., 2016) 10 Bảng 1.4 Thành phần kháng dưỡng dịch chiết ethanol – hạt bơ 11 Bảng 1.5 Hàm lượng nhóm polyphenol bơ 13 Bảng 2.1: Nội dung nghiên cứu đề tài 26 Bảng 2.2 Phân tích thơng số chất lượng đầu vào nguyên liệu 30 Bảng 2.3 Khảo sát chất lượng nguyên liệu bơ theo thời gian bảo quản 12 tháng 31 Bảng Khảo sát phương pháp trích ly polyphenol từ hạt bơ 32 Bảng 2.5 Khảo sát ảnh hưởng dung mơi đến q trình trích ly 33 Bảng 2.6 Ảnh hưởng số lần trích ly 33 Bảng 2.7 Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi 34 Bảng 2.8: Khảo sát loại chất mang 35 Bảng 2.9: Khảo sát tỉ lệ phối trộn chất mang 35 Bảng 2.10: Các tiêu đánh giá chất lượng chế phẩm 40 Bảng 2.11: Khảo sát thời gian bảo quản chế phẩm 41 Bảng 2.12 Công thức thức ăn (T0) dùng cho thí nghiệm 42 Bảng 2.13 Mô tả nghiệm thức thức ăn thí nghiệm tăng trưởng 46 Bảng 2.14 Mơ tả nghiệm thức thí nghiệm đánh giá khả miễn dịch 48 Bảng 2.15 Các phương pháp xác định thành phần hóa học 52 Bảng 2.16 Hàm lượng mẫu trắng hàm lượng thêm chuẩn (mg/kg) 55 Bảng 2.17 Kết độ lặp lại hiệu suất thu hồi 56 Bảng 2.18 Kết hoạt tính ức chế gốc tự DPPH acid gallic vitamin C 63 Bảng 2.19 Mô tả mức đánh giá tiêu cảm quan 69 Bảng 3.1: Số liệu thống kê diện tích sản lương bơ (2020) 73 vii Bảng 3.2 Danh mục công ty cung cấp hạt bơ 74 Bảng 3.3 Kết đánh giá thu suất, TPC hoạt tính ức chế DPPH 74 giống bơ 74 Bảng 3.4 So sánh thành phần dinh dưỡng, hàm lượng TPC, hoạt tính ức chế DPPH hai mẫu bơ Đắk Lắk (R1)và Lâm Đồng (R2) 75 Bảng 3.5 Kết định tính thành phần hóa học hai mẫu cao R1 R2 77 Bảng 3.6: Tiêu chuẩn chất lượng bơ Đắk Lắk thu mua HTX Nông nghiệp Bazan 78 Bảng 3.7 Độ ẩm, TPC, DPPH mẫu cao trích 12 tháng 78 Bảng 3.8 Kết hiệu suất trích ly theo hai phương pháp khảo sát 81 Bảng Kết hiệu suất trích ly tổng hàm lượng polyphenol mẫu cao khảo sát nồng độ dung môi 82 Bảng 3.10 Kết hiệu suất trích ly tổng hàm lượng polyphenol mẫu cao chiết theo số lần trích ly 83 Bảng 3.11 Hiệu suất trích ly tổng hàm lượng polyphenol mẫu cao chiết theo tỷ lệ nguyên liệu/ dung môi 84 Bảng 3.12 Hiệu suất hàm lượng polyphenol tổng mẫu tối ưu 85 Bảng 3.13 Tiêu chuẩn chất lượng cao polyphenol 85 Bảng 3.14 Khả kháng khuẩn mạnh mẫu cao trích polyphenol 86 Bảng 3.15 Kết khảo sát độc tính cấp đường uống mẫu thử 86 Bảng 3.16: Kết đánh giá chất lượng chế phẩm điều chế từ hai loại chất mang 90 Bảng 3.17: Kết tổng hàm lượng polyphenol theo tỉ lệ phối trộn 91 Bảng 3.18: Kết ức chế gốc tự DPPH theo tỉ lệ phối trộn 