0353TÓI ƯU HÓA MÔI TRƯỜNG LÊN MEN VI KHUĂN NỘI SINH Pacillus sp. T3 NHẰM NÂNG CAO HOẠT TÍNH KHÁNG NÁM Corynespora cassiicola

B TR NGă GIÁO D CăVẨă ẨOăT O IH CM TP H CHÍ MINH  BÁO CÁO KHĨA LU N T T NGHI P Tênăđ tài: T Iă UăHịAăMỌIăTR NG LÊN MEN VI KHU N N I SINH Bacillus sp T3 NH M NÂNG CAO HO T TÍNH KHÁNG N M Corynespora cassiicola KHOA CÔNG NGH SINH H C CHUYÊN NGHÀNH: VI SINH ậ SINH H C PHÂN T GVHD : ThS NGUY NăV NăMINH SVTH : NGUY N THÀNH TRUNG MSSV : 1053010856 KHÓA : 2010 ậ 2014 Tp H Chí Minh, tháng n m 2014 L I C Mă N hoƠnă thƠnhă đ tài này, s c g ng c a b n thân cịn có s h ng d n c a th y cô, anh ch s giúpăđ c a b n bè u tiên, em xin chân thành c mă năt t c th y cô Khoa Công ngh Sinh H cătr ngă i H c M Tp H ChíăMinhăđƣătruy năđ t cho em nh ng ki n th c n n t ng nh t, em xin c mă năth y Nguy năV năMinh,ăcôăD ană Duyă Phápă bên c nhă đ nhă h ngăNh t Linh th y ng, truy nă đ t kinh nghi m,ă đ ng viên em hoƠnăthƠnhăđ tài Con c mă năbaăm , c mă năgiaăđìnhăđƣălnăbênăcon,ăt o m iăđi u ki n t t nh tăđ hoàn thành vi c h c c a Em xin chân thành c mă n ch Võ Ng c Y n Nhi, anh ng iăanh,ăng oƠnăVi t Phi nh ng i ch ng h ,ăgiúpăđ emătrongălúcălƠmăđ tài Bên c nhăđó,ăem xin c mă năcácăb n, em phịng thí nghi m Cơng ngh Vi sinh Tr ngă i h c M Thành ph H Chí Minh đƣălnăquanătâm, giúp đ em q trình th c hi năđ tài M t l n n a, em xin g iăđ n t t c th y cô, anh ch , b n bè l i bi tă năvƠă kính chúc s c kh e, may m n, g t hái nhi uăthƠnhăcôngătrongăt ngălai Tp H Chí Minh, Ngày 17 tháng 06 n m 2014 NGUY N THÀNH TRUNG DANHăM C M Că T V Nă CH NGă1 C T NG QUAN TÀI LI U 1.1 GI I THI U V CÂY CAO SU Hevea brasiliensis muell arg 1.2 1.1.1 Phân lo i h c 1.1.2 Ngu n g c 1.1.3 căđi m th c v t h c 1.1.4 Vai trị tình hình s n xu t 1.1.5 Tình hình b nh h i cao su 1.1.6 Tình hình nghiên c u ch ph m sinh h c cho cao su NHăR NGăL ăCORYNESPORA TRÊN CÂY CAO SU 1.2.1 Phân b 1.2.2 Tri u ch ng b nh cao su 1.2.3 Tác h i b nh r ng Corynespora cao su 1.2.4 Cách phòng tr 11 1.3 N M Corynespora cassiicola 12 1.3.1 L ch s phát hi n n m Corynespora cassiicola (Berk & Curt.) Wei 12 1.3.2 Phân lo i h c 12 1.3.3 căđ m hình thái 12 1.3.4 căđi m sinh lý 13 1.3.5 Kh n ngăt n t i 14 1.3.6 Kh n ngăphátătán 14 1.3.7 Conă đ ng xâm nh p kh n ngă gơyă b nh c a n m Corynespora cassiicola 15 1.4 T NG QUAN V Bacillus 15 1.4.1 Phân lo i 15 1.4.2 Hìnhăd ng,ăkíchăth 1.4.3 Dinhăd c 17 ngăvƠăt ngătr SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG ng 17 i DANHăM C 1.4.4 ng d ng c a Bacillus 19 1.4.5 Ch t chuy n hóa kháng n m c a Bacillus 20 1.5 QUY HO CH TH C NGHI M 22 1.5.1 nhăngh aăquyăho ch th c nghi m 22 1.5.2 uăđi m quy ho ch th c nghi m 22 iăt 1.5.3 ng c a quy ho ch th c nghi m 23 1.5.4 Thí nghi m sàng l c 24 1.5.5 T iă uăhóa 26 1.5.6 Ph n m m quy ho ch th c nghi m Minitab 16 30 CH NGă2 V T LI UăVẨăPH 2.1 TH