92 Bảng 3.19 Khả kháng khuẩn mạnh mẫu cao trích polynenol 93 Nội dung cơng việc hồn thành với kết lựa chọn bột bắp làm chất mang với tỷ lệ phối trộn (1:3, w/w) 93 Bảng 3.20 Tóm tắt thơng số cơng đoạn quy trình sản xuất PHB (qui mơ pilot) 93 Bảng 3.21 Tiêu chuẩn chất lượng cao polyphenol 95 Bảng 3.22 Thành phần dinh dưỡng hoạt tính sinh học chế phẩm 96 viii Bảng 3.23 Hoạt tính kháng khuẩn Vibrio parahaematolycus 96 Bảng 3.24 Hoạt tính kháng khuẩn Vibrio parahaematolycus 97 Bảng 3.25: Tiêu chuẩn chất lượng chế phẩm polyphenol PHB 97 Bảng 3.26: Kết khảo sát độc tính cấp đường uống mẫu PHB 98 Bảng 3.27: Kết thay đổi tổng hàm lượng polyphenol chế phẩm PHB theo thời gian 98 Bảng 3.28 Thành phần dưỡng chất thức ăn (T0) dùng cho thí nghiệm 103 Bảng 3.29 Số liệu đo đạt thông số môi trường nước nuôi suốt thời gian nuôi thí nghiệm 104 Bảng 3.30 Tăng trưởng, hệ số thức ăn tỷ lệ sống tôm nuôi nghiệm thức 104 Bảng 3.31 Kết phân tích tơm thu hoạch nghiệm thức 105 Bảng 3.32 Kết phân tích tơm nghiệm thức sau nấu chín 106 Bảng 3.33 Điểm số đánh giá cảm quan tôm nấu chin độ thịt tôm nghiệm thức 107 Bảng 3.34 Kết tiêu môi trường nước nuôi thời gian thử nghiệm 107 Bảng 3.35 Tỷ lệ chết tôm nghiệm thức thí nghiệm LD50 108 Bảng 3.36 Tỷ lệ sống tôm nuôi nghiệm thức ngày thứ 45 108 Bảng 3.37 Tỷ lệ sống tôm thẻ nhóm thử nghiệm khác 109 Bảng 3.38 Tỷ lệ sống tôm nuôi 60 ngày (45 ngày ni bình thường 15 ngày cảm nhiễm) nghiệm thức 111 ix PHỤ LỤC –ĐIỀU CHẾ CHẾ PHẨM POLYPHENOL Phụ lục 18: Kết độ hấp thụ quang để xác định tổng polyphenol mẫu cao với lần lặp Lần 1,448 1,519 1,555 Phụ lục 19: Kết độ hấp thụ quang để xác định hoạt tính ức chế gốc tự DPPH mẫu cao với lần lặp Mẫu B1 Nồng độ (μg/mL) Control 10 25 50 100 0,512 0,364 0,219 0,161 0,061 0,503 0,367 0,227 0,152 0,070 0,510 0,364 0,236 0,157 0,070 Phụ lục 20: Kết độ hấp thụ quang để xác định hoạt tính ức chế gốc tự DPPH mẫu B1 M1 với lần lặp Mẫu B1 M1 Nồng độ (μg/mL) Control 10 25 50 100 0,512 0,364 0,219 0,161 0,061 0,503 0,367 0,227 0,152 0,070 0,510 0,364 0,236 0,157 0,070 0,512 0,298 0,249 0,223 0,190 0,503 0,265 0,247 0,219 0,190 0,510 0,275 0,263 0,227 0,197 Phụ lục 21: Kết độ hấp thụ quang để xác định tổng phenolic mẫu B1 M1 với lần lặp 150 Mẫu Lần B1 M1 0,441 0,290 0,402 0,226 0,436 0,265 Phụ lục 22: Kết độ hấp thụ quang để xác định hoạt tính ức chế gốc tự DPPH mẫu B2, B3, B4 B5 với lần lặp Mẫu B2 B3 B4 B5 Nồng độ (μg/mL) Control 10 25 50 100 0,447 0,271 0,086 0,051 0,027 0,43 0,279 0,098 0,052 0,034 0,457 0,262 0,109 0,051 0,033 0,447 0,343 0,280 0,111 0,057 0,43 0,367 0,179 0,108 0,063 0,457 0,353 0,176 0,167 0,053 0,447 0,410 0,307 0,241 0,134 0,43 0,403 0,311 0,240 0,141 0,457 0,386 0,309 0,233 0,115 0,447 0,406 0,354 0,301 0,206 0,43 0,425 0,340 0,269 0,225 0,457 0,420 0,328 0,284 0,191 Phụ lục 23: Kết độ hấp thụ quang để xác định tổng phenolic mẫu B1, B2, B3 B4 với lần lặp Lần Mẫu B2 B3 B4 B5 0,549 0,441 0,337 0,330 0,473 0,402 0,317 0,319 0,549 0,436 0,344 0,320 151 Phụ lục 24: Kết độ hấp thụ quang để xác định hoạt tính ức chế gốc tự DPPH mẫu PHB Nồng độ (μg/mL) Mẫu PHB Control 10 25 50 100 0,444 0,320 0,228 0,160 0,048 0,461 0,330 0,223 0,166 0,064 0,466 0,343 0,210 0,176 0,078 Phụ lục 25: Kết độ hấp thụ quang để xác định tổng phenolic mẫu PHB Lần 0,488 0,475 0,492 152 Phụ lục 26: Kết kiểm nghiệm thành phần dinh dưỡng chế phẩm PHB Phụ lục 27: Kết kiểm nghiệm độc tính cấp đường uống chế phẩm PHB 153 154 155 Phụ lục 28: Kết phân tích tiêu kim loại nặng vi sinh chế phẩm polyphenol 156 PHỤ LỤC KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM TRÊN TÔM THẺ CHÂN TRẮNG Phụ lục 29 Số liệu tôm ban đầu, tôm thu hoạch tăng trọng tơm ni thí nghiệm: Nghiệm Ký hiệu thức bể nuôi T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T5 T5 T5 C24 C32 C37 C23 C26 C39 C29 C35 C38 C25 C31 C40 C28 C33 C36 C27 C30 C34 KLBĐ (g/bể) 48,8 45,3 47,1 48,3 46,3 45,6 48,1 46,5 46,4 47,3 46,6 47,7 47,9 46,6 46,8 47,7 45,9 47,3 Số tôm KLBĐ ban đầu (g/con) (con) 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 45 1,08 1,01 1,05 1,07 1,03 1,01 1,07 1,03 1,03 1,05 1,04 1,06 1,06 1,04 1,04 1,06 1,02 1,05 Số tôm thu hoạch (con/bể) 29 29 32 31 33 32 32 36 34 36 33 33 35 33 35 35 35 36 Khối Khối lượng thu lượng thu hoạch hoạch (g/bể) (g/con) 239,0 8,24 273,0 9,41 313,0 9,78 273,0 8,81 279,0 8,45 303,0 9,47 258,0 8,06 283,0 7,86 298,0 8,76 310,0 8,61 251,3 7,62 254,0 7,70 299,1 8,55 251,8 7,63 269,5 7,70 282,4 8,07 297,1 8,49 308,4 8,57 Tăng trọng (g/con) 7,16 8,41 8,73 7,73 7,43 8,46 6,99 6,83 7,73 7,56 6,58 6,64 7,48 6,60 6,66 7,01 7,47 7,52 Phụ lục 30 Số liệu thức ăn, hiệu sử dụng thức ăn tỷ lệ sống tơm ni thí nghiệm: Nghiệm thức Ký hiệu bể nuôi T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 C24 C32 C37 C23 C26 C39 C29 C35 C38 C25 C31 C40 Lượng Số thức ăn lượng sử tôm dụng chết (g/bể) (con/bể) 327,2 16 355,3 16 377,2 13 345,6 14 340,9 12 368,0 13 326,0 13 324,0 347,3 11 343,0 321,9 12 