IăGIANăVẨă NGăPHỄPăNGHIểNăC U 37 Aă I M NGHIÊN C U 38 2.2 V T LI U NGHIÊN C U 38 2.2.1 Ch ng vi sinh v t nghiên c u 38 2.2.2 Ch ng n m Corynespora cassiicola th nghi m 38 2.2.3 Môiătr 2.2.4 Thi t b ậ d ng c 38 2.3 PH ng ậ hóa ch t 38 NGăPHÁP NGHIÊN C U 40 2.3.1 Tái phân l p Bacillus 40 2.3.2 Xácăđ nh ho t tính ch t kháng n m c a ch ng Bacillus sp T3 b ng ph 2.3.3 ngăpháp khu ch tán gi ng th ch 41 Kh o sát n ngăđ c ch n m Corynespora cassiicola b ngăph ngă pháp phun d ch l c nuôi c y ch ng Bacillus sp T3 42 2.3.4 Xây d ngăđ ngăt ngăquanăgi a giá tr OD610 m tăđ t bào 44 2.3.5 Xây d ngăđ ngăcongăt ngătr 2.3.6 Ch n l a y u t nhă h ng c a Bacillus sp T3 45 ng t i ho t tính ch t kháng n m c a ch ng Bacillus sp T3 46 2.3.7 Thi t k thí nghi m tìm y u t nhă h ngă chínhă đ n q trình lên menăt ngăho t tính ch t kháng n m theo thi t k Plackett ậ Burman 49 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG ii DANHăM C 2.3.8 Thí nghi m kh iăđ u 50 2.3.9 Tìm kho ng t iă uăcho trình lên men b ngăph ngăphápăleoăd c 51 2.3.10 Thí nghi m b m t ch tiêuăxácăđ nh giá tr t iă uăc a y u t 53 CH NGă3 K T QU VÀ TH O LU N 55 3.1 TÁI PHÂN L P 56 3.2 TH KH N NGăKH NGă NGăPH NGăPH PăKHU CH TÁN GI NG TH CH 56 3.3 T Iă UăHịAăMÔIăTR NG LÊN MEN CHO CH NG Bacillus sp T3 57 3.3.1 ngăt ngăquanăgi a giá tr OD610 m tăđ t bào 57 3.3.2 ngăcongăt ngătr ngăvƠăđ nhăh ng kính vịng kháng n m 58 3.3.3 Sàng l c y u t 3.3.4 Xácăđ nh y u t 3.3.5 Thí nghi m kh iăđ u 73 3.3.6 Thí nghi m tìm kho ng t iă uăb ngăph 3.3.7 Thí nghi măđápă ng b m t theo thi t k thí nghi m Box ậ Behnken nhăh ng 61 ng theo ma tr n Plackett ậ Burman 68 ngăphápăleoăd c 75 77 3.4 KH O SÁT HO T TÍNH CH T KHÁNG N M THEO TH I GIAN 84 3.5 SO SÁNH KH TR CH N NGăTIểUăDI T N M Corynespora cassiicola C A MÔI NG T Iă UăHịAăV IăMÔIăTR NGă4 NG NB 85 K T LU N VÀ KI N NGH 91 TÀI LI U THAM KH O 93 PH L C 102 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG iii DANHăM C DANH M C CH VI T T T ANOVA Oneậway analysis of variance C cassiicola Corynespora cassiicola CFU Colony forming unit Cs C ng s NA Nutrent Agar NB Nutrient Broth nm nanomet OD Optical Density PTN Phịng thí nghi m PDA Potato Dextrose Agar PDB Potato Dextrose Broth PậB Plackett ậ Burman VSV Vi sinh v t WHO World Health Organization SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG iv DANHăM C DANH M C CÁC B NG B ng 1.1 K t h p d u ma tr n 25 B ng 1.2 Ma tr n quy ho ch v i N = 12, K = 11 25 B ng 2.1 Các ngu n nit ăkh o sát 47 B ng 3.1 K t qu phân l p 56 B ng 3.2 K t qu th kh n ngăkhángăb ng gi ng khu ch tán 57 B ng 3.3 Giá tr OD610 m tăđ t bào (Log (N/mL)) 58 B ng 3.4 Giá tr xây d ngăđ ngăcongă t ngătr ng vƠăđ ng cong ho t tính ch t kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 59 B ng 3.5 K t qu ngu nănit ăkh o sát 61 B ng 3.6 K t qu ngu n cacbon kh o sát 63 B ng 3.7 K t qu ngu n khoáng kh o sát 64 B ng 3.8 K t qu dãy pH kh o sát 65 B ng 3.9 K t qu dãy nhi tăđ kh o sát 67 B ng 3.10 K t qu y u t ch n l c 68 B ng 3.11 Giá tr bi n s thí nghi m Plackett ậ Burman tìm y u t h nh ngăchínhăđ n ho t tính kháng n m ch ng Bacillus sp T3 68 B ng 3.12 Thi t k thí nghi m Plackett ậ Burman k t qu thí nghi m v i m căđ c a y u t 69 B ng 3.13 B trí thí nghi m kh iăđ u cho y u t B ng 3.14 Tínhăb c chuy năđ ngăph B ng 3.15 K t qu đ nhăh ng 73 ngăphápăleoăd c ch ng Bacillus sp T3 75 ng kính vịng kháng n măthuăđ c sau th c hi n ph ngă pháp leo d c ch ng Bacillus sp T3 76 B ng 3.16 Giá tr t ng m căđ thi t k thí nghi m Box ậ Behnken 77 B ng 3.17 B trí k t qu thí nghi m Box ậ Behnken ch ng Bacillus sp T3 78 B ng 3.18.ă ng kính vịng kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 84 B ng 3.19 K t qu th nghi m phun d ch l c c ch n m Corynespora cassiicola ch ng vi khu n Bacillus sp T3 nuôi c yătrênămôiătr SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG ng NB 86 v DANHăM C B ng 3.20 K t qu th nghi m phun d ch l c c ch n m Corynespora cassiicola ch ng vi khu n Bacillus sp T3 nuôi c yătrênămôiătr ng t iă u 88 B ng 3.21 Tóm t t k t qu nghiên c u 90 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG vi DANHăM C DANH M C BI Uă Bi uăđ 3.1.ă ngăt ngăquanătuy n tính gi a OD610 m tăđ t bào Bacillus sp T3 58 Bi uăđ 3.2.ă ngăcongăt ngătr Bi uăđ 3.3 ng kính vịng kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 60 ng theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 59 Bi uăđ 3.4 K t qu ngu nănit ăkh o sát 62 Bi uăđ 3.5 K t qu ngu n cacbon kh o sát 63 Bi uăđ 3.6 K t qu ngu n khoáng kh o sát 64 Bi uăđ 3.7 K t qu dãy pH kh o sát 66 Bi uăđ 3.8 K t qu dãy nhi tăđ kh o sát 67 Bi uăđ 3.9.ă ng kính vịng kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 85 DANHăM Că TH th 3.1 th nhăh th 3.2.ă th đ th 3.3.ă th b m t bi u th giá tr t iă uăc a y u t 82 ng (Main Effects Plot) 71 ng m c bi u th giá tr t iă uăc a y u t 82 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG vii DANHăM C DANHăM CăCÁC HỊNH Hình 1.1 Hai d ngăđ măvƠăx Hìnhă1.2.ă ngăcá m,ăđ m có l vi n vàng Hình 1.3 Héo b căđ u Hình 1.4 D ngăx ngăcáăvƠăcháyăphi n Hình 1.5 Khu n l c n m Corynespora cassiicola trênămôiătr ng PDA 13 Hình 1.6 Bào t n m Corynespora cassiicola nhu m b ng dung d ch lactophenol 13 Hìnhă1.7.ăS ăđ đ iăt ng nghiên c u 23 Hình 1.8 Thi t k CCD v iă 4ă mă góc,ă 4ă m tr c l n l p l i t iă m thí nghi m trung tâm (0,0) 29 Hình 1.9 Ma tr n b trí thí nghi m theo thi t k Box ậ Behnken 30 Hình 1.10 Giao di n ph n m m Minitab 16.2.0 31 Hình 2.1 K t qu kháng n m c a vi khu n 42 Hình 2.2.ă ngăcongăsinhătr ng h th ng lên men kín 45 Hình 3.1 Hình thái nhu m Gram vi khu n Bacillus sp T3 56 Hình 3.2 Hình thái khu n l c vi khu n Bacillus sp T3ătrênămôiătr ng NA 56 Hình 3.3 K t qu th kh n ngăkhángăb ng gi ng khu ch tán ch ng Bacillus sp T3 57 Hình 3.4 K t qu giá tr t iă uăc a y u t SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG nhăh ng 83 viii TẨIă I UăTHAMăKH O [48] Liu X., Ren B , Gao H., Liu M., Dai H., Song F., Yu Z., Wang Z., Hu J.,ăKokareăC.ăR.ă,ăZhangăL.ă(2012),ăắOptimizationăforătheăProductionă ofă Surfactină withă aă Newă Synergistică Antifungală ActivityẰ,ă PLoS ONE 7(5): e34430 [49] Lokesha N M., Benagi V I.ă (2007),ă ắ iological Management of Pigeonpeaă Dryă Rootă Rotă Causedă byă Macrophominaă phaseolinaẰ,ă Karnataka J Agric Sci 20(1), pp.54 ậ 56 [50] MacFaddină J.ă F.ă ă (2000),ă ắ iochemicaă ă testsă foră identificationă ofă mediacaăăbarteriaẰ,ăLippincott Williams & Wilkins [51] Maheshwariă D.ă K.ă (2010),ă ắPlantă growthă andă healthă promotingă bacteriaẰ,ăHeidelberg: Springer, 16, pp 445 [52] Mnifă I.,ă Ellouzeă S.ă E.,ă Ghribiă D.ă (2012),ă ắOptimizationă ofă theă Nutritional Parameters for Enhanced Production of B subtilis SPB1 Biosurfactant in SurfaceMethodologyẰă Submerged ,ă Culture Hindawi Using Publishing Response Corporation Biotechnology Research International, Volume 2012, pp ậ [53] Morsy E M., Kawi K A., Khalil M N A.ă (2009),ă ắEfficiencyă ofăă Trichoderma viride and Bacillus subtilis as Biocontrol Agents gainst Fusarium solani on Tomato Plants”, Eg pt J Ph top thol 37(1), pp 47 ậ 57 [54] Moyne A L., Shelby R., Cleveland T Eăă(2001),ăắ acillomycinăD:ăană iturin with antifungal activity against Aspergillus fl vus”, J Appl Microbiol, 90(4), pp.622 ậ [55] Mushrif S K.ă (2006),ă ắMorphology,ă physiologyă andă survivală ofă Corynespora cassiicola (Berk & Curt.) Wei Corynespora leaf disease of Hevea brasiliensis Strategies for management (Ed C Kuruvillaă Jacob)Ằ.ă Rubber Reseach Institute of India, Kottayam, Kerala, India pp 26 ậ 31 [56] Nghia N A., Kadir J., Sunderasană E.ă (2008),ă ắMorphologicală andă inter simple seqquencerepeat SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG (ISSR), markers analyses of 98 TẨIă I UăTHAMăKH O Corynespora cassiicola isolatesfromăRubberăplantionsăinăMalaysiaẰ Mycopathologia 166(4), pp 189 ậ 201 [57] OnesirosanăP.ăT.,ăArnyăD.ăC.,ăăDurbinăR.ăD.ă(1974),ăắHostăspecificityă of Nigerian and North American isolates of Corynespora cassiicol ”, Phytopathology 64, pp 1364 ậ 1367 [58] PerneznyăK.,ăSimoneăG.ăW.ă(1993),ăắTargetăspotăofăseveralăvegetableă crops Florida Cooperative Extension Services Institute of Food andăAgriculturalăSciencesẰ,ăUniversity of Florida, p 39 [59] Plackett R.ă L.,ă urmană J.ă P.ă (1946),ă ắTheă Designă ofă Optimumă MultifactorialăExperimentsẰ,ăBiometrika, Vol 33, No 4, pp 305 ậ 325 [60] Sarmaă R.,ă Nayuduă M.ă V.ă (1970),ă ắNewă hostsă ofă Corynespora cassiicola ( erk,ăandăCurt.)ăWei.ẰăCurr Sci., 39(21), pp 495 ậ 496 [61] Sarrafzadehă M.ă H.ă (2012),ă ắNutritională Requirementsă ofă Bacillus thuringiensis During Different Phases of Growth, Sporulation and Germination Evaluated by Plackett ậ urmană MethodẰ.ă Iran J Chem Chem.Eng Research Note 31(4), pp 131 ậ 136 [62] ShihăL.ăI.ă,ăKuoăY.ăC.,ăHsiehăC.ăF.,ăKaoăS.ăS.,ăHsiehăC.ă(2008),ăắUse of surface response methodology to optimize culture conditions for iturin A production by Bacillus subtilis in solid ậ state fermentationẰ,ă Journal of the Chinese Institute of Chemical Engineers 39 , pp 635 ậ 643 [63] Shrivastavaă A.,ă Mahendraă K.ă G.,ă Singhală P.ă K.ă (2013),ă ắNutritională and environmental optimization of antifungal potential of Bacillus strainsẰ,ăăInternational Journal of Advanced Research (1), pp ậ [64] Song H., Guo H., Fu W., Zhang G., Jiang H., Liu P., Zhou B., Bao Z Z.,ă Liuă X.ă (2013),ă ắMediumă optimizationă foră productionă ofă antifungal active substances from antagonistic Brevibacillus laterosporus andă itsă antifungală activityă analysisẰ,ă Full Length Research Paper 7(19), pp.1933 ậ 1939 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 99 TẨIă I UăTHAMăKH O [65] Souza L M., Gazaffi R., Mantello C C., Silva C C., Garcia D., Guen V L., Cardoso S E A., Franco Garcia A A F., Souza A P (2013), ắQTLăMappingăofăGrowth ậ Related Traits in a Full ậ Sib Family of Rubber Tree (Hevea brasiliensis) Evaluated in a Sub ậ Tropical ClimateẰă,ăPLoS ONE 8(4): p e61238 [66] Sreekumară G.,ă Krishnană S.ă (2010),ă ắEnhancedă biomassă productionă study on probiotic Bacillus subtilis SK09 by medium optimization usingă responseă surfaceă methodologyẰ,ă African Journal of Biotechnology, Vol 9, (45), pp 8078 ậ 8084 [67] Swadener,ăCarrie.ăă(1994),ăắBacillus thuringiensis ( T)Ằ,ăFall 14 (3), pp 13 ậ 20 [68] Todar K., (2008), Gram ậ positive, Aerobicor Facultative Endospore ậ forming Bacteria (formerly, "The Genus Bacillus"), from Online Textbook of Bacteriology [69] Toureă Y.,ă Ongenaă M.,ă Jacquesă P.ă (2004),ă ắRoleă ofă lipopeptidesă produced by Bacillus subtilis GA1 in the reduction of grey mould diseaseă causedă byă otrytisă cinereaă onă appleẰ,ă Journal of Applied Microbiology, pp 1151 ậ 1160 [70] Travisă R.ă G.,ă Maureenă O.ă (2000),ă ắBacillus thuringiensis ậ Biology, Ecologyă&ăSafetyẰ,ăVol I Hardcover [71] Trinh T K., Kang S L (2010), "Application of response surface method as an experimental design to optimaize coagulation tests", Enviromental Engineering Research, Vol 15(2), pp 063 ậ 070 [72] Venkatachalam P., Jayashree., Rekha R., Sushmakumari K., Sobha S., Jayasree S., Jayasree P K., Kala R G.ă (2007),ă ắRubberă Treeă (Heveabrasiliensis Muell.ă Arg)Ằ,ă In Agrobacterium Protocols (2), pp 153 ậ 164 [73] Wang Z W., Liu X L.ă(2008),ăắMediumăoptimizationăforăantifungală active substances SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG production from a newly isolated 100 TẨIă I UăTHAMăKH O Paenibacillus sp.ă usingă responseă surfaceă ă methodologyẰă , Bioresource Technolog, 99: 8245 ậ 8251 [74] Wei C T (1950), Notes on Corynespora Mycological Papers 34, pp.1 ậ 10 [75] WHO, (1999), Bacillus thuringiensis, Enviromental Health Criteria 217, International Programme on Chemical Safety, World Health Organization, Geneva [76] Zhang T., Shi Z Q., Hu L B., Cheng L G., Wang F (2008), ắAntifungală compounds from Bacillus subtilis B ậ FS06 inhibiting the growth of Aspergillus flavusẰ,ă World Journal of Microbiology and Biotechnology 24(6), pp 783 ậ 788 [77] ZhaoăX.,ăHanăY.,ăTanăX.,ăWangăJ.,ăZhouăZ.ă(2013),ăắOptimizationăofă Antifungal Lipopeptide Production from Bacillus sp BH072 by ResponseăSurfaceăMethodologyẰăJournal of Microbiology, pp ậ [78] Zhao Z Z., Wang Q., Wang K B K., Liu C H., Gu Y (2010), ắStudyă ofă theă antifungală activityă ofă Bacillus vallismortis ZZ185 in vitro and identification ofă itsă antifungală componentsẰ,ă Bioresource Technolog 101, pp 292 ậ 297 [79] Zhaoă P.,ă Quană C.,ă Wangă Y.,ă Wangă J.,ă Fană S.ă (2013),ă ắă Bacillus amyloliquefaciens Q426 as a potential biocontrol agent against Fusarium oxysporum f sp SpinaciaeẰ,ă Journal of basic microbiology SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 101 PH ă PH ă Că1 ăMỌIăTR C NGăVẨăHịAăCH T 1.1 THU CăNHU M Crystal violet: a) Crystal violet 0,4 g C nă96o 10 mL b) Phenol 1g N 100 mL căc t L u ý:ătr năhaiădungăd chăaăvƠăbăl iăv iănhau,ăkhu yăchoăhòaătanăđ uăr iăđemă l c.ă oăqu n chai màu tránh ánh sáng Lugol KI 2g Iodătinhăth 1g N 300 mL căc t L u ý: hịaătană2găKIăvƠoă5ămLăn tanăh tăm iăthêmăn căc t,ăsauăđóăthêmă1găIod.ăCh ăchoăIodă căv aăđ ă300ămL Safranin O SafraninăOă(dungăd chă2%ătrongăc nă96o) 25 mL N uăỦ: căc t oăqu nătrongăchaiămƠu 1.2 MỌIăTR Môiătr NG ng NA: NB 8g Agar 20 g N 1000 mL cc t H p kh trùng Môiătr 75 mL 1210C/15 ậ 20 phút ng NB: Cao th t 5g Pepton b t 10g NaCl 5g SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 102 PH ă N cc t Môiătr 1000 mL 7,4 ậ 7,6 pH : Môiătr C ng PDA: D ch chi t khoai tây 20% D ậ Glucose 20 g/l Agar 20 g N 1000ml cc t ng PS: D ch chi t khoai tây 20% Pepton 10g Glucose 40g N 1000ml cc t M i tr ng n n cho Bacillus sp T3 Theo Cao cs., 2010 D ch chi t khoai tây 20% Glucose 20 g Chi t th t bò 5g (NH4)2SO4 1g MgSO4 1g KH2PO4 0,6 g Theo Ghribi cs., 2011 D ch chi t khoai tây 20% Chi t th t bò 5g Glucose 20 g B sung mu i: KH2PO4 0,5 g K2HPO4 1g NaCl 0,5 g MgSO4 1g SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 103 PH ă PH ă Că2: K T QU X C LÝ TH NG KÊ 2.1 K t qu x lý th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi măxácăđ nh m tăđ t bào theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.2 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi mă xácă đ nh ho t tính ch t kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 104 PH ă C 2.3 K t qu x lý th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m sàng l c ngu n nit ă ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.4 K t qu x lý th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m c a thí nghi m sàng l c ngu n cacbon ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 105 PH ă C 2.5 K t qu x lý th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m sàng l c ngu n khoáng ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.6 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m sàng l c dãy pH ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 106 PH ă C 2.7 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m sàng l c dãy nhi tă đ ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.8 K t qu x lý s li u thí nghi m Plackett ậ Burman ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Minitab 16.2.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 107 PH ă C 2.9 K t qu phân tích h i quy cho thí nghi m kh iăđ u ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Minitab 16.2.0 2.10 K t qu phân tích h i quy cho thí nghi m đápă ng b m t ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Minitab 16.2.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 108 PH ă 2.11 K t qu phơnă t chă ph C ngă saiă choă th ă nghi m đápă ng b m t ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Minitab 16.2.0 2.12 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi mă xácă đ nh ho t tính ch t kháng n m theo th i gian ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 109 PH ă C 2.13 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh l n phun th ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ nh tă trênă môiă tr ngă nhăt ngăc a n m ng NB ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.14 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ l n phun th hai trênămôiătr ngă nhăt ngăc a n m ng NB ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 110 PH ă C 2.15 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ l n phun th ba trênămôiătr ngă nhăt ngăc a n m ng NB ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.16 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ l n phun th nh t trênămôiătr ngă nhăt ngăc a n m ng t iă u ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 111 PH ă C 2.17 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ l n phun th hai trênă môiă tr ngă nhăt ngăc a n m ng t iă u ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 2.18 K t qu x lí th ng kê ANOVA m t y u t k t qu x p h ng c a thí nghi m v nhăh ng c a t l phun d ch l căđ i v iăđ l n phun th ba môiă tr ngă nhăt ngăc a n m ng t iă u ch ng Bacillus sp T3 b ng ph n m m Statgraphics Plus 3.0 SVTH: NGUY N THÀNH TRUNG 112