292,8 12 Khối lượng tôm chết (g/bể) Tỷ lệ sống (%) Hệ số thức ăn (FCR) 95,10 87,60 75,00 72,60 61,90 76,60 70,50 45,00 57,90 43,30 63,10 59,50 64,4 64,4 71,1 68,9 73,3 71,1 71,1 80,0 75,6 80,0 73,3 73,3 1,15 1,13 1,11 1,16 1,16 1,10 1,16 1,15 1,12 1,12 1,20 1,10 Tỷ lệ Tăng thức ăn trọng đặc thu nhận biệt (%/ngày) (%/ngày) 3,79 3,72 3,49 3,59 3,49 3,52 3,55 3,28 3,36 3,20 3,60 3,24 3,38 3,73 3,72 3,51 3,51 3,72 3,37 3,38 3,57 3,51 3,33 3,30 157 T4 T4 T4 T5 T5 T5 C28 C33 C36 C27 C30 C34 327,8 319,5 314,4 346,7 342,9 362,9 10 12 10 10 10 50,20 62,10 53,60 59,1 55,7 54,2 77,8 73,3 77,8 77,8 77,8 80,0 1,09 1,20 1,14 1,18 1,12 1,15 3,15 3,57 3,31 3,50 3,33 3,40 3,47 3,33 3,34 3,38 3,53 3,50 Phụ lục 31 Số liệu phân tích tơm tươi thu hoạch nghiệm thức: Nghiệm thức T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T5 T5 T5 Kết phân tích tiêu hóa học (%) tơm tươi sau thu hoạch Ẩm Protein Lipid Tro Canxi 76,17 18,13 1,62 2,99 1,22 76,15 18,21 1,62 2,96 1,26 76,48 1,56 2,96 1,29 76,55 17,80 1,58 3,08 1,37 76,22 17,73 1,55 3,09 1,44 75,94 1,61 3,06 1,39 76,62 17,52 1,76 2,97 1,43 76,29 17,56 1,81 2,94 1,36 76,26 1,77 2,96 1,34 75,65 18,61 1,91 2,53 1,24 75,68 18,79 1,96 2,56 1,30 75,73 1,94 2,56 1,23 76,57 17,23 1,74 3,23 1,45 76,41 17,27 1,70 3,19 1,46 76,70 1,74 3,22 1,42 75,64 18,46 1,58 3,08 1,23 75,62 18,42 1,60 3,09 1,13 75,92 1,55 3,07 1,15 Phụ lục 32 Số liệu phân tích tơm nghiệm thức sau hấp chín: Nghiệm thức T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 Kết phân tích tiêu hóa học (%) tơm sau hấp chín Ẩm Protein Lipid Tro Canxi 75,06 18,76 1,69 3,06 1,50 75,24 18,84 1,81 2,97 1,43 75,90 1,77 3,12 1,54 74,44 19,11 1,91 3,28 1,64 74,43 18,87 1,75 3,13 1,67 74,22 1,71 3,20 1,60 74,80 18,92 1,80 2,93 1,52 74,14 18,84 1,95 3,19 1,61 74,49 2,08 3,21 1,48 74,16 19,73 2,13 2,81 1,47 73,93 19,92 2,22 3,02 1,43 73,87 2,15 2,86 1,36 74,04 18,85 2,25 3,59 1,65 158 T4 T4 T5 T5 T5 74,20 74,55 74,45 74,21 73,85 18,59 2,32 2,24 1,87 1,64 1,87 19,66 19,48 3,24 3,51 3,45 3,20 3,16 1,64 1,69 1,31 1,44 1,29 Phụ lục 33 Điểm số đánh giá cảm quan tơm nấu chín (màu, mùi vị) nghiệm thức: Nghiệm thức T0 T0 T0 T0 T0 T0 T0 T1 T1 T1 T1 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T2 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T3 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T4 T4 Thành viên No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 No.6 No.7 No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 No.6 No.7 No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 No.6 No.7 No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 No.6 No.7 No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 Chỉ tiêu cảm quan (điểm) Màu Mùi 7 8 6 8 6 7 8 7 7 8 7 6 7 7 8 7 6 Vị 9 8 9 8 9 8 7 8 159 T4 T4 T5 T5 T5 T5 T5 T5 T5 No.6 No.7 No.1 No.2 No.3 No.4 No.5 No.6 No.7 7 6 7 8 9 8 Phụ lục 34 Số liệu đo độ thịt tôm nghiệm thức máy đo Rheo Tex SD-700 Texturometer: Nghiệm thức Ký hiệu bể T0 C24 T0 C32 T0 C37 T1 C23 T1 C26 T1 C39 T2 C29 T2 C35 T2 C38 T3 C25 T3 C31 T3 C40 T4 C28 T4 C33 T4 C36 T5 C27 T5 C30 T5 C34 Mã mẫu 174 248 197 981 353 371 422 847 632 296 716 359 719 535 863 668 524 459 Độ (g) 287 277 319 391 348 350 260 336 297 359 388 290 327 413 283 325 311 303 mm 3,5 3,5 3,5 4,0 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 3,5 Độ (g*cm) 100,5 97,0 111,7 156,4 121,8 122,5 91,0 117,6 104,0 125,7 135,8 101,5 114,5 144,6 99,1 113,8 108,9 106,1 160 Phụ lục 35 Số liệu thí nghiệm LD50: TT 10 11 12 13 14 15 Liều vi khuẩn (CFU/ml) Bể số 10^8 10^8 10^8 10^7 10^7 10^7 10^6 10^6 10^6 10^5 10^5 10^5 0 208 224 232 209 223 233 210 222 234 211 221 235 212 220 236 Số tôm (con/bể) 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 15 Số tôm chết ghi nhận theo ngày thời gian ngâm với vi khuẩn liều lượng khác 1 1 1 2 1 1 1 1 1 2 1 2 10 11 12 1 1 1 1 1 13 14 15 Tổng cộng tôm chết (con/bể) Tỷ lệ chết (%) 15 15 15 8 3 2 1 100,0 100,0 100,0 46,7 53,3 53,3 20,0 13,3 20,0 6,7 13,3 13,3 6,7 6,7 6,7 161 Phụ lục 36 Số liệu ghi nhận cảm nhiễm tôm nghiệm thức vi khuẩn Vibrio parahaemolyticus: Nghiệm thức Bể số Số tôm (con/bể) T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T5 T5 T5 204 212 223 206 210 218 208 211 224 205 219 220 209 217 222 207 216 221 10 10 9 12 10 11 11 10 13 13 11 12 13 12 12 13 13 Thể tích nước (L/bể) 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 V para (ml/bể) 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 100 Số tôm chết ghi nhận theo ngày thời gian cảm nhiễm 10 11 12 13 14 15 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Tổng cộng tôm chết (con/bể) Tỷ lệ chết (%) 5 5 4 5 4 5 50,00 50,00 55,56 44,44 41,67 50,00 36,36 36,36 50,00 38,46 38,46 36,36 33,33 38,46 33,33 41,67 30,77 38,46 162 Phụ lục 37 Số liệu tổng số tế bào máu (THC – Total hemocyte count): Nghiệm thức Bể số T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 T4 T4 T5 T5 T5 204 212 223 206 210 218 208 211 224 205 219 220 209 217 222 207 216 221 Tổng số tế bào máu (cell/ml) tôm thời gian cảm nhiễm Ngày Ngày Ngày 15 10.000.000 10.909.091 10.000.000 10.769.231 10.909.091 10.000.000 10.833.333 10.000.000 11.000.000 11.000.000 12.000.000 11.000.000 11.666.667 12.000.000 10.666.667 10.000.000 11.000.000 10.000.000 11.000.000 12.000.000 11.333.333 10.000.000 13.000.000 11.000.000 11.000.000 12.666.667 10.500.000 11.111.111 12.727.273 11.000.000 10.769.231 12.500.000 11.000.000 11.000.000 13.571.429 10.000.000 11.000.000 12.500.000 11.666.667 10.833.333 14.000.000 10.500.000 10.000.000 12.000.000 10.588.235 11.000.000 12.307.692 10.666.667 10.000.000 13.076.923 10.500.000 10.000.000 12.666.667 11.333.333 Phụ lục 38 Số liệu hoạt tính Phenoloxidase (PO) tơm nghiệm thức thí nghiệm: Nghiệm thức Bể số T0 T0 T0 T1 T1 T1 T2 T2 T2 T3 T3 T3 T4 T4 204 212 223 206 210 218 208 211 224 205 219 220 209 217 Hoạt tính Phenoloxidase (u mg-1 phút-1) tơm thời gian cảm nhiễm Ngày 0,21 0,24 0,17 0,23 0,25 0,19 0,18 0,27 0,21 0,26 0,25 0,17 0,21 0,26 Ngày 0,23 0,28 0,18 0,31 0,23 0,26 0,29 0,29 0,26 0,38 0,45 0,35 0,42 0,37 Ngày 15 0,26 0,25 0,22 0,29 0,25 0,31 0,26 0,32 0,32 0,36 0,45 0,39 0,42 0,38 165 T4 T5 T5 T5 222 207 216 221 0,17 0,18 0,24 0,28 0,41 0,38 0,31 0,35 0,41 0,37 0,29 0,38 Phụ lục 39 Số liệu hoạt tính Superoxide dismutase (SOD) tôm nghiệm thức thí nghiệm: Hoạt tính Superoxide dismutase (u ml-1) tôm thời gian cảm nhiễm Ngày Ngày Ngày 15 Nghiệm thức Bể số T0 204 0,65 0,71 0,67 T0 212 0,52 0,52 0,58 T0 223 0,57 0,66 0,57 T1 206 0,71 0,71 0,61 T1 210 0,65 0,65 0,78 T1 218 0,54 0,58 0,65 T2 208 0,63 0,71 0,75 T2 211 0,57 0,82 0,78 T2 224 0,73 0,58 0,62 T3 205 0,74 0,8 0,74 T3 219 0,68 0,72 0,78 T3 220 0,59 0,78 0,69 T4 209 0,69 0,73 0,8 T4 217 0,58 0,79 0,69 T4 222 0,62 0,8 0,82 T5 207 0,67 0,7 0,66 T5 216 0,59 0,8 0,78 T5 221 0,48 0,77 0,84 166 ... việc ứng dụng chế phẩm polyphenol từ hạt bơ bổ sung vào thức ăn nuôi tôm nhằm nâng cao hiệu nuôi tôm thẻ chân trắng hướng tiếp cận phù hợp, khơng có ý nghĩa khoa học ứng dụng cao mà cịn góp phần... 2.4 Sơ đồ nghiên cứu cơng việc Xử lí hạt bơ: Hạt bơ xử lý sơ đóng gói bảo quản, công việc b) Khảo sát phương pháp trích ly polyphenol từ hạt bơ Thực trích ly cao polyphenol từ bột hạt bơ theo hai... tạo sản phẩm có giá trị, nâng cao tăng trưởng, tỉ lệ sống tính bền vững nghề nuôi tôm thẻ 2.6 Mục tiêu nhiệm vụ a) Mục tiêu tổng quát: Tăng cường miễn dịch nâng cao hiệu nuôi tôm thẻ chân